CN114072142A - 用于治疗乙型肝炎病毒感染的组合疗法 - Google Patents

用于治疗乙型肝炎病毒感染的组合疗法 Download PDF

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CN114072142A CN202080044730.5A CN202080044730A CN114072142A CN 114072142 A CN114072142 A CN 114072142A CN 202080044730 A CN202080044730 A CN 202080044730A CN 114072142 A CN114072142 A CN 114072142A
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Abstract

描述的是与衣壳组装调节剂(CAM)组合使用的、用于抑制乙型肝炎病毒(HBV)表达的RNA干扰(RNAi)试剂及其施用方法。HBV RNAi试剂和CAM按比率施用，以有效抑制HBV基因表达并且治疗与HBV感染相关的疾病和状况。

Description

用于治疗乙型肝炎病毒感染的组合疗法
相关申请的交叉引用
本申请要求以下的优先权利益：于2019年4月18日提交的美国临时专利申请序列号62/836,066；于2019年5月24日提交的美国临时专利申请序列号62/852,749；于2019年8月9日提交的PCT专利申请号PCT/US2019/046036；以及于2019年11月7日提交的美国临时专利申请序列号62/932,346；所述专利申请各自的内容整体引入本文作为参考。
ASCII文本文件序列表提交
ASCII文本文件的下述提交的内容整体引入本文作为参考：计算机可读形式(CRF)的序列表 (文件名：165002000941SEQLIST.TXT，记录日期：2020年4月17日，大小：8 KB)。
技术领域
本公开内容总体上涉及包含RNA干扰(RNAi)组分和衣壳组装调节剂的组合物和试剂盒，以及其用于治疗乙型肝炎病毒感染或抑制至少一种乙型肝炎病毒基因表达的用途。
背景技术
乙型肝炎病毒(HBV)是严格嗜肝性、含有双链DNA的病毒。尽管DNA是遗传材料，但复制周期涉及将前基因组RNA复制成DNA的逆转录步骤。乙型肝炎病毒被分类为嗜肝DNA病毒的一个成员，且属于嗜肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)。成人由乙型肝炎病毒的初次感染引起急性肝炎，具有器官炎症、发烧、黄疸和血液中的肝氨基转移酶增加的症状。不能克服病毒感染的那些患者遭受经过多年的慢性疾病进展，伴随发展肝硬化或肝癌的增加风险。从感染乙型肝炎病毒的母亲到新生儿的围产期传播也导致慢性肝炎。
在由肝细胞摄取后，核衣壳转移到核，且释放DNA。在其中，完成DNA链合成并修复间隙，以得到3.2kb的共价闭合环状(ccc)超螺旋DNA。cccDNA充当长3.5、3.5、2.4、2.1和0.7kb的五种主要病毒mRNA的转录模板。所有mRNA都是5'加帽的，且在3'端处多聚腺苷酸化的。在所有5种mRNA之间的3'端处存在序列重叠。
一种3.5 kb mRNA充当核心蛋白和聚合酶生产的模板。另外，相同的转录物充当前基因组复制中间体，并且允许病毒聚合酶启动成为DNA的逆转录。核心蛋白是核衣壳形成所需的。另一种3.5 kb mRNA编码前核心(pre-core)、可分泌的e抗原(HBeAg)。在不存在复制抑制剂的情况下，血液中的e抗原丰度与肝中的乙型肝炎病毒的复制相关联，并且充当监测疾病进展的重要诊断标记物。
2.4和2.1 kb mRNA携带开放读码框(“ORF”)前S1、前S2和S，用于表达病毒大、中和小表面抗原。s抗原与传染性的完整颗粒相关。另外，受感染患者的血液还含有衍生自单独的s抗原的非传染性颗粒，不含基因组DNA或聚合酶。这些颗粒的功能并未完全理解。血液中可检测的s抗原的完全和持久耗尽被视为乙型肝炎病毒清除的可靠指标。
0.7 kb mRNA编码X蛋白。这种基因产物对于病毒基因的有效转录是重要的，并且还充当关于宿主基因表达的反式激活蛋白。后一种活性似乎对于肝癌发展过程中的肝细胞转化是重要的。
在血液中具有可检测的s抗原、e抗原和/或病毒DNA超过6个月的患者被视为慢性感染的。作为逆转录酶活性抑制剂的核苷类似物通常是许多患者的第一治疗选项。拉米夫定、替诺福韦和/或恩替卡韦的施用已显示压制乙型肝炎病毒复制，有时至无法检测的水平，其中肝功能的改善和肝炎症的减少通常被视为最重要的益处。然而，只有少数患者在治疗结束后达到完全和持久的缓解。此外，随着治疗持续时间的增加，乙型肝炎病毒发展药物抗性。这对于由乙型肝炎病毒和人免疫缺陷病毒(HIV)共感染的患者尤为困难。这两种病毒均对核苷类似物药物敏感，并且可能共同发展抗性。
第二治疗选项是干扰素-α的施用。在此处，患者在6个月时期接受高剂量的干扰素-α。亚洲基因型B给出极弱的应答率。由丁型肝炎病毒(HDV)或人免疫缺陷病毒的共感染已显示致使干扰素-α疗法完全无效。具有严重肝损伤和重度纤维化状况的患者对于干扰素-α疗法是不合格的。
某些乙型肝炎病毒特异性RNA干扰(RNAi)试剂先前已显示抑制HBV基因表达的表达。例如，整体引入本文作为参考、授予Chin等人的美国专利申请公开号2013/0005793，公开了用于抑制乙型肝炎病毒基因表达的某些双链核糖核酸(dsRNA)分子。
另外，HBV抑制剂，例如衣壳组装调节剂(CAM)，可以与乙型肝炎核心蛋白结合并干扰病毒衣壳组装过程，从而阻止聚合酶结合的pgRNA衣壳化。这导致形成缺乏HBV DNA或RNA的HBV衣壳(非功能性衣壳)，并且最终导致HBV复制的抑制。参见例如WO2014184350A1。参考文献WO2014184350A1整体引入本文，特别是衣壳组装调节剂化合物及其制备方法的描述。
存在改善的HBV疗法的需要，所述HBV疗法可以克服现有治疗选项的至少一个缺点，例如毒性、致突变性、缺乏选择性、弱功效、弱生物利用度和合成困难，同时提供另外的益处，例如增加的效力或增加的安全窗口。
本文中提及的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的公开内容都在此整体引入本文作为参考。
发明内容
本文提供的是用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，其中：(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO:7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ IDNO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE002
或其药学上可接受的盐。
还提供的是用于治疗受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，其中：(a)RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ IDNO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE004
或其药学上可接受的盐。
进一步提供的是治疗接受衣壳组装调节剂疗法的受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中：所述衣壳组装调节剂疗法是式(I)的化合物：
Figure 100002_DEST_PATH_IMAGE006
或其药学上可接受的盐；和
该方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分，其中所述RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19。在某些变化中，受试者进一步接受核苷类似物疗法。
本文还提供的是用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其中向受试者施用与RNAi组分组合的有效量的式(I)的化合物，其中：(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE008
或其药学上可接受的盐。
还提供的是治疗乙型肝炎病毒感染的方法，其包括使感染有乙型肝炎病毒感染的细胞与有效量的RNAi组分和式(I)的化合物、或前述的治疗上有效的代谢物接触，其中：(a)RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ IDNO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ IDNO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE010
或其药学上可接受的盐。
在本文的任何方法或其它公开内容中，在一种变化中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂包含至少一个修饰的核苷酸或至少一个修饰的核苷间键。在另一种变化中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。在进一步的变化中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂进一步包含与第一RNAi试剂或第二RNAi试剂缀合的靶向配体。在一个方面，靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。在一个特定方面，靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。在一种变化中，靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。在另一种变化中，靶向配体与第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链缀合。在另一种变化中，靶向配体与第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。在另外一种变化中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQID NO: 10的有义链；包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；包含SEQID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQID NO: 12的有义链；包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；包含SEQID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQID NO: 13的有义链；以及包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。在一种特定变化中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，并且第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：包含SEQ IDNO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ IDNO: 12的有义链；包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；包含SEQ IDNO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；以及包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。在另外一种变化中，第一RNAi试剂与第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。在另一种变化中，第一RNAi试剂与第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。在某些方面，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，并且第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链。在一种变化中，式(I)的化合物是式(I)的化合物的药学上可接受的盐：
Figure DEST_PATH_IMAGE012
。在另一种变化中，式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE014
。
在本文详述的任何方法中，在一种变化中，RNAi组分以约40-200 mg的剂量每月一次施用于受试者。在本文详述的任何方法的另一种变化中，RNAi组分以约50-200 mg的剂量每月一次施用于受试者。在另一种变化中，式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以约100-500 mg的日剂量施用于受试者。RNAi组分可以经由静脉内注射或皮下注射施用于受试者。式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以经口施用于受试者。在一个方面，RNAi组分与衣壳组装调节剂同时或序贯施用。在另一个方面，RNAi组分与衣壳组装调节剂分开施用。在一个方面，受试者已接受衣壳组装调节剂疗法至少约1个月。在另一个方面，该方法进一步包括向受试者施用核苷类似物，例如恩替卡韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺。在一种变化中，恩替卡韦以约0.1-5 mg的日剂量施用于受试者。在另一种变化中，富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺以约5-50 mg替诺福韦艾拉酚胺或约200-500 mg富马酸替诺福韦二吡呋酯的日剂量施用于受试者。
还提供了试剂盒，在一种变化中，其包含有效量的RNAi组分和式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE016
或其药学上可接受的盐。在一种变化中，试剂盒进一步包括用于执行本文详述的任何一种方法的说明书。在另一种变化中，试剂盒进一步包含药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或前述任何的组合。
还提供的是包含RNAi组分和式(I)的化合物的组合物，其中(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE018
或其药学上可接受的盐。该组合物可以包含如本文详述的任何RNAi试剂子集和式(I)的化合物，并且任选地包含载体等等。还提供的是药物组合物，其包含有效量的本文详述的组合物，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或前述任何的组合。还提供的是制造物品，其包括封装组合物或药物组合物的容器。
还提供的是在制造药剂中的有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，所述药剂用于治疗受试者的由乙型肝炎病毒引起的病毒感染，其中：(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ IDNO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE020
或其药学上可接受的盐。
还提供的是在制造药剂中的有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，所述药剂用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达，其中：(a) RNAi组分包括(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO:19；并且(b)式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE022
或其药学上可接受的盐。
附图说明
图1显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第29天HBsAg的个体变化。患者在第1天时给予RNAi组分的单一皮下剂量。每条线代表一个个别CHB患者。
图2显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第29天的平均对数HBsAg变化。患者在第1天时给予RNAi组分的单一皮下剂量。
图3A-3C显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第85天(图3A)、从第1天到第168天(图3B)、或从第1天到第336天(图3C) HBsAg的个体变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。每条线代表一个个别CHB患者。虚线代表HBeAg阳性患者。
图4显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第85天的平均对数HBsAg变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。N代表其数据在相应时间进行分析的患者数目。
图5A-5C显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第113天(图5A)、从第1天到第168天(图5B)、或从第1天到第336天(图5C) HBsAg的个体变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。每条线代表一个个别CHB患者。
图6显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第113天的平均HBsAg和对数HBsAg变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。
图7显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，在第113天时HBsAg的个体减少。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。每个点代表一个个别CHB患者。具有箭头的点指示HBeAg阳性患者。没有箭头的点指示HBeAg阴性患者。
图8A-8D显示了对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天250 mg化合物A和(3) NA的CHB患者(实施例1的队列12)，从第1天到第113天HBV DNA、HBV RNA、HBeAg和HBcrAg的个体变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予RNAi组分的三个皮下剂量。每条线代表一个个别CHB患者。
图9显示了分别地对于实施例1的队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的CHB患者，从第1天到第113天的平均HBsAg变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予以下量的RNAi组分的三个皮下剂量：25 mg (队列1b)、50 mg (队列1c)、100 mg (队列2b)、200 mg (队列3b)、300mg (队列4b)或400 mg (队列5b)。所有患者都每天给予NA一次。
图10显示了对于实施例1的队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的所有患者，在第113天时距离第1天的平均和个体HBsAg变化。具有箭头的点指示HBeAg阳性患者。没有箭头的点指示HBeAg阴性患者。
图11A-11D显示了分别地对于实施例1的队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的CHB患者，从第1天到第113天HBV DNA、HBV RNA、HBeAg和HBcrAg的个体变化。患者在第1天、第29天和第57天时给予以下量的RNAi组分的三个皮下剂量：25 mg (队列1b)、50 mg (队列1c)、100mg (队列2b)、200 mg (队列3b)、300 mg (队列4b)或400 mg (队列5b)。并且所有患者都每天给予NA一次。每条线代表一个个别CHB患者。
具体实施方式
呈现下述描述以使得本领域普通技术人员能够制备且使用各个实施方案。具体组合物、技术和应用的描述仅作为实例提供。本文描述的实例的各种修改对于本领域普通技术人员将是显而易见的，并且本文定义的一般原理可以应用于其它实例和应用，而不脱离各个实施方案的精神和范围。因此，各个实施方案并不预期限于本文描述和显示的实例，而是符合与权利要求一致的范围。
定义
除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语都具有与由本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解相同的含义。本文提及的所有专利、申请、公开申请和其它出版物都整体引入作为参考。如果这个节段中阐述的定义与引入本文作为参考的专利、申请或其它出版物中阐述的定义相反或在其它方面不一致，则这个节段中阐述的定义优先于引入本文作为参考的定义。
如本文和所附权利要求中使用的，单数形式“一个”、“一种”和“该/所述”包括复数所指物，除非上下文另有明确说明。应进一步注意，权利要求可以被撰写为排除任何任选要素。因此，这种陈述预期充当与权利要求要素的叙述相关联的此类专有术语如“仅”、“只有”等等的使用、或者“否定”限制的使用的前提基础。
如本文使用的，术语“包括”、“含有”和“包含”以其开放的、非限制性意义使用。
术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等等。此类介质和试剂用于药学活性物质的用途是本领域众所周知的。除非任何常规介质或试剂与活性成分不相容，否则考虑其在药物组合物中的使用。补充性活性成分也可以掺入药物组合物内。
术语“药学上可接受的盐”指已知无毒且常用于药学文献中的本文化合物中任一种的盐。在一些实施方案中，化合物的药学上可接受的盐保留本文所述的化合物的生物学有效性，并且并非生物学或其它方面不期望的。药学上可接受的盐的实例可以在Berge等人，Pharmaceutical Salts，J. Pharmaceutical Sciences，1977年1月，66(1)，1-19中找到。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸形成。盐可以由其衍生的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和磷酸。盐可以由其衍生的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、延胡索酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羟乙基磺酸、对甲苯磺酸、硬脂酸和水杨酸。药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱形成。盐可以由其衍生的无机碱包括例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰和铝。盐可以由其衍生的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺；取代胺包括天然存在的取代胺；环胺；以及碱性离子交换树脂。有机碱的实例包括异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐选自铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。
术语“患者”和“受试者”指动物，例如哺乳动物、鸟类或鱼类。在一些实施方案中，患者或受试者是哺乳动物。哺乳动物包括例如小鼠、大鼠、犬、猫、猪、绵羊、马、牛和人。在一些实施方案中，患者或受试者是人，例如已经或即将成为治疗、观察或实验对象的人。本文所述的化合物、组合物和方法可以用于人治疗和兽医应用两者中。
“溶剂合物”由溶剂和化合物的相互作用形成。合适的溶剂包括例如水和醇(例如乙醇)。溶剂合物包括具有化合物与水的任何比率的水合物，例如一水合物、二水合物和半水合物。
术语“治疗有效量”或“有效量”指本文公开和/或描述的化合物的量，当施用于需要此类治疗的患者时，所述量足以实现如本文定义的治疗。化合物的治疗有效量可以是足以治疗响应心脏肌节调节的疾病的量。治疗有效量将根据例如待治疗的受试者和疾病状况、受试者的重量和年龄、疾病状况的严重性、特定化合物、待遵循的给药方案、施用时机、施用方式而变，所有这些可以由本领域普通技术人员容易地确定。治疗有效量可以在实验上例如通过测定化学实体的血液浓度进行确定，或在理论上通过计算生物利用度进行确定。
除非另有说明，否则本文公开和/或描述的化合物包括所有可能的对映异构体、非对映异构体、内消旋异构体和其它立体异构形式，包括其外消旋混合物、旋光纯形式和中间体混合物。对映异构体、非对映异构体、内消旋异构体和其它立体异构形式可以使用手性合成子或手性试剂进行制备，或使用常规技术进行拆分。除非另有说明，否则当本文公开和/或描述的化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心时，预期该化合物包括E和Z异构体两者。当本文所述的化合物含有能够互变异构的部分时，并且除非另有说明，否则预期化合物包括所有可能的互变异构体。
本发明的化合物和中间体的纯立体异构形式可以通过应用本领域已知的程序来获得。例如，对映异构体可以通过其非对映异构盐由旋光酸或碱的选择性结晶而彼此分开。其实例是酒石酸、二苯甲酰酒石酸、二对甲基苯甲酰酒石酸和樟脑磺酸。可替代地，对映异构体可以使用手性固定相通过色谱技术进行分离。所述纯立体化学异构形式也可以衍生自适当原材料的相应纯立体化学异构形式，条件是反应立体特异性地发生。优选地，如果需要特定的立体异构体，则所述化合物将通过立体特异性的制备方法合成。这些方法将有利地采用对映体纯的原材料。
组合
本文提供的是有效量的RNAi组分和衣壳组装调节剂(CAM)或其药学上可接受的盐的组合。
CAM化合物
CAM是式(I)的化合物(本文也称为化合物A)：
Figure DEST_PATH_IMAGE024
或其药学上可接受的盐。在一种变化中，CAM是
Figure DEST_PATH_IMAGE026
的药学上可接受的盐。在另一种变化中，CAM是
Figure DEST_PATH_IMAGE028
。
在另一个方面，本公开内容的CAM化合物可以是药学上可接受的盐或溶剂合物的形式。在一些实施方案中，化合物的药学上可接受的盐保留本文所述的化合物的生物学有效性，并且并非生物学或其它方面不期望的。药学上可接受的盐的实例可以在Berge等人，Pharmaceutical Salts，J. Pharmaceutical Sciences，1977年1月，66(1)，1-19中找到。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸形成。盐可以由其衍生的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸和磷酸。盐可以由其衍生的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、延胡索酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羟乙基磺酸、对甲苯磺酸、硬脂酸和水杨酸。药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱形成。盐可以由其衍生的无机碱包括例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰和铝。盐可以由其衍生的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺；取代胺包括天然存在的取代胺；环胺；以及碱性离子交换树脂。有机碱的实例包括异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐选自铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。
RNAi组分
在一个方面，RNAi组分包含一种或多种RNAi试剂。本文公开的每种RNAi试剂至少包括有义链和反义链。有义链和反义链可以彼此部分、基本上或完全互补。本文所述的RNAi试剂有义链和反义链的长度各自可以为长度16至30个核苷酸。在一些实施方案中，有义链和反义链的长度独立地为17至26个核苷酸。在一些实施方案中，有义链和反义链的长度独立地为19至26个核苷酸。在一些实施方案中，有义链和反义链的长度独立地为21至26个核苷酸。在一些实施方案中，有义链和反义链的长度独立地为21至24个核苷酸。有义链和反义链可以是相同的长度或不同的长度。本文公开的HBV RNAi试剂已设计为包括与HBV基因组中的序列至少部分互补的反义链序列，所述HBV基因组中的序列跨越大多数已知的HBV血清型是保守的。在递送至表达HBV的细胞后，本文所述的RNAi试剂在体内或体外抑制一种或多种HBV基因的表达。
RNAi试剂包括包含第一序列的有义链(也称为过客链)和包含第二序列的反义链(也称为引导链)。本文所述的HBV RNAi试剂的有义链包括与HBV mRNA中的至少16个连续核苷酸的核苷酸序列具有至少约85%同一性的核心段。在一些实施方案中，与HBV mRNA中的序列具有至少约85%同一性的有义链核心核苷酸段的长度为16、17、18、19、20、21、22或23个核苷酸。HBV RNAi试剂的反义链包含在至少16个连续核苷酸的核心段上与HBV mRNA中的序列和相应的有义链具有至少约85%互补性的核苷酸序列。在一些实施方案中，与HBV mRNA或相应的有义链中的序列具有至少约85%互补性的反义链核心核苷酸序列的长度为16、17、18、19、20、21、22或23个核苷酸。
在一些实施方案中，RNAi组分包含第一RNAi试剂或第二RNAi试剂，所述第一RNAi试剂包括包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ IDNO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；所述第二RNAi试剂包括包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19。在一些实施方案中，RNAi组分包含第一RNAi试剂和第二RNAi试剂，所述第一RNAi试剂包括包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；所述第二RNAi试剂包括包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19。
在一些实施方案中，本文公开的第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包含表1中的任何序列。
表 1. 第一RNAi试剂和第二RNAi试剂的示例性序列
Figure DEST_PATH_IMAGE030
靶向基团
在一些实施方案中，使用本领域已知的任何寡核苷酸递送技术，将RNAi试剂递送至靶细胞或组织。核酸递送方法包括但不限于通过封装在脂质体中、通过离子电渗疗法或通过掺入其它媒介物内，所述其它媒介物例如水凝胶、环糊精、可生物降解的纳米胶囊和生物粘附性微球体、蛋白质载体或动态多聚缀合物(Dynamic Polyconjugate) (DPC) (参见例如WO 2000/053722、WO 2008/0022309、WO 2011/104169和WO 2012/083185，其各自引入本文作为参考)。在一些实施方案中，通过将RNAi试剂与靶向基团共价连接，将HBV RNAi试剂递送至靶细胞或组织。在一些实施方案中，靶向基团可以包括细胞受体配体，例如脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPr)配体。在一些实施方案中，ASGPr配体包括半乳糖衍生物簇或由半乳糖衍生物簇组成。在一些实施方案中，半乳糖衍生物簇包括N-乙酰半乳糖胺三聚体或N-乙酰半乳糖胺四聚体。在一些实施方案中，半乳糖衍生物簇是N-乙酰半乳糖胺三聚体或N-乙酰半乳糖胺四聚体。
靶向基团可以连接至HBV RNAi试剂的有义链或反义链的3'或5'端。在一些实施方案中，靶向基团连接至有义链的3'或5'端。在一些实施方案中，靶向基团连接至有义链的5'端。在一些实施方案中，靶向基团经由接头连接至RNAi试剂。
在一些实施方案中，RNAi组分包含具有不同核苷酸序列的第一RNAi试剂和第二RNAi试剂的组合或混合物(cocktail)。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自分开且独立地连接至靶向基团。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自连接至由N-乙酰半乳糖胺组成的靶向基团。在一些实施方案中，当第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包括在组合物中时，RNAi试剂各自连接至相同的靶向基团。在一些实施方案中，当第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包括在组合物中时，RNAi试剂各自连接至不同的靶向基团，例如具有不同化学结构的靶向基团。
在一些实施方案中，靶向基团无需使用另外的接头而连接至第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，靶向基团被设计为具有易于存在的接头，以促进与第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的连接。在一些实施方案中，当第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包括在组合物中时，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂可以使用相同的接头连接至靶向基团。在一些实施方案中，当第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包括在组合物中时，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂使用不同的接头连接至靶向基团。
表2中提供了靶向基团和连接基团的实例。非核苷酸基团可以共价连接至有义链和/或反义链的3'和/或5'端。在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂含有与有义链的3'和/或5'端连接的非核苷酸基团。在一些实施方案中，非核苷酸基团连接至第一RNAi试剂或第二RNAi试剂有义链的5'端。非核苷酸基团可以直接或经由接头/连接基团间接连接至第一RNAi试剂或第二RNAi试剂。在一些实施方案中，非核苷酸基团经由不稳定的、可切割的或可逆的键或接头连接至第一RNAi试剂或第二RNAi试剂。
靶向基团和连接基团包括下述，关于其的化学结构在下表2中提供：(PAZ)、(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)、(NAG39)s。每条有义链和/或反义链可以具有上文列出的任何靶向基团或连接基团，以及与序列的5'和/或3'端缀合的其它靶向基团或连接基团。
表 2. 代表各种修饰的核苷酸、靶向基团和连接基团的结构
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修饰的核苷酸
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂含有一个或多个修饰的核苷酸。如本文使用的，“修饰的核苷酸”是除核糖核苷酸(2'-羟基核苷酸)外的核苷酸。在一些实施方案中，至少50% (例如，至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少97%、至少98%、至少99%或100%)的核苷酸是修饰的核苷酸。如本文使用的，修饰的核苷酸包括但不限于脱氧核糖核苷酸、核苷酸模拟物、脱碱基核苷酸(在本文中表示为Ab)、2'-修饰的核苷酸、3'至3'键(倒置)核苷酸(在本文中表示为invdN、invN、invn、invAb)、含非天然碱基的核苷酸、桥接核苷酸、肽核酸(PNA)、2',3'-开环核苷酸模拟物(非锁定的核碱基类似物，在本文中表示为NUNA或NUNA)、锁定的核苷酸(在本文中表示为NLNA或NLNA)、3'-O-甲氧基(2'核苷间连接的)核苷酸(在本文中表示为3'-OMen)、2'-F-阿拉伯糖核苷酸(Arabinonucleotide) (在本文中表示为NfANA或NfANA)、5'-Me、2'-氟核苷酸(在本文中表示为5Me-Nf)、吗啉代核苷酸、乙烯基膦酸酯脱氧核糖核苷酸(在本文中表示为vpdN)、含乙烯基膦酸酯的核苷酸和含环丙基膦酸酯的核苷酸(cPrpN)。2'-修饰的核苷酸(即在五元糖环的2'位置具有除羟基外的基团的核苷酸)包括但不限于2'-O-甲基核苷酸(在本文中表示为核苷酸序列中的小写字母'n')、2'-脱氧-2'-氟核苷酸(在本文中表示为Nf，在本文中也表示为2'-氟核苷酸)、2'-脱氧核苷酸(在本文中表示为dN)、2'-甲氧基乙基(2'-O-2-甲氧基乙基)核苷酸(在本文中表示为NM或2'-MOE)、2'-氨基核苷酸和2'-烷基核苷酸。给定化合物中的所有位置无需是统一修饰的。相反，可以在第一RNAi试剂或第二RNAi试剂中、或者甚至在其单个核苷酸中掺入多于一种修饰。RNAi试剂有义链和反义链可以通过本领域已知的方法进行合成和/或修饰。在一个核苷酸处的修饰独立于在另一个核苷酸处的修饰。
修饰的核碱基包括合成的和天然的核碱基，例如5-取代的嘧啶，6-氮杂嘧啶以及N-2、N-6和O-6取代的嘌呤(例如，2-氨丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶或5-丙炔基胞嘧啶)，5-甲基胞嘧啶(5-me-C)，5-羟甲基胞嘧啶，黄嘌呤，次黄嘌呤，2-氨基腺嘌呤，腺嘌呤和鸟嘌呤的6-烷基(例如，6-甲基、6-乙基、6-异丙基或6-正丁基)衍生物，腺嘌呤和鸟嘌呤的2-烷基(例如，2-甲基、2-乙基、2-异丙基或2-正丁基)衍生物和其它烷基衍生物，2-硫尿嘧啶，2-硫胸腺嘧啶，2-硫胞嘧啶，5-卤代尿嘧啶，胞嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-丙炔基胞嘧啶，6-偶氮尿嘧啶，6-偶氮胞嘧啶，6-偶氮胸腺嘧啶，5-尿嘧啶(假尿嘧啶)，4-硫尿嘧啶，8-卤代、8-氨基、8-巯基、8-硫代烷基、8-羟基和其它8-取代的腺嘌呤和鸟嘌呤，5-卤代(例如5-溴)、5-三氟甲基和其它5-取代的尿嘧啶和胞嘧啶，7-甲基鸟嘌呤和7-甲基腺嘌呤，8-氮杂鸟嘌呤和8-氮杂腺嘌呤，7-脱氮杂鸟嘌呤，7-脱氮杂腺嘌呤，3-脱氮杂鸟嘌呤和3-脱氮杂腺嘌呤。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的全部或基本上全部核苷酸都是修饰的核苷酸。如本文使用的，其中基本上所有存在的核苷酸都是修饰的核苷酸的RNAi试剂是在有义链和反义链两者中具有其为核糖核苷酸的四个或更少(即，0、1、2、3或4个)核苷酸的RNAi试剂。如本文使用的，其中基本上所有存在的核苷酸都是修饰的核苷酸的有义链是在有义链中具有其为核糖核苷酸的两个或更少(即，0、1或2个)核苷酸的有义链。如本文使用的，其中基本上所有存在的核苷酸都是修饰的核苷酸的反义链是在有义链中具有其为核糖核苷酸的两个或更少(即，0、1或2个)核苷酸的反义链。在一些实施方案中，RNAi试剂的一个或多个核苷酸是核糖核苷酸。
修饰的核苷间键
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的一个或多个核苷酸通过非标准键或主链(即，修饰的核苷间键或修饰的主链)进行连接。在一些实施方案中，修饰的核苷间键是含非磷酸酯的共价核苷间键。修饰的核苷间键或主链包括但不限于5’-硫代磷酸酯基团(在本文中表示为小写字母“s”)、手性硫代磷酸酯、硫代磷酸盐、二硫代磷酸酯、磷酸三酯、氨基烷基-磷酸三酯、烷基膦酸酯(例如，甲基膦酸酯或3'-亚烷基膦酸酯)、手性膦酸酯、次膦酸酯、氨基磷酸酯(例如，3'-氨基氨基磷酸酯、氨基烷基氨基磷酸酯或硫羰氨基磷酸酯(thionophosphoramidate))、硫羰烷基(thionoalkyl)-膦酸酯、硫羰烷基磷酸三酯、吗啉代键、具有正常3'-5'键的硼烷磷酸酯、2'-5'连接的硼烷磷酸酯类似物、或具有倒置极性的硼烷磷酸酯，其中相邻的核苷单元对是3'-5'连接至5'-3'或2'-5'连接至5'-2'的。在一些实施方案中，修饰的核苷间键或主链缺少磷原子。缺少磷原子的修饰的核苷间键包括但不限于短链烷基或环烷基糖间键、混合的杂原子和烷基或环烷基糖间键、或者一个或多个短链杂原子或杂环糖间键。在一些实施方案中，修饰的核苷间主链包括但不限于硅氧烷主链，硫化物主链，亚砜主链，砜主链，甲乙酰基(formacetyl)和硫代甲乙酰基主链，亚甲基甲乙酰基和硫代甲乙酰基主链，含烯烃的主链，氨基磺酸盐主链，亚甲基亚氨基和亚甲基肼基主链，磺酸盐和磺酰胺主链，酰胺主链以及具有混合的N、O、S和CH2组分的其它主链。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链可以含有1、2、3、4、5或6个硫代磷酸酯键，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的反义链可以含有1、2、3、4、5或6个硫代磷酸酯键，或有义链和反义链两者可以独立地含有1、2、3、4、5或6个硫代磷酸酯键。在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链可以含有1、2、3或4个硫代磷酸酯键，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的反义链可以含有1、2、3或4个硫代磷酸酯键，或有义链和反义链两者可以独立地含有1、2、3或4个硫代磷酸酯键。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂有义链含有至少两个硫代磷酸酯核苷间键。在一些实施方案中，至少两个硫代磷酸酯核苷间键位于从有义链的3'端开始的位置1-3处的核苷酸之间。在一些实施方案中，至少两个硫代磷酸酯核苷间键位于从有义链的5’端开始的位置1-3、2-4、3-5、4-6、4-5或6-8处的核苷酸之间。在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂反义链含有四个硫代磷酸酯核苷间键。在一些实施方案中，四个硫代磷酸酯核苷间键位于从有义链的5'端开始的位置1-3处的核苷酸之间，以及从5'端开始的位置19-21、20-22、21-23、22-24、23-25或24-26处的核苷酸之间。在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂含有在有义链中的至少两个硫代磷酸酯核苷间键、以及在反义链中的三个或四个硫代磷酸酯核苷间键。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂或第二RNAi试剂含有一个或多个修饰的核苷酸和一个或多个修饰的核苷间键。在一些实施方案中，2'-修饰的核苷与修饰的核苷间键组合。
在一些实施方案中，本文公开的第一RNAi试剂和第二RNAi试剂包含表3中的任何修饰序列。
表3. 第一RNAi试剂和第二RNAi试剂的示例性修饰序列
Figure DEST_PATH_IMAGE062
A = 3'-磷酸腺苷；
C = 3'-磷酸胞苷；
G = 3'-磷酸鸟苷；
U = 3'-磷酸尿苷
n = 任何2'-OMe修饰的核苷酸
a = 2'-O-甲基腺苷-3'-磷酸酯
as = 2'-O-甲基腺苷-3'-硫代磷酸酯
c = 2'-O-甲基胞苷-3'-磷酸酯
cs = 2'-O-甲基胞苷-3'-硫代磷酸酯
g = 2'-O-甲基鸟苷-3'-磷酸酯
gs = 2'-O-甲基鸟苷-3'-硫代磷酸酯
t = 2'-O-甲基-5-甲基尿苷-3'-磷酸酯
ts = 2’-O-甲基-5-甲基尿苷-3’-硫代磷酸酯
u = 2'-O-甲基尿苷-3'-磷酸酯
us = 2'-O-甲基尿苷-3'-硫代磷酸酯
Nf = 任何2'-氟修饰的核苷酸
Af = 2'-氟腺苷-3'-磷酸酯
Afs = 2'-氟腺苷-3'-硫代磷酸酯
Cf = 2'-氟胞苷-3'-磷酸酯
Cfs = 2'-氟胞苷-3'-硫代磷酸酯
Gf = 2'-氟鸟苷-3'-磷酸酯
Gfs = 2’-氟鸟苷-3’-硫代磷酸酯
Tf = 2'-氟-5'-甲基尿苷-3'-磷酸酯
Tfs = 2’-氟-5’-甲基尿苷-3’-硫代磷酸酯
Uf = 2'-氟尿苷-3'-磷酸酯
Ufs = 2'-氟尿苷-3'-硫代磷酸酯
dN = 任何2'-脱氧核糖核苷酸
dT = 2'-脱氧胸苷-3'-磷酸酯
NUNA = 2',3'-开环核苷酸模拟物(未锁定的核碱基类似物)
NLNA = 锁定的核苷酸
NfANA = 2'-F-阿拉伯糖核苷酸
NM = 2'-甲氧基乙基核苷酸
AM = 2'-甲氧基乙基腺苷-3'-磷酸酯
AMs = 2'-甲氧基乙基腺苷-3'-硫代磷酸酯
TM = 2'-甲氧基乙基胸苷-3'-磷酸酯
TMs = 2'-甲氧基乙基胸苷-3'-硫代磷酸酯
R = 核糖醇
(invdN) = 任何反向的脱氧核糖核苷酸(3'-3'连接的核苷酸)
(invAb) = 反向的(3'-3'连接的)脱碱基脱氧核糖核苷酸
(invAb)s = 反向的(3'-3'连接的)脱碱基脱氧核糖核苷酸-5'-硫代磷酸酯
(invn) = 任何反向的2'-OMe核苷酸(3'-3'连接的核苷酸)
s = 硫代磷酸酯键
在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 5和SEQ ID NO: 14。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 14。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 7和SEQ ID NO: 15。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQID NO: 1和SEQ ID NO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 3和SEQ IDNO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 4和SEQ ID NO: 12。在一些实施方案中，第二RNAi试剂包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19。在一些实施方案中，第二RNAi试剂包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO：16、17或18。
在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 5和SEQ ID NO: 14的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 14的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO:9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 7和SEQ ID NO: 15的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。
在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 1和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 4和SEQ ID NO: 12的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO:16、17或18的第二RNAi试剂。
在一些实施方案中，RNAi组分包含比率为约1:1、2:1、3:1、4:1或5:1的第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以约2:1的比率施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链，并且式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE064
(化合物A)或其药学上可接受的盐。
本文所述的组合可以用于下文所述的任何方法或试剂盒中。
在一些实施方案中，包括在本文所述的组合中的RNAi组分和式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在分开的容器中提供。在一些实施方案中，包括在本文所述的组合中的RNAi组分和式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在同一容器中提供。在一些实施方案中，RNAi组分包括在第一容器中的第一RNAi试剂和在第二容器中的第二RNAi试剂。例如，在一个示例性实施方案中，第一RNAi试剂在第一容器中，第二RNAi试剂在第二容器中，并且式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在第三容器中。在另一个实施方案中，RNAi组分包括在同一容器中的第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。例如，在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂在第一容器中，并且式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在第二容器中。示例性容器包括小瓶、袋、管或其它合适的容器。在一些实施方案中，容器的内容物是无菌的。
CAM药物组合物和制剂
在一些实施方案中，式(I)的化合物(例如化合物A)的有效量在约75-600 mg/剂量的范围内。在一些实施方案中，式(I)的化合物(例如化合物A)的有效量在约75-100 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、约300-400 mg、约400-500 mg或约500-600 mg/剂量的范围内。在一些实施方案中，式(I)的化合物(例如化合物A)的有效量为约75 mg、约80 mg、约85 mg、约90 mg、约95 mg、约100 mg、约125 mg、约150 mg、约175mg、约200 mg、约250 mg、约300 mg、约350 mg、约400 mg、约450 mg、约500 mg、约550 mg或约600 mg/剂量。在一些实施方案中，式(I)的化合物(例如化合物A)的有效量为约100 mg、约150 mg或约250 mg/剂量。
本发明的化合物例如式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其任何亚组，可以配制成各种药物形式用于施用目的。作为适当的组合物，可以引用通常用于全身施用药物的所有组合物。为了制备本发明的药物组合物，任选地以加成盐形式，作为活性成分的有效量的特定化合物与药学上可接受的载体紧密混合组合，取决于对于施用所需的制剂形式，所述载体可以采取广泛多样的形式。这些药物组合物期望为单位剂型，其特别适合于经口、直肠、经皮或通过肠胃外注射的施用。例如，在制备以经口剂型的组合物时，在经口液体制剂如悬浮液、糖浆剂、酏剂、乳状液和溶液的情况下，可以采用任何常用的药物介质，例如水、二醇、油、醇等等；或者在粉末、丸剂、胶囊和片剂的情况下，可以采用固体载体例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等等。由于它们易于施用，片剂和胶囊代表了最有利的经口剂量单位形式，在这种情况下采用固体药物载体。对于肠胃外组合物，载体通常包含无菌水，至少大部分包含无菌水，尽管也可以包括其它成分，例如以有助于溶解性。例如，可以制备可注射溶液，其中载体包含盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射的悬浮液，在这种情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂等等。还包括的是预期在使用前不久转换为液体形式制剂的固体形式制剂。在适合于经皮施用的组合物中，载体任选地包含渗透促进剂和/或合适的润湿剂，任选地与以较小比例的任何性质的合适添加剂组合，所述添加剂并不对皮肤产生显著的有害作用。本发明的化合物还可以使用任何本领域已知的递送系统，以溶液、悬浮液或干粉的形式，经由经口吸入或吹入进行施用。
以单位剂型配制上述药物组合物是尤为有利的，用于施用的容易和剂量的均匀性。如本文使用的，单位剂型指适合作为单位剂量的物理上离散的单位，每个单位含有与所需的药物载体结合的、计算为产生所需疗效的预定数量的活性成分。此类单位剂型的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊、丸剂、栓剂、粉包、糯米纸囊剂(wafer)、可注射溶液或悬浮液等等，以及其分离倍数。
RNAi试剂药物组合物和制剂
在另一个方面，本文描述的是用于治疗性治疗和/或预防性治疗与HBV感染相关的疾病/病症、或者抑制一种或多种HBV基因表达的方法，其包括施用包含一种或多种HBVRNAi试剂的药物组合物，取决于是需要局部治疗还是需要全身治疗，所述药物组合物可以以多种方式进行施用。施用可以是但不限于静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、真皮下(例如，经由植入装置)和实质内施用。在一些实施方案中，本文所述的药物组合物通过皮下注射进行施用。
在另一个方面，本文所述的方法包含一种或多种HBV RNAi试剂，其中所述一种或多种HBV试剂被制备为药物组合物或制剂。在一些实施方案中，药物组合物包括至少一种HBV RNAi试剂。这些药物组合物可特别用于抑制靶细胞、细胞群、组织或生物中的靶mRNA表达。药物组合物可以用于治疗患有疾病或病症的受试者，所述疾病或病症将受益于靶mRNA水平的减少或靶基因表达的抑制。药物组合物可以用于治疗处于发展疾病或病症的风险中的受试者，所述疾病或病症将受益于靶mRNA水平的减少或靶基因表达的抑制。在一个实施方案中，该方法包括向待治疗的受试者施用与如本文所述的靶向配体连接的HBV RNAi试剂。在一些实施方案中，将一种或多种药学上可接受的赋形剂(包括媒介物、载体、稀释剂和/或递送聚合物)加入包括HBV RNAi试剂的药物组合物中，从而形成适合于体内递送至人的药物制剂。
本文公开的包括HBV RNAi试剂的药物组合物和方法可以降低细胞、细胞群、细胞群、组织或受试者中的靶mRNA水平，所述方法包括：向受试者施用治疗有效量的本文描述的HBV RNAi试剂，从而抑制受试者中的靶mRNA表达。
在一些实施方案中，包括HBV RNAi试剂的所述药物组合物用于治疗或管理与HBV感染相关的临床表现。在一些实施方案中，将治疗有效量或预防有效量的一种或多种药物组合物施用于需要此类治疗、预防或管理的受试者。在一些实施方案中，所公开的HBV RNAi试剂中任一种的施用均可以用于降低受试者中的疾病症状的数目、严重性和/或频率。
包括HBV RNAi试剂的所述药物组合物可以用于治疗患有疾病或病症的受试者中的至少一种症状，所述疾病或病症将受益于HBV mRNA表达的减少或抑制。在一些实施方案中，向受试者施用治疗有效量的包括HBV RNAi试剂的一种或多种药物组合物，从而治疗症状。在其它实施方案中，向受试者施用预防有效量的一种或多种HBV RNAi试剂，从而预防至少一种症状。
施用途径是HBV RNAi试剂通过其与身体接触的路径。一般而言，施用药物和核酸用于治疗哺乳动物的方法是本领域众所周知的，并且可以应用于本文所述的组合物的施用。本文公开的HBV RNAi试剂可以经由任何合适的途径，以对于特定途径适当定制的制剂进行施用。因此，本文所述的药物组合物可以通过例如静脉内注射、肌内注射、皮内注射、皮下注射、关节内注射或腹膜内注射进行施用。在一些实施方案中，本文描述了经由皮下注射的药物组合物。
可以使用本领域已知的寡核苷酸递送技术，将本文所述的包括HBV RNAi试剂的药物组合物递送至细胞、细胞群、肿瘤、组织或受试者。一般而言，本领域公认的用于递送核酸分子的任何合适的方法(在体外或体内)可以适合与本文所述的组合物一起使用。例如，递送可以是通过局部施用(例如，直接注射、植入或局部施用)，全身施用，或者皮下、静脉内、腹膜内或肠胃外途径，包括颅内(例如，心室内、实质内和鞘内)、肌内、透皮、气道(气溶胶)、鼻、经口、直肠或局部(包括颊和舌下)施用。在某些实施方案中，组合物通过皮下或静脉内输注或注射进行施用。
相应地，在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以配制用于施用于受试者。
如本文使用的，药物组合物或药剂包括药理学有效量的至少一种所述的治疗化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。药学上可接受的赋形剂(多种赋形剂)是除活性药物成分(API，治疗产物，例如HBV RNAi试剂)外的物质，其有意地包括在药物递送系统中。赋形剂在预期剂量下并不发挥疗效或并不预期发挥疗效。赋形剂可以作用于a)在制造过程中有助于药物递送系统的加工，b)保护、支持或增强API的稳定性、生物利用度或患者可接受性，c)帮助产物鉴定，和/或d)在贮存或使用过程中增强API的总体安全性、有效性、递送的任何其它属性。药学上可接受的赋形剂可以是或可以不是惰性物质。
赋形剂包括但不限于：吸收促进剂、抗粘附剂、消泡剂、抗氧化剂、粘合剂、缓冲剂、载体、包衣剂、色素、递送促进剂、递送聚合物、右旋糖酐、右旋糖、稀释剂、崩解剂、乳化剂、增量剂、填料、调料、助流剂、保湿剂、润滑剂、油、聚合物、防腐剂、盐水、盐、溶剂、糖、助悬剂、缓释基质、甜味剂、增稠剂、张度剂、媒介物、憎水剂和润湿剂。
适用于可注射用途的药物组合物包括无菌水溶液(当水溶性时)或分散体、以及用于临时制备无菌注射溶液或分散体的无菌粉末。对于静脉内施用，合适的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM (BASF，Parsippany，NJ)或磷酸盐缓冲盐水。它在制造和贮存条件下应该是稳定的，并且应该针对微生物如细菌和真菌的污染作用进行防腐。载体可以是溶剂或分散介质，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)及其合适的混合物。适当流动性可以例如通过以下得到维持：使用包衣例如卵磷脂、在分散体的情况下维持所需粒度、以及使用表面活性剂。在许多情况下，优选在组合物中包括等渗剂，例如糖、多元醇如甘露糖醇、山梨糖醇和氯化钠。可注射组合物的延长吸收可以通过在组合物中包括延迟吸收的试剂来实现，所述试剂例如单硬脂酸铝和明胶。
无菌可注射溶液可以通过以下进行制备：将所需量的活性化合物掺入适当的溶剂中，根据需要连同上文列举的成分之一或组合一起，随后为过滤灭菌。一般地，分散体通过将活性化合物掺入无菌媒介物内进行制备，所述无菌媒介物含有基本分散介质和来自上文列举那些的所需其它成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，制备方法包括真空干燥和冷冻干燥，这从其先前无菌过滤的溶液得到活性成分加上任何另外所需成分的粉末。
适合关节内施用的制剂可以是药物的无菌水性制剂的形式，其可以是微晶形式，例如，水性微晶悬浮液的形式。脂质体制剂或可生物降解的聚合物系统也可以用于呈递用于关节内施用和眼部施用两者的药物。
活性化合物可以与载体一起进行制备，所述载体保护化合物免于从体内快速消除，例如控释制剂，包括植入物和微囊化递送系统。可以使用可生物降解的生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。用于制备此类制剂的方法对于本领域技术人员将是显而易见的。脂质体悬浮液也可以用作药学上可接受的载体。这些可以根据本领域技术人员已知的方法进行制备，所述方法例如如美国专利号4,522,811中所述的。
HBV RNAi试剂可以配制成剂量单位形式的组合物，用于施用的容易和剂量的均匀性。剂量单位形式指适合作为待治疗受试者的单位剂量的物理上离散的单位；每个单位含有与所需的药物载体结合的、计算为产生所需疗效的预定数量的活性化合物。关于本公开内容的剂量单位形式的规格由以下决定并直接取决于以下：活性化合物的独特特性和待实现的疗效，以及调制此类活性化合物用于治疗个体的领域中固有的局限性。
药物组合物可以含有在药物组合物中通常发现的其它的附加组分。此类附加组分包括但不限于：止痒药、收敛剂、局部麻醉药或抗炎剂(例如抗组胺药、苯海拉明等)。还设想了表达或包含本文定义的RNAi试剂的细胞、组织或分离的器官可以用作“药物组合物”。如本文使用的，“药理学有效量”、“治疗有效量”或简单地“有效量”指产生药理学结果、治疗结果或预防结果的RNAi试剂的量。
一般地，活性化合物的有效量在每天约0.1至约100 mg/kg体重，例如每天约1.0至约50 mg/kg体重的范围内。在一些实施方案中，活性化合物的有效量在约0.25至约5 mg/kg体重/剂量的范围内。在一些实施方案中，活性化合物的有效量在每1-18周或1-6个月25-400 mg的范围内。在一些实施方案中，活性化合物的有效量在每4周或每一个月50-125 mg的范围内。在一些实施方案中，活性成分的有效量在约0.5至约3 mg/kg体重/剂量的范围内。在一些实施方案中，活性成分的有效量在约25-400 mg/剂量的范围内。在一些实施方案中，活性成分的有效量在约50-125 mg/剂量的范围内。所施用的量很可能还取决于此类变量如患者的总体健康状况、所递送的化合物的相对生物学功效、药物的制剂、制剂中赋形剂的存在和类型以及施用途径。另外，应理解，所施用的初始剂量可以增加到超过上述较高水平，以便快速地达到所需的血液水平或组织水平，或者初始剂量可以小于最佳剂量。
在一些实施方案中，RNAi组分的有效量在约25-600 mg/剂量的范围内。在一些实施方案中，RNAi组分的有效量在约25-50 mg、约50-75 mg、约75-100 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、约300-400 mg、约400-500 mg或约500-600 mg/剂量的范围内。在一些实施方案中，RNAi组分的有效量为约25 mg、约30 mg、约35 mg、约40mg、约45 mg、约50 mg、约55 mg、约60 mg、约65 mg、约70 mg、约75 mg、约80 mg、约85 mg、约90 mg、约95 mg、约100 mg、约125 mg、约150 mg、约175 mg、约200 mg、约250 mg、约300 mg、约350 mg、约400 mg、约450 mg、约500 mg、约550 mg或约600 mg/剂量。在一些实施方案中，RNAi组分的有效量为约25 mg、约35 mg、约40 mg、约50 mg、约100 mg或约200 mg/剂量。
本文所述的一种或多种(例如，至少两种) HBV RNAi试剂可以配制成一种单一组合物或分开的个别组合物。在一些实施方案中，分开的个别组合物中的HBV RNAi试剂可以与相同或不同的赋形剂和载体一起进行配制。在一些实施方案中，分开的个别组合物中的HBV RNAi试剂可以通过相同或不同的施用途径进行施用。在一些实施方案中，HBV RNAi试剂是皮下施用的。
为了治疗疾病或者形成用于治疗疾病的药剂或组合物，本文所述的包括HBV RNAi试剂的药物组合物可以与赋形剂或者第二治疗剂或治疗进行组合，所述第二治疗剂或治疗包括但不限于：第二RNAi试剂或其它RNAi试剂、小分子药物、抗体、抗体片段和/或疫苗。
当加入药学上可接受的赋形剂或佐剂中时，所述的HBV RNAi试剂可以包装到试剂盒、容器、包装或分配器内。本文所述的药物组合物可以包装到预装注射器或小瓶中。
在一些实施方案中，组合物包含每个剂量在约25-600 mg范围内的有效量的RNAi组分、以及在约75-600 mg范围内的有效量的式(I)的化合物(例如，化合物A)。在一些实施方案中，组合物包含每个剂量在约25-300 mg范围内的有效量的RNAi组分、以及在约75-300mg范围内的有效量的式(I)的化合物(例如，化合物A)。在一些实施方案中，组合物包含每个剂量约25 mg、约35 mg、约40 mg、约50 mg、约100 mg或约200 mg的有效量的RNAi，以及约100 mg、约150 mg或约250 mg的有效量的式(I)的化合物(例如，化合物A)。
试剂盒
例如当加入药学上可接受的赋形剂或佐剂中，并且包装到试剂盒、容器、包装或分配器内时，所述的HBV RNAi试剂和CAM化合物可以以试剂盒的形式呈递。本文所述的药物组合物可以包装到预装注射器或小瓶中。
试剂盒可以包含本文所述的任何组合或组合物。
在另一个方面，试剂盒进一步包含包装插页，其包括但不限于用于制备和施用制剂的适当说明书、制剂的副作用和任何其它有关信息。说明书可以是任何合适的格式，包括但不限于印刷品、录像带、计算机可读磁盘、光盘或基于互联网的说明书的指导。
在另一个方面，提供了用于治疗患有或易患本文所述状况的个体的试剂盒，其包括包含剂量量的如本文公开的组合物或制剂的第一容器、以及关于使用的包装插页。容器可以是本领域已知的并且适合于静脉内制剂的贮存和递送的任何容器。在某些实施方案中，试剂盒进一步包括第二容器，其包含用于制备待施用于个体的制剂的药学上可接受的载体、稀释剂、佐剂等。
在一些实施方案中，试剂盒包含在约75-600 mg/剂量的范围内的式(I)的化合物(例如，化合物A)的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含在约75-100 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、约300-400 mg、约400-500 mg或约500-600 mg/剂量的范围内的式(I)的化合物(例如，化合物A)的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含约75 mg、约80 mg、约85 mg、约90 mg、约95 mg、约100 mg、约125mg、约150 mg、约175 mg、约200 mg、约250 mg、约300 mg、约350 mg、约400 mg、约450 mg、约500 mg、约550 mg或约600 mg/剂量的式(I)的化合物(例如，化合物A)的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含约100 mg、约150 mg或约250 mg/剂量的式(I)的化合物(例如，化合物A)的一个或多个剂量。
在一些实施方案中，试剂盒包含在约25-600 mg/剂量的范围内的RNAi组分的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含在约25-50 mg、约50-75 mg、约75-100 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、约300-400 mg、约400-500 mg或约500-600 mg/剂量的范围内的RNAi组分的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含约25 mg、约30 mg、约35 mg、约40 mg、约45 mg、约50 mg、约55 mg、约60 mg、约65 mg、约70 mg、约75 mg、约80 mg、约85 mg、约90 mg、约95 mg、约100 mg、约125 mg、约150 mg、约175 mg、约200 mg、约250 mg、约300 mg、约350 mg、约400 mg、约450 mg、约500 mg、约550mg或约600 mg/剂量的RNAi组分的一个或多个剂量。在一些实施方案中，试剂盒包含约25mg、约35 mg、约40 mg、约50 mg、约100 mg或约200 mg/剂量的RNAi组分的一个或多个剂量。
在另一个方面，还可以提供这样的试剂盒，其含有足够剂量的本文所述的组合物(包括其药物组合物)，以对于个体提供延长时期的有效治疗，例如1-3天、1-5天、1周、2周、3周、4周、6周、8周、1个周期、2个周期、3个周期、4个周期、5个周期、6个周期、7个周期、8个周期或更多。在一些实施方案中，一个治疗周期为约1-24个月、约1-3个月、约3-6个月、约6-9个月、约9-12个月、约12-18个月、约18-21个月或约21-24个月。在一些实施方案中，一个治疗周期为约1个月、约2个月、约3个月、约4个月、约5个月、约6个月、约7个月、约8个月、约9个月、约10个月、约11个月、约12个月、约15个月、约18个月、约21个月或约24个月。
在一些实施方案中，试剂盒还可以包括多个剂量，并且可以以足以在药房例如医院药房和调制药房中贮存和使用的数量进行包装。在某些实施方案中，试剂盒可以包括一定剂量量的如本文公开的至少一种组合物。
方法
本文还提供的是用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和衣壳组装调节剂。本文还提供的是用于治疗受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和衣壳组装调节剂。本文还提供的是用于治疗接受衣壳组装调节剂疗法的受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和衣壳组装调节剂。本文还提供的是用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其中向受试者施用与RNAi组分组合的有效量的式(I)的化合物。本文还提供的是用于治疗乙型肝炎病毒感染的方法，其包括使感染有乙型肝炎病毒感染的细胞与有效量的RNAi组分和衣壳组装调节剂接触。
在一些实施方案中，RNAi组分包括：(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；以及(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 5和SEQ ID NO: 14。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 14。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 7和SEQ ID NO: 15。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQID NO: 1和SEQ ID NO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 3和SEQ IDNO: 10、11或13。在一些实施方案中，第一RNAi试剂包含SEQ ID NO: 4和SEQ ID NO: 12。在一些实施方案中，第二RNAi试剂包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19。在一些实施方案中，第二RNAi试剂包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO：16、17或18。
在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 5和SEQ ID NO: 14的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 6和SEQ ID NO: 14的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO:9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 7和SEQ ID NO: 15的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 9和SEQ ID NO: 19的第二RNAi试剂。
在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 1和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO: 10、11或13的第一RNAi试剂，以及包含SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 16、17或18的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，RNAi组分包括包含SEQ ID NO: 4和SEQ ID NO: 12的第一RNAi试剂，以及包含SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO:16、17或18的第二RNAi试剂。
在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以约1:1、2:1、3:1、4:1或5:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以约2:1的比率施用。
在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约25-75 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBVRNAi试剂以每次剂量施用约50-125 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约75-150 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约100-200 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约150-250 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约200-300 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约300-400 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约50-100 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约25-400 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBVRNAi试剂以每次剂量施用约25-75 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约50-125 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约75-150 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约100-200 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约125-225 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约150-250 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约200-300 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约300-400 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约100 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约25 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约35 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBVRNAi试剂以每次剂量施用约40 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约50 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约75 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约200 mg的组合量和约2:1的比率施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约3-650 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约2-325 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约15-150 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约5-75 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约35-265 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约50-75 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约15-75 mg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约20-125 mg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-50 mg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约5-40 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约17 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约8 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约23 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约12 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约27 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约13 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约33 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约17 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约67 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约33 mg的量施用。
在一些实施方案中，两种RNAi试剂以每次剂量施用25-400 mg的组合剂量施用。在一个实施方案中，两种RNAi试剂以25-400 mg的组合剂量施用，并且第一RNAi试剂与第二RNAi试剂以1:1的比率施用。在一个实施方案中，对于约25 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约12 mg的量。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约17 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约20 mg的量。在一个实施方案中，对于约50 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约25 mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约50 mg的量。在一个实施方案中，对于约200 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约100 mg的量。在一个实施方案中，对于约300 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约150 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约200 mg的量。
在一个实施方案中，两种RNAi试剂以每个剂量25-400 mg的组合剂量施用，并且第一RNAi试剂与第二RNAi试剂以2:1的比率施用。在一个实施方案中，对于约25 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约16 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约8 mg的量。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约24 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约12 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约27 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约13 mg的量。在一个实施方案中，对于约50 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约33 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约17mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约65 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约35 mg的量。在一个实施方案中，对于约200 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约133 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约67 mg的量。在一个实施方案中，对于约300 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约200 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约100 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约270 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约135 mg的量。
在一个实施方案中，两种RNAi试剂以每个剂量25-400 mg的组合剂量施用，第一RNAi试剂与第二RNAi试剂以3:1的比率施用。在一个实施方案中，对于约25 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约18 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约6 mg的量。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约27 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约9 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约30 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约10 mg的量。在一个实施方案中，对于约50mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约36 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约12 mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约75 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约25 mg的量。在一个实施方案中，对于约200 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约150 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约50 mg的量。在一个实施方案中，对于约300 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约225 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约75 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约300 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约100 mg的量。
在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约1-10 mg/kg的组合量施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约1-5 mg/kg的组合量施用。在一些实施方案中，两种HBV RNAi试剂以每次剂量施用约1-1.5 mg/kg、约1.5-2.0 mg/kg、约2.0-2.5 mg/kg、约2.5-3.0 mg/kg、约3.0-3.5 mg/kg、约3.5-4.0 mg/kg、约4.0-4.5 mg/kg、约4.5-5.0 mg/kg、约5.0-5.5 mg/kg、约5.5-6.0 mg/kg、约6.0-6.5 mg/kg、约6.5-7.0mg/kg、约7.0-7.5 mg/kg、约7.5-8.0 mg/kg、约8.0-8.5 mg/kg、约8.5-9.0 mg/kg、约9.0-9.5 mg/kg、约9.5-10 mg/kg、约1-2.5 mg/kg、约2.5-5.0 mg/kg、约5.0-7.5 mg/kg、约7.5-10 mg/kg、约1-5.0 mg/kg、或约5.0-10 mg/kg的组合量施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约0.6-7 mg/kg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.3-5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.5-2.5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.3-1.5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约0.6-5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约1-2.5 mg/kg的量施用。
在一些实施方案中，以约1-18周的间隔施用两种RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1周的间隔、约2周的间隔、约3周的间隔、约4周的间隔、约5周的间隔、约6周的间隔、约7周的间隔、约8周的间隔、约9周的间隔、约10周的间隔、约11周的间隔、约12周的间隔、约13周的间隔、约14周的间隔、约15周的间隔、约16周的间隔、约17周的间隔或约18周的间隔施用两种RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1-6个月的间隔施用两种RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1个月的间隔、约2个月的间隔、约3个月的间隔、约4个月的间隔、约5个月的间隔或约6个月的间隔施用两种RNAi试剂。在一些实施方案中，以约4周的间隔或1个月的间隔施用两种RNAi试剂。在一些实施方案中，两种RNAi试剂每月施用一次。
在一些实施方案中，本文公开的是用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO:11的第一RNAi试剂、以及有效量的包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，本文公开的是用于治疗受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的受试者施用有效量的包含SEQ ID NO: 2和SEQ IDNO: 11的第一RNAi试剂、以及有效量的包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约2:1。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约3:1。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约1:1。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约4:1。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约5:1。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用的第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的比率为约1:2。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-400 mg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-50mg、50-75 mg、75-100 mg、100-125 mg、125-150 mg、150-175 mg、175-200 mg、200-225 mg、225-250 mg、250-275 mg、275-300 mg、300-325 mg、325-350 mg、350-375 mg、375-400 mg、25-75 mg、50-100 mg、100-150 mg、150-200 mg、200-250 mg、250-300 mg、300-350 mg、350-400 mg、25-100 mg、50-150 mg、100-200 mg、150-250 mg、200-300 mg、300-400 mg、25-200 mg或200-400 mg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂与第二RNAi试剂以每次剂量施用约25 mg、约50 mg、约100 mg、约125 mg、约150 mg、约175 mg、约200 mg、约225 mg、约250 mg、约275 mg、约300 mg、约325 mg、约350 mg、约375 mg或约400 mg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约50 mg、约75mg、约100 mg或约125 mg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25 mg、约35 mg、约40 mg或约200 mg的组合量施用。
在一些实施方案中，以约1-18周的间隔施用第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1周的间隔、约2周的间隔、约3周的间隔、约4周的间隔、约5周的间隔、约6周的间隔、约7周的间隔、约8周的间隔、约9周的间隔、约10周的间隔、约11周的间隔、约12周的间隔、约13周的间隔、约14周的间隔、约15周的间隔、约16周的间隔、约17周的间隔或约18周的间隔施用第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1-6个月的间隔施用第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，以约1个月的间隔、约2个月的间隔、约3个月的间隔、约4个月的间隔、约5个月的间隔或约6个月的间隔施用第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。在一些实施方案中，以约4周的间隔或1个月的间隔施用第一RNAi试剂和第二RNAi试剂。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂施用约1-12个月的持续时间。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂施用至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约4个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约12个月的持续时间。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂施用约1-18周的持续时间。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂施用至少约1周、至少约5周、至少约10周、至少约15周、至少约20周、至少约25周、至少约30周、至少约35周、至少约40周、至少约45周、至少约50周、至少约55周、至少约60周、至少约65周、至少约70周、至少约75周、至少约80周或至少约90周的持续时间。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐施用约24周或48周的持续时间。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-75 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约40-100 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约50-125 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约75-150 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约100-200 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约150-250 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约200-300mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约300-400 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约50-100 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约35-40 mg的组合量，以及约2:1、约3:1、约1:1、约4:1、约5:1或约1:2的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-400 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-75 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约35-40 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约50-125 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约75-150 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约100-200 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约125-225 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约150-250 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约200-300 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约300-400 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约100 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约25 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约35 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约40 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约50 mg的组合量和约2:1的比率施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约200 mg的组合量和约2:1的比率施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂以约3-650 mg的量施用，并且第二RNAi试剂以每次剂量施用约2-325 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约35-265 mg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约50-75 mg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约20-125 mg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约25-50 mg的量施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约1-10 mg/kg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约1-5mg/kg的组合量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用约1-1.5 mg/kg、约1.5-2.0 mg/kg、约2.0-2.5 mg/kg、约2.5-3.0 mg/kg、约3.0-3.5 mg/kg、约3.5-4.0 mg/kg、约4.0-4.5 mg/kg、约4.5-5.0 mg/kg、约5.0-5.5 mg/kg、约5.5-6.0 mg/kg、约6.0-6.5 mg/kg、约6.5-7.0 mg/kg、约7.0-7.5 mg/kg、约7.5-8.0 mg/kg、约8.0-8.5mg/kg、约8.5-9.0 mg/kg、约9.0-9.5 mg/kg、约9.5-10 mg/kg、约1-2.5 mg/kg、约2.5-5.0mg/kg、约5.0-7.5 mg/kg、约7.5-10 mg/kg、约1-5.0 mg/kg或约5.0-10 mg/kg的组合量施用。
在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.3-5 mg/kg的量施用，并且第一RNAi试剂以每次剂量施用约0.6-7 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.5-2.5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第二RNAi试剂以每次剂量施用约0.3-1.5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约0.6-5 mg/kg的量施用。在一些实施方案中，第一RNAi试剂以每次剂量施用约1-2.5 mg/kg的量施用。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每次剂量施用25-400 mg的组合剂量施用。在一个实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以25-400 mg的组合剂量施用，并且第一RNAi试剂与第二RNAi试剂以1:1的比率施用。在一个实施方案中，对于约25mg的组合剂量，第一RNAi试剂与第二RNAi试剂的剂量以约12 mg的量施用。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约17 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约20 mg的量。在一个实施方案中，对于约50 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约25 mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约50 mg的量。在一个实施方案中，对于约200 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约100 mg的量。在一个实施方案中，对于约300mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约150 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自的剂量为约200 mg的量。
在一个实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每个剂量25-400 mg的组合剂量施用，并且第二RNAi试剂与第一RNAi试剂以1:2的比率施用。在一个实施方案中，对于约25 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约16 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约8mg的量。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约12 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约24 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约27 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约13 mg的量。在一个实施方案中，对于约50 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约33 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约17 mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约35 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约65 mg的量。在一个实施方案中，对于约200 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约67 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约133 mg的量。在一个实施方案中，对于约300 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约100mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约200 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约135 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约270 mg的量。
在一个实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂以每个剂量25-400 mg的组合剂量施用，第二RNAi试剂与第一RNAi试剂以1:3的比率施用。在一个实施方案中，对于约25mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约18 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约6 mg的量。在一个实施方案中，对于约35 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约9 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约27 mg的量。在一个实施方案中，对于约40 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约30 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约10 mg的量。在一个实施方案中，对于约50 mg的组合剂量，第一RNAi试剂的剂量为约36 mg的量，并且第二RNAi试剂的剂量为约12 mg的量。在一个实施方案中，对于约100 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约25 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约75 mg的量。在一个实施方案中，对于约200mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约50 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约150 mg的量。在一个实施方案中，对于约300 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约75 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约225 mg的量。在一个实施方案中，对于约400 mg的组合剂量，第二RNAi试剂的剂量为约100 mg的量，并且第一RNAi试剂的剂量为约300 mg的量。
在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约1 mg/kg (mpk)的第一RNAi试剂和约1 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约1.5 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.5 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约2.0 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.0 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约3.0 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.0 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约3.2 mg/kg的第一RNAi试剂和约0.8 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约2.7 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.3 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约4.0 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.0 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约3.3 mg/kg的第一RNAi试剂和约1.7 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，向有此需要的受试者施用约0.05至约5 mg/kg的第一RNAi试剂和约0.05至约5 mg/kg的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，约第一RNAi试剂和约第二RNAi试剂是分开施用的(例如，在分开的注射中)。在一些实施方案中，相应剂量的第一RNAi试剂和相应剂量的第二RNAi试剂是一起施用的(例如，在同一注射中)。在一些实施方案中，相应剂量的第一RNAi试剂和相应剂量的第二RNAi试剂在单一药物组合物中进行制备。
在一些实施方案中，第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链，并且式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE066
(化合物A)或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐以约50-1000 mg、约50-75 mg、约75-100 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、约300-350 mg、约350-400 mg、约400-450 mg、约450-500 mg、约50-750 mg或约750-100 mg的量施用。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐以约100 mg、约150 mg、约200mg、约250 mg或约500 mg的量施用。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂(例如，化合物A)或药学上可接受的盐以约75 mg、约80 mg、约85 mg、约90 mg、约95 mg、约100 mg、约125 mg、约150 mg、约175 mg、约200 mg、约250 mg、约300 mg、约350 mg、约400 mg、约450 mg、约500mg、约550 mg或约600 mg的量施用。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐以约100 mg、约150 mg或约250 mg的量施用。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐施用至少约1周、至少约5周、至少约10周、至少约15周、至少约20周、至少约25周、至少约30周、至少约35周、至少约40周、至少约45周、至少约50周、至少约55周、至少约60周、至少约65周、至少约70周、至少约75周、至少约80周或至少约90周的持续时间。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐施用约24周或48周的持续时间。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐每天、每隔一天、每周、每2周、每3周或每月施用一次。
在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐配制为固体形式，例如片剂或胶囊。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂或药学上可接受的盐配制为液体形式，例如悬浮液、溶液、乳状液或糖浆剂，或者可以是冻干的。在一些实施方案中，RNAi组分配制为固体形式，例如片剂或胶囊。在一些实施方案中，RNAi组分配制用于皮下注射。在一些实施方案中，RNAi组分配制为液体形式，例如悬浮液、溶液、乳状液或糖浆剂，或者可以是冻干的。
在一些实施方案中， RNAi组分和衣壳组装调节剂同时或间歇地施用。在一些实施方案中，RNAi组分和衣壳组装调节剂分开配制并以不同的给药频率施用。在一些实施方案中，RNAi组分和衣壳组装调节剂配制为一种组合物或分开的组合物。在一些实施方案中，RNAi组分配制为溶液并且经由皮下注射每月施用一次。在一些实施方案中，衣壳组装调节剂配制为经口片剂并且每天施用一次。
在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约50-250 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约100-500 mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分以约50 mg、约75 mg、约100 mg或约125 mg的量施用。在一些实施方案中，式(I)的化合物以150 mg、200 mg、250 mg或300 mg的量施用。在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约100 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约250 mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分包括比率为2:1的包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO:11的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。CAM是式(I)的化合物(化合物A)：
Figure DEST_PATH_IMAGE068
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约25-200 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约75-300 mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分以约35 mg、约40 mg、约50 mg、约100 mg或约200 mg的量施用。在一些实施方案中，式(I)的化合物以75 mg、150 mg、250 mg或300 mg的量施用。在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约40 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约250 mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约100 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约250 mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分经由皮下注射以约200 mg的量每月施用一次，而式(I)的化合物以片剂的形式以约250mg的量每天施用一次。在一些实施方案中，RNAi组分包括比率为2:1的包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 11的第一RNAi试剂、以及包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。在一些实施方案中，式(I)的化合物是化合物A：
Figure DEST_PATH_IMAGE070
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该方法进一步包括施用核苷类似物。在一些实施方案中，核苷类似物是恩替卡韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺。在一些实施方案中，核苷类似物是拉米夫定(LAM)、替比夫定或阿德福韦。在一些实施方案中，核苷类似物是恩替卡韦，并且它以约0.01-5 mg、约0.01-0.05 mg、约0.05-0.1 mg、约0.1-0.5 mg、约0.5-1mg、约1-2 mg、约2-3 mg、约3-4 mg或约4-5 mg的量施用。在一些实施方案中，核苷类似物是恩替卡韦，并且它以约0.5 mg的量施用。在一些实施方案中，核苷类似物是富马酸替诺福韦二吡呋酯，并且它以约100-500 mg、约100-150 mg、约150-200 mg、约200-250 mg、约250-300 mg、300-400 mg、约400-500 mg的量施用。在一些实施方案中，核苷类似物是富马酸替诺福韦二吡呋酯，并且它以约300 mg的量施用。在一些实施方案中，核苷类似物是替诺福韦艾拉酚胺，并且它以约5-100 mg、约5-25 mg、约25-50 mg、约50-75或约75-100 mg的量施用。在一些实施方案中，核苷类似物是替诺福韦艾拉酚胺，并且它以约25 mg的量施用。在一些实施方案中，患者在组合疗法之前已暴露于核苷类似物。在一些实施方案中，在接受组合疗法之前，患者已施用核苷类似物至少1个月、至少3个月、至少6个月或至少1年。
在一些实施方案中，在施用组合疗法之前，患者就HBeAg状态进行筛选。在一些实施方案中，患者为HBeAg阳性。在一些实施方案中，患者为HBeAg阴性。
在一些实施方案中，患者中的HBsAg水平距离在第1天时的基线减少了至少约log100.5、约log10 0.75、约log10 1、约log10 1.25、约log10 1.5、约log10 1.75、约log10 2或约log102.5。在一些实施方案中，患者中的HBeAg水平距离在第1天时的基线减少了至少约log100.5、约log10 0.75、约log10 1、约log10 1.25、约log10 1.5、约log10 1.75、约log10 2或约log102.5。在一些实施方案中，患者中的HBcrAg水平距离在第1天时的基线减少了至少约log100.5、约log10 0.75、约log10 1、约log10 1.25、约log10 1.5、约log10 1.75、约log10 2或约log102.5。在一些实施方案中，患者中的HBV DNA水平距离在第1天时的基线减少了至少约log100.5、约log10 1、约log10 1.5、约log10 2、约log10 3、约log10 4、约log10 5或约log10 7.5。在一些实施方案中，患者中的HBV RNA水平距离在第1天时的基线减少了至少约log10 0.5、约log10 0.75、约log10 1、约log10 1.25、约log10 1.5、约log10 1.75、约log10 2或约log10 2.5。
在一些实施方案中，在施用RNAi组分之前，患者已接受衣壳组装调节剂至少约1个月、约3个月、约6个月或约1年。
示例性实施方案
下述实施方案是示例性的，并且不应被视为限制如本文所述的本发明。
实施方案1一种用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE072
，
或其药学上可接受的盐。
实施方案2一种用于治疗受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中所述方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE074
，
或其药学上可接受的盐。
实施方案3一种治疗接受衣壳组装调节剂疗法的受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症的方法，其中：
所述衣壳组装调节剂疗法是式(I)的化合物：
Figure DEST_PATH_IMAGE076
，
或其药学上可接受的盐；和
该方法包括向受试者施用有效量的RNAi组分，其中所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19。
实施方案4实施方案3的方法，其中所述受试者进一步接受核苷类似物疗法。
实施方案5一种治疗乙型肝炎病毒感染的方法，其包括使感染有乙型肝炎病毒感染的细胞与有效量的RNAi组分和式(I)的化合物、或前述的治疗上有效的代谢物接触，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE078
或其药学上可接受的盐。
实施方案6实施方案1-5中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂包含至少一个修饰的核苷酸或至少一个修饰的核苷间键。
实施方案7实施方案1-6中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。
实施方案8实施方案1-7中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂进一步包含与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂缀合的靶向配体。
实施方案9实施方案8的方法，其中所述靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。
实施方案10实施方案9的方法，其中所述靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。
实施方案11实施方案10的方法，其中所述靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。
实施方案11实施方案8-11中任何一个的方法，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链缀合。
实施方案13实施方案12的方法，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。
实施方案14实施方案1-13中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQ ID NO: 10的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案15实施方案1-14中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，并且所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案16实施方案1-15中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。
实施方案17实施方案16的方法，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。
实施方案18实施方案1-5中任何一个的方法，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，并且所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链。
实施方案19实施方案1-18中任何一个的方法，其中所述式(I)的化合物是式(I)的化合物的药学上可接受的盐：
Figure DEST_PATH_IMAGE080
。
实施方案20实施方案1-18中任何一个的方法，其中所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE082
。
实施方案21实施方案1-20中任何一个的方法，其中所述RNAi组分以约50-200 mg的剂量每月一次施用于受试者。
实施方案22实施方案1、2和5-21中任何一个的方法，其中所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以约100-500 mg的日剂量施用于受试者。
实施方案23实施方案1-22中任何一个的方法，其中所述RNAi组分经由静脉内注射或皮下注射施用于受试者。
实施方案24实施方案1、2和5-23中任何一个的方法，其中所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐经口施用于受试者。
实施方案25实施方案3或4的方法，其中所述RNAi组分与所述衣壳组装调节剂同时或序贯施用。
实施方案26实施方案3或4的方法，其中所述RNAi组分与所述衣壳组装调节剂分开施用。
实施方案27实施方案3或4的方法，其中所述受试者已接受衣壳组装调节剂疗法至少约1个月。
实施方案28实施方案1-3和5-27中任何一个的方法，其进一步包括向所述受试者施用核苷类似物。
实施方案29实施方案4或28的方法，其中所述核苷类似物是恩替卡韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺。
实施方案30实施方案29的方法，其中所述恩替卡韦以约0.1-5 mg的日剂量施用于受试者。
实施方案31实施方案29的方法，其中所述富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺以约5-50 mg替诺福韦艾拉酚胺或约200-500 mg富马酸替诺福韦二吡呋酯的日剂量施用于受试者。
实施方案32一种试剂盒，其包含有效量的RNAi组分和式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE084
或其药学上可接受的盐。
实施方案33实施方案32的试剂盒，其进一步包括用于执行实施方案1-31的任何一种方法的说明书。
实施方案34实施方案32-33中任何一个的试剂盒，其进一步包含药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或前述任何的组合。
实施方案35实施方案32-34中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂包含至少一个修饰的核苷酸或至少一个修饰的核苷间键。
实施方案36实施方案32-35中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。
实施方案37实施方案32-36中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂进一步包含与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂缀合的靶向配体。
实施方案38实施方案37的试剂盒，其中所述靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。
实施方案39实施方案38的试剂盒，其中所述靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。
实施方案40实施方案39的试剂盒，其中所述靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。
实施方案41实施方案37-40中任何一个的试剂盒，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链缀合。
实施方案42实施方案41的试剂盒，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。
实施方案43实施方案32-42中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQ ID NO: 10的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案44实施方案32-43中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，并且所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案45实施方案32-44中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。
实施方案46实施方案45的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。
实施方案47实施方案32-34中任何一个的试剂盒，其中所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，并且所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链。
实施方案48实施方案42-47中任何一个的试剂盒，其中所述式(I)的化合物是以下的药学上可接受的盐
Figure DEST_PATH_IMAGE086
。
实施方案49实施方案32-47中任何一个的试剂盒，其中所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE088
。
实施方案50实施方案32-49中任何一个的试剂盒，其中所述RNAi组分和式(I)的化合物或其药学上可接受的盐配制为两种分开的组合物。
实施方案51实施方案50的试剂盒，其中所述RNAi组分配制用于对受试者静脉内注射或皮下注射。
实施方案52实施方案50或51的试剂盒，其中所述式(I)的化合物或其药学上可接受的盐配制用于对受试者经口施用。
实施方案53一种包含RNAi组分和式(I)的化合物的组合物，其中
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE090
或其药学上可接受的盐。
实施方案54实施方案53的组合物，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。
实施方案55实施方案53-54中任何一个的组合物，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂进一步包含与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂缀合的靶向配体。
实施方案56实施方案55的组合物，其中所述靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。
实施方案57实施方案56的组合物，其中所述靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。
实施方案58实施方案57的组合物，其中所述靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。
实施方案59实施方案55-58中任何一个的组合物，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链缀合。
实施方案60实施方案59的组合物，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。
实施方案61实施方案53-60中任何一个的组合物，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQ ID NO: 10的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案62实施方案55-61中任何一个的组合物，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案63实施方案53-62中任何一个的组合物，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。
实施方案64实施方案63的组合物，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。
实施方案65实施方案53或54的组合物，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQID NO: 11的有义链，并且所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQID NO: 16的有义链。
实施方案66实施方案53-65中任何一个的组合物，其中所述化合物是式(I)的药学上可接受的盐
Figure DEST_PATH_IMAGE092
。
实施方案67实施方案53-65中任何一个的组合物，其中所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE094
。
实施方案68一种药物组合物，其包含有效量的实施方案53-67中任何一个的组合物，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或前述任何的组合。
实施方案69一种制造物品，其包括封装实施方案53-67中任何一个的组合物或实施方案68的药物组合物的容器。
实施方案70在制造药剂中的有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，所述药剂用于治疗受试者的由乙型肝炎病毒引起的病毒感染，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE096
或其药学上可接受的盐。
实施方案71在制造药剂中的有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，所述药剂用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE098
或其药学上可接受的盐。
实施方案72一种用于抑制有此需要的受试者的乙型肝炎病毒基因表达的式(I)的化合物，其中向所述受试者施用与RNAi组分组合的有效量的式(I)的化合物，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE100
或其药学上可接受的盐。
实施方案73一种包含RNAi组分和式(I)的化合物的组合，其中
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQID NO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQID NO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO:16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE102
或其药学上可接受的盐。
实施方案74实施方案73的组合，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。
实施方案75实施方案73或实施方案74的组合，其中所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂进一步包含与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂缀合的靶向配体。
实施方案76实施方案75的组合，其中所述靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。
实施方案77实施方案76的组合，其中所述靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。
实施方案78实施方案77的组合，其中所述靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。
实施方案79实施方案75-78中任何一个的组合，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链缀合。
实施方案80实施方案79的组合，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。
实施方案81实施方案73-80中任何一个的组合，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQ ID NO: 10的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案82实施方案75-81中任何一个的组合，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
实施方案83实施方案73-82中任何一个的组合，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。
实施方案84实施方案83的组合，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。
实施方案85实施方案73或实施方案74的组合，其中所述第一RNAi试剂和第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链，并且所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链。
实施方案86实施方案73-85中任何一个的组合，其中所述化合物是式(I)的药学上可接受的盐
Figure DEST_PATH_IMAGE104
。
实施方案87实施方案73-85中任何一个的组合，其中所述式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE106
。
实施方案88一种药物组合物，其包含有效量的实施方案73-87中任何一个的组合，以及药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或前述任何的组合。
实施方案89一种制造物品，其包括封装用于实施方案73-87中任何一个的组合或实施方案88的药物组合物的容器。
实施方案90一种试剂盒，其包含实施方案73-87中任何一个的组合。
实施方案91实施方案90的试剂盒，其中所述RNAi组分在第一容器内，并且所述式(I)的化合物在第二容器内。
实施方案92实施方案90的试剂盒，其中所述RNAi组分和式(I)的化合物在同一容器中。
实施例
提供下述实施例以说明而非限制本发明。本领域技术人员将认识到可以使用本领域普通技术人员已知的方法修改下述程序。
实施例1. 组合疗法的临床研究
进行了多场所、I/2a期人临床试验，其评价了包含RNAi组分和衣壳组装调节剂的组合在正常成人志愿者中的安全性、耐受性、药代动力学和药效学效应。该研究设计为评估组合疗法在慢性乙型肝炎(CHB)患者中的安全性和药理学效应以及其它结果。该组合包含化合物A和RNAi组分，所述RNAi组分包含比率为2:1的包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 11的第一RNAi试剂、以及有效量的包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。研究受试者群体包括18-55岁、患有或不患有CHB的成年男性和女性。
给予受试者(1)以单一剂量或以特定时间间隔的多个剂量(取决于患者队列)作为皮下注射的25-400 mg RNAi组分，并且在一个队列中，还给予受试者(2)每天一次(从第1天到第84天，包括端点在内)作为经口片剂(25 mg和100 mg)的250 mg化合物A。所有HBV队列中的所有患者从第1天开始接受NA (以批准剂量的TDF或ETV (对于TDF为245 mg或对于ETV为0.5 mg))。安全性评价包括：生命体征评价(静息心率、血压、呼吸频率、温度)；临床实验室测量(生物化学、血液学、血液凝固、尿分析)；静息ECG测量；患者的其它同时用药/疗法的变化评价；注射部位的评价；以及EOS妊娠后90天的随访电话。基于安全性/耐受性数据(不良事件的发生率、血液样品分析)；药代动力学数据(RNAi组分/NUC(核苷(酸)抑制剂)/化合物A血浆浓度)；和药效学数据(免疫学和病毒学评价)的组合进行功效评估。研究参数概括于表4中。
Figure DEST_PATH_IMAGE108
Figure DEST_PATH_IMAGE110
在RNAi组分的单一皮下剂量后，对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天一次250mg化合物A和(3) NA的个体参与者(队列12)，距离基线的HBsAg变化和平均HBsAg下降显示于图1和2 (直到第29天)中。在第1天、第29天和第57天时RNAi组分的三个皮下剂量后，对于接受(1) 200 mg RNAi组分、(2)每天一次250 mg化合物A和(3) NA的个体参与者(队列12)，距离基线的HBsAg变化和平均HBsAg下降显示于图3A、3B、3C (分别为直到第85天、直到第168天和直到第336天)和图4 (直到第85天)中。
此处还报告的是探索了RNAi组分、化合物A和NA的三重组合疗法的队列(即队列12)。直到第113天(即，RNAi组分给药后两个月，以及化合物A给药后一个月)的功效和安全性数据。在队列12中，其为HBeAg阳性或阴性、经历NA (无论HBV DNA水平如何)或未接受过NA的CHB患者被纳入，并且接受下述三重组合治疗：(1)三个200 mg RNAi组分皮下剂量(即在第1天、第29天、第57天时)；(2) 每天一次的经口化合物A 250 mg，共12周(即直到第85天)；以及(3)所有患者在第1天时起始或继续NA (ETV或TDF)治疗，所述治疗在化合物A给药结束后继续。研究就诊在筛选时以及在第1天、第8天、第15天、第29天、第43天、第57天、第85天和第113天时，随后为大约每2个月的延长随访，共12个月。评价了血清病毒参数，即HBVDNA (定量下限[LLOQ]：20 IU/mL)、HBV RNA (LLOQ：1.65 log10 U/mL4)、HBsAg (LLOQ：0.05IU/mL)、HBeAg (LLOQ：0.01 PEIU/mL；低于0.11 PEIU/mL的值报告为未检测到)和HBcrAg(LLOQ：1 kU/mL)。安全性评价包括从筛选直到第113天(如此处报告的)以及直到延长的随访期评价的临床实验室评价和不良事件(AE)。
关于队列12的基线特性和人口统计信息显示于表5中。所有患者都接受了其计划的RNAi组分、化合物A和NA剂量，没有治疗中断或剂量调整。
表5
Figure DEST_PATH_IMAGE112
BMI：体重指数；HBeAg：乙型肝炎e抗原；HBsAg：乙型肝炎表面抗原；NA：核苷(酸)类似物；SEM：平均值的标准误差。
在第1天、第29天和第57天时RNAi组分的三个皮下剂量后，对于接受(1) 200 mgRNAi组分、(2)每天一次250 mg化合物A和(3) NA的个体参与者(队列12)，距离基线的HBsAg变化和平均HBsAg下降显示于图5A、5B、5C (分别为直到第113天、直到第168天和直到第336天)和图6 (直到第113天)中。无论基线HBsAg水平如何，HBsAg水平在队列12中的所有患者中在治疗期间都下降。在第113天(在三个RNAi组分剂量后的通常平均最低点，在最后一次剂量后56天)，距离第1天的平均HBsAg (平均值的标准误差[SEM]) log10 IU/mL减少为1.7(0.11)，n=12。
在第1天、第29天和第57天时RNAi组分的三个皮下剂量后，对于接受(1) 200 mgRNAi组分、(2)每天一次的250 mg化合物A和(3) NA的个体参与者(队列12)，距离基线在第113天时的HBsAg变化显示于图7中。队列12中的所有12个患者达到处于最低点的距离第1天≥1.0 log10 IU/mL的HBsAg减少，其对于1个患者为第85天，且对于11个患者为第113天。对于HBeAg阳性和阴性患者观察到类似的应答。队列12中其为HBeAg阴性(N=4，平均最低点：-1.52 log10 IU/mL)和HBeAg阳性(N=8，平均最低点：-1.76 log10 IU/mL)的个体参与者显示了距离基线在第113天时的类似HBsAg减少。所有患者在第1天时都具有HBsAg >100 IU/mL，并且在用RNAi组分、化合物A和NA治疗12周后，10/12个患者达到HBsAg <100 IU/mL。
在第1天、第29天和第57天时RNAi组分的三个皮下剂量后，对于接受(1) 200 mgRNAi组分、(2)每天一次的250 mg化合物A和(3) NA的个体参与者(队列12)，距离基线的HBVDNA、HBV RNA、HBeAg和HBcrAg变化分别显示于图8A-8D中。在第1天时具有>1000 IU/mL HBVDNA的所有患者(N=6，3.7-7.7 log10 IU/mL)具有HBV DNA的快速下降。这六个患者之一在第1天时具有高HBV DNA水平(7.7 log10 IU/mL)，其在第113天时下降至3.5 log10 IU/mL。一个患者具有在基线时>LLOQ且<1000 IU/mL的HBV DNA (33 IU/mL)，并且具有处于或略高于LLOQ的持续地低HBV DNA水平(最高值为在第71天时的54 IU/mL) - 此处不包括这些数据。并且该患者在研究起始前已处于NA治疗大约七年。在第1天时具有可定量HBV RNA (1.75-7.5 log10 U/mL)的9个患者中，6个患者到第29天具有<LLOQ的水平。在第1天时对于HBeAg(N=4)或HBcrAg (N=8)呈阳性的患者具有这些参数的减少，尽管这些减少一般不如其它参数那样明显。
截至安全性数据截止值(cutoff)，与共12周每天一次的250 mg化合物A和每天一次的NA组合的三个剂量的200 mg Q4w RNAi组分在CHB患者中一般是良好耐受的。没有报告死亡、中断、严重不良事件或重度不良事件。报告了与治疗无关的轻度呼吸道感染的两个AE。在生命体征、12导联心电图、血液学或临床化学参数方面没有具有临床意义的发现。唯一值得注意的治疗出现的实验室发现是1级，短暂的孤立的丙氨酸氨基转移酶升高(n=5个患者，57–122 U/L)，其随着继续给药而消退，并且潜在地由病毒参数的减少诱导。
这种三重组合是良好耐受的，并且所有CHB患者都达到HBsAg、HBV DNA和HBV RNA的显著减少。在给药期过程中，HBeAg和HBcrAg的减少一般较不明显。所有患者都达到≥1.0log10 IU/mL (90%)的HBsAg减少(最低点范围为–1.01至–2.26 log10 IU/mL)。HBsAg减少在HBeAg阳性患者和HBeAg阴性患者中是类似的。对于这种三重组合的更长持续时间的研究正在进行中，其旨在评价CHB患者中的功能治愈率。
此处还报告的是在队列1b、1c和2b-5b中收集的功效和安全性数据。在队列1b、1c和2b-5b中，HBeAg阳性或阴性、经历NA或未接受过NA的CHB患者被纳入，并且在第1天、第27天和第57天时接受25、50、100、200、300或400 mg Q4w的三个皮下RNAi组分剂量。所有患者都在第1天时起始(未接受过NA的)或继续(经历NA的)每天一次的NA (TDF或ETV)治疗，并且在RNAi组分给药结束后继续。研究就诊在筛选时以及在第1天、第8天、第15天、第29天、第43天、第57天、第85天和第113天时，随后为大约每2个月的延长随访，共12个月。评价了血清病毒参数，即HBV DNA (定量下限[LLOQ]：20 IU/mL)、HBV RNA (LLOQ：1.65 log10 U/mL4)、HBsAg (LLOQ：0.05 IU/mL)、HBeAg (LLOQ：0.01 PEIU/mL；低于0.11 PEIU/mL的值报告为未检测到)和HBcrAg (LLOQ：1 kU/mL)。安全性评价包括从筛选直到第113天(如此处报告的)以及直到延长的随访期评价的临床实验室评价和不良事件(AE)。
关于队列1b、1c、2b、3b、4b和5b的基线特性和人口统计信息显示于表6中。大多数患者都是经历NA的(40/48，83%)。所有患者都接受了其计划的RNAi组分剂量，没有治疗中断。
表6
Figure DEST_PATH_IMAGE114
AA：非裔美国人；BMI：体重指数；HBeAg：乙型肝炎e抗原；HBsAg：乙型肝炎表面抗原；NA：核苷(酸)类似物；SEM：平均值的标准误差。
对于队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的CHB患者，从第1天到第113天的平均HBsAg变化显示于图9中。在第1天、第29天和第57天时给予患者以下量的RNAi组分的三个皮下剂量：25mg (队列1b)、50 mg (队列1c)、100 mg (队列2b)、200 mg (队列3b)、300 mg (队列4b)或400 mg (队列5b)。并且所有患者都每天给予NA一次。在评估的所有剂量下，RNAi组分都减少了HBsAg水平。在第113天(在三个剂量后的通常平均最低点，在最后一次剂量后56天)，距离第1天的平均HBsAg (SEM) log10减少对于25 mg为1.00 (0.18)，对于50 mg为1.18(0.08)，对于100 mg为1.54 (0.18)，对于200 mg为1.71 (0.15)，对于300 mg为1.48(0.11)且对于400 mg RNAi组分为1.75 (0.16)。
对于队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的所有患者，距离第1天在第113天时的平均和个别HBsAg变化显示于图10中。达到处于最低点的距离第1天≥ 1.0 log10的HBsAg减少、具有第113天数据的患者的比例为4/8 (25 mg)、6/8 (50 mg)、7/8 (100 mg)、8/8 (200 mg)、8/8 (300 mg)和8/8 (400 mg)。对于HBeAg阳性和阴性患者观察到类似的应答。HBeAg阳性患者(n=11)呈现了-1.52 log10 IU/mL (平均最低点)的HBsAg减少。HBeAg阴性患者(n=37)呈现了-1.62 log10 IU/mL (平均最低点)的HBsAg减少。接受200 mg的一个患者在第113天具有无法检测的HBsAg，并且在HBsAg血清清除前的第15天时达到了1.6 log10减少。对于HBsAg >100 IU/mL (第1天)且具有第113天数据的患者，2/7 (25 mg)、3/8 (50 mg)、5/7(100 mg)、5/6 (200 mg)、6/8 (300 mg)和5/7 (400 mg)对于RNAi组分治疗达到了HBsAg <100 IU/mL。
对于在第1天、第29天和第57天时接受25 mg (队列1b)、50 mg (队列1c)、100 mg(队列2b)、200 mg (队列3b)、300 mg (队列4b)或400 mg (队列5b)的个体参与者(队列1b、1c、2b、3b、4b和5b)，HBV DNA、HBV RNA、HBeAg和HBcrAg变化显示于图11A-11D中。所有患者都每天给予NA一次。对于在第1天时具有可测量参数的患者，患者具有HBV DNA和HBV RNA水平的显著下降，并且对于RNAi组分治疗，HBeAg和HBcrAg的减少较不明显。
对于队列1b、1c、2b、3b、4b和5b中的参与者，直到且包括治疗的第113天出现的可能或很可能与药物有关的不良事件(AE)显示于下表7中。关于队列1b至5b直到第113天的安全性数据显示了，伴随NA以25-400 mg的RNAi组分的三个每月一次剂量在CHB患者中一般是良好耐受的。报告了与药物无关的三个严重不良事件(单个患者中的焦虑伴抑郁和月经过多，各自需要住院治疗)。最常报告的至少可能与药物有关的AE由在注射部位处的各种AE(例如，变色、红斑、瘀伤、皮疹)组成，所述AE都是轻度的，并且在5个患者中报告。没有血小板减少症的报告，并且存在可能与药物有关的1期急性肾损伤的报告，具有肌酐增加(从剂量前第1天的1.10 mg/dL到第8天时的峰值1.55 mg/dL，并且在第15天时恢复到1.06 mg/dL)，其为治疗紧急情况，但可能是由于肌酸补充，并未导致治疗中断或调整。报告了轻度、可能有关的异常肝功能测试(峰值丙氨酸氨基转移酶[ALT] 136 U/L)的单一AE，其代表队列1b至5b中直到第113天(研究结束)的治疗出现的最高ALT升高。不存在ALT >3x正常上限和总胆红素>2x正常上限的同时升高的情况。
表7
Figure DEST_PATH_IMAGE116
a基于相似性聚集的MedDRA优选术语
在CHB患者中，伴随NA的RNAi组分具有针对HBsAg、HBV DNA和HBV RNA的强活性。HBeAg和HBcrAg的减少一般是较不明显的。HBsAg减少在HBeAg阳性患者和HBeAg阴性患者中是类似的。使用100–400 mg RNAi组分的扩展队列确认了先前发现：HBsAg下降对于这些剂量是类似的；这些患者中的97% (31/32)达到≥1.0 log10 (90%)的HBsAg减少。25 mg和50mg RNAi组分剂量在减少HBsAg方面是活性的，并且似乎不如更高剂量有效。对于RNAi组分的HBsAg应答与其使来自cccDNA和宿主整合的病毒DNA (其为某些CHB群体中HBsAg的主要来源)的HBV RNA沉默的能力一致。RNAi组分(和NA)治疗对于三个剂量在直到400 mg Q4w的剂量下是良好耐受的。总体而言，RNAi组分证实了对于RNAi疗法期望的抗HBV特性。更长持续时间的研究正在进行中，包括旨在CHB患者中的功能性治愈的三重组合。
实施例2. 组合疗法的临床研究
进行了2b期、多中心、双盲、活性对照、剂量发现、随机化研究，以调查包括RNAi组分和/或衣壳组装调节剂的不同组合方案用于治疗慢性乙型肝炎(CHB)病毒感染的功效和安全性。研究受试者群体包括患有CHB、18-65岁的成年男性和女性。该组合包含化合物A和RNAi组分，所述RNAi组分包含比率为2:1的有效量的包含SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 11的第一RNAi试剂、以及有效量的包含SEQ ID NO: 16和SEQ ID NO: 8的第二RNAi试剂。
给予受试者以下的组合：(1)通过皮下注射的40 mg、100 mg或200 mg每月一次的RNAi组分，或相应的安慰剂；以及(2)作为经口片剂的250 mg每天一次的化合物A (25 mg和100 mg)，或相应的安慰剂；以及(3)作为经口片剂(ETV 0.5 mg；TDF 300 mg；TAF 25 mg)的NA (ETV：未接受过核苷的患者 = 每天一次0.5 mg；拉米夫定难治性患者 = 每天一次1mg；TDF = 每天一次300 mg；TAF：每天一次25 mg)。在总共4周的随后筛选阶段中，积极治疗阶段持续直到48周。本研究的主要假设是一种或多种组合方案比单独的NA治疗更有效，如通过主要功效终点(在第48周完成所有研究干预后24周，具有HBsAg血清清除的参与者比例)测量的。在48周后，满足NA治疗完成标准的参与者完成用RNAi组分、化合物A和NA的治疗，并且在随访阶段过程中密切监测。并不满足NA治疗完成标准的参与者在48周的随访期过程中继续接受NA治疗，其可以延长至最多96周的持续时间。安全性和功效评价标准以及研究参数概括于表8中。
表8
Figure DEST_PATH_IMAGE118
Figure DEST_PATH_IMAGE120
Figure DEST_PATH_IMAGE122
Figure IDA0003417314680000011
Figure IDA0003417314680000021
Figure IDA0003417314680000031
Figure IDA0003417314680000041
Figure IDA0003417314680000051

Claims (28)

1.一种包含RNAi组分和式(I)的化合物的组合，其用于在治疗受试者的与由乙型肝炎病毒引起的感染相关的疾病或病症中使用，其中向所述受试者施用有效量的RNAi组分和式(I)的化合物，其中：
(a)所述RNAi组分包括
(i)包含以下的第一RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 6和SEQ IDNO: 7，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、SEQ ID NO: 14和SEQ ID NO: 15；和
(ii)包含以下的第二RNAi试剂：包含下述任何一个的核苷酸序列的反义链：SEQ IDNO: 8和SEQ ID NO: 9，以及包含下述任何一个的核苷酸序列的有义链：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18和SEQ ID NO: 19；和
(b)式(I)的化合物是
Figure 363735DEST_PATH_IMAGE002
或其药学上可接受的盐。
2.权利要求1的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂或所述第二RNAi试剂包含至少一个修饰的核苷酸或至少一个修饰的核苷间键。
3.权利要求1或权利要求2的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂和所述第二RNAi试剂中的基本上所有核苷酸都是修饰的核苷酸。
4.权利要求1-3中任一项的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂或所述第二RNAi试剂进一步包含与所述第一RNAi试剂或所述第二RNAi试剂缀合的靶向配体。
5.权利要求4的用于使用的组合，其中所述靶向配体包含N-乙酰半乳糖胺。
6.权利要求5的用于使用的组合，其中所述靶向配体选自(NAG13)、(NAG13)s、(NAG18)、(NAG18)s、(NAG24)、(NAG24)s、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG26)s、(NAG27)、(NAG27)s、(NAG28)、(NAG28)s、(NAG29)、(NAG29)s、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG32)、(NAG32)s、(NAG33)、(NAG33)s、(NAG34)、(NAG34)s、(NAG35)、(NAG35)s、(NAG36)、(NAG36)s、(NAG37)、(NAG37)s、(NAG38)、(NAG38)s、(NAG39)和(NAG39)s。
7.权利要求6的用于使用的组合，其中所述靶向配体是(NAG25)、(NAG25)s、(NAG31)、(NAG31)s、(NAG37)或(NAG37)s。
8.权利要求4-7中任一项的用于使用的组合，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或所述第二RNAi试剂的有义链缀合。
9.权利要求8的用于使用的组合，其中所述靶向配体与所述第一RNAi试剂或所述第二RNAi试剂的有义链的5'末端缀合。
10.权利要求1-9中任一项的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂和所述第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 1的反义链和包含SEQ ID NO: 10的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 3的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 17的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
11.权利要求1-10中任一项的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂和所述第二RNAi试剂各自独立地缀合至包含N-乙酰半乳糖胺的靶向配体，并且所述第一RNAi试剂和所述第二RNAi试剂独立地包含选自以下的双链体：
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 11的有义链；
包含SEQ ID NO: 4的反义链和包含SEQ ID NO: 12的有义链；
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 16的有义链；
包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ ID NO: 13的有义链；和
包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ ID NO: 18的有义链。
12.权利要求1-11中任一项的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率在约1:2至约5:1的范围内。
13.权利要求12的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂与所述第二RNAi试剂按重量计的比率为约2:1。
14.权利要求1的用于使用的组合，其中所述第一RNAi试剂和所述第二RNAi试剂各自独立地缀合至(NAG37)s，所述第一RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 2的反义链和包含SEQ IDNO: 11的有义链，并且所述第二RNAi试剂包括包含SEQ ID NO: 8的反义链和包含SEQ IDNO: 16的有义链。
15.权利要求1-14中任一项的用于使用的组合，其中式(I)的化合物是式(I)的化合物的药学上可接受的盐：
Figure 749717DEST_PATH_IMAGE004
。
16.权利要求1-14任一项的用于使用的组合，其中式(I)的化合物是
Figure DEST_PATH_IMAGE006
。
17.权利要求1-16中任一项的用于使用的组合，其中所述RNAi组分以约40-200 mg的剂量每月一次施用于受试者。
18.权利要求1-16中任一项的用于使用的组合，其中所述RNAi组分以约50-200 mg的剂量每月一次施用于受试者。
19.权利要求1-18中任一项的用于使用的组合，其中式(I)的化合物或其药学上可接受的盐以约100-500 mg的日剂量施用于受试者。
20.权利要求1-19中任一项的用于使用的组合，其中所述RNAi组分经由静脉内注射或皮下注射施用于受试者。
21.权利要求1-20中任一项的用于使用的组合，其中式(I)的化合物或其药学上可接受的盐经口施用于受试者。
22.权利要求1-21中任一项的用于使用的组合，其中所述RNAi组分与式(I)的化合物同时或序贯施用。
23.权利要求1-21中任一项的用于使用的组合，其中所述RNAi组分与式(I)的化合物分开施用。
24.权利要求1-21中任一项的用于使用的组合，其中所述受试者已接受式(I)的化合物至少约1个月。
25.权利要求1-24中任一项的用于使用的组合，其中所述组合进一步包含核苷类似物。
26.权利要求25的用于使用的组合，其中所述核苷类似物是恩替卡韦、富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺。
27.权利要求26的用于使用的组合，其中所述核苷类似物是以约0.1-5 mg的日剂量施用于受试者的恩替卡韦。
28.权利要求26的用于使用的组合，其中所述核苷类似物是以约5-50 mg替诺福韦艾拉酚胺或约200-500 mg富马酸替诺福韦二吡呋酯的日剂量施用于受试者的富马酸替诺福韦二吡呋酯或替诺福韦艾拉酚胺。
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