CN114568301B - 一种优质高产啤酒大麦的选育方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于作物育种技术领域，具体涉及一种优质高产啤酒大麦的选育方法。本发明以大麦品种法瓦维特为母本，以甘啤3号与Krona杂交种F1代植株为父本，结合小孢子培养技术获得产量高、品质好的啤酒大麦新品种；同时，此选育方法育种时间更短，更高效。

Description

一种优质高产啤酒大麦的选育方法

技术领域

本发明属于作物育种技术领域，具体涉及一种优质高产啤酒大麦的选育方法。

背景技术

大麦包括皮大麦和裸大麦，是一种多用途的麦类作物，如其可用于食用、饲用、药用和酿造等，同时大麦也是世界上最古老的谷类作物之一。考古资料表明，大麦的栽培历史在8000年以上。从最原始的啤酒酿造开始，人们都是以大麦作为啤酒酿造的主要原料。在我国，人们习惯上将酿造啤酒的大麦称为“啤酒大麦”。随着我国啤酒工业迅速发展，到2002年我国啤酒产量已达2386.83万吨，并且每年以8％左右的速率在增长，成为世界上第一啤酒生产大国和消费大国。

小孢子培养技术是近年来发展起来的一项高效的单倍体育种手段，该技术已在油菜、烟草等作物中实现。与花药培养相比，小孢子培养由于去除了药壁组织，解除了小孢子个体之间的营养和空间竞争，因而培养效率更高，但技术也更为复杂，由于没有了花药壁的保护，完全暴露在提取液中的小孢子活力受到严重影响，小孢子活力的下降又影响到愈伤组织的形成，现有的小孢子培育方法并非适用于任意作物。同时，啤酒大麦主要为常规杂交育种，育种手段落后耗时较长，一般需要10～14年时间，在一定程度上限制了啤酒大麦新品种的选育。

发明内容

基于上述技术问题，本发明的目的在于提供一种优质高产啤酒大麦的选育方法，采用本发明提供的选育方法得到的大麦品种，产量更高，品质更好，育种周期更短。

为了实现上述目的，本发明提供了一种优质高产啤酒大麦的选育方法，包括如下步骤：

1)以大麦品种甘啤3号为母本，以大麦品种Krona为父本，杂交收获F0代，F0代自交得到甘啤3号×Krona的F1代植株；

2)以大麦品种法瓦维特为母本，所述甘啤3号×Krona的F1代植株为父本，杂交得BF0代种子，种植后自交，得BF1代种子；

3)将所述BF1代种子播种，自交，得BF2代；

4)于所述BF2代的植株孕穗期进行小孢子培育，单株收获，得到优质高产啤酒大麦稳定株系。

优选的，所述步骤1)和步骤2)中的杂交包括人工杂交组配；所述人工杂交组配包括去雄，每个植株去雄的穗数为1。

优选的，所述小孢子培育的步骤包括：

于BF2代植株孕穗期取穗、取花药；

将所述花药在预处理培养基中黑暗条件培养，分离得到小孢子；

将所述小孢子经诱导培养、再生培养、生根培养和种子生产，得到大麦稳定株系。

优选的，用于所述取穗的BF2代植株为健壮无病植株；所述BF2代植株孕穗期的生长温度包括白天15～18℃，夜间12～15℃。

优选的，所述暗培养的温度为24℃，时间为12～14天。

优选的，所述诱导培养为黑暗条件培养；所述诱导培养的温度为20～25℃，时间为12～14d；

所述诱导培养的培养基以N6培养基为基本培养基，还包括：85～95g/L麦芽糖、0.4～0.6mg/LKT、0.8～1.2mg/L 2,4-D、0.9～1.0g/L MES、1550～1650mg/L谷氨酰胺及380～420mg/L水解干酪素，pH 5.6～6.0。

优选的，所述再生培养在20～25℃下，光照14～18h、黑暗6～10h培养10～18天；

所述再生培养的培养基以2/3MS培养基为基本培养基，还包括：25～35g/L麦芽糖、0.4～0.6mg/L 6-BA、1.2～1.8mg/LKT及0.04～0.06mg/LNAA，用5.0～6.0g/L琼脂粉固化，pH 5.6～6.0。

优选的，所述生根培养基以1/2MS为基本培养基，还包括：25～35g/L蔗糖、3.5～4.5mg/L多效唑及0.04～0.06mg/L NAA，用5.0～6.0g/L琼脂粉固化，pH5.6～6.0；生根培养基培养为在20～25℃下，光照14～18h、黑暗6～10h生根培养14～30天。

优选的，所述壮苗生根培养后，将所述壮苗生根后的植株移栽到土壤中进行所述种子生产；所述种子生产的温度为20～28℃，光周期为16L:8D。

优选的，所述优质高产啤酒大麦稳定株系为株高75cm～85cm、穗长≥8cm、穗粒数20≥粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g、饱满度≥85％，蛋白质含量10.5～12.5％，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性强、抗病性强的株系；

所述饱满度为籽粒腹茎≥2.5mm的籽粒。

有益效果：

本发明提供了一种优质高产啤酒大麦的选育方法，以大麦品种法瓦维特为母本，以甘啤3号与Krona杂交种F1代植株为父本，结合小孢子培养技术获得产量高、品质好的啤酒大麦新品种；同时，此选育方法育种时间更短，只需2～3年，较传统5～6年的育种时间更加高效。

具体实施方式

本发明提供了一种优质高产啤酒大麦的选育方法，包括如下步骤：

1)以大麦品种甘啤3号为母本，以大麦品种Krona为父本，杂交，得到F0代杂交种，种植后自交，得F1代种子；

2)以大麦品种法瓦维特为母本，所述F1代杂交种为父本，杂交得BF0代种子，种植后自交，得BF1代种子；

3)将所述BF1代杂交种子播种，自交，得BF2代；

4)于所述BF2代的植株孕穗期进行小孢子培育，单株收获，得到优质高产啤酒大麦稳定株系。

本发明所述大麦品种Krona优选通过对国内外优质高产大麦种质资源的农艺性状和经济性状进行田间鉴定筛选获得；所述筛选标准优选包括生育期为95～105d，株高为75～85cm，穗长≥8.0cm，穗粒数≥23粒，成穗数≥50万/亩，千粒重≥45g，株型紧凑，熟期转色好，整齐度一致，植株抗倒性强和抗病性强。

本发明所述大麦品种甘啤3号和法瓦维特均为我国广泛种植的优质啤酒大麦品种。

本发明以大麦品种甘啤3号为母本，大麦品种Krona为父本，杂交，得到甘啤3号×Krona的F1代植株。本发明所述杂交优选包括人工杂交组配，所述人工杂交组配优选包括去雄，所述去雄的过程中，每个植株优选只做1个穗，至少做6个植株，以获得足够的杂交种子。

得到所述甘啤3号×Krona的F1代植株后，本发明以大麦品种法瓦维特为母本，以所述甘啤3号×Krona杂交种F1代植株为父本，杂交，得到BF0代种子。本发明所述杂交的方式优选与上述杂交方式相同，不再进行赘述。本发明在得到所述BF0代种子前，优选还包括对杂交后的成熟籽粒混合收获和风干。本发明对所述混合收获和风干的方式没有特殊限定，采用本领域常规收获和风干方式即可。

得到所述BF0代种子后，本发明优选种植所述BF0代种子，自交，获得BF1代种子。本发明收获BF1代种子的方式优选与收获BF0代种子的方式相同，在此不再赘述。

得到所述BF1代种子后，本发明将所述BF1代种子播种，得到BF2代植株。本发明对所述BF1代种子播种的行数没有特殊限定，保证得到大量分离的BF2代植株即可，如可种植2行。

得到所述BF2代植株后，本发明于所述BF2代植株孕穗期进行小孢子培育，单株收获，得到大麦稳定株系。本发明优选选用健壮、无病植株的BF2代植株进行所述小孢子培育。本发明所述优质高产啤酒大麦稳定株系优选为株高75cm～85cm、穗长≥8cm、穗粒数20≥粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g、饱满度≥85％，蛋白质含量10.5～12.5％，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性强、抗病性强的株系；所述饱满度优选为籽粒腹茎≥2.5mm的籽粒。

本发明所述小孢子培育的步骤优选包括：

于BF2代植株孕穗期取穗、取花药；

将所述花药在预处理培养基中黑暗条件培养，分离得到小孢子；

将所述小孢子经诱导培养、再生培养、生根培养和种子生产，得到大麦稳定株系。

本发明优选在健壮无病的BF2代植株上进行所述取穗，所述取穗时期优选为穗中间小花的小孢子处于单核期中后期。本发明所述BF2代植株的生长温度优选包括白天15～18℃，夜间12～15℃。

本发明优选在取花药前对取得的BF2代植株穗进行前处理，得到前处理的BF2代植株穗。本发明所述前处理优选包括对所述BF2代植株穗进行测量和消毒，本发明所述测量优选包括测量所述BF2代植株穗的旗叶与倒二叶之间的距离，以确认旗叶和倒二叶片叶之间的距离在2～10cm之间，穗为浅绿色，得到满足取花药要求的F2代植株穗。本发明通过取旗叶距为2～10cm的穗提高了小孢子取材的准确性和效率，分离的小孢子数量多，同时保证了小孢子的活力。

本发明优选还包括对所述满足取花药要求的BF2代植株穗切芒，得到无芒BF2代植株穗。本发明优选以70％酒精对所述无芒BF2代植株穗消毒，所述消毒方式优选为喷洒。本发明优选还包括将消毒后的BF2代植株穗置于70％酒精湿纸巾上挥发酒精，待酒精蒸发后，进行所述去雄。

本发明优选在显微镜下进行所述取花药。本发明在每个小花上取花药的个数优选为3个。本发明用于取花药的工具优选为镊子，更优选为细镊子。本发明对所述镊子的规格没有特殊要求，根据实际操作适应性调整即可。

得到所述大麦花药后，本发明优选还包括将所述大麦花药置于含有预处理培养基的培养皿，密封，得到预处理的大麦花药。本发明所述密封用封口膜优选为石蜡封口膜。本发明优选还包括在密封的预处理培养皿上贴上标签。

本发明所述预处理培养基的组分优选包括：50～70g/L甘露醇、1.0～1.2g/LCaCl₂、0.9～1.0g/L MES、15～25mg/L秋水仙碱，pH 5.6～5.8；进一步优选为55～65g/L甘露醇、1.05～1.15g/L CaCl₂、0.95～0.98g/L MES、18～23mg/L秋水仙碱，pH 5.7～5.9；更优选为60g/L甘露醇、1.1g/L CaCl₂、0.976g/L MES、20mg/L秋水仙碱，pH 5.8。本发明通过在上述预处理培养基培养，显著提高了小孢子活力，更易形成愈伤组织。本发明所述取花药和预处理优选在无菌操作台上进行。

得到预处理的大麦花药后，本发明优选将所述预处理的大麦花药进行暗培养，分离，得到小孢子。本发明所述暗培养的温度优选为20～25℃；培养时间优选为12～14天。本发明所述分离优选包括将暗培养后的花药研磨，低速离心，提取小孢子。本发明所述低速离心优选包括100～200g离心8～12min，更优选为150g离心10min。

得到所述小孢子后，本发明优选将所述小孢子诱导培养，得到愈伤组织。本发明所述诱导培养优选为黑暗条件培养；所述诱导培养的温度优选为20～25℃℃；所述诱导培养的时间优选为12～14d。本发明所述诱导培养的培养基优选以N6培养基为基本培养基。本发明所述诱导培养基中优选还包括：85～95g/L麦芽糖、0.4～0.6mg/L KT、0.8～1.2mg/L 2,4-D、0.9～1.0g/L MES、1550～1650mg/L谷氨酰胺及380～420mg/L水解干酪素，pH 5.6～6.0；进一步优选为以N₆为基本培养基，添加86～93g/L麦芽糖、0.45～0.55mg/L KT、0.9～1.1mg/L 2,4-D、0.95～0.98g/L MES、1560～1640mg/L谷氨酰胺及390～410mg/L水解干酪素，pH 5.7～5.9；更优选为以N₆为基本培养基，添加90g/L麦芽糖、0.5mg/L KT、1.0mg/L 2,4-D、0.976g/L MES、1600mg/L谷氨酰胺及400mg/L水解干酪素，pH 5.8。本发明通过在上述诱导培养基中培养，提高了愈伤组织的产量。本发明将所述小孢子转移到所述诱导培养的培养基中的方式优选为：以70％酒精洗手后，将所述小孢子转移。本发明在所述转移后，优选还包括对含有所述诱导培养的培养基基的培养皿封口。本发明所述预处理培养基和诱导培养基可用0.22μm膜过滤灭菌，再生培养基和生根培养基通过0.11Mpa、121℃高温高压灭菌15min。

得到所述愈伤组织后，本发明将所述愈伤组织在再生培养基中，在20～25℃下，光照14～18h、黑暗6～10h，荧光白炽灯的光强度为200μE/m²s、70～80％相对湿度的生长室培养10～18天，得到嫩苗。本发明所述再生培养的培养基优选以2/3MS培养基为基本培养基。本发明所述的再生培养基优选还包括：25～35g/L麦芽糖、0.4～0.6mg/L 6-BA、1.2～1.8mg/L KT及0.04～0.06mg/L NAA，用5.0～6.0g/L琼脂粉固化，pH 5.6～6.0；进一步优选地，以2/3MS为基本培养基，添加27～33g/L麦芽糖、0.45～0.55mg/L 6-BA、1.4～1.6mg/LKT及0.045～0.055mg/L NAA，用5.2～5.8g/L琼脂粉固化，pH 5.7～5.9；更优选为以2/3MS为基本培养基，添加30g/L麦芽糖、0.5mg/L 6-BA、1.5mg/L KT及0.05mg/L NAA，用5.5g/L琼脂粉固化，pH 5.8。本发明通过在上述再生培养基培养后，显著提高了成苗率。

得到嫩苗后，本发明优选将嫩苗在生根培养基中，在20～25℃下，光照14～18h、黑暗6～10h生根14～30天培养，得到生根植株。本发明所述生根培养基优选地以1/2MS为基本培养基，添加25～35g/L蔗糖、3.5～4.5mg/L多效唑及0.04～0.06mg/L NAA，用5.0～6.0g/L琼脂粉固化，pH 5.6～6.0；进一步优选地，以1/2MS为基本培养基，添加27～33g/L蔗糖、3.8～4.3mg/L多效唑及0.045～0.055mg/L NAA，用5.3～5.8g/L琼脂粉固化，pH 5.7～5.9；更优选为以1/2MS为基本培养基，添加30g/L蔗糖、4.0mg/L多效唑及0.05mg/L NAA，用5.5g/L琼脂粉固化，pH 5.8。本发明通过在上述生根培养基中培养，促进植株的生根，提高了植株的成活率。

得到所述生根植株后，本发明优选将所述生根植株进行种子生产，得到双单倍体种子。本发明所述种子生产的温度优选为20～28℃；光周期优选为16L:8D(光照时间为16h，黑暗时间为8h)。本发明在得到所述双倍体种子前，优选还包括丢弃不加倍的种子。

本发明在进行所述种子生产前，优选还包括将所述嫩苗移栽，继续培养两周。本发明所述培养包括水培或土培，本发明对所述土培和水培没有特殊限定，采用本领域常规土培和水培即可。本发明优选采用细水雾进行所述移栽，以保证移栽过程中植株所需的水分。本发明所述继续培养的过程可进一步增强幼苗根系。

得到所述双倍体种子后，本发明优选还包括将所述双倍体种子进行种子繁殖和田间选择。本发明在进行所述种子繁殖前优选还包括将所述双倍体种子分为两份，一份用于所述种子繁殖，一份备份保存。本发明所述种子繁殖优选包括将所述双倍体种子进行播种，本发明对所述播种的方式没有特殊限定，采用本领域常规播种方式即可。本发明优选对所述播种后的植株和收获的种子进行田间选择；所述田间选择的标准优选为：株高75～85cm、穗长≥8cm、穗粒数≥20粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g，饱满度(≥2.5mm)≥85％，蛋白质含量为10.5～12.5％，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、具备抗倒性和抗病性。

本发明所述田间选择优选采取随机区组排列，所述品系比较试验采用随机区组排列，种植3次，小区长2.5m，宽1.25m，5行区、行距0.25m、区距0.25m，面积3.125m²，每行播种250粒，于3月中下旬手锄开沟条播。选择综合性状好、性状稳定、品系比较试验比对照品种增产5％以上的品系，参加区域试验。本发明所述对照品种为甘啤6号。

本发明符合上述田间选择标准的株系即为本发明选育方法得到的大麦稳定株系，即优质高产啤酒大麦新品种，将其命名为XBZ17-2。本发明所述选育方法显著缩短了育种时间，更加高效。

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

一种优质高产啤酒大麦新品种高效选育方法，由以下步骤组成：

优质高产啤酒大麦种质资源的筛选：对国内外优质高产啤酒大麦种质资源农艺性状及经济性状进行田间鉴定：包括生育期95天～105天、株高75～85cm、穗长≥8.0cm、穗粒数≥23粒、成穗数≥50万/亩、千粒重≥45g、株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性强、抗病性强，筛选出优质高产啤酒大麦Krona。

以优质啤酒大麦法瓦维特为母本，以(甘啤3号×Krona)杂交植株为父本，人工杂交组配，去雄时每个植株只做1个穗，做6个以上的植株，获得足够的杂交种子，籽粒成熟时统一混合收获，风干保存，收获杂交种子即为BF0代种子。

将BF0代种子种植到田间即为BF1代，成熟时收获BF1代种子，风干保存。

将BF1代种子种植到田间即为BF2代植株，种植2行。BF2代大量分离，待孕穗时选取健壮无病植株进行小孢子培育。

小孢子培育的方式为：

将F2代供体植株在白天15℃，夜晚12℃下，选择旗叶距为2～10cm的穗，用解剖刀轻轻地切下，从穗顶切下芒，将70％酒精喷到穗子上，将穗放在工作台70％酒精湿纸巾上，让酒精挥发；

酒精蒸发30分钟后，开始取花药，用两个细镊子在显微镜下从每个小花中取出三个花药，然后将花药放在培养皿中的预处理培养基上，用石蜡封口膜密封培养皿，在培养皿上贴上标签，置于24℃黑暗条件下培养12～14天，然后将花药研磨，培养液以150g离心10min，提取小孢子；其中预处理培养基为60g/L甘露醇、1.1g/L CaCl₂、0.976g/L MES、20mg/L秋水仙碱，pH 5.8；

将小孢子在诱导培养基中，在24℃的暗室中培养12～14天；其中，诱导培养基为以N₆为基本培养基(N₆培养基见表1)，添加90g/L麦芽糖、0.5mg/L KT、1.0mg/L 2,4-D、0.976g/L MES、1600mg/L谷氨酰胺及400mg/L水解干酪素，pH 5.8；

将愈伤组织在再生培养基中，在24℃下，光照16h、黑暗8h，荧光白炽灯的光强度为200μE/m²s、70～80％相对湿度的生长室培养10～18天，得到嫩苗；其中再生培养基为以2/3MS为基本培养基(MS培养基见表2)，添加30g/L麦芽糖、0.5mg/L 6-BA、1.5mg/L KT及0.05mg/LNAA，用5.5g/L琼脂粉固化，pH 5.8；

将嫩苗在生根培养基中，在20～25℃下，光照14～18h、黑暗6～10h生根14～30天培养，得到生根植株；其中生根培养基为以1/2MS为基本培养基(MS培养基见表2)，添加30g/L蔗糖、4.0mg/L多效唑及0.05mg/L NAA，用5.5g/L琼脂粉固化，pH 5.8。

用细水雾移栽到土壤中保持水分或水培2周继续培育，在16h光照/8h黑暗、24℃的条件下生长，收获单株，选择选择农艺形状好、株高75～85cm、穗长≥8cm、穗粒数≥20粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g，饱满度(≥2.5mm)≥85％，蛋白质含量在10.5～12.5％之间，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性和抗病性株系，获得大麦稳定株系；

将种子分成两份，一份用于种子繁殖和田间选择，一份备份保存。

选择选择农艺形状好、株高75～85cm、穗长≥8cm、穗粒数≥20粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g，饱满度(≥2.5mm)≥85％，蛋白质含量在10.5～12.5％之间，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性和抗病性株系，参加品系鉴定试验；

品系鉴定试验采用间比法排列，种植三次，每隔10个小区加一个对照小区，对照品种为甘啤6号，小区长2.5m、宽1.25m、行距0.25m、区距0.25m、走道0.5m、小区面积3.125m²，5行区，每行播种250粒，于3月中下旬，手锄开沟条播，选择综合性状好、比对照增产5％的品系进行鉴定试验，较对照增产7.5％。

另外，采用本发明所述的优质高产啤酒大麦新品种高效选育方法，仅需2年即可得到稳定的新品种，较常规6～7年的选育方法缩短了4～5年。

表1 N₆培养基配方

表2 MS培养基配方

尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (5)

1.一种优质高产啤酒大麦的选育方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）以大麦品种甘啤3号为母本，以大麦品种Krona为父本，杂交收获F0代，F0代自交得到甘啤3号×Krona的F1代植株；

2）以大麦品种法瓦维特为母本，所述甘啤3号×Krona的F1代植株为父本，杂交得BF0代种子，种植后自交，得BF1代种子；

3）将所述BF1代种子播种，自交，得BF2代；

4）于所述BF2代的植株孕穗期进行小孢子培育，单株收获，得到优质高产啤酒大麦稳定株系；

所述小孢子培育的步骤包括：

于BF2代植株孕穗期取穗、取花药；

将所述花药在预处理培养基中黑暗条件培养，分离得到小孢子；

将所述小孢子经诱导培养、再生培养、生根培养和种子生产，得到大麦稳定株系；

所述诱导培养为黑暗条件培养；所述诱导培养的温度为20~25℃，时间为12~14d；

所述诱导培养的培养基以N6培养基为基本培养基，还具有以下组分：85~95 g/L麦芽糖、0.4~0.6mg/L KT、0.8~1.2 mg/L 2,4-D、0.9~1.0 g/L MES、1550~1650 mg/L谷氨酰胺及380~420 mg/L水解干酪素，pH 5.6~6.0；

所述再生培养在20~25℃下，光照14~18h、黑暗6~10h培养10~18天；

所述再生培养的培养基以2/3 MS培养基为基本培养基，还具有以下组分：25~35 g/L麦芽糖、0.4~0.6mg/L 6-BA、1.2~1.8mg/L KT及0.04~0.06 mg/L NAA，用5.0~6.0 g/L琼脂粉固化，pH 5.6~6.0；

所述生根培养的培养基以1/2MS为基本培养基，还具有以下组分：25~35 g/L蔗糖、3.5~4.5mg/L多效唑及0.04~0.06 mg/L NAA，用5.0~6.0 g/L琼脂粉固化，pH 5.6~6.0；生根培养为在20~25℃下，光照14~18h、黑暗6~10h生根培养14~30天；

所述预处理培养基的组分为：50~70g/L甘露醇、1.0~1.2g/L CaCl₂、0.9~1.0g/L MES、15~25mg/L秋水仙碱，pH 5.6~5.8；

所述优质高产啤酒大麦稳定株系为株高75cm~85cm、穗长≥8cm、穗粒数≥20粒、分蘖率≥2.0个、千粒重≥45g、饱满度≥85%，蛋白质含量10.5~12.5%，株型紧凑、熟期转色好、整齐度一致、植株抗倒性强、抗病性强的株系；

所述饱满度为籽粒腹茎≥2.5mm的籽粒占比。

2.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述步骤1）和步骤2）中的杂交包括人工杂交组配；所述人工杂交组配包括去雄，每个植株去雄的穗数为1。

3.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，用于所述取穗的BF2代植株为健壮无病植株；所述BF2代植株孕穗期的生长温度包括白天15~18℃，夜间12~15℃。

4.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述黑暗条件培养的温度为24℃，时间为12~14天。

5.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述生根培养后，将所述生根后的植株移栽到土壤中进行所述种子生产；所述种子生产的温度为20~28℃，光周期为16L:8D。