CN114101314A - 一种强化黑麦草修复镉污染土壤的植物生长调节复合剂及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种强化黑麦草修复镉污染土壤的植物生长调节复合剂及其应用，植物生长调节复合剂的原料包括：多胺12.5~41份、水杨酸4~41份，硝普钠8~60份、亚硒酸钠0.8~10份、吐温50~75份和水100000~150000份。本发明突破传统单一外源植物生长调节物质，而是采用多胺、水杨酸、硝普钠和亚硒酸钠多种外源物质复配而成的植物生长调节复合剂，多种外源有机结合，不仅可以提高黑麦草对镉的富集速率，同时还增强其对其它生物与非生物胁迫的能力，解决了黑麦草生物量较小的问题。将本发明的植物生长调节复合剂用于强化黑麦草修复镉污染土壤上，并且充分利用黑麦草一年多次收割，收割间隔短的特点，缩短了植物修复镉污染土壤的时间，降低了土壤中镉污染的水平。

Description

一种强化黑麦草修复镉污染土壤的植物生长调节复合剂及其 应用

技术领域

本发明属于土壤污染修复技术领域，具体涉及一种强化黑麦草修复镉污染土壤的植物生长调节复合剂及其应用。

背景技术

镉进入土壤后难以被降解，并通过食物链在生物体内富集，长此以往会导致中毒、癌症、畸形、突变，严重影响了人类生产活动及地球生态系统的稳定。植物修复技术是一种经济有效的镉污染土壤污染修复技术，其依靠超富集植物强大的自身抗性机制，从土壤中提取或稳定重金属，达到污染治理的目的。

目前已发现的超富集植物大约有500多种，但植物修复技术在实践应用中的推广仍然受到诸多方面的制约，如植物生长速度缓慢、生长区域性和土壤中重金属生物利用度低等，其抗性机制也会受到植物本身对重金属胁迫的阈值限制，当胁迫超过这个阈值，植物修复的效率就会大大降低甚至失去修复功能。为了解决植物修复技术在实际应用中的局限性问题，学者们尝试了应用不同的措施使一些植物在一定的生物或非生物因子的刺激作用下，通过信号传导激活植物的天然防御机制，产生一种后天免疫功能，增强植物对重金属的耐性，从而实现提高植物修复的效率的目的。诱导因子因来源不同可分为生物因子和非生物因子来源不同可分为生物手段和非生物手段。生物手段包括利用病原弱毒株、非寄主专一性病原和来源于病原、植物或其他生物的诱导因子(寡糖类、蛋白类、糖蛋白类)；非生物因子包括物理因子(紫外线辐射、电动、机械损伤等)和化学因子(植物激素、茉莉酸、褪黑素等)。这些强化措施的研究逐渐成为近年来植物修复领域的热点。对解决植物修复技术在实践化、经济化过程中遇到的难题具有重大意义。

植物生长调节物质(PGRs)是一类与植物激素具有相似生理和生物学效应的物质的统称。多胺、水杨酸、NO等是一类普遍分布于生物体内的生长关键物质，广泛参与了植物的各种生理过程。上个世纪50年代，学者们就已注意到这些外源物质对植物生长的调节作用，并对其增强植物逆境抗性及其作用机理有了初步的了解。目前大量研究表明外源施用多胺(腐胺、亚精胺、精胺)、水杨酸、硝普钠可显著改善重金属胁迫给植物带来的负面效应，促进重金属在植物体内的富集转运。

近年来，对于镉污染土壤的修复的研究主要集中在水杨酸，如中国专利CN113105293A 公开了一种添加外源水杨酸的水稻幼苗培养液及应用，表面添加外源水杨酸使得水稻幼苗根细胞壁Cd分配比例增加，显著促进Cd在细胞壁的沉积。

然而，单一外源物质作用下，其强化作用往往因植物生长环境因素影响不尽如人意，导致在实际应用推广中具有一定的局限性。且其他外源物质如硝普钠、亚硒酸钠等在镉污染土壤的修复上鲜少报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中的不足，提供一种能够强化黑麦草修复镉污染土壤的植物生长调节复合剂，采用该植物生长调节复合剂能够提高黑麦草对镉的富集速率，加快镉污染地区的生态恢复。

本发明的第二目的在于提供上述所述的植物生长调节复合剂的应用。

本发明的第三目的在于提供一种强化黑麦草修复镉污染土壤的方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种植物生长调节复合剂，按重量份计，所述植物生长调节复合剂的原料包括：多胺 12.5～41份、水杨酸4～41份，硝普钠8～60份、亚硒酸钠0.8～10份、吐温50～75份和水100000～150000份。

本发明中，所述多胺在黑麦草修复镉污染土壤中的作用是与重金属离子发生螯合作用，调节阴阳离子平衡与生物大分子的合成、稳定蛋白和细胞膜结构。

本发明中，所述水杨酸在黑麦草修复镉污染土壤中的作用是可作为一种抗氧化剂直接清除性氧类物质。也可通过激活抗氧化反应来调节植物体内的氧化还原平衡，或通过增加H₂O₂的含量来触发信号转导网络，或者通过改变植物中钾、镁等矿质元素的含量和分布。

本发明中，所述硝普钠在黑麦草修复镉污染土壤中的作用是清除脂质自由基和超氧阴离子调节植物体内物质代谢，穿梭于细胞内外传递胁迫信息，加强植物对逆境的响应能力。

本发明中，所述亚硒酸钠在黑麦草修复镉污染土壤中的作用是增加根部细胞壁中果胶和半纤维素的含量，使细胞壁与重金属的结合能力增强，增加根中Se的保留率，抑制重金属向地上部转移；还可以刺激O^2-自发歧化成H₂O₂(没有SOD的催化)、直接清除O^2-和OH^-、调节抗氧化酶活性；同时也是谷胱甘肽过氧化物酶(GR)的重要组成成分，参与谷胱甘肽的合成。

所述吐温作为增稠剂使用，有助于外源调节物质吸附在黑麦草的叶片上。

进一步地，所述多胺为腐胺、亚精胺、精胺中的一种或多种的组合。

优选地，按重量份剂，所述植物生长调节复合剂的原料包括：腐胺9～20份、亚精胺1.5～15 份、精胺2～6份、水杨酸4～41份，硝普钠8～60份、亚硒酸钠0.8～10份、吐温50～75份和水 100000～150000份。进一步优选地，按重量份计，所述植物生长调节复合剂的原料包括：腐胺10～15份、亚精胺5～15份、精胺2～6份、水杨酸10～30份，硝普钠15～40份、亚硒酸钠5～10份、吐温50～75份和水100000～150000份。

本发明采取的第二技术方案：一种上述所述的植物生长调节复合剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)使多胺溶于水中，制成多胺溶液；

(2)使水杨酸溶于无水乙醇中，然后加入乙酸，再用水稀释，制成水杨酸溶液；

(3)使硝普钠溶于水中，制成硝普钠溶液；

(4)使亚硒酸钠溶于水中，制成亚硒酸钠溶液；

(5)使多胺溶液、水杨酸溶液、硝普钠溶液、亚硒酸钠溶液、吐温和水混合，制得所述植物复合调节剂。

本发明采取的第三技术方案：上述所述的植物生长调节复合剂在强化黑麦草修复镉污染土壤上的应用。

本发明采取的第四技术方案：一种强化黑麦草修复镉污染土壤的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)对镉污染土壤进行翻耕平整并施肥；

(2)将催芽后的黑麦草播撒于经步骤(1)处理后的所述镉污染土壤中；

(3)待黑麦草生长45～50天后进行收割，且收割前7～10天开始每天喷施上述所述的植物生长调节复合剂，直至收割前一天；

(4)经步骤(3)处理后的黑麦草继续进行生长直至生长出真叶后进行收割，且收割前 7～10天开始每天喷施上述所述的植物生长调节复合剂，直至收割前一天；

(5)经步骤(4)处理后的黑麦草继续生长40～60天，直至收获黑麦草，且收获前7～10 天开始喷施上述所述的植物生长调节复合剂，直至收获前一天。

进一步地，步骤(1)中，翻耕深度为20～22cm。

进一步地，步骤(2)中，所述黑麦草的播种量为20～35g/m²。

进一步地，步骤(3)中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为50～80mL/m²。

进一步地，步骤(3)中，收割的留茬高度为2～5cm。

进一步地，步骤(4)中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为25～40mL/m²。

进一步地，步骤(4)中，收割的留茬高度为2～5cm。

进一步地，步骤(5)中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为20～25mL/m²。

在一些优选且具体实施方式中，若当地年平均温度在5～30℃，则可重复步骤(4)4～6 次，再进行步骤(5)；否则，步骤(4)完成后直接进行步骤(5)的操作。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

本发明突破传统单一外源植物生长调节物质，而是采用多胺、水杨酸、硝普钠和亚硒酸钠多种外源物质复配而成的植物生长调节复合剂，多种外源有机结合，不仅可以提高黑麦草对镉的富集速率，同时还增强其对其它生物与非生物胁迫的能力，解决了黑麦草生物量较小的问题。

将本发明的植物生长调节复合剂用于强化黑麦草修复镉污染土壤上，并且还充分利用黑麦草一年多次收割，收割间隔短的特点，缩短了植物修复镉污染土壤的时间，减轻土壤中镉污染的水平。而多胺作为一种生物体内广泛存在的物质，若残留在环境中，也能够很快的被土壤中的微生物吸收利用。即使通过食物链进入人畜体内，其浓度也远远低于人畜本身所合成的浓度，所以对黑麦草外施植物生长调节复合剂，不仅加快了重金属污染地区的生态恢复，而且成本较低，安全可靠。

本发明修复镉污染土壤的方法还有效解决了目前土地重金属污染严重制约本地区的农牧业生产和社会经济发展等问题。

附图说明

图1为分别采用实施例1、对比例1～3的植物生长复合剂和采用蒸馏水对黑麦草喷施，镉地上部总迁移量对比示意图；

图2为分别采用实施例1、对比例1～3的植物生长复合剂和采用蒸馏水对黑麦草喷施，黑麦草富集系数变化对比示意图；

图3为分别采用实施例1、对比例1～3的植物生长复合剂和采用蒸馏水对黑麦草喷施，黑麦草转运系数变化对比示意图。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附后权利要求书限定的范围内。

实施例1

本实施例提供的植物生长调节复合剂，由以下组分构成：15份腐胺、亚精胺8份、精胺 4份、水杨酸20份、硝普钠30份、亚硒酸钠5份、吐温-80 60份、无水乙醇200份、乙酸 100份、水120000份。

本例的植物生长调节复合剂通过以下步骤制备得到：考虑到该复合剂中各组分的稳定性对其效果的影响，各组分由预先配制好的母液提供，现用现配，具体方法如下：

(1)称取腐胺15份、亚精胺8份、精胺4份溶于1200份蒸馏水中，搅拌混匀后，分装成100份，贮存于-20℃。

(2)称取水杨酸20份，溶于200份无水乙醇中，再加入100份乙酸提高稳定性，然后用蒸馏水稀释至水的总重量为1200份，分装成100份，避光密封贮存。

(3)避光条件下，精确称取硝普钠30份，溶于1200份蒸馏水中，分装成100份，避光密封2～8℃贮存。

(4)精确称取亚硒酸钠5份，溶于1200份蒸馏水中，分装成100份，0～8℃密封贮存。

(5)取各组分一份，混合搅拌均匀后，再用蒸馏水稀释25倍，同时加入0.6份吐温-80，即得植物生长调节复合剂。

对比例1

本对比例提供的植物生长调节复合剂，与实施例1的不同之处在于：组分中只包含15份腐胺、水杨酸20份、吐温-80 60份、无水乙醇200份、乙酸100份、水120000份。

其它同实施例1。

对比例2

本对比例提供的植物生长调节复合剂，与实施例1的不同之处在于：组分中只包含水杨酸20份、硝普钠30份、吐温-80 60份、无水乙醇200份、乙酸100份、水120000份。

其它同实施例1。

对比例3

本对比例提供的植物生长调节复合剂，与实施例1的不同之处在于：组分中只包含硝普钠30份、亚硒酸钠5份、吐温-80 60份、水120000份。

其它同实施例1。

实施例2

本实施例提供强化黑麦草修复镉污染土壤的方法，具体包括以下步骤：

(1)整地施肥：将要进行修复的地面进行平整翻耕并施肥，翻耕深度为20～22cm，施用黑麦草绿肥20t/hm²，过磷酸钙40kg/亩，磷酸二铵25kg/亩。

(2)进行播种：冬牧70黑麦草种子经消毒、浸种、催芽处理后。在待修复土壤，按幅宽1m筑垄，垄间距约0.3～0.5m，垄高8～10cm，垄面平整后一般播深为5厘米，具体深度还要视墒情土质灵活掌握，其变幅不宜过大播种量一般每亩播种7.5～10kg。按行距为0.2～0.3m划播种沟，播种沟宽0.1m左右，播种沟深4～6cm，将黑麦草种子采用条播的方式播撒在播种沟内，播种量为每亩2～3kg，播种后播种沟面覆土2～3cm。

(3)田间管理：生长45天后开始收割，收割前10天开始喷施实施例1的植物生长调节复合剂，直至收割前一天，留茬高度为2cm。继续生长至90天后再次收割，收割前10天开始喷施实施例1的植物生长调节复合剂，直至收割前一天，留茬高度为3cm。再生长至135 天全部收获，收获前10天开始喷施实施例1的植物生长调节复合剂，直至收获前一天。

(4)收割：将整株植物收获，进行镉的回收提取，地上部可制作成青贮用于牲畜的饲养或绿肥。

上述绿肥的制作方法：采集生长至开花期的新鲜黑麦草，拣去杂质，用水洗净浮尘和泥土，剪切成2～4cm大小，按鲜草：水＝1：10的比例浸泡在自来水中即可，发酵时间为12～15 天。发酵完毕后，将发酵产物按10cm左右厚度平铺，晾干，使之含水量达到40±5％，用不同目的筛子过筛，按计量包装，成品在通风干燥处贮存。

应用实施例

(1)试验地点

供试土壤取自苏州科技大学东门附近的农田。表土(0～20cm)，其性质如下：土壤采自苏州科技大学东门附近农田，取0～20cm的表层土壤，土壤性质如下：土壤pH 6.16，阳离子交换量(CEC)17.04cmol·kg^-1，有机质含量40.05g·kg^-1，全N 0.77g·kg^-1，有效P10.32mg·kg^-1，速效K 71.93mg·kg^-1。自然风干后，先初步剔除其中粗杂质，过100目筛后备用。测得混合后土壤Cd的背景值为0.27mg·kg^-1。用分析纯的Cd(NO₃)₂来制备重金属盐溶液，拌入风干的土壤中并充分混匀，静置钝化30d后作为试验土壤，土壤中Cd的最终浓度为99.71±0.31 mg·kg^-1。

(2)试验设计

采用盆栽试验，设置5个处理组：喷施蒸馏水(对照组)、分别喷施实施例1和对比例1～3的植物生长调节复合剂，每组3个平行，不同阶段的喷施量见表1。每盆称取3kg土样(风干土)，加入自来水至田间持水量，过夜后开始播种。每盆播种饱满一致的冬牧70黑麦草种子20粒，播种后盖土2cm。出苗后留取12株长势一致的幼苗，之后的生长过程在植物温室中进行，定期浇水。生长45天后开始收割，收割前10天开始喷施实施例1、对比例1～3的植物生长调节复合剂，直至收割前一天，留茬高度为2.5cm。继续生长至90天后再次收割，收割前10天开始喷施实施例1、对比例1～3的植物生长调节复合剂，直至收割前一天，留茬高度为3cm。再生长至135天全部收获，收获前10天开始喷施实施例1的植物生长调节复合剂，直至收获前一天。每次收割所获得黑麦草地上部分用于测定镉含量，收获后取出植株样品进行检测，抖落根系上附着的土壤，然后清洗植株根系，浸泡于20mmol·L^-1EDTA-Na溶液中30分钟，再用去离子水洗净以去除螯合附着在根系表面的Cd²⁺，洗净后的样品用于镉积累特征参数的测定。

检测方法

1、黑麦草生长参数的测定

处理结束后，把植株按照地上、地下部分别称重得到各部分生物量，生物量为单株植物收割时植物的鲜重与移栽时植物幼苗的鲜重的差值，并测量每株株长、根长。

2、黑麦草镉积累特性相关参数的测定与计算

将地上部、地下部分别置于烘箱中115℃杀青30min，80℃烘干至恒重磨碎过筛。

采用湿灰化法进行植物样品处理，取三个重复样。准确称取0.2g已经处理好的的植物样品于50mL锥形瓶中，加入10mL浓硝酸，摇匀后，静置过夜。加3mL60％高氯酸，置于电热板上，在通风橱低温加热至微沸(140-160℃)，待棕色氮氧化物基本赶完后，升高温度继续加热消化产生浓白烟，挥发大部分高氯酸，呈灰白色糊状，取下冷却。用超纯水定容于50mL 的容量瓶中，经过滤后保存于聚乙烯瓶中供分析用。采用火焰原子吸收光谱仪测定黑麦草地上地下部镉含量(mg/kg，DW)，并计算各部位镉积累量、富集系数及转移系数。

镉地上部迁移总量(TMT)＝该植株地上部镉含量×该植株地上部生物量

富集系数(BCF)＝植物地上部Cd含量/土壤Cd含量

转移系数(TF)＝地上部分地上部Cd含量/根部Cd含量

表1不同收割阶段的喷施剂量

收割阶段	蒸馏水	植物生长调节复合剂
			1	15ml	15ml
2	10ml	10ml
			3	8ml	8ml

3、结果分析

试验结果主要为：

1)喷施植物生长调节复合剂可显著提高镉胁迫下黑麦草的生长量、株长、根长，具体数值见下表2所示：

表2喷施植物生长调节复合剂对镉污染土壤中黑麦草生物量及株长、根长的影响

由表2可知，相比喷施蒸馏水处理，喷施实施例1的植物生长调节复合剂使黑麦草3次收割的地上部生物量分别提高了25.59％、32.04％、31.89％，地下部生物量提高了23.53％，株长分别提高了28.32％、26.8％、26.96％，根长提高了22.55％；喷施对比例1复合剂使黑麦草3次收割的地上部生物量分别提高了5.44％，8.18％，9.72％，地下部提高了8.29％，株长分别提高了9.88％、7.26％、6.21％，根长提高了6.49％；喷施对比例2复合剂使黑麦草3次收割的地上部生物量分别提高了11.91％、15.84％、10.7％，地下部提高了5.62％，株长分别提高了7.81％、5.39％、5.1％，根长提高了3.48％；喷施对比例3复合剂使黑麦草3次收割的地上部生物量分别提高了17.58％、20.26％、29.01％，地下部14.49％，株长分别提高了16.49％、 14.93％、15.45％，根长提高了15.98。

2)喷施植物生长调节复合剂可显著提高黑麦草对土壤镉污染的修复效果，具体数值见下表3所示：

表3喷施植物生长调节复合剂对镉污染土壤中黑麦草体内镉含量的影响

从表3中可以看出，相较于喷施蒸馏水处理，喷施实施例1的植物生长调节复合剂使黑麦草地上部镉含量分别提高了16.80％，18.29％，15.54％，地下部镉含量降低了5.66％。喷施对比例1复合剂使黑麦草地上部镉含量分别提高了4.40％，6.54％，6.81％，地下部镉含量降低了11.8％了；喷施对比例2复合剂使黑麦草地上部镉含量分别提高了9.10％，9.43％，13.18％，地下部镉含量降低了7.14％；喷施对比例3复合剂使黑麦草地上部镉含量分别提高了 2.49％，2.00％，5.22％，地下部镉含量提高了11.22％。

不同收割阶段各处理的镉地上部迁移总量的变化如图1所示，不同收割阶段喷施实施例1中的复合剂均显著促进了镉在黑麦草地上部的积累，镉地上部迁移总量分别提高了46.68％， 56.19％，52.39％；喷施对比例1复合剂使镉地上部迁移总量分别提高了12.96％，14.97％， 13.40％；喷施对比例2复合剂使镉地上部迁移总量分别提高了22.09％，26.76％，25.29％；喷施对比例3复合剂使镉地上部迁移总量分别提高了20.51％，22.66％，35.75％。

黑麦草富集和转运系数的变化如图2和图3所示，每组处理黑麦草的富集系数均超过了 1，说明冬牧70黑麦草对镉具有良好的耐受性。相对对照组(喷施蒸馏水)而言，可以看出喷施植物生长调节复合剂对黑麦草镉提取和转运均产生了显著影响，喷施实施例1复合剂的黑麦草富集系数为对照组的1.17倍，转运系数为对照组的1.29倍；喷施对比例1复合剂的黑麦草富集系数为对照组的1.06倍，转运系数为对照组的1.20倍；喷施对比例2复合剂的黑麦草富集系数为对照组的1.10倍，转运系数为对照组的1.15倍；喷施对比例3复合剂的黑麦草富集系数为对照组的1.03倍，转运系数为对照组的0.93倍。

由此可看出，相较对比例复合剂，施用实施例1复合剂，无论是黑麦草的镉地上部迁移总量，还是镉富集与转运速率都有了明显的提升，且多次收割后仍然有效。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。

Claims (10)

1.一种植物生长调节复合剂，其特征在于，按重量份计，所述植物生长调节复合剂的原料包括：多胺12.5~41份、水杨酸4~41份、硝普钠8~60份、亚硒酸钠0.8~10份、吐温50~75份和水100000~150000份。

2.根据权利要求1所述的植物生长调节复合剂，其特征在于：所述多胺为腐胺、亚精胺、精胺中的一种或多种的组合。

3.根据权利要求2所述的植物生长调节复合剂，其特征在于：按重量份剂，所述植物生长调节复合剂的原料包括：腐胺9~20份、亚精胺1.5~15份、精胺2~6份、水杨酸4~41份，硝普钠8~60份、亚硒酸钠0.8~10份、吐温50~75份和水100000~150000份。

4.根据权利要求3所述的植物生长调节复合剂，其特征在于：按重量份计，所述植物生长调节复合剂的原料包括：腐胺10~15份、亚精胺5~15份、精胺2~6份、水杨酸10~30份，硝普钠15~40份、亚硒酸钠5~10份、吐温50~75份和水100000~150000份。

5.一种权利要求1~4中任一项所述的植物生长调节复合剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

（1）使多胺溶于水中，制成多胺溶液；

（2）使水杨酸溶于无水乙醇中，然后加入乙酸，再用水稀释，制成水杨酸溶液；

（3）使硝普钠溶于水中，制成硝普钠溶液；

（4）使亚硒酸钠溶于水中，制成亚硒酸钠溶液；

（5）使多胺溶液、水杨酸溶液、硝普钠溶液、亚硒酸钠溶液、吐温和水混合，制得所述植物复合调节剂。

6.权利要求1~4中任一项所述的植物生长调节复合剂在强化黑麦草修复镉污染土壤上的应用。

7.一种强化黑麦草修复镉污染土壤的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）对镉污染土壤进行翻耕平整并施肥；

（2）将催芽后的黑麦草播撒于经步骤（1）处理后的所述镉污染土壤中；

（3）待黑麦草生长45~50天后进行收割，且收割前7~10天开始每天喷施权利要求1~4中任一项所述的植物生长调节复合剂，直至收割前一天；

（4）经步骤（3）处理后的黑麦草继续进行生长直至生长出真叶后进行收割，且收割前7~10天开始每天喷施权利要求1~4中任一项所述的植物生长调节复合剂，直至收割前一天；

（5）经步骤（4）处理后的黑麦草继续生长40~60天，直至收获黑麦草，且收获前7~10天开始喷施权利要求1~4中任一项所述的植物生长调节复合剂，直至收获前一天。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为50~80mL/m²；和/或，步骤（4）中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为25~40 mL/m²；和/或，步骤（5）中，每天喷施所述植物生长调节复合剂的用量为20~25 mL/m²。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，翻耕深度为20~22cm；和/或，步骤（2）中，所述黑麦草的播种量为20~35g/m²；和/或，步骤（3）中，收割的留茬高度为2~5cm；和/或，步骤（4）中，收割的留茬高度为2~5cm。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：若黑麦草当地年平均温度在5~30℃，则可重复步骤（4）4~6次，再进行步骤（5）；否则，步骤（4）完成后直接进行步骤（5）的操作。

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