CN114717101A - 基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置及方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置及方法。装置，包括光源装置、微流控滤光芯片、显微成像组件以及图像采集装置；光源装置用于照射在所述微流控滤光芯片上流动的样品；图像采集装置用于通过所述显微成像组件获取在所述微流控滤光芯片上流动的样品图像；显微成像组件一方面用于通过第一光路提取在所述微流控滤光芯片上流动的样品于明场中的图像，另一方面用于通过第二光路提取在所述微流控滤光芯片上流动的样品于荧光场中的图像，并将提取到的明场图像和荧光场图像同时送入搭载有计数应用的图像采集装置。本发明可同时对船舶压载水中所有微藻以及存活微藻进行成像、计数和尺寸判定，用于现场快速检测船舶压载水的处理性能。

Description

基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置及方法

技术领域

本发明涉及微流控芯片应用技术领域，具体而言，尤其涉及一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置及方法。

背景技术

随着交通运输行业的发展，海运贸易由于其性价比高、运输规模大已经成为跨区域间货物贸易往来的主要方式，船舶压载水为船舶航行和空载提供安全性和稳定性的同时也对海洋环境产生一定的影响，如果排放不当或者随意排放到其他海域，压载水中携带的微生物就会以入侵者的身份破坏该海域的物种多样性及生态平衡，所以经处理后的船舶压载水中微生物活性的快速检测成为行业焦点。

船舶压载水造成的生物入侵是国际社会上公认的问题，《2004年国际船舶压载水和沉积物控制与管理公约》(简称《公约》)要求通过指示性分析，迅速而准确地确定经处理后的压载水中活性微生物的数量。

目前，可以用来作为对处理后的压载水效果的指示性分析的有效方法主要有显微计数法和流式细胞分析法。

显微计数法使用血球计数板或塞吉计数板进行计数，它们分别需要10-20μL和1000μL的样本。通过显微镜可以人工数出目镜下的藻类细胞个数，利用体积换算关系得出样本中的藻细胞浓度。另外，通过计数板上的标尺，也可以计算出微藻的尺寸大小。该方法最大的不足是：用于检测的样本容量并不能很好地代表压载水中微藻的实际规模，并可能导致对浓度的错误估计，且耗时较长，同时由于是通过肉眼来观察，不仅需要操作人员对此领域的专业知识有一定的掌握，在实际检测中还容易漏记和重复计数。

流式细胞分析法结合荧光测量和散射光测量，集流体驱动原理、激光测量技术、计算机分析技术于一体，有些还包括细胞成像、分选、波形分析等功能，能够对单细胞或其它生物粒子进行定量分析和分选，可快速分析数以万计的细胞，并能同时检测得到同一个细胞的多个参数，实现对细胞的大小、形态、叶绿素含量和内容物等细胞参数的精确分析。该方法最大的不足是：流式细胞仪价格昂贵、操作复杂，只能在实验室使用，不能进行现场检测，也不能广泛的在船舶压载水处理设备领域推广。

如上所述，上述两种方法存在一定的局限性，亟待满足海洋生物的多样性和压载水处理系统的多样化要求，而开发压载水符合性检测的新技术。

发明内容

根据上述提出的现有藻类检测方法可靠性低、不适用于现场检测的技术问题，而提供一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置及方法。本发明可同时对船舶压载水中不同尺寸存活微藻进行分别计数和分析，检测准确性高。

本发明采用的技术手段如下：

一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，包括光源装置、微流控滤光芯片、显微成像组件以及图像采集装置；

所述光源装置用于照射在所述微流控滤光芯片上流动的样品；

所述图像采集装置用于通过所述显微成像组件获取在所述微流控滤光芯片上流动的样品图像，并基于所述样品图像对微藻进行计数；

所述显微成像组件一方面用于通过第一光路提取在所述微流控滤光芯片上流动的样品于明场中的图像，另一方面用于通过第二光路提取在所述微流控滤光芯片上流动的样品于荧光场中的图像，并将提取到的明场图像和荧光场图像同时送入搭载有计数应用的图像采集装置。

进一步地，所述显微成像组件包括：微流控滤光芯片位置调节部、物镜镜头、分光棱镜、第一目镜以及第二目镜；

所述微流控滤光芯片位置调节部用于将所述微流控滤光芯片放置在所述光源装置的正射位置，使所述光源装置射出的激光穿过微流控滤光芯片的工作区域射入物镜镜头后，经所述分光棱镜作用形成第一光束和第二光束，其中第一光束射入第一目镜镜头，第二光束射入第二目镜镜头；

所述图像采集装置通过第一摄像头提取第一目镜镜头中的图像作为明场图像，通过第二摄像头提取第二目镜镜头中的图像作为荧光场图像，所述第二摄像头与第二目镜镜头中间设置有红光滤光片。

进一步地，所述微流控滤光芯片包括由上至下设置的苏丹Ⅱ微流控滤光芯片和载玻片，其中所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片上凹刻有直微通道，所述直微通道两端分别设置有储液槽；

所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片和载玻片通过等离子清洗技术键合在一起。

进一步地，所述图像采集装置为智能手机，所述第一摄像头为外界USB摄像头，所述第二摄像头为智能手机自带摄像头。

进一步地，所述红光滤光片的滤光范围是过滤652-707nm以外的杂光。

进一步地，所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片由浓度为0.025g/mL的苏丹Ⅱ甲苯溶液与10gPDMS和1g固化剂充分溶解混合后抽真空，倒入直微通道模具并烘烤固化制得。

进一步地，所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片的厚度为3mm。

本发明还提供了一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析方法，基于上述任意一项所述的装置实现，包括以下步骤：

S1、调节光路：启动所述激光二极管光源，调节手动微给进台，使所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片位于所述物镜镜头的正下方，调节所述载物台的高度，使物象清晰，完成光路的调节；

S2、样品滴加：用移液枪吸取少量的待检样品缓慢滴加在所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片入口端的储液槽中；

S3、样品检测：启动图像采集装置中的智能计数程序，位于储液槽中的待检样品在流体静压的作用下，开始从进口端沿直微通道向出口端流动，成像结果通过所述物镜镜头，向上传送至所述分光棱镜，所述分光棱镜将光线分为两束分别传送至所述第一目镜镜头和第二目镜镜头，所述第一目镜镜头与第一摄像头连接，通过数据线将图像传至所述图像采集装置；同时通过所述第二目镜镜头的光路经所述红光滤光片，直接与第二摄像头相连，所述图像采集装置同时记录明场和荧光场中微藻的数目，便可得到微藻的总数和活藻的数目，实现船舶压载水处理装置的作用效果检测和实时进行船舶压载水中微藻的死活分析。

较现有技术相比，本发明具有以下优点：

1)本发明装置能够同时实现微藻的明场成像和荧光场成像，能够在短时间内完成微藻的实时检测和计数，并进行微藻死活分析。

2)本发明装置依靠智能移动终端内置的应用便可自动检测并计数，无需复杂的仪器进行统计操作，有利于非专业的港口工作人员和船员进行实船检测的操作。

3)本装置采用微流控滤光芯片，无需采用外加的滤光片过滤杂光便可完成微藻死活分析，有效降低了检测成本。

基于上述理由，本发明可在压载水现场检测等领域广泛推广。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图做以简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明活藻实时检测装置结构示意图。

图2为本发明微流控滤光芯片的结构示意图。

图3为本发明成像过程的光路原理图。

图中：1、手动微给进台；2、光源装置；3、微流控滤光芯片；301、苏丹Ⅱ微流控滤光芯片；3011、直微通道；3012、储液槽；302、载玻片；4、载物台；5、物镜镜头；6、分光棱镜；7、第一目镜镜头；8、红光滤光片；9、第一摄像头；10、第二目镜镜头；11、图像采集装置。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。以下对至少一个示例性实施例的描述实际上仅仅是说明性的，决不作为对本发明及其应用或使用的任何限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。

除非另外具体说明，否则在这些实施例中阐述的部件和步骤的相对布置、数字表达式和数值不限制本发明的范围。同时，应当清楚，为了便于描述，附图中所示出的各个部分的尺寸并不是按照实际的比例关系绘制的。对于相关领域普通技术人员己知的技术、方法和设备可能不作详细讨论，但在适当情况下，所述技术、方法和设备应当被视为授权说明书的一部分。在这里示出和讨论的所有示例中，任向具体值应被解释为仅仅是示例性的，而不是作为限制。因此，示例性实施例的其它示例可以具有不同的值。应注意到：相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项，因此，一旦某一项在一个附图中被定义，则在随后的附图中不需要对其进行进一步讨论。

在本发明的描述中，需要理解的是，方位词如“前、后、上、下、左、右”、“横向、竖向、垂直、水平”和“顶、底”等所指示的方位或位置关系通常是基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，在未作相反说明的情况下，这些方位词并不指示和暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位或者以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明保护范围的限制：方位词“内、外”是指相对于各部件本身的轮廓的内外。

为了便于描述，在这里可以使用空间相对术语，如“在……之上”、“在……上方”、“在……上表面”、“上面的”等，用来描述如在图中所示的一个器件或特征与其他器件或特征的空间位置关系。应当理解的是，空间相对术语旨在包含除了器件在图中所描述的方位之外的在使用或操作中的不同方位。例如，如果附图中的器件被倒置，则描述为“在其他器件或构造上方”或“在其他器件或构造之上”的器件之后将被定位为“在其他器件或构造下方”或“在其位器件或构造之下”。因而，示例性术语“在……上方”可以包括“在……上方”和“在……下方”两种方位。该器件也可以其他不同方式定位(旋转90度或处于其他方位)，并且对这里所使用的空间相对描述作出相应解释。

此外，需要说明的是，使用“第一”、“第二”等词语来限定零部件，仅仅是为了便于对相应零部件进行区别，如没有另行声明，上述词语并没有特殊含义，因此不能理解为对本发明保护范围的限制。

如图1-3所示，本发明提供一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，包括光源装置2、微流控滤光芯片3、显微成像组件以及图像采集装置11。本发明实施例中光源装置2优选采用激光二极管光源，图像采集装置11优选采用自带摄像头的智能手机。光源装置2用于照射在微流控滤光芯片3上流动的样品。图像采集装置11用于通过所述显微成像组件获取在所述微流控滤光芯片3上流动的样品图像，并基于所述样品图像对微藻进行计数。显微成像组件一方面用于通过第一光路提取在所述微流控滤光芯片3上流动的样品于明场中的图像，另一方面用于通过第二光路提取在所述微流控滤光芯片3上流动的样品于荧光场中的图像，并将提取到的明场图像和荧光场图像同时送入搭载有计数应用的图像采集装置11。

进一步地，显微成像组件包括：微流控滤光芯片位置调节部、物镜镜头5、分光棱镜6、第一目镜7以及第二目镜10。本发明实施例中微流控滤光芯片位置调节部优选包括手动微给进台1和载物台4。将微流控滤光芯片3放置在载物台4上，通过调节手动微给进台1的旋钮可以对微流控滤光芯片3的位置进行微调。

更进一步地，微流控滤光芯片3包括由上至下设置的苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301和载玻片302，其中所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301上凹刻有直微通道3011，所述直微通道3011两端分别设置有储液槽3012。苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301和载玻片302通过等离子清洗技术键合在一起。

工作时，通过微流控滤光芯片位置调节部将所述微流控滤光芯片3放置在光源装置2的正射位置，使光源装置2射出的激光穿过微流控滤光芯片3的工作区域射入物镜镜头5后，经所述分光棱镜作用形成第一光束和第二光束，其中第一光束射入第一目镜镜头7，第二光束射入第二目镜镜头10。图像采集装置11通过第一摄像头9提取第一目镜镜头7中的图像作为明场图像，通过第二摄像头提取第二目镜镜头10中的图像作为荧光场图像，第二摄像头与第二目镜镜头10中间设置有红光滤光片8。本发明中优选采用智能手机自由摄像头作为第二摄像头。

检测过程中，的光源装置2发出波长为430-480nm的蓝紫光，照射在微流控滤光模块上，之后通过物镜镜头5射向分光棱镜6，光束经过分光棱镜后分解为两束，一束光通过所述目镜镜头经所述红光滤光片过滤后，进入智能手机，另一束光通过目镜镜头5直接射入USB摄像头中，经数据线连接，将图像传至所述智能手机。此时荧光场和明场能够同时成像，可实现活藻和死藻同时在一个显微观测视野下的计数和分析。

具体地，在苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301的直微通道3011中流动的微藻经激光二极管光源发出的蓝紫光照射后，被激发出红色荧光，经苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301过滤后，滤去470nm以下波长的紫光，而仅通过苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301的照射光由于未能将激发光滤除，且微藻又阻挡了部分光通过，因此在观测视野中实现明场成像。另一视野中，经所述红光滤光片过滤后，652-707nm以外所有波段全部被截止，仅微藻激发后的红光可以进入所述目镜镜头，实现荧光场成像。

下面通过具体的应用实例，对本发明的方案做进一步说明。

实施例1

如图1所示，本实施例中装置主要包括：手动微进给台1、光源装置2、微流控滤光芯片3、载物台4、物镜镜头5、分光棱镜6、两个一模一样的第一目镜镜头7和第二目镜镜头10、第一摄像头9、红光滤光片8和智能手机11。所述智能手机11的摄像头做为第二摄像头经红光滤光片8对准第二目镜镜头11，分光镜6与第一目镜镜头7和第二目镜镜头10呈45°，第一目镜镜头7与第二目镜镜头10的拍摄方向垂直。物镜镜头5放置在分光棱镜6的正下方，微流控滤光芯片3放置在载物台4上面，手动微给进台1带动微流控滤光芯片处于便于物镜镜头5观察的位置，光源装置2优选采用激光二极管光源，处于载物台4的正下方。

本实施例中，激光二极管光源的发光的波长范围为430-480nm；物镜镜头放大倍数为40倍，第一目镜镜头和第二目镜镜头放大的倍数为10倍，红光滤光片的过滤范围为652nm～707nm波段以外所有杂光。

具体来说，如图2所示，微流控滤光芯片3包括包括由上至下设置的苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301和载玻片302，苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301上凹刻有一条用于进行样品分析的直微通道3011，在直微通道3011的两端各有一个储液槽3012储存样本溶液。其中，苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301由浓度为0.025g/mL的苏丹Ⅱ甲苯溶液与10gPDMS和1g固化剂充分溶解混合后抽真空，倒入直微通道模具并烘烤固化制得。苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301能够将激发光中400～470nm波段的蓝光滤除。且微流控滤光芯片3的长度为4cm,其中直微通道12的长度为3cm，通道的宽度为100μm。

实施例2

在实施例1的基础上，本实施例提供了基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析方法，主要包括如下步骤：

S1、调节光路：启动激光二极管光源，调节所述手动微给进台1，使苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301位于所述物镜镜头5的正下方，调节所述载物台4的高度，使物象清晰，完成光路的调节。

S2、样品滴加：用移液枪吸取少量的待检样品缓慢滴加在所述微流控滤光芯片入口端的储液槽中。

S3、样品检测：启动智能手机11中的智能计数程序，位于储液槽中的待检样品在流体静压的作用下，开始从进口端沿直微通道向出口端流动，成像结果通过所述物镜镜头5，向上传送至所述分光棱镜6，分光棱镜6将光线分为两束分别传送至所述两个目镜镜头7和10，目镜镜头7与第一摄像头10连接，通过数据线将图像传至所述智能手机11，本实施例中第一摄像头优选为USB摄像头，其通过导线与智能手机11连接。同时通过目镜镜头10的光路经红光滤光片8，直接与智能手机11的自带摄像头相连。智能手机11同时记录明场和荧光场中微藻的数目，便可得到微藻的总数和活藻的数目，实现船舶压载水处理装置的作用效果检测和实时进行船舶压载水中微藻的死活分析。

具体来说，本方法的光路原理如图3所示，检测时，所述的激光二极管光源发出波长为430-480nm的蓝紫光，照射在所述微流控滤光模块上，之后通过所述物镜镜头5射向分光棱镜6，光束经过分光棱镜后分解为两束，一束光通过目镜镜头10经所述红光滤光片8过滤后，进入所述智能手机11，另一束光通过第一目镜镜头7直接射入所述USB摄像头10中，经数据线连接，将图像传至所述智能手机11。基于实施例1中的显微成像组件，荧光场和明场能够同时成像，可实现活藻和死藻同时在一个显微观测视野下的计数和分析

进一步地，在所述苏丹Ⅱ滤光模块的直微通道中流动的微藻经所述激光二极管光源发出的蓝紫光照射后，被激发出红色荧光，经所述结苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301过滤后，滤去470nm以下波长的紫光，而仅通过苏丹Ⅱ微流控滤光芯片301的照射光由于未能将激发光滤除，且微藻又阻挡了部分光通过，因此在观测视野中实现明场成像；另一视野中，经所述红光滤光片过滤后，652-707nm以外所有波段全部被截止，仅微藻激发后的红光可以进入所述目镜镜头，实现荧光场成像。

在荧光场成像中，仅活藻体内的叶绿素能够被激发从而发射红色荧光，在显微视野中呈现红色亮点。因此，可分别对荧光场和明场中的微藻进行计数，从而实现微藻的实时死活分析和对船舶压载水处理设备处理效果的检测。综上所述，本发明在实验室验证中，利用活藻的荧光叶绿素检测法，制作微流控滤光芯片进行滤光，并采用分光棱镜让在直微通道中流动的样品的明场成像和荧光场成像同时呈现，通过记录不同成像方式下微藻的数目，便可得到视野中总的微藻数目和活藻数量，完成微藻的死活分析和检验船舶压载水的处理效果。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (8)

1.一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，包括光源装置(2)、微流控滤光芯片(3)、显微成像组件以及图像采集装置(11)；

所述光源装置(2)用于照射在所述微流控滤光芯片(3)上流动的样品；

所述图像采集装置(11)用于通过所述显微成像组件获取在所述微流控滤光芯片(3)上流动的样品图像，并基于所述样品图像对微藻进行计数；

所述显微成像组件一方面用于通过第一光路提取在所述微流控滤光芯片(3)上流动的样品于明场中的图像，另一方面用于通过第二光路提取在所述微流控滤光芯片(3)上流动的样品于荧光场中的图像，并将提取到的明场图像和荧光场图像同时送入搭载有计数应用的图像采集装置(11)。

2.根据权利要求1所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述显微成像组件包括：微流控滤光芯片位置调节部、物镜镜头(5)、分光棱镜(6)、第一目镜(7)以及第二目镜(10)；

所述微流控滤光芯片位置调节部用于将所述微流控滤光芯片(3)放置在所述光源装置(2)的正射位置，使所述光源装置(2)射出的激光穿过微流控滤光芯片(3)的工作区域射入物镜镜头(5)后，经所述分光棱镜作用形成第一光束和第二光束，其中第一光束射入第一目镜镜头(7)，第二光束射入第二目镜镜头(10)；

所述图像采集装置(11)通过第一摄像头(9)提取第一目镜镜头(7)中的图像作为明场图像，通过第二摄像头提取第二目镜镜头(10)中的图像作为荧光场图像，所述第二摄像头与第二目镜镜头(10)中间设置有红光滤光片(8)。

3.根据权利要求1所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述微流控滤光芯片(3)包括由上至下设置的苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)和载玻片(302)，其中所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)上凹刻有直微通道(3011)，所述直微通道(3011)两端分别设置有储液槽(3012)；

所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)和载玻片(302)通过等离子清洗技术键合在一起。

4.根据权利要求1所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述图像采集装置(11)为智能手机，所述第一摄像头(9)为外界USB摄像头，所述第二摄像头为智能手机自带摄像头。

5.根据权利要求1所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述红光滤光片(8)的滤光范围是过滤652-707nm以外的杂光。

6.根据权利要求1所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)由浓度为0.025g/mL的苏丹Ⅱ甲苯溶液与10gPDMS和1g固化剂充分溶解混合后抽真空，倒入直微通道模具并烘烤固化制得。

7.根据权利要求6所述的一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析装置，其特征在于，所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)的厚度为3mm。

8.一种基于微流控滤光芯片的双视场微藻活性分析方法，基于权利要求1-7中任意一项所述的装置实现，其特征在于，包括以下步骤：

S1、调节光路：启动所述激光二极管光源(2)，调节手动微给进台(1)，使所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)位于所述物镜镜头(5)的正下方，调节所述载物台(4)的高度，使物象清晰，完成光路的调节；

S2、样品滴加：用移液枪吸取少量的待检样品缓慢滴加在所述苏丹Ⅱ微流控滤光芯片(301)入口端的储液槽中；

S3、样品检测：启动图像采集装置(11)中的智能计数程序，位于储液槽中的待检样品在流体静压的作用下，开始从进口端沿直微通道向出口端流动，成像结果通过所述物镜镜头(5)，向上传送至所述分光棱镜(6)，所述分光棱镜(6)将光线分为两束分别传送至所述第一目镜镜头(7)和第二目镜镜头(10)，所述第一目镜镜头(7)与第一摄像头(9)连接，通过数据线将图像传至所述图像采集装置(11)；同时通过所述第二目镜镜头(10)的光路经所述红光滤光片(8)，直接与第二摄像头相连，所述图像采集装置(11)同时记录明场和荧光场中微藻的数目，便可得到微藻的总数和活藻的数目，实现船舶压载水处理装置的作用效果检测和实时进行船舶压载水中微藻的死活分析。

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