CN113993604B - 生物过程纯化系统中的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法，该柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，该体积的样本装料包括配置成在装载期间在柱中捕获的至少一个产物。该方法包括：执行(51)纯化循环；在纯化循环期间测量(52)至少一个参数，所述至少一个参数指示样本装料的装载期间在柱后的至少一个所捕获产物的穿透；当检测到穿透时，在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的量减少(56a)；以及重复步骤，以执行其他纯化循环。每个纯化循环包括：将某个量的样本装料装载到柱上，清洗柱，并且洗脱至少一个产物。

Description

生物过程纯化系统中的方法

技术领域

本发明涉及一种用于监测和控制用于生物反应器系统中的至少一个产物的循环重复纯化的生物过程纯化系统的方法。

背景技术

生物反应器中(细胞培养系统中)产生的材料的质量是重要的，以便在纯化来自生物反应器的收获物时实现可靠、健壮和经济的制造规程。

当前，来自生物反应器的净化或清澈装料（feed）被引入柱捕获色谱系统中，该柱捕获色谱系统配置用于循环纯化过程以萃取产物。循环过程包括：将装料装载到柱上；清洗柱；洗脱产物；以及此后在柱以重复方式被装载有新装料之前清洁柱。对于给定体积的装料，与当使用大体积柱时相比，使用小体积柱的纯化过程将更费时。

因此，存在下列需要：修改纯化过程，以对给定体积的装料尤其对于小体积柱来实现使用柱捕获色谱系统的纯化中的更有效循环过程。

发明内容

本公开的目的是要提供方法和装置，其配置成执行设法单独地或者按照任何组合来减轻、缓解或消除本领域中的上述缺陷和缺点的一个或多个的方法和计算机程序。

此目的通过如由独立权利要求所限定的方法来实现。

优点在于，用来执行产物的纯化的时间可减少，同时保持高产率。

另一个优点在于，纯化过程可适合更有效地使用色谱系统中的可用容量。

可由本领域的技术人员根据详细描述来得到另外目的和优点。

附图说明

图1图示设计成纯化来自生物反应器的收获物（harvest）流体的产物的生物过程纯化系统的概述。

图2图示控制生物过程纯化系统中的上游/下游过程的概念。

图3a图示配置成使用仅一个柱从样本装料递送产物的理想循环捕获色谱过程。

图3b图示依次使用若干柱的循环捕获色谱过程。

图4是图示循环捕获色谱过程中的压力行为的图表。

图5图示用于监测单柱捕获色谱系统中的操作状态的过程的第一实施例。

图6图示用于监测单柱捕获色谱系统中的操作状态的过程的第二实施例。

图7图示用于监测单柱捕获色谱系统中的操作状态的过程的第三实施例。

具体实施方式

生物过程纯化系统被设计用于通过下列方式来产生和纯化产物(例如蛋白质、来自细胞培养/发酵的生物分子、自然萃取物)：在细胞培养生物反应器中生长能够表达产物的细胞，之后接着用于纯化产物的下游纯化过程(又称作下游过程)。下游纯化过程可以是能够提供纯化产物的任何适当过程，该过程可包括一个或多个步骤。下游纯化过程中的一个常用步骤是色谱。特别是，本发明涉及一种生物过程纯化系统，该生物过程纯化系统被布置成在延长时间段期间从某个体积的样本装料来产生和提供纯化产物。产物作为具有比柱的体积要大的体积的批来提供，或者产物从生物反应器来收获并且通过下游纯化过程来纯化，同时保持细胞培养。这种类型的细胞培养在本文中称作“连续细胞培养过程”，并且这类细胞培养的示例包括灌注细胞培养和恒化器细胞培养。

在图1中，示出按照一个实施例、配置成使用分离过程来纯化产物的生物过程纯化系统的概述。该生物过程纯化系统包括与细胞培养11、保持12、捕获13、病毒灭活14、精制（polish）15和递送16相关的多个步骤。

在本发明的所公开实施例中的一个中，细胞培养步骤11可以是连续细胞培养过程，其包括在延长时间段内连续添加养分（nutrient）以及连续去除产物和废物(收获物)。能够通过例如使用交替切向过滤(ATF)装置在灌注中操作该过程，从而将细胞保留在生物反应器中。备选地，在没有细胞保持(即，恒化器)的情况下操作生物反应器。细胞培养步骤可包括对活细胞密度VCD而且还对养分和代谢物的过程控制。可通过适配被馈送给培养物的细胞培养介质的成分或者通过直接对培养物添加某些成分来控制VCD、生产率和产物质量，如下面更详细描述。

在一些实施例中，可在将收获物馈送到下游纯化过程之前例如通过过滤、离心或另一种技术来净化包含产物的收获物。

保持步骤12是可选步骤，该步骤取决于过程需要，例如过滤器在捕获步骤13之前是否联机。该步骤可包括对重量的过程控制，以及过程中的下一个步骤在达到预定体积值时或者备选地在某个时间段之后或者在达到预定质量时开始。保持步骤可用于从灌注细胞培养来收集某个体积的过滤装料。

在本发明的另一个实施例中，省略细胞培养步骤，以及包含产物的样本装料批在保持步骤12被提供，并且被提供给纯化过程。

在所公开实施例中，下游纯化过程包括三个步骤捕获13、病毒灭活14和精制15。捕获步骤13可包括单个色谱柱中的色谱过程。可在捕获步骤之前联机提供过滤器。捕获步骤包括多个批洗脱，以及例如使用联机UV传感器的过程控制操控装料浓度和树脂容量的变化。下一个步骤在达到预定量值(例如体积、质量或时间)时开始。

在病毒灭活步骤14中，用于病毒灭活的不同选项根据过程需要是可用的。一个选项是要在滞留容器（hold up tank）中使用具有低pH的批模式30-60分钟。该步骤可包括对体积、时间、温度和pH的过程控制。下一个步骤在达到预定时间时开始。

精制步骤15可以是具有连接批步骤的直通处理(STP)或者具有连续装载步骤的连续色谱或者它们的组合。流率被调整成由生产者细胞所要求的灌注速率，这意味着流率通过先前步骤来确定。该步骤可包括对于UV、流量和体积的过程控制，以及下一个步骤在达到预定体积和量时开始，备选地在达到超时时开始。

递送步骤16可包括超过滤步骤之前的病毒去除步骤，例如病毒过滤器。递送步骤可用作来自精制步骤的经处理的收获物的批添加的浓缩步骤。递送步骤16可包括产物的连续或批递送，并且可包括废物的连续或批去除。该步骤可包括对于pH、传导率、吸收率、体积和压力的过程控制，以及在达到预定义环境中的预定产物浓度时实现递送。

自动化层17用于操控用于过程中的下一个步骤的判定点。作为联机传感器和脱机传感器的不同类型的传感器(未示出)被集成到过程流程中，以监测可用于为自动化层17提供可用来操控判定点的数据的不同参数。传感器包括但不限于仅测量流量、VCD、重量、压力、UV、体积、pH、传导率、吸收率等。

应当注意，UV吸收是可被监测以检测所纯化收获物的组成的参数的示例。但是，可使用操作在其他频率范围(例如IR、荧光、x射线等)中的其他参数。

可通过得到与过程运行（run）期间的产物或者所产生产物本身相关的信息来改进生物过程纯化系统中产生的产物的产物质量。与产物质量相关的属性必须被测量，并且可使用不同分析方法，例如质谱MS、光散射、尺寸排阻色谱SEC、拉曼光谱等。

细胞培养系统包括生物反应器，该生物反应器产生包含产物的收获物，以及细胞培养过程可被控制以优化产物的产物质量。可在生物反应器中被控制的参数的示例是温度、曝气、搅拌等。

图2图示控制生物过程纯化系统中的上游/下游过程的概念。生物过程纯化系统的图示经过简化，并且包括三个步骤：样本装料20、分离21和分批（batchify）22。在分批步骤之后递送产物(在这个示例中通过“活性药物组分”——API所例示)。

样本装料20可以是如上所述的连续细胞培养过程中的细胞培养步骤，该连续细胞培养过程包括向例如细胞灌注过程连续添加养分，其中连续收获产物和废物或者以比单柱色谱系统的容量要大的体积所提供的样本装料批。包括产物和废物的样本装料被认为是收获物，所述收获物被馈入分离步骤21，所述分离步骤21可包括下游纯化过程的一个或多个步骤。分离步骤包括至少部分将收获物中的产物与废物分离的过程，以及产物被转发给最终步骤分批22，其中产物被操控以便准备作为API进行递送。

在分离步骤之后，可使用质谱仪MS或光谱测定来测量某些参数或质量属性，例如产物中的杂质的组成或者产物的碎片（fragment）或聚集体（aggregate）的量。这个信息可用来控制上游过程23。例如，如果在分离之后检测到大量降级产物，则这可通过下列来抵消：改变细胞培养步骤中的参数，例如通过到生物反应器中的介质的增加流率以防止产物分子在被引入分离步骤21之前的降级。备选地，细胞培养中的养分或过程参数的馈送可基于所测量质量属性来调整，如下面更详细描述。例如，如果检测到所捕获产物的穿透（breakthrough）(这可通过改变被装载到柱上的样本装料的量来抵消)，则可在柱之后检测被提供给分离步骤21的样本装料的组成的变化。

同样的概念可用来控制下游过程24。被馈入分离步骤21中的收获物中的产物的浓度可通过测量用来装载每个柱的时间以及洗脱后的产物的峰量来确定。这个信息可用来基于被馈入分离步骤中的收获物的产物的浓度来调整洗脱。

图3a图示理想循环捕获色谱过程，其配置成在循环重复纯化过程的情况下仅使用一个柱递送来自某个体积的样本装料的至少一个产物。在这个示例中，在200次循环内使用相同柱，其中每个纯化循环包括将某个量的样本装料装载到柱上，清洗住，并且洗脱至少一个所捕获产物。但是，情况不是这样，因为系统的性能根据所执行循环而退化，并且当性能降低时，柱需要使用原位清洁CIP来清洁，这改进色谱柱的性能。而且，当通过CIP未改进柱的性能时，柱需要被新柱替换。这个过程在图3b中图示。

图3b图示依次使用若干柱的循环捕获色谱过程。指示CIP触发，并且因此对柱执行CIP。CIP触发可以是下列中的任何：

- 如果样本装料的装载期间的压力增加10%

- 如果洗脱期间的洗脱峰宽度增加例如>5%

- 如果洗脱峰不对称性增加

在柱必须被更换之前，CIP将系统的性能改进到某个水平。下面是可用来确定柱需要被更换的时间的指示的一些示例：

- 如果样本装料的装载期间的压力增加超过安全极限(如图4中通过虚线40所指示)

- 如果样本装料的量下降到低于柱中的树脂的动态结合容量DBC的70%

- 如果通过增加洗脱峰宽度或洗脱峰不对称性所发起的CIP后的3个循环运行内没有改进

在图3b中，响应于CIP触发而执行CIP，以及当检测到DBC中的临界下降时，第一柱“单元1”被新柱“单元2”替换。此外，虽然对单元2执行若干CIP，但是检测到压力的临界增加，并且“单元2”被“单元3”替换。使用单元3产生产物的最终量。

图4是图示表示为“单元1”、“单元2”和“单元3”的依次使用柱的压力曲线41的图表。在X次循环(例如70次循环)之后，检测到DBC中的临界下降，并且更换柱。压力曲线41在这个点处仍然低于指示压力的安全极限的虚线40。但是，当纯化开始又Y次循环(例如附加65次循环)时，压力增加到超过安全极限，并且“单元2”在X+Y次循环(在这个示例中为135次循环)后被“单元3”替换。在附加Z次循环(在这个示例中为65次循环)后，该过程完成，并且在200次循环后产生产物的最终量。

压力曲线的形状可用来识别趋势，并且由此更有效地检测柱的退化性能。

图5图示用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法50的第一方面，该柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括配置成在装载期间在柱中捕获的至少一个产物(例如目标产物)。所述体积的样本装料源自相同装料(例如批或连续装料)。捕获色谱系统包括一个单柱，或者备选地包括并行耦合的若干柱，生物反应器可与其连接，生物反应器配置成向柱提供某个体积的样本装料，其中样本装料的体积大于捕获色谱系统的体积容量。因此要求按照重复方式的循环纯化。该过程包括多个步骤：

a) 执行51纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到柱上，清洗柱，并且洗脱所捕获产物，

b) 在纯化循环期间测量52至少一个参数，所述至少一个参数指示样本装料的装载期间在柱后的至少一个所捕获产物的穿透；

c) 如由56所图示的那样如果检测到至少一个所捕获产物的穿透，则在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的量减少56a；以及

d) 重复进行步骤a)-d)，直到已经产生产物的预期量。这在上文结合图3a和图3b图示。

按照一些实施例，在51中的样本的装载在装载时间Δt期间执行；以及装载时间在56a中减少，以使所装载的样本装料的量减少，以便防止下一个纯化循环期间的穿透。按照一些实施例，装载时间减少至少5%。在一些实施例中，当检测到穿透时，装载时间减少不超过10%。

按照一些实施例，当如由58所图示的那样在预定次数的连续纯化循环x期间在步骤c)中保持样本装料的量时，装载时间增加58a，以在下一个纯化循环期间使所装载的样本装料的量增加。作为示例，x为至少25次循环。按照一些实施例，装载时间增加1%，以达到最佳装载，而无需冒产率损失的风险。

按照一些实施例，在52中所测量的至少一个参数是来自被安装在柱后的UV检测器的信号。

按照一些实施例，该方法进一步包括监测至少一个所捕获产物的洗脱期间所测量的至少一个附加参数，如由54所图示。至少一个附加参数指示柱的纯化容量，以及该方法进一步包括：如由57所图示的那样如果纯化容量正下降而没有穿透的指示，则如由58a所图示的那样在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的量增加。按照一些实施例，样本装料的量增加1%。

按照一些实施例，该方法进一步包括：在56之前，评估54在所捕获产物的洗脱期间所测量的指示色谱系统中的纯化容量的至少一个附加参数；以及如由55所图示的那样如果纯化容量低于预定上阈值，则例如使用CIP来清洁55a柱。例如，上阈值对应至少一个附加参数指示纯化容量的5-10%的下降时的水平。

在柱必须被更换之前，CIP将系统的性能改进到某个水平。按照一些实施例，在步骤53中监测柱性能，以及如果检测到不良性能，则柱需要被更换。

如上所述，下面是可用来确定下列时间的指示的一些示例

- 如果样本装料的装载期间的压力增加超过安全极限(如图4中通过虚线40所指示)

- 如果样本装料的量下降到低于柱中的树脂的动态结合容量DBC的70%

- 如果通过增加洗脱峰宽度或洗脱峰不对称性所发起的CIP后的3个循环运行内没有改进

按照一些实施例，在步骤54中的评估是所测量的至少一个附加参数随时间的趋势分析。

按照一些实施例，在步骤54中的附加参数是洗脱至少一个所捕获产物时相对于被装载到柱上的样本装料的量所测量的洗脱峰面积。

按照一些实施例，评估至少一个附加参数的步骤进一步包括：如由55b所指示的那样如果在检测到穿透的同时纯化容量低于预定下阈值，则采用新柱来替换59柱。例如，下阈值对应至少一个附加参数指示纯化容量的10-20%的下降时的水平。

本发明还涉及一种捕获色谱系统，该捕获色谱系统包括：柱，其配置用于对样本装料所执行的纯化，该样本装料包括至少一个产物，所述至少一个产物配置成在装载期间在柱中捕获；以及控制单元，其配置成控制柱中的纯化，其中控制单元进一步配置成执行结合图5所述的方法。

在图6中，公开一种按照本发明的第二方面的方法60，其中该方法可包括：

a) 执行61纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到柱上，清洗柱，并且洗脱至少一个所捕获产物，

b) 在纯化循环期间测量62至少一个参数，所述至少一个参数指示样本装料的装载期间在柱后的至少一个所捕获产物的穿透；以及在纯化循环期间测量64附加参数，所述附加参数指示洗脱期间在柱后的至少一个所捕获产物的量；

c) 如在67中所指示的那样如果至少一个所捕获产物的量正下降而没有穿透的指示，则在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的量增加68a；以及

d) 重复进行步骤a)-d)。

按照某个实施例，在步骤c)中的样本装料的量增加1%。

按照一些实施例，该方法进一步包括：在步骤c)之前，评估65至少一个附加参数；以及如果纯化容量低于预定上阈值，则清洁65a柱。

按照某个实施例，评估是所测量的至少一个附加参数随时间的趋势分析。

按照某个实施例，附加参数是洗脱至少一个所捕获产物时相对于被装载到柱上的样本装料的量所测量的洗脱峰面积。

按照某个实施例，评估至少一个附加参数的步骤进一步包括：如由65b所指示的那样如果在检测到穿透的同时纯化容量低于预定下阈值，则采用新柱来替换69柱。

按照某个实施例，步骤c)进一步包括：如由66所指示的那样如果检测到至少一个所捕获产物的穿透，则在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的量减少66a。按照一些实施例，样本装料的量减少至少5%。在一些实施例中，当检测到穿透时，样本装料的量减少不超过10%。

按照某个实施例，在步骤a)中的样本的装载在装载时间Δt期间执行；以及装载时间在步骤c)中减少，以防止下一个纯化循环期间的穿透。

按照某个实施例，如由68所指示的那样在至少“x”次连续纯化循环（例如25次连续循环）期间在步骤c)中保持装载时间时，对下一个纯化循环使装载时间增加68a。

按照某个实施例，在步骤b)中的所测量参数是来自被安装在柱后的UV检测器的信号。

按照某个实施例，对样本装料批或者对从细胞培养反应器连续提供的样本装料执行循环重复纯化。

本发明还涉及一种捕获色谱系统，该捕获色谱系统包括：柱，其配置用于对样本装料所执行的纯化，该样本装料包括至少一个产物，所述至少一个产物配置成在装载期间在柱中捕获；以及控制单元，其配置成控制柱中的纯化，其中控制单元进一步配置成执行结合图6所述的方法。

图7图示用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法的第三方面，该柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，该体积的样本装料包括配置成在装载期间在柱中捕获的至少一个产物。该体积的样本装料源自相同装料(例如大批或连续装料)。捕获色谱系统包括一个单柱，或者备选地包括并行耦合的若干柱，生物反应器可与其连接，并且配置成向柱提供某个体积的样本装料，其中样本装料的体积大于捕获色谱系统的体积容量。因此要求按照重复方式的循环纯化。该过程包括多个步骤：

a) 执行71纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到柱上，清洗柱，并且洗脱至少一个所捕获产物；

b) 测量72至少一个所捕获产物的洗脱期间的至少一个参数，所述至少一个参数指示色谱系统中的纯化容量；

c) 评估74至少一个参数；以及如果纯化容量低于预定上阈值，则清洁75a柱；以及

d) 重复进行步骤a)-d)。

按照一些实施例，在步骤b)中的至少一个参数被选择为相对于被装载到柱上的样本装料的量的洗脱产物的量。按照一些实施例，在步骤b)中的至少一个参数被选择为滴度，以及该方法进一步包括确定洗脱期间的峰面积，并且基于所确定峰面积来估计滴度。

按照一些实施例，对样本装料批或者对从细胞培养反应器连续提供的样本装料执行循环重复纯化。

本发明还涉及一种捕获色谱系统，该捕获色谱系统包括：柱，其配置用于对某个量的样本装料执行的循环重复纯化，该量的样本装料包括至少一个产物；以及控制单元，其配置成控制柱中的纯化，其中控制单元进一步配置成执行结合图7所述的方法。

上述方法可在用于控制生物过程纯化系统的计算机程序中实现。该计算机程序包括指令，所述指令当在至少一个处理器上被执行时使所述至少一个处理器执行按照结合图5-7所述方法的方法。用于控制生物过程纯化系统的计算机程序可被存储在计算机可读存储介质上并且由其携带。

因此，本发明的各个方面和实施例提供在无手动干预的情况下(例如自动)地运行第一色谱柱的过程，以及仅在第一色谱柱被耗尽时才切换到另一个色谱柱的使用。

Claims (25)

1.一种用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法，所述柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括配置成在装载期间在所述柱中捕获的至少一个产物，其中所述方法包括：

a)执行纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到所述柱上，清洗所述柱，并且洗脱至少一个所捕获产物，

b)在所述纯化循环期间测量至少一个参数，所述至少一个参数指示样本装料的装载期间在所述柱后的所述至少一个所捕获产物的穿透；

c)如果检测到所述至少一个所捕获产物的穿透，则在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的所述某个量减少；以及

d)重复进行步骤a)-c)，其中在步骤a)中的样本的装载在装载时间(Δt)期间执行；以及所述装载时间在步骤c)中减少，以防止所述下一个纯化循环期间的穿透,

其中当在预定次数的连续纯化循环期间在步骤c)中保持所述装载时间时，对所述下一个纯化循环使所述装载时间增加。

2.如权利要求1所述的方法，其中，在步骤b)中的所测量参数是来自被安装在所述柱后的UV检测器的信号。

3.如权利要求1至2中的任一项所述的方法，其中，所述方法进一步包括监测所述至少一个所捕获产物的洗脱期间所测量的指示所述柱的纯化容量的至少一个附加参数，以及如果所述纯化容量正下降而没有穿透的指示，则在所述下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的所述某个量增加。

4.如权利要求3所述的方法，进一步包括：在步骤c)之前，评估所述至少一个附加参数；以及如果所述纯化容量低于预定上阈值，则清洁所述柱。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述评估是所测量的至少一个附加参数随时间的趋势分析。

6.如权利要求5所述的方法，其中，所述附加参数是洗脱所述至少一个所捕获产物时相对于被装载到所述柱上的样本装料的量所测量的洗脱峰面积。

7.如权利要求4至6中的任一项所述的方法，其中，评估所述至少一个附加参数的步骤进一步包括：如果在检测到穿透的同时所述纯化容量低于预定下阈值，则采用新柱来替换所述柱。

8.如权利要求1至2中的任一项所述的方法，其中，对样本装料批或者对从细胞培养反应器连续提供的样本装料执行所述循环重复纯化。

9.一种用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法，所述柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括配置成在装载期间在所述柱中捕获的至少一个产物，其中所述方法包括：

a)执行纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到所述柱上，清洗所述柱，并且洗脱至少一个所捕获产物，

b)在所述纯化循环期间测量至少一个参数，所述至少一个参数指示所述样本装料的装载期间在所述柱后的所述至少一个所捕获产物的穿透；以及在所述纯化循环期间测量附加参数，所述附加参数指示洗脱期间在所述柱后的所述至少一个所捕获产物的量；

c)如果所述至少一个所捕获产物的所述量正下降而没有穿透的指示，则在下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的所述某个量增加；以及

d)重复进行步骤a)-c)，在步骤c)之前，评估至少一个附加参数；以及如果纯化容量低于预定上阈值，则清洁所述柱。

10.如权利要求9所述的方法，其中，所述评估是所测量的至少一个附加参数随时间的趋势分析。

11.如权利要求10所述的方法，其中，所述附加参数是洗脱所述至少一个所捕获产物时相对于被装载到所述柱上的样本装料的量所测量的洗脱峰面积。

12.如权利要求9至11中的任一项所述的方法，其中，评估所述至少一个附加参数的步骤进一步包括：如果在检测到穿透的同时所述纯化容量低于预定下阈值，则采用新柱来替换所述柱。

13.如权利要求9至11中的任一项所述的方法，其中，步骤c)进一步包括：如果检测到所述至少一个所捕获产物的穿透，则在所述下一个纯化循环中使装载期间所装载的样本装料的所述某个量减少。

14.如权利要求13所述的方法，其中，在步骤a)中的样本的装载在装载时间(Δt)期间执行；以及所述装载时间在步骤c)中减少，以防止所述下一个纯化循环期间的穿透。

15.如权利要求14所述的方法，其中，当在至少25次连续纯化循环期间在步骤c)中保持所述装载时间时，对所述下一个纯化循环使所述装载时间增加。

16.如权利要求9至11中的任一项所述的方法，其中，在步骤b)中的所测量参数是来自被安装在所述柱后的UV检测器的信号。

17.如权利要求9至11中的任一项所述的方法，其中，对样本装料批或者对从细胞培养反应器连续提供的样本装料执行所述循环重复纯化。

18.一种用于监测柱捕获色谱系统中的操作状态的方法，所述柱捕获色谱系统配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括配置成在装载期间在所述柱中捕获的至少一个产物，其中所述方法包括：

a)执行纯化循环，包括：将某个量的样本装料装载到所述柱上，清洗所述柱，并且洗脱至少一个所捕获产物；

b)在所述至少一个所捕获产物的洗脱期间测量至少一个参数，所述至少一个参数指示所述色谱系统中的纯化容量；

c)评估(74)所述至少一个参数；以及如果所述纯化容量低于预定上阈值，则清洁所述柱；以及

d)重复进行步骤a)-c)。

19.如权利要求18所述的方法，其中，所述至少一个参数被选择为相对于被装载到所述柱上的样本装料的所述某个量的洗脱的至少一个产物的量。

20.如权利要求18或19所述的方法，其中，所述至少一个参数被选择为滴度，以及所述方法进一步包括确定洗脱期间的峰面积，并且基于所确定峰面积来估计滴度。

21.如权利要求18至19中的任一项所述的方法，其中，对样本装料批或者对从细胞培养反应器连续提供的样本装料执行所述循环重复纯化。

22.一种捕获色谱系统，所述捕获色谱系统包括：柱，其配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括至少一个产物；以及控制单元，其配置成控制所述柱中的纯化，其中所述控制单元进一步配置成执行如权利要求1至17中的任一项所述的方法。

23.一种捕获色谱系统，所述捕获色谱系统包括：柱，其配置用于对某个体积的样本装料执行的循环重复纯化，所述体积的样本装料包括至少一个产物；以及控制单元，其配置成控制所述柱中的纯化，其中所述控制单元进一步配置成执行如权利要求18至21中的任一项所述的方法。

24.一种用于监测柱色谱系统中的操作状态的计算机程序，其包含指令，所述指令当其在至少一个处理器上被执行时使所述至少一个处理器执行如权利要求1至21中的任一项所述的方法。

25.一种计算机可读存储介质，其携带如权利要求24所述的用于监测柱色谱系统中的操作状态的计算机程序。