CN114295592A - 一种藻类盐度耐受性的快速检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种藻类盐度耐受性的快速检测方法。本发明包括以下步骤：S1取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，照射不同时间，施加饱和脉冲，直到实际光合作用效率达到最大，得间隔时间；S2再次取测试藻，在上述间隔时间下，施加饱和脉冲，按照此间隔时间，不断施加饱和脉冲，直至实际光合作用效率达到稳定状态；S3再次取测试藻，调节盐度，按照步骤S2的方法，得在不同盐度新稳态下的实际光合作用效率；S4绘制测试藻的盐度耐受曲线，与初始状态下的实际光合作用效率相比，大于初始状态下的实际光合作用效率对应的盐度范围即为测试藻的盐度耐受范围。本发明实现了对测试藻的直接检测，操作方便，耗时短，成本低，适用于现场快速检测。
Description
技术领域
本发明属于分析检测方法的技术领域，特别是指一种藻类盐度耐受性的快速检测方法。
背景技术
盐度是重要的水环境因子之一，对盐度的适应是水生生物最基本的生理特点。不同水生生物均具有一定的盐度耐受性，从而分布于不同生态环境中。藻类等光合放氧生物是维持生态环境稳定的主要贡献者。当水中盐度变化超过藻类的耐受极限时，会直接影响生态环境的稳定性，从而改变生态环境的结构。
目前，确定藻类盐度耐受性的方法主要是培养法。将测试藻培养于不同的盐度条件下的水体中，通过测定其种群在数天内的增长情况，从而确定测试藻的盐度耐受性范围。这种测定藻类盐度耐受性的方法耗时长，工作量大，而且，需要专业的培养设备，成本高，不适用于现场快速检测。
发明内容
本发明的目的是提供一种藻类盐度耐受性的快速检测方法，旨在解决现有技术中测定藻类盐度耐受性的方法存在耗时长、工作量大以及成本高的问题。
为了解决上述技术问题，本发明的一种藻类盐度耐受性的快速检测方法主要是通过以下技术方案加以实现的：
本发明的一种藻类盐度耐受性的快速检测方法，包括以下步骤：
S1确定脉冲的间隔时间
a、取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射1min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
b、另取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在相同光强下照射2min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
c、以此类推，直到实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到最大值，即脉冲的间隔时间；
S2确定测试藻光合作用的初始状态
d、再次取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
e、继续在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，再次施加饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
f、重复步骤e若干次，直至测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态，得测试藻初始状态下的实际光合作用效率；
S3确定测试藻光合作用的新稳态
g、再次取测试藻，调节盐度，按照步骤S2的方法，测定盐度变化后测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，得测试藻新稳态下的实际光合作用效率；
h、重复步骤g若干次，得到测试藻在不同盐度的新稳态下的实际光合作用效率；
S4确定测试藻的盐度耐受范围
i、以步骤S3中的盐度以及步骤S2的初始盐度为横坐标，以步骤S3所得的测试藻新稳态下的实际光合作用效率以及步骤S2所得的初始状态下的实际光合作用效率为纵坐标，绘制实际光合作用效率随盐度变化曲线，并拟合，得测试藻的盐度耐受曲线；
j、与步骤S2中所得的测试藻初始状态下的实际光合作用效率相比，若新稳态下的实际光合作用效率大于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件有利于测试藻生长；若新稳态下的实际光合作用效率小于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件不利于测试藻生长；得测试藻的盐度耐受范围。
本发明的测试藻可以是实验室培养的藻，可以是野外生长的藻，将实验室培养的藻或野外生长的藻取样之后直接进行检测，实现了对测试藻的直接检测，不需要对其进行专业培养；本发明将取来的测试藻直接利用叶绿素荧光测定仪测定其光合作用效率，通过光合作用初始状态与光合作用新稳态的对比，快速确定了测试藻的适宜盐度，操作方便，工作量小，耗时短，效率高，成本低，可以确定藻类对盐度的适应性，用于藻类适宜盐度范围的快速确定，适用于现场快速检测藻类的适宜盐度范围；通常以新稳态下的实际光合作用效率不低于初始状态下的实际光合作用效率所对应的盐度范围为测试藻的最佳生长盐度范围。如果取样是来自实验室培养的藻，则在培养光强下照射；如果取样是来自野外生长的藻，则在采样光强下照射；这种光强的选择是为了更好地与测试藻的原始生长环境保持一致。
作为一种优选的实施方案，所述步骤g中，通过加入纯水或者氯化钠来调节盐度。盐度的调节是若干个高于测试藻原始生长盐度和若干个低于测试藻原始生长盐度，通过盐度的变化，绘制测试藻的盐度耐受曲线。加入纯水可以降低测试藻的盐度，加入氯化钠可以提高测试藻的盐度；纯水的使用，避免了水中其它离子，如硝酸根和磷酸根等，对叶绿素荧光测定的影响，提高了实验的准确度。
作为一种优选的实施方案，所述步骤g中，加入的氯化钠是氯化钠饱和溶液。事先配制好的氯化钠饱和溶液可以实现测试藻的盐度快速调整，盐度调整方便，进一步提高了实验效率。另外，氯化钠饱和溶液储存方便，浓度维持稳定，提高了使用的便利性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤h中，重复步骤g 15次。重复的次数越多，所得的测试藻的盐度耐受曲线越好，拟合度越高，可以更好地反映测试藻新稳态下的实际光合作用效率随盐度的变化趋势。
作为一种优选的实施方案，所述步骤i中，盐度分别为5‰、10‰、12‰、14‰、16‰、18‰、20‰、22‰、24‰、26‰、28‰、30‰、32‰、34‰、36‰、39‰。由于大部分海洋环境最高盐度为38‰，本发明中最大盐度调整为39‰，在高于测试藻原始生长盐度下取5个值；由于大部分海洋环境最低盐度为7‰左右，本发明中最低盐度调整为5‰，在低于测试藻原始生长盐度下取10个值；当然，还可以根据实际情况，变化盐度的具体数值。
作为一种优选的实施方案，所述步骤f中，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm的变化率不超过3％。当测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm在3％以内波动时，证明测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm已经达到稳定状态；否则，需要继续进行测定。通过实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm的波动可以快速的确定测试藻的实际光合作用效率的稳定状态，提高了操作的便利性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤f中，重复步骤e 3-5次。为了充分保证测试藻的实际光合作用效率达到了稳定状态，重复测定实际光合作用效率3-5次，从而提高实验的准确性和可靠性。
作为一种优选的实施方案，所述步骤c中，照射时间依次为4min、6min、8min。照射时间可以根据实际情况进行调整，如果实际光合作用效率变化大，说明实际光合作用效率与最大值之间还有很大差距，则照射时间可以适当延长；如果实际光合作用效率变化小，说明实际光合作用效率已经接近最大值，则照射时间可以适当缩短。本发明利用不同样品确定了测试藻实际光合作用效率的脉冲间隔时间，避免了饱和脉冲后的驰豫过程影响测定结果。
作为一种优选的实施方案，所述测试藻为东海原甲藻、中肋骨条藻、赤潮异弯藻、小球藻、叉鞭金藻中的任意一种。本发明的测试藻是浮游植物，这些浮游植物可以是海洋浮游植物，也可以是淡水浮游植物；这些浮游植物包括东海原甲藻、中肋骨条藻、赤潮异弯藻、小球藻和叉鞭金藻等等，东海原甲藻属于甲藻门，中肋骨条藻属于硅藻门，赤潮异弯藻属于黄藻门，小球藻属于绿藻门，叉鞭金藻属于金藻门。
作为一种优选的实施方案，所述步骤i中，y＝-0.0008x2+0.0499x-0.2931，R2＝0.865，其中，y为实际光合作用效率，x为盐度，R为决定系数。将实际光合作用效率随盐度的变化曲线进行拟合，消除系统误差，使其更具有代表性；本发明曲线方程的拟合度为0.865，拟合度好，曲线关系好。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的测试藻可以是实验室培养的藻，可以是野外生长的藻，将实验室培养的藻或野外生长的藻取样之后直接进行检测，实现了对测试藻的直接检测，不需要对其进行专业培养；本发明将取来的测试藻直接利用叶绿素荧光测定仪测定其光合作用效率，操作方便，工作量小，耗时短，效率高，成本低，可以确定藻类对盐度的适应性，用于藻类适宜盐度范围的快速确定，适用于现场快速检测藻类适宜盐度范围。
附图说明
图1为本发明一个实施例所得的测试藻的盐度耐受曲线图；
图2为图1中测试藻的最佳生长盐度范围确定图；
图3为常规培养法所得的测试藻的盐度耐受曲线图；
图4为图3中测试藻的最佳生长盐度范围确定图。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明的一种藻类盐度耐受性的快速检测方法，包括以下步骤：
S1确定脉冲的间隔时间
a、取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射1min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
b、另取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在相同光强下照射2min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
c、以此类推，直到实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到最大值，即脉冲的间隔时间；
S2确定测试藻光合作用的初始状态
d、再次取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
e、继续在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，再次施加饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
f、重复步骤e若干次，直至测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态，得测试藻初始状态下的实际光合作用效率；
S3确定测试藻光合作用的新稳态
g、再次取测试藻，调节盐度，按照步骤S2的方法，测定盐度变化后测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，得测试藻新稳态下的实际光合作用效率；
h、重复步骤g若干次，得到测试藻在不同盐度的新稳态下的实际光合作用效率；
S4确定测试藻的盐度耐受范围
i、以步骤S3中的盐度以及步骤S2的初始盐度为横坐标，以步骤S3所得的测试藻新稳态下的实际光合作用效率以及步骤S2所得的初始状态下的实际光合作用效率为纵坐标，绘制实际光合作用效率随盐度变化曲线，并拟合，得测试藻的盐度耐受曲线；
j、与步骤S2中所得的测试藻初始状态下的实际光合作用效率相比，若新稳态下的实际光合作用效率大于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件有利于测试藻生长；若新稳态下的实际光合作用效率小于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件不利于测试藻生长；得测试藻的盐度耐受范围。
优选地，所述步骤g中，通过加入纯水或者氯化钠来调节盐度。
进一步地，所述步骤g中，加入的氯化钠是氯化钠饱和溶液。
优选地，所述步骤h中，重复步骤g 15次。
进一步地，所述步骤i中，盐度分别为5‰、10‰、12‰、14‰、16‰、18‰、20‰、22‰、24‰、26‰、28‰、30‰、32‰、34‰、36‰、39‰。
优选地，所述步骤f中，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm的变化率不超过3％。
进一步地，所述步骤f中，重复步骤e 3-5次。
优选地，所述步骤c中，照射时间依次为4min、6min、8min。
优选地，所述测试藻为东海原甲藻、中肋骨条藻、赤潮异弯藻、小球藻、叉鞭金藻中的任意一种。
作为一种优选的实施方案，所述步骤i中，y＝-0.0008x2+0.0499x-0.2931，R2＝0.865，其中，y为实际光合作用效率，x为盐度，R为决定系数。
实施例一
本发明的一种藻类盐度耐受性的快速检测方法，包括以下步骤：
S1确定脉冲的间隔时间
a、取测试藻——东海原甲藻，测得测试藻的原始盐度为28‰，置于叶绿素荧光测定仪中，在104μmol/(m2·s)的光强下照射1min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
b、另取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在相同光强下照射2min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
c、以此类推，分别测定照射4min、6min和8min下的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，实验过程如表1所示；
由表1可以看出，当间隔时间为4min时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm已经达到最大值(0.44)，因此，脉冲的间隔时间为4min；
表1测试藻脉冲时间确定过程表
| 间隔时间(min) | F<sub>0</sub> | F<sub>m</sub> | 实际光合作用效率 |
| 1 | 858 | 1463 | 0.41 |
| 2 | 790 | 1381 | 0.43 |
| 4 | 775 | 1376 | 0.44 |
| 6 | 770 | 1372 | 0.44 |
| 8 | 765 | 1361 | 0.44 |
S2确定测试藻光合作用的初始状态
d、再次取测试藻，测得测试藻的原始盐度为28‰，置于叶绿素荧光测定仪中，在104μmol/(m2·s)的光强下4min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
e、继续在上述光强下照射4min，再次施加饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
f、重复步骤e 1次，依次测定实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，实验过程如表2所示；
表2测试藻初始状态实际光合作用效率的确定过程表
| 序号 | 间隔时间(min) | F<sub>0</sub> | F<sub>m</sub> | 实际光合作用效率 |
| 1 | 4 | 780 | 1397 | 0.44 |
| 2 | 4 | 783 | 1380 | 0.43 |
| 3 | 4 | 792 | 1421 | 0.44 |
由表2可以看出，进行3个间隔时间时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm已经达到稳定状态，此时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm的波动值为2.3％，2.3％<3.0％；因此，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态，测试藻初始状态下的实际光合作用效率为0.44；
S3确定测试藻光合作用的新稳态
g、再次取测试藻，加入饱和氯化钠溶液调节盐度，使其盐度调整至30‰，按照步骤S2的方法，测定盐度变化后测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，得测试藻新稳态下的实际光合作用效率为0.44；
h、重复步骤g，加入饱和氯化钠溶液调节盐度，使其盐度分别调整至32‰、34‰、36‰和39‰，加入纯水调节盐度，使其盐度分别调整至5％、10‰、12‰、14‰、16‰、18‰、20‰、22‰、24‰和26‰，得测试藻在不同盐度的新稳态下的实际光合作用效率如表3所示；
表3测试藻在不同盐度的新稳态下实际光合作用效率
| 序号 | 盐度(‰) | F<sub>0</sub> | F<sub>m</sub> | 实际光合作用效率 |
| 1 | 5 | 997 | 998 | 0.00 |
| 2 | 10 | 901 | 910 | 0.01 |
| 3 | 12 | 578 | 609 | 0.05 |
| 4 | 14 | 801 | 1211 | 0.34 |
| 5 | 16 | 798 | 1197 | 0.33 |
| 6 | 18 | 722 | 1162 | 0.38 |
| 7 | 20 | 820 | 1379 | 0.41 |
| 8 | 22 | 557 | 981 | 0.43 |
| 9 | 24 | 650 | 1123 | 0.42 |
| 10 | 26 | 820 | 1472 | 0.44 |
| 11 | 30 | 789 | 1399 | 0.44 |
| 12 | 32 | 762 | 1356 | 0.44 |
| 13 | 34 | 933 | 1691 | 0.45 |
| 14 | 36 | 879 | 1579 | 0.44 |
| 15 | 39 | 823 | 1387 | 0.41 |
S4确定测试藻的盐度耐受范围
i、以步骤S3中的盐度为横坐标，以步骤S3所得的测试藻新稳态下的实际光合作用效率为纵坐标，并补入步骤S2所得的测试藻在初始盐度28‰时的初始状态下的实际光合作用效率0.44，绘制实际光合作用效率随盐度变化曲线，并拟合，得测试藻的盐度耐受曲线；
由图1可以看出，测试藻的盐度耐受曲线的曲线方程为：y＝-0.0008x2+0.0499x-0.2931，R2＝0.865，其中，y为实际光合作用效率，x为盐度，R为决定系数；
j、在步骤i的纵坐标上找到步骤S2中所得的测试藻初始状态下的实际光合作用效率的点，通过该点画一条水平线；水平线与测试藻的盐度耐受曲线相交于两点，找出这两点在横坐标上对应的盐度，这两个盐度之间的范围即为测试藻的最佳生长盐度范围。
由图2可以看出，所得测试藻的最佳生长盐度范围为25-35‰。
对比例
将实施例一所用的测试藻——东海原甲藻按照常规培养法测定测试藻的盐度耐受范围。具体方法为：取实施例一所用的测试藻——东海原甲藻，分别置于10％、14‰、20‰、24‰、原始盐度(28‰)和39‰的盐度下培养，分别测定其在6天内的增长情况，实验结果如表4所示。
表4测试藻在常规培养条件下的生长情况
| 序号 | 盐度(‰) | 生长率(d<sup>-1</sup>) |
| 1 | 10 | 0.00 |
| 2 | 14 | 0.12 |
| 3 | 20 | 0.45 |
| 4 | 24 | 0.47 |
| 5 | 28 | 0.47 |
| 6 | 39 | 0.35 |
由表4可以看出，当盐度为10‰时，测试藻不能生长；在14‰的盐度下，培养至第6天时，其生长率为0.12d-1；这与28‰盐度下的测试藻相比，其生长率下降75％，表明在此盐度测试藻的生长受到极大抑制；该测试藻在20‰和24‰的盐度下，培养至第6天时，其生长率均与测试藻在28‰盐度下的生长率接近；这说明测试藻处于正常生长状态；测试藻在39‰的盐度下，培养至第6天时，其生长率为0.35d-1；这较测试藻在28‰盐度下的生长率略有下降，说明测试藻处于生长期，只是生长略慢。
将表4所得的数据，以盐度为横坐标，以测试藻的生长率为纵坐标，绘制曲线，拟合。由图3可以看出，基于生长率的测试藻盐度耐受曲线方程为y＝-0.0015x2+0.0857x-0.7288，拟合度为0.958。
过盐度为28‰(原始盐度)的生长率(0.47d-1)的点，做一条水平线，与盐度耐受曲线相交于两点，由图4可以看出，该测试藻的最佳生长盐度范围为24-33‰。
因此，本发明的方法所得的测试藻的最佳生长盐度范围与常规培养法所得的测试藻的最佳生长盐度范围基本一致。常规培养法需要测试藻进入指数增长期并确定其生长率，对东海原甲藻来说，需要6天，即144小时。然而，本发明所采用的方法，诊断一个盐度最多仅需0.5小时(步骤S3)，测定如表3中所示的15个盐度条件，全部完成仅需7.5小时，整个测试藻的最佳生长盐度范围的确定实验大约需要8.5小时。所以，本发明的藻类盐度耐受性的快速检测方法所用的时间远低于常规培养法所用的时间。
所以，与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的测试藻可以是实验室培养的藻，可以是野外生长的藻，将实验室培养的藻或野外生长的藻取样之后直接进行检测，实现了对测试藻的直接检测，不需要对其进行专业培养；本发明将取来的测试藻直接利用叶绿素荧光测定仪测定其光合作用效率，操作方便，工作量小，耗时短，效率高，成本低，可以确定藻类对盐度的适应性，用于藻类适宜盐度范围的快速确定，适用于现场快速检测藻类的适宜盐度范围。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1确定脉冲的间隔时间
a、取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射1min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
b、另取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在相同光强下照射2min，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
c、以此类推，直到实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到最大值，即脉冲的间隔时间；
S2确定测试藻光合作用的初始状态
d、再次取测试藻，置于叶绿素荧光测定仪中，在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，施加一次饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
e、继续在培养光强或采样光强下照射步骤S1所得的间隔时间，再次施加饱和脉冲，记录此时的最小荧光F0以及最大荧光Fm，计算实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm；
f、重复步骤e若干次，直至测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态，得测试藻初始状态下的实际光合作用效率；
S3确定测试藻光合作用的新稳态
g、再次取测试藻，调节盐度，按照步骤S2的方法，测定盐度变化后测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm，得测试藻新稳态下的实际光合作用效率；
h、重复步骤g若干次，得到测试藻在不同盐度的新稳态下的实际光合作用效率；
S4确定测试藻的盐度耐受范围
i、以步骤S3中的盐度以及步骤S2的初始盐度为横坐标，以步骤S3所得的测试藻新稳态下的实际光合作用效率以及步骤S2所得的初始状态下的实际光合作用效率为纵坐标，绘制实际光合作用效率随盐度变化曲线，并拟合，得测试藻的盐度耐受曲线；
j、与步骤S2中所得的测试藻初始状态下的实际光合作用效率相比，若新稳态下的实际光合作用效率大于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件有利于测试藻生长；若新稳态下的实际光合作用效率小于初始状态下的实际光合作用效率，则说明新盐度条件不利于测试藻生长；得测试藻的盐度耐受范围。
2.根据权利要求1所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤g中，通过加入纯水或者氯化钠来调节盐度。
3.根据权利要求2所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤g中，加入的氯化钠是氯化钠饱和溶液。
4.根据权利要求1所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤h中，重复步骤g 15次。
5.根据权利要求4所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤i中，盐度分别为5‰、10‰、12‰、14‰、16‰、18‰、20‰、22‰、24‰、26‰、28‰、30‰、32‰、34‰、36‰、39‰。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤f中，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm达到稳定状态时，测试藻的实际光合作用效率(Fm-F0)/Fm的变化率不超过3％。
7.根据权利要求6所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤f中，重复步骤e 3-5次。
8.根据权利要求1所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤c中，照射时间依次为4min、6min、8min。
9.根据权利要求1所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述测试藻为东海原甲藻、中肋骨条藻、赤潮异弯藻、小球藻、叉鞭金藻中的任意一种。
10.根据权利要求1所述的藻类盐度耐受性的快速检测方法，其特征在于：
所述步骤i中，测试藻的盐度耐受曲线的方程为y＝-0.0008x2+0.0499x-0.2931，R2＝0.865，其中，y为实际光合作用效率，x为盐度，R为决定系数。
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