CN1137621C - 冰冻切片组织支持剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种冰冻切片组织支持剂,它由羧甲基纤维素纳、聚乙烯醇-124、丙三醇、聚乙二醇-400、蔗糖、麝香草酚、蒸馏水组成,将水溶性高分子化合物,经丙三醇等进行塑化,加添加剂和稳定剂,经水浴加热配制而成,它能与进口OCT媲美,制备的切片染色结果清晰;平整、无皱褶;切片薄,厚度均匀。
Description
发明领域
本发明涉及一种冰冻切片组织支持剂,具体的说是涉及一种能在快速病理诊断中,帮助其直接进行冰冻切片,并制出优良病理切片的支持剂,以给临床提供及时、准确可靠的病理诊断依据。
背景技术
目前,在日常快速病理诊断中,病理活检组织,特别是一些微小组织(如肾穿、肝穿、纤维支气管镜及胃镜活检等)及散碎组织(如脑组织、宫内膜等)标本,在进行冰冻制片时,直接进行冰冻切片是很困难的,必须借助支持剂(包埋剂)方能制出优良的病理切片,否则难以给临床提供及时、准确可靠的病理诊断依据。在冰冻制片时,现在国内外多采用香糊、自来水及美国产品OCT(Optimal cutting temperature)作为组织支持剂。但用香糊和自来水作为组织支持剂时,冰冻切片存在以下弊端:①冻结后组织指标变坚硬,切片时阻力较大,很难制出优质的切片,②由于他们的韧性较差,从而难以制成薄片,同时切片易碎,易形成皱褶,使病理诊断受到影响,③常规HE染色后切片易出现核浆共染现象且切片外观较混浊,④由于它们当中含水份较多,易使组织内产生冰晶,致使组织结构变形,导致镜下无法做出准确的病理诊断;⑤不能连续切片,切片易脱落。多数单位使用的进口OCT,切片效果虽好,但价格昂贵(198元/瓶),有时不易购买到。鉴于上述存在的问题,为了进一步提高病理活检冰冻制片质量,现有的用于帮助冰冻切片的支持剂有待于进一步改进。
鉴于现有支持剂在制片中存在的问题,为了进一步提高病理活检冰冻制片质量,本发明人经多年的研究,研制出一种新型的“冰冻切片组织支持剂”。此“冰冻切片组织支持剂”的配方经《中国专利局检索中心》对国内外专利文献、公开出版的所属专业及相关专业主要文献进行初步检索尚未同类技术报导。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能与进口OCT媲美的,价格低廉且制备的切片平整、无皱褶的冰冻切片组织支持剂。
本发明的目的是这样实现的,它由羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇-124、丙三醇、聚乙二醇-400、蔗糖、麝香草酚、蒸馏水组成,将水溶性高分子化合物,经丙三醇等进行塑化,加添加剂和稳定剂,经水浴加热配制而成,其特征在于,由下述配比的原料制成:
羧甲基纤维素纳0.3~0.5g 聚乙烯醇-124 9~12g
丙 三 醇0.5~1.5ml 聚乙二醇-400 3.5~4.5ml
蔗 糖0.2~1.0g 麝 香 草 酚 0.1~0.5g
蒸 馏 水90~120ml。
配制时,将上述配比的原料依次放入盛有蒸馏水的烧杯内,水浴加热溶解后,即可使用。
本发明与现有技术相比,①性能与进口OCT基本一致,有些性能还优于进口OCT,且价格低廉(成本费10-20元左右/瓶),适于国内科研、大专院校与医院病理科普遍使用,是一种理想的进口支持剂代用品;②能与组织紧密结合,在低温条件下,能迅速冻结(2-3min),冻结后支持剂硬度与组织一致,适于临床快速病理诊断的需要;③制备的冰冻切片,经染色后,玻片污染少,染色结果清晰;④由于支持剂中含有经塑化的高分子物质存在,使切片具有一定的韧性,所以切片易于拉伸,切片平整,不形成皱褶和波纹,人为损伤可消除到最低程度,同时能连续进行切片;⑤支持剂冻结后,硬度适中,易于切制薄片(2-3μm),且厚度均匀;⑥所制切片经水洗后,支持剂很容易脱去,切片背景干净;⑦支持剂中的高分子物质能防止游离的细胞成分被冲走,保证切片牢固地贴附于洁净的载物片上而无需使用蛋白甘油,也无需用滤纸吸干;⑧此支持剂pH为中性,对组织结构、细胞内的各种成分有较好的保护作用。用此法制备的切片,除能进行常规HE染色外,还能进行各种特染、组化、免疫组化及免疫荧光等染色;⑨除具有很好的经济效益外,届时还可产生良好的社会效益。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明。
该支持剂主要采用水溶性高分子化合物,经丙三醇等进行塑化,另加一些添加剂和稳定剂经水浴加热配制而成。
实施例如下:
①商购并称重下述配比的原料:
羧甲基纤维素纳0.4g 聚乙烯醇-124 10.5g
丙 三 醇1.0ml 聚乙二醇-400 4.0ml
蔗 糖0.6g 麝 香 草酚 0.3g
蒸 馏 水100ml。
②配制时,将上述配比的原料依次放入盛有蒸馏水的烧杯内,水浴加热溶解后,即得本发明的冰冻切片组织支持剂。
本发明的冰冻切片组织支持剂经北京协和医院、北京医院、北京肾病研究所、肿瘤医院、301医院、朝阳医院、263医院及妇产医院等多家单位和本科常规及科研工作中的实际应用,证实它能与进口OCT媲美,制备的切片染色结果清晰;平整、无皱褶;切片薄,厚度均匀。
Claims (1)
1.一种冰冻切片组织支持剂,它由羧甲基纤维素纳、聚乙烯醇-124、丙三醇、聚乙二醇-400、蔗糖、麝香草酚、蒸馏水组成,将水溶性高分子化合物,经丙三醇等进行塑化,加添加剂和稳定剂,经水浴加热配制而成,其特征在于,由下述配比的原料制成:
羧甲基纤维素纳0.3~0.5g 聚乙烯醇-124 9~12g
丙 三 醇0.5~1.5ml 聚乙二醇-400 3.5~4.5ml
蔗 糖0.2~1.0g 麝 香 草 酚 0.1~0.5g
蒸 馏 水90~120ml。
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