CN114504019A - 丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂及其制备方法和应用，以重量份计，所述保鲜剂包括：丁香提取物纳米胶囊0.5‑3份、壳聚糖‑明胶涂层液90‑110份；保鲜剂pH为5‑6；所述丁香提取物纳米胶囊包括：丁香提取物2‑4份、壳聚糖2‑4份、三聚磷酸钠0.5‑2份、吐温2‑4份；所述壳聚糖‑明胶涂层液由0.5‑2wt%的壳聚糖溶液与2‑4wt%的明胶溶液混合制备而成。本发明的涂膜保鲜剂配方科学合理，天然无毒，综合抑菌效果好，抑菌效果具有长效性，且具有护色、抗氧化等多种功能，能大大延长肉与肉制品的货架期。
Description
技术领域
本发明涉及肉类保鲜技术领域，具体地说是涉及一种丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂及其制备方法和应用。
背景技术
目前我们常用的食品保鲜方法主要可以分为物理保鲜方法和化学保鲜方法。其中物理保鲜技术有冷藏、冻藏、平衡改性气氛包装、气调包装、活性包装、辐射和脉冲电场等，然而存在成本高、难控制、破坏肉类品质等问题。化学保鲜技术主要分为化学防腐剂和天然防腐剂，化学防腐剂成本低、用量少，却存在一定毒性；天然防腐剂具有良好的抑菌性、抗氧化性，但存在稳定性差、溶解性差等问题。因此，寻找便捷、高效、安全的肉类抑菌方法对肉类产业发展起至关重要的作用。
丁香，药食同源物质，为桃金娘科蒲桃属，该种植物属于常绿热带植物。《日华子》中记载，其有“治口气、反胃，鬼疰蛊毒，及疗肾气奔豚气，阴痛，壮阳，暖腰膝，治冷气，杀酒毒，消痃癖，除冷劳”的功效。根据有无开花，分为公丁香和母丁香。花蕾为公丁香，气香力足；果实为母丁香，气味较淡，故入药以公丁香为胜。此外，丁香具有独特的芳香气味，叶子及芽常用作调味香料。丁香及其活性成分具有多种有益功能，是最有潜力的膳食营养添加剂和抑菌剂之一。目前对丁香提取物的保鲜应用研究处于初级阶段，研究发现，丁香提取物有良好的抑菌作用和抗癌作用，并且对肥胖起到抑制和预防的作用。吕心泉等研究表明将6种药食同源植物提取物与Nisin做复合防腐剂对盐水鸭进行防腐保鲜，表现出良好的抑菌效果，并且不影响鸭肉的口味和口感。丁一冉从药食同源植物中发现一种脂肪酸合成酶抑制剂-丁香提取物，研究发现其对于高脂饮食诱导的肥胖症的发生与发展具有明显的改善与调节作用。李忠伟研究表明丁香提取物中的齐墩果酸可发挥抑制高脂饮食的作用。Yassin等发现丁香提取物对结肠癌细胞具有较强的抗癌活性。丁香提取物不仅具有良好的抑菌效果，还具有较高的生物活性。
然而，丁香提取物存在溶解性差、气味大、颜色深等问题，影响其在肉品中的应用。因此，如何解决丁香提取物的上述问题，将其应用于工业肉制品的保鲜是本领域重要的研究课题。
发明内容
本发明的目的是提供一种丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂及其制备方法和应用，以解决丁香提取物因溶解性差、气味大、颜色深而难以应用于工业肉制品保鲜的问题。
本发明技术方案为：一种丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂，以重量份计，
所述保鲜剂包括：丁香提取物纳米胶囊(CCNPs)0.5-3份、壳聚糖-明胶涂层液90-110份；保鲜剂pH为5-6；
所述丁香提取物纳米胶囊包括：丁香提取物(Clove)2-4份、壳聚糖(CS)2-4份、三聚磷酸钠(TPP)0.5-2份、吐温2-4份；
所述壳聚糖-明胶涂层液由0.5-2wt％的壳聚糖溶液与2-4wt％的明胶(Gel)溶液混合制备而成。
壳聚糖溶液与明胶溶液等体积混合。
上述的涂膜保鲜剂的制备方法，包括以下步骤：
(a)将0.5-2wt％的壳聚糖溶液与2-4wt％的明胶溶液混合，并在50-70℃下搅拌5-15分钟，冷却至室温，即得到壳聚糖-明胶涂层液；
(b)按比例向壳聚糖-明胶涂层液中加入丁香提取物纳米胶囊，搅拌至混合均匀，然后调节pH至5-6，即得到所述的涂膜保鲜剂。
步骤(a)中，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.5-2wt％的乙酸溶液，将壳聚糖溶于乙酸溶液后于50-70℃搅拌20-40分钟，即得所述壳聚糖溶液。
步骤(a)中，明胶溶液的制备为：将明胶置于蒸馏水中过夜溶胀，然后于50-60℃下磁力搅拌20-40分钟，即得所述明胶溶液。
步骤(b)中，所述丁香提取物纳米胶囊通过以下方法制备：
(b-1)按比例称取原料，将壳聚糖配制成浓度为1.0-5.0mg/mL的壳聚糖溶液，然后将壳聚糖溶液与吐温混合，并于50-70℃搅拌20-40分钟，得到均匀的混合物；
(b-2)将丁香提取物配制成浓度为0.25-2.0mg/mL的丁香提取物乙醇溶液，将三聚磷酸钠配制成浓度为1.0-3.0mg/mL、pH为4-5的三聚磷酸钠溶液，将丁香提取物乙醇溶液加入到所述混合物中，室温搅拌20-40分钟，然后逐滴加入三聚磷酸钠溶液，常温搅拌50-70分钟，形成丁香提取物纳米胶囊分散液；
(b-3)丁香提取物纳米胶囊分散液经离心、洗涤、冷冻干燥后，得到丁香提取物纳米胶囊CCNPs。
步骤(b-1)中，壳聚糖溶液的配制为：将壳聚糖用1％冰醋酸溶解，并于50-70℃搅拌50-70分钟形成均匀的溶液，然后经0.45μm微孔滤纸过滤，并调节滤液pH至4-5。
步骤(b-2)中，丁香提取物的制备为：丁香经粉粹、干燥得到丁香粉末，将丁香粉末与95％乙醇混合，室温震荡20-28小时，然后在功率20-30W下超声处理20-40分钟，再经过滤、减压浓缩、冷冻干燥后即得所述丁香提取物。干燥温度为40-50℃，干燥时间为20-24小时。过滤时先粗滤，然后用无菌的定性滤纸过滤。减压浓缩温度为40-50℃，真空度要求为-0.10-0.08MPa。
步骤(b-3)中，离心速度为12000rpm，离心时间为10-30分钟，洗涤溶剂为水，洗涤次数为2-3次。
上述的涂膜保鲜剂在肉和肉制品保鲜上的应用。具体为：将肉或肉制品块浸入到涂膜保鲜剂中浸泡5-20s。浸泡处理后，晾于不锈钢架子上，成膜后，重复上述涂层过程1-3次。将所有处理好的样品装在无菌的聚氯乙烯托盘中，并用聚乙烯薄膜密封。
本发明的有益效果为：
(1)合成简单
本发明的CCNPs保鲜剂原料易得、合成步骤简单、易于分离纯化，适合批量生产，有利于商业化的推广应用。
(2)绿色无毒
CCNPs的合成原料均为食品级原料，且均为绿色无毒原料，因此CCNPs是一种绿色无毒的食品保鲜剂。
(3)综合抑菌效果好
对于肉品常见腐败菌(黑曲霉、铜绿假单胞菌等)和致病菌(单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌等)均具有较高的抑制效果。
(4)应用范围广
具有护色、抗氧化等多种功能，很好地解决了丁香提取物溶解性差、气味大和颜色深的问题，适用于各类肉和肉制品保鲜的应用，且具有推广到其他食品保鲜的潜力。
(5)缓释长效抑菌
CCNPs具有缓慢释放的特点，使其抑菌效果时间延长。
附图说明
图1为CCNPs扫描电镜图。A为冷冻干燥的CCNPs微观结构，B为未经过冷冻干燥的CCNPs微观结构。
图2为CS、CCNPs、CNPs(空白纳米胶囊)以及Clove红外光谱图。
图3为CCNPs的累积释放率。
图4为本发明保鲜剂对冷鲜肉菌落总数的影响。Con指对照组，CS指CS组，CS-Gel指壳聚糖-明胶组，CS-Gel-Clove指壳聚糖-明胶-丁香提取物组，CS-Gel-NPs指壳聚糖-明胶-壳聚糖-丁香提取物纳米胶囊组。
图5为本发明保鲜剂对冷鲜肉TBARS的影响。Con指对照组，CS指CS组，CS-Gel指壳聚糖-明胶组，CS-Gel-Clove指壳聚糖-明胶-丁香提取物组，CS-Gel-NPs指壳聚糖-明胶-壳聚糖-丁香提取物纳米胶囊组。
图6为本发明保鲜剂对冷鲜肉TVB-N的影响。Con指对照组，CS指CS组，CS-Gel指壳聚糖-明胶组，CS-Gel-Clove指壳聚糖-明胶-丁香提取物组，CS-Gel-NPs指壳聚糖-明胶-壳聚糖-丁香提取物纳米胶囊组。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的阐述，在下述实施例中未详细描述的过程和方法是本领域公知的常规方法，实施例中所用原料或试剂除另有说明外均为市售品，可通过商业渠道购得。
实施例1
丁香提取物(Clove)的制备；丁香经粉粹，在40℃下干燥24小时，得到较细的粉末。然后取较细的丁香粉末20g与95％乙醇200mL混合，室温震荡24小时，得到混合物，然后在25W功率下超声处理30分钟。过滤收集滤液，过滤时先粗滤，再用无菌的定性滤纸过滤。滤液进行减压浓缩，减压浓缩温度为40℃，真空度为0.03MPa，最后经冷冻干燥得到Clove，于-20℃保存。
实施例2
丁香提取物纳米胶囊(CCNPs)的制备方法：称取丁香提取物(Clove)3g、CS 3g、三聚磷酸钠(TPP)1g和吐温-80(质量分数为0.8％)3g。
将上述原料分别配制成3mg/mL的CS溶液，1.0mg/mL Clove溶液，2.0mg/mL、pH为4.5的TPP溶液；将CS溶液与吐温-80在60℃搅拌30分钟得到均匀混合物A，冷却至室温备用。将Clove的乙醇溶液加入到混合物A中，室温搅拌30分钟，然后逐滴加入TPP溶液，常温搅拌60分钟，形成CCNPs分散液。最后，CCNPs分散液经高速离心、洗涤、冷冻干燥得到CCNPs。CCNPs分散液离心速度为12000rpm，离心时间为20分钟，洗涤溶剂为水，洗涤次数为2-3次。
CS溶液配制时需要溶解于1％冰醋酸中，并于60℃搅拌60分钟形成均匀的溶液。然后经0.45μm微孔滤纸过滤，调节滤液pH至4.5。
CCNPs涂层液的制备方法：将质量分数为1％的CS溶液100mL和质量分数为3％的Gel溶液100mL混合，60℃下搅拌10分钟得到CS-Gel涂层液，冷却至室温。然后将CCNPs 1g加入到100g上述CS-Gel涂层液中并混合均匀，调节pH至5.6，得到最终的涂膜保鲜剂——丁香提取物纳米胶囊涂层溶液。
质量分数为1％的CS溶液的制备时需将CS溶解于1％乙酸溶液，并于60℃搅拌30分钟。
质量分数为3％的Gel溶液的制备时，Gel先于蒸馏水中过夜溶胀，后经55℃磁力搅拌30分钟。对所得样品进行表征，结果见图1和图2所示。
冷冻干燥的CCNPs微观结构见图1A，结果显示为具有粗糙片状结构，甚至有聚集的情况。进一步研究了未经冷冻干燥的CCNPs的微观结构见图1B，结果显示CCNPs呈较规则圆形，粒径较为均匀，形态饱满，粒径为30nm左右。
CCNPs的傅里叶变化红外光谱图(FTIR)见图2，CS、CCNPs、CNPs(空白纳米胶囊，不含丁香提取物)和Clove在特征峰吸收区3000cm-1-3500cm-1、2800cm-1-3000cm-1、1000cm-1-1700cm-1有着不同的吸收峰。CS红外光谱如图2显示，在3468.23cm-1处的吸收峰归因于-OH的伸缩震动，在2878.43cm-1处的吸收峰归因于-CH2的对称伸缩震动，在1654.12cm-1处的振动吸收峰归因于伯酰胺的伸缩震动，在1077.04cm-1处有振动吸收峰归因于糖苷键的伸缩震动。CNPs的-OH吸收峰变的更为平坦，表明CS与TPP之间的氢键作用加强。基于TPP中的磷酸基团与CS中氨基的静电作用，伯酰胺的吸收峰转移至1560.21cm-1。CS在此处的吸收峰为3468.23cm-1，而在CCNPs和CNPs中，该峰转移到了3435.38cm-1和3240.04cm-1处，分子内、分子间氢键的作用使得伸缩振动频率向低波数方向移动，表明了CS与TPP之间的氢键作用加强。Clove比CCNPs多转移了18.55cm-1，可能是Clove与CS分子中未被交联的氨基基团相互作用的结果。在1000cm-1-1700cm-1段，CS中C＝O的伸缩振动吸收峰为1654.12cm-1，而CCNPs和CNPs中，该峰转移到了1635.55cm-1和1560.21cm-1处，推测可能是TPP的磷酸基团与CS的-NH2、-CONH2都发生了交联。在CCNPs中，伯酰胺的吸收峰转移至1635.55cm-1，这是Clove与CS中氨基静电作用的结果，同时可证明Clove已被包封到CS与TPP形成的纳米胶囊中。
实施例3
丁香提取物纳米胶囊(CCNPs)的制备方法：称取丁香提取物(Clove)2g、CS 2g、三聚磷酸钠(TPP)0.5g和吐温-80(质量分数为0.8％)2g。
将上述原料分别配制成3mg/mL的CS溶液，1.0mg/mL Clove溶液，2.0mg/mL、pH为4.5的TPP溶液；将CS溶液与吐温-80在50℃搅拌40分钟得到均匀混合物A，冷却至室温备用。将Clove的乙醇溶液加入到混合物A中，室温搅拌20分钟，然后逐滴加入TPP溶液，常温搅拌50分钟，形成CCNPs分散液。最后，CCNPs分散液经高速离心、洗涤、冷冻干燥得到CCNPs。CCNPs分散液离心速度为12000rpm，离心时间为10分钟，洗涤溶剂为水，洗涤次数为2-3次。
CS溶液配制时需要溶解于1％冰醋酸中，并于60℃搅拌60分钟形成均匀的溶液。然后经0.45μm微孔滤纸过滤，调节滤液pH至4.5。
CCNPs涂层液的制备方法：将质量分数为0.5％的CS溶液100mL和质量分数为2％的Gel溶液100mL混合，60℃下搅拌10分钟得到CS-Gel涂层液，冷却至室温。然后将CCNPs0.5g加入到90g上述CS-Gel涂层液中并混合均匀，调节pH至5.0，得到最终的涂膜保鲜剂——丁香提取物纳米胶囊涂层溶液。
质量分数为0.5％的CS溶液的制备时需将CS溶解于1％乙酸溶液，并于60℃搅拌30分钟。
质量分数为2％的Gel溶液的制备时，Gel先于蒸馏水中过夜溶胀，后经55℃磁力搅拌30分钟。
实施例4
丁香提取物纳米胶囊(CCNPs)的制备方法：称取丁香提取物(Clove)4g、CS 4g、三聚磷酸钠(TPP)2g和吐温-80(质量分数为0.8％)4g。
将上述原料分别配制成3mg/mL的CS溶液，1.0mg/mL Clove溶液，2.0mg/mL、pH为4.5的TPP溶液；将CS溶液与吐温-80在70℃搅拌20分钟得到均匀混合物A，冷却至室温备用。将Clove的乙醇溶液加入到混合物A中，室温搅拌40分钟，然后逐滴加入TPP溶液，常温搅拌70分钟，形成CCNPs分散液。最后，CCNPs分散液经高速离心、洗涤、冷冻干燥得到CCNPs。CCNPs分散液离心速度为12000rpm，离心时间为30分钟，洗涤溶剂为水，洗涤次数为2-3次。
CS溶液配制时需要溶解于1％冰醋酸中，并于60℃搅拌60分钟形成均匀的溶液。然后经0.45μm微孔滤纸过滤，调节滤液pH至4.5。
CCNPs涂层液的制备方法：将质量分数为2％的CS溶液100mL和质量分数为4％的Gel溶液100mL混合，60℃下搅拌10分钟得到CS-Gel涂层液，冷却至室温。然后将CCNPs 3g加入到110g上述CS-Gel涂层液中并混合均匀，调节pH至6.0，得到最终的涂膜保鲜剂——丁香提取物纳米胶囊涂层溶液。
质量分数为2％的CS溶液的制备时需将CS溶解于1％乙酸溶液，并于60℃搅拌30分钟。
质量分数为4％的Gel溶液的制备时，Gel先于蒸馏水中过夜溶胀，后经55℃磁力搅拌30分钟。
实施例5
测定实施例1和实施例2制备的样品的抑菌性能，结果见表1所示。
表1 CCNPs和Clove的MIC、MBC分析
CCNPs对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌和黑曲霉的MIC值和MBC值见表1。抑菌性大小：CCNPs>Clove，说明Clove经过纳米修饰可以提高Clove的抑菌性。CCNPs对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌和黑曲的综合抑菌性能均强于单独的Clove。
实施例6
CCNPs的体外缓释性能分析
为模拟CCNPs在冷鲜肉保存中的释放机制，采用柠檬酸盐缓冲溶液(pH＝5.6)和磷酸盐缓冲溶液(pH＝7.4)作为释放基质分别在4℃和25℃下观察Clove的释放情况。由图3可以看出，Clove在不同pH值的缓冲液和不同温度环境中有着不同的缓释效果。在0-5小时内，Clove的累积释放率初始阶段快速上升，由于纳米粒表面有部分Clove附着，较易从体系中释放出来。另外，CS聚合物的高溶解速率导致大量Clove的快速释放。在6小时后，CCNPs进入缓释阶段且不同温度、不同pH值环境下的纳米粒呈现出不同的缓释速度。其中相同温度下在pH＝5.6环境下的累计释放率高于在中性条件下的，一方面，可能由于pH＝7.4偏碱性，导致壳聚糖层不溶，阻碍Clove的释放；另一方面，高浓度的H+降低静电作用，导致纳米粒膨胀破裂，促进了Clove的释放。相同的pH值、不同的温度环境下，Clove的释放率也不相同，环境温度25℃的累计释放率高于4℃下的，表明温度升高有利于内容物的释放。体外缓释结果表明CCNPs能够实现Clove的可控性释放，其释放量可通过pH值和温度进行调控。
实施例7
将肉块浸入到CCNPs涂层液中浸泡10s。浸泡处理后，晾于不锈钢架子上，成膜后，重复上述涂层过程1次。将所有处理好的猪肉样品装在无菌的聚氯乙烯托盘中，并用聚乙烯薄膜密封进行冷藏。
(1)CCNPs涂层液对冷鲜猪肉细菌总数的影响
CCNPs对冷鲜猪肉细菌总数(TVC)的影响见图4，第0d，冷鲜猪肉的TVC值为2.92logCFU/g，在冷藏期间，Con组及处理组的猪肉TVC值均急剧增加。Con组的TVC值在冷藏贮藏过程中表现出最快的增长，从第3d起就显着高于所有涂层处理组(P<0.05)。冷藏期间样品微生物数量的增加可能归因于嗜冷菌细菌的繁殖。如果TVC超过限值(腐败肉：>6.0log CFU/g)，则可能会导致猪肉变质。Con组的TVC值在7d超过此限值，相比之下，CS涂层样品第9d(TVC值为6.15log CFU/g)、CS-Gel涂层样品第11d(TVC值为6.95log CFU/g)、CS-Gel-Clove涂层样品第11d(TVC值为6.31log CFU/g)超过腐败肉标准，而CS-Gel-NPs涂层的样品在储存13d(TVC为6.35log CFU/g)才超过腐败肉标准。
与对照组相比，处理组均能有效抑制微生物的生长。第3d开始，CS涂层对微生物的生长产生了有效的抑制作用。CS分子抑制微生物生长的机制被认为是CS的正电荷与微生物细胞膜表面的负电荷之间的静电作用，改变了膜的渗透性。此外，CS-Gel涂层样品的TVC值在第9d和第11d低于CS涂层样品的TVC值，表明CS-Gel涂层具有更高的抗菌性。分析其原因可能是CS和Gel通过氢键形成致密的结构来降低涂层的透湿性，因此可进一步提高涂层的抗菌活性。
(2)CCNPs涂层液对冷鲜猪肉脂肪氧化的影响
肉类产品中的脂质氧化会导致其质量变差，这对于肌肉食品的保质期尤为重要。醛是脂质氧化的次级反应产物，因此根据硫代巴比妥酸(TBARS)反应性物质的存在来确定与肉品感官质量密切相关的次要脂质氧化产物的含量。CCNPs对冷鲜肉脂肪氧化的影响如图5所示，所有样品的TBARS值随贮藏时间的延长呈增加趋势。对照组猪肉TBARS增幅最快，TBARS从第1d的0.17mg MDA/kg显著增加到储存结束时的1.63mg MDA/kg。这主要是因为Con样品与密封在塑料托盘中的氧气直接接触且容易发生脂质氧化，而脂质氧化产生的活性氧会加速氧化过程。处理组样品在保存13d后TBARS值均显著低于Con组，这表明涂层液具有抗氧化性能。涂层液中都包含CS，说明CS涂层在肉类保鲜中有良好的抗氧化活性。
CS-Gel-Clove组第13d的TBARS值低于1.5mg MDA/kg，说明CS-Gel-Clove涂层液除了抑菌外还可抑制氧化从而达到保鲜作用。这可能是由于Clove中酚类组合物质具有抗氧化特性，尤其是丁香酚成分。从贮藏开始，CS-GEL-NPs涂层处理对猪肉制品起到了有效的保护作用，在冷藏贮藏的前9d中将TBARS值保持在0.76mg MDA/kg以下，在贮藏结束时依旧保持在1.0mg/kg以下。与游离提取物相比，经过纳米修饰的丁香提取物具有更强的抗氧化活性以及更好的稳定性，可实现降低抗氧化剂在食品或食用涂层中的使用浓度。
(3)CCNPs涂层液对冷鲜猪肉挥发性盐基总氮的影响
挥发性盐基总氮(TVB-N)含量是作为肉类品质衡量的常用指标，储存过程中TVB-N值的测量可提供有关含氮物质生成的信息，它代表了微生物在肉类分解过程中释放的氨和其他碱性挥发性含氮化合物的总和，从而深入了解内源酶的活性以及细菌的活性和腐败性。CCNPs对冷鲜猪肉TVB-N值的影响见图6，冷鲜猪肉的初始TVB-N含量为7.72mg/100g，表明初始冷鲜猪肉样品具有良好的卫生质量，这与微生物分析部分样品初始含有较低的菌落总数是一致的。TVB-N随贮藏天数的增加呈上升趋势，第5d Con组TVN-N的含量已显著高于处理组(P<0.05)。Con组第5d的TVB-N的含量为20.34mg/100g，该值超过腐败肉的限量(20mg/100g)，而CS-GEL-NPs组在第13d TVB-N的含量(23.84mg/100g)才超过腐败肉的限量。CS-GEL-NPs组的TVB-N值始终低于其他对照组，说明CS-GEL-NPs组有良好的抗氧化和抗菌作用，能发挥良好的保鲜性能，显著延长冷鲜肉的货架期。
Claims (10)
1.一种丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂，其特征在于，以重量份计，
所述保鲜剂包括：丁香提取物纳米胶囊0.5-3份、壳聚糖-明胶涂层液90-110份；保鲜剂pH为5-6；
所述丁香提取物纳米胶囊包括：丁香提取物2-4份、壳聚糖2-4份、三聚磷酸钠0.5-2份、吐温2-4份；
所述壳聚糖-明胶涂层液由0.5-2wt%的壳聚糖溶液与2-4wt%的明胶溶液混合制备而成。
2.根据权利要求1所述的丁香提取物纳米胶囊涂膜保鲜剂，其特征在于，壳聚糖溶液与明胶溶液等体积混合。
3.一种权利要求1或2所述的涂膜保鲜剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（a）将0.5-2wt%的壳聚糖溶液与2-4wt%的明胶溶液混合，并在50-70℃下搅拌5-15分钟，冷却至室温，即得到壳聚糖-明胶涂层液；
（b）按比例向壳聚糖-明胶涂层液中加入丁香提取物纳米胶囊，搅拌至混合均匀，然后调节pH至5-6，即得到所述的涂膜保鲜剂。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（a）中，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.5-2wt%的乙酸溶液，将壳聚糖溶于乙酸溶液后于50-70℃搅拌20-40分钟，即得所述壳聚糖溶液。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（a）中，明胶溶液的制备为：将明胶置于蒸馏水中过夜溶胀，然后于50-60℃下磁力搅拌20-40分钟，即得所述明胶溶液。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤（b）中，所述丁香提取物纳米胶囊通过以下方法制备：
（b-1）按比例称取原料，将壳聚糖配制成浓度为1.0-5.0 mg/mL的壳聚糖溶液，然后将壳聚糖溶液与吐温混合，并于50-70℃搅拌20-40分钟，得到均匀的混合物；
（b-2）将丁香提取物配制成浓度为0.25-2.00 mg/mL的丁香提取物乙醇溶液，将三聚磷酸钠配制成浓度为1.0-3.0 mg/mL、pH为4-5的三聚磷酸钠溶液，将丁香提取物乙醇溶液加入到所述混合物中，室温搅拌20-40分钟，然后逐滴加入三聚磷酸钠溶液，常温搅拌50-70分钟，形成丁香提取物纳米胶囊分散液；
（b-3）丁香提取物纳米胶囊分散液经离心、洗涤、冷冻干燥后，得到丁香提取物纳米胶囊。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤（b-1）中，壳聚糖溶液的配制为：将壳聚糖用1%冰醋酸溶解，并于50-70℃搅拌50-70分钟形成均匀的溶液，然后经0.45μm微孔滤纸过滤，并调节滤液pH至4-5。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤（b-2）中，丁香提取物的制备为：丁香经粉粹、干燥得到丁香粉末，将丁香粉末与95%乙醇混合，室温震荡20-28小时，然后在功率20-30W下超声处理20-40分钟，再经过滤、减压浓缩、冷冻干燥后即得所述丁香提取物。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤（b-3）中，离心速度为12000rpm，离心时间为10-30分钟，洗涤溶剂为水，洗涤次数为2-3次。
10.权利要求1或2所述的涂膜保鲜剂在肉和肉制品保鲜上的应用。
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