CN114028565A - 一种治疗乳腺癌的3d-cof载药体系及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种治疗乳腺癌的3D‑COF载药体系及其制备方法。本发明的3D‑COF载药体系可以实现将光敏剂ICG与缺氧激活药物AQ4N通过TPB‑DMTP‑COF共递送进入肿瘤细胞内，一方面能够解决ICG在水溶液中的不稳定性和分散性差的问题，另一方面ICG在808nm近红外光源照射下同时发挥光动和光热效应杀死肿瘤细胞，同时光动力治疗后的深度乏氧微环境激活AQ4N转化为AQ4抗肿瘤药物，ICG与AQ4N的协同作用提高了肿瘤细胞的治疗效率。

Description

一种治疗乳腺癌的3D-COF载药体系及其制备方法
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种治疗乳腺癌的3D-COF载药体系及其制备方法。
背景技术
乳腺癌是全球女性中最常见，也是致死率最高的癌症类型。这其中的一个重要原因是，乳腺癌作为一种异质性肿瘤，有着较高的恶化概率和转移风险。多数患者在前往就诊时，乳腺癌已发生转移，使得手术治疗后痊愈的概率也比较低。因此乳腺癌患者术后需要配合进行化疗。
肿瘤的光动力治疗是FDA于1996年批准应用于临床的一种治疗手段，它是利用肿瘤细胞代谢活跃的特点，在注射光敏剂后，肿瘤组织内浓度明显高于周围正常组织，在适当时间用特定波长的激光照射肿瘤组织，激活光敏剂将光能转化为化学能，产生活性氧，特异性破坏肿瘤细胞及肿瘤新生血管。近年来其所独有的微创性，高选择性，毒性低微以及可重复治疗等特点被认为在药物治疗方面有着较大的潜力。而利用药物载体进行光动力与其他方法联合抗肿瘤治疗的方案也因此得到了广泛的关注和研究。
吲哚菁绿(ICG)能够在近红外光源照射的情况下产生单线态氧的同时其自身还能够将光能转化为热能，因此是一种很优良的光动力治疗(PDT)结合光热治疗(PTT)的药物。但是ICG在水溶液中往往不稳定很容易分解，这种不可逆的药物降解会大大降低光动和光热治疗的效果。由于肿瘤微环境具有弱酸性和缺氧性的特点，而光动力治疗又会消耗氧气进一步提高肿瘤微环境的缺氧状态。光动力治疗的效率也往往因此受到影响。
共价有机框架材料(COF)作为一种C、N、O元素形成的共价有机框架，有着较大的比表面积和规则的孔径结构，能够作为一种药物载体负载药物通过高渗透长滞留(EPR)效应在肿瘤部位积聚并通过细胞内吞作用进入肿瘤细胞，并在肿瘤细胞内的弱酸性微环境下发生崩解。
AQ4N(班诺蒽醌二盐酸盐)是一种生物还原激活的抗肿瘤前药。它在肿瘤的缺氧环境下会被生物还原，生成一种细胞毒性的烷基氨基蒽醌代谢物AQ4。AQ4对DNA有很高的亲和力，是拓扑异构酶Ⅱ的有效抑制剂，拓扑异构酶Ⅱ作为一种DNA加工酶，对细胞分裂十分重要。AQ4N本身几乎没有内在的细胞毒活性，在体内的药代动力学稳定，是一种很好的抗肿瘤前药。
发明内容
鉴于上述背景内容，本发明的目的在于提供一种被ICG修饰后的3D-COF，负载缺氧诱导药物AQ4N的载药体系的制备和应用。本发明通过物理吸附实现ICG与AQ4N在3D-COF上的吸附，通过最外层透明质酸(HA)的包裹可进一步提高3D-COF载药体系对于癌细胞的靶向性。本发明的3D-COF载药体系进入细胞后，表现出良好的生物相容性，且被近红外光源的照射之后，能够有效的杀死乳腺癌细胞；利用ICG的光动力治疗(PDT)结合光热治疗(PTT)消耗氧气，提高肿瘤微环境的缺氧状态，促进AQ4N药物被还原为AQ4肿瘤药物，起到协同治疗的效果。
为了实现本发明的目的，本发明提供了如下的技术方案：
本发明的第一方面在于提供一种3D-COF载药体系的制备方法，包括如下步骤：
(a)TPB-DMTP-COF纳米颗粒的制备：将2,5-二甲氧基苯-1,4-二甲醛(TPB)与1,3,5-三(4-氨苯基)苯(DMTP)按照3：2的摩尔比溶于乙腈，加入无水乙酸，常温常压下充分反应，离心收集沉淀，洗涤得到TPB-DMTP-COF纳米颗粒；
(b)COF-ICG纳米颗粒的制备：将步骤(a)制得的TPB-DMTP-COF纳米颗粒与吲哚菁绿(ICG)分散于溶剂中，混合搅拌使ICG充分吸附于TPB-DMTP-COF纳米颗粒上，得到COF-ICG分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG纳米颗粒固体；
(c)COF-AQ4N纳米颗粒的制备：将步骤(a)制得的TPB-DMTP-COF纳米颗粒与班诺蒽醌二盐酸盐(AQ4N)分散于溶剂中，混合搅拌使AQ4N充分吸附于TPB-DMTP-COF纳米颗粒上，得到COF-AQ4N分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-AQ4N纳米颗粒固体；
(d)COF-ICG-AQ4N纳米颗粒的制备：将步骤(b)制得的COF-ICG纳米颗粒与步骤(c)制得的COF-AQ4N纳米颗粒分散于溶剂中，混合搅拌，得到COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG-AQ4N纳米颗粒固体。3D-COF载药体系改善了ICG、AQ4N在水溶液中不稳定、分散性差的问题。
作为本发明的一种优选实施方式，将步骤(d)中的COF-ICG纳米颗粒替换为COF-ICG-HA纳米颗粒，最终制得COF-ICG-HA-AQ4N纳米颗粒固体；其中所述COF-ICG-HA纳米颗粒的制备方法为：
将步骤(b)制得的COF-ICG纳米颗粒与透明质酸(HA)分散于溶剂中，混合搅拌使HA充分吸附于COF-ICG纳米颗粒上，得到COF-ICG-HA分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG-HA纳米颗粒固体。通过透明质酸对COF-ICG表面进行包裹以增强其对细胞膜表面受体地靶向性。
作为本发明的一种优选实施方式，在步骤(b)的混合体系中ICG与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(3～40):1000。进一步地优选地，在步骤(b)的混合体系中ICG与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(30～40):1000。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤(b)中，混合搅拌的时间为5～12h。
作为本发明的一种优选实施方式，在步骤(c)的混合体系中AQ4N与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(1～20):1000。进一步地优选地，在步骤(c)的混合体系中AQ4N与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(2～10):1000。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤(c)中，AQ4N的溶剂为磷酸缓冲液。
作为本发明的一种优选实施方式，在步骤(d)的混合体系中ICG与AQ4N的质量比为(30～40):(2～10)。进一步地优选地，在步骤(d)的混合体系中ICG与AQ4N的质量比为40:(2～8)。
作为本发明的一种优选实施方式，在所述COF-ICG-HA纳米颗粒的制备方法的混合体系中，HA与ICG的质量比为(1～100):(30～40)。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤(a)得到的TPB-DMTP-COF纳米颗粒的粒径为195～240nm。
作为本发明的一种优选实施方式，步骤(a)中反应时间为12h。
本发明的第二方面在于提供由前述的方法制得的3D-COF载药体系，。
本发明第三方面提供前述3D-COF载药体系在制备治疗乳腺癌的药物中的应用。
本发明第四方面提供一种上述制备方法制得的光3D-COF载药体系在乳腺癌抗肿瘤光学治疗-缺氧激活协同治疗的药物制备中的应用。
本发明提供了一种3D COF负载光敏剂ICG和AQ4N的方法及所制得的3D-COF载药体系，并将其用于治疗乳腺癌。
与现有的技术相比，本发明的有益效果至少包括：
(1)本发明提供的3D-COF载药体系，是一种以TPB-DMTP-COF为药物载体的纳米递送系统。本发明首先制备了TPB-DMTP-COF材料，并将其用作药物载体。本发明制备的TPB-DMTP-COF材料在用作药物载体方面存在如下优势：有着一致大小的粒径结构，在多种缓冲液中均有着较好的稳定性，具有良好的生物相容性及孔径结构，可以与ICG及AQ4N通过物理吸附作用相结合形成COF-ICG-AQ4N纳米颗粒。
(2)本发明的3D-COF载药体系可以实现将光敏剂ICG与缺氧激活药物AQ4N通过TPB-DMTP-COF共递送进入肿瘤细胞内，一方面能够解决ICG在水溶液中的不稳定性和分散性差的问题，另一方面ICG在808nm近红外光源照射下同时发挥光动和光热效应杀死肿瘤细胞，同时光动力治疗后的深度乏氧微环境激活AQ4N转化为AQ4抗肿瘤药物，ICG与AQ4N的协同作用提高了肿瘤细胞的治疗效率。
(3)本发明的3D-COF载药体系，以TPB-DMTP-COF为药物载体，利用低氧激活药物AQ4N及光敏剂ICG，COF-ICG-AQ4N纳米颗粒本身基本没有细胞毒性，相较于传统的化疗药物降低了对于正常细胞的毒性；而在TPB-DMTP-COF载体的作用下，基于EPR效应在肿瘤部位积聚并通过细胞内吞作用进入肿瘤细胞后，利用ICG光动和光热效应杀死肿瘤细胞，消耗氧气转化为活性氧，形成肿瘤细胞乏氧微环境，激活AQ4N转化为具有细胞毒性的烷基氨基蒽醌代谢物AQ4，利用AQ4对DNA的高亲和力，抑制肿瘤细胞分裂，导致细胞死亡。本发明以TPB-DMTP-COF为药物载体，通过ICG与AQ4N协同治疗方法，补偿了氧气不足所造成的光动力治疗效果下降，提高了肿瘤细胞的治疗效率。
(4)本发明设计的以TPB-DMTP-COF为药物载体的纳米递送系统共递送光敏剂ICG与缺氧激活药物AQ4N的方法具有过程简单、产物得率高，成本较低且制备周期较短的优势。
(5)本发明通过在COF-ICG-AQ4N纳米颗粒复合透明质酸可以实现对于肿瘤细胞更好的靶向性。
(6)本发明的3D-COF载药体系可用于制备增强肿瘤区域局部乏氧状况、提高针对肿瘤乏氧区域细胞杀伤的药物。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图做简单介绍。
图1是实施例1的TPB-DMTP-COF的相关表征结果图：A为XRD衍射图；B为BET图，孔径分布图；C为透射电镜图；D为水和粒径分布图。
图2为不同浓度的TPB-DMTP-COF(简写为COF)纳米颗粒分散液对MDA-MB-231乳腺癌细胞的毒性检测结果图。
图3A为三种不同纳米颗粒的水和粒径大小；图3B为三种不同纳米颗粒十五天内的粒径稳定性图。
图4A为ICG的标准曲线，图4B为不同ICG浓度条件下制备的COF-ICG纳米颗粒的ICG的包封率，图4C为不同吸附时间(常温下混合搅拌时长)条件下制备的COF-ICG纳米颗粒的ICG的包封率。
图5A为本发明实施例4中制备的COF-ICG纳米颗粒在不同pH条件下ICG的体外释放情况。图5B为本发明实施例5制备的COF-AQ4N纳米颗粒在不同pH条件下AQ4N的体外释放情况。
图6A为三种不同颗粒(实施例1制备得到的TPB-DMTP-COF、游离的ICG、实施例4方法制得的COF-ICG)分散液在不同光照时间下的体外光热效果图。图6B为游离的ICG溶液、实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒分散液在不同光照时间下的温度变化情况图。
图7A为不同ICG终浓度下的不同实验组的光动光热协同杀死MDA-MB-231乳腺癌细胞结果图。图7B为COF-ICG纳米颗粒分散液孵育不同时长之后进行光照处理对于细胞毒性检测结果的影响图。
图8A为实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒在MDA-MB-231细胞内的活性氧检测的荧光成像图，图8B为对应的灰度分析结果。
图9为不同浓度的游离AQ4N溶液、COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液(有或无激光处理)的细胞毒性检测结果图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例1
TPB-DMTP-COF纳米颗粒的制备：
本实施例为一种名为TPB-DMTP-COF的3D-COF纳米材料的制备方法，包括如下步骤：
将1，3，5-三(4-氨基苯基)(TPB)与2，5-二甲氧基对苯二甲醛(DMTP)按照3：2的摩尔比例(Ma W,Zheng Q,He Y,Li G,Guo W,Lin Z,Zhang L.Size-Controllable Synthesisof Uniform Spherical Covalent Organic Frameworks at Room Temperature forHighly Efficient and Selective Enrichment of Hydrophobic Peptides.J Am ChemSoc.2019Nov13；141(45):18271-18277.doi:10.1021/jacs.9b09189.Epub 2019Nov4.PMID:31656073.)，即TPB 19.68mg、DMTP 16.3mg分别溶于等量的乙腈(10mL)中，然后将两种溶液混合在一起，之后加入乙酸(1mL)作为催化剂，常温常压下搅拌反应24h，反应结束后使用超速离心机，10000rmp离心30min，弃去上清液，收集沉淀。使用无水乙醇将沉淀洗涤三次得到TPB-DMTP-COF终产物。
涉及的反应方程式如下：
Figure BDA0003382764260000061
与传统的溶剂热合成方法不同，实施例1的制备方法不需要任何剧烈的反应条件，且很容易实现克级以上的反应产物。
实施例2
TPB-DMTP-COF纳米颗粒的表征：
(1)本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF纳米材料的XRD射线衍射分析。
将实施例1获得的TPB-DMTP-COF粉末在室温下用去离子水稀释成100μg/mL后进行相关的XRD检测，结果如图1A所示。
图1A为本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF的XRD衍射图谱。结果表明测量得到的结果与计算机模拟结果一致，且峰形良好，说明实施例1制备的TPB-DMTP-COF有着较为一致且稳定的晶型结构。
(2)本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF纳米材料的N2吸附解吸附分析。
将实施例1获得的TPB-DMTP-COF粉末在室温下用去离子水稀释成200μg/mL后进行N2吸附解吸附检测，采用Brunauer-Emmett-T Eller(BET)方程计算其比表面积，用非局域密度泛函理论(NLDFT)模型从吸附曲线推导出孔径分布，结果如图1B所示。
图1B为本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF的N2吸附解吸附图谱。结果表明TPB-DMTP-COF呈Ⅳ型等温线，说明本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF有着较好的介孔结构。插图为TPB-DMTP-COF材料的孔径大小分布图，表明实施例1制备的TPB-DMTP-COF的孔径大小较为均匀。
(3)本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF纳米材料的透射电镜分析。
将实施例1获得的TPB-DMTP-COF粉末在室温下用去离子水稀释成1mg/mL后进行透射电镜检测，结果如图1C所示。
图1C为本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF的透射电镜图。结果表明TPB-DMTP-COF在水溶液中的结构一致，呈分散状态，粒径大小均匀，保持在200nm左右。
(4)本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF纳米材料的水和粒径分析。
将上述获得的TPB-DMTP-COF固体在室温下用去离子水稀释成100μg/mL后检测其水和粒径，结果如图1D所示。
图1D为本发明实施例1制备的TPB-DMTP-COF的水和粒径分布图。结果表明TPB-DMTP-COF在水溶液中的分散良好，且TPB-DMTP-COF粒径大小基本与TEM结果基本一致。
实施例3
本发明实施例1方法制得的TPB-DMTP-COF纳米颗粒分散液对MDA-MB-231乳腺癌细胞的毒性考察(测试方法参见Ge L,Qiao C,Tang Y,Zhang X,Jiang X.Light-ActivatedHypoxia-Sensitive Covalent Organic Framework for Tandem-Responsive DrugDelivery.Nano Lett.2021Apr 14；21(7):3218-3224.doi:10.1021/acs.nanolett.1c00488.Epub 2021Mar 16.PMID:33724042)。
将MDA-MB-231细胞以1×104个细胞/孔的密度接种到96孔板中，使用DMEM培养基(参见Tas AC.Grade-1titanium soaked in a DMEM solution at 37℃.Mater Sci Eng CMater Biol Appl.2014Mar 1；36:84-94.doi:10.1016/j.msec.2013.11.045.Epub2013Dec 7.PMID:24433890)持续培养48h(37℃，5％CO2)。吸去96孔板中的DMEM培养基，再向实验组中加入使用DMEM培养基稀释的TPB-DMTP-COF纳米颗粒分散液(20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL、140μg/mL、160μg/mL、180μg/mL)添加到孔板中，每个浓度设置三个复孔，继续孵育48h。孵育结束后，移除TPB-DMTP-COF纳米颗粒分散液，并加入100μL新鲜DMEM培养基和10μL噻唑蓝(MTT)溶液(5mg/mL)，继续孵育4h。随后，添加100μL三联溶解液(10％十二烷基硫酸钠+5％异丙醇+1‰HCL)过夜，最后在酶标仪上570nm处测量吸光度，计算细胞存活率。
将仅添加DMEM培养基无细胞培养的组别命名为空白组；将仅添加DMEM培养基不加任何药物进行细胞培养的组别命名为阴性对照组；将添加有不同浓度TPB-DMTP-COF纳米颗粒分散液的培养基进行细胞培养的组别命名为实验组。
Figure BDA0003382764260000081
图2为不同浓度的TPB-DMTP-COF纳米颗粒分散液对MDA-MB-231乳腺癌细胞的毒性检测结果图。结果表明，载体TPB-DMTP-COF纳米颗粒对MDA-MB-231乳腺癌细胞无明显毒性，表明该种材料有较好的生物相容性。
实施例4
一种COF-ICG纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：
实施例1制得的TPB-DMTP-COF(简写为COF)水溶液与ICG的DMSO溶液按照体积比1：1在常温下混合，混合体系中COF终浓度为1mg/mL，ICG终浓度设置为0～40μg/mL，搅拌5h以上，得到COF-ICG分散液，将得到的产物冷冻干燥最终获得COF-ICG纳米颗粒固体。
实施例5
一种COF-AQ4N纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：
实施例1制得的TPB-DMTP-COF(简写为COF)水溶液AQ4N的磷酸缓冲液按照体积比1：1在常温下混合，混合体系中COF终浓度为1mg/mL，AQ4N终浓度设置为0～20μg/mL，搅拌5h以上，得到COF-AQ4N分散液，将得到的产物冷冻干燥最终获得COF-AQ4N纳米颗粒固体。
实施例6
本发明实施例4的COF-ICG纳米颗粒及实施例5的COF-AQ4N纳米颗粒的粒径表征，包括粒径大小及粒径稳定性。
将实施例1、4～5获得的纳米颗粒在室温下用去离子水稀释成100μg/mL(以COF浓度计)后进行粒径、PDI的检测，结果如图3所示。
图3A为三种不同纳米颗粒的水和粒径大小。结果表明，负载ICG或AQ4N之后的纳米材料与TPB-DMTP-COF纳米颗粒相比，粒径稍有所增加，但仍保持在200nm左右。
图3B为三种不同纳米颗粒十五天内的粒径稳定性图。由图可见，负载不同药物之后的COF材料十五天内粒径大小无明显变化，说明三种不同的纳米颗粒(TPB-DMTP-COF、COF-ICG、COF-AQ4N)均没有出现聚集情况，证明TPB-DMTP-COF纳米颗粒、COF-ICG纳米颗粒和COF-AQ4N纳米颗粒粒径稳定性良好。
实施例7
本发明实施例4的方法制备得到的COF-ICG纳米颗粒中ICG的药物装载情况。
将实施例4方法制备得到的COF-ICG用去离子水稀释至COF浓度为40μg/mL，在室温下避光搅拌24h，通过多次离心洗涤(10000rpm，10min)来纯化混合物，直至上清无颜色。收集所有上清，测780nm处的紫外吸光度，实验重复三次。根据以下公式计算ICG的包封率：
Figure BDA0003382764260000091
图4A为ICG的标准曲线，图4B为不同ICG浓度条件(0～100μg/mL)下制备的COF-ICG纳米颗粒的ICG的包封率，图4C为当ICG浓度为40μg/mL时不同吸附时间条件下制备的COF-ICG纳米颗粒的ICG的包封率。
由图4B可以看出，当ICG与COF质量比在(3～40)：1000(对应于ICG终浓度为3～40μg/mL)范围内，所制得的COF-ICG纳米颗粒中对ICG的包封率均能够达到95％以上，表明TPB-DMTP-COF作为药物载体表现出较好的载药效率；而当ICG与COF质量比大于(3～10)：100(对应于ICG浓度40～100μg/mL)范围内，ICG浓度在40～100μg/mL时，COF对于ICG的吸附性能下降。因此，ICG与COF质量比在(3～40)：1000。
由图4C可知，当ICG与COF质量比为40：1000(对应于ICG终浓度为3～40μg/mL)时，为实现COF-ICG纳米颗粒中对ICG的包封率能够达到97％以上，所需的吸附时间(常温下混合搅拌时长)不小于5h。
实施例8
本发明实施例4的方法制备得到的COF-ICG纳米颗粒和实施例4制得的COF-AQ4N纳米颗粒在不同pH条件下的药物的体外释放。
(1)将实施例4的方法制得的COF-ICG纳米颗粒分散在1mL超纯水中，并转移至透析袋(截留分子量3.5kDa)中，将其分别浸入pH 7.4和pH 5.6的磷酸盐(PBS)缓冲液(30mL)中进行透析实验。然后，将其置于100r/min，37℃缓慢振荡的摇床上以释放药物。按照设定的时间点(0，0.5，1，2，4，6，8，10，12，24，36，48，72，96，120h)进行取样，每次取出3mL透析液后向其中补充3mL相应pH值的新鲜PBS缓冲液。取样结束后，样品在780nm处通过UV-vis测定吸光度。每个实验重复三次。结合游离ICG在释放液中的标准曲线计算COF-ICG溶液中的ICG的释放情况。
(2)将实施例5方法制得的COF-AQ4N纳米颗粒分散在1mL超纯水中，并转移至透析袋(截留分子量3.5kDa)中，将其分别浸入pH 7.4和pH 5.6的磷酸盐(PBS)缓冲液(30mL)中进行透析实验。然后，将其置于100r/min，37℃缓慢振荡的摇床上以释放药物。按照设定的时间点(0，0.5，1，2，4，6，8，10，12，24，36，48，72，96，120h)进行取样，每次取出3mL透析液后向其中补充3mL相应pH值的新鲜PBS缓冲液。取样结束后，样品在610nm处通过UV-vis测定吸光度。每个实验重复三次。结合游离AQ4N在释放液中的标准曲线计算COF-AQ4N溶液中的AQ4N释放情况。
图5A为本发明实施例4中制备的COF-ICG纳米颗粒在不同条件下ICG的体外释放情况。图5B为本发明实施例5制备的COF-AQ4N纳米颗粒在不同条件下AQ4N的体外释放情况。结果表明：在弱酸性(pH 5.6)条件下ICG的药物释放要显著高于在中性条件(pH 7.4)；与COF-ICG纳米颗粒类似，COF-AQ4N纳米颗粒在弱酸性(pH 5.6)条件下相比于中性条件(pH 7.4)，能够更快速实现药物AQ4N的释放。
实施例9
本发明实施例4方法制备得到的COF-ICG纳米颗粒的体外光热效果。
分别将实施例1的方法制得的TPB-DMTP-COF(简记为COF)纳米颗粒、游离的ICG、实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒(混合体系中COF终浓度为1mg/mL，ICG终浓度设置为30μg/mL)分散在水中，得到的三种不同纳米颗粒分散液。控制实施例1的方法制得的TPB-DMTP-COF(简记为COF)纳米颗粒的COF浓度与实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒中COF终浓度相等；控制游离的ICG浓度与实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒中ICG终浓度相等。
使用波长为808nm的近红外光源进行照射，光照强度为2W/cm2。红外成像仪记录照射0、1、2、3、4、5min后的光热成像图，同时每隔10s记录溶液的温度变化情况。
图6A为三种不同颗粒(实施例1制备得到的COF、游离的ICG、实施例4方法制得的COF-ICG)分散液在不同光照时间下的体外光热效果图。图6B为游离的ICG溶液、实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒分散液在不同光照时间下的温度变化情况图。可以看出ICG被TPB-DMTP-COF纳米颗粒负载后，表现出优于游离ICG的光热效果。
实施例10
一种COF-ICG-HA纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：
实施例4制得的COF-ICG纳米颗粒分散液与透明质酸(HA)溶液按照体积比1：1在常温下混合，混合体系中COF终浓度为1mg/mL，ICG终浓度设置为0～30μg/mL，HA终浓度100μg/mL，搅拌混匀，得到COF-ICG-HA纳米颗粒分散液，将得到的产物冷冻干燥最终获得COF-ICG-HA纳米颗粒固体。
实施例11
本发明实施例4方法制得的COF-ICG纳米颗粒对MDA-MB-231乳腺癌细胞的光动光热联合治疗效果考察。
(1)ICG终浓度：
将MDA-MB-231细胞以1×104个细胞/孔的密度接种到96孔板中，持续培养48h(37℃，5％CO2)。吸去96孔板中的培养基加入不同组别的培养基。将仅添加DMEM培养基无细胞培养的组别命名为空白组，将仅添加DMEM培养基不加任何药物进行细胞培养的组别命名为阴性对照组，其余均为实验组。将DMEM培养基稀释的游离ICG溶液(5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、35μg/mL、40μg/mL)命名为实验组1；将DMEM培养基稀释的实施例4制得的COF-ICG纳米颗粒分散液(ICG终浓度为5μg/mL、10μg/mL、15μg/mL、20μg/mL、25μg/mL、30μg/mL、35μg/mL、40μg/mL)命名为实验组2；将同样的加入实验组2所述浓度的药物且加药后进行近红外光源照射命名为激光组1(对应图7中的C-I(Laser))；同样加入上述药物，且加入上述药物后加入透明质酸(HA，终浓度100μg/mL)充分混匀后(参考实施例10)进行近红外光源照射命名为激光组2(对应图7中的C-I-HA(Laser))。同时参考实施例3设置阴性对照组和空白对照组，每组设置3个复孔。
激光组1和2在加药孵育18h后，使用808nm近红外激光(2w/cm2)每孔照射5min后继续放入培养箱培养至24h，非激光组直接将加好药的96孔板放入培养箱培养至24h。孵育结束后，移除培养液，并加入100μL新鲜培养基和10μL MTT溶液(5mg/mL)，继续孵育4h。随后，添加100μL MTT Buffer过夜，最后在酶标仪上570nm处测量吸光度。计算细胞存活率。
图7A为不同ICG终浓度下的不同实验组的光动光热协同杀死MDA-MB-231乳腺癌细胞结果图。
对比实施例4制得的COF-ICG纳米颗粒分散液(实验组2，COF-ICG)与其对应的激光组(激光组1，C-I(Laser))，结果表明，激光照射后的细胞存活率相比没有被激光照射组的细胞存活率有显著的下降趋势，且随着负载的ICG浓度不断升高，光照之后的细胞存活率也在不断下降。这说明，激光照射可以诱导ICG发挥光敏剂的作用在一定程度上杀死乳腺癌细胞。
对比激光组1(对应图7中的C-I(Laser))与激光组2(对应图7中的C-I-HA(Laser))，结果表明，添加透明质酸(HA)之后的激光组2(实施例10的COF-ICG-HA纳米颗粒)的细胞存活率低于没有添加透明质酸的激光组1(实施例4的COF-ICG纳米颗粒)。说明经过透明质酸包裹之后的纳米颗粒内吞效率有所提升，进入乳腺癌细胞的ICG含量得到提高，因此光照之后的细胞存活率得以降低。
(2)孵育时长：
进一步对加药后的孵育时间长度对杀死MDA-MB-231乳腺癌细胞的效果进行讨论。将MDA-MB-231细胞以1×104个细胞/孔的密度接种到96孔板中，持续培养48h(37℃，5％CO2)。吸去96孔板中的培养基加入不同组别的培养基。将仅添加DMEM培养基无细胞培养的组别命名为空白组，将仅添加DMEM培养基不加任何药物进行细胞培养的组别命名为阴性对照组，其余均为实验组。将DMEM培养基稀释的游离ICG溶液(40μg/mL)命名为实验组1，将DMEM培养基稀释的COF-ICG纳米颗粒分散液(ICG终浓度为40μg/mL)命名为实验组2，将同样的加入实验组2所述浓度的药物且加药后进行近红外光源照射命名为激光组1，同样加入上述药物，且加入上述药物后加入透明质酸(HA)(100μg/mL)后进行近红外光源照射命名为激光组2。同时参考实施例3设置阴性对照组和空白对照组，每组设置3个复孔。激光组孵育不同时长(0、3、6、9、18、24h)后，使用808nm近红外激光(2w/cm2)每孔照射5min后继续放入培养箱培养至24h，非激光组直接将加好药的96孔板放入培养箱培养至24h。孵育结束后，移除培养液，并加入100μL新鲜培养基和10μL MTT溶液(5mg/mL)，继续孵育4h。随后，添加100μLMTT Buffer过夜，最后在酶标仪上570nm处测量吸光度。计算细胞存活率。
图7B为COF-ICG纳米颗粒分散液孵育不同时长之后进行光照处理对于细胞毒性检测结果的影响图。结果表明，随着孵育时间的延长，细胞内吞进去的COF-ICG纳米颗粒不断累积，光照后的杀死癌细胞的效果也得以提高，当孵育时长为24h后，细胞存活率基本降到最低，可能是COF-ICG纳米颗粒的内吞达到最大值。
实施例12
本发明实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒分散液在MDA-MB-231乳腺癌细胞内的活性氧产生情况的考察。
向12孔板中加入1mL密度为2×104个/mL的MDA-MB-231细胞液，放入培养箱孵育48h。每皿加入DMEM稀释的COF-ICG纳米颗粒分散液30μg/mL(以ICG终浓度计)，分别孵育不同时长(0、3、6、18h)。然后用808nm近红外激光(2W/cm2)每孔照射5min，然后用ROS检测试剂盒检测其产生ROS的能力，详细操作如下：用PBS洗净孔板里残留的药物和培养基，置于200r/min的摇床上洗涤3次，每次10min，洗涤时注意避光。随后用无血清DMEM稀释DCFH-DA使其浓度为10μM，将其与细胞放于培养箱中共孵育30min后用无血清培养基避光洗涤。最后用荧光显微镜FITC通道观察活性氧(ROS)的产生情况。
图8A为实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒在MDA-MB-231细胞内的活性氧检测的荧光成像图，图8B为对应的灰度分析结果。结果显示，在孵育不同时间后使用近红外光源照射，活性氧的荧光信号随着孵育时间的增长而增加。表明在激光照射下光敏剂ICG可以在细胞内诱导产生ROS。
实施例13
一种COF-ICG-AQ4N纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：
实施例4制得的COF-ICG纳米颗粒分散液与实施例5制得的COF-AQ4N纳米颗粒分散液按照体积比1：1在常温下混合，混合体系中COF终浓度设置为1mg/mL，ICG终浓度设置为40μg/mL，AQ4N终浓度1～10μg/mL，充分搅拌得到COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液，将得到的产物冷冻干燥最终获得COF-ICG-AQ4N纳米颗粒固体。
实施例14
一种COF-ICG-HA-AQ4N纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤：
实施例10制得的COF-ICG-HA纳米颗粒分散液与实施例5制得的COF-AQ4N纳米颗粒分散液按照体积比1：1在常温下混合，混合体系中COF终浓度设置为1mg/mL，ICG终浓度设置为40μg/mL，HA终浓度100μg/mL，AQ4N终浓度1～10μg/mL，充分搅拌，得到COF-ICG-HA-AQ4N纳米颗粒分散液，将得到的产物冷冻干燥最终获得COF-ICG-HA-AQ4N纳米颗粒固体。
实施例15
本发明实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒分散液与及实施例5制备的COF-AQ4N纳米颗粒分散液协同作用对MDA-MB-231乳腺癌细胞的毒性考察。
将MDA-MB-231细胞以1×104个细胞/孔的密度接种到96孔板中，持续培养48h(37℃，5％CO2)。吸去96孔板中的原培养基，进行换液处理。将仅添加DMEM培养基无细胞培养的组别命名为空白组，将仅添加DMEM培养基不加任何药物进行细胞培养的组别命名为阴性对照组，其余均为实验组。将DMEM培养基稀释的游离AQ4N溶液(0μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL、4μg/mL、5μg/mL、6μg/mL、7μg/mL、8μg/mL、9μg/mL、10μg/mL)命名为实验组1，将DMEM培养基稀释的COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液(AQ4N终浓度为0μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL、4μg/mL、5μg/mL、6μg/mL、7μg/mL、8μg/mL、9μg/mL、10μg/mL)命名为实验组2，将同样的加入实验组2所述浓度的药物且加药后进行近红外光源照射命名为激光组。每组设置3个复孔。激光组孵育18h后，使用808nm近红外激光(2w/cm2)每孔照射5min，非激光组直接将加好药的96孔板放入培养箱培养至24h。孵育结束后，移除培养液，并加入100μL新鲜培养基和10μLMTT溶液(5mg/mL)，继续孵育4h。随后，添加100μL MTT Buffer过夜，最后在酶标仪上570nm处测量吸光度。计算细胞存活率。
图9为不同浓度的游离AQ4N溶液、COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液(有或无激光处理)的细胞毒性检测结果图。结果表明808nm激光光照，加入AQ4N之后的细胞存活率从42％(AQ4N添加量为0μg/mL，即COF-ICG纳米颗粒分散液)下降到20.9％，说明在本发明实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒作用后的缺氧肿瘤细胞内加入COF-AQ4N纳米颗粒后，AQ4N能够被激活生成AQ4，在一定程度上杀死肿瘤细胞，由此证明本发明实施例4制备的COF-ICG纳米颗粒分散液与及实施例5制备的COF-AQ4N纳米颗粒分散液协同作用提高了肿瘤细胞的治疗效率。
综上，实验表明，利用本发明制备得到的TPB-DMTP-COF药物载体在通过胞吞作用进入MDA-MB-231乳腺癌细胞后，能够通过内吞作用进入细胞，且呈现出较好的生物相容性。在使用808nm波长的近红外光源照射后，在COF-ICG的作用下，细胞内产生活性氧在逐渐增多，细胞毒性实验结果表明乳腺癌细胞的细胞存活率在不断下降；在COF-AQ4N联合激光的作用下MDA-MB-231乳腺癌细胞存活率得到了进一步的下降。结果表明协同作用能够更好的抑制肿瘤细胞的生长。因此本发明还提供了所述方法在增强肿瘤细胞部位缺氧状况，提高针对肿瘤缺氧情况杀伤细胞的药物制备中的应用。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。

Claims (10)

1.一种3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)TPB-DMTP-COF纳米颗粒的制备：将2,5-二甲氧基苯-1,4-二甲醛(TPB)与1,3,5-三(4-氨苯基)苯(DMTP)按照3：2的摩尔比溶于乙腈，加入无水乙酸，常温常压下充分反应，离心收集沉淀，洗涤得到TPB-DMTP-COF纳米颗粒；
(b)COF-ICG纳米颗粒的制备：将步骤(a)制得的TPB-DMTP-COF纳米颗粒与吲哚菁绿(ICG)分散于溶剂中，混合搅拌使ICG充分吸附于TPB-DMTP-COF纳米颗粒上，得到COF-ICG分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG纳米颗粒固体；
(c)COF-AQ4N纳米颗粒的制备：将步骤(a)制得的TPB-DMTP-COF纳米颗粒与班诺蒽醌二盐酸盐(AQ4N)分散于溶剂中，混合搅拌使AQ4N充分吸附于TPB-DMTP-COF纳米颗粒上，得到COF-AQ4N分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-AQ4N纳米颗粒固体；
(d)COF-ICG-AQ4N纳米颗粒的制备：将步骤(b)制得的COF-ICG纳米颗粒与步骤(c)制得的COF-AQ4N纳米颗粒分散于溶剂中，混合搅拌，得到COF-ICG-AQ4N纳米颗粒分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG-AQ4N纳米颗粒固体。
2.根据权利要求1所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，将步骤(d)中的COF-ICG纳米颗粒替换为COF-ICG-HA纳米颗粒，最终制得COF-ICG-HA-AQ4N纳米颗粒固体；
其中所述COF-ICG-HA纳米颗粒的制备方法为：
将步骤(b)制得的COF-ICG纳米颗粒与透明质酸(HA)分散于溶剂中，混合搅拌使HA充分吸附于COF-ICG纳米颗粒上，得到COF-ICG-HA分散液，去除溶剂，将得到的产物冷冻干燥以获得COF-ICG-HA纳米颗粒固体。
3.根据权利要求1或2所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，在步骤(b)的混合体系中ICG与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(3～40):1000。
4.根据权利要求1或2所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，在步骤(c)的混合体系中AQ4N与TPB-DMTP-COF纳米颗粒的质量比为(1～20):1000。
5.根据权利要求1或2所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，在步骤(d)的混合体系中ICG与AQ4N的质量比为(30～40):(2～10)。
6.根据权利要求5所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，在步骤(d)的混合体系中ICG与AQ4N的质量比为40:(2～8)。
7.根据权利要求2所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，在所述COF-ICG-HA纳米颗粒的制备方法的混合体系中，HA与ICG的质量比为(1～100):(30～40)。
8.根据权利要求1或2所述的3D-COF载药体系的制备方法，其特征在于，步骤(a)得到的TPB-DMTP-COF纳米颗粒的粒径为195～240nm。
9.一种3D-COF载药体系，其特征在于，由权利要求1～8中任一项所述的方法制得。
10.权利要求9所述的3D-COF载药体系在制备治疗乳腺癌的药物中的应用。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106562930A (zh) * 2016-10-24 2017-04-19 苏州大学 一种乏氧响应性脂质体制剂及其制备方法与应用
CN111840546A (zh) * 2019-04-11 2020-10-30 华东理工大学 一种低氧激活前药联合光治疗靶向纳米粒

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106562930A (zh) * 2016-10-24 2017-04-19 苏州大学 一种乏氧响应性脂质体制剂及其制备方法与应用
CN111840546A (zh) * 2019-04-11 2020-10-30 华东理工大学 一种低氧激活前药联合光治疗靶向纳米粒

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WENDA MA等: "Size-Controllable Synthesis of Uniform Spherical Covalent Organic Frameworks at Room Temperature for Highly Efficient and Selective Enrichment of Hydrophobic Peptides", 《J. AM. CHEM. SOC》 *
王涛等: "共价有机框架的合成及其在肿瘤治疗中的应用研究进展", 《化学学报》 *
胡子涛等: "基于共价有机框架材料的纳米体系在生物医学中的应用", 《化学进展》 *
陈世雄等: "乏氧响应型纳米药物的设计、合成及其抗肿瘤作用研究", 《药学进展》 *

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