CN113712056A - 一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及农业技术领域,具体涉及一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段;将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时;将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液;在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物;将固体物溶解于甲醇钠溶液,得到甲醇化产物;将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物;将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量,从而实现对利用互花米草化感物质抑制藻类生长的效果的测定。
Description
技术领域
本发明涉及农业技术领域,尤其涉及一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法。
背景技术
目前除藻类有物理法、化学法和生物法等。物理法主要包括机械或人工打捞、黏土絮凝和遮光技术等方法,物理法直接清除水体中的藻类,不会产生二次污染,但是由于需要昂贵的费用,因此该方法只能局限于小水体或大水体的局部水域;化学法使用杀菌灭藻剂,时间效应比较快,但会造成环境污染或破坏生态平衡;生物法的应用也会带来其他生态问题。
由于互花米草是一种具有极强繁殖能力的物种,其生长迅速,由于互花米草对藻类有抑制作用,能够预防藻类对沿海滩涂地区的藻类污染,如此,能否利用互花米草化感物质抑制藻类生长,从而解决海藻污染是预防赤潮发生的关键。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,用于抑制藻类生长,从而解决海藻污染。
为实现上述目的,本发明采用的一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,包括如下步骤,
采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段;
将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时;
将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液;
在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物;
将固体物溶解于甲醇钠溶液,得到甲醇化产物;
将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物;
将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量。
其中,在“采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段”中,所述方法还包括,
采取新鲜互花米草;
将互花米草放入烘箱内烘干;
将互花米草剪成2~4cm的小段,存放待用。
其中,在“将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时”中,所述方法还包括,
选取100段互花米草小段放入20℃的200ml蒸馏水中,每隔6小时震荡蒸馏水30min,并保持互花米草浸提,浸提互花米草48小时,得到浸提液。
其中,在“将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液”中,所述方法还包括,
将得到的浸提液通过1000目的滤网过滤,得到滤液;
将滤液抽滤得到互花米草浸出液;
将互花米草浸出液加入旋转蒸发仪中浓缩,得到浓缩液。
其中,在“在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物”中,所述方法还包括,
向装有50ml浓缩液的容器中加入50ml的甲醇;
将混合溶液摇匀后静置12小时;
再次过滤静置液后将滤液加入旋转蒸发仪内蒸干;
蒸干后得到固体物。
其中,在“将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物”中,所述方法还包括,
将得到的甲醇化产物对正庚烷进行萃取,得到120ml正庚烷的萃取液;
将2.5g无水硫酸钠加入至正庚烷的萃取液中,静置;
将混合液加入旋转蒸发仪浓缩,得到浓缩物。
其中,在“将混合液加入旋转蒸发仪浓缩,得到浓缩物”中,所述方法还包括,
将120ml的混合萃取液加入旋转蒸发仪中蒸发浓缩,得到10ml的互花米草化感物质浓缩物,其浓度为4g/ml。
其中,在“将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量”中,所述方法还包括,
将得到的浓缩物加入至300ml中肋骨条藻溶液中;
将混合液放到摇瓶中培养;
培养结束后,测定肋骨条藻培养液中的中肋骨条生物量。
其中,在“将混合液放到摇瓶中培养”中,所述方法还包括,
培养温度保持在30℃,培养96小时,并在培养过程中每隔8小时摇动一次。
本发明的一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段;将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时;将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液;在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物;将固体物溶解于甲醇钠溶液,得到甲醇化产物;将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物;将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量,从而实现对利用互花米草化感物质抑制藻类生长的效果的测定。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法的流程图。
图2是本发明的采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段的流程图。
图3是本发明的将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液的流程图。
图4是本发明的在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物的流程图。
图5是本发明的将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物的流程图。
图6是本发明的将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量的流程图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例在附图中示出,其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,旨在用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“长度”、“宽度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,在本发明的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
请参阅图1至图6,本发明提供了一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,包括如下步骤:
S101:采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段;
S1011:采取新鲜互花米草;
S1012:将互花米草放入烘箱内烘干;
S1013:将互花米草剪成2~4cm的小段,存放待用;
在本实施方式中,从互花米草靠近根部的位置采取互花米草,互花米草被采集后进行清洗,并烘干互花米草放入烘箱内,调节烘箱内的温度为30℃,去除互花米草表面的水分,然后将互花米草剪切成2cm至4cm的小段,存放待下一步进行使用。
S102:选取100段互花米草小段放入20℃的200ml蒸馏水中,每隔6小时震荡蒸馏水30min,并保持互花米草浸提,浸提互花米草48小时,得到浸提液;
在本实施方式中,从存放待用的互花米草中选取100段,并将互花米草小段放入20℃的200ml蒸馏水的容器中,对互花米草进行浸提48小时,浸提过程中采用机械臂对互花米草的夹持,并带动装有互花米草的蒸馏水容器每隔6小时震荡蒸馏水30分钟,从而得到互花米草的浸提液。
S103:将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液;
S1031:将得到的浸提液通过1000目的滤网过滤,得到滤液;
S1032:将滤液抽滤得到互花米草浸出液;
S1033:将互花米草浸出液加入旋转蒸发仪中浓缩,得到浓缩液;
在本实施方式中,对互花米草的浸提液进行过滤,滤掉浸提液中互花米草的残体,然后对互花米草浸提液进行抽滤,抽滤过程中将抽滤的浸出液加入旋转蒸发仪中,对浸出液进行浓缩,最后得到50ml的浓缩液,此时,浓缩液的体积为浓缩前的30%。
S104:在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物;
S1041:向装有50ml浓缩液的容器中加入50ml的甲醇;
S1042:将混合溶液摇匀后静置12小时;
S1043:再次过滤静置液后将滤液加入旋转蒸发仪内蒸干;
S1044:蒸干后得到固体物;
在本实施方式中,将50ml甲醇加入到装有50ml浓缩液的容器中,此时甲醇与浓缩液的重量比为1:1,然后对容器内的混合液进行摇匀,静置12小时后再次对混合液进行过滤,并将再次过滤后的混合液加入旋转蒸发仪中蒸干,从而得到蒸干后的固体物。
S105:将固体物溶解于甲醇钠溶液,得到甲醇化产物;
在本实施方式中,将固体物溶解在50ml的甲醇钠溶液中,进行甲醇化反应0.5~1小时,反应结束后,得到甲醇化产物。
S106:将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物;
S1061:将得到的甲醇化产物对正庚烷进行萃取,得到120ml正庚烷的萃取液;
S1062:将2.5g无水硫酸钠加入至正庚烷的萃取液中,静置;
S1063:将120ml的混合萃取液加入旋转蒸发仪中蒸发浓缩,得到10ml的互花米草化感物质浓缩物,其浓度为4g/ml;
在本实施方式中,将得到的甲醇化产物对正庚烷进行萃取,得到120ml正庚烷萃取液,然后将2.5g无水硫酸钠加入至120ml的正庚烷萃取液中,静置12小时后得到混合萃取液,将混合萃取液加入旋转蒸发仪中蒸发浓缩,从而得到10ml的互花米草化感物质浓缩物,其中互花米草化感物质浓缩物的浓度为4g/ml。
S107:将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量;
S1071:将得到的浓缩物加入至300ml中肋骨条藻溶液中;
S1072:培养温度保持在30℃,培养96小时,并在培养过程中每隔8小时摇动一次;
S1073:培养结束后,测定肋骨条藻培养液中的中肋骨条生物量。
在本实施方式中,将得到的浓度为4g/ml的浓缩物加入到300ml中肋骨条藻溶液中,将溶液放入到培养箱中,保持培养温度在30℃,并且培养96小时,其中在培养过程中每隔8小时摇动一次培养溶液,待培养96小时完成后,测定肋骨条藻培养液中的中肋骨条生物量。
以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已,当然不能以此来限定本发明之权利范围,本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程,并依本发明权利要求所作的等同变化,仍属于发明所涵盖的范围。
Claims (9)
1.一种利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,包括如下步骤,
采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段;
将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时;
将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液;
在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物;
将固体物溶解于甲醇钠溶液,得到甲醇化产物;
将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物;
将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量。
2.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“采取互花米草,干燥处理后进行剪切,得到2~4cm的小段”中,所述方法还包括,
采取新鲜互花米草;
将互花米草放入烘箱内烘干;
将互花米草剪成2~4cm的小段,存放待用。
3.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将分段的互花米草放入蒸馏水中浸提,持续48小时”中,所述方法还包括,
选取100段互花米草小段放入20℃的200ml蒸馏水中,每隔6小时震荡蒸馏水30min,并保持互花米草浸提,浸提互花米草48小时,得到浸提液。
4.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将浸提液过滤去除互花米草残体,抽滤得到互花米草浸出液,浓缩后,得到浓缩液”中,所述方法还包括,
将得到的浸提液通过1000目的滤网过滤,得到滤液;
将滤液抽滤得到互花米草浸出液;
将互花米草浸出液加入旋转蒸发仪中浓缩,得到浓缩液。
5.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“在浓缩液中加入甲醇后摇匀,静置后过滤,蒸干后得到固体物”中,所述方法还包括,
向装有50ml浓缩液的容器中加入50ml的甲醇;
将混合溶液摇匀后静置12小时;
再次过滤静置液后将滤液加入旋转蒸发仪内蒸干;
蒸干后得到固体物。
6.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将甲醇化产物萃取正庚烷,得到萃取液,加入无水硫酸钠,静置得到混合萃取液,蒸发浓缩后得到化感物质浓缩物”中,所述方法还包括,
将得到的甲醇化产物对正庚烷进行萃取,得到120ml正庚烷的萃取液;
将2.5g无水硫酸钠加入至正庚烷的萃取液中,静置;
将混合液加入旋转蒸发仪浓缩,得到浓缩物。
7.如权利要求6所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将混合液加入旋转蒸发仪浓缩,得到浓缩物”中,所述方法还包括,
将120ml的混合萃取液加入旋转蒸发仪中蒸发浓缩,得到10ml的互花米草化感物质浓缩物,其浓度为4g/ml。
8.如权利要求1所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将化感物质浓缩物加入肋骨条藻溶液中培养,检测肋骨条藻生物量”中,所述方法还包括,
将得到的浓缩物加入至300ml中肋骨条藻溶液中;
将混合液放到摇瓶中培养;
培养结束后,测定肋骨条藻培养液中的中肋骨条生物量。
9.如权利要求8所述的利用互花米草化感物质抑制藻类生长的方法,其特征在于,在“将混合液放到摇瓶中培养”中,所述方法还包括,
培养温度保持在30℃,培养96小时,并在培养过程中每隔8小时摇动一次。
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