CN113892460A - Nod-b6重组近交系小鼠模型的构建方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了NOD‑B6重组近交系小鼠模型的构建方法及应用，属于实验动物模型技术领域。以NOD/ShiLtJ X小鼠和C57BL/6J小鼠作为亲本，杂交获得F1代；F1代同一窝小鼠全同胞交配，获得F2代；后续各代同一窝小鼠均进行全同胞交配，至20代以上，获得NOD‑B6重组近交系小鼠。本发明构建的小鼠模型纯合率高，后代繁殖稳定，可用于耳聋、糖尿病、干燥综合征等疾病的生物研究。
Description
技术领域
本发明属于实验动物模型技术领域，具体涉及NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法及应用。
背景技术
实验动物是生物医学研究中不可或缺的工具，实验动物在探究基因基础功能，探寻疾病的发病机制以及应用药物的临床前筛选等方面有着十分重要的作用。小鼠在发育和代谢上与人类具有极大的相似性，其基因与人类基因也具有极高的相似度(小鼠99％的基因能在人类基因组中找到同源基因)，且其生命周期短，被认为是哺乳动物中理想的模式生物。
随着生物医学研究的不断发展，现有的小鼠模型难以满足更为广泛的实验需求，因此，如何提供新颖的动物模型是本领域亟待解决的问题。
发明内容
本发明公开了NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法，所形成的动物模型基因纯合率达到99％以上，可满足生物医学研究需求。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法：
以NOD/ShiLtJ X小鼠和C57BL/6J小鼠作为亲本，杂交获得F1代；
F1代同一窝小鼠全同胞交配，获得F2代；
后续各代同一窝小鼠均进行全同胞交配，至20代以上，获得NOD-B6重组近交系小鼠。
NOD/ShiLtJ小鼠，简称NOD小鼠，是常用的动物模型，可自发发展为Ⅰ型糖尿病，具有严重的听力缺陷，也是比较适宜的干燥综合征动物模型。
C57BL/6J小鼠，简称B6小鼠，是实验室常用的动物模型，常被作为产生自发突变和诱发突变的同基因型小鼠的背景品系小鼠，老年的B6也表现为渐近性耳聋。
本发明使用以上两种小鼠作为亲本杂交进行模型构建，使其特殊的疾病表型相关基因在杂交后代的反复交配过程中趋向纯合，20代后每个后代的每个基因位点能达到99％以上的纯合率，进而形成全新的基因组稳定的可持续的动物模型。
优选地，NOD/ShiLtJ X小鼠作为母本；
C57BL/6J小鼠作为父本。
上述NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法可用于构建耳聋、糖尿病、干燥综合征等疾病的小鼠模型。
综上所述，本发明通过NOD/ShiLtJ X小鼠和C57BL/6J小鼠杂交，在经过20代以上同窝小鼠全同胞交配，构建获得纯合率高的小鼠模型，小鼠模型之间的基因组信息与表型数据可成为通过连锁分析筛查疾病基因的庞大资源，并且构建的小鼠模型可用于耳聋、糖尿病、干燥综合征等疾病的生物研究。
附图说明
图1所示为不同小鼠的ABR阈值；
其中，A为1月龄的NOD小鼠、B6小鼠在不同频率下的ABR阈值；
B为F2代同一窝小鼠3周和6周在16KHz的ABR阈值。
图2所示为小鼠模型构建过程染色体片段交换示意图。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
实验材料：NOD/ShiLtJ X小鼠、C57BL/6J小鼠均为市售。
NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法：
以NOD/ShiLtJ X小鼠作为母本，C57BL/6J小鼠作为父本，杂交获得F1代；
F1代同一窝小鼠全同胞交配，获得F2代；
后续各代同一窝小鼠均进行全同胞交配，至20代以上，获得NOD-B6重组近交系小鼠。
对前五代小鼠各年龄段的听力情况进行跟踪，结果如图1所示，重组近交系小鼠自F2代开始就出现表性分离，相同年龄段小鼠的听力损失呈现体状分布，可见，重组近交系后代自F2代起出现了与理论意义上相一致的染色体片段交换。
如图2所示，NOD/ShiLtJ X小鼠与C57BL/6J小鼠杂交产生的F1代胶束具有相同基因型，但各位点均为杂合；F2代呈不同基因型，且部分染色体片段为纯合；随着代数增多，纯合率逐渐升高，直到20代之后达到99％以上纯合率，成为稳定的持续延续的动物模型；繁殖至20代之后，每种基因型的重组近交系后代都可作为一种新的动物模型，用于与其表型相关的生物学实验，并且其后代均为纯合。将多种基因型的纯合重组近交系后代各自的性状或疾病表型与其基因型进行对应分析，包括通过测序分析其转录组学、蛋白质组学、代谢组学以及DNA序列多态性等生物信息数据，对于为人类耳聋、糖尿病、干燥综合征等遗传性疾病研究提供全新且稳定可靠的动物模型具有重要价值。
对上述实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (5)
1.NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法，其特征在于，
以NOD/ShiLtJ X小鼠和C57BL/6J小鼠作为亲本，杂交获得F1代；
F1代同一窝小鼠全同胞交配，获得F2代；
后续各代同一窝小鼠均进行全同胞交配，至20代以上，获得NOD-B6重组近交系小鼠。
2.根据权利要求1所述的NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法，其特征在于，
NOD/ShiLtJ X小鼠作为母本；
C57BL/6J小鼠作为父本。
3.权利要求1或2所述的NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法在构建耳聋小鼠模型中的应用。
4.权利要求1或2所述的NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法在构建糖尿病小鼠模型中的应用。
5.权利要求1或2所述的NOD-B6重组近交系小鼠模型的构建方法在构建干燥综合征小鼠模型中的应用。
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