CN113975294B - 根管内消毒药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种根管内消毒药物及其制备方法,属于口腔药物技术领域。该消毒药物所为液态,包括壳聚糖、螯合剂和溶剂。本发明的根管内消毒药物,以壳聚糖为主要活性组分,以螯合剂和表面活性剂吐温80为辅助剂,对牙髓卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌等对根管感染的主要相关菌均有较强的抑制作用。
Description
技术领域
本发明属于口腔药物技术领域,具体涉一种根管内消毒药物及其制备方法。
背景技术
甲壳素是继纤维素后地球上第二丰富的天然多糖,广泛存在于海洋节肢动物,比如虾、蟹等甲壳类动物的外壳。壳聚糖是甲壳素脱乙酰的产物。壳聚糖具有抑菌、抗肿瘤等多种独特的生物活性。
柯松等【1】综述了壳聚糖对细菌和真菌抑制效果的研究进展,认为壳聚糖的抑菌性能影响因素众多且复杂,目前已研究的影响因素主要有分子量、浓度、脱乙酰度、pH值、金属离子、菌株、晶型等,多种因素之间又有相互交错作用,使得目前对壳聚糖抑菌性影响因素的评价试验较为困难。本专利的研究人员在以前的研究中【2】,发现壳聚糖-Zn配合物、壳聚糖-Ag配合物和N,O-羧甲基壳聚糖对根管感染的牙髓卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌等主要相关菌均有较强的抑制作用。但是壳聚糖对在口腔医学中的应用还处在起步阶段,其抑菌作用原理还不太清楚。周琳等【3】发现EDTA能够增强MTAN(Nisin粉、柠檬酸和吐温80的混合物)对于血链球菌、具核梭杆菌和牙龈卟啉单胞菌的抗菌作用,但是EDTA本身本没有杀菌作用,其作用机理是促进细胞对Nisin的敏感性和渗透性。EDTA等螯合剂对于壳聚糖抑菌作用的影响尚不明确。
参考文献:
[1]柯松,王文凯,刘载阳.壳聚糖抑菌性能的研究进展[J].生物骨科材料与临床研究,16(3).
[2]刘琨,侯本祥,杨圣辉,等.壳聚糖体外抑菌实验研究[J].现代口腔医学杂志2007年21卷3期,281-283页,ISTIC CA,2007.
[3]周琳,蔡文静,杨慧,等.MTAN用于抑制血链球菌,具核梭杆菌,牙龈卟啉单胞菌混合菌的体外研究[J].安徽医科大学学报,2021,56(8):4.
发明内容
本发明是在以前实验基础上的进一步研究,尝试考察EDTA等螯合剂对于壳聚糖对牙髓卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌等对根管感染的主要相关菌作用的影响。
本发明的第一方面在于公开一种根管内消毒药物,所述根管内消毒药物为液态,包括壳聚糖、螯合剂和溶剂。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述壳聚糖选自壳聚糖-Zn配合物、壳聚糖-Ag配合物和N,O-羧甲基壳聚糖中的一种或多种。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述螯合剂包括乙二胺四乙酸和二亚乙基三胺五乙酸,进一步优选摩尔比为(1:3)-(3:1),更进一步优选摩尔比为1:1。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述螯合剂包括二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸,进一步优选摩尔比为(1:3)-(3:1),更进一步优选摩尔比为1:1。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述螯合剂包括乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸,进一步优选摩尔比为(1-3):(1-3):(4-8),更进一步优选摩尔比为1:1:2。
在本发明的一些优选的实施方式中,还包括表面活性剂,优选所述表面活性剂为吐温80。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述溶剂为中和液,所述中和液包括冰醋酸和氢氧化钠水溶液。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述氢氧化钠水溶液的浓度为0.2-1.0M,进一步优选为0.5M。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述冰醋酸和氢氧化钠水溶液的体积比为(1-5):(4-10),进一步优选为3:6。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述壳聚糖的浓度为0.5-3%(w/v),进一步优选为1%。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述螯合剂的浓度为1-20mM,进一步优选为1mM。
在本发明的一些优选的实施方式中,所述表面活性剂的浓度为1-3%(v/v),进一步优选为2%(v/v)。
在本发明的一些优选的实施方式中,包括壳聚糖、螯合剂和表面活性剂,所述壳聚糖为壳聚糖-Zn配合物,所述螯合剂为二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四亚甲基膦酸,所述表面活性剂为吐温80,进一步优选所述螯合剂为乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸。
在本发明的一些优选的实施方式中,包括壳聚糖、螯合剂和表面活性剂,所述壳聚糖为壳聚糖-Ag配合物,所述螯合剂为二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四亚甲基膦酸,所述表面活性剂为吐温80,进一步优选所述螯合剂为乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸。
在本发明的一些优选的实施方式中,包括壳聚糖、螯合剂和表面活性剂,所述壳聚糖为N,O-羧甲基壳聚糖,所述螯合剂为乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸,所述表面活性剂为吐温80。
本发明的第二方面在于公开第一方面所述的根管内消毒药物的制备方法,包括以下步骤:
(1)取壳聚糖加入到冰醋酸中,搅拌溶解,再加入氢氧化钠水溶液,搅拌均匀;
(2)依次加入螯合剂和吐温80,搅拌均匀,得到所述根管内消毒药物。
本发明中,P.g为牙龈卟啉单胞菌,P.e为牙髓卟啉单胞菌,P.i为中间普氏菌,A.v为G+菌粘性放线菌。
本发明中,术语“具有显著差异”、“具有显著性差异”和“差异具有统计学上的意义”内涵是一样的,均为P<0.05。
本发明的有益效果:
(1)本发明的根管内消毒药物,以壳聚糖为主要活性组分,以螯合剂和表面活性剂吐温80为辅助剂,对牙髓卟啉单胞菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌等对根管感染的主要相关菌均有较强的抑制作用;
(2)本发明的根管内消毒药物,研究了不同的螯合剂和特定的壳聚糖组分制成的根管内消毒药物对抑菌作用的的相互影响,发现了特定的螯合剂和壳聚糖组分的组合,可以显著提高壳聚糖对根管感染主要相关菌的抑制作用。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式,本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用,本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用,在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
所述壳聚糖-Zn配合物和壳聚糖-Ag配合物的制备方法是壳聚糖与金属离子分别螯合,N,O-羧甲基壳聚糖的制备方法是壳聚糖在碱性条件下与氯乙酸反应,所述壳聚糖-Zn配合物、壳聚糖-Ag配合物和N,O-羧甲基壳聚糖均来自北京芭萌缔生物科技有限公司。
若非特别指出,实施例和对比例为组分、组分含量、制备步骤、制备参数相同的平行试验。
实施例1单一螯合剂对三种壳聚糖抑菌的影响
一种根管内消毒药物,包括壳聚糖、螯合剂、吐温80和中和液。所述中和液为冰醋酸和0.5M的氢氧化钠水溶液,二者的体积比为3:5。
壳聚糖、螯合剂和吐温80的含量见下表:
表1根管内消毒药物配方
根管内消毒药物的制备方法,包括以下步骤:
(1)取壳聚糖加入到冰醋酸中,搅拌溶解,再加入氢氧化钠水溶液,搅拌均匀;
(2)依次加入螯合剂和吐温80,搅拌均匀,得到所述根管内消毒药物。
实施例2复合螯合剂对三种壳聚糖抑菌的影响
一种根管内消毒药物,包括壳聚糖、螯合剂、吐温80和中和液。所述中和液为冰醋酸和0.5M的氢氧化钠水溶液,二者的体积比为3:5。
壳聚糖、螯合剂和吐温80的含量见下表:
表3根管内消毒药物配方
根管内消毒药物的制备方法,同实施例1。其中螯合剂按着乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四亚甲基膦酸的顺序,依次加入,然后搅拌均匀。
试验例1根管内消毒药物抑菌实验——单一螯合剂
取实施例1-3的各个配方的根管内消毒药物,按照在先研究(刘琨,侯本祥,杨圣辉,等.壳聚糖体外抑菌实验研究[J].现代口腔医学杂志2007年21卷3期,281-283页,ISTICCA,2007.)的实验材料和方法,测定4种受试细菌的抑菌环直径,n=10。结果见表4。
表4单一螯合剂对三种壳聚糖抑菌的影响
根管内消毒药物配方中,对比1-3三种壳聚糖本身对于4种菌均有一定的抑制作用,三者之间没有显著差异。对比4-6乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸三种螯合剂和吐温80的组分对4种菌的抑制作用可以忽略。添加乙二胺四乙酸的采用壳聚糖-Zn配合物的配方1和对比1相比,对于4种菌的抑制作用提高不显著,没有统计学意义。采用壳聚糖-Ag配合物和N,O-羧甲基壳聚糖有类似的结果。
试验例2根管内消毒药物抑菌实验——复合螯合剂
取实施例1-3的各个配方的根管内消毒药物,按照在先研究(刘琨,侯本祥,杨圣辉,等.壳聚糖体外抑菌实验研究[J].现代口腔医学杂志2007年21卷3期,281-283页,ISTICCA,2007.)的实验材料和方法,测定4种受试细菌的抑菌环直径,n=10。结果见表5。
表5复合螯合剂对三种壳聚糖抑菌的影响
采用壳聚糖-Zn配合物的根管内消毒药物配方中,添加乙二胺四乙酸和二亚乙基三胺五乙酸两种螯合物的配方4对于4种菌的抑制作用与配方1没有显著差异。添加二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四亚甲基膦酸两种螯合物的配方5对于4种菌的抑制作用与配方1有显著差异。添加乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸三种螯合物的配方6对于4种菌的抑制作用与配方5有显著差异。采用壳聚糖-Ag配合物的根管内消毒药物与壳聚糖-Zn配合物类似。采用N,O-羧甲基壳聚糖的根管内消毒药物配方10-11对于4种菌的抑制作用与配方3没有显著差异,配方12与配方3的差异具有统计学上的意义。
降低吐温80浓度后的对比7-9,对P.g、P.e和P.i的抑制作用降低到不添加螯合剂的水平,对A.v的抑制作用没有显著下降。
以上对本发明优选的具体实施方式和实施例作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施方式和实施例,在本领域技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明构思的前提下作出各种变化。
Claims (3)
1.一种根管内消毒药物,其特征在于,所述根管内消毒药物为液态,包括壳聚糖、螯合剂和溶剂;
还包括表面活性剂,所述表面活性剂为吐温80;
所述壳聚糖选自壳聚糖-Zn配合物、壳聚糖-Ag配合物和N,O-羧甲基壳聚糖中的一种或多种;
所述螯合剂包括乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸;所述乙二胺四乙酸、二亚乙基三胺五乙酸和乙二胺四亚甲基膦酸的摩尔比为1:1:2;
所述壳聚糖的浓度为0.5-3%(w/v);
所述螯合剂的浓度为1-20mM;
所述表面活性剂的浓度为2%(v/v)。
2.根据权利要求1所述的根管内消毒药物,其特征在于,所述溶剂为中和液,所述中和液包括冰醋酸和氢氧化钠水溶液。
3.根据权利要求2所述的根管内消毒药物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取壳聚糖加入到冰醋酸中,搅拌溶解,再加入氢氧化钠水溶液,搅拌;
(2)依次加入螯合剂和吐温80,搅拌,得到所述根管内消毒药物。
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