CN114409603A - 一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 - Google Patents
一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114409603A CN114409603A CN202210068611.4A CN202210068611A CN114409603A CN 114409603 A CN114409603 A CN 114409603A CN 202210068611 A CN202210068611 A CN 202210068611A CN 114409603 A CN114409603 A CN 114409603A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reaction
- ring
- bottom flask
- alkyl
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- -1 Pyrimidone thioether compound Chemical class 0.000 title claims abstract description 75
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 14
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 22
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 20
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 13
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 13
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 11
- 125000000229 (C1-C4)alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 10
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 10
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 10
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 10
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims description 8
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001820 oxy group Chemical group [*:1]O[*:2] 0.000 claims description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 claims description 2
- 125000000101 thioether group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 abstract description 8
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 abstract description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 abstract description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 6
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 abstract description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 abstract description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 140
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 140
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 118
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 114
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 110
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 105
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 81
- 239000000047 product Substances 0.000 description 76
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 70
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 42
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 40
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 40
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 39
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 37
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzenecarboxaldehyde Natural products O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- ZIUSEGSNTOUIPT-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-cyanoacetate Chemical compound CCOC(=O)CC#N ZIUSEGSNTOUIPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 35
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 35
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 108091005625 BRD4 Proteins 0.000 description 15
- 102100029895 Bromodomain-containing protein 4 Human genes 0.000 description 15
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 9
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 7
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- GNMUEVRJHCWKTO-FQEVSTJZSA-N 6h-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepine-6-acetamide, 4-(4-chlorophenyl)-n-(4-hydroxyphenyl)-2,3,9-trimethyl-, (6s)- Chemical compound C([C@@H]1N=C(C2=C(N3C(C)=NN=C31)SC(=C2C)C)C=1C=CC(Cl)=CC=1)C(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 GNMUEVRJHCWKTO-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 229950000080 birabresib Drugs 0.000 description 5
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229940088617 BET protein inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical class [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001805 Bromodomains Human genes 0.000 description 2
- 108050009021 Bromodomains Proteins 0.000 description 2
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N pyrimidin-2-ol Chemical group OC1=NC=CC=N1 VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 2
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- XHGLXNUIRLXTQE-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-chlorophenyl)methylsulfanyl]-4-oxo-6-phenyl-1h-pyrimidine-5-carbonitrile Chemical compound N=1C(C=2C=CC=CC=2)=C(C#N)C(O)=NC=1SCC1=CC=CC=C1Cl XHGLXNUIRLXTQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJYVEMPWNAYQQN-UHFFFAOYSA-N 5-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C21OC(=O)C1=CC(C(=O)O)=CC=C21 NJYVEMPWNAYQQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029894 Bromodomain testis-specific protein Human genes 0.000 description 1
- 102100033641 Bromodomain-containing protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100033642 Bromodomain-containing protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- JXDOJSKIEHEGEV-UHFFFAOYSA-N CC(C=C(C=C1)C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=C1OC Chemical compound CC(C=C(C=C1)C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=C1OC JXDOJSKIEHEGEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MWOWDHZENZTEKV-UHFFFAOYSA-N CC1=C(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)C=CC=C1 Chemical compound CC1=C(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)C=CC=C1 MWOWDHZENZTEKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMIKCTHCOHTGOQ-UHFFFAOYSA-N CC1=CC(C)=CC(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)=C1 Chemical compound CC1=CC(C)=CC(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)=C1 MMIKCTHCOHTGOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMJIXSSFAZBHTQ-UHFFFAOYSA-N CC1=CC=C(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)C=C1 Chemical compound CC1=CC=C(CSC(NC2=O)=NC(C(C=C3OC)=CC(OC)=C3OC)=C2C#N)C=C1 KMJIXSSFAZBHTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJUCKHINIBILGX-UHFFFAOYSA-N CCOC(C=C(C=C1)C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=C1OC Chemical compound CCOC(C=C(C=C1)C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=C1OC JJUCKHINIBILGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYUQBOXYVKLMBP-UHFFFAOYSA-N CCOC(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1)=C1OC Chemical compound CCOC(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1)=C1OC MYUQBOXYVKLMBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZVFJRDYJDMYTOX-UHFFFAOYSA-N CNC(C1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC=C1)=O Chemical compound CNC(C1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC=C1)=O ZVFJRDYJDMYTOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQIACEYHNZPZEM-UHFFFAOYSA-N COC(C(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1)=C1OC)=O Chemical compound COC(C(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1)=C1OC)=O BQIACEYHNZPZEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAJKBAQAMFKZIF-UHFFFAOYSA-N COC(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1OC)=C1OC Chemical compound COC(C=CC(C(N=C(NC1=O)SCC(C=CC=C2)=C2Cl)=C1C#N)=C1OC)=C1OC RAJKBAQAMFKZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOVIILJGMRCXFZ-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(Cl)=C1OC Chemical compound COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(Cl)=C1OC HOVIILJGMRCXFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SKOZGSXFRXEISO-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(O)=C1OC Chemical compound COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(O)=C1OC SKOZGSXFRXEISO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGCOQHXZYQMPTQ-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC Chemical compound COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3Cl)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC QGCOQHXZYQMPTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORSYJQUJCQHGOQ-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3F)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC Chemical compound COC1=CC(C(N=C(NC2=O)SCC(C=CC=C3)=C3F)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC ORSYJQUJCQHGOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAEZWJMDQQVFLX-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C(NCC2=CC=CC=C2)NC2=O)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC Chemical compound COC1=CC(C(N=C(NCC2=CC=CC=C2)NC2=O)=C2C#N)=CC(OC)=C1OC CAEZWJMDQQVFLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 206010019668 Hepatic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 101000794028 Homo sapiens Bromodomain testis-specific protein Proteins 0.000 description 1
- 101000871850 Homo sapiens Bromodomain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000871851 Homo sapiens Bromodomain-containing protein 3 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- KFXVCFYPHWYBER-UHFFFAOYSA-N N#CC(C(N1)=O)=C(C(C=C2)=CC3=C2OCCO3)N=C1SCC(C=CC=C1)=C1Cl Chemical compound N#CC(C(N1)=O)=C(C(C=C2)=CC3=C2OCCO3)N=C1SCC(C=CC=C1)=C1Cl KFXVCFYPHWYBER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBQHBNRYBGPWBT-UHFFFAOYSA-N N#CC(C(N1)=O)=C(C(C=C2)=CC=C2OC(F)(F)F)N=C1SCC(C=CC=C1)=C1Cl Chemical compound N#CC(C(N1)=O)=C(C(C=C2)=CC=C2OC(F)(F)F)N=C1SCC(C=CC=C1)=C1Cl JBQHBNRYBGPWBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N Triiodomethane Natural products IC(I)I OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 1
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940045348 brown mixture Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000005580 one pot reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/56—One oxygen atom and one sulfur atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Abstract
本发明提供一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用，该化合物具有式Ⅰ所示的结构，
式Ⅰ，该通式化合物具有降低NF‑kB通路依赖的炎症因子TNF‑α和IL‑6的表达的作用，并具有明显抑制LPS诱导巨噬细胞产生一氧化氮的效果，可应用于制备预防和/或治疗炎症性疾病的药物中。
Description
技术领域
本发明属于化合物合成领域，具体涉及一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用。
背景技术
据统计，脓毒血症是过去几十年中重症住院病人死亡案例最主要的原因之一。导致这一现象的主要原因是脓毒血症目前仍然没有起效快速的特效药，无法有效改善重症脓毒血症病人的炎症水平。近年来，表观遗传靶点溴结构域和超末端结构域(bromodomainand extraterminal，BET)蛋白家族在肿瘤及炎症治疗作为一个极其重要的靶点。BET蛋白家族包含4种亚型，分别是BRD2、BRD3、BRD4和BRDT,其中 BRD4相关的研究最为广泛。有报道称，BRD4的抑制可以降低NF-kB通路依赖的炎症因子的表达，主要有IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-12。同时，BRD4的抑制可以有效的改善LPS诱导的小鼠脓毒血症。在该理论基础及实验证据下，开发新型有效的BRD4 小分子抑制剂用于治疗脓毒血症成为一种可能。
自2010年BET蛋白家族的新型抑制剂及生物学功能一直处于火热的研究状态，但仍然没有一个小分子抑制剂被批准上市。其中一个重要原因是大多数BET蛋白家族抑制剂除了体内药效比较低意外，还伴有血小板减少及胃肠道副作用。专利申请 CN110003204A公开了一种BET蛋白抑制剂、其制备方法及用途，BET蛋白抑制剂化学式结构为
并经催化偶联反应制得，用于癌症、败血症、病毒感染、血管疾病、神经性疾病等的治疗。专利申请CN105518001A公开涉及BET蛋白抑制性的、特别是BRD4-抑制性的具有通式
的二氢喹喔啉酮类化合物和二氢吡啶并吡嗪酮类化合物，还涉及BET蛋白抑制剂在病毒感染、炎性疾病、动脉粥样硬化性疾病等方面的用途。BET蛋白抑制剂作为药物研发具有良好的应用前景，更多用于治疗BET结构域功能的疾病的药物，特别是BRD4的抑制的药物亟待开发。
发明内容
本发明的目的是提供一种嘧啶酮硫醚类化合物、其制备方法及其应用。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：
一种嘧啶酮硫醚类化合物，它具有式Ⅰ所示的结构，
其中，A选自＝CH和-C＝O，
当A为-C＝O时，R3选自烷基、氢和
当A为＝CH时，R3不存在；
Y选自S和NH；
R1选自氢、烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷氧基和烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
B选自
R2选自烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷氧基和烷硫醚基，或者至少一个R2与相邻的苯基共同形成环D2，所述环D2为稠环芳基或稠杂芳基，所述环 D2上的一个或者多个氢独立地被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
m1和m2各自独立地选自0-5的自然数，i和n各自独立地选自1和2。
作为技术的进一步改进，R1选自氢、C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。
作为技术的进一步改进，R1选自氢、C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自氢、C1-C4的烷基、氧基、C1-C4的烷氧基、C3-C5的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。
作为技术的进一步改进，B为
,R2选自C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R2与相邻的苯基共同形成环D2，所述环D2为稠环芳基或稠杂芳基，所述环D2上的一个或者多个氢独立地被选自C1-C4的烷基、氧基、C1-C4 的烷氧基、C3-C6的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
m2选自0-5的自然数。
本发明中嘧啶酮硫醚类化合物的制备可采用行业内现有的方法，例如：采用两步合成法：
一、采用胍类化合物的取代生产其盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐等取代物；
二、所述取代物与C3化合物发生N-C环化生成嘧啶环或者取代物与苯甲醛类化合物、腈基酯类化合物发生N-C环化生成嘧啶酮环；嘧啶酮环取代制得嘧啶化合物。
本发明还提供一种所述化合物在制备药物中的用途。本发明的通式化合物可直接作为预防和/或治疗炎症性疾病的药物；也可以作为中间体，发生进一步反应生成本发明的另一种通式化合物；还可以作为药物的一种组分，和其他化合物配合，用来预防和治疗炎症性疾病。
作为技术的进一步改进，所述化合物用在制备预防和/或治疗炎症性疾病的药物中。
作为技术的进一步改进，所述化合物用在制备预防和/或治疗脓毒血症、结肠炎、心肌炎和肝纤维化疾病。
本发明相对现有技术具有突出的实质性特点和显著的进步，具体的说，本发明的通式化合物具有降低NF-kB通路依赖的炎症因子TNF-α和IL-6的表达，具有明显抑制LPS诱导巨噬细胞产生一氧化氮的优点，本发明的通式化合物还可以采用较短(两步)的合成路线，并且第二步可采用一锅煮的方法，快速及高产率的获得目标化合物。
附图说明
图1为本发明在动物实验中对TNF-α表达的抑制作用结果图。
图2为本发明在动物实验中对IL-6表达的抑制作用结果图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式，对本发明的技术方案做进一步的详细描述，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照行业现有方法和条件实施。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-300核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用MS液质联用仪(生产商：Agilent，MS型号：6110/6120Quadrupole MS)。HRMS使用Aglient 6230。
薄层层析硅胶板使用青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。OTX-015购自南京三舒生物科技有限公司，其他本发明公开的起始原料可以按照本领域已知的方法来合成，或者来自市售产品。
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气气氛或氮气气氛下进行。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例1-35的反应路线为下式，起始物、中间体及产物见表1
其中X为S或者NH。
表1
实施例1
2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-4-苯基-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末189mg,收率为53.22％。
产品表征结果如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.84–7.75(m,2H),7.68–7.60(m,1H),7.50(dq,J ＝5.9,3.2,2.6Hz,4H),7.36–7.26(m,2H),4.42(s,2H),3.96(s,1H).HRMS(ESI):calcd forC18H11ClN3OS[M-H]+352.03168,found 352.03094.
实施例2
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末160mg,收率为41.53％。
产品表征结果如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.61–7.48(m,3H),7.45(dd,J＝7.6,1.8Hz,1H), 7.40–7.30(m,2H),7.25(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(t,J＝7.4Hz,1H),4.56(s,2H),3.87(s, 3H).HRMS(ESI):calcd for C19H15ClN3O2S[M+H]+384.04953,found 384.0585.
实施例3
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(3-甲氧基苯基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末163mg，收率42.31％。
产品表征结果如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.60(dd,J＝7.3,2.0Hz,1H),7.57–7.53(m,2H), 7.53–7.48(m,2H),7.39–7.28(m,2H),7.23(dt,J＝5.9,2.7Hz,1H),4.66(s,2H),3.84 (s,3H).
实施例4
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(4-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末184mg，收率47.76％。
产品表征结果如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.06–8.02(m,2H),7.60(dd,J＝7.2,2.1Hz,1H), 7.54(dd,J＝7.5,1.6Hz,1H),7.40–7.30(m,2H),7.19–7.14(m,2H),4.68(s,2H),3.90 (s,3H).
实施例5
2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-4-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到灰色粉末(213mg，收率48.47％)。
产品表征结果如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.15–8.07(m,2H),7.67–7.57 (m,3H),7.54(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.35(dtd,J＝16.2,7.4,1.7Hz,2H),4.66(s,2H).
实施例6
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(2，3-二甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(235mg，56.58％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.52(ddd,J＝15.6,7.5,1.8Hz,2H),7.39–7.19(m,4H),6.98(dd,J＝6.6,2.7Hz,1H),4.52(s,2H),3.90(s,3H),3.73(s,3H).
实施例7
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(2，5-二甲氧基苯基)-6–氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(218mg，52.48％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.54(ddd,J＝20.9,7.6,1.9Hz,2H),7.33(dtd,J＝18.0,7.4,1.8Hz,2H),7.22–7.08(m,2H),7.01(d,J＝2.8Hz,1H),4.55(s,2H),3.81(s,3H),3.77(s,3H).
实施例8
3-(2-((2-氯苄基)硫代)-5-氰基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4–基)-N-甲基苯甲酰胺
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(218mg，52.48％)。
产物结构表征如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.60(d,J＝4.8Hz,1H),8.32(t, J＝1.8Hz,1H),8.04–7.94(m,2H),7.68–7.58(m,2H),7.54–7.46(m,1H),7.38–7.29 (m,2H),4.52(s,2H),3.96(s,1H),2.84(d,J＝4.4Hz,3H).
实施例9
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(3，5-二甲氧基苯基)-6–氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(236mg，56.82％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.61(d,J＝7.4Hz,1H),7.53(d,J＝7.6Hz,1H), 7.34(p,J＝7.3Hz,2H),7.16–7.06(m,2H),6.78(s,1H),3.83(s,6H).
实施例10
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(3，4-二甲氧基苯基)-6–氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(248mg，59.71％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.71(s,1H),7.61(s,2H),7.53(s,1H),7.35(s,2H),7.20(s,1H),4.69(s,2H),3.89(s,3H),3.81(s,3H).
实施例11
2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(239mg，53.65％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.65(dd,J＝5.8,3.6Hz,1H),7.52–7.44(m,1H), 7.31(dd,J＝5.9,3.5Hz,2H),7.14(s,2H),4.42(s,2H),3.82(s,6H),3.74(s,3H).
实施例12
2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-4-(2，3，4-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(227mg，50.95％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.56(ddd,J＝15.8,7.6,1.8Hz,2H),7.36(dtd,J＝16.5,7.4,1.6Hz,2H),7.24(d,J＝8.7Hz,1H),7.02(d,J＝8.8Hz,1H),4.58(s,2H),3.93(s,3H),3.84(s,3H),3.83(s,3H).
实施例13
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(218mg，48.29％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.71(d,J＝2.1Hz,1H),7.62(ddd,J＝7.3,5.7,2.2 Hz,2H),7.56–7.51(m,1H),7.43–7.31(m,3H),7.28(d,J＝5.5Hz,1H),4.68(s,2H), 3.89(s,3H).
实施例14
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(4-甲氧基-3-甲基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(229mg，57.35％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.93(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.77(d,J＝2.3Hz, 1H),7.57(ddd,J＝20.3,7.3,1.9Hz,2H),7.35(pd,J＝7.4,1.8Hz,2H),7.15(d,J＝8.7 Hz,1H),4.66(s,2H),3.92(s,3H),2.24(d,J＝2.7Hz,3H).
实施例15
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(249mg，57.98％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.70(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.64–7.48(m,3H), 7.34(pd,J＝7.4,1.8Hz,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,1H),4.67(s,2H),4.02(q,J＝6.9Hz, 2H),3.89(s,3H),1.37(t,J＝6.9Hz,3H).
实施例16
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(4-乙氧基-3-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(269mg，62.64％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.77(s,1H),7.70(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.62(dt, J＝4.2,2.1Hz,2H),7.54(dd,J＝7.5,1.7Hz,1H),7.35(pd,J＝7.4,1.8Hz,2H),7.17(d, J＝8.5Hz,1H),4.68(s,2H),4.16(q,J＝6.9Hz,2H),3.81(s,3H),1.40(t,J＝6.9Hz, 3H).
实施例17
2-(2-氯苄基)硫代)-4-(3，4-二乙氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(254mg，57.27％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.70(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.58(dtd,J＝14.8,7.4,1.9Hz,3H),7.42–7.30(m,2H),7.19(dd,J＝7.5,4.4Hz,1H),4.69(s,2H),4.17(q,J＝7.0Hz,2H),4.09–4.01(m,2H),1.41(d,J＝6.9Hz,3H),1.37(d,J＝6.9Hz,3H).
实施例18
4-(2-((2-氯苄基)硫代)-5-氰基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-基)-2-甲氧基苯甲酸甲酯
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(243mg，54.79％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.33(dd,J＝7.0,2.4Hz,1H),8.23(dd,J＝8.8,2.6 Hz,1H),7.62(dd,J＝7.2,2.2Hz,1H),7.53(dd,J＝7.6,1.7Hz,1H),7.46–7.29(m,3H), 4.66(s,2H),3.96(d,J＝2.3Hz,3H),3.86(s,3H).
实施例19
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(2，3-二氢苯并[b][1，4]二恶英-6–基)-6- 氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(239mg，57.82％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.69–7.52(m,4H),7.35(p,J＝6.7Hz,2H),7.08(d, J＝9.2Hz,1H),4.66(s,2H),4.36(q,J＝5.2Hz,4H).
实施例20
4-(苯并[d][1,3]二恶醇-5–基)-2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到白色粉末(256mg，64.12％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.58(ddd,J＝7.4,5.9,2.1Hz,2H),7.53–7.43(m, 2H),7.31(pd,J＝7.4,1.8Hz,2H),7.11(d,J＝8.2Hz,1H),6.16(s,2H),4.63(s,2H).
实施例21
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(3-羟基-4,5-二甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(247mg，57.2％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),7.63(dd,J＝7.0,2.2Hz,1H),7.54(dd, J＝7.5,1.8Hz,1H),7.35(pd,J＝7.4,1.9Hz,2H),7.24(d,J＝2.1Hz,1H),7.15(d,J＝2.2Hz,1H),4.67(s,2H),3.82(s,3H),3.80(s,3H).
实施例22
4-(3-氯-4，5-二甲氧基苯基)-2-((2-氯苄基)硫代)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(241mg，53.56％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.62(p,J＝2.7,2.3Hz,2H),7.59(d,J＝2.1Hz,1H),7.55–7.51(m,1H),7.35(tt,J＝7.4,5.5Hz,2H),4.65(s,2H),3.90(s,3H),3.89(s,3H).
实施例23
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(3-(环丙基甲氧基)-4-甲氧基苯基)-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.98g，Y＝79.5％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(251mg，55.09％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.70(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.64–7.50(m,3H), 7.42–7.28(m,2H),7.19(dd,J＝8.6,3.8Hz,1H),4.69(s,2H),3.91(s,3H),3.85(d,J＝ 6.9Hz,2H),1.30(dp,J＝12.6,4.7,4.0Hz,1H),0.61(dt,J＝7.9,3.0Hz,2H),0.35(dd,J ＝9.6,4.8Hz,2H).
实施例24
2-((2-氯苯乙基)硫代)-4-(3,4-二甲氧基苯基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-腈
将3.416mmol起始化合物、3.105mmol卤代物和10ml乙醇加入到50ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(0.57g，Y＝84.6％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(193mg，47.6％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,)δ7.73(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.63(d,J＝2.2Hz,1H),7.41(tt,J＝6.1,3.2Hz,2H),7.34–7.25(m,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,1H),3.90(s,3H),3.78(s, 3H),3.66–3.52(m,2H),3.19(t,J＝7.4Hz,2H).
实施例25
2-(苄胺基)-6–氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将3.416mmol起始化合物、3.105mmol卤代物和10ml乙醇加入到50ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(0.35g，Y＝61.0％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(138mg，32.16％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.82(s,1H),7.58(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.44(s,1H),7.41–7.33(m,4H),7.32–7.25(m,1H),7.10(d,J＝8.6Hz,1H),4.64(d,J＝6.0Hz, 2H),3.85(s,3H),3.77(d,J＝6.0Hz,3H).
实施例26
6-氧代-2-((嘧啶-2-亚甲基)硫)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.3g，Y＝68.1％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(241mg，50.37％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.81(d,J＝5.2Hz,2H),7.40(d,J＝25.6Hz,3H), 4.85(s,2H),3.86(s,6H),3.79(s,3H).
实施例27
2-((2-甲基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.9g，Y＝73.3％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(246mg，52.90％)。
产物结构表征如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.43(d,J＝6.8Hz,1H),7.35(s,2H),7.26–7.21(m,2H),7.21–7.12(m,1H),4.61(s,2H),3.83(s,6H),3.79(s,3H),2.38 (s,3H).
实施例28
6-氧代-2-((2-(三氟甲基)苯硫基)-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(5.8g，Y＝69.4％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(213mg，50.74％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝7.9Hz,2H),7.70(t,J＝7.5Hz,1H), 7.57(t,J＝7.7Hz,1H),7.31(s,2H),4.79(s,2H),3.79(d,J＝3.8Hz,9H).
实施例29
2-((2-硝基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶 -5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(5.4g，Y＝70.6％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(227mg，51.98％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝8.1Hz,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H), 7.72(t,J＝7.5Hz,1H),7.60(t,J＝7.8Hz,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,2H),4.90(s,2H),3.85 (s,6H),3.80(d,J＝2.6Hz,3H).
实施例30
2-((2-氟苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(5.4g，Y＝79.3％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(221mg，47.94％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.56(td,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.38(dt,J＝8.8,2.1 Hz,1H),7.34(s,2H),7.29–7.23(m,1H),7.22–7.15(m,1H),4.64(s,2H),3.84(s,6H), 3.79(s,3H).
实施例31
2-((3-甲氧苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(5.1g，Y＝70.9％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(239mg，53.18％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.37–7.22(m,3H),7.07–7.00(m,2H),6.87–6.80 (m,1H),4.57(s,2H),3.84(s,6H),3.79(s,3H),3.65(s,3H).
实施例32
2-((4-甲基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.7g，Y＝70.3％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(226mg，48.60％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.35(d,J＝7.0Hz,4H),7.15(d,J＝7.9Hz,2H), 4.56(s,2H),3.83(s,6H),3.79(s,3H),2.29(s,3H).
实施例33
2-((3-甲基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5-甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.9g，Y＝73.2％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(241mg，51.82％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.45(s,2H),7.27–7.21(m,3H),7.15(d,J＝7.4Hz,1H),4.60(s,2H),4.00(s,3H),3.94(s,6H),2.36(s,3H).
实施例34
2-((2,3-二甲基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1，6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.7g，Y＝65.9％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(234mg，51.86％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ7.47(s,2H),7.26(d,J＝7.7Hz,1H),7.18(d,J＝7.4Hz,1H),7.09(t,J＝7.5Hz,1H),4.67(s,2H),4.00(s,3H),3.96(s,6H),2.35(s,6H).
实施例35
2-((3,5-二甲基苄基)硫代)-6-氧代-4-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,6-二氢嘧啶-5- 甲腈
将34.16mmol起始化合物、31.05mmol卤代物和60ml乙醇加入到250ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到85℃回流4h。TLC检测反应完全结束，将圆底烧瓶移出油浴并缓慢降温至室温，在冰浴中缓慢搅拌2h，析出大量白色结晶粉末，过滤并用冰乙醇研洗滤饼，得到目标产物，白色粉末(4.9g，Y＝68.9％).
将中间体(1.0mmol)、苯甲醛类化合物(1.0mmol)、腈基乙酸乙酯(106.51mg，1.0mmol)、氢氧化钠(44.16mg，1,1mmol)和10ml甲醇加入到25ml圆底烧瓶中，氮气保护，加热到70℃反应5h。TLC检测反应完全结束，待反应冷却到室温后，减压浓缩除去溶剂，经柱层析得到黄色粉末(251mg，55.62％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.36(s,2H),7.06(s,2H),6.91(s,1H),4.51(s,2H),3.84(s,6H),3.79(s,3H),2.21(s,6H).
实施例36
2-((2-氯苄基)硫代)-4-(3,4-二甲氧基苯基)-1-甲基-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-甲腈，反应路线如下式：
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.73(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.68–7.51(m,3H), 7.36(dtd,J＝16.4,7.4,1.7Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,1H),4.78(s,2H),3.90(s,3H), 3.79(s,3H),3.50(s,3H).
实施例37
1-(2-氯苄基)-2-((2-氯苄基)硫代)-4-(3,4-二甲氧基苯基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-5-甲腈，反应路线如下式：
将反应物(200mg，483.24umol)加入到50ml圆底烧瓶中，加入10ml DMF作为反应溶剂，冰浴冷却至0℃，缓慢加入氢化钠(17.39mg，724.85umol)，反应1h后，加入临氯苄氯(531.56umol)，将反应移至室温继续反应9h后，TLC检测反应完全结束。加入等体积的水和乙酸乙酯分液萃取三次，合并有机层并与饱和氯化钠分液萃取，有机层用无水硫酸钠干燥30min后，浓缩除去溶剂，残留物经柱层析后得到白色粉末 (127mg，48.81％)。
产物结构表征如下：
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.84(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.73(d,J＝2.1Hz, 1H),7.66–7.49(m,4H),7.48–7.41(m,2H),7.30(qd,J＝7.3,1.8Hz,2H),7.10(d,J＝ 8.6Hz,1H),5.55(s,2H),4.63(s,2H),3.86(s,6H).
实施例38
反应路线如下式：
将反应物(200mg，724.85uM)加入到50ml圆底烧瓶中，加入10ml三氯氧磷作为反应溶剂，在氮气保护下100℃回流反应3h后。TLC检测，原料基本完全反应，待反应完全冷却至室温后，减压浓缩除去溶剂。
将残留物溶于10ml甲醇中，加入催化量的10％钯碳(含55％的水)，在H2氛围下室温反应5h，反应完全结束。将反应液用硅藻土过滤，以甲醇洗涤滤饼，减压浓缩除去甲醇，经柱层析得到黄色粉末(101mg，35.02％)。
产物结构表征如下：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.12(s,1H),7.73(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.66– 7.60(m,2H),7.51(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),7.32(tt,J＝7.4,5.5Hz,2H),7.21(d,J＝8.5 Hz,1H),4.65(s,2H),3.88(s,3H),3.82(s,3H).
1.各实施例对BRD4的抑制率测试
以竞争性荧光偏振(FP)测定评估化合物对BRD4(1)和BRD4(2)的抑制活性。为了建立FP检测，我们设计并合成了一种基于(+)-JQ1(MedChemExpress(MCE))的FAM(MedChemExpress(MCE))标记的荧光探针。通过在测定hepes(安耐吉化学)缓冲液中连续稀释，将实施例化合物(10mM在DMSO(国药集团化学试剂有限公司)母液中) 制备成各种浓度的溶液。BRD4(1)和BRD4(2)以及荧光探针(FAM-(+)-JQ1)在测定缓冲液中稀释至所需浓度。该实验在384孔黑色平底聚苯乙烯板(康宁编号3575)中进行。对于每个测定，等体积的稀释化合物(20uL)、BRD4(1)(20uL,A nM final)或BRD4 (2)(20uL,A nM final)和FAM-(+)-JQ1(20uL,A nM final)连续添加到孔中。将板盖上并在室温下摇动30分钟，使用SpectraMax多模式酶标仪(Molecular Devices)检测FP值，激发和发射波长分别为485和535nm。对于每个测定，空白对照(仅 FAM-(+)-JQ1)的FP值记录为Pmin；阴性对照(FAM-(+)-JQ1和蛋白质)的FP值记为Pmax，测试孔(化合物、FAM-(+)-JQ1和蛋白质)的FP值记为Ptest。各浓度点化合物的抑制率计算公式如下：抑制率(％)＝[1-(Ptest-Pmin)/(Pmax-Pmin)]×100％。 Ki值计算根据文献X.Ran,Y.Zhao,L.Liu,L.Bai,C.Y.Yang,B.Zhou,J.L. Meagher,K.Chinnaswamy,J.A.Stuckey,S.Wang,Structure-Based Design of gamma-CarbolineAnalogues as Potent and Specific BET Bromodomain Inhibitors,J Med Chem,58(2015)4927-4939.的方法计算。
1.)5-FAM-(+)-JQ1探针合成路线如下：
试剂与反应条件:(a)TFA,DCM,3h,r.t.；(b)PyBOP,DIPEA,4h,r.t.；(c)TFA,DCM,3h,r.t.；(d)HATU,DIPEA,DMF,6h,r.t.
步骤a:将(+)-JQ1(300mg,656.47uM)溶于10ml二氯甲烷(亚盛集团)中，在上述溶液中室温缓慢滴加974ul(20eq)三氟乙酸(安耐吉化学)，室温搅拌3h，然后用TLC反应完全。减压浓缩除去溶剂，得淡黄色油状物(262mg，99.6％)，无需进一步纯化，直接进入下一步。
步骤b:室温下将C1(266mg，0.66mmol)溶于无水二氯甲烷中，向上述溶液中加入pyBOP(379mg，0.73mmol)(安耐吉化学)和DIPEA(256mg，1.98mmol)(安耐吉化学)，室温下搅拌30分钟，然后加入C2(164mg),0.66mmol)加入到反应混合物中。在室温下继续搅拌4h后，通过TLC监测反应材料的完全反应。有机层加水和二氯甲烷萃取3次，合并有机层，用饱和NaCl萃取，有机层用无水硫酸钠干燥 30min，萃取浓缩除去溶剂，得通过柱色谱分离白色粉末C3(295mg，67.1％)。结构表征参数为1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.51(d,J＝8.8Hz,2H),7.45(d,J＝8.6 Hz,2H),6.81(t,J＝5.7Hz,1H),4.54(dd,J＝7.9,6.2Hz,1H),3.61–3.51(m,8H),3.48 (t,J＝5.8Hz,2H),3.41(t,J＝6.1Hz,2H),3.10(t,J＝5.9Hz,2H),3.06–2.98(m,1H), 2.62(s,3H),2.46–2.40(s,3H),1.68–1.62(s,3H),1.39(s,9H).
步骤c:室温下，将C3(295mg，0.44mmol)加入50ml圆底烧瓶中，加入10ml二氯甲烷作为反应溶剂，缓慢滴加2ml三氟乙酸，在3℃搅拌后用TLC监测原料反应。室温3h。减压除去溶剂，得到棕红色油状物(210mg)。无需进一步纯化，直接流延至下一步。
步骤d:在室温下，将C4(210mg，0.37mmol)加入到50ml圆底烧瓶中，然后加入7ml无水DMF(国药集团化学试剂有限公司)、HATU(154.7mg，0.41mmol)(安耐吉化学) 和DIPEA(144.5mg，1.1mmol)(安耐吉化学)，反应进行N2保护下搅拌30分钟，反应变为浅棕色混合物，然后加入5-FAM(139.2mg，0.37mmol)(MedChemExpress(MCE))，继续搅拌6小时。TLC监测原料的完全反应。有机层加水和二氯甲烷萃取3次，合并有机层，用饱和氯化钠(西陇科学)萃取，有机层用无水硫酸钠干燥30min，萃取浓缩除去溶剂，得通过柱色谱分离淡黄色粉末5-FAM-(+)-JQ1(267mg,81.4％)。化合物表征参数为1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.21(s,1H),8.95(t,J＝5.4Hz,1H),8.49(s,1H),8.35(s,1H),8.28 (dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),7.56–7.41(m,5H),7.39(d,J＝8.1Hz,1H),6.72(d,J＝2.2Hz,2H),6.61(d, J＝8.6Hz,2H),6.56(dd,J＝8.8,2.2Hz,2H),4.53(dd,J＝7.8,6.3Hz,1H),3.62–3.58(m,6H),3.50 (q,J＝5.7,4.9Hz,4H),3.27(t,J＝7.2Hz,4H),2.62(s,3H),2.43(s,3H),1.63(s,3H).
2.)各实施例对BRD4(1)和BRD4(2)的抑制效果见下表：
2.药理活性评价
DMEM培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司)中培养RAW264.7细胞：将细胞浓度为5×104细胞/ml的细胞接种于96孔板，每孔200μl，在37℃，5％CO2条件下培养24h，然后弃培养基。。
实验设置设空白对照组(加入2μl培养基)、LPS模型组(加入2μl培养基)、 OTX-015(南京三舒生物科技有限公司)阳性对照组(加入2uL 500uM或者1mM OTX-015 的DMSO溶液)和待测实施例组(加入2uL 500uM或者1mM待测实施例的DMSO溶液)，每个浓度设置3个复孔，每孔加入DMEM培养基197μL(无血清)。给药2h后，空白对照组加入1uL DMEM培养基，LPS模型组、OTX-015阳性对照组和待测实施例组分别加入1ulLPS的PBS溶液(100ug/ml)至0.5ug/ml。继续培养22h后，离心细胞，称取上清液，用Griess试剂(来源：碧云天生物技术)测定NO含量。抑制率＝(模型组 NO浓度-给药组NO浓度)/(模型组NO浓度-对照组NO浓度)×100％。
各实施例抑制LPS诱导巨噬细胞RAW264.7产生NO的活性结果见下表：
3.本发明在动物体内抑制IL-6和TNF-α表达的评价
将雄性、6-8周的C57BL/6小鼠在标准条件(12/12h光/暗循环，22±3℃，相对湿度40％)下维持3天，并自由饮食和饮水。三天后，将小鼠随机分为五组，每组5 只小鼠，实验方案如下：空白对照组连续三天腹腔注射生理盐水，LPS模型组连续三天腹腔注射生理盐水，OTX-015组连续三天腹腔注射10mg/kg OTX-015，实施例27低剂量组连续三天腹腔注射15mg/kg实施例27，实施例27高剂量组连续三天腹腔注射 30mg/kg实施例27。三天后，除空白对照组外，其余四组小鼠均腹腔注射15mg/kg LPS (Sigma-Aldrich,St.Louis,no.L4130)，12h后取每只小鼠血样进行分析并处死小鼠。
使小鼠血样在28℃下凝固30分钟，然后通过5000r/min离心速度离心30分钟来分离血清。使用ELISA试剂盒(来源：BOSTER，TNF-α，IL-6)检测血清样品中IL-6 和TNF-α的表达，检测方法按照Elisa检测标准流程，实施例27制得的受试药物对 IL-6和TNF-α的表达均有抑制作用，结果见图1和图2所示。
最后应当说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制；尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解，依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换；而不脱离本发明技术方案的精神，其均应涵盖在本发明请求保护的技术方案范围当中。
Claims (7)
1.一种嘧啶酮硫醚类化合物，其特征在于，它具有式Ⅰ所示的结构，
式Ⅰ，
其中，A选自=CH和-C=O；
当A为-C=O时，R3选自烷基、氢和
；当A为=CH时，R3不存在；
Y选自S和NH；
R1选自氢、烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷氧基和烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
B选自 
和
；
R2选自烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、烷氧基和烷硫醚基，或者至少一个R2与相邻的苯基共同形成环D2，所述环D2为稠环芳基或稠杂芳基，所述环D2上的一个或者多个氢独立地被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
m1和m2各自独立地选自0-5的自然数，i和n各自独立地选自1和2。
2.根据权利要求1所述的嘧啶酮硫醚类化合物，其特征在于，R1选自氢、C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自烷基、羟基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。
3.根据权利要求2所述的嘧啶酮硫醚类化合物，其特征在于，R1选自氢、C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R1与相邻的苯基共同形成环C1，所述环C1为稠环芳基或稠杂芳基，其中所述的环C1上氢原子任选被选自氢、C1-C4的烷基、羟基、C1-C4的烷氧基、C3-C6的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代。
4.根据权利要求1所述的嘧啶酮硫醚类化合物，其特征在于，B 为
,R2选自C1-C4的烷基、卤素、羟基、巯基、氨基、羧基、硝基、氰基、C1-C4的烷氧基和C1-C4的烷硫醚基，或者至少一个R2与相邻的苯基共同形成环D2，所述环D2为稠环芳基或稠杂芳基，所述环D2上的一个或者多个氢独立地被选自C1-C4的烷基、氧基、C1-C4的烷氧基、C3-C6的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
m2选自0-5的自然数。
5.一种根据权利要求1-4任一项所述化合物在制备药物中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述化合物用在制备预防和/或治疗炎症性疾病的药物中。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述化合物用在制备预防和/或治疗脓毒血症、结肠炎、心肌炎和肝纤维化的药物中。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210068611.4A CN114409603B (zh) | 2022-01-20 | 2022-01-20 | 一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210068611.4A CN114409603B (zh) | 2022-01-20 | 2022-01-20 | 一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114409603A true CN114409603A (zh) | 2022-04-29 |
| CN114409603B CN114409603B (zh) | 2023-11-07 |
Family
ID=81275178
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210068611.4A Active CN114409603B (zh) | 2022-01-20 | 2022-01-20 | 一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114409603B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20170232007A1 (en) * | 2015-11-13 | 2017-08-17 | Pietro Paolo Sanna | Methods and compositions for treating alcohol use disorders |
| CN107207483A (zh) * | 2014-08-29 | 2017-09-26 | Tes制药有限责任公司 | α‑氨基‑β‑羧基粘康酸半醛脱羧酶抑制剂 |
| CN109516984A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-26 | 郑州大学 | 一种2-巯基-5-氰基嘧啶类衍生物及其制备方法和应用 |
| WO2019084271A1 (en) * | 2017-10-25 | 2019-05-02 | Children's Medical Center Corporation | PAPD5 INHIBITORS AND METHODS OF USE |
-
2022
- 2022-01-20 CN CN202210068611.4A patent/CN114409603B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107207483A (zh) * | 2014-08-29 | 2017-09-26 | Tes制药有限责任公司 | α‑氨基‑β‑羧基粘康酸半醛脱羧酶抑制剂 |
| US20170232007A1 (en) * | 2015-11-13 | 2017-08-17 | Pietro Paolo Sanna | Methods and compositions for treating alcohol use disorders |
| WO2019084271A1 (en) * | 2017-10-25 | 2019-05-02 | Children's Medical Center Corporation | PAPD5 INHIBITORS AND METHODS OF USE |
| CN109516984A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-03-26 | 郑州大学 | 一种2-巯基-5-氰基嘧啶类衍生物及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| EBTEHAL S. AL-ABDULLAH等: ""Synthesis of novel 6-phenyl-2, 4-disubstituted pyrimidine-5-carbonitriles as potential antimicrobial agents"", 《EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 46, no. 9, pages 4642 - 4647, XP028278367, DOI: 10.1016/j.ejmech.2011.08.003 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114409603B (zh) | 2023-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2470190T3 (es) | Compuestos bic�clicos y sus usos como inhibidores duales de c-SRC/JAK | |
| JP5933746B2 (ja) | イミダゾリジンジオン系化合物およびその用途 | |
| CN110092745B (zh) | 一种含芳环的化合物及其应用 | |
| EP2917207A1 (en) | Therapeutic compounds and compositions and their use as pkm2 modulators | |
| JP2021176847A (ja) | 置換５員および６員複素環式化合物、その調製方法、薬剤の組み合わせおよびその使用 | |
| WO2004033435A1 (en) | Quinazolinone derivatives useful as anti-hyperalgesic agents | |
| CN111303121A (zh) | 含喹喔啉酮的4-苯氧基吡啶类化合物及其应用 | |
| JP7395807B2 (ja) | アミド類化合物の調製方法及びその医薬分野の使用 | |
| BR112020021664A2 (pt) | composto de formamida, método de preparação do mesmo e aplicação do mesmo | |
| CN112920176B (zh) | 可诱导prc2蛋白复合物核心亚基降解的双功能化合物和药物组合物及应用 | |
| JP7423655B2 (ja) | キノリル含有化合物、医薬組成物およびその使用 | |
| CN101314584A (zh) | HGF/c-Met信号通道抑制剂及其制备方法和用途 | |
| EP3760633B1 (en) | Oxazino-quinazoline and oxazino-quinazoline type compound, preparation method therefor, and uses thereof | |
| JP2002226479A (ja) | 新しいメタロプロテアーゼインヒビター、その製造方法及びこれらを含む薬剤組成物 | |
| CN114409603B (zh) | 一种嘧啶酮硫醚类化合物及其应用 | |
| MX2015002310A (es) | Nuevas amidas de fenil-piridina/pirazina para el tratamiento de cancer. | |
| CN115703761A (zh) | 作为wwp1抑制剂的化合物及其应用 | |
| JP2019520359A (ja) | ビアリール尿素誘導体またはそれらの塩、およびそれらの調製方法および使用 | |
| KR20180105926A (ko) | 퀴나졸린, 퀴놀린 유도체 및 egfr 키나제 억제제로서의 용도 | |
| KR20150079677A (ko) | 디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제 억제제로서의 신규 화합물 | |
| CN113929674B (zh) | 含1,4-二氢喹唑啉结构的化合物及其制备方法与应用 | |
| CN115572247B (zh) | 一类维生素k3衍生物及其医药用途 | |
| RU2240313C2 (ru) | Лекарственные средства для лечения злокачественных опухолей | |
| NL2029098B1 (en) | Substituted thiophene compounds as D-dopachrome tautomerase inhibitors | |
| CN114394934B (zh) | 吡唑苯甲酰胺类化合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |