CN113812323A - 一种防控三七线虫病的方法 - Google Patents

一种防控三七线虫病的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及药用植物绿色病害防控技术领域，具体公开一种防控三七线虫病的方法，包括以下步骤：选用杀线虫植物：苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，混合后进行腐熟，将混合腐熟后的杀线虫植物、生物炭和有机肥按质量比2:1.5:1混合后，再混入土中；将苦蒿、大蓟地上部分，混合均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛；将苦蒿、大蓟地上部分，进行粉碎至20～30目，然后在三七种植的第6个月、第8个月、第10个月，分别均匀的洒至三七种植的墒面，采用本发明的技术方案后，三七线虫病抑制率高达90%‑92%，化学药剂和农药使用量降低60%，实现三七的生态种植和病害绿色防控。

Description

一种防控三七线虫病的方法
技术领域
本发明涉及药用植物绿色病害防控技术领域，具体涉及一种防控三七线虫病的方法。
背景技术
三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)为五加科人参属植物，是我国享誉海内外的传统名贵中药材。而线虫病已发展成为三七产业的主要障碍因子，线虫病主要危害三七药用部位，可引起根部出现根瘿、根肿、粗短根、根皮层肿胀和根腐等病变，并造成植株萎蔫。同时，线虫了直接危害根部外，还能传播真菌、细菌、病毒等，产生复合侵染造成复合病害，如线虫与致萎真菌镰刀菌(Fusarium)、轮枝菌(Verticillium)和疫霉菌(Phytophthora)的相互作用可加剧枯萎病、黄萎病、根腐病的发生，造成根的坏死与腐烂，导致三七产业绝收。
植物是自然界种类繁多和结构多样次生代谢物质的主要来源(占80％以上)，这些次生物质介导着植物与其它有机体间的化学作用，并与土壤微生物保持高效的地下通讯，调控、诱导微生物群落区系和功能，并对生态环境作出有利反馈。植物提取物不仅能抵御病原微生物的侵染，还具有生物刺激作用促进植株生长发育，增加植株抗性。同时，植物的次生代谢物质还可聚集特定的与土壤养分循环相关的微生物群落，改变植物间的氮代谢及养分循环，将难吸收的营养形态转化为可吸收利用的有机物，增加养分回归，为共生植物所利用，对生态系统的稳定性及对抗生态环境恶化的缓冲能力起着重要作用。
将药用植物源引入土壤，不仅能直接杀死线虫，还可改善土壤微生物种群结构，促进养分循环，同时为生物防治中的微生物菌剂提供能源，使其向“抑病和有机养分土壤”转化，缓解化肥和农药的使用，保障三七的生态种植以及病害防治的持续性和安全性。
挑选田间优势杂草，合理开发变废为宝，不仅可达到科学防除的效果，还具有较高的生态和经济效益，成为解决生物入侵问题的最佳途径。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种防控三七线虫病的方法，以解决三七生长过程中的线虫危害问题。
为实现以上目的，本发明提供以下技术方案：
一种防控三七线虫病的方法，包括以下步骤：
(1)土壤改良：选用杀线虫植物：苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，混合后进行腐熟，将混合腐熟后的杀线虫植物、生物炭和有机肥按质量比2:1.5:1混合后，再混入土中；
(2)植物覆盖：将苦蒿、大蓟地上部分，混合后均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛；
(3)植物再次施入：将步骤(2)中配比的植物，进行粉碎至20～30目，然后在三七种植的第6个月、第8个月、第10个月，分别均匀的洒至三七种植的墒面。
所述步骤(1)中苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，按质量比2:2:1混合后进行腐熟。
所述步骤(2)中，将苦蒿、大蓟地上部分，按照质量比为2:1混合，均匀的铺设于三七种植墒面，混合后的苦蒿和大蓟按密度2kg/m2铺设，松毛厚度为2-3cm。
所述步骤(1)中，混入土中时深翻土壤40-45cm混入，覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗。
本发明的有益效果：
1.三七线虫病抑制率高达90％-92％，化学药剂和农药使用量降低60％，实现三七的生态种植和病害绿色防控。
2.达到对优势杂草资源利与用的生态和经济效益。
本发明所述的杀线虫植物抑制根腐线虫的应用，整套技术能够有效的抑制三七线虫病。在其应用中，所述的杀线虫植物苦蒿、紫茎泽兰、大蓟的质量比为2:2:1，利用此技术方案线虫病的抑制率为80.58-85.58％，而选用苦蒿、紫茎泽兰、大蓟分别单一的施入土壤，线虫病的抑制率分别为58-62％、56-64％、25-44％，本发明选用杀植物线虫配比对线虫病的抑制率比苦蒿、紫茎泽兰、大蓟单一的施入土壤分别提高了37％-39％、33％-43％、94％-222％。
本发明土壤改良步骤中杀线虫植物、生物炭、有机肥的质量比为2:1.5:1，此技术方案的土壤有机质含量较单一施入杀线虫植物显著增高39.82％。单一施入配比的杀线虫植物，此技术方案线虫病的抑制率为80.58-85.58％，而按杀线虫植物、生物炭、有机肥的质量比为2:1.5:1的技术方案对线虫病的抑制率提高到90％-95％。
本发明植物再次施入步骤中，在三七种植第6个月、8个月、10个月，再次施入杀线虫植物干粉，此技术方案可达到抑制三七线虫病长达3年的时效，使三七整个生育期免除三七根腐线虫的侵害。利用此技术方案在三七种植的第3年线虫病的抑制率均高达90％-92％。
附图说明
图1基于ITS序列以邻接法构建线虫及其近源种的系统发育树显示图；
图2线虫对三七种子存苗率的影响显示图(Control为对照组；Treated为线虫侵染组；A为人参链格孢(Alternaria panax)；B为毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans)；C为茄镰孢菌(Fusarium solani)；E为假单胞菌(Pseudomonas sp.))。
具体实施方式
以下通过具体实施例来进一步说明本发明，但实施例仅用于说明，并不能限制本发明保护的范围。本发明中所使用的有机肥购买于师宗县锦沣道地农业科技有限公司，产品名称：锦沣-滇黄精专用有机肥，登记证号云农肥(2018)准字2139号；所使用的生物炭购买于云南威鑫农业科技股份有限公司，总空隙度≧70％；持水量≧5倍。
实施例1
一种防控三七线虫病的方法，包括以下步骤：
(1)土壤改良：选用杀线虫植物：苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分(避开开花结实期采收杀线虫植物的地上部分)，按质量比2:2:1混合后进行30天腐熟，深翻土壤40-45cm，将杀线虫植物、生物炭、有机肥按质量比2:1.5:1混入土中，每亩施入杀线虫植物、生物炭和有机肥的总量为1800～2000kg，覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗；
(2)植物覆盖：将苦蒿、大蓟地上部分，直接均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛，杀线虫植物按密度2kg/m2铺设，松毛厚度为2-3cm；
(3)植物再次施入：将步骤(2)中配比的植物，进行粉碎至20～30目，然后在三七种植的第6个月、第8个月、第10个月，分别均匀的洒至三七种植的墒面。
经检测以上技术方案，对线虫病的抑制率为93％。
试验验证
1、三七根腐线虫的鉴定和致病性研究
于文山市三七种植基地，采集30份三七根腐样品，将根腐根部进行体视镜和解剖镜观察，以命名L1的线虫检出率最高，检出率为53.33％，且数量基数最大。通过分子生物学手段将线虫得到的ITS序列与从GenBank下载的序列进行比对分析，结果显示命名为L1的线虫鉴定为双胃线虫目双胃线虫科Pristionchus属的线虫Pristionchus pacificus，命名为L1的线虫碱基序列如SEQ ID NO:1所示，其对比分析的源种发育树分类如图1所示。
开展田间试验，观测线虫对三七种苗存苗率的影响，并与三七根腐病病原菌进行复合侵染，分析线虫与病原菌的作用关系。结果如图2所示，线虫侵染均对三七种苗的存苗率存在极显著影响，在5月份时，线虫侵染下种苗存苗率较CK下降了32.37％，在9月份时下降了63.77％。同时，线虫和致病菌C复合侵染，使存苗率下降为14.43％，较对照降低了81.03％。
由此说明，Pristionchus pacificus线虫对三七种植可造成严重影响，具体表现为使三七存苗率降低，并在根腐病爆发时，联合致病菌共同侵染，使三七几乎绝收。同时线虫侵染三七药用部位根部，对三七药材的产量和品质均会造成负面影响。因此将此线虫作为本发明研究对象。
2、具有杀虫活性的植物选择
挑选12种三七种植基地旁植物源，开展对三七根腐线虫具有杀虫活性的植物源筛选试验。采用的三七根腐线虫为Pristionchus pacificus，选用的植物源包括：紫茎泽兰、土大黄、土荆芥、苦蒿、三分三、大蓟、曼陀罗、大狼毒、小狼毒、蓖麻、波斯菊、青蒿。结果如表1，结果显示苦蒿、大蓟、土大黄、小狼毒的提取物对线虫的杀虫活性最强，校正死亡率达到了100％，紫茎泽兰和蓖麻抑制率达到90％以上。
为方便就地取材的目的，实现生态和经济效益双赢，根据前期调研结果，选择三七种植基地旁储存量巨大的紫茎泽兰、苦蒿、大蓟植物源作为杀线虫植物进行下一步田间应用研究。
表1种植物提取物对线虫的毒力测定
Figure BDA0003285318030000051
3、杀线虫植物开展土壤改良试验
选用杀线虫植物开展土壤改良试验，设置对照、覆膜对照、杀线虫植物的单一和配比处理、添加有机肥和生物炭的混合组配比处理。覆膜45天，揭膜10天后采土进行土壤养分检测，具体结果如表2。
将杀线虫植物进行2:2:1配比后有机质含量、全氮、速效氮、速效钾含量均显著提高，杀线虫植物配比后有机质含量较苦蒿、紫茎泽兰、大蓟的单一植物处理分别提高了28.70％、39.77％、143.65％；全氮较单一植物处理分别提高了46.15％、78.13％、96.55％；速效氮较单一植物处理分别提高了6.73％、41.85％、15.03％；速效钾较单一植物处理分别提高了5.24％、14.53％、8.13％。
混合组的杀线虫植物、生物炭、有机肥的质量比为2:1.5:1的配比，此技术方案土壤的pH较空白对照显著增高，酸性土壤为三七根腐病爆发的诱因之一，此发明技术改善了土壤酸碱度，为三七多年种植创造了较好的土壤环境。另外混合组土壤的有机质含量较单一施入杀线虫植物配比技术方案提高了26.54％，速效氮提高了65.49％。
因此，此发明技术改善进了土壤酸碱度，使土壤的有机质含量和营养状况提高，显著增加植株抗性，增加植株对生态系统的稳定性及对抗生态环境恶化的缓冲能力，增加抵御线虫侵染的抗病能力。
表2各处理土壤养分表
Figure BDA0003285318030000061
4、田间应用试验
(1)苦蒿处理：于10月份在三七种植前，选用苦蒿的地上部分，切成1cm以内的小段，进行30天腐熟。深翻土壤40-45cm，将苦蒿混入其中，覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗。并将苦蒿的地上部分作为覆盖物，均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛。
(2)紫茎泽兰处理：选用紫茎泽兰，处理方法同(1)。
(3)大蓟处理：选用大蓟，处理方法同(1)。
(4)杀线虫植物配比：将杀线虫植物苦蒿、紫茎泽兰、大蓟的地上部分，切成1cm以内的小段，按质量比2:2:1进行30天腐熟。深翻土壤40-45cm，将配比的杀线虫植物混入土中。覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗。避开开花结实期采收杀线虫植物的地上部分，杀线虫植物苦蒿、大蓟按质量比为2:1混合，直接均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛。杀线虫植物按密度2kg/m2铺设，松毛厚度为2-3cm。
(5)混合组配比：将杀线虫植物苦蒿、紫茎泽兰、大蓟的地上部分，切成1cm以内的小段，按质量比2:2:1进行30天腐熟。深翻土壤40-45cm，将杀线虫植物、生物炭、有机肥按质量比2:1.5:1混入土中，杀线虫植物按每亩800kg混入，生物炭按每亩600kg施入，有机肥按每亩400kg施入。覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗。避开开花结实期采收杀线虫植物的地上部分，杀线虫植物苦蒿、大蓟按质量比为2:1混合，直接均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛。杀线虫植物按密度2kg/m2铺设，松毛厚度为2-3cm。
(6)设置无土壤改良、铺设松毛为对照处理，于第二年4月调查出苗率，10月调查存苗率及生长量数据。
(7)结果显示(表3)，本发明所述的杀线虫植物抑制根腐线虫的应用，整套技术能够有效的抑制三七线虫病。在其应用中，所述的杀线虫植物苦蒿、紫茎泽兰、大蓟的质量比为2:2:1，利用此技术方案线虫病的抑制率为80.58-85.58％，而选用苦蒿、紫茎泽兰、大蓟分别单一的施入土壤，线虫病的抑制率分别为58-62％、56-64％、25-44％，本发明选用杀植物线虫配比对线虫病的抑制率比苦蒿、紫茎泽兰、大蓟单一的施入土壤分别提高了37％-39％、33％-43％、94％-222％。
(8)混合组杀线虫植物、生物炭、有机肥的质量比为2:1.5:1的配比技术方案，此技术方案对线虫病的抑制率提高到90％-95％。单一施入配比的杀线虫植物技术方案线虫病的抑制率为80.58-85.58％。
表3田间试验效果
Figure BDA0003285318030000071
Figure BDA0003285318030000081
(9)在混合组配比技术方案的基础上，设计了添加了杀线虫植物再次施入步骤，在三七种植后的第6个月、8个月、10个月，分别再次施入杀线虫植物干粉，具体实施方案为：混合配比处理：实施方案同(5)，未再次添加杀线虫植物；混合配比+植物再次施入处理：实施方案同(5)，在三七种植后的第6个月、8个月、10个月，分别再次施入杀线虫植物干粉，干粉为苦蒿、大蓟地上部分，按照质量比为2:1混合。每个实施方案重复3次。
(10)此技术方案可达到抑制三七线虫病长达3年的时效，具体效果详见表4，使三七整个生育期免除三七根腐线虫的侵害。利用此技术方案在三七种植的第三年线虫病的抑制率均高达90％-92％，较混合配比处理技术方案提高了23.49％-26.49％。
表4再次施入植物干粉后的效果对比
Figure BDA0003285318030000082
Figure BDA0003285318030000091
Figure BDA0003285318030000101
序列表
<120> 一种防控三七线虫病的方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 706
<212> DNA
<213> 线虫(Pristionchus pacificus)
<400> 1
tagatggttc gattagtctt tcgcccctat acccgagtcc gacgatcgat ttgcacgtca 60
gaaccgcttc ggacttccat cagagtttcc tctgacttcg tcctgctcag gcatagttca 120
ccatctttcg ggtcctagtg tgtacgctcc atctccacac cactgcaagc agtaggcatg 180
ggactatgtt gcgccgctgg ccgagaccga cggatcacat atcagacgaa caagccgccc 240
ttcacattta ttgcgccaat aggtttaata cccaatgact cgcgtacata ctagacttct 300
tggtccgtgt ttcaagacgg gtcggatagg tggtcgactt tcgcataccg ggagtgggcc 360
ataggcgagc gcccgctaat cagcacacgt acgaggcagc cagacatgtc cgactaccaa 420
gcagcacacc aactaacgaa cgaacgcgca gaggcacggc caccgctacg atcagcgagc 480
acatcaactt ccgacgacag aacactacca agcaagcttg ggtgactctg aagccttcag 540
aagggctcac cgaacgtccc agcacgtacc gacaatgaat gcgcacccga tcacgagcga 600
acccgatcac gagcactgaa cactgccagt ttcgtcaact ctatccgctt agcccccacg 660
tggtttcaca ttctcttgaa ctctctcttc aaagttcttt gcactt 706

Claims (6)

1.一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）土壤改良：选用杀线虫植物：苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，混合后进行腐熟，将混合腐熟后的杀线虫植物、生物炭和有机肥按质量比2:1.5:1混合后，再混入土中；
（2）植物覆盖：将苦蒿、大蓟地上部分，混合后均匀的铺设于三七种植墒面，后铺设松毛；
（3）植物再次施入：将步骤（2）中配比的植物，进行粉碎至20～30目，然后在三七种植的第6个月、第8个月、第10个月，分别均匀的洒至三七种植的墒面。
2.根据权利要求1所述的一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，所述步骤（1）中苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，按质量比2:2:1混合后进行腐熟。
3.根据权利要求1所述的一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，将苦蒿、大蓟地上部分，按照质量比为2:1混合，均匀的铺设于三七种植墒面，混合后的苦蒿和大蓟按密度2kg/m2铺设，松毛厚度为2-3cm。
4.根据权利要求1所述的一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，混入土中时深翻土壤40-45cm混入，覆膜45天，揭膜晾晒10天后种植三七种苗。
5.根据权利要求1所述的一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，每亩施入杀线虫植物、生物炭和有机肥的总量为1800～2000kg。
6.根据权利要求1-5任意所述的一种防控三七线虫病的方法，其特征在于，所述苦蒿、紫茎泽兰和大蓟的地上部分，避开开花结实期采收。
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