CN114831127B - Vuaa-1作为or2配体及其在害虫防治中的应用 - Google Patents

Vuaa-1作为or2配体及其在害虫防治中的应用 Download PDF

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CN114831127B CN202210334960.6A CN202210334960A CN114831127B CN 114831127 B CN114831127 B CN 114831127B CN 202210334960 A CN202210334960 A CN 202210334960A CN 114831127 B CN114831127 B CN 114831127B
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    • A01N43/64—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/647—Triazoles; Hydrogenated triazoles
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    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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Abstract

本发明提供VUAA‑1作为OR2配体及其在害虫防治中的应用，属于生物工程和化学生态技术领域。本发明通过研究发现，化合物VUAA‑1可以作为梨小食心虫性信息素12861和12892受体的伴侣蛋白(OR2)的配体，并可以引起下游钙离子的改变，故可以利用化合物VUAA‑1作为OR2的激动剂、干扰受体的表达和功能的行使，从而达到防治害虫的目的，因此具有良好的实际应用之价值。

Description

VUAA-1作为OR2配体及其在害虫防治中的应用
技术领域
本发明属于生物工程和化学生态技术领域，具体涉及VUAA-1作为OR2配体及其在害虫防治中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
昆虫性信息素受体作为昆虫嗅觉受体家族的成员之一，是用于接受和传递信息素信号的膜蛋白，位于昆虫触角感受器上的嗅觉神经元，其在昆虫感知化学信息、传递神经信号中发挥关键作用。
昆虫OR是一种异源复合物，由负责检测可变气味刺激的高度趋异OR和高度保守的非规范共表达OR(Orco)组成(Benton，2009；Jones，2012)。与脊椎动物中典型的G蛋白偶联受体的拓扑结构相反，每个OR都具有一个反向的七个跨膜拓扑结构，其N端和大多数保守环位于细胞内(Benton，2006；Lundin，2007；Sato，2008)。OR/Orco复合物仅在单个嗅觉神经元中表达，并赋予气味识别特异性。在这种复合物中，Orco对于OR的定位，稳定和正确的蛋白质折叠至关重要，使其成为检测气味剂的必需品(Stengl和Funk，2013)。由于对该复合体的结构解析尚未完成，关于嗅觉受体复合物与配体作用后传递信号的分子机制只存在很多假说模型，但根据这些功能学研究结果，嗅觉受体复合物传递信号可能依赖离子通道和代谢通路两种作用机制；而嗅觉受体对化学信息感知的特异性的机制如今也存在争议，一种说法是通过气味结合蛋白来传递配体给嗅觉受体，另一种说法是用一定浓度的配体直接刺激嗅觉受体也可以产生信号，无论哪一种理论都指出了嗅觉受体在传递化学信号方面发挥关键作用；配体刺激后，神经元随即将信号传递至更高级的神经中枢，进而产生相应行为。
根据目前的数据，尤其是在果蝇上，配体结合的PR和Orco的复合物是PRNs的离子化学电信号转导的基础(Benton，2006；Ha和Smith，2009)。关于信息素的检测，据报道Orco表达的缺失或沉默引起OSN对信息素化合物的反应性急剧下降(Koutroumpa等，2016；Li，2016；Liu Q.，2017)。事实上，桑蚕Bombykol受体BmOR1的共表达Orco在异源表达系统中诱导大量的配体刺激的非选择性阳离子通道(Nakagawa，2005；Sato，2008)。在这种情况下，除了其作为伴侣分子的功能外，在使用异源表达的实验中，Orco还被鉴定为自发开放的钙渗透性和非特异性阳离子通道(Wicher等，2008；Jones等，2011；Nolte等人，2013年)。因此开发出Orco的拮抗剂和激动剂对于防治害虫具有至关重要的作用。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供VUAA-1作为OR2配体及其在害虫防治中的应用。本发明通过研究发现，化合物VUAA-1可以作为梨小食心虫性信息素12861、12892受体的伴侣蛋白(OR2)的配体，并可以引起下游钙离子的改变，故可以利用化合物VUAA-1作为OR2的激动剂、干扰受体的表达和功能的行使，从而达到防治害虫的目的，因此具有良好的实际应用之价值。
具体的，本发明涉及以下技术方案：
本发明的第一个方面，提供VUAA-1在作为昆虫OR2激动剂配体中的应用。
其中，所述昆虫包括卷蛾科害虫，如梨小食心虫、苹小食心虫、大豆食心虫、麻小食心虫、苹果小卷蛾、棉褐带卷蛾、苹褐卷蛾、苹黄卷蛾、黄色卷蛾、芽白小卷蛾、白小卷蛾和黄斑长翅卷蛾等；优选为梨小食心虫。
更具体的，所述OR2为梨小食心虫性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白。
其中，所述梨小食心虫性信息素受体12861的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
所述梨小食心虫性信息素受体12892的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
编码OR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
经研究发现，本发明使用的VUAA-1不仅可以特异性的结合性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白OR2即作为其配体，同时配体VUAA-1还可以引起OR2下游钙信号的变化，从而可以作为该OR2的激动剂。
本发明的第二个方面，提供一种组合物，其包含上述VUAA-1或其溶剂化物。
本发明的第三个方面，提供一种制剂，其包含上述VUAA-1或其溶剂化物，和至少一种农药学上可接受的辅料。
本发明的第四个方面，提供上述VUAA-1或其溶剂化物或者上述组合物或制剂在害虫防治中的应用。
本发明的第五个方面，提供一种防治害虫的方法，其包括施用上述VUAA-1或溶剂化物或组合物或制剂。
其中，所述害虫包括卷蛾科害虫，如梨小食心虫、苹小食心虫、大豆食心虫、麻小食心虫、苹果小卷蛾、棉褐带卷蛾、苹褐卷蛾、苹黄卷蛾、黄色卷蛾、芽白小卷蛾、白小卷蛾和黄斑长翅卷蛾等；优选为梨小食心虫。
以上一个或多个技术方案的有益技术效果：
上述技术方案通过研究发现，化合物VUAA-1可以作为梨小食心虫性信息素12861、12892受体的伴侣蛋白(OR2)的配体，并可以引起下游钙离子的改变，故可以利用化合物VUAA-1作为OR2的激动剂、干扰受体的表达和功能的行使，从而达到防治害虫的目的，因此具有良好的实际应用之价值。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明实施例中实施例中不同浓度VUAA-1作用于受体时可以引起OR2下游钙信号的变化图。
图2为本发明实施例中实施例中10-5M VUAA-1作用于受体时引起OR2构象变化。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。下列具体实施方式中如果未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域技术内的分子生物学的常规方法和条件，这种技术和条件在文献中有完整解释。参见例如Sambrook等人，《分子克隆：实验手册》中所述的技术和条件，或按照制造厂商所建议的条件。
需要说明的是，本发明中的化合物VUAA-1，其CAS号：525582-84-7，结构式如下所示：
Figure BDA0003576458420000051
本发明的一个典型具体实施方式中，提供VUAA-1在作为昆虫OR2激动剂配体中的应用。
其中，所述昆虫包括卷蛾科害虫，如梨小食心虫、苹小食心虫、大豆食心虫、麻小食心虫、苹果小卷蛾、棉褐带卷蛾、苹褐卷蛾、苹黄卷蛾、黄色卷蛾、芽白小卷蛾、白小卷蛾和黄斑长翅卷蛾等；优选为梨小食心虫。
更具体的，所述OR2为梨小食心虫性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白。
其中，所述梨小食心虫性信息素受体12861的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
所述梨小食心虫性信息素受体12892的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
编码OR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
经研究发现，本发明使用的VUAA-1不仅可以特异性的结合性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白OR2即作为其配体，同时配体VUAA-1还可以引起OR2下游钙信号的变化，从而可以作为该OR2的激动剂。
本发明的又一具体实施方式中，提供一种组合物，其包含上述VUAA-1或其溶剂化物。
本发明的又一具体实施方式中，提供一种制剂，上述VUAA-1或其溶剂化物，和至少一种农药学上可接受的辅料。
本发明的又一具体实施方式中，所述辅料选自分散剂、润湿剂、崩解剂、粘结剂、消泡剂、抗冻剂、增稠剂、填料和溶剂中的一种或多种。本发明对所述菌剂可接受的辅料的来源等没有特殊限制，一般采用市售产品即可。
其中，所述分散剂为阴离子型分散剂和/或非离子型分散剂，可选自木质素磺酸钠、萘磺酸钠甲醛缩合物、亚甲基双萘磺酸钠、甲醛缩合物硫酸盐、聚羧酸盐、烷基酚聚氧乙烯基磷酸酯和脂肪酸聚氧乙烯酯中的一种或多种。
所述湿润剂可选自十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、皂角粉、无患子粉、茶枯粉和拉开粉BX中的一种或多种。
所述崩解剂可选自膨润土、硫酸铵、氯化铝、尿素、氯化镁和葡萄糖中的一种或多种。
所述粘结剂可选自淀粉、硅藻土、环糊精、松香、羧甲基纤维素、羧乙基纤维素和羧甲基纤维素盐中的一种或多种。
所述消泡剂可选自C8～C20脂肪醇类化合物、C10～C20饱和脂肪酸类化合物、环氧大豆油、乙醇、硅酮类化合物和有机硅油中的一种或多种。
所述抗冻剂可选自山梨醇、乙二醇、聚乙二醇、丙二醇、丙三醇、尿素和氯化钠中的一种或多种。
所述增稠剂可选自明胶、黄原胶、聚乙二醇和聚乙烯醇中的一种或多种。
所述填料可选自轻质碳酸钙、硅藻土、膨润土、凹凸棒土和白炭黑中的一种或多种。
所述溶剂可选自水(优选为去离子水)或油酸甲酯。
本领域技术人员可采用公知的技术将本发明的化合物配制成药物组合物或制剂。比如将本发明上述VUAA-1与药用辅料混合，然后如果需要，使所得混合物形成所需的形状。
本发明的又一具体实施方式中，提供上述脱氧皮质酮或其溶剂化物或其药学上可接受的盐或者上述组合物或制剂在害虫防治中的应用。
其中，所述害虫包括卷蛾科害虫，如梨小食心虫、苹小食心虫、大豆食心虫、麻小食心虫、苹果小卷蛾、棉褐带卷蛾、苹褐卷蛾、苹黄卷蛾、黄色卷蛾、芽白小卷蛾、白小卷蛾和黄斑长翅卷蛾等；优选为梨小食心虫。
本发明的又一具体实施方式中，提供一种防治害虫的方法，其包括施用上述VUAA-1或溶剂化物或组合物或制剂。
其中，所述害虫包括卷蛾科害虫，如梨小食心虫、苹小食心虫、大豆食心虫、麻小食心虫、苹果小卷蛾、棉褐带卷蛾、苹褐卷蛾、苹黄卷蛾、黄色卷蛾、芽白小卷蛾、白小卷蛾和黄斑长翅卷蛾等；优选为梨小食心虫。
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明，但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例
采用分子生物学方法，构建基因重组的重组OR2质粒，利用钙调蛋白的生物发光共振能量转移方法可以检测OR2的下游钙信号的变化，以化合物VUAA-1刺激生物发光共振能量转移的效率表征OR2的下游钙信号的变化程度。
其中，所述OR2为梨小食心虫性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白。
所述梨小食心虫性信息素受体12861的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
所述梨小食心虫性信息素受体12892的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
编码OR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
将化合物VUAA-1用PBS配制成工作浓度为10-12M、10-11M、10-10M、10-9M、10-8M、10-7M、10-6M、10-5M，在过表达OR2的HEK293细胞中，再给予不同浓度(10-12-10-5M)的配体化合物VUAA-1刺激，阴性对照为不加配体的PBS刺激过表达OR2的HEK293细胞，利用多功能酶标仪检测发光值，对结果进行统计分析作图。
实验结果表明，化合物VUAA-1能够特异性的结合性信息素受体12861、12892的伴侣蛋白OR2，配体VUAA-1还可以引起OR2下游钙信号的变化。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东大学
<120> VUAA-1作为OR2配体及其在害虫防治中的应用
<130>
<160> 6
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1272
<212> DNA
<213> 梨小食心虫性信息素受体12861核苷酸序列
<400> 1
atggcccacg tgaacctgga catcgccacc aaacccagca aggacgtctt cagcctgggc 60
tacatgagac tgatcagatt tctgattaac acactgggcc agtggcccaa cagaatgctg 120
ggagacgaaa gcagactggc ctcctggctc ctggtgtaca actataccgc cctcggaatc 180
tgcaccctgt gcggattcaa cctgatgctg tacgctaaaa tgaacgtgaa gaagctcccc 240
ttcattgacg ccggccagtg ctacaccaac ctcttcctgg acatgctcta catccagaga 300
tccaccctgt ctctccaaaa aaaatactgc tccgtggtga aagaattcat cctgaaattc 360
cacctgatgc atcacgaaga caagaactcc ttcgccgccc aggaatacag aagaataaac 420
aaaatctgca agatcggaag catcgtgtac ctggtcgaag tgacctgcgg catcctcggc 480
tacaacctcg tccccctgta ccaaaactac aacgccggca tgttcaacga aataaaaccc 540
gagaacaaaa ccttcatcca ctctatctac ttcgtgctgc ccttcgatta cagcaccgac 600
accaccggat acttcatcgt cttctgcttc aactttatcg cctcctactg ggtgcccagc 660
gccatgtgct actacgactt cttcgtcttc atcattctct ttcatgtgtc cggccacctg 720
aacatcgtca tcaacaccat gatcaacttc ccccgcctct ccggcgacgt gggcaagcaa 780
cccaaggaga tcatggagga gtataacaaa gccgccttca tccagctcaa agacgtgatc 840
cagcattacc aggtgatcaa ggaattcatg acagagatgg gcgaagccct ggacttcacc 900
ctgtgcacct acctggcctt ccaccagctg atgtgctgcc tcctcctgct ggagtgcagc 960
accctggaac ccgaggccat ggttaaatac ggaatgctga ccttttatgt gttcgagcaa 1020
tgtatcctga tgtccgtgat ctttgaacac atcaacgtca aaagcgagag cctgggagac 1080
agagtgtaca gcctgccctg ggagcagatg gacgtcaaga acaggaagat cctgctgatg 1140
ctgctgagaa acgtgcagaa ccccctcgcc ctgaaggccg gaggcatggt gcccgtgggc 1200
gtgagaacca tgtccagcat tatgagaaca agttgcagct acttcctgtt cctgaagacc 1260
ttcgccgact ga 1272
<210> 2
<211> 423
<212> PRT
<213> 梨小食心虫性信息素受体12861氨基酸序列
<400> 2
Met Ala His Val Asn Leu Asp Ile Ala Thr Lys Pro Ser Lys Asp Val
1 5 10 15
Phe Ser Leu Gly Tyr Met Arg Leu Ile Arg Phe Leu Ile Asn Thr Leu
20 25 30
Gly Gln Trp Pro Asn Arg Met Leu Gly Asp Glu Ser Arg Leu Ala Ser
35 40 45
Trp Leu Leu Val Tyr Asn Tyr Thr Ala Leu Gly Ile Cys Thr Leu Cys
50 55 60
Gly Phe Asn Leu Met Leu Tyr Ala Lys Met Asn Val Lys Lys Leu Pro
65 70 75 80
Phe Ile Asp Ala Gly Gln Cys Tyr Thr Asn Leu Phe Leu Asp Met Leu
85 90 95
Tyr Ile Gln Arg Ser Thr Leu Ser Leu Gln Lys Lys Tyr Cys Ser Val
100 105 110
Val Lys Glu Phe Ile Leu Lys Phe His Leu Met His His Glu Asp Lys
115 120 125
Asn Ser Phe Ala Ala Gln Glu Tyr Arg Arg Ile Asn Lys Ile Cys Lys
130 135 140
Ile Gly Ser Ile Val Tyr Leu Val Glu Val Thr Cys Gly Ile Leu Gly
145 150 155 160
Tyr Asn Leu Val Pro Leu Tyr Gln Asn Tyr Asn Ala Gly Met Phe Asn
165 170 175
Glu Ile Lys Pro Glu Asn Lys Thr Phe Ile His Ser Ile Tyr Phe Val
180 185 190
Leu Pro Phe Asp Tyr Ser Thr Asp Thr Thr Gly Tyr Phe Ile Val Phe
195 200 205
Cys Phe Asn Phe Ile Ala Ser Tyr Trp Val Pro Ser Ala Met Cys Tyr
210 215 220
Tyr Asp Phe Phe Val Phe Ile Ile Leu Phe His Val Ser Gly His Leu
225 230 235 240
Asn Ile Val Ile Asn Thr Met Ile Asn Phe Pro Arg Leu Ser Gly Asp
245 250 255
Val Gly Lys Gln Pro Lys Glu Ile Met Glu Glu Tyr Asn Lys Ala Ala
260 265 270
Phe Ile Gln Leu Lys Asp Val Ile Gln His Tyr Gln Val Ile Lys Glu
275 280 285
Phe Met Thr Glu Met Gly Glu Ala Leu Asp Phe Thr Leu Cys Thr Tyr
290 295 300
Leu Ala Phe His Gln Leu Met Cys Cys Leu Leu Leu Leu Glu Cys Ser
305 310 315 320
Thr Leu Glu Pro Glu Ala Met Val Lys Tyr Gly Met Leu Thr Phe Tyr
325 330 335
Val Phe Glu Gln Cys Ile Leu Met Ser Val Ile Phe Glu His Ile Asn
340 345 350
Val Lys Ser Glu Ser Leu Gly Asp Arg Val Tyr Ser Leu Pro Trp Glu
355 360 365
Gln Met Asp Val Lys Asn Arg Lys Ile Leu Leu Met Leu Leu Arg Asn
370 375 380
Val Gln Asn Pro Leu Ala Leu Lys Ala Gly Gly Met Val Pro Val Gly
385 390 395 400
Val Arg Thr Met Ser Ser Ile Met Arg Thr Ser Cys Ser Tyr Phe Leu
405 410 415
Phe Leu Lys Thr Phe Ala Asp
420
<210> 3
<211> 1263
<212> DNA
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agactgtacc tgaacaccat cgcccactgg ccccacgaga tcttcggccc cagaaccatg 120
agaaccagac tcttttccat ataccacaga gtcatgctga cctcctgcgt gtgtatcatg 180
atttccgaga tcatcctggc ccgctacaac agcgaaaccc acgacctctt ctacatgggc 240
caggactacc tgaacattct catcatgttt gttatgatcg cccggagcac cctgatcctg 300
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gtgaccatcg tgatgctcat ccagtgcctg atcggccccg tgatgttcaa cgtggtgccc 480
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1 5 10 15
Met Lys Ala Thr Arg Leu Tyr Leu Asn Thr Ile Ala His Trp Pro His
20 25 30
Glu Ile Phe Gly Pro Arg Thr Met Arg Thr Arg Leu Phe Ser Ile Tyr
35 40 45
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Pro Leu Asn Ser Thr Phe Thr His Ser Val Asn Tyr Phe Phe Ile Leu
180 185 190
Asp Gln Tyr Lys Asp Met Pro Gly Tyr Ile Thr Val Phe Ile Leu Asn
195 200 205
Leu Tyr Ile Ser Tyr Ile Cys Ala Ala Leu Phe Cys Gly Leu Asp Leu
210 215 220
Leu Ile Tyr Ile Met Val Phe His Ile Met Gly His Ile Asn Ile Leu
225 230 235 240
Val Asn Arg Met Lys Thr Phe Pro Arg Pro Lys Lys Asp Asp Glu Phe
245 250 255
Ser Pro Glu His Phe Glu Gln Tyr Asn Glu Glu Ala Ser Lys Ile Leu
260 265 270
Lys Asp Leu Ile Lys Tyr Asp Val Leu Ile Lys Asp Ser Leu Asp Asn
275 280 285
Thr Ser Gly Thr Phe Gly Leu Gln Leu Cys Ile Cys Leu Phe Tyr His
290 295 300
Gln Val Ser Gly Cys Ile Cys Leu Leu Glu Ile Ser Pro Met Thr Pro
305 310 315 320
Glu Ala Leu Gly Arg Tyr Ile Pro Leu Thr Ile Ile Met Tyr Asn Gln
325 330 335
Leu Ile Gln Met Ser Ile Ile Phe Glu Leu Ile Ala Ser Lys Ser Asp
340 345 350
Ser Ile Pro Asp Glu Val Tyr Gly Leu Pro Trp Glu Leu Met Asp Ala
355 360 365
Arg Asn Arg Arg Thr Val Leu Val Phe Leu Arg Asn Ala Gln Arg Gly
370 375 380
Lys Ala Leu Lys Ala Gly Gly Leu Val Pro Val Gly Val Ile Thr Met
385 390 395 400
Ser Ser Ile Ile Lys Asn Ser Leu Ser Tyr Phe Ile Ile Leu Lys Thr
405 410 415
Leu Gly Ser Asn
420
<210> 5
<211> 1422
<212> DNA
<213> 辅助受体OR2核苷酸序列
<400> 5
atgatgggga aggtgaagag ccagggcctg gtgagcgacc tgatgcccaa catcaagctg 60
atgcagatgg ccggacactt cctgttcaac tactccgacg agaccggcgg catgtccatg 120
ctgctgagaa aggtgtacgc ctccatgcat gcctttctga tcgtgatcaa cttcgtgtgc 180
atgggcatca acatggccca gtacagcgag gaggtgaacg agctgaccgc caacaccatc 240
accgtgctgt tcttcgccca caccatcatc aagctggtgt ttttcgccgt gaacagcaag 300
tctttctaca ggaccctggc cgtgtggaac cagtccaatt cccaccccct gttcaccgag 360
agcgatgcca ggtaccacca gctgagcctg gacaagtcca gaagactgct gtacttcatc 420
tgtggcacca cctgcattag catcgtgagc tggatcaccc tgaccttctt cggcgagagc 480
gtgagactga tcaccgacaa agaaagcaac gaaaccctga ccgaacccgc cccccgcctg 540
cctctgaaag cctggtaccc cttcgacacc atgggcggca gcatgtacat cattgccttc 600
gtgtaccaga tctactggct gctgttcgcc atgatgatcc ccaacctgct ggatgtgatg 660
ttctgctcct ggctgatctt cgcctgcgag cagctgcagc acctgaaagc catcatgaag 720
cccctgatgg agctgtccgc cgccctggac acctaccgcc caaacactgc cgagctgttc 780
cgcgcctcct ccaccgagaa aagcgaaaag gtgcccgaac ccacagacat ggacatccgc 840
ggcatctact ccacccagca ggacttcggc atgatcctga gaggagccgg gggcaggctg 900
cagaacttca acagccagaa ccccaacccc aacggactga cccagaagca ggagatgctg 960
gccaggtctg ccatcaaata ctgggtggag cggcacaagc acgtggtgag actggtggcc 1020
tccatcggag acacctacgg cacagccctg ctgttccaca tgctggtgag caccatcaca 1080
ctgaccctgc tggcctacca ggccacaaaa atcgacggcc tgaacgtgta cgccttcagc 1140
accgtgggat acctgtcata caccctgggc caggtgttcc atttctgcat cttcggcaac 1200
agactgatcg aggagagcag cagcgtgatg gaggctgcct actcctgcca gtggtacgac 1260
ggaagcgagg aggccaagac attcgtgcag atcgtgtgcc agcagtgcca gaaagccatg 1320
tccatcagcg gggccaagtt cttcaccgtg agcctggacc tgttcgccag cgtgctggga 1380
gccgtggtga cctacttcat ggtgctggtg cagctgaagt ga 1422
<210> 6
<211> 473
<212> PRT
<213> 辅助受体OR2氨基酸序列
<400> 6
Met Met Gly Lys Val Lys Ser Gln Gly Leu Val Ser Asp Leu Met Pro
1 5 10 15
Asn Ile Lys Leu Met Gln Met Ala Gly His Phe Leu Phe Asn Tyr Ser
20 25 30
Asp Glu Thr Gly Gly Met Ser Met Leu Leu Arg Lys Val Tyr Ala Ser
35 40 45
Met His Ala Phe Leu Ile Val Ile Asn Phe Val Cys Met Gly Ile Asn
50 55 60
Met Ala Gln Tyr Ser Glu Glu Val Asn Glu Leu Thr Ala Asn Thr Ile
65 70 75 80
Thr Val Leu Phe Phe Ala His Thr Ile Ile Lys Leu Val Phe Phe Ala
85 90 95
Val Asn Ser Lys Ser Phe Tyr Arg Thr Leu Ala Val Trp Asn Gln Ser
100 105 110
Asn Ser His Pro Leu Phe Thr Glu Ser Asp Ala Arg Tyr His Gln Leu
115 120 125
Ser Leu Asp Lys Ser Arg Arg Leu Leu Tyr Phe Ile Cys Gly Thr Thr
130 135 140
Cys Ile Ser Ile Val Ser Trp Ile Thr Leu Thr Phe Phe Gly Glu Ser
145 150 155 160
Val Arg Leu Ile Thr Asp Lys Glu Ser Asn Glu Thr Leu Thr Glu Pro
165 170 175
Ala Pro Arg Leu Pro Leu Lys Ala Trp Tyr Pro Phe Asp Thr Met Gly
180 185 190
Gly Ser Met Tyr Ile Ile Ala Phe Val Tyr Gln Ile Tyr Trp Leu Leu
195 200 205
Phe Ala Met Met Ile Pro Asn Leu Leu Asp Val Met Phe Cys Ser Trp
210 215 220
Leu Ile Phe Ala Cys Glu Gln Leu Gln His Leu Lys Ala Ile Met Lys
225 230 235 240
Pro Leu Met Glu Leu Ser Ala Ala Leu Asp Thr Tyr Arg Pro Asn Thr
245 250 255
Ala Glu Leu Phe Arg Ala Ser Ser Thr Glu Lys Ser Glu Lys Val Pro
260 265 270
Glu Pro Thr Asp Met Asp Ile Arg Gly Ile Tyr Ser Thr Gln Gln Asp
275 280 285
Phe Gly Met Ile Leu Arg Gly Ala Gly Gly Arg Leu Gln Asn Phe Asn
290 295 300
Ser Gln Asn Pro Asn Pro Asn Gly Leu Thr Gln Lys Gln Glu Met Leu
305 310 315 320
Ala Arg Ser Ala Ile Lys Tyr Trp Val Glu Arg His Lys His Val Val
325 330 335
Arg Leu Val Ala Ser Ile Gly Asp Thr Tyr Gly Thr Ala Leu Leu Phe
340 345 350
His Met Leu Val Ser Thr Ile Thr Leu Thr Leu Leu Ala Tyr Gln Ala
355 360 365
Thr Lys Ile Asp Gly Leu Asn Val Tyr Ala Phe Ser Thr Val Gly Tyr
370 375 380
Leu Ser Tyr Thr Leu Gly Gln Val Phe His Phe Cys Ile Phe Gly Asn
385 390 395 400
Arg Leu Ile Glu Glu Ser Ser Ser Val Met Glu Ala Ala Tyr Ser Cys
405 410 415
Gln Trp Tyr Asp Gly Ser Glu Glu Ala Lys Thr Phe Val Gln Ile Val
420 425 430
Cys Gln Gln Cys Gln Lys Ala Met Ser Ile Ser Gly Ala Lys Phe Phe
435 440 445
Thr Val Ser Leu Asp Leu Phe Ala Ser Val Leu Gly Ala Val Val Thr
450 455 460
Tyr Phe Met Val Leu Val Gln Leu Lys
465 470

Claims (3)

1.VUAA-1在作为昆虫OR2激动剂配体中的应用；
所述OR2为梨小食心虫性信息素受体12861和12892的伴侣蛋白；
所述编码OR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。
2.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述梨小食心虫性信息素受体12861的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
所述梨小食心虫性信息素受体12892的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述VUAA-1导致OR2下游钙信号的变化。
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