CN113677360A - 使用糖聚唾液酸化治疗性蛋白的方法 - Google Patents

Abstract

本文提供了与聚唾液酸(PSA)缀合的新颖的蛋白和化合物。还提供了使用这些化合物的方法以及治疗多种疾病和紊乱的方法。本文提供的新颖的化合物具有改进的药效学和/或药代动力学性质、改进的有效性和其他合意的性质。

Description

使用糖聚唾液酸化治疗性蛋白的方法

相关申请

本申请要求于2019年2月4日提交的美国临时专利申请序列第62/801,013号的优先权，并且有权享有其申请日。上文提及的申请的内容通过引用并入本文。

发明领域

本发明涉及与水溶性聚合物缀合的蛋白和其他生物化合物，特别是在与水溶性聚合物诸如PSA缀合后获得的新颖的蛋白(例如糖蛋白)缀合物。本发明还涉及使用本文描述的新颖的缀合蛋白和化合物以及制剂的使用和治疗方法。

发明背景

多肽药物的缀合，诸如通过PEG化或聚唾液酸化，保护它们在血液循环中免受降解，并且因此改进它们的药效学和药代动力学谱(Harris和Chess,Nat Rev DrugDiscov.2003；2:214-21；S.Jain,D.Hreczuk-Hirst,P.Laing和G.Gregoriadis,DrugDelivery Systems and Sciences,4(No 1):3-9,2004.)。唾液酸(也被称为N-乙酰神经氨酸)和聚唾液酸被发现广泛分布在动物组织中，并且在较小程度上分布在从植物和真菌至酵母和细菌的范围内的其他物种中，主要分布在糖蛋白和神经节苷脂中。本文使用的缩写“PSA”指的是术语“聚唾液酸”。类似地，本文使用的术语“mPSA”指的是术语“修饰的聚唾液酸”。

PSA由N-乙酰神经氨酸的聚合物(通常是均聚物)组成。仲氨基基团通常带有乙酰基基团，但是它可以代替地带有羟乙酰基基团。羟基基团上可能的取代基包括乙酰基基团、乳酸基基团、乙基基团、硫酸酯基团和磷酸酯基团。

PSA和mPSA通常包含基本上由通过2,8-糖苷键或2,9-糖苷键或这些的组合(例如交替的2,8-键和2,9-键)连接的N-乙酰神经氨酸部分组成的线性聚合物。在特别优选的PSA和mPSA中，糖苷键是α-2,8。这样的PSA和mPSA方便地衍生自多聚唾液酸(colominic acid)，并且在本文中被称为“CA”和“mCA”。典型的PSA和mPSA包含至少2个、优选地至少5个、更优选地至少10个并且最优选地至少20个N-乙酰神经氨酸部分。因此，它们可以包含从5个至500个N-乙酰神经氨酸部分，优选地从10个至300个N-乙酰神经氨酸部分。PSA和CA可以是包含不同的糖部分的聚合物。它们可以是共聚物。PSA和CA优选地基本上不含除了N-乙酰神经氨酸之外的糖部分。PSA和CA优选地包含至少90％、更优选地至少95％并且最优选地至少98％的N-乙酰神经氨酸部分。

在PSA和CA包含除了N-乙酰神经氨酸之外的部分的情况下(如例如在mPSA和mCA中)，这些部分优选地位于聚合物链的一个末端或两个末端处。这样的“其他”部分可以是例如通过氧化或还原衍生自末端N-乙酰神经氨酸部分的部分。例如，可以制备mPSA和/或mCA，其中非还原性末端N-乙酰神经氨酸单元通过与高碘酸钠反应转化为醛基团(参见WO-A-0187922)。可选择地，例如，可以使用mPSA和mCA，其中还原性末端N-乙酰神经氨酸单元经受还原，以还原性地打开还原性末端N-乙酰神经氨酸单元处的环以形成邻位二醇基团，该邻位二醇基团被氧化以将邻位二醇基团转化为醛基团(参见WO 2005/016974)。

通过在水溶性聚合物和蛋白(例如治疗性蛋白)之间形成共价键来制备缀合物可以通过多种化学方法进行。用于将PSA与蛋白偶联的一种方法是经由蛋白的碳水化合物部分缀合聚合物。蛋白中碳水化合物的邻位羟基(OH)基团可以容易地被高碘酸钠(NaIO₄)氧化以形成活性醛基团(Rothfus和Smith,J Biol Chem 1963；238:1402-10；van Lenten和Ashwell,J Biol Chem 1971；246:1889-94)。随后，聚合物可以通过使用含有例如活性酰肼基团的试剂与碳水化合物的醛基团偶联(Wilchek M和Bayer EA,Methods Enzymol 1987；138:429-42)。最近的技术是使用含有与醛反应以形成肟键的氨基氧基基团的试剂(WO 96/40662，WO2008/025856)。

尽管有将水溶性聚合物与治疗性蛋白缀合的可用方法，但对开发用于将水溶性聚合物与多种含碳水化合物的蛋白和化合物缀合以便改进化合物的药效学和/或药代动力学性质的材料和方法仍存在需求。此外，对开发和测试与PSA或mPSA缀合的宽范围的药物以确定它们是否具有有益的性质仍存在巨大的未满足的需求。在本申请中，我们通过提供和测试许多与PSA或mPSA缀合的特定化合物来解决这一缺陷。

发明概述

本发明提供了与水溶性聚合物缀合的化合物(例如蛋白)并且特别是与PSA或mPSA缀合的新颖的化合物，以及使用这样的化合物的方法。

本文提供的新颖的化合物优选地具有改进的药效学和/或药代动力学性质和其他合意的性质。本文提供的化合物典型地是蛋白，并且更典型地是除了凝血蛋白之外的糖蛋白。

所使用的优选的非限制性水溶性聚合物是PSA或mPSA，其在本文中参考本文中的实施方案被简称为PSA。所使用的水溶性聚合物也可以是，但不限于，聚乙二醇(PEG)、支链PEG、PEG衍生物、CA、mCA、羟乙基纤维素(HEC)、糊精、聚噁唑啉、碳水化合物、多糖、普鲁兰多糖、壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、淀粉、右旋糖酐、羧甲基右旋糖酐、聚亚烷基氧化物(PAO)、聚亚烷基二醇(PAG)、聚丙二醇(PPG)、聚噁唑啉、聚丙烯酰吗啉、聚乙烯醇(PVA)、聚羧酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚磷腈、聚噁唑啉、聚乙烯-共-马来酸酐、聚苯乙烯-共-马来酸酐、聚(1-羟甲基乙烯羟甲基缩甲醛)(PHF)、2-甲基丙烯酰氧基-2’-乙基三甲基磷酸铵(MPC)。

在下文实例中说明的本发明的另外的实施方案中，水溶性聚合物是聚唾液酸(PSA)或修饰的PSA(mPSA)。PSA或mPSA可以具有350Da至120,000Da、500Da至100,000Da、1000Da至80,000Da、1500Da至60,000Da、2,000Da至45,000Da或3,000Da至35,000Da的分子量范围。PSA或mPSA可以是多聚唾液酸或修饰的多聚唾液酸。PSA或mPSA典型地包括约2-500个或10-300个唾液酸单元，然而设想其他数量的唾液酸单元。本文还描述了用于将水溶性聚合物与多种含碳水化合物的化合物缀合以便改进化合物的药效学和/或药代动力学性质的材料和方法。本文描述的化合物可以通过本文描述的多种方法来制备。一种非限制性实例包括使氧化的碳水化合物部分与水溶性聚合物在允许缀合的条件下接触，其中所述水溶性聚合物包含氨基氧基基团，并且肟键在氧化的碳水化合物部分和水溶性聚合物上的氨基氧基基团之间形成，或者其中所述水溶性聚合物包含酰肼基团，并且腙键在氧化的碳水化合物部分和水溶性聚合物上的酰肼基团之间形成。水溶性聚合物还可以被氧化以在水溶性聚合物的末端唾液酸单元上形成醛基团，随后是使氧化的水溶性聚合物与氨基氧基接头反应。因此，在某些实施方案中，水溶性聚合物通过使活化的氨基氧基接头与氧化的水溶性聚合物反应来制备，其中接头是同型双官能或异型双官能接头。同型双官能接头可以具有通式NH₂[OCH₂CH₂]_nONH₂，其中n＝1-50、优选地1-11、更优选地1-6。其他合适的接头在通过引用并入本文的Jain等人的题为“Glycopolysialylation of non-blood coagulationproteins”的WO2011/012850中进一步描述。

本文提供的用于产生与水溶性聚合物缀合的某些新颖的化合物的方法的另一种非限制性实例包括使水溶性聚合物氧化以在水溶性聚合物的末端单元，例如PSA或mPSA的末端唾液酸单元上形成醛基团，以及使氧化的水溶性聚合物与氨基氧基接头反应。在通过使氧化的水溶性聚合物与酰肼接头反应在水溶性聚合物(例如PSA或mPSA)上形成酰肼基团的情况下，可以形成某些新颖的化合物。酰肼接头可以合适地是己二酸二酰肼或肼。某些新颖的化合物可以通过还原缀合的化合物(例如蛋白)中的肟键或腙键来形成。本文描述的其他新颖的化合物通过键和使用在以下中详细地描述的接头来制备：USSN 10/276,552、USSN10/568,111、USSN 11/660,128、USSN 11/816,823、USSN 12/375,012、USSN 12/843,284、US6,166,687、US 8,217,154和US 9,795,683，全部通过引用以其整体并入。

发明详述

如本文使用的“生物活性衍生物”或“生物活性变体”包括具有与分子大体上相同的功能和/或生物学性质诸如结合性质，和/或相同的结构基础诸如肽主链或碱性聚合物单元的所述分子的任何衍生物或变体。

术语“基因表达紊乱”指的是由已知的并且为RNA治疗方法的候选物的单个基因的突变引起的许多遗传紊乱。由单基因突变引起的紊乱，如囊性纤维化、血友病和许多其他，关于某种性状将在后代中出现的可能性，可以是显性的或隐性的。虽然显性等位基因在仅具有一个拷贝的等位基因的个体中表现出表型，但对于隐性等位基因，个体必须具有两个拷贝，来自各自亲本的一个拷贝，才能表现出来。相比之下，多基因紊乱是由两个或更多个基因引起的，并且各自的疾病的表现通常是流畅的，并且与环境因素相关联。多基因紊乱的实例是高血压、升高的胆固醇水平、癌症、神经退行性紊乱、精神疾病以及其他。此外，在这些情况下，代表这些基因中的一个或更多个的治疗性RNA可能对这些患者是有益的。此外，遗传紊乱不一定是从父母的基因遗传下来的，而是也可能是由新的突变引起的。此外，在这些情况下，代表正确基因序列的治疗性RNA可能对患者是有益的。其他基因表达紊乱包括高血压、升高的胆固醇水平、癌症、神经退行性紊乱、精神疾病、囊性纤维化、血友病(或其他凝血疾病)、神经精神紊乱诸如精神分裂症、双相情感障碍、重性抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默病和自闭症谱系紊乱、白化病、安格曼综合征(Angelman syndrome)、强直性脊柱炎、阿佩尔综合征(Apert syndrome)、腓骨肌萎缩症、先天性肾上腺增生、囊性纤维化、唐氏综合征、软骨发育不全、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、抗磷脂综合征、注意力缺陷多动障碍、自闭症、常染色体显性多囊肾病、腓骨肌萎缩症、猫叫综合征、克罗恩病、囊性纤维化、痛性肥胖症、眼球后缩综合征、杜氏肌营养不良、V因子Leiden血栓形成倾向、家族性高胆固醇血症、家族性地中海热、脆性X综合征、戈谢病(Gaucher Disease)、血色沉着病、前脑无裂畸形、亨廷顿病、先天性代谢缺陷、克兰费尔特综合征(Klinefelter Syndrome)、马凡综合征(MarfanSyndrome)、甲基丙二酸血症、肌强直性营养不良、神经纤维瘤病、努南综合征(NoonanSyndrome)、成骨不全症、帕金森病、苯丙酮尿症、Poland Anomaly、卟啉症、早衰症、色素性视网膜炎、重症联合免疫缺陷、镰状细胞病、脊髓性肌萎缩、家族性黑蒙性白痴(Tay-SachsDisease)、地中海贫血、三甲基胺尿症、特纳综合征(Turner Syndrome)、腭心面综合征或威尔逊病(Wilson Disease)。目前具有22,993个人类基因和遗传紊乱的条目连同它们各自的基因以及它们的表型的描述的在线目录在ONIM(在线人类孟德尔遗传)网页(http://omim.org)处可获得；每种的序列从Uniprot数据库(http://www.uniprot.org)可获得。

实施方案包括治疗基因表达紊乱的方法。该方法可以包括向患者施用有效量的PSA-核酸缀合物的步骤。PSA-缀合物可以包括与选自双链RNA、单链RNA或短干扰RNA(siRNA)的RNA寡核苷酸共价地连接的PSA。可选择地，PSA-缀合物可以包含经由可裂解的接头部分与RNA寡核苷酸共价地连接的PSA。在其他实施方案中，PSA分子任选地经由接头与至少一个RNA分子在RNA 3’末端碱基处缀合。可选择地，PSA-缀合物可以包含与RNA寡核苷酸共价地连接的PSA，其中RNA寡核苷酸包含编码多肽或其互补序列的编码区，其中多肽是VEGF、载脂蛋白B、肌营养不良蛋白的外显子51、SMN2、甲状腺素运载蛋白、CEP290 c.2991+1655A>G突变、KRAS、补体5(C5)蛋白、EphA2、CTGF、TRPV1、LDHA、TGF-β1、Cox-2、KRAS G12D、P53、胱天蛋白酶-2、抗凝血酶、FANCA、凝血因子VIII、凝血因子IX、ANK1、PIG-A、UROD、腺苷脱氨酶、JAK3、RAG1/2、Artemis、IL7R-α、IL-2Rγ、T细胞表面糖蛋白CD3δ链、CD3.ε、CDKN2、NF1、NF2、LIM激酶、弹性蛋白、ALDP、CFTR、肝杀菌肽、ABCA3、表面活性蛋白B、ADAMTS13、α1-抗胰蛋白酶或GAA。

术语“疾病(ailment)”或“疾病(disease)”指的是对人类的部分或全部的结构或功能产生负面影响的、不是由于任何直接的外部损伤的特定的异常状况。疾病通常被认为是与特定的症状和体征相关的医学状况。疾病可能是由外部因素诸如病原体或由内部功能障碍引起的。例如，免疫系统的内部功能障碍可以产生多种不同的疾病，包括多种形式的免疫缺陷、超敏反应、过敏和自身免疫性紊乱。

“类似物”、“变体”或“衍生物”是与天然存在的分子在结构上大体上相似并且具有相同的生物活性(尽管在某些情况下程度不同)的化合物。例如，多肽变体指的是与参考多肽共享大体上相似的结构并且具有相同的生物活性的多肽。基于一个或更多个突变，变体或类似物与类似物衍生自的天然存在的多肽相比在它们的氨基酸序列的组成方面不同，所述突变涉及(i)在多肽的一个或更多个末端和/或天然存在的多肽序列的一个或更多个内部区域(例如片段)处一个或更多个氨基酸残基的缺失，(ii)在多肽的一个或更多个末端(典型地“添加”或“融合”)和/或天然存在的多肽序列的一个或更多个内部区域处(典型地“插入”)一个或更多个氨基酸的插入或添加，或(iii)用一个或更多个氨基酸取代天然存在的多肽序列中的其他氨基酸。通过实例的方式，“衍生物”指的是已经被例如化学地修饰的与参考多肽共享相同或大体上相似的结构的多肽。

变体或类似物多肽包括插入变体，其中一个或更多个氨基酸残基被添加到本发明的蛋白氨基酸序列中。插入物(insertion)可以位于蛋白的任一末端或两个末端处，和/或可以被定位在蛋白氨基酸序列的内部区域内。在任一末端或两个末端处具有另外的残基的插入变体包括例如融合蛋白和包含氨基酸标签或其他氨基酸标记物的蛋白。在一个方面中，蛋白分子任选地包含N-末端Met，特别是当分子在细菌细胞诸如大肠杆菌(E.coli)中被重组表达时。

在缺失变体中，如本文描述的蛋白或多肽中的一个或更多个氨基酸残基被去除。缺失可以在蛋白或多肽的一个或两个末端处实现，和/或在蛋白氨基酸序列内去除一个或更多个残基的情况下实现。因此，缺失变体包括蛋白或多肽序列的片段。

在取代变体中，蛋白或多肽的一个或更多个氨基酸残基被去除并且被可选择的残基替代。在一个方面中，取代本质上是保守的，并且这种类型的保守取代是本领域熟知的。可选择地，本发明包括也是非保守的取代。示例性的保守取代在通过引用并入本文的Lehninger,[Biochemistry,第2版；Worth Publishers,Inc.,New York(1975),第71-77页]中被描述。

含碳水化合物的化合物诸如除了凝血蛋白之外的糖蛋白的药理学和免疫学性质可以通过化学修饰和与水溶性聚合物，特别是PEG或PSA或mPSA缀合来改进。所得到的缀合物的性质通常强烈地取决于聚合物的结构和尺寸。因此，具有明确的和窄的尺寸分布的聚合物通常是优选的。在具体实例中使用的PSA和mPSA可以以产生具有窄的尺寸分布的最终PSA制品的这样的方式来纯化。

糖蛋白和其他蛋白靶

如本文描述的，除了凝血蛋白之外的糖蛋白包括但不限于细胞因子诸如白细胞介素、α、β和γ-干扰素、集落刺激因子包括粒细胞集落刺激因子、成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、植物蛋白诸如凝集素和蓖麻毒素、肿瘤坏死因子和相关的等位基因、肿瘤坏死因子受体的可溶性形式、白细胞介素受体和白细胞介素受体的可溶性形式、生长因子、组织生长因子、转化生长因子诸如TGFα或TGFβ和表皮生长因子、激素、生长调节素、色素激素、下丘脑释放因子、抗利尿激素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、胃泌酸调节素和胃泌酸调节素样肽、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物和免疫球蛋白诸如IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、单克隆抗体、红细胞生成素(EPO)、除了凝血蛋白之外的血液因子、半乳糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶、胎球蛋白、其片段；并且通常本发明设想包含任何上文提及的蛋白或其片段连同治疗性糖蛋白的任何融合蛋白。

在本文提供的许多特定实施方案中，参与多种调节和信号转导途径的蛋白、多肽和肽被缀合以制备蛋白-PSA缀合物。在某些实施方案中，用于制备新颖的蛋白-PSA缀合物的蛋白、肽和其他化合物选自以下：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、血管假性血友病因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、血栓调节蛋白(以及类似物，例如Solulin)、蛋白C、蛋白S、tPA、PAI-1、组织因子(TF)、ADAMTS 13蛋白酶、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、M-CSF、SCF、GM-CSF、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、干扰素-α(IFN-α)、复合干扰素、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-31、IL-32α、IL-33、血小板生成素(TPO)、Ang-1、Ang-2、Ang-4、Ang-Y、血管生成素样多肽1(ANGPTL1)、血管生成素样多肽2(ANGPTL2)、血管生成素样多肽3(ANGPTL3)、血管生成素样多肽4(ANGPTL4)、血管生成素样多肽5(ANGPTL5)、血管生成素样多肽6(ANGPTL6)、血管生成素样多肽7(ANGPTL7)、玻连蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素、激活蛋白A、激活蛋白B、激活蛋白C、骨形态发生蛋白-1、骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-3、骨形态发生蛋白-4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白-6、骨形态发生蛋白-7、骨形态发生蛋白-8、骨形态发生蛋白-9、骨形态发生蛋白-10、骨形态发生蛋白-11、骨形态发生蛋白-12、骨形态发生蛋白-13、骨形态发生蛋白-14、骨形态发生蛋白-15、骨形态发生蛋白受体IA、骨形态发生蛋白受体IB、骨形态发生蛋白受体II、脑源性神经营养因子、心脏营养素-1、睫状神经营养因子、睫状神经营养因子受体、畸胎瘤衍化生长因子(cripto)、cryptic、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2α、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β、内皮细胞生长因子、内皮素1、表皮生长因子、epigen、上皮调节蛋白、上皮源性中性粒细胞引诱物、成纤维细胞生长因子4、成纤维细胞生长因子5、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子7、成纤维细胞生长因子8、成纤维细胞生长因子8b、成纤维细胞生长因子8c、成纤维细胞生长因子9、成纤维细胞生长因子10、成纤维细胞生长因子11、成纤维细胞生长因子12、成纤维细胞生长因子13、成纤维细胞生长因子16、成纤维细胞生长因子17、成纤维细胞生长因子19、成纤维细胞生长因子20、成纤维细胞生长因子21、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞系源性神经营养因子受体α1、胶质细胞系源性神经营养因子受体α2、生长相关蛋白、生长相关蛋白α、生长相关蛋白β、生长相关蛋白γ、肝素结合表皮生长因子、肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、肝癌衍生生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子受体、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白、角质形成细胞生长因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受体α、内吗啡肽(1&2)、神经肽、神经生长因子、神经生长因子受体、神经生成素(neuropoietin)、神经营养因子-3、神经营养因子-4、抑癌蛋白M(OSM)、胎盘生长因子、胎盘生长因子2、血小板衍生内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血小板衍生生长因子A链、血小板衍生生长因子AA、血小板衍生生长因子AB、血小板衍生生长因子B链、血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子受体α、血小板衍生生长因子受体β、前B细胞生长刺激因子、干细胞因子(SCF)、干细胞因子受体、TNF、TNF0、TNF1、TNF2、转化生长因子α、转化生长因子β、转化生长因子β1、转化生长因子β1.2、转化生长因子β2、转化生长因子β3、转化生长因子β5、潜在转化生长因子β1、转化生长因子β结合蛋白I、转化生长因子β结合蛋白II、转化生长因子β结合蛋白III、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、肿瘤坏死因子受体I型、肿瘤坏死因子受体II型、尿激酶型纤溶酶原激活物受体、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、凝集素、蓖麻毒素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物、IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶、胎球蛋白、促黄体激素、雌激素、胰岛素、白蛋白、脂蛋白、胎蛋白、转铁蛋白、血小板生成素、尿激酶、整联蛋白、凝血酶、血栓调节蛋白、瘦蛋白、阿达木单抗、地诺单抗或依那西普。这些蛋白和制备这些化合物的特定方法在通过引用并入本文的题为‘Nucleophilic catalyst for oximelinkage’的US 9,731,024中进一步详细地描述。

在某些实施方案中，用于制备新颖的蛋白-PSA缀合物的蛋白、肽和其他化合物选自以下：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、血管假性血友病因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、蛋白C、蛋白S、tPA、PAI-1、组织因子(TF)、ADAMTS 13蛋白酶、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、M-CSF、SCF、GM-CSF、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、干扰素-α(IFN-α)、复合干扰素、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-31、IL-32α、IL-33、血小板生成素(TPO)、Ang-1、Ang-2、Ang-4、Ang-Y、血管生成素样多肽1(ANGPTL1)、血管生成素样多肽2(ANGPTL2)、血管生成素样多肽3(ANGPTL3)、血管生成素样多肽4(ANGPTL4)、血管生成素样多肽5(ANGPTL5)、血管生成素样多肽6(ANGPTL6)、血管生成素样多肽7(ANGPTL7)、玻连蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素、激活蛋白A、激活蛋白B、激活蛋白C、骨形态发生蛋白-1、骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-3、骨形态发生蛋白-4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白-6、骨形态发生蛋白-7、骨形态发生蛋白-8、骨形态发生蛋白-9、骨形态发生蛋白-10、骨形态发生蛋白-11、骨形态发生蛋白-12、骨形态发生蛋白-13、骨形态发生蛋白-14、骨形态发生蛋白-15、骨形态发生蛋白受体IA、骨形态发生蛋白受体IB、骨形态发生蛋白受体II、脑源性神经营养因子、心肌营养素-1、睫状神经营养因子、睫状神经营养因子受体、畸胎瘤衍化生长因子、cryptic、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2α、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β、内皮细胞生长因子、内皮素1、表皮生长因子、epigen、上皮调节蛋白、上皮源性中性粒细胞引诱物、成纤维细胞生长因子4、成纤维细胞生长因子5、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子7、成纤维细胞生长因子8、成纤维细胞生长因子8b、成纤维细胞生长因子8c、成纤维细胞生长因子9、成纤维细胞生长因子10、成纤维细胞生长因子11、成纤维细胞生长因子12、成纤维细胞生长因子13、成纤维细胞生长因子16、成纤维细胞生长因子17、成纤维细胞生长因子19、成纤维细胞生长因子20、成纤维细胞生长因子21、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞系源性神经营养因子受体α1、胶质细胞系源性神经营养因子受体α2、生长相关蛋白、生长相关蛋白α、生长相关蛋白β、生长相关蛋白γ、肝素结合表皮生长因子、肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、肝癌衍生生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子受体、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白、角质形成细胞生长因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受体α、神经生长因子、神经生长因子受体、神经生成素、神经营养因子-3、神经营养因子-4、抑癌蛋白M(OSM)、胎盘生长因子、胎盘生长因子2、血小板衍生内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血小板衍生生长因子A链、血小板衍生生长因子AA、血小板衍生生长因子AB、血小板衍生生长因子B链、血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子受体α、血小板衍生生长因子受体β、前B细胞生长刺激因子、干细胞因子(SCF)、干细胞因子受体、TNF、TNF0、TNF1、TNF2、转化生长因子α、转化生长因子β、转化生长因子β1、转化生长因子β1.2、转化生长因子β2、转化生长因子β3、转化生长因子β5、潜在转化生长因子β1、转化生长因子β结合蛋白I、转化生长因子β结合蛋白II、转化生长因子β结合蛋白III、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、肿瘤坏死因子受体I型、肿瘤坏死因子受体II型、尿激酶型纤溶酶原激活物受体、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、凝集素、蓖麻毒素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物、IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶(例如DNA酶I)、胎球蛋白、促黄体激素、雌激素、胰岛素、白蛋白、脂蛋白、胎蛋白、转铁蛋白、血小板生成素、尿激酶、整联蛋白、凝血酶、血栓调节蛋白、瘦蛋白、Humira(阿达木单抗)、Prolia(地诺单抗)或其生物活性片段、衍生物或变体。这些蛋白和制备这些化合物的特定方法在作为20120190096公布的题为‘Materials and methods for conjugating a water soluble fatty acidderivative to a protein’的美国专利申请中进一步详细地描述，该美国专利申请通过引用并入本文。

在某些实施方案中，用于制备新颖的蛋白-PSA缀合物的蛋白、肽和其他化合物选自以下：天冬酰胺酶、安多昔韦(amdoxovir)(DAPD)、抗排卵肽、贝卡普勒明、降钙素、蓝藻抗病毒蛋白、地尼白介素、红细胞生成素(EPO)、EPO激动剂(例如长度从约10-40个氨基酸并且包含如在WO 96/40749中描述的特定核心序列的肽)、链道酶α、促红细胞生成蛋白(NESP)、凝血因子诸如因子V、因子VII、因子Vila、因子VIII、因子IX、因子X、因子XII、因子XIII、血管假性血友病因子；阿糖苷酶、伊米苷酶(cerezyme)、α-葡糖苷酶、胶原、环孢菌素、α防御素、β防御素、激动肽-4(exendin-4)、粒细胞集落刺激因子(GCSF)、血小板生成素(TPO)、α-1蛋白酶抑制剂、依降钙素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、纤维蛋白原、非格司亭、生长激素、人类生长激素(hGH)、生长激素释放激素(GHRH)、GRO-β、GRO-β抗体、骨形态发生蛋白诸如骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-6、OP-1、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、CD-40配体、肝素、人类血清白蛋白、低分子量肝素(LMWH)、干扰素诸如干扰素α、干扰素β、干扰素γ、干扰素ω、干扰素τ、复合干扰素；白细胞介素和白细胞介素受体诸如白细胞介素-1受体、白细胞介素-2、白细胞介素-2融合蛋白、白细胞介素-1受体拮抗剂、白细胞介素-3、白细胞介素-4、白细胞介素-4受体、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12、白细胞介素-13受体、白细胞介素-17受体；乳铁蛋白和乳铁蛋白片段、促黄体激素释放激素(LHRH)、胰岛素、胰岛素原、胰岛素类似物(例如，如在美国专利第5,922,675号中描述的单酰化胰岛素)、胰淀素、C-肽、生长抑素、生长抑素类似物包括奥曲肽、血管升压素、促卵泡激素(FSH)、流感疫苗、胰岛素样生长因子(IGF)、促胰岛素(insulintropin)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、纤溶酶原激活物诸如阿替普酶、尿激酶、瑞替普酶、链激酶、帕米普酶(pamiteplase)、拉诺普酶和替奈普酶；神经生长因子(NGF)、骨保护素、血小板衍生生长因子、组织生长因子、转化生长因子-1、血管内皮生长因子、白血病抑制因子、角质形成细胞生长因子(KGF)、神经胶质生长因子(GGF)、T细胞受体、CD分子/抗原、肿瘤坏死因子(TNF)、单核细胞趋化蛋白-1、内皮生长因子、甲状旁腺激素(PTH)、胰高血糖素样肽、生长激素、胸腺素α1、胸腺素α1Ilb/Illa抑制剂、胸腺素β10、胸腺素β9、胸腺素β4、α-1抗胰蛋白酶、磷酸二酯酶(PDE)化合物、VLA-4(极晚期抗原-4)、VLA-4抑制剂、双膦酸盐、呼吸道合胞病毒抗体、囊性纤维化跨膜调节剂(CFTR)基因、脱氧核糖核酸酶(DNA酶)、杀菌/通透性增加蛋白(BPI)和抗CMV抗体。示例性的单克隆抗体包括依那西普(一种由与IgG1的Fc部分连接的人类75kD TNF受体的细胞外配体结合部分组成的二聚融合蛋白)、阿昔单抗、阿非莫单抗、巴利昔单抗、达克珠单抗、英夫利昔单抗、替伊莫单抗、米妥莫单抗、莫罗单抗-CD3、碘131托西莫单抗缀合物、奥马珠单抗(olizumab)、利妥昔单抗和曲妥珠单抗(赫赛汀)。这些蛋白和制备这些化合物的特定方法在作为US2018021444公布的题为‘Multi-arm polymerprodrugs’的美国专利申请中进一步详细地描述，该美国专利申请通过引用并入本文。用于制备新颖的蛋白-PSA缀合物的实例包括但不限于红细胞生成素(EPO)诸如重组人类EPO(rhEPO)、集落刺激因子(CSF)诸如G-CSF样重组人类G-CSF(rhG-CSF)、α-干扰素(IFNα)、β-干扰素(IFNβ)或γ-干扰素(IFNγ)诸如IFNα和IFNβ样重组人类IFNα或IFNβ(rhIFNα或rhIFNβ)、白细胞介素例如IL-1至IL-18诸如IL-2或IL-3样重组人类IL-2或IL-3(rhIL-2或rhIL-3)、血清蛋白诸如凝血因子II-XIII样因子VII、VIII、IX、αl-抗胰蛋白酶(A1AT)、活化蛋白C(APC)、纤溶酶原激活物诸如组织型纤溶酶原激活物(tPA)诸如人类组织型纤溶酶原激活物(hTPA)、AT III诸如重组人类AT III(rhAT III)、肌红蛋白、白蛋白诸如牛血清白蛋白(BSA)、生长因子诸如表皮生长因子(EGF)、血小板生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、脑源性生长因子(BDGF)、神经生长因子(NGF)、B-细胞生长因子(BCGF)、脑源性神经营养生长因子(BDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)、转化生长因子诸如TGFα或TGFβ、BMP(骨形态发生蛋白)、生长激素诸如人类生长激素、肿瘤坏死因子诸如TNFα或TNFβ、生长抑素、生长激素(somatotropin)、生长调节素、血红蛋白、激素或激素原诸如胰岛素、促性腺激素、促黑激素(α-MSH)、曲普瑞林、下丘脑激素诸如抗利尿激素(ADH)和催产素以及释放激素和释放抑制激素、甲状旁腺激素、甲状腺激素诸如甲状腺素、促甲状腺素、促甲状腺素释放素、催乳素、降钙素、胰高血糖素、胰高血糖素样肽(GLP-1、GLP-2等)、激动肽诸如激动肽-4和艾塞那肽(Exenatide)、瘦蛋白、血管升压素、胃泌素、分泌素、整合素、糖蛋白激素(例如LH、FSH等)、促黑激素、脂蛋白和载脂蛋白诸如apo-B、apo-E、apo-La、免疫球蛋白诸如IgG、IgE、IgM、IgA、IgD及其片段、水蛭素、组织途径抑制剂、植物蛋白诸如凝集素或蓖麻毒素、蜂毒、蛇毒、免疫毒素、抗原E、α-蛋白酶抑制剂、豚草过敏原、黑色素、寡聚赖氨酸蛋白、RGD蛋白或任选地这些蛋白中的一种的相应受体；或者这些蛋白或受体中的任一种的功能衍生物或片段。优选的酶是例如碳水化合物特异性酶、蛋白水解酶、氧化酶、氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂解酶、异构酶、激酶和连接酶。具体的非限制性实例是天冬酰胺酶、精氨酸酶、精氨酸脱氨酶、腺苷脱氨酶、谷氨酰胺酶、谷氨酰胺酶-天冬酰胺酶、苯丙氨酸、色氨酸酶、酪氨酸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、内毒素酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、脂肪酶、尿酸酶、腺苷二磷酸酶、嘌呤核苷磷酸化酶、胆红素氧化酶、葡糖氧化酶、葡萄糖、葡糖酸氧化酶、半乳糖苷酶、葡糖脑苷脂酶、葡糖醛酸酶、透明质酸酶、组织因子、链激酶、尿激酶、MAP-激酶、DNA酶(例如DNA酶I)、RNA酶、乳铁蛋白及其功能衍生物或片段。这些蛋白和制备这些化合物的特定方法在作为美国公布第2007134197号公布的题为‘Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein,prepared by reductive amination’的美国专利申请中进一步详细地描述，该美国专利申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，抗体-药物缀合物被缀合以制备抗体-药物-PSA缀合物。这些抗体和制备这些化合物的特定方法在作为WO2018002902公布的题为‘Antibody-drugconjugates and therapeutic methods using the same’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。在这些实施方案中，一种合适的抗体-药物缀合物包含与接头分子共价地结合的抗体，该接头分子继而与能够结合HIV包膜糖蛋白的一种或更多种药物共价地结合。制备缀合物的另一种合适的抗体是在CD4结合位点处与HIV包膜糖蛋白结合的抗体。制备缀合物的另一种合适的抗体是在gp120-gp41界面处与HIV包膜糖蛋白结合的抗体。这样的抗体包括但不限于选自在美国公布第20150361160号、美国公布第20160022803号和美国公布第20150152167号中详细地描述的8ANC195、35022和PGT151的抗体。制备缀合物的另一种合适的抗体是与gp41膜近端外部区域(MPER)结合的抗体，包括但不限于在美国公布第20160009789号、PCT公布申请第WO2013070776号、美国公布第20150158934号、美国公布第20120269821号中详细地描述的4E10、10E8、2F5和Z13e1。为了制备另外的抗体缀合物，用于结合HIV包膜糖蛋白的示例性抗体包括但不限于VRC01、VRC07、VRC07-523、3BNC1 17、NIH45-46、PGV04、b12、CH31和CH103。VRC07-523的实例在J.Virol,88(21):第12669-12682页(2014年11月)中阐述。3BNC1 17的实例在美国公布第20140212458号中阐述。NIH45-46的实例在美国公布第20150274813号中阐述。PGV04的实例在美国公布第20130251726号中阐述。b12的实例在美国公布第20160009789号中阐述。CH31的实例在美国公布第20130251726号中阐述。CH103的实例在美国公布第20140212458号中阐述。

为了制备另外的抗体缀合物，用于结合HIV包膜糖蛋白的示例性抗体包括但不限于在全部通过引用并入本文的WO201210657、WO2016196975、美国专利第8,637,036号、美国专利公布第2014/0322163号、WO 2016196975和WO2017/79479中详细地描述的2G12、2F5、3BC176、3BNC60、3BNC1 17、4E10、8ANC131、8ANC195、10E8、10-1074、12A12、35022、b12、B2530、CH01-04、CH103、CH31、HJ16、M66.6、N6、N6-LS、NIH45-46、PG9、PG16、PGDM1400、PGT121、PGT128、PGT135、PGT141-PGT145、PGT151、PGV04、VRC01、VRC01-LS、VRC07、VRC07-523、VRC07-LS和Z13，并且优选地VRC01、VRC01-LS、N6、N6-LS、VRC07和VRC07-523。

在另一个方面中，抗体-药物缀合物被缀合以制备抗axl抗体PSA缀合物。在这些实施方案中，抗axl抗体是结合AXL蛋白的细胞外部分上的表位的抗体，该AXL蛋白也被称为UFO或JTK11，一种具有104-140kDa的分子量的894氨基酸蛋白，是哺乳动物TAM受体酪氨酸激酶(RTK)的亚家族的一部分。这些抗体和制备这些化合物的特定方法在作为WO2018007592公布的题为‘New dosage regimens for antibody drug conjugates basedon anti-axl antibodies’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，蛋白-PSA缀合物被制成许多细胞表面标志物及其配体。例如，已经报告癌细胞表达以下细胞表面标志物和/或配体中的至少一种，包括但不限于碳酸酐酶IX、α-甲胎蛋白、α-辅肌动蛋白-4、A3(对A33抗体特异性的抗原)、ART-4、B7、Ba-733、BAGE、BrE3-抗原、CA125、CAMEL、CAP-1、CASP-8/m、CCCL19、CCCL21、CD1、CDla、CD2、CD3、CD4、CDS、CD8、CDl-lA、CD14、CD15、CD16、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD45、CD46、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a-e、CD67、CD70、CD74、CD79a、CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CDC27、CDK-4/m、CDK 2A、CXCR4、CXCR7、CXCL12、HIF-l-α、结肠特异性抗原-p(CSAp)、CEA(CEACAM5)、CEACAM6、c-met、DAM、EGFR、EGFRvIII、EGP-1、EGP-2、ELF2-M、Ep-CAM、Flt-1、Flt-3、叶酸受体、G250抗原、GAGE、GROB、HLA-DR、HM1.24、人类绒毛膜促性腺激素(HCG)及其亚基、HER2/neu、HMGB-1、低氧诱导因子(HIF-1)、HSP70-2M、HST-2或la、IGF-1R、IFN-γ、IFN-α、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、KC4-抗原、KS-1-抗原、KS1-4、Le-Y、LDR/FUT、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、MAGE、MAGE-3、MART-1、MART-2、NY-ESO-1、TRAG-3、mCRP、MCP-1、MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUC1、MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、MUM-1/2、MUM-3、NCA66、NCA95、NCA90、胰腺癌粘蛋白、胎盘生长因子、p53、PLAGL2、前列腺酸性磷酸酶、PSA、PRAME、PSMA、P1GF、ILGF、ILGF-1R、IL-6、IL-25、RS5、RANTES、T101、SAGE、S100、存活素、存活素-2B、TAC、TAG-72、腱生蛋白、TRAIL受体、TNF-α、Tn-抗原、Thomson-Friedenreich抗原、肿瘤坏死抗原、VEGFR、ED-B纤连蛋白、WT-1、17-1A-抗原、补体因子C3、C3a、C3b、C5a、C5、血管生成标志物、bcl-2、bcl-6、Kras、cMET、癌基因标志物和癌基因产物(参见，例如，Sensi等人,Clin.Cancer Res.12(2006)5023-5032；Parmiani等人,J.Immunol.178(2007)1975-1979；Novellino等人,CancerImmunol.Immunother.54(2005)187-207)。用如本文报告的方法获得的缀合物可以用于制备用于治疗例如肿瘤疾病、心血管疾病、感染性疾病、炎性疾病、自身免疫性疾病、代谢(例如内分泌)疾病或神经(例如神经退行性)疾病的药物。这些疾病的示例性非限制性实例是阿尔茨海默病、非霍奇金淋巴瘤、B细胞急性和慢性淋巴性白血病、伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、毛细胞白血病、急性和慢性骨髓性白血病、T细胞淋巴瘤和白血病、多发性骨髓瘤、神经胶质瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、癌(诸如口腔癌、胃肠道癌、结肠癌、胃癌、肺道癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宫癌、子宫内膜癌、宫颈癌、膀胱癌、胰腺癌、骨癌、肝癌、胆囊癌、肾癌、皮肤癌和睾丸癌)、黑素瘤、肉瘤、神经胶质瘤和皮肤癌、急性特发性血小板减少性紫癜、慢性特发性血小板减少性紫癜、皮肌炎、西登哈姆氏舞蹈病、重症肌无力、系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、风湿热、多腺体综合征、大疱性类天疱疮、糖尿病、过敏性紫癜、链球菌感染后肾炎、结节性红斑、大动脉炎(Takayasu's arteritis)、艾迪生氏病(Addison'sdisease)、类风湿性关节炎、多发性硬化、结节病、溃疡性结肠炎、多形性红斑、IgA肾病、结节性多动脉炎、强直性脊柱炎、肺出血肾炎综合征、血栓闭塞性脉管炎、干燥综合征、原发性胆汁性肝硬化、桥本氏甲状腺炎、甲状腺毒症、硬皮病、慢性活动性肝炎、多发性肌炎/皮肌炎、多发性软骨炎、寻常型天疱疮、韦格纳氏肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)、膜性肾病、肌萎缩性侧索硬化、脊髓痨、巨细胞动脉炎/多肌痛、恶性贫血、急进性肾小球肾炎、银屑病或纤维化肺泡炎。这些蛋白在作为WO2016096741公布的题为‘Novel methods forenzyme mediated polypeptide conjugation using sortase’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，抗间皮素抗体-PSA缀合物是使用对间皮素有反应的抗体以使它们与PSA缀合制备的。在这些实施方案中，优选的是用于制备PSA-缀合物的抗体识别间皮素的表位，该表位未被另一种细胞外抗原掩蔽。在这些实施方案的另一个方面中，抗体-PSA缀合物在治疗癌症诸如胰腺癌、卵巢癌、间皮瘤和肺癌的方法中使用。这些蛋白在作为US20150259433公布的题为‘Anti-mesothelin antibodies and uses thereof’的美国专利申请中详细地描述，该美国专利申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，酶被缀合以制备酶PSA缀合物。在这些实施方案中，用于制备PSA缀合物的合适的酶包括但不限于：来自酯酶组的酶，所述酯酶组包含金属蛋白酶、枯草杆菌酶或脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、枯草杆菌酶、金属蛋白酶、胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶或CT、胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、枯草杆菌酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、金属蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、-胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶；酶聚合物缀合物，诸如酯酶-聚合物缀合物，所述酯酶-聚合物缀合物包含胰凝乳蛋白酶-pDMAEMA(CT-pDMAEMA)缀合物、金属蛋白酶-pOEGMA缀合物、嗜热菌蛋白酶-pOEGMA缀合物、枯草杆菌蛋白酶-离子液体聚合物缀合物、枯草杆菌酶-离子液体聚合物缀合物或脂肪酶-pDMAA缀合物。在这些实施方案中，由酶-聚合物缀合物催化的化学反应可以包括例如酯交换反应、水解反应、对映选择性反应、氧化还原反应、缩合反应、聚酯合成反应或肽合成反应，或其任何组合。这些蛋白在作为WO2016130677公布的题为‘Non-aqueous enzyme-polymer conjugate solutions andrelated methods’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，配体-药物缀合物被缀合以制备配体-药物-PSA缀合物。在这些实施方案中，新颖的PSA缀合物由抗体-药物缀合物制成。这些实施方案包括制备和使用PSA抗体缀合物，其中抗体被修饰以与药物诸如细胞毒性剂连接。可以用于本发明的抗体-药物缀合物的特定抗体包括但不限于抗HER2单克隆抗体诸如曲妥珠单抗和帕妥珠单抗，抗CD20单克隆抗体诸如利妥昔单抗、奥法木单抗、托西莫单抗和替伊莫单抗，抗CA125单克隆抗体诸如奥戈伏单抗，抗EpCAM(17-1A)单克隆抗体诸如依决洛单抗，抗EGFR单克隆抗体诸如西妥昔单抗、帕尼单抗和尼妥珠单抗，抗CD30单克隆抗体诸如本妥昔单抗，抗CD33单克隆抗体诸如吉妥珠单抗和huMy9-6，抗血管整联蛋白α-vβ-3单克隆抗体诸如伊瑞西珠单抗，抗CD52单克隆抗体诸如阿仑单抗，抗CD22单克隆抗体诸如依帕珠单抗，抗CEA单克隆抗体诸如labetuzumab，抗CD44v6单克隆抗体诸如bivatuzumab，抗FAP单克隆抗体诸如sibrotuzumab，抗CD19单克隆抗体诸如huB4，抗CanAg单克隆抗体诸如huC242，抗CD56单克隆抗体诸如huN901，抗CD38单克隆抗体诸如达雷木单抗，抗CA6单克隆抗体诸如DS6，抗IGF-IR单克隆抗体诸如西妥木单抗和3B7，抗整联蛋白单克隆抗体诸如CNTO 95，以及抗多配体聚糖-1单克隆抗体诸如B-B4。在某些实施方案中，除了抗体之外的结合蛋白还可以被用作用于配体-药物缀合物的细胞结合配体，包括但不限于干扰素诸如IFN-a、IFN-f3和IFN-y、转铁蛋白、表皮生长因子(EGF)和EGF样结构域、胃泌素释放肽(GRP)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF)、痘苗生长因子(VGF)、胰岛素和胰岛素样生长因子(IGF)诸如IGF-1和IGF-2、其他合适的激素诸如促甲状腺素释放激素(TRH)、促黑激素(MSH)、类固醇激素(例如雌激素和雄激素)和生长抑素、淋巴因子诸如IL-2、IL-3、IL-4和IL-6、集落刺激因子(CSF)诸如G-CSF、M-CSF和GM-CSF、铃蟾肽、胃泌素和叶酸。用于制备PSA缀合物的这些抗体或结合蛋白缀合物在作为WO2016147031公布的题为‘Novel hydrophilic linkers andligand-drug conjugates thereof’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，抗体-缀合物被缀合以制备抗体缀合物，该抗体缀合物进一步与PSA缀合以提供新颖的抗体缀合物。在根据该方面的实施方案中，用于制备PSA缀合物的抗体的典型的实例包括但不限于阿昔单抗、利妥昔单抗、巴利昔单抗、帕利珠单抗、英夫利昔单抗、曲妥珠单抗、阿仑单抗、阿达木单抗、托西莫单抗-1131、西妥昔单抗、替伊莫单抗、奥马珠单抗、贝伐珠单抗、那他珠单抗、兰尼单抗、帕尼单抗、依库丽单抗、赛妥珠单抗、戈利木单抗、康纳单抗、卡妥索单抗、优特克单抗、托珠单抗、奥法木单抗、地诺单抗、贝利木单抗、伊匹单抗和本妥昔单抗。用于制备PSA缀合物的这些抗体或结合蛋白缀合物在作为WO2017137457公布的题为‘Antibody-conjugates with improved therapeutic indexfor targeting cd30tumours and method for improving therapeutic index ofantibody-conjugates’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在另一个方面中，抗体-利福霉素缀合物进一步与PSA缀合以提供新颖的抗体缀合物。用于制备PSA缀合物的这些抗体或结合蛋白缀合物在作为WO2017152083公布的题为‘Process for the preparation of an antibody-rifamycin conjugate’的PCT申请中详细地描述，该PCT申请通过引用并入本文。

在某些实施方案中，对含T细胞Ig和粘蛋白结构域的分子-3(Tim-3)有反应的抗体或其抗原结合部分与PSA缀合以形成抗TIM3缀合物。针对含粘蛋白结构域的分子-3(Tim-3)的合适的抗体在通过引用并入本文的US2018016336中描述。在另一个方面中，抗TIM3/PSA抗体缀合物在治疗方法中使用。在一种实施方案中，抗TIM3/PSA抗体缀合物结合人类含T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域-3(TIM3)并且结合可溶性人类TIM3，结合膜结合的人类TIM3，并且诱导或增强T细胞活化。在另一个方面中，所制备的抗体缀合物在用于抑制肿瘤和癌症的生长的方法中使用，所述肿瘤和癌症包括膀胱癌、乳腺癌、子宫癌/宫颈癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、食管癌、胃肠癌、胰腺癌、结肠直肠癌、结肠癌、肾癌、头颈癌、肺癌、胃癌、生殖细胞癌、骨癌、肝癌、甲状腺癌、皮肤癌、中枢神经系统的赘生物、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤、肉瘤和病毒相关的癌症。

在某些实施方案中，抗体或其抗原结合部分与含蛋白血小板反应蛋白1型结构域7A(THSD7A)反应以形成抗THSD7A缀合物。针对THSD7A蛋白的合适的抗体在通过引用并入本文的WO2017167770中描述。在另一个方面中，所制备的抗体缀合物在用于抑制肿瘤和癌症的生长的方法中使用，所述肿瘤和癌症包括肾癌、前列腺癌、甲状腺癌、膀胱癌、食管癌、结肠癌和乳腺癌。

在另一个方面中，肽和肽模拟物与PSA缀合以制备肽-PSA缀合物。在某些实施方案中，在通过引用并入本文的WO2018015296中描述的肽和肽模拟物与PSA缀合，以制备特定的肽-PSA缀合物。用于制备缀合物的特定蛋白是可溶性淀粉样前体蛋白a(sAPPa)。这种蛋白具有特定的结合位点，该结合位点允许与GABABRI a受体结合，从而通过与GABABRIa的sushi结构域1特异性结合而引起激动作用。本文提供了能够活化该受体的与PSA缀合的可溶性淀粉样前体蛋白a(sAPPa)。

在另一个方面中，参与调节和信号转导途径的蛋白、多肽和肽诸如受体、配体、第二信使和相关的蛋白和化合物被缀合以制备蛋白-PSA缀合物。在某些实施方案中，EI24蛋白或其片段与PSA缀合以制备E124蛋白-PSA缀合物。在制备E124-PSA缀合物时，可以使用根据SEQ ID NO:1(Met-Ala-Asp-Ser-Val-Lys-Thr-Phe-Leu-Gln-Asp-Leu-Ala-Arg-Gly-Ile-Lys-Asp-Ser-Ile-Trp-Gly-Ile-Cys-Thr-Ile-Ser-Lys-Leu-Asp-Ala-Arg-Ile-Gln-Gln-Lys-Arg-Glu-Glu-Gln-Arg-Arg-Arg-Arg-Ala-Ser-Ser-Val-Leu-Ala-Gln-Arg-Arg-Ala-Gln-Ser-Ile-Glu-Arg-Lys-Gln-Glu-Ser-Glu-Pro-Arg-Ile-Val-Ser-Arg-Ile-Phe-Gln-Cys-Cys-Ala-Trp-Asn-Gly-Gly-Val-Phe-Trp-Phe-Ser-Leu-Leu-Leu-Phe-Tyr-Arg-Val-Phe-Ile-Pro-Val-Leu-Gln-Ser-Val-Thr-Ala-Arg-Ile-Ile-Gly-Asp-Pro-Ser-Leu-His-Gly-Asp-Val-Trp-Ser-Trp-Leu-Glu-Phe-Phe-Leu-Thr-Ser-Ile-Phe-Ser-Ala-Leu-Trp-Val-Leu-Pro-Leu-Phe-Val-Leu-Ser-Lys-Val-Val-Asn-Ala-Ile-Trp-Phe-Gln-Asp-Ile-Ala-Asp-Leu-Ala-Phe-Glu-Val-Ser-Gly-Arg-Lys-Pro-His-Pro-Phe-Pro-Ser-Val-Ser-Lys-Ile-Ile-Ala-Asp-Met-Leu-Phe-Asn-Leu-Leu-Leu-Gln-Ala-Leu-Phe-Leu-Ile-Gln-Gly-Met-Phe-Val-Ser-Leu-Phe-Pro-Ile-His-Leu-Val-Gly-Gln-Leu-Val-Ser-Leu-Leu-His-Met-Ser-Leu-Leu-Tyr-Ser-Leu-Tyr-Cys-Phe-Glu-Tyr-Arg-Trp-Phe-Asn-Lys-Gly-Ile-Glu-Met-His-Gln-Arg-Leu-Ser-Asn-Ile-Glu-Arg-Asn-Trp-Pro-Tyr-Tyr-Phe-Gly-Phe-Gly-Leu-Pro-Leu-Ala-Phe-Leu-Thr-Ala-Met-Gln-Ser-Ser-Tyr-Ile-Ile-Ser-Gly-Cys-Leu-Phe-Ser-Ile-Leu-Phe-Pro-Leu-Phe-Ile-Ile-Ser-Ala-Asn-Glu-Ala-Lys-Thr-Pro-Gly-Lys-Ala-Tyr-Leu-Phe-Gln-Leu-Arg-Leu-Phe-Ser-Leu-Val-Val-Phe-Leu-Ser-Asn-Arg-Leu-Phe-His-Lys-Thr-Val-Tyr-Leu-Gln-Ser-Ala-Leu-Ser-Ser-Ser-Thr-Ser-Ala-Glu-Lys-Phe-Pro-Ser-Pro-His-Pro-Ser-Pro-Ala-Lys-Leu-Lys-Ala-Thr-Ala-Gly-HIS)的人类E124蛋白的全长多肽、片段或变体。在另一个方面中，E124-PSA缀合物在治疗癌症等的方法中使用。在某些实施方案中治疗的特定但非限制性类型的癌症是选自由以下组成的组的癌症：乳腺癌、宫颈癌、白血病、胃癌、肉瘤、肝癌、肺癌、结肠直肠癌和肾癌。EI24蛋白在通过引用并入本文的US20180028605中进一步详细地描述。

在另一个方面中，参与免疫系统的调节、过敏反应和过敏的蛋白和肽以及相关的蛋白和化合物被缀合以制备蛋白-PSA缀合物。在一些实施方案中，衍生自桃(PRUNUSPERSICA)的PRU P 3过敏原的肽被缀合以制备蛋白-PSA缀合物。使用从Pru p 3蛋白及其变体的不同区域开发的氨基酸序列Ala-Ser-Ser-Asn-Gly-lle-Arg-Asn-Val-Asn-Asn-Leu-Ala-Arg-Thr-Pro-Asp-Arg-Gln-Ala-Cys(SEQ ID NO:2)以制备Pru p 3蛋白-PSA缀合物。在另一个方面中，Pru p 3蛋白-PSA缀合物在治疗免疫紊乱(包括治疗过敏)的方法中使用。Pru p 3蛋白在通过引用并入本文的WO2017051049中进一步详细地描述。

在另一个方面中，能够结合肿瘤坏死因子受体(TNF)的蛋白和肽以及相关的蛋白和化合物被缀合以制备TNF结合蛋白-PSA缀合物。在某些实施方案中，这些能够结合肿瘤坏死因子受体(TNF)的蛋白是包含根据SEQ ID NO:3(V-P-A-Q-W-F-P-R-S-I-P-E-P-S-N-L-C-Q-P-R-E-Y-Y-D-E-R-A-Q-R-R-C-S-Q-C-P-P-G-C-R-A-K-S-F-C-N-E-T-S-D-T-V-C-V-P-C-E-D-S-T-Y-T-Q-L-W-N-W-L-P-E-C-L-S-C-G-S-R-C-S-T-G-Q-V-E-T-Q-A-C-T-L-K-Q-N-R-I-C-T-C-E-P-G-R-Y-C-I-L-P-R-Q-E-G-C-Q-V-C-G-L-L-R-K-C-P-P-G-F-G-V-A-K-P-G-T-A-T-S-N-W-C-A)的氨基酸序列或其变体的受体或结合分子。这代表了包含CDR2和CDR3 TNF结合结构域的马TNFR p80多肽的截短的细胞外结构域，如从人类TNFR p80同种型的CDR2和CDR3结合结构域所预测的，如由Mukai等人在Science Signaling 3(148):ra83中所描述的。在另一个方面中，TNF结合蛋白-PSA缀合物在治疗过敏或免疫紊乱的方法中使用。在特定实施方案中，通过使用TNF结合蛋白-PSA缀合物治疗的免疫紊乱是由TNF介导的状况，所述状况包括炎性介导的状况、慢性炎性疾病、关节炎诸如免疫介导的多关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、多关节炎、幼年特发性关节炎、银屑病关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、银屑病、系统性血管炎、特应性皮炎、充血性心力衰竭、难治性葡萄膜炎、支气管哮喘、过敏性状况、脓毒症、休克、糖尿病和神经退行性状况诸如阿尔茨海默病、帕金森病、中风和肌萎缩性侧索硬化。与PSA缀合的TNF结合蛋白在通过引用并入本文的WO2016119023中进一步详细地描述。

在另一个方面中，能够结合红细胞生成素受体(EPOR)的蛋白和肽以及相关的蛋白和化合物被缀合以制备EPOE蛋白-PSA缀合物。在某些实施方案中，本文提供的EPOE蛋白-PSA缀合物被用作阻断或抑制EPO/EPOR信号传导通路，并且特别是在治疗癌症且特别是肝细胞癌的方法中使用。与PSA缀合的EPOR蛋白在通过引用并入本文的WO2017219951中进一步详细地描述。

在另一个方面中，非蛋白化合物与PSA缀合以形成与PSA缀合的另外的新颖的化合物。在另一个方面中，这些非蛋白化合物PSA缀合物可以与特定的蛋白或肽-PSA缀合物组合，例如在本文提供的特定制剂或治疗方法中。

在另一组实施方案中，能够抑制p38γ蛋白的细胞内表达的化合物被缀合以制备p38抑制剂PSA缀合物。在某些实施方案中，这些化合物可以在治疗方法(包括癌症的治疗)中使用与其他非蛋白化合物PSA缀合物组合的蛋白或肽PSA缀合物。产生这些实施方案并且特别有效的一种特定类型的非限制性癌症是用于治疗肝癌。

在某些实施方案中，能够抑制p38γ蛋白的细胞内表达的化合物是包含根据SEQID NO:4(Y-G-R-K-K-R-R-Q-R-R-R-A-R-V-P-K-E-T-A-L)的氨基酸序列的肽。在用于治疗癌症和其他疾病的制剂中，化合物可以与其他化合物组合，这些化合物本身可以是或可以不是新颖的。例如，上文的肽用于形成PSA缀合物，该PSA缀合物在取决于特定实施方案任选地包括其他化合物的制剂中使用，这些化合物可以是或可以不是PSA缀合物。适合于制备新颖的PSA缀合物的特定化合物在通过引用并入本文的作为WO2016198698公布的PCT专利申请中描述。

在另一个方面中，被称为CCIO的Clar细胞10kDa蛋白被缀合以制备CCIO蛋白-PSA缀合物。在某些实施方案中，本文提供的CCIO蛋白-PSA缀合物在治疗病毒感染并且特别是流感感染，包括A型流感、H1N1流感和埃博拉病毒疾病(EVD)(也称为埃博拉出血热(EHF))的方法中使用。与PSA缀合的CCIO蛋白在通过引用并入本文的作为WO2016133560公布的PCT专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，可溶性重组蛋白M1型Kunin多肽被缀合以制备Kunin蛋白-PSA缀合物。在根据该方面的某些实施方案中，可溶性重组P-选择素蛋白用于形成新颖的Kunin蛋白PSA缀合物。在另一个方面中，这些新颖的Kunin蛋白PSA缀合物在制剂和治疗方法中使用，特别是包括用于治疗子宫内膜异位症。与PSA缀合的可溶性重组蛋白M1型Kunin多肽在通过引用并入本文的作为CN106146669公布的Guo,Sunwei等人的中国专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，欧洲熊蜂(Bombus terrestris)幼虫衍生的多肽被缀合以制备欧洲熊蜂蛋白-PSA缀合物。在另一个方面中，这些新颖的欧洲熊蜂蛋白-PSA缀合物在制剂和治疗方法中使用，特别是包括用于治疗和/或预防勃起功能障碍和动脉硬化。与PSA缀合的欧洲熊蜂幼虫衍生的多肽在通过引用并入本文的作为KR20150073932公布的Ahn MiYoung AC等人的韩国专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，被称为JAMA-A的连接粘附分子蛋白被缀合以制备JAMA-A蛋白-PSA缀合物。新颖的JAMA-A PSA缀合物在治疗免疫紊乱的方法中使用。在某些实施方案中，本文提供的JAMA-A蛋白-PSA缀合物在治疗关节炎，并且特别是类风湿性关节炎(RA)的方法中使用。与PSA缀合的JAMA-A蛋白在通过引用并入本文的作为CN105125548公布的LiMeizhang等人的中国专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，被称为TIPE2的肿瘤坏死因子-α诱导的蛋白8样-2被缀合以制备TIPE2蛋白-PSA缀合物。新颖的TIPE2 PSA缀合物可以在免疫调节或治疗免疫紊乱的方法中使用。在某些实施方案中，本文提供的TIPE2蛋白-PSA缀合物在治疗内毒素脓毒症合并急性肺损伤的方法中使用。与PSA缀合的TIPE2蛋白在通过引用并入本文的作为CN105126106公布的Tao Zhen Gang等人的中国专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，粘液穿透肽与PSA缀合以制备粘液穿透肽PSA缀合物，该粘液穿透肽PSA缀合物可以与其他化合物结合使用，以通过鼻内递送来增强治疗性化合物的穿透和递送(其中粘膜穿透被增强)。在这些实施方案中，典型地在五个至十个氨基酸之间的肽可以用于形成PSA缀合物，并且在许多实施方案中，肽的长度为约六个至八个氨基酸。新颖的粘液穿透肽PSA缀合物可以在需要鼻内递送的多种治疗方法中使用。与PSA缀合的粘液穿透肽在通过引用并入本文的作为WO2018013907公布的PCT专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，胰高血糖素受体选择性类似物及其肽衍生物与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的胰高血糖素受体类似物肽PSA缀合物。在这些实施方案中，典型地在五个至十五个氨基酸之间的肽可以用于形成PSA缀合物，并且在许多实施方案中，肽的长度为约七个至十个氨基酸，并且在许多实施方案中，具有九个氨基酸的肽用于形成新颖的PSA缀合物。在另一个方面中，本文提供的新颖的胰高血糖素受体类似物肽PSA缀合物在治疗代谢紊乱的方法，特别是包括治疗肥胖症和糖尿病的方法中使用。与PSA缀合的特定胰高血糖素受体选择性类似物和肽衍生物在通过引用并入本文的作为US2018009871公布的US专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，基于肽的治疗剂与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的基于肽的治疗剂PSA缀合物。在这些实施方案中使用的肽的非限制性实例包括SEQ IDNO:5(Arg-Pro-Met-Arg-Leu-Glu-Ser-Phe-Ser-Ala-Cys-Ile-Trp-Val-Lys-Ala-Thr-Asp-Val-Leu-Asn-Lys-Thr-Ile-Leu-Phe-Ser-Tyr-Gly-Thr-Lys-Arg-Asn-Pro-Tyr-Glu-Ile)和SEQ ID NO:6(Gly-Gly-Gly-Phe-Asp-Glu-Thr-Leu-Ala-Phe-Ser-Gly-Arg-Leu-Thr-Gly-Phe-Asn-Ile-Trp-Asp-Ser-Val-Leu-Ser-Asn-Glu-Glu-Ile-Arg-Glu-Thr-Gly-Gly-Ala-Glu-Ser-Cys-His-Ile)。在另一个方面中，与PSA缀合的新颖的基于肽的治疗剂在治疗癌症，在特定实施方案中乳腺癌、肺癌、鼻咽癌和上皮癌的方法中使用。与PSA缀合的特定基于肽的治疗剂在通过引用并入本文的作为US20180002400公布的US专利申请中进一步详细地描述。

在另一个方面中，结合Tau蛋白表位的抗体与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的抗Tau抗体PSA缀合物。在该方面的某些实施方案中，新颖的PSA缀合的抗体选择性地识别病理类型Tau蛋白。在特定实施方案中，与正常Tau相比赋予对病理类型Tau蛋白更高亲和力的特定表位包括出现在选自以下的病理类型Tau蛋白内的氨基酸序列：SEQ IDNO:7(K-H-Q-P-G-G-G)、SEQ ID NO:8(K-H-V-P-G-G-G)、SEQ ID NO:9(H-H-K-P-G-G-G)和SEQ ID NO:10(T-H-V-P-G-G-G)。在另一个方面中，本文提供的新颖的抗Tau抗体PSA缀合物在治疗和预防阿尔茨海默病和其他形式的痴呆的方法中使用。与PSA和优选的表位缀合的特定抗体在通过引用并入本文的作为AU2017272259公布的澳大利亚专利申请中进一步描述。

在另一个方面中，α-螺旋抗菌肽GV与PSA缀合，以制备具有增强的抗菌或其他治疗性质的新颖的α-螺旋抗菌肽PSA缀合物。在另一个方面中，本文提供的新颖的抗菌肽缀合物在治疗方法中使用，特别是用于治疗细菌感染。与PSA缀合的特定α-螺旋抗菌肽GV肽在通过引用并入本文的作为CN106366162公布的中国专利申请中进一步描述。

在另一个方面中，用于修饰微泡和GBM靶向(多形性胶质母细胞瘤靶向)的多肽与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的多肽PSA缀合物。在该方面的特定实施方案中，用于修饰微泡的合适的多肽包括从N-末端到C-末端依次排列的亲脂性结构域、细胞杀伤结构域和肿瘤靶向结构域，其中肿瘤靶向结构域是低密度A脂蛋白肽模拟肽，亲脂性结构域和细胞杀伤结构域之间以及细胞杀伤结构域和肿瘤靶向结构域之间，通过柔性连接肽连接。与PSA缀合的用于修饰微泡和GBM靶向的特定多肽在通过引用并入本文的作为CN106632688公布的Ren Jinghua等人的中国专利申请中进一步描述。

在另一个方面中，用于促进肌肉或肌腱再生或动脉生成的PEDF衍生的肽/多肽与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的PEDF衍生的多肽PSA缀合物。用于促进肌肉或肌腱再生的PEDF衍生的肽/多肽可以是合成的，并且它们可以是多种长度，包括至少20个氨基酸的长度、约29个至30个氨基酸的长度，或者可选择地具有更多或更少的氨基酸，使得它们典型地但不总是具有五个至五十个氨基酸的长度。用于促进肌肉或肌腱再生或动脉生成的特定PEDF衍生的多肽在通过引用并入本文的作为JP2017165745公布的Tsao Yeou-Ping等人的日本专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，用于促进SERCA钙泵的活性的肽与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的SERCA钙泵活化肽PSA缀合物。用于这些实施方案的合适的肽包括以下：M-A-E-K-E-S-T-S-P-H-L-M-V-P-I-L-L-L-V-G-W-I-V-G-C-I-I-V-I-Y-I-V-F-F(SEQ IDNO:11)、M-A-E-K-A-E-S-T-S-P-H-L-M-V-P-I-L-L-L-V-G-W-I-V-G-C-I-I-V-I-Y-I-V-F-F(SEQ ID NO:12)、M-A-E-K-E-S-T-S-P-H-L-I-V-P-I-L-L-L-V-G-W-I-V-G-C-I-I-V-I-Y-I-V-F-F(SEQ ID NO:13)和M-A-E-K-A-E-S-T-S-P-H-L-I-V-P-I-L-L-L-V-G-W-I-V-G-C-I-I-V-I-Y-I-V-F-F(SEQ ID NO:14)。在另一个方面中，本文提供的用于促进SERCA钙泵的活性的肽的新颖的PSA缀合物在治疗方法中使用，特别是在治疗心脏和心血管状况的方法中使用。用于促进SERCA钙泵的活性的特定肽在通过引用并入本文的作为US20170298107A1公布的美国专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，用于兴奋性神经毒性相关损伤的治疗性肽与PSA缀合，以制备具有增强的神经治疗性质的新颖的神经治疗肽PSA缀合物，包括用于治疗中枢神经系统损伤。在制备新颖的PSA缀合物中使用的一种特定肽具有Y-E-K-L-L-D-T-E-I(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列或其功能变体。在制备新颖的缀合物中使用的可用于兴奋性神经毒性相关损伤的肽在通过引用并入本文的作为WO2017185249公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，SALL4肽用于制备PSA缀合物。在这些实施方案中，与成视网膜细胞瘤结合蛋白4RBBp4结合的治疗性肽与PSA缀合以形成新颖的肽缀合物，该肽缀合物在结合后阻断SALL4-RBBp4相互作用。在另一个方面中，还提供了用于治疗患有由SALL4失调介导的紊乱的受试者的方法，包括使用本文开发和描述的缀合的新颖的肽PSA用于治疗成视网膜细胞瘤的方法的实施方案。在制备新颖的缀合物中使用的适合于与成视网膜细胞瘤结合蛋白4RBBp4结合的肽在通过引用并入本文的作为WO2017190032公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，与NFKB必需调节剂(NEMO)结合结构域CARGO序列连接的肽缀合物用于制备具有增强的渗透性和其他治疗性质的肽PSA缀合物。在另一个方面中，还提供了用于治疗患有葡萄膜炎或干眼病的受试者的方法。在制备新颖的缀合物中使用的合适的肽在通过引用并入本文的作为WO2017189826公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，与胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体肽和类似物肽连接的肽缀合物用于制备具有增强的治疗性质的肽PSA缀合物。与具有序列H-S-Q-G-T-F-T-S-D-Y-S-K-Y-L-D-S-R-R-A-Q-D-F-V-Q-W-L-M-N-T(SEQ ID NO:16)的GLP-1具有相似性的肽及其变体用于制备特定的新颖的GLP-1肽-PSA缀合物。在这些肽的特定实施方案中，序数30或末端氨基酸(典型地为C-末端)被具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的肽替代：E-E-P-S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:17)；E-P-S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:18)；G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:19)；G-G-P-S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:20)；G-P-S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:21)；K-R-N-K-N-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:22)；K-R-N-K-N-P-P-S-OH(SEQ IDNO:23)；K-R-N-K-P-P-I-A--OH(SEQ ID NO:24)；K-R-N-K-P-P-P-A-OH(SEQ ID NO:25)；K-R-N-K-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:26)；K-S-S-G-K-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:27)；P-E-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:28)；PK-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:29)；P-K-S-K-A-P-P-P-S-NH2(SEQ ID NO:30)；P-K-S-K-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:31)；P-K-S-K-E-P-P-P-S-NH2(SEQ ID NO:32)；P-K-S-K-E-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:33)；P-K-S-K-Q-P-P-P-S-OH(SEQ IDNO:34)；P-K-S-K-S-P-P-P-S-NH2(SEQ ID NO:35)；P-K-S-K-S-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:36)；P-R-N-K-N-N-P-P-S-OH(SEQ ID NO:37)；P-S-K-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:38)；P-S-S-G-A-P-P-P-S-E-OH(SEQ ID NO:39)；P-S-S-G-A-P-P-P-S-NH2(SEQ ID NO:40)；P-S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:41)；P-S-S-G-A-P-P-P-S-S-OH(SEQ ID NO:42)；P-S-S-G-E-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:43)；P-S-S-G-K-K-P-P-S-OH(SEQ ID NO:44)；P-S-S-G-K-P-P-P-S-NH2(SEQ ID NO:45)；P-S-S-G-K-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:46)；P-S-S-G-S-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:47)；P-S-S-K-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:48)；P-S-S-K-E-P-P-P-S-OH(SEQ IDNO:49)；P-S-S-K-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:50)；P-S-S-K-Q-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:51)；P-S-S-K-S-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:52)；S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:53)；以及S-S-G-A-P-P-P-S-OH(SEQ ID NO:54)。在另一个方面中，本文提供的新颖的GLP-1肽-PSA缀合物用于治疗多种代谢紊乱，包括糖尿病。在制备新颖的GLP-1PSA和相关的缀合物中使用的其他合适的肽在全部通过引用并入本文的美国专利第10,010,614号、美国专利第9,982,029号、美国专利第9,839,692号、美国专利第9,988,430号、美国专利第7,067,488号以及作为WO2017200944公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个相关方面中，本文提供了具有改进的和合意的制剂和递送特性的新颖的GLP-1和GLP-1类似物聚唾液酸化化合物。在某些实施方案中，本文提供的GLP-1和GLP-1类似物聚唾液酸化化合物和制剂具有改进的鼻内递送能力。在另一个相关方面中，本文提供了与非聚唾液酸化GLP-1和GLP-1类似物相比具有新颖的和/或改进的治疗用途的新颖的GLP-1和GLP-1类似物聚唾液酸化化合物。

在另一个相关方面中，由于聚唾液酸部分的作用与聚唾液酸化的GLP-1和GLP-1类似物的作用组合，某些实施方案被认为在特定组织和细胞类型中呈现出协同活性。例如，已经报告聚唾液酸或PSA部分本身在某些神经组织中具有抗炎性质。

因此，在本文的其他实施方案中，提供了治疗神经元紊乱(例如神经变性)的方法，该方法使用PSA作为抗炎剂与本文提供的可用于治疗神经元紊乱或状况的其他聚唾液酸化化合物的使用组合或联合。在特定实施方案中治疗的示例性神经退行性疾病包括肌萎缩性侧索硬化(ALS)、阿尔茨海默病、认知损害、脱髓鞘疾病、变性视网膜疾病、路易体痴呆、帕金森病、深眠状态、糖尿病性神经病变(例如视网膜病变)或多发性硬化。合适的聚唾液酸在通过引用并入本文的Newmann等人的题为‘Polysialic acid and use for treatment ofneurodegenerative and neuroinflammatory disorders’的国际专利申请第PCT/EP2014/055445号中描述。

在某些实施方案中，例如，提供了可用于治疗帕金森病的聚唾液酸化的艾塞那肽化合物。在一份报告中，激动肽-4/艾塞那肽已经被探索为一种潜在的帕金森病治疗剂。参见Aviles-Olmo,I.,等人,Exenatide and the treatment of patients with Parkinson’s disease,J.Clin Invest.,3013,123(6):2730-2736.doi:10.1172/JC168295,其通过引用并入本文。

在另一个方面中，本文提供的某些实施方案使用基本上由聚唾液酸化合物组成或由聚唾液酸化合物组成的制剂，用作抗炎剂并且用于治疗与炎症相关的疾病和紊乱。因此，虽然一些实施方案使用与治疗性化合物共价地连接或与治疗性化合物组合的聚唾液酸，但其他实施方案使用不含其他治疗性化合物的聚唾液酸化合物。

在另一个方面中，可用于治疗人类表皮生长因子受体(HER)过度表达癌症的肽DNA缀合物用于制备具有增强的治疗性质的肽PSA缀合物。在某些实施方案中，包含一种或更多种人类表皮生长因子受体(HER)结合肽、接头和单链多核苷酸的肽-多核苷酸嵌合体用于形成新颖的PSA缀合物。在另一个方面中，新颖的(HER)结合嵌合体PSA缀合物在治疗癌症的方法中使用，特别是在过度表达人类表皮生长因子受体的癌症中使用。在制备新颖的PSA缀合物中使用的其他合适的肽和化合物在通过引用并入本文的作为WO2017200787公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，用于治疗癌症的抗微生物肽TP4用于制备具有增强的治疗性质的肽PSA缀合物。具有氨基酸序列F-I-H-H-I-I-G-G-L-F-S-A-G-K-A-I-H-R-L-I-R-R-R-R-R(SEQ ID NO:55)或其变体的TP4肽用于制备新颖的肽PSA缀合物。在另一个方面中，本文提供的TP4 PSA缀合物在治疗癌症的组合物和方法中使用，所述癌症包括例如恶性MDR癌症、复发性癌症或转移性癌症或三阴性乳腺癌(TNBC)。在制备新颖的PSA缀合物中使用的其他合适的肽和化合物在通过引用并入本文的作为TW201725048公布的中国台湾申请中更详细地描述。

在另一个方面中，脊髓灰质炎样激酶1polo盒结构域的肽和模拟物结合激动剂用于制备具有增强的治疗性质的肽PSA缀合物。在另一个方面中，本文提供的脊髓灰质炎样激酶1polo盒结构域PSA缀合物在治疗癌症的组合物和方法中使用，所述癌症包括但不限于急性成淋巴细胞白血病、急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、基底细胞癌、膀胱癌、骨癌、脑瘤、乳腺癌、宫颈癌、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性骨髓增生性紊乱、结肠癌、结肠直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、食管癌、尤因氏肿瘤家族、成视网膜细胞瘤、胃(胃)癌(Gastric(Stomach)Cancer)、胃肠肿瘤、神经胶质瘤、头颈癌、肝细胞(肝)癌、霍奇金淋巴瘤、胰岛细胞瘤(内分泌胰腺)、肾(肾细胞)癌、喉癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴瘤、成神经管细胞瘤、黑素瘤、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、直肠癌以及甲状腺癌。在制备根据该方面的新颖的PSA缀合物中使用的特别合适的肽和化合物在通过引用并入本文的作为WO2017082924公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，对降钙素基因相关肽(CGRP)特异性的蛋白用于制备具有增强的治疗性质的PSA缀合物。在某些实施方案中，结合CGRP的hNGAL突变蛋白用于制备本文中的PSA缀合物。在另一个方面中，新颖的CGRP结合多肽PSA缀合物在治疗方法中使用，诸如用于治疗偏头痛和相关状况。在制备根据该方面的新颖的PSA缀合物中使用的合适的CGRP结合多肽在通过引用并入本文的作为TW201725212公布的中国台湾申请中更详细地描述。

在另一个方面中，用于治疗和/或预防缺血和缺血-再灌注损伤的肽用于制备具有增强的治疗性质的PSA缀合物。在另一个方面中，本文提供的新颖的缺血和缺血-再灌注损伤肽PSA缀合物在治疗缺血和缺血-再灌注损伤和相关紊乱的方法中使用。在制备根据该方面的新颖的PSA缀合物中使用的特定的肽变体和化合物在通过引用并入本文的作为WO2017117381公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，用于辅助免疫球蛋白穿过血脑屏障递送的肽用于形成新颖的PSA肽缀合物。在根据该方面的某些实施方案中，用于辅助免疫球蛋白穿过血脑屏障递送的肽具有免疫球蛋白亲和配体，该免疫球蛋白亲和配体被共价地附接至接头部分，被共价地附接至血脑屏障剂。在这些实施方案中，合适的血脑屏障剂包括具有序列L-R-V-R-L-A-S-H-L-R-K-L-R-K-R-L-L-R-D-A (SEQ ID NO:56)的肽，或其具有一个或两个保守氨基酸取代的变体。在制备根据该方面的新颖的PSA缀合物中使用的用于辅助免疫球蛋白穿过血脑屏障递送的特定肽在通过引用并入本文的作为US20170058017A1公布的US申请中更详细地描述。

在另一个方面中，端粒酶易位的肽抑制剂用于制备具有增强的治疗性质的PSA缀合物。在根据该方面的某些实施方案中，合适的端粒酶易位的肽抑制剂包含R-R-R-G-G-Xj-A-S-R-S-L-P-L-P-K-R-P-R-R或其变体，其中Xi是选自由天冬氨酸(SEQ ID NO:57)和谷氨酸(SEQ ID NO:58)组成的组的仿磷酸化(phosphomimetic)残基。在这些实施方案的另一个方面中，使用与端粒酶易位的肽抑制剂缀合的新颖的PSA提供用于治疗或预防接受化学治疗剂的受试者的心脏或血管毒性的组合物和方法，其中心脏或血管毒性与化学治疗剂的施用相关。在制备根据该方面的新颖的PSA缀合物中使用的特定的端粒酶易位的肽抑制剂在通过引用并入本文的作为WO2017040309公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，与用于将治疗性多肽或多核苷酸递送至身体的细胞或组织的细胞穿透缀合物相关的组合物和方法用于制备具有增强的治疗性质的PSA缀合物。在根据该方面的某些实施方案中，合适的细胞穿透递送缀合物具有细胞穿透肽、核定位信号、效应物部分和任选地表位标签，它们一起形成用于制备本文提供的新颖的PSA缀合物的化合物。根据该方面的合适的细胞穿透肽包括但不限于包含蛋白转导结构域、果蝇触角足(Antp)肽和聚精氨酸(Arg8)肽的HIV TAT蛋白或其片段。在另一个方面中，这些新颖的缀合物在用于递送多种治疗剂的组合物和方法中使用。根据该方面的细胞穿透缀合物在通过引用并入本文的作为WO2017048466公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，靶向HIV融合蛋白的多肽用于制备具有增强的治疗性质的PSA缀合物。根据该方面的合适的靶向HIV融合蛋白的多肽包括三个活性结构域，其中一个结构域是抗CD4 Adnectin蛋白，第二个结构域是gp41结合部分，并且第三个结构域是HIV融合肽抑制剂部分。在另一个方面中，靶向HIV融合蛋白的多肽的新颖的PSA缀合物用于治疗HIV和相关病毒感染以及相关紊乱。根据该方面的靶向HIV融合蛋白的多肽在通过引用并入本文的作为WO2016171980公布的PCT申请中更详细地描述。

在另一个方面中，归巢、分布至、靶向、引导至、积累在、迁移至和/或结合至癌细胞的肽用于制备新颖的癌症靶肽PSA缀合物。在另一个方面中，归巢、分布至、靶向、引导至、积累在、迁移至和/或结合至癌细胞的肽的PSA缀合物在用于治疗癌症和相关紊乱的方法和制剂中使用。在某些实施方案中，本公开内容的肽可以包含在AU2016283391中列出的序列。用于缀合物的其他合适的肽在通过引用并入本文的题为‘Therapeutic peptides andmethods of use thereof’并且作为AU2016283391(A1)公布的澳大利亚专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，羧基末端肽和长效干扰素用于制备新颖的PSA缀合物。合适的新的羧基末端肽具有氨基酸序列S-S-G-S-S-S-S-S-S-S-K-A-P-P-P-S-L-P-S-P-S-R-L-P-G-P-S-D-T-P-I-L-P-Q-N-G-S(SEQ ID NO:59)，或其变体。用于制备PSA缀合物的其他合适的肽包括通过引用并入本文的作为CN106397570公布的中国专利申请中描述的肽。

在另一个方面中，整联蛋白结合肽与PSA缀合，以制备具有增强的治疗性质的新颖的整联蛋白结合肽PSA缀合物。在该方面的某些实施方案中，优选的整联蛋白结合肽具有氨基酸序列VGDLTYLK(SEQ ID NO:60)和VGDLTYLKK(SEQ ID NO:61)。在另一个方面中，本文提供的新颖的整联蛋白结合肽PSA缀合物在治疗疾病和紊乱的方法中使用，所述疾病和紊乱包括癌症、炎性疾病、自身免疫性疾病、慢性纤维化、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺气肿、放射诱导的肺纤维化和慢性创伤性皮肤病。在特定实施方案中，本文提供的新颖的整联蛋白结合肽PSA缀合物用于治疗以下癌症：胰腺癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、口腔鳞状细胞癌。与PSA缀合的特定整联蛋白结合肽在通过引用并入本文的作为WO2017218569公布的PCT专利申请中进一步描述。

在另一个方面中，新颖的PSA缀合物使用能够与胞壁酰肽结合的抗体、结合蛋白或抗原结合片段制备，优选地其中所述胞壁酰肽包含胞壁酸和选自由丙氨酸、异谷氨酰胺、谷氨酸或其盐组成的组的氨基酸。在另一个方面中，结合胞壁酰肽或衍生物或类似物的抗体或类似物的新颖的PSA缀合物在治疗方法中使用，包括但不限于治疗自身免疫性疾病或炎性疾病。可用于制备PSA缀合物的其他合适的抗体在通过引用并入本文的作为US2017342136公布的美国专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，新颖的PSA缀合物使用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)制备，以制备具有增强的抗肿瘤活性、渗透和其他治疗性质的PSA缀合物。可用于制备PSA缀合物的合适的肽和蛋白在通过引用并入本文的作为US2017247427公布的美国专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，新颖的PSA缀合物使用从皱纹盘鲍(haliotis discus hannai)内脏器官中分离的抗炎肽制备，以制备具有治疗性质的PSA缀合物。在特定方面中，所制备的新颖的PSA缀合物可以在治疗炎性和免疫系统疾病和紊乱中使用。可用于制备PSA缀合物的合适的肽在通过引用并入本文的作为CN10544010公布的Qian Zhongji的中国专利申请中详细地描述。

在另一个方面中，新颖的PSA缀合物使用肽毒素制备，以制备具有增强的治疗性质或具有其他合意的特性的新颖的缀合物。用于与PSA缀合以形成新颖的PSA-毒素缀合物的合适的肽毒素包括肉毒杆菌毒素(A和B)和芋螺毒素(例如，α、δ、κ、μ、ω、齐考诺肽、来考诺肽(Leconotide)等)。合适的肉毒杆菌神经毒素在全部通过引用并入本文的美国专利第7,780,967号、美国专利第7,758,873号、美国专利第9,220,783号和美国专利第9,598,685号中描述。用于确定肉毒杆菌神经毒素生物活性的方法在通过引用并入本文的美国专利第9,212,355号中描述。被报告为合成的ω-芋螺毒素MVIIA(通常在吃鱼的海螺体中发现)的来考诺肽是一种特别适合用于制备PSA肽缀合物的芋螺毒素。齐考诺肽是另一种特别适合用于制备PSA肽缀合物的芋螺毒素，并且它在全部通过引用并入本文的McGivern,J.,Neuropsychiatric Dis.Treat.,2007,3(I),69-85和美国专利第7,524,812号中描述。用于制备PSA缀合物的合适的齐考诺肽肽序列包括SEQ ID NO:62(C-K-G-K-G-A-K-C-S-R-L-M-Y-D-C-C-T-G-S-C-R-S-G-K-C)及其类似物。

在另一个方面中，新颖的PSA缀合物使用大麻素制备，以制备具有治疗性质或具有其他合意的特性的PSA肽缀合物。合适的大麻素包括但不限于四氢大麻酚(THC)、四氢大麻酚酸(THCA)、大麻二酚(CBD)、大麻二酚酸(CBDA)、大麻酚(CBN)、大麻萜酚(cannabigerol)(CBG)、大麻环萜酚(cannabichromene)(CBC)、大麻环酚(cannabicyclol)(CBL)、次大麻酚(cannabivarin)(CBV)、四氢次大麻酚(tetrahydrocannabivarin)(THCV)、次大麻二酚(cannabidivarin)(CBDV)、次大麻色酚(cannabichromevarin)(CBCV)、次大麻萜酚(cannabigerovarin)(CBGV)、大麻萜酚单甲醚(cannabigerol monomethyl ether)(CBGM)、大麻艾尔松(cannabielsoin)(CBE)、大麻二吡喃环烷(cannabicitran)(CBT)。在一些实施方案中，本文提供的大麻素-PSA缀合物在治疗诸如以下的状况、疾病或紊乱的方法中使用：肥胖症、厌食、呕吐、疼痛、神经性疼痛、多发性硬化、神经保护、炎症、癌症、帕金森病、亨廷顿病、图雷特综合征(Tourette's syndrome)、阿尔茨海默病、癫痫、双相情感障碍、精神分裂症、创伤后应激障碍(PTSD)、抑郁、焦虑和失眠。在某些实施方案中，本文提供的PSA-大麻素是以具有水和非水性组分(例如油类、脂类、脂肪酸类等)的大体上非水性制剂等形式的制剂，例如以促进溶解性。

在该实施方案的其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物使疾病的严重程度降低了例如至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在该实施方案的又其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物使肿瘤的尺寸降低例如，约5％至约100％、约10％至约100％、约20％至约100％、约30％至约100％、约40％至约100％、约50％至约100％、约60％至约100％、约70％至约100％、约80％至约100％、约10％至约90％、约20％至约90％、约30％至约90％、约40％至约90％、约50％至约90％、约60％至约90％、约70％至约90％、约10％至约80％、约20％至约80％、约30％至约80％、约40％至约80％、约50％至约80％、或约60％至约80％、约10％至约70％、约20％至约70％、约30％至约70％、约40％至约70％或约50％至约70％。

本文公开的药物组合物可以包括以足以允许对个体进行常规施用的量的PSA-蛋白缀合物。在该实施方案的方面中，本文公开的药物组合物可以是，例如，至少5mg、至少10mg、至少15mg、至少20mg、至少25mg、至少30mg、至少35mg、至少40mg、至少45mg、至少50mg、至少55mg、至少60mg、至少65mg、至少70mg、至少75mg、至少80mg、至少85mg、至少90mg、至少95mg、至少100mg、至少200mg、至少300mg、至少400mg、至少500mg、至少600mg、至少700mg、至少800mg、至少900mg、至少1g、至少2g、至少3g、至少4g、至少5g、至少6g、至少7g、至少8g、至少9g、至少10g、至少15g、至少20g、至少25g、至少50g、至少100g的PSA-蛋白缀合物。

在该实施方案的其他方面中，本文公开的药物组合物可以是，例如，至少5mg、至少10mg、至少20mg、至少25mg、至少50mg、至少75mg、至少100mg、至少200mg、至少300mg、至少400mg、至少500mg、至少600mg、至少700mg、至少800mg、至少900mg、至少1g、至少2g、至少3g、至少4g、至少5g、至少6g、至少7g、至少8g、至少9g、至少10g、至少15g、至少20g、至少25g、至少50g、至少100g的PSA-蛋白缀合物。在该实施方案的又其他方面中，本文公开的药物组合物可以在以下的范围内：例如，约5mg至约100mg、约10mg至约100mg、约50mg至约150mg、约100mg至约250mg、约150mg至约350mg、约250mg至约500mg、约350mg至约600mg、约500mg至约750mg、约600mg至约900mg、约750mg至约1,000mg、约850mg至约1,200mg、约250mg至约10g、约500mg至约7.5g、约1g至约5g、约250mg至约2.5g、约500mg至约2.5g或约1,000mg至约1,500mg。在该实施方案的仍其他方面中，本文公开的药物组合物可以在以下的范围内：例如，约10mg至约250mg、约10mg至约500mg、约10mg至约750mg、约10mg至约1,000mg、约10mg至约1,500mg、约50mg至约250mg、约50mg至约500mg、约50mg至约750mg、约50mg至约1,000mg、约50mg至约1,500mg、约100mg至约250mg、约100mg至约500mg、约100mg至约750mg、约100mg至约1,000mg、约100mg至约1,500mg、约200mg至约500mg、约200mg至约750mg、约200mg至约1,000mg、约200mg至约1,500mg、约5mg至约1,500mg、约5mg至约1,000mg或约5mg至约250mg。

本文公开的药物组合物中的本文公开的PSA-蛋白缀合物的最终浓度可以是任何期望的浓度。在该实施方案的方面中，药物组合物中PSA-蛋白缀合物的最终浓度可以是治疗有效量。在该实施方案的其他方面中，药物组合物中PSA-蛋白缀合物的最终浓度可以是，例如，至少0.00001mg/mL、至少0.0001mg/mL、至少0.001mg/mL、至少0.01mg/mL、至少0.1mg/mL、至少1mg/mL、至少10mg/mL、至少25mg/mL、至少50mg/mL、至少100mg/mL、至少200mg/mL、至少500mg/mL、至少700mg/mL、至少1,000mg/mL或至少1,200mg/mL。在该实施方案的其他方面中，溶液中本文公开的PSA-蛋白缀合物的浓度可以是，例如，至多1,000mg/mL、至多1,100mg/mL、至多1,200mg/mL、至多1,300mg/mL、至多1,400mg/mL、至多1,500mg/mL、至多2,000mg/mL、至多2,000mg/mL或至多3,000mg/mL。在该实施方案的其他方面中，药物组合物中PSA-蛋白缀合物的最终浓度可以在以下的范围内：例如，约0.00001mg/mL至约3,000mg/mL、约0.0001mg/mL至约3,000mg/mL、约0.01mg/mL至约3,000mg/mL、约0.1mg/mL至约3,000mg/mL、约1mg/mL至约3,000mg/mL、约250mg/mL至约3,000mg/mL、约500mg/mL至约3,000mg/mL、约750mg/mL至约3,000mg/mL、约1,000mg/mL至约3,000mg/mL、约100mg/mL至约2,000mg/mL、约250mg/mL至约2,000mg/mL、约500mg/mL至约2,000mg/mL、约750mg/mL至约2,000mg/mL、约1,000mg/mL至约2,000mg/mL、约100mg/mL至约1,500mg/mL、约250mg/mL至约1,500mg/mL、约500mg/mL至约1,500mg/mL、约750mg/mL至约1,500mg/mL、约1,000mg/mL至约1,500mg/mL、约100mg/mL至约1,200mg/mL、约250mg/mL至约1,200mg/mL、约500mg/mL至约1,200mg/mL、约750mg/mL至约1,200mg/mL、约1,000mg/mL至约1,200mg/mL、约100mg/mL至约1,000mg/mL、约250mg/mL至约1,000mg/mL、约500mg/mL至约1,000mg/mL、约750mg/mL至约1,000mg/mL、约100mg/mL至约750mg/mL、约250mg/mL至约750mg/mL、约500mg/mL至约750mg/mL、约100mg/mL至约500mg/mL、约250mg/mL至约500mg/mL、约0.00001mg/mL至约0.0001mg/mL、约0.00001mg/mL至约0.001mg/mL、约0.00001mg/mL至约0.01mg/mL、约0.00001mg/mL至约0.1mg/mL、约0.00001mg/mL至约1mg/mL、约0.001mg/mL至约0.01mg/mL、约0.001mg/mL至约0.1mg/mL、约0.001mg/mL至约1mg/mL、约0.001mg/mL至约10mg/mL或约0.001mg/mL至约100mg/mL。

本说明书的方面部分地公开了治疗罹患疾病的个体。如本文使用的，术语“治疗”指的是减轻或消除个体中的疾病的临床症状；或者延缓或防止个体中疾病的临床症状的发作。例如，术语“治疗”可以意指使状况的症状或疾病的严重程度减轻例如，至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％。本领域技术人员将了解与特定疾病相关的适当症状或指标(indicator)并且将知道如何确定个体是否为如本文公开的用PSA-蛋白缀合物治疗的候选者。

在该实施方案的方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使与疾病相关的症状减轻例如，至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％。在该实施方案的其他方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使与疾病相关的症状减轻例如，至多10％、至多15％、至多20％、至多25％、至多30％、至多35％、至多40％、至多45％、至多50％、至多55％、至多60％、至多65％、至多70％、至多75％、至多80％、至多85％、至多90％、至多95％或至多100％。在该实施方案的又其他方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使与疾病相关的症状减轻例如，约10％至约100％、约10％至约90％、约10％至约80％、约10％至约70％、约10％至约60％、约10％至约50％、约10％至约40％、约20％至约100％、约20％至约90％、约20％至约80％、约20％至约70％、约20％至约60％、约20％至约50％、约20％至约40％、约30％至约100％、约30％至约90％、约30％至约80％、约30％至约70％、约30％至约60％或约30％至约50％。

在该实施方案的又其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的治疗有效量通常在约0.001mg/kg/天至约100mg/kg/天的范围内。在该实施方案的方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以是，例如，至少0.001mg/kg/天、至少0.01mg/kg/天、至少0.1mg/kg/天、至少1.0mg/kg/天、至少5.0mg/kg/天、至少10mg/kg/天、至少15mg/kg/天、至少20mg/kg/天、至少25mg/kg/天、至少30mg/kg/天、至少35mg/kg/天、至少40mg/kg/天、至少45mg/kg/天或至少50mg/kg/天。在该实施方案的其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以在以下的范围内：例如，约0.001mg/kg/天至约10mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约15mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约20mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约25mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约30mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约35mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约40mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约45mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约50mg/kg/天、约0.001mg/kg/天至约75mg/kg/天或约0.001mg/kg/天至约100mg/kg/天。在该实施方案的又其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以在以下的范围内：例如，约0.01mg/kg/天至约10mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约15mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约20mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约25mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约30mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约35mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约40mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约45mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约50mg/kg/天、约0.01mg/kg/天至约75mg/kg/天或约0.01mg/kg/天至约100mg/kg/天。在该实施方案的仍其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以在以下的范围内：例如，约0.1mg/kg/天至约10mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约15mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约20mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约25mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约30mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约35mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约40mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约45mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约50mg/kg/天、约0.1mg/kg/天至约75mg/kg/天或约0.1mg/kg/天至约100mg/kg/天。

在该实施方案的其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以在以下的范围内：例如，约1mg/kg/天至约10mg/kg/天、约1mg/kg/天至约15mg/kg/天、约1mg/kg/天至约20mg/kg/天、约1mg/kg/天至约25mg/kg/天、约1mg/kg/天至约30mg/kg/天、约1mg/kg/天至约35mg/kg/天、约1mg/kg/天至约40mg/kg/天、约1mg/kg/天至约45mg/kg/天、约1mg/kg/天至约50mg/kg/天、约1mg/kg/天至约75mg/kg/天或约1mg/kg/天至约100mg/kg/天。在该实施方案的又其他方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的有效量可以在以下的范围内：例如，约5mg/kg/天至约10mg/kg/天、约5mg/kg/天至约15mg/kg/天、约5mg/kg/天至约20mg/kg/天、约5mg/kg/天至约25mg/kg/天、约5mg/kg/天至约30mg/kg/天、约5mg/kg/天至约35mg/kg/天、约5mg/kg/天至约40mg/kg/天、约5mg/kg/天至约45mg/kg/天、约5mg/kg/天至约50mg/kg/天、约5mg/kg/天至约75mg/kg/天或约5mg/kg/天至约100mg/kg/天。

在液体和半固体制剂中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的浓度典型地可以在约50mg/mL至约1,000mg/mL之间。在该实施方案的方面中，本文公开的PSA-蛋白缀合物的治疗有效量可以是，例如，约50mg/mL至约100mg/mL、约50mg/mL至约200mg/mL、约50mg/mL至约300mg/mL、约50mg/mL至约400mg/mL、约50mg/mL至约500mg/mL、约50mg/mL至约600mg/mL、约50mg/mL至约700mg/mL、约50mg/mL至约800mg/mL、约50mg/mL至约900mg/mL、约50mg/mL至约1,000mg/mL、约100mg/mL至约200mg/mL、约100mg/mL至约300mg/mL、约100mg/mL至约400mg/mL、约100mg/mL至约500mg/mL、约100mg/mL至约600mg/mL、约100mg/mL至约700mg/mL、约100mg/mL至约800mg/mL、约100mg/mL至约900mg/mL、约100mg/mL至约1,000mg/mL、约200mg/mL至约300mg/mL、约200mg/mL至约400mg/mL、约200mg/mL至约500mg/mL、约200mg/mL至约600mg/mL、约200mg/mL至约700mg/mL、约200mg/mL至约800mg/mL、约200mg/mL至约900mg/mL、约200mg/mL至约1,000mg/mL、约300mg/mL至约400mg/mL、约300mg/mL至约500mg/mL、约300mg/mL至约600mg/mL、约300mg/mL至约700mg/mL、约300mg/mL至约800mg/mL、约300mg/mL至约900mg/mL、约300mg/mL至约1,000mg/mL、约400mg/mL至约500mg/mL、约400mg/mL至约600mg/mL、约400mg/mL至约700mg/mL、约400mg/mL至约800mg/mL、约400mg/mL至约900mg/mL、约400mg/mL至约1,000mg/mL、约500mg/mL至约600mg/mL、约500mg/mL至约700mg/mL、约500mg/mL至约800mg/mL、约500mg/mL至约900mg/mL、约500mg/mL至约1,000mg/mL、约600mg/mL至约700mg/mL、约600mg/mL至约800mg/mL、约600mg/mL至约900mg/mL或约600mg/mL至约1,000mg/mL。

给药可以是单一剂量或累积性的(连续给药)，并且可以由本领域技术人员容易地确定。例如，治疗疾病可以包括一次性施用有效剂量的本文公开的药物组合物。可选择地，治疗疾病可以包括在一系列时间段内进行多次施用有效剂量的药物组合物，诸如，例如，每天一次、每天两次、每天三次、每隔几天一次或每周一次。施用的时间可以因人而异，这取决于如个体症状的严重程度这样的因素。例如，有效剂量的包括本文公开的PSA-蛋白缀合物的药物组合物可以每天一次地施用至个体持续不确定的时间段，或者直到个体不再需要治疗。本领域普通技术人员将认识到，可以在整个治疗过程中监测个体的状况，并且所施用的包括本文公开的PSA-蛋白缀合物的药物组合物的有效量可以被相应地调整。

在一种实施方案中，本文公开的PSA-蛋白缀合物能够使罹患癌症的个体中的疾病的严重程度与未接受相同治疗的患者相比减轻例如，至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在该实施方案的其他方面中，PSA-蛋白缀合物能够使罹患癌症的个体中的疾病的严重程度与未接受相同治疗的患者相比减轻例如，约10％至约100％、约20％至约100％、约30％至约100％、约40％至约100％、约50％至约100％、约60％至约100％、约70％至约100％、约80％至约100％、约10％至约90％、约20％至约90％、约30％至约90％、约40％至约90％、约50％至约90％、约60％至约90％、约70％至约90％、约10％至约80％、约20％至约80％、约30％至约80％、约40％至约80％、约50％至约80％、或约60％至约80％、约10％至约70％、约20％至约70％、约30％至约70％、约40％至约70％或约50％至约70％。

在另外的实施方案中，PSA-蛋白缀合物及其衍生物具有以下的半衰期：2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、1周、2周、3周、4周、一个月、两个月、三个月、四个月或更久。

在实施方案中，PSA-蛋白缀合物的施用时间段为持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更久。在另外的实施方案中，施用被停止的时间段为持续1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月或更久。

在该实施方案的方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使个体中的疾病的严重程度维持或减轻例如，至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少100％。在该实施方案的其他方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使个体中的疾病的严重程度维持或减轻例如，至多10％、至多15％、至多20％、至多25％、至多30％、至多35％、至多40％、至多45％、至多50％、至多55％、至多60％、至多65％、至多70％、至多75％、至多80％、至多85％、至多90％、至多95％或至多100％。在该实施方案的又其他方面中，治疗有效量的本文公开的PSA-蛋白缀合物使个体中的疾病的严重程度维持或减轻例如，约10％至约100％、约10％至约90％、约10％至约80％、约10％至约70％、约10％至约60％、约10％至约50％、约10％至约40％、约20％至约100％、约20％至约90％、约20％至约80％、约20％至约70％、约20％至约60％、约20％至约50％、约20％至约40％、约30％至约100％、约30％至约90％、约30％至约80％、约30％至约70％、约30％至约60％或约30％至约50％。

药物组合物或PSA-蛋白缀合物被施用至个体。个体典型地是人类，但可以是动物，包括但不限于犬、猫、鸟、牛、马、绵羊、山羊、爬行动物和其他动物，无论是否驯养。典型地，作为治疗的候选者的任何个体是对该个体所罹患的疾病进行某种形式治疗的候选者，无论该疾病是良性的还是恶性的。关于癌症，最常见类型的癌症包括但不限于膀胱癌、乳腺癌、结肠癌和直肠癌、子宫内膜癌、肾脏癌、肾癌、白血病、肺癌、黑素瘤、非霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、前列腺癌、胃癌和甲状腺癌。除了公开程序的所有相关风险和益处的全面知情同意之外，术前评估典型地包括例行病史和身体检查。

神经节苷脂

在本发明的实施方案中，神经节苷脂与水溶性聚合物，例如PEG或PSA或mPSA缀合。已知神经节苷脂为细胞提供可以用于细胞识别和细胞间通讯的有区别的表面标志物。它们可用作治疗剂。

本发明的缀合物可以包含神经节苷脂和水溶性聚合物，其中神经节苷脂包含具有连接在糖链上的一个或更多个唾液酸的鞘糖脂(神经酰胺和寡糖)。神经节苷脂可以根据多少唾液酸单元存在于分子上来分类。神经节苷脂的实例是GM1、GM2和GM3(单唾液酸-神经节苷脂)、GD1a、GD1b、GD2和GD3(二唾液酸-神经节苷脂)、GT1b(三唾液酸-神经节苷脂)和GQ1(四唾液酸-神经节苷脂)。

为了用于本发明，优选的神经节苷脂包含与葡萄糖连接的神经酰胺，该神经酰胺与第一半乳糖连接，该第一半乳糖与N-乙酰半乳糖胺连接，该N-乙酰半乳糖胺与第二半乳糖连接。该第二半乳糖可以与一个唾液酸连接。第一半乳糖可以与一个、两个、三个或四个唾液酸连接。唾液酸可以作为单体(每个半乳糖分子上一个)或作为寡唾液酸(2-4个唾液酸)与第一半乳糖连接。

其中所施用的治疗性神经节苷脂需要在血液中长时间循环。为了使它们对靶组织的作用更有效，神经节苷脂可以例如通过本发明的方法被聚唾液酸化。

药物递送系统

在本发明的另外的实施方案中，药物递送系统与水溶性聚合物，例如PEG或PSA或mPSA缀合。通常，药物递送系统(DDS)是可以控制与实体相关的药物的命运和效果的任何分子或颗粒实体。DDS可以被分为两种一般类型。第一种类型包括大分子(MDDS)，例如抗体、拟糖蛋白以及合成聚合物，诸如聚(羟丙基甲基丙烯酰胺)、聚赖氨酸和聚合的氰基丙烯酸烷基酯。药物与多种类型的大分子载体的缔合，包括将药物靶向期望位点的单克隆抗体，例如通过Gregoriadis在Nature 265,407-411(1977)中来描述。第二种类型是颗粒DDS(PDDS)，该颗粒DDS(PDDS)包含例如纳米球或微球，其包含可生物降解的材料诸如白蛋白或半可生物降解的材料诸如右旋糖酐和氰基丙烯酸烷基酯聚合物，或由非离子表面活性剂或脂质体形成的囊泡，其细节参见例如Gregoriadis在NIPS,4,146-151(1989)中。

药物可以被共价地连接至DDS或被动地包埋到DDS中。例如，包含表面活性剂囊泡或脂质体的PDDS可以通过由表面活性剂或脂质分子的层的适当组合形成来包埋亲水性或疏水性药物活性化合物。药物活性化合物通常通过可以在或可以不在体内裂解的键与MDDS共价地连接，例如在活性化合物执行其功能之前或之后。

许多MDDS具有被靶细胞或组织通过后者的表面上的受体识别的内在的(例如抗体)或后天的(例如拟糖蛋白)能力。典型地，这样的DDS在注射后被靶特异性摄取。然而，在大部分DDS被其他不相关的(与治疗不相关的)组织摄取的情况下，特异性摄取受到限制。这样做的原因是抗体和其他DDS蛋白(无论它们对靶的特异性如何)必须像其他蛋白一样在它们的生物寿命结束时被分解代谢。

用于大分子型MDDS的合成聚合物是例如聚(羟丙基甲基丙烯酰胺)、聚赖氨酸和聚合的氰基丙烯酸烷基酯。这些可以通过适当的溶酶体酶在网状内皮系统(RES)或其他组织中分解代谢。将合意的是通过一些手段降低这样的可生物降解的大分子型DDS的分解代谢的速率，例如通过减少RES或其他组织对DDS的摄取，或者通过减少在被RES摄取后被溶酶体酶的降解。

通常，颗粒DDS(PDDS)通过RES从循环中去除。由于它们对RES的倾向，PDDS通常用于将药物递送到这些组织。然而，通常合意的是PDDS被引导至除了RES的组织之外的组织。为了实现这个目标，人们必须阻断或延迟RES对PDDS的拦截。

用于本发明的DDS最初可能不包含糖基。一种选择是将糖基添加或以其他方式掺入到DDS结构。这样的情况的实例是掺入甘露糖基化脂质或半乳糖基化脂质的脂质体。这些糖脂体将分别将活性物质靶向表达甘露糖或半乳糖受体的组织。

在DDS需要在血液中长时间循环使得例如靶组织的摄取更有效的情况下(正如肝实质细胞)，它们有利地通过本发明的方法被聚唾液酸化。

在实施方案中，本文公开的药物组合物可以任选地包括药学上可接受的载体，该药学上可接受的载体促进活性成分加工成药学上可接受的组合物。如本文使用的，术语“药理学上可接受的载体”与“药理学载体”同义并且意指当被施用时实质上不具有长期或永久有害作用的任何载体，并且涵盖术语诸如“药理学上可接受的媒介物、稳定剂、稀释剂、添加剂、辅剂或赋形剂”。这样的载体通常与活性化合物混合或被允许稀释或包封活性化合物并且可以是固体剂、半固体剂或液体剂。应当理解，活性成分可以在期望的载体或稀释剂中是可溶性的或可以作为在期望的载体或稀释剂中的悬浮液被递送。可以使用多种药学上可接受的载体中的任何一种，包括但不限于水性介质，诸如，但不限于水、盐水、甘氨酸、透明质酸等；固体载体，诸如，但不限于甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石粉、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等；溶剂；分散介质；包衣；抗细菌和抗真菌剂；等渗剂和吸收延迟剂；或任何其他非活性成分。药理学上可接受的载体的选择可以取决于施用的模式。除非任何药理学上可接受的载体与活性成分不相容，否则预期将其用于药学上可接受的组合物中。这样的药物载体的具体用途的非限制性实例可以在Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems(Howard C.Ansel等人,编著,Lippincott Williams&Wilkins出版社,第7版1999)；REMINGTON:THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY(AlfonsoR.Gennaro编著,Lippincott,Williams&Wilkins,第20版2000)；Goodman&Gilman的ThePharmacological Basis of Therapeutics(Joel G.Hardman等人,编著,McGraw-HillProfessional,第10版2001)；以及Handbook of Pharmaceutical Excipients(RaymondC.Rowe等人,APhA出版,第4版2003)中找到。这些方案是例行程序并且任何修改都在本领域技术人员以及本文的教导所获知的范围之内。

在实施方案中，本文公开的药物组合物可以任选地包括但不限于其他药学上可接受的组分(或药物组分)，包括但不限于缓冲剂、防腐剂、张力调节剂、盐、抗氧化剂、渗透压调节剂(osmolality adjusting agents)、生理物质、药理物质、疏松剂、乳化剂、润湿剂、调味剂、着色剂等。在实施方案中，用于调节pH的多种缓冲剂和手段可以用于制备本文公开的药物组合物，条件是所得到的制品是药学上可接受的。这样的缓冲剂包括但不限于乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、中性缓冲盐水、磷酸盐缓冲盐水和硼酸盐缓冲剂。应当理解，可以根据需要使用酸或碱来调节组合物的pH。在实施方案中，药学上可接受的抗氧化剂包括但不限于焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁基化羟基茴香醚和丁基化羟基甲苯。有用的防腐剂包括但不限于苯扎氯铵、氯丁醇、硫柳汞、乙酸苯汞、硝酸苯汞、稳定的氧氯组合物和螯合剂(诸如，例如，DTPA或DTPA-双酰胺、钙DTPA和CaNaDTPA-双酰胺)。在实施方案中，在药物组合物中有用的张力调节剂包括但不限于，盐(诸如，例如氯化钠、氯化钾)、甘露醇或甘油和其他药学上可接受的张力调节剂。在实施方案中，药物组合物可以作为盐被提供并且可以用许多种酸来形成，所述许多种酸包括但不限于盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等。与对应的游离碱形式相比，盐倾向于更可溶于水性溶剂或其他质子溶剂。应当理解，这些物质和药理学领域中已知的其他物质可以被包括在药物组合物中。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物(例如PSA-蛋白缀合物)，或包含这样的治疗性化合物的组合物，可以被配制为用于使用局部、肠内或肠胃外施用途径进行局部或全身递送。在另外的实施方案中，本文公开的治疗性化合物本身可以被配制在药物组合物中，或者可以与本文公开的一种或更多种其他治疗性化合物一起被配制在单一药物组合物中。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物，或包含这样的治疗性化合物的组合物制剂，可以被制成吸入制剂。在实施方案中，适合于肠内或肠胃外施用的吸入制剂包括但不限于气雾剂、干粉。在另外的实施方案中，可以根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法制备旨在用于这样的施用的本文公开的治疗性化合物或组合物。

在实施方案中，在这样的吸入剂型中，治疗性化合物可以被制备成在液体推进剂中作为气雾剂递送，该液体推进剂用于加压剂量吸入器(PDI)或其他计量剂量吸入器(MDI)中。在实施方案中，适用于PDI或MDI的推进剂包括但不限于CFC-12、HFA-134a、HFA-227、HCFC-22(二氟氯甲烷)、HFA-152(二氟乙烷和异丁烷)。在实施方案中，治疗性化合物还可以使用喷雾器或其他气雾剂递送系统来递送。在实施方案中，治疗性化合物可以被制备成作为干粉递送，该干粉用于在干粉吸入器(DPI)中使用。在实施方案中，用于在吸入器中使用的干粉通常将具有小于100pm、90pm、80pm、70pm、60pm、50pm、40pm、30pm、20pm和10pm的质量中值空气动力学直径。在实施方案中，具有在约5pm至约0.5pm的范围内的空气动力学直径的微粒通常将沉积在呼吸道细支气管中，而具有在约2pm至约0.05pm的范围内的空气动力学直径的较小颗粒很可能沉积在肺泡中。在实施方案中，DPI可以是被动递送机构或主动递送机构，所述被动递送机构依靠个体的吸气来将颗粒引入到肺内，所述主动递送机构需要一种用于将粉末递送到个体的机构。在实施方案中，用于吸入制剂的本文公开的治疗性化合物的治疗有效量可以为约0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。在实施方案中，在吸入制剂中，用于吸入制剂的本文公开的治疗性化合物的治疗有效量也可以为0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物，或包含这样的治疗性化合物的组合物，可以被制成固体制剂。在实施方案中，适合于肠内或肠胃外施用的固体制剂包括但不限于，胶囊、片剂、丸剂、锭剂、糖锭剂、口服溶解条、适合于吸入或用于重构为无菌可注射溶液或分散体的粉末和颗粒剂。在实施方案中，上文提及的制剂中的每一种可以包括但不限于，立即释放制剂、缓慢释放制剂(包括但不限于蜡基质)、珠状(包括但不限于双珠状，其中一个珠立即释放，随后是另一个珠的稍晚释放)、球状口服药物吸收系统(“SODAS”)、口服释放渗透系统(“OROS”)、咀嚼片剂、贴剂(包括但不限于递送优化的热力学(“DOT”))、喷洒剂(sprinkle)或前药。在实施方案中，可以根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法制备旨在用于这样的施用的本文公开的治疗性化合物或组合物。在实施方案中，在这样的固体剂型中，治疗性化合物可以与不限于以下各项混合：(a)至少一种惰性常规赋形剂(或载体)，诸如但不限于柠檬酸钠或磷酸二钙；或(b)填充剂或增量剂，如例如但不限于淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、异麦芽酮糖醇和硅酸；(c)粘合剂，诸如但不限于羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(d)湿润剂，诸如例如甘油；(e)崩解剂，诸如但不限于琼脂、碳酸钙、玉米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉、海藻酸、某些复合硅酸盐和碳酸钠；(f)溶液缓凝剂，诸如但不限于石蜡；(g)吸收加速剂，诸如但不限于季铵化合物；(h)润湿剂，诸如但不限于十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；(i)吸附剂，诸如但不限于高岭土和膨润土；(j)润滑剂，诸如但不限于滑石、硬脂酸、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠或它们的混合物；以及(k)缓冲剂。在实施方案中，片剂可以是未包衣的，或者它们可以通过已知技术包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并且从而在较长的时间段内提供持续作用。在另外的实施方案中，可以采用不限于时间延迟材料诸如单硬脂酸甘油脂或二硬脂酸甘油酯。在实施方案中，在固体制剂中，本文公开的治疗性化合物的治疗有效量典型地可以为约0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物，或包含这样的治疗性化合物的组合物，可以被制成半固体制剂。在实施方案中，适合于局部施用的半固体制剂包括但不限于，软膏、乳膏、油膏(salve)和凝胶。在实施方案中，可以根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法制备旨在用于这样的施用的本文公开的治疗性化合物或组合物。在实施方案中，在半固体制剂中，本文公开的治疗性化合物的治疗有效量典型地可以为约0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。在实施方案中，在半固体制剂中，本文公开的治疗性化合物的治疗有效量典型地也可以为约0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物，或包含这样的治疗性化合物的组合物，可以被制成液体制剂。在实施方案中，适合于肠内或肠胃外施用的液体制剂包括但不限于溶液、糖浆、酏剂、分散体、乳剂和悬浮液。在实施方案中，可以不限于根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法制备旨在用于这样的施用的本文公开的治疗性化合物或组合物。在实施方案中，在这样的液体剂型中，本文公开的治疗性化合物或组合物可以与不限于以下各项混合：(a)合适的水性和非水性载体；(b)稀释剂；(c)溶剂，诸如但不限于，水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇、甘油、植物油诸如但不限于菜籽油和橄榄油，以及可注射的有机酯诸如油酸乙酯；和/或促流动剂(fluidity agent)诸如但不限于表面活性剂或包衣剂如卵磷酯。在分散体和悬浮液的情况下，流动性也可以通过维持特定的粒度来控制。在实施方案中，在液体制剂中，本文公开的治疗性化合物的治疗有效量典型地可以为约0.0001％(w/v)至约90％(w/v)、0.0001％(w/v)至约80％(w/v)、0.0001％(w/v)至约70％(w/v)、0.0001％(w/v)至约60％(w/v)、0.0001％(w/v)至约50％(w/v)、0.0001％(w/v)至约40％(w/v)、0.0001％(w/v)至约30％(w/v)、0.0001％(w/v)至约20％(w/v)、0.0001％(w/v)至约10％(w/v)、约0.001％(w/v)至约90.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约80.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约70.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约60.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约50.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约40.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约30.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约20.0％(w/v)、0.001％(w/v)至约10.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约90.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约80.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约70.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约60.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约50.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约40.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约30.0％(w/v)、约0.01％(w/v)至约20.0％(w/v)或约0.01％(w/v)至约10.0％(w/v)之间。

在实施方案中，糖浆和酏剂可以与不限于甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖一起配制。在另外的实施方案中，这样的制剂还可以包含但不限于缓和剂、防腐剂、调味剂和着色剂。

在实施方案中，液体悬浮液可以不限于通过将本文公开的治疗性化合物悬浮在具有适合于制造水性悬浮液的赋形剂的掺合物中来配制。在实施方案中，这样的赋形剂是悬浮剂，例如但不限于羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、果胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、天然树胶、琼脂、黄蓍胶与阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或氧化烯与脂肪酸的缩合产物，例如但不限于聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如但不限于，十七亚乙基氧基鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或环氧乙烷与源自脂肪酸的偏酯的缩合产物，例如但不限于聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(polyoxyethylene sorbitan monooleate)。

在实施方案中，油性悬浮液可以通过将本文公开的治疗性化合物悬浮在具有以下各项的掺合物中来配制：(a)植物油，诸如但不限于杏仁油、落花生油(arachis oil)、鳄梨油、芥花油、蓖麻油、椰子油、玉米油、棉籽油、葡萄籽油、榛果油、工业大麻油(hemp oil)、亚麻籽油、橄榄油、棕榈油、花生油(peanut oil)、菜籽油、米糠油、红花籽油、芝麻油、大豆油(soybean oil)、豆油(soya oil)、葵花油、核桃油、麦胚油或它们的组合；(b)饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸或它们的组合，诸如但不限于棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸或它们的组合；(c)矿物油，诸如但不限于液体石蜡；(d)表面活性剂或去垢剂。在实施方案中，油性悬浮液可以包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或十六醇。在实施方案中，可以添加甜味剂诸如上文阐述的那些和调味剂，以提供可口的口服制品。在实施方案中，这些组合物可以通过添加抗氧化剂诸如抗坏血酸来保存。

在实施方案中，适合于通过添加水制备水性悬浮液的可分散粉末和颗粒剂提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或更多种防腐剂混合的合并的治疗性化合物。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物可以呈水包油乳剂的形式。在实施方案中，油相可以是如本文所公开的植物油或如本文所公开的矿物油或它们的混合物。在另外的实施方案中，合适的乳化剂可以是天然存在的树胶(诸如但不限于阿拉伯胶或黄耆胶)、天然存在的磷脂(例如大豆卵磷酯)和源自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如但不限于山梨糖醇酐单油酸酯)、以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯)。

在实施方案中，本文公开的治疗性化合物，或包含这样的治疗性化合物的组合物，也可以掺入到药物递送平台中，以便实现随时间的受控释放谱。在实施方案中，这样的药物递送平台包括分散在聚合物基质(典型地但不限于可生物降解的、可生物腐蚀的和/或可生物再吸收的聚合物基质)中的本文公开的治疗性化合物。在实施方案中，如本文使用的，术语“聚合物”指的是合成的均聚物或共聚物、天然存在的均聚物或共聚物，以及但不限于具有直链、支链或星型结构的其合成修饰物或衍生物。在实施方案中，共聚物可以被设置成任何形式，诸如但不限于无规、嵌段、链段、锥形嵌段、接枝或三嵌段。在实施方案中，聚合物通常是缩合聚合物。在实施方案中，聚合物可以通过引入交联剂或改变侧残基的疏水性来进一步修饰以增强其机械性质或降解性质。在实施方案中，如果是交联的，聚合物通常是小于75％交联的、65％交联的、55％交联的、45％交联的、35％交联的、25％交联的、15％交联的、5％交联的，通常小于1％交联的。

在实施方案中，合适的聚合物包括但不限于，藻酸盐、脂肪族聚酯、聚亚烷基草酸酯、聚酰胺、聚酰胺酯、聚酸酐、聚碳酸酯、聚酯、聚乙二醇、多羟基脂族羧酸、聚原酸酯、聚氧杂酯、多肽、聚磷腈、多糖和聚氨酯。在实施方案中，聚合物通常组成药物递送平台的至少约10％(w/w)、至少约20％(w/w)、至少约30％(w/w)、至少约40％(w/w)、至少约50％(w/w)、至少约60％(w/w)、至少约70％(w/w)、至少约80％(w/w)或至少约90％(w/w)。在实施方案中，用于制作药物递送平台的可生物降解的、可生物腐蚀的和/或可生物再吸收的聚合物和方法的实例在以下文献中描述：例如但不限于，Drost，Controlled Release Formulation，美国专利4,756,911；Smith等人，Sustained Release Drug Delivery Devices，美国专利5,378,475；Wong和Kochinke，Formulation for Controlled Release of Drugs byCombining Hyrophilic and Hydrophobic Agents，美国专利7,048,946；Hughes等人，Compositions and Methods for Localized Therapy of the Eye，美国专利公布2005/0181017；Hughes，Hypotensive Lipid-Containing Biodegradable IntraocularImplants and Related Methods，美国专利公布2005/024444；Altman等人，Silk FibroinHydrogels and Uses Thereof，美国专利公布2011/0008437；其每一个通过引用以其整体并入。

在实施方案中，组成基质的聚合物是多肽，诸如但不限于丝纤蛋白、角蛋白或胶原。在另外的实施方案中，组成基质的聚合物是多糖(诸如但不限于纤维素、琼脂糖、弹性蛋白、壳聚糖、几丁质)，或糖胺聚糖(如硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素或透明质酸)。在又另一种实施方案中，组成基质的聚合物是聚酯，诸如但不限于D-乳酸、L-乳酸、外消旋乳酸、乙醇酸、己内酯以及它们的组合。

本领域普通技术人员应理解，用于形成合适的所公开的药物递送平台的合适聚合物的选择取决于若干个因素。在选择适合的聚合物方面更相关的因素包括但不限于，聚合物与药物的相容性、期望的药物释放动力学、在植入部位处的平台的期望的生物降解动力学、在植入部位处的平台的期望的可生物腐蚀动力学、在植入部位处的平台的期望的可生物再吸收动力学、在体内平台的机械性能、处理温度、平台的生物相容性，以及患者耐受性。在某种程度上但不限于决定聚合物的体外和体内行为的其他相关因素包括化学组成、成分的空间分布、聚合物的分子量和结晶度。

施用

在一种实施方案中，本发明的缀合化合物可以通过注射，诸如静脉内注射、肌肉内注射或腹膜内注射来施用。该组合物可以用作治疗剂、诊断剂和/或类似的剂。

为了将包含本发明的缀合化合物的组合物施用至人类或测试动物，在一个方面中，该组合物包含一种或更多种药学上可接受的载体。术语“药学上的”或“药理学上可接受的”指的是以下分子实体和组合物：稳定；抑制蛋白降解诸如聚集和裂解产物；并且此外，当使用本领域熟知的途径施用时，不产生过敏或其他不良反应，如下文所描述的。“药学上可接受的载体”包括任何和全部临床上有用的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等，包括上文公开的那些剂。

如本文使用的，“有效量”包括适合于治疗患有临床上定义的紊乱的哺乳动物的剂量。

该组合物可以口服、局部、透皮、肠胃外、通过吸入喷雾、阴道、直肠或通过颅内注射施用。如本文使用的术语肠胃外包括皮下注射、静脉内、肌肉内、脑池内注射或输注技术。也预期通过静脉内、皮内、肌肉内、乳房内、腹膜内、鞘内、眼球后、肺内注射和/或在特定部位处的手术植入施用。通常，组合物基本上不含热原以及可能对接受者有害的其他杂质。

组合物的单次施用或多次施用可以用由治疗医师选择的剂量水平和模式来进行。对于疾病的预防或治疗，适当的剂量将取决于如上文所描述的待治疗的疾病的类型、疾病的严重程度和进程、药物被施用是用于预防目的或治疗目的、先前的治疗、患者的临床病史和对药物的响应，以及主治医师的判断。

本发明还涉及包含有效量的如本文所定义的缀合化合物或蛋白的药物组合物。药物组合物还可以包含药学上可接受的载体、稀释剂、盐、缓冲剂或赋形剂。药物组合物可以用于治疗临床上定义的紊乱。本发明的药物组合物可以是溶液或冻干产品。药物组合物的溶液可以经受任何合适的冻干过程。

作为另外的方面，本发明包括包含本发明的组合物的药盒，该组合物以有助于其用于施用至受试者的方式包装。在一种实施方案中，这样的药盒包括本文描述的化合物或组合物(例如，包含缀合蛋白的组合物)，该化合物或组合物包装在容器诸如密封瓶或器皿中，具有贴在容器上的标签或包含在描述化合物或组合物在实施该方法中的用途的包装中的标签。在一种实施方案中，药盒包含第一容器和第二容器，所述第一容器具有包含缀合蛋白的组合物，所述第二容器具有用于第一容器中的组合物的生理学上可接受的重构溶液。在一个方面中，化合物或组合物被包装成单位剂型。药盒还可以包括适合于根据特定的施用途径施用组合物的装置。优选地，药盒包含描述治疗性蛋白或肽组合物的用途的标签。

在一种实施方案中，衍生物保留天然治疗性化合物的全部功能活性，并且提供与天然治疗性化合物相比延长的体内半衰期。在另一种实施方案中，衍生物相对于天然化合物保留至少20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、200或500百分比(％)的生物活性。

在实施方案中，药物递送平台包括持续释放药物递送平台和延长释放药物递送平台两者。在实施方案中，术语“持续释放”指的是本文公开的一种或更多种治疗性化合物在约七天或更长的时间段内的释放。在实施方案中，术语“延长释放”指的是本文公开的一种或更多种治疗性化合物在少于约七天的时间段内的释放。

在实施方案中，持续释放药物递送平台在但不限于施用后约3天、施用后约7天、施用后约10天、施用后约15天、施用后约20天、施用后约25天、施用后约30天、施用后约45天、施用后约60天、施用后约75天或施用后约90天的时间段内释放治疗性化合物。在另一种实施方案中，持续释放药物递送平台以大体上零级释放动力学在但不限于施用后至少3天、施用后至少7天、施用后至少10天、施用后至少15天、施用后至少20天、施用后至少25天、施用后至少30天、施用后至少45天、施用后至少60天、施用后至少75天或施用后至少90天的时间段内释放本文公开的治疗性化合物。

在实施方案中，PSA-治疗性化合物呈长效组合物，包括但不限于延长释放组合物的形式。实施方案包括但不限于延长释放胶囊、片剂或其他固体或液体制剂，其随时间向其所施用的患者提供一种或更多种治疗性化合物。长效组合物可以在患者体内提供持续4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、16小时、20小时、24小时、28小时、30小时、32小时、34小时、36小时、40小时、48小时、3天、4天、5天、6天、7天、2周、3周或4周。长效制剂可以提供聚唾液酸化治疗性化合物的活性持续少至4小时或长至4周、持续少至4小时或长至3周、持续少至4小时或长至2周、持续少至4小时或长至1周、持续少至4小时或长至6天、持续少至4小时或长至5天、持续少至4小时或长至4天、持续少至4小时或长至3天、持续少至4小时或长至2天、持续少至4小时或长至1天、持续少至4小时或长至20小时、持续少至4小时或长至16小时、持续少至4小时或长至14小时、持续少至4小时或长至12小时、持续少至4小时或长至10小时、持续少至4小时或长至8小时、持续少至4小时或长至6小时。

在实施方案中，持续释放药物递送平台在但不限于施用后约3天、施用后约7天、施用后约10天、施用后约15天、施用后约20天、施用后约25天、施用后约30天、施用后约45天、施用后约60天、施用后约75天或施用后约90天的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。在该实施方案的其他方面中，持续释放药物递送平台以大体上一级释放动力学在但不限于施用后至少3天、施用后至少7天、施用后至少10天、施用后至少15天、施用后至少20天、施用后至少25天、施用后至少30天、施用后至少45天、施用后至少60天、施用后至少75天或施用后至少90天的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。

在实施方案中，药物递送平台在但不限于施用后约1天、施用后约2天、施用后约3天、施用后约4天、施用后约5天、施用后约6天或施用后约7天或更长的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。在另外的实施方案中，药物递送平台以大体上零级释放动力学在但不限于施用后至多1天、施用后至多2天、施用后至多3天、施用后至多4天、施用后至多5天、施用后至多6天或施用后至多7天或更长的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。

在实施方案中，药物递送平台以释放动力学在但不限于施用后约1天、施用后约2天、施用后约3天、施用后约4天、施用后约5天、施用后约6天或施用后约7天或更长的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。在另外的实施方案中，药物递送平台以大体上一级释放动力学在例如施用后至多1天、施用后至多2天、施用后至多3天、施用后至多4天、施用后至多5天、施用后至多6天或施用后至多7天或更长的时间段内释放本文公开的一种或更多种治疗性化合物。

唾液酸和PSA

如本文使用的，“唾液酸部分”包括唾液酸单体或聚合物(“多糖”)，其可溶于水性溶液或悬浮液中并且在以药物有效量施用PSA-蛋白缀合物后对哺乳动物几乎没有或没有负面影响，诸如副作用。在一个方面中，PSA和mPSA被表征为具有1个、2个、3个、4个、5个、10个、20个、30个、40个、50个、60个、70个、80个、90个、100个、125个、150个、200个、300个、400个或500个唾液酸单元。在某些方面中，不同的唾液酸单元被组合成链。

在本发明的一种实施方案中，PSA或mPSA化合物的唾液酸部分是高度亲水的，并且在另一种实施方案中，整个化合物是高度亲水的。亲水性主要由唾液酸单元的羧基侧基以及羟基基团赋予。糖单元可以包含其他官能团，诸如胺基团、羟基基团或硫酸酯基团或它们的组合。这些基团可以存在于天然存在的糖类化合物上，或者引入到衍生的多糖化合物中。用于本发明的方法和缀合物中的PSA和mPSA可以如上文在发明背景中描述地进一步表征。

天然存在的聚合物PSA作为示出宽的尺寸分布(例如Sigma C-5762)和高的多分散性(PD)的多分散制品可获得。因为多糖通常是在携带共纯化内毒素的固有风险的细菌中产生的，所以长唾液酸聚合物链的纯化可能提高增加的内毒素含量的可能性。具有1-4个唾液酸单元的短PSA分子也可以被合成地制备(Kang SH等人,Chem Commun.2000；227-8；RessDK和Linhardt RJ,Current Organic Synthesis.2004；1:31-46)，因此最小化高内毒素水平的风险。然而，现在可以制造具有窄尺寸分布和低多分散性的PSA制品，该PSA制品也是不含内毒素的。在一个方面中，特别用于本发明的多糖化合物是由细菌产生的那些。这些天然存在的多糖中的一些被称为糖脂。在一种实施方案中，多糖化合物大体上不含末端半乳糖单元。

在多种实施方案中，化合物以化学计量的量(例如，1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:7、1:8、1:9或1:10等)与PSA或mPSA化合物连接或缔合。在多种实施方案中，1-6个、7-12个或13-20个PSA和/或mPSA单元与化合物连接。在仍其他实施方案中，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个或更多个PSA和/或mPSA单元与化合物连接。

任选地，化合物被修饰以引入糖基化位点(即，除了天然糖基化位点之外的位点)。这样的修饰可以使用本领域已知的标准分子生物学技术来实现。此外，化合物可以在经由一个或更多个碳水化合物部分缀合之前在体内或体外被糖基化。

氨基氧键

在本发明的一种实施方案中，羟胺或羟胺衍生物与醛(例如，在被高碘酸钠氧化之后的碳水化合物部分上)形成肟基团的反应被用于制备化合物的缀合物。例如，糖蛋白首先用氧化剂诸如高碘酸钠(NaIO₄)氧化(Rothfus JA et Smith EL.,J Biol Chem 1963,238,1402-10；以及Van Lenten L和Ashwell G.,J Biol Chem 1971,246,1889-94)。例如糖蛋白的高碘酸盐氧化是基于1928年描述的经典马拉普拉德反应，即用高碘酸盐氧化邻二醇以形成活性醛基团(Malaprade L.,Analytical application,Bull Soc Chim France,1928,43,683-96)。这样的氧化剂的另外的实例是四乙酸铅(Pb(OAc)₄)、乙酸锰(MnO(Ac)₃)、乙酸钴(Co(OAc)₂)、乙酸铊(TlOAc)、硫酸铈(Ce(SO₄)₂)(US 4,367,309)或过钌酸钾(KRuO₄)(Marko等人,J Am Chem Soc 1997,119,12661-2)。“氧化剂”意指能够氧化碳水化合物中的邻二醇，从而在生理反应条件下产生活性醛基团的温和氧化化合物。

第二步是将含有氨基氧基基团的聚合物与氧化的碳水化合物部分偶联以形成肟键。在本发明的一种实施方案中，该步骤可以在存在催化量的亲核催化剂苯胺或苯胺衍生物的情况下进行(Dirksen A.,Dawson PE,Bioconjugate Chem.2008；Zeng Y等人,NatureMethods 2009；6:207-9)。苯胺催化显著地加速肟键，允许使用非常低浓度的试剂。在本发明的另一种实施方案中，肟键通过用NaCNBH₃还原以形成烷氧基胺键来稳定。

在本发明的一种实施方案中，将PSA或mPSA与蛋白缀合的反应步骤被分开地和顺序地进行(即，起始材料(例如，蛋白、聚合物等)、试剂(例如，氧化剂、苯胺等)和反应产物(例如，蛋白上的氧化的碳水化合物、活化的氨基氧基聚合物等)在单独的反应步骤之间是分开的)。

关于氨基氧基技术的另外的信息可以在以下参考文献中找到，其每一个以其整体并入：EP 1681303A1(HASylated erythropoietin)；WO 2005/014024(conjugates of apolymer and a protein linked by an oxime linking group)；WO96/40662(aminooxy-containing linker compounds and their application in conjugates)；WO 2008/025856(Modified proteins)；Peri F等人,Tetrahedron 1998,54,12269-78；Kubler-Kielb J和Pozsgay V.,J Org Chem 2005,70,6887-90；Lees A等人,Vaccine 2006,24(6),716-29；以及Heredia KL等人,Macromoecules 2007,40(14),4772-9。

关于PSA与抗体附接的另外的信息可以在以下参考文献中找到，其每一个以其整体并入：Konterman R.和Dubel S.,Antibody Engineering,2010,V.1,第2版SpringerProtocals,ISBN-13:978-3642011436；Zhang B,等人:Unveiling a glycation hot spotin a recombinant humanized monoclonal antibody,Anal Chem.,2008,80,2379-2390；Miller AK,等人Characterization of site-specific glycation during processdevelopment of a human therapeutic monoclonal antibody,J.Pharm.Sci.,2011,100,2543-2550。

本发明的优点包括缀合物的高回收率、与未缀合的蛋白相比缀合的糖蛋白的高活性保留和高缀合效率。

生物活性测定

多种生物测定可用于确定聚唾液酸化对靶蛋白的活性的影响。在修饰之前和聚唾液酸/PSA的附接之后的靶蛋白之间进行比较。例如，本文中聚唾液酸化的酶特别适合于通过测试酶活性来测试修饰的靶蛋白的活性。对于在本文中聚唾液酸化的抗体或其结合片段，使用标准抗体-配体结合测定并且比较修饰的抗体和未修饰的抗体。对于其他靶蛋白，可以使用对靶的生物测定来测量本文中聚唾液酸化靶蛋白的活性。对于特定的靶蛋白，需要适当且灵敏的测定。该测定还应提供聚唾液酸化靶蛋白的特定读数，而不受相关化合物的干扰。适用于多种靶的生物测定方法在本文的实施例中描述。与根据本发明被聚唾液酸化的特定靶蛋白相关的特定生物测定也在上文提及的并且通过引用并入本文作为与特定靶蛋白相关的专利和申请中描述。

本文中的治疗性PSA蛋白可以使用多种体外测定来鉴定。优选地，该测定是允许同时筛选多于一个候选物的高通量测定。在一些实施方案中，生物分子相互作用可以用

系统实时监测，该

系统使用SPR来检测由于高达300nm远的表面的折射率的变化而导致的玻璃支持物上的薄金膜的表面处的光共振角的变化。

分析产生缔合速率常数、解离速率常数、平衡解离常数和亲和力常数。结合亲和力通过使用

表面等离子共振系统(Biacore,Inc.)评估缔合速率常数和解离速率常数来获得。生物传感器芯片被激活用于靶的共价偶联。然后将靶稀释并且注入到芯片上，以在固定化的材料的响应单元中获得信号。由于共振单位(RU)中的信号与固定化的材料的质量成正比，这代表了基质上一系列的固定化的靶密度。

基于细胞的测定可以用于表征、测量和比较本文提供的多种聚唾液酸化蛋白的生物活性。在一些实施方案中，基于细胞的测定是酶联免疫吸附测定(ELISA)。ELISA试剂盒从许多来源，诸如Cell Sciences.RTM.(Canton,Mass.)可商购。使用ELISA试剂盒的方法是本领域已知的，并且试剂盒通常包括说明手册，例如关于如何制备样品、标准品、校准曲线和进行实验的说明手册。在另一种实施方案中，基于细胞的测定是均相时间分辨荧光测定(HTRF.RTM.)。HTRF.RTM.试剂盒从Cisbio International(Bedford,Mass.)可商购。使用HTRF.RTM.试剂盒的方法是本领域已知的，并且试剂盒通常包括说明手册，例如关于如何制备样品、标准品、校准曲线和进行实验的说明手册。均相时间分辨荧光基于细胞的测定在美国专利第5,527,684号(其公开内容通过引用并入本文)和从Cisbio HTRF.RTM.ProductCenter可获得的文件参考号62AM4PEB rev02(2007年8月)(参见www.htrf.com/products/gpcr/camp/，其公开内容通过引用并入本文)中描述。

现在参考以下实施例说明本发明。

实施例

实施例1

氨基氧基-PSA聚合物的制备

将1.3g的氧化的多聚唾液酸(23kDa)溶解在18ml的50mM乙酸钠pH 5.5±0.02中。将20倍摩尔过量的1,11-二氨基-3,6,9-三氧杂十一烷(也被称为3,6,9-三氧杂-十一烷-1,11-二羟基胺)溶解在最小量的50mM乙酸钠(pH 5.5±0.02)中，并且添加到PSA溶液中。最终的多聚唾液酸浓度为62.5mg/ml。将该反应混合物在温和的混合器(每分钟22次振荡)上在22±1.0℃孵育持续2±0.1小时。在此之后，将0.65ml的160mg/ml NaCNBH₃溶液添加到上文反应混合物中，以便使最终浓度为5.00mg/ml。将其在振荡器(每分钟22次振荡)上在具有足够的顶部空间用于混合的无内毒素的气密容器中在4.0±1.0℃孵育持续3.0±0.20小时。为了纯化，将样品用2mM三乙醇胺pH 8.0±0.02稀释，以使最终的多聚唾液酸浓度为20mg/ml。将反应混合物脱盐以去除过量的1,11-二氨基-3,6,9-三氧杂十一烷、NaCNBH₃和反应的副产物。这随后在Sephadex G25柱上使用20mM三乙醇胺缓冲液(pH 8.0±0.02)脱盐。将脱盐的样品的pH调节至7.8-8.0，并且用20mM TEA pH 8.0超滤/渗滤一次且用2mM三乙醇胺(TEA)pH 8.0超滤/渗滤两次。将样品冷冻干燥并且储存在-80℃。

可选择地，纯化在脱盐和超滤/渗滤步骤(UF/DF)期间在存在高盐的情况下进行。高盐阴离子交换色谱也用于制备高度纯的氨基氧基-PSA。以此类推，合成不同分子量的氨基氧基-PSA。

实施例2

二氨基氧基-PSA与红细胞生成素(EPO)的偶联

将0.2mg的EPO用10mM的NaIO₄在4℃氧化持续30分钟。氧化通过添加NaHSO₃至5mM的最终浓度来停止。缀合反应使用氧化的EPO与23kDa的二氨基氧基聚合物进行。反应混合物中聚合物的最终浓度为1.25mM。反应混合物中EPO的最终浓度为0.125mg/ml。反应混合物的最终pH为约5.75。将氰基硼氢化钠添加到反应混合物中至50mM或3.17mg/ml的浓度。将反应在4℃进行持续24小时。未纯化的缀合物使用SDS PAGE进行表征。在SDS PAGE中对缀合物观察到条带的移位。

实施例3

用苯胺将二氨基氧基-PSA与EPO偶联作为亲核催化剂

将0.2mg的EPO用10mM NaIO₄在4℃氧化持续30分钟。氧化通过添加NaHSO₃至5mM的最终浓度来停止。缀合反应使用氧化的EPO与二氨基氧基PSA聚合物(22kDa)进行。反应混合物中聚合物的最终浓度为1.25mM。反应混合物的最终pH为约5.75。将氰基硼氢化钠添加到反应混合物中至50mM或3.17mg/ml的浓度。反应中的最终蛋白浓度为0.125mg/ml。将84.21μl的200mM苯胺溶液添加到1.6ml的反应混合物中。将反应在4℃进行过夜。缀合物使用SDSPAGE进行表征。在缀合物中观察到条带的移位。没有观察到苯胺对缀合物的活性的不利影响。

实施例4

酰肼-PSA与红细胞生成素的偶联

对于红细胞生成素(EPO)的氧化，使用浓度为10mM的NaIO₄。将EPO(1mg)在pH 5.75在4℃氧化持续30分钟，然后氧化通过添加NaHSO₃至5mM的最终浓度来停止。缀合反应使用氧化的EPO与酰肼-PSA聚合物进行。用于缀合的酰肼-PSA的分子量为24.34kDa。反应混合物中酰肼-PSA的最终浓度为1.25mM。反应混合物中EPO的最终浓度为0.125mg/ml。反应混合物的最终pH为约5.75。将氰基硼氢化钠添加到反应混合物中至50mM或3.17mg/ml的浓度。将反应在4℃进行持续24小时。缀合物使用SDS PAGE和蛋白质印迹进行表征。在SDS PAGE中对缀合物观察到条带的移位，并且阳性结果从蛋白质印迹获得。

实施例5

氨基氧基-PSA与NGF的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg神经生长因子(NGF)添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂,350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GE Healthcare,Fairfield,Ct)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mMNaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mM CaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例6

氨基氧基-PSA与干扰素-α(IFN-α)的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg干扰素-α添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GE Healthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mMNaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mM CaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例7

氨基氧基-PSA与TPA(组织纤溶酶原激活物)的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg TPA添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GE Healthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mMNaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mM CaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例8

氨基氧基-PSA与血小板生成素(TPO)的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg TPA添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GE Healthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mMNaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mM CaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例9

氨基氧基-PSA与凝血酶的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg凝血酶添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GE Healthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mMNaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mM CaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例10

氨基氧基-PSA与FGF的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg成纤维细胞生长因子(FGF)添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GEHealthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mMCaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mMCaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例11

氨基氧基-PSA与TGF-β的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg转化生长因子β(TGF-β)添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵,50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GEHealthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mMCaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mMCaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例12

氨基氧基-PSA与PDGF的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg血小板衍生生长因子(PDGF)添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GEHealthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mMCaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mMCaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例13

氨基氧基-PSA与VEGF的偶联

向溶解在10ml Hepes缓冲液pH 6(50mM Hepes，5mM CaCl₂，150mM NaCl，0.01％吐温)中的10mg血管内皮生长因子(VEGF)添加50μl 10mM高碘酸钠。将混合物在黑暗中在4℃振荡持续30min，并且通过添加100μl的1M甘油水溶液在4℃猝灭持续30min。然后添加20.0mg氨基氧基-PSA(18.8kD)，并且将混合物在4℃振荡过夜。离子强度通过添加含有8M乙酸铵的缓冲液(8M乙酸铵，50mM Hepes，5mM CaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)来增加，以得到2.5M乙酸铵的最终浓度。接下来，将反应混合物加载到HiTrap Butyl FF(GEHealthcare,Fairfield,CT)柱上，该柱用平衡缓冲液(2.5M乙酸铵，50mM Hepes，5mMCaCl₂，350mM NaCl，0.01％吐温80，pH 6.9)平衡。将产物用洗脱缓冲液(50mM Hepes，5mMCaCl₂，0.01％吐温80，pH 7.4)洗脱，并且洗脱液通过离心过滤使用具有30,000MWCO的Vivaspin(Sartorius,Goettingen,Germany)装置浓缩。

实施例14

二氨基氧基(3氧杂-戊烷-1,5-二羟基胺连接基)-PSA与血栓调节蛋白的偶联

对于血栓调节蛋白的氧化，使用浓度为2mM的NaIO₄。将3mg的血栓调节蛋白在5.75的酸性pH在4℃氧化持续30分钟，然后氧化通过添加NaHSO₃至2mM的最终浓度来停止。缀合反应使用氧化的血栓调节蛋白与二氨基氧基PSA聚合物(23kDa)进行。确定反应混合物中聚合物的最终浓度。反应混合物的最终pH为约5.75。将氰基硼氢化钠添加到反应混合物中至50mM或3.17mg/ml的浓度。反应在4℃进行持续2小时。缀合物使用SDS PAGE和蛋白质印迹进行表征。在SDS PAGE中缀合物的条带的移位表示阳性结果。

实施例15

通过表面等离子体共振(SPR)确定血小板生成素(TPO)结合亲和力

如下使用Biacore仪器(GE Healthcare,Uppsala,Sweden)分析TPO结合亲和力：

TPO以三种密度固定在CMS生物传感器芯片的流通池上。将研究的TPO样品用运行缓冲液(10mM Hepes，150mM NaCl，0.05％表面活性剂P20，pH 7.4)稀释至一系列七种稀释度(根据给定的蛋白值0.1nM至50nM X)，然后以50μL/min的恒定流速使用“单循环”模式应用于芯片。缔合的时间为4min并且解离的时间为10min。在每个循环之后，TPO从芯片中去除(“再生”)，并且用新的TPO样品重复实验。缔合常数和解离常数是使用‘生物评价’程序的朗缪尔模型确定的。确定以下动力学参数：缔合速率常数ka，解离速率常数kd和平衡解离常数KD。结合也通过评价Rmax来确定，Rmax是计算的在饱和时的最大结合。动力学结果是从三种不同的TPO固定化水平的平均值计算的。

Biacore技术用于确定TPO和肿瘤坏死因子受体之间复合物形成的动力学。为了此目的，将TPO固定到传感器芯片表面上的三个不同水平上，并且将研究的TPO和血小板生成素受体再缓冲到缓冲液中，并且以单循环模式以五种不同浓度注入样品。假设固定化的TPO和血小板生成素受体之间存在均匀的1:1相互作用，使用Biacore T200设备的“生物评价”程序的朗缪尔模型来确定缔合常数和解离常数。

确定描述TPO-血小板生成素受体相互作用的动力学参数，诸如缔合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)和平衡解离常数(＝kd/ka)等，并且经受进一步评价和数据比较。将来自PSA修饰的蛋白的数据与未修饰的蛋白进行比较。

实施例16

通过表面等离子体共振(SPR)确定CD20结合亲和力

如下使用Biacore仪器(GE Healthcare,Uppsala,Sweden)分析CD20结合亲和力：

CD20以三种密度固定在CMS生物传感器芯片的流通池上。将研究的TPO样品用运行缓冲液(10mM Hepes，150mM NaCl，0.05％表面活性剂P20，pH 7.4)稀释至一系列七种稀释度(根据给定的蛋白值0.1nM至50nM X)，然后以50μL/min的恒定流速使用“单循环”模式应用于芯片。缔合的时间为4min并且解离的时间为10min。在每个循环之后，TPO从芯片中去除(“再生”)，并且用新的TPO样品重复实验。缔合常数和解离常数是使用‘生物评价’程序的朗缪尔模型确定的。确定以下动力学参数：缔合速率常数ka，解离速率常数kd和平衡解离常数KD。结合也通过评价Rmax来确定，Rmax是计算的在饱和时的最大结合。动力学结果是从三种不同的TPO固定化水平的平均值计算的。

Biacore技术用于确定CD20和CD20受体之间复合物形成的动力学。为了此目的，将CD20固定到传感器芯片表面上的三个不同水平上，并且将研究的CD20和CD20受体再缓冲到缓冲液中，并且以单循环模式以五种不同浓度注入样品。假设固定化的CD20和CD20受体之间存在均匀的1:1相互作用，使用Biacore T200设备的“生物评价”程序的朗缪尔模型来确定缔合常数和解离常数。

确定描述CD20-CD20受体相互作用的动力学参数，诸如缔合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)和平衡解离常数(＝kd/ka)等，并且经受进一步评价和数据比较。将来自PSA修饰的蛋白的数据与未修饰的蛋白进行比较。

实施例17

通过表面等离子体共振(SPR)确定凝血酶结合亲和力

如下使用Biacore仪器(GE Healthcare,Uppsala,Sweden)分析凝血酶结合亲和力：

凝血酶以三种密度固定在CMS生物传感器芯片的流通池上。将研究的凝血酶样品用运行缓冲液(10mM Hepes，150mM NaCl，0.05％表面活性剂P20，pH 7.4)稀释至一系列七种稀释度(根据给定的蛋白值0.1nM至50nM X)，然后以50μL/min的恒定流速使用“单循环”模式应用于芯片。缔合的时间为4min并且解离的时间为10min。在每个循环之后，凝血酶从芯片中去除(“再生”)，并且用新的凝血酶样品重复实验。缔合常数和解离常数是使用‘生物评价’程序的朗缪尔模型确定的。确定以下动力学参数：缔合速率常数ka，解离速率常数kd和平衡解离常数KD。结合也通过评价Rmax来确定，Rmax是计算的在饱和时的最大结合。动力学结果是从三种不同的TNF固定化水平的平均值计算的。

Biacore技术用于确定凝血酶和血栓调节蛋白之间复合物形成的动力学。为了此目的，将凝血酶固定到传感器芯片表面上的三个不同水平上，并且将研究的凝血酶和血栓调节蛋白(或类似物，例如Solulin)缓冲到缓冲液中，并且以单循环模式以五种不同浓度注射样品。假设固定化的凝血酶和血栓调节蛋白之间存在均匀的1:1相互作用，使用BiacoreT200设备的“生物评价”程序的朗缪尔模型来确定缔合常数和解离常数。

确定描述TNF-肿瘤坏死因子受体相互作用的动力学参数，诸如缔合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)和平衡解离常数(＝kd/ka)等，并且经受进一步评价和数据比较。将来自PSA修饰的蛋白的数据与未修饰的蛋白进行比较。

实施例18

通过表面等离子体共振(SPR)确定肿瘤坏死因子(TNF)结合亲和力

如下使用Biacore仪器(GE Healthcare,Uppsala,Sweden)分析TNF结合亲和力：

TNF以三种密度固定在CMS生物传感器芯片的流通池上。将研究的TNF样品用运行缓冲液(10mM Hepes，150mM NaCl，0.05％表面活性剂P20，pH 7.4)稀释至一系列七种稀释度(根据给定的蛋白值0.1nM至50nM X)，然后以50μL/min的恒定流速使用“单循环”模式应用于芯片。缔合的时间为4min并且解离的时间为10min。在每个循环之后，TNF从芯片中去除(“再生”)，并且用新的TNF样品重复实验。缔合常数和解离常数是使用‘生物评价’程序的朗缪尔模型确定的。确定了以下动力学参数：缔合速率常数ka，解离速率常数kd和平衡解离常数KD。结合也通过评价Rmax来确定，Rmax是计算的在饱和时的最大结合。动力学结果是从三种不同的TNF固定化水平的平均值计算的。

Biacore技术用于确定TNF和肿瘤坏死因子受体之间复合物形成的动力学。为了此目的，将TNF固定到传感器芯片表面上的三个不同水平上，并且将研究的TNF和肿瘤坏死因子受体再缓冲到缓冲液中，并且以单循环模式以五种不同浓度注入样品。假设固定化的TNF和肿瘤坏死因子受体之间存在均匀的1:1相互作用，使用Biacore T200设备的“生物评价”程序的朗缪尔模型来确定缔合常数和解离常数。

确定描述TNF-肿瘤坏死因子受体相互作用的动力学参数，诸如缔合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)和平衡解离常数(＝kd/ka)等，并且经受进一步评价和数据比较。将来自PSA修饰的蛋白的数据与未修饰的蛋白进行比较。

实施例19

通过活化蛋白C测定确定结合血栓调节蛋白后的凝血酶活性

使用以下材料，其具有以下来源：C57BL6J 6–8周龄雄性小鼠例如从JacksonLaboratories获得，人类APC可以从Haemotologic Technologies(Essex Junction,VT,USA)获得，Spectrazyme PCa来自American Diagnostica，牛凝血酶来自GE AmershamBiosciences，重组水蛭素来自EMD Chemicals，苄脒HCl水合物和牛血清白蛋白V型来自Fisher Scientific，来自猪肠粘膜的肝素来自Sigma，用于体外实验的96孔Costar(cat#3595)板和用于体内实验的8孔EIA/RIA Corning条(cat#2590)来自Fisher Scientific，以及针对人类APC的小鼠单克隆抗体可以从商业来源获得。许多目前使用血栓调节蛋白活性的显色确定的测定是基于通过引用并入本文的Salem等人,Journal of BiologicalChemistry,第259卷,第19期,第12246-12251页(1984)。此外，可商购的显色测定BIOPHEN蛋白C 2.5也用于一些实验中，并且可以从Hyphen BioMed(West Chester,Ohio)获得。

体外人类蛋白C剂量响应。将人类蛋白C(32.25nM、64.5nM和322.5nM)与在0.1mLPBS(w/Ca²⁺)中的sTM(29.3nM)和牛凝血酶(7.36nM)在1.7mL微量离心管中孵育持续10min。将25μl等分试样取出并且添加到25μl重组水蛭素[0.25U/μl]中，以猝灭96孔板内每个孔中的凝血酶活性。添加50μl Spectrazyme溶液(2μM)，并且确定在60min时的OD。对来自三个独立实验的60min时间点的值进行平均，N＝3±SD。人类蛋白C和牛凝血酶的摩尔浓度分别基于62kDa和36.7kDa的MW计算。

体外血栓调节蛋白剂量响应。将人类蛋白C(64.5nM)与在0.1mL PBS(w/Ca²⁺)中的sTM(0.293nM、2.93nM、29.3nM和1470nM)和牛凝血酶(7.36nM)在1.7mL微量离心管中孵育持续10min。将25μl等分试样取出并且放置在96孔板内的每个孔中，添加25μl重组水蛭素[0.25U/μl]和50μL Spectrazyme溶液(2μM)，并且确定在60min时的OD。对在60min时间点的独立实验的值进行平均，N＝3±SD。

体内人类蛋白C剂量响应。假设25g小鼠的平均血容量为1.5mL。将sTM(29.3nM)和牛凝血酶(7.36nM)预孵育持续10min，并且注射到C57BL6J小鼠的颈静脉中。此后立即，将人类蛋白C(32.25nM、64.5nM或322.5nM)注射到对侧颈静脉中。10min后，血液在3.8％柠檬酸钠和苄脒HCl(v/v 2:1)中从下腔静脉收集，每600μl收集的血液添加100μl的柠檬酸钠混合物。将血液以1500xg旋转持续5min。收集血浆并且在液氮中快速冷冻，并储存在-80℃直到使用。

体内血栓调节蛋白剂量响应。在注射到C57BL6J小鼠的颈静脉中之前，将sTM(0.293nM、2.93nM、29.3nM和1470nM)和牛凝血酶(7.36nM)预孵育持续10min。此后立即，将人类蛋白C(64.5nM)注射到对侧颈静脉中。10min后，血液在3.8％柠檬酸钠和苄脒HCl(v/v2:1)中从下腔静脉收集，每600μl血液添加100μl的柠檬酸钠:苄脒HCl混合物。如上文制备血浆。合适的和相关的PKC测定方法还在通过引用并入本文的Camemolla,R.,等人,JImmunol Methods.,2012年10月31日；384,(1-2),21–24，以及Xu,H.,等人,C.J Biol Chem2005；280(9):7956-7961中描述。

实施例20

通过基于抗体的ELISA进行的人类APC检测

允许在20mM Hepes、150NaCl、5mM CaCl₂、pH 7.5中的抗人类APC mAb 1555(5μg/mL)在4℃与高结合EIA/RIA 8孔条结合过夜。在室温，将孔用20mM Hepes、150NaCl、5mMCaCl₂、0.05％吐温-20、pH 7.5洗涤两次，并且用20mM Hepes、150NaCl、5mM CaCl₂、1％BSA、pH 7.5封闭持续1小时。然后将孔洗涤2次，每次持续5min。人类APC标准品[0-3200ng/mL]在20mM Hepes、150NaCl、15mM CaCl₂、0.1％BSA、2U/mL肝素、20mM苄脒HCl、pH 7.5(100μl/孔)中1:4稀释的小鼠血浆中制备。掺有人类APC抗体[50μg/mL]以降低背景(抗体非特异性)的人类APC标准品被平行地制备。来自给予不同剂量的人类PC或sTM的小鼠的血浆样品与标准品相等地被制备。将标准品和样品在室温孵育持续1小时，洗涤4次，每次持续5min。将100μl的1μM Spectrazyme溶液(在包衣缓冲液中1:10稀释)添加到每个孔中，并且每min测量在405nm的OD持续2小时。从在存在过量抗人类APC mAb[50μg/mL]的情况下获得的人类APC值中减去人类APC的原始值。然后，APC值基于标准曲线从线性方程中推断出来。人类APC值[ng/mL]被报告为N＝3-4±SD的平均值。

实施例21

在血栓性中风模型中PSA-血栓调节蛋白类似物(Solulin)活性

在该实验中，在小鼠血栓性中风模型中测试并比较根据本发明制备的多种PSA-血栓调节蛋白的生物活性。实验根据在通过引用并入本文的Su,E.J.,等人,2011,Journal ofThrombosis and Haemostasis,9,1174-1182,DOI:10.1111/j.1538-7836.2011.04269.x中描述的方法进行。使用以下材料，其来源：C57BL6J 6-8周龄雄性小鼠例如从JacksonLaboratories获得，人类APC可以从Haemotologic Technologies(Essex Junction,VT,USA),Spectrazyme PCa获得。

缺血性中风模型。将雄性(10周)用水合氯醛(450mg kg-1)麻醉并且牢固地放置在解剖显微镜下。将左侧MCA如所描述地进行暴露，并且将激光多普勒流量探头(N型：Transonic Systems,Ithaca,NY,USA)放置在位于距离MCA的分叉点1.5mm背正中处的大脑皮层的表面上。探头被连接到流量计(Transonic型号BLF21)，并且相对组织灌注单位(TPU)用连续数据采集程序(windaq,dataq,Akron,OH,USA)记录。将玫瑰红(RB)(Fisher)在乳酸林格氏液中稀释至10mg mL-1，并且然后注射到尾静脉(50mg kg-1)中。3.5-mW绿光激光器(540nm；Melles Griot,Albuquerque,NM,USA)从6cm的距离指向MCA，并且记录大脑皮层的TPU。当TPU下降到<20％的闭塞前水平并且在激光撤除之后10min内不反弹时，实现了稳定的闭塞。

PSA-Solulin递送和脑血流追踪。PSA-Solulin经由插入尾静脉中并且连接到Genie Plus注射泵(Kent Scientific,Torrington,CT,USA)的26-G

血管导管(Hospira,Lake Forest,IL,USA)施用。小鼠在RB注射之前30min或在MCAO之后30min或60min接受乳酸林格氏液(对照)或Solulin。量有待确定。

所有脑血流(CBF)追踪将在RB注射之前10min开始，并且在这段时间内的平均CBF被认为是100％并用于使CBF归一化。时间零点被设置在RB注射时。在MCAO之后七十二小时，将动物用水合氯醛(450mg kg-1)再麻醉并且再次暴露手术部位，并且将多普勒血流探头再连接到与之前相同的位置以获得72-h CBF数据。

为了确定中风体积，将脑取出并切成2-mm厚的冠状切片，并且用在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的4％2,3,5-三苯基四唑鎓氯化物(TTC)在37℃染色持续20min，并且然后在4％多聚甲醛溶液中固定持续10min。切片用nih image j使用以下公式分析：V％中风＝∑(病变面积)/∑(同侧半球面积)×100，其中V％中风是以同侧半球的百分比计算的中风体积。

血红蛋白测定。在MCAO之后二十四小时，将脑取出，分成与MCAO同侧和对侧的半球，并且将每个半球在PBS中在冰上均质化。在均质化和混合之后，将样品在23℃孵育持续5min，并且然后以25000xg在4℃离心持续30min，并且上清液的吸光度在410nm读取并相对于纯化的血红蛋白标准品(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO,USA)对血红蛋白定量。

免疫组织化学。根据制造商的说明书，使用Apoptag试剂盒(Oncor,Gaithersburg,MD,USA)检查来自在MCAO之后72小时安乐死的经媒介物处理的动物和经Solulin处理的动物的石蜡包埋的切片(5μm)。

本说明书的方面还可以被如下描述：

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、血管假性血友病因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、蛋白C、蛋白S、tPA、PAI-1、组织因子(TF)、ADAMTS 13蛋白酶、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、M-CSF、SCF、GM-CSF、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、干扰素-α(IFN-α)、复合干扰素、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-31、IL-32α、IL-33、血小板生成素(TPO)、Ang-1、Ang-2、Ang-4、Ang-Y、血管生成素样多肽1(ANGPTL1)、血管生成素样多肽2(ANGPTL2)、血管生成素样多肽3(ANGPTL3)、血管生成素样多肽4(ANGPTL4)、血管生成素样多肽5(ANGPTL5)、血管生成素样多肽6(ANGPTL6)、血管生成素样多肽7(ANGPTL7)、玻连蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素、激活蛋白A、激活蛋白B、激活蛋白C、骨形态发生蛋白-1、骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-3、骨形态发生蛋白-4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白-6、骨形态发生蛋白-7、骨形态发生蛋白-8、骨形态发生蛋白-9、骨形态发生蛋白-10、骨形态发生蛋白-11、骨形态发生蛋白-12、骨形态发生蛋白-13、骨形态发生蛋白-14、骨形态发生蛋白-15、骨形态发生蛋白受体IA、骨形态发生蛋白受体IB、骨形态发生蛋白受体II、脑源性神经营养因子、心脏营养素-1、睫状神经营养因子、睫状神经营养因子受体、畸胎瘤衍化生长因子、cryptic、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2α、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β、内皮细胞生长因子、内皮素1、表皮生长因子、epigen、上皮调节蛋白、上皮源性中性粒细胞引诱物、成纤维细胞生长因子4、成纤维细胞生长因子5、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子7、成纤维细胞生长因子8、成纤维细胞生长因子8b、成纤维细胞生长因子8c、成纤维细胞生长因子9、成纤维细胞生长因子10、成纤维细胞生长因子11、成纤维细胞生长因子12、成纤维细胞生长因子13、成纤维细胞生长因子16、成纤维细胞生长因子17、成纤维细胞生长因子19、成纤维细胞生长因子20、成纤维细胞生长因子21、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞系源性神经营养因子受体α1、胶质细胞系源性神经营养因子受体α2、生长相关蛋白、生长相关蛋白α、生长相关蛋白β、生长相关蛋白γ、肝素结合表皮生长因子、肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、肝癌衍生生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子受体、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白、角质形成细胞生长因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受体α、神经生长因子、神经生长因子受体、神经生成素、神经营养因子-3、神经营养因子-4、抑癌蛋白M(OSM)、胎盘生长因子、胎盘生长因子2、血小板衍生内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血小板衍生生长因子A链、血小板衍生生长因子AA、血小板衍生生长因子AB、血小板衍生生长因子B链、血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子受体α、血小板衍生生长因子受体β、前B细胞生长刺激因子、干细胞因子(SCF)、干细胞因子受体、TNF、TNF0、TNF1、TNF2、转化生长因子α、转化生长因子β、转化生长因子β1、转化生长因子β1.2、转化生长因子β2、转化生长因子β3、转化生长因子β5、潜在转化生长因子β1、转化生长因子β结合蛋白I、转化生长因子β结合蛋白II、转化生长因子β结合蛋白III、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、肿瘤坏死因子受体I型、肿瘤坏死因子受体II型、尿激酶型纤溶酶原激活物受体、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、凝集素、蓖麻毒素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物、IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶、胎球蛋白、促黄体激素、雌激素、胰岛素、白蛋白、脂蛋白、胎蛋白、转铁蛋白、血小板生成素、尿激酶、整联蛋白、凝血酶、瘦蛋白、阿达木单抗、地诺单抗或依那西普。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、血管假性血友病因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、蛋白C、蛋白S、tPA、PAI-1、组织因子(TF)、ADAMTS 13蛋白酶、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、M-CSF、SCF、GM-CSF、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、干扰素-α(IFN-α)、复合干扰素、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-31、IL-32α、IL-33、血小板生成素(TPO)、Ang-1、Ang-2、Ang-4、Ang-Y、血管生成素样多肽1(ANGPTL1)、血管生成素样多肽2(ANGPTL2)、血管生成素样多肽3(ANGPTL3)、血管生成素样多肽4(ANGPTL4)、血管生成素样多肽5(ANGPTL5)、血管生成素样多肽6(ANGPTL6)、血管生成素样多肽7(ANGPTL7)、玻连蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素、激活蛋白A、激活蛋白B、激活蛋白C、骨形态发生蛋白-1、骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-3、骨形态发生蛋白-4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白-6、骨形态发生蛋白-7、骨形态发生蛋白-8、骨形态发生蛋白-9、骨形态发生蛋白-10、骨形态发生蛋白-11、骨形态发生蛋白-12、骨形态发生蛋白-13、骨形态发生蛋白-14、骨形态发生蛋白-15、骨形态发生蛋白受体IA、骨形态发生蛋白受体IB、骨形态发生蛋白受体II、脑源性神经营养因子、心肌营养素-1、睫状神经营养因子、睫状神经营养因子受体、畸胎瘤衍化生长因子、cryptic、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2α、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β、内皮细胞生长因子、内皮素1、表皮生长因子、epigen、上皮调节蛋白、上皮源性中性粒细胞引诱物、成纤维细胞生长因子4、成纤维细胞生长因子5、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子7、成纤维细胞生长因子8、成纤维细胞生长因子8b、成纤维细胞生长因子8c、成纤维细胞生长因子9、成纤维细胞生长因子10、成纤维细胞生长因子11、成纤维细胞生长因子12、成纤维细胞生长因子13、成纤维细胞生长因子16、成纤维细胞生长因子17、成纤维细胞生长因子19、成纤维细胞生长因子20、成纤维细胞生长因子21、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞系源性神经营养因子受体α1、胶质细胞系源性神经营养因子受体α2、生长相关蛋白、生长相关蛋白α、生长相关蛋白β、生长相关蛋白γ、肝素结合表皮生长因子、肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、肝癌衍生生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子受体、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白、角质形成细胞生长因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受体α、神经生长因子、神经生长因子受体、神经生成素、神经营养因子-3、神经营养因子-4、抑癌蛋白M(OSM)、胎盘生长因子、胎盘生长因子2、血小板衍生内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血小板衍生生长因子A链、血小板衍生生长因子AA、血小板衍生生长因子AB、血小板衍生生长因子B链、血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子受体α、血小板衍生生长因子受体β、前B细胞生长刺激因子、干细胞因子(SCF)、干细胞因子受体、TNF、TNF0、TNF1、TNF2、转化生长因子α、转化生长因子β、转化生长因子β1、转化生长因子β1.2、转化生长因子β2、转化生长因子β3、转化生长因子β5、潜在转化生长因子β1、转化生长因子β结合蛋白I、转化生长因子β结合蛋白II、转化生长因子b结合蛋白III、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、肿瘤坏死因子受体I型、肿瘤坏死因子受体II型、尿激酶型纤溶酶原激活物受体、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、凝集素、蓖麻毒素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物、IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶、胎球蛋白、促黄体激素、雌激素、胰岛素、白蛋白、脂蛋白、胎蛋白、转铁蛋白、血小板生成素、尿激酶、整联蛋白、凝血酶、瘦蛋白、Humira(阿达木单抗)、Prolia(地诺单抗)或其生物活性片段、衍生物或变体。

一种治疗HIV的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与在gp120-gp41界面处结合HIV包膜糖蛋白的蛋白共价地连接的PSA。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：碳酸酐酶IX、α-甲胎蛋白、α-辅肌动蛋白-4、A3(对A33抗体特异性的抗原)、ART-4、B7、Ba-733、BAGE、BrE3-抗原、CA125、CAMEL、CAP-1、CASP-8/m、CCCL19、CCCL21、CD1、CDla、CD2、CD3、CD4、CDS、CD8、CDl-lA、CD14、CD15、CD16、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD45、CD46、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a-e、CD67、CD70、CD74、CD79a、CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CDC27、CDK-4/m、CDK 2A、CXCR4、CXCR7、CXCL12、HIF-l-α、结肠特异性抗原-p(CSAp)、CEA(CEACAM5)、CEACAM6、c-met、DAM、EGFR、EGFRvIII、EGP-1、EGP-2、ELF2-M、Ep-CAM、Flt-1、Flt-3、叶酸受体、G250抗原、GAGE、GROB、HLA-DR、HM1.24、人类绒毛膜促性腺激素(HCG)及其亚基、HER2/neu、HMGB-1、低氧诱导因子(HIF-1)、HSP70-2M、HST-2或la、IGF-1R、IFN-γ、IFN-α、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、KC4-抗原、KS-1-抗原、KS1-4、Le-Y、LDR/FUT、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、MAGE、MAGE-3、MART-1、MART-2、NY-ESO-1、TRAG-3、mCRP、MCP-1、MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUC1、MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、MUM-1/2、MUM-3、NCA66、NCA95、NCA90、胰腺癌粘蛋白、胎盘生长因子、p53、PLAGL2、前列腺酸性磷酸酶、PSA、PRAME、PSMA、P1GF、ILGF、ILGF-1R、IL-6、IL-25、RS5、RANTES、T101、SAGE、S100、存活素、存活素-2B、TAC、TAG-72、腱生蛋白、TRAIL受体、TNF-α、Tn-抗原、Thomson-Friedenreich抗原、肿瘤坏死抗原、VEGFR、ED-B纤连蛋白、WT-1、17-lA-抗原、补体因子C3、C3a、C3b、C5a、C5、血管生成标志物、bcl-2、bcl-6、Kras、cMET、癌基因标志物和癌基因产物。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与识别间皮素的抗体或结合蛋白共价地连接的PSA。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：来自酯酶组的酶，所述酯酶组包含金属蛋白酶、枯草杆菌酶或脂肪酶，三酰甘油脂肪酶、枯草杆菌酶、金属蛋白酶、胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶或CT，胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、枯草杆菌酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、金属蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、-胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶；酶聚合物缀合物，诸如酯酶-聚合物缀合物，该酯酶-聚合物缀合物包含胰凝乳蛋白酶-pDMAEMA(CT-pDMAEMA)缀合物、金属蛋白酶-pOEGMA缀合物、嗜热菌蛋白酶-pOEGMA缀合物、枯草杆菌蛋白酶-离子液体聚合物缀合物、枯草杆菌酶-离子液体聚合物缀合物或脂肪酶-pDMAA缀合物。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与抗体-药物缀合物共价地连接的PSA，该抗体-药物缀合物包含以下抗体：抗HER2单克隆抗体诸如曲妥珠单抗和帕妥珠单抗，抗CD20单克隆抗体诸如利妥昔单抗、奥法木单抗、托西莫单抗和替伊莫单抗，抗CA125单克隆抗体诸如奥戈伏单抗，抗EpCAM(17-1A)单克隆抗体诸如依决洛单抗，抗EGFR单克隆抗体诸如西妥昔单抗、帕尼单抗和尼妥珠单抗，抗CD30单克隆抗体诸如本妥昔单抗，抗CD33单克隆抗体诸如吉妥珠单抗和huMy9-6，抗血管整联蛋白α-vβ-3单克隆抗体诸如伊瑞西珠单抗，抗CD52单克隆抗体诸如阿仑单抗，抗CD22单克隆抗体诸如依帕珠单抗，抗CEA单克隆抗体诸如labetuzumab，抗CD44v6单克隆抗体诸如bivatuzumab，抗FAP单克隆抗体诸如sibrotuzumab，抗CD19单克隆抗体诸如huB4，抗CanAg单克隆抗体诸如huC242，抗CD56单克隆抗体诸如huN901，抗CD38单克隆抗体诸如达雷木单抗，抗CA6单克隆抗体诸如DS6，抗IGF-IR单克隆抗体诸如西妥木单抗和3B7，抗整联蛋白单克隆抗体诸如CNTO 95，以及抗多配体聚糖-1单克隆抗体诸如B-B4。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中PSA-缀合物包含与结合分子-药物缀合物共价地连接的PSA，该结合分子-药物缀合物包含以下非抗体的结合化合物：除了抗体之外的结合蛋白还可以被用作用于配体-药物缀合物的细胞结合配体，包括但不限于干扰素诸如IFN-a、IFN-f3和IFN-y、转铁蛋白、表皮生长因子(EGF)和EGF样结构域、胃泌素释放肽(GRP)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF)、痘苗生长因子(VGF)、胰岛素和胰岛素样生长因子(IGF)诸如IGF-1和IGF-2、其他合适的激素诸如促甲状腺素释放激素(TRH)、促黑激素(MSH)、类固醇激素(例如雌激素和雄激素)和生长抑素、淋巴因子诸如IL-2、IL-3、IL-4和IL-6、集落刺激因子(CSF)诸如G-CSF、M-CSF和GM-CSF、铃蟾肽、胃泌素和叶酸。

一种治疗疾病、癌症或免疫紊乱的方法，该方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-凝血酶缀合物，其中PSA-凝血酶缀合物包含与凝血酶共价地连接的PSA。

本文描述了本发明的某些实施方案，包括本发明人已知的用于实施本发明的最佳模式。当然，在阅读前述说明书后，这些描述的实施方案的变化对于本领域普通技术人员将变得明显。本发明人预期技术人员酌情采用这样的变化，并且本发明人旨在以不同于本文具体描述的方式实施本发明。因此，本发明包括被适用法律许可的在此所附权利要求书中叙述的主题的所有修改和等同物。此外，上文描述的实施方案以其所有可能的变化的任何组合由本发明所涵盖，除非本文另外指示或以其他方式与上下文明显矛盾。

本发明的可选择的实施方案、要素或步骤的分组不应被解释为限制。每个组成员可以被单独地或与本文公开的其他组成员任何组合来提及和要求保护。预期的是，为了方便和/或专利性的原因，组的一个或更多个成员可以被包括在组中或从组中删除。当任何这样的包括或删除发生时，本说明书被认为包含作为修改的组，从而实现在所附权利要求书中使用的所有马库什组(Markush group)的书面描述。

除非另外指示，否则在本说明书和权利要求书中使用的表示特性、项目、数量、参数、性质、术语等的所有数字应被理解为在所有情况下被术语“约”修饰。如本文使用的，术语“约”意指如此指定的特性、项目、数量、参数、性质、或术语涵盖规定的特性、项目、数量、参数、性质或术语的值的以上和以下正或负10％的范围。因此，除非相反地指示，否则本说明书和所附权利要求书中阐述的数值参数为可以变化的近似值。至少且不试图限制将等效原则应用于权利要求书的范围，每个数值指示应当至少根据所报告的有效数字的数目并且通过应用常规凑整技术来解释。尽管阐述本发明的宽范围的数值范围和值是近似值，但在具体实施例中阐述的数值范围和值尽可能精确地来报告。然而，任何数值范围或值固有地包含一定的误差，该误差是由它们各自的测试测量中发现的标准偏差必然造成的。本文中对值的数值范围的叙述仅仅意图用作单独地提及落入该范围的每个单独的数值的简写方法。除非本文另外指示，否则将数值范围的每个单独的值并入到本说明书中，如同其在本文中被单独地叙述一样。类似地，如本文使用的，除非相反地指示，否则术语“大体上”是意图指示如此指定的特性、项目、数量、参数、性质或术语的近似的程度术语，涵盖本领域普通技术人员可以理解和解释的范围。

关于实施方案或实施方案的方面使用术语“可以(may)”或“可以(can)”也用它携带“可能不(may not)”或“不能(cannot)”的可选择的含义。因此，如果本说明书公开实施方案或实施方案的方面可以或可以作为本发明的主题的部分被包括，则也明确地表示负面限制或排除条件，意味着实施方案或实施方案的方面可能不或不能作为本发明的主题的部分被包括。以相似的方式，关于实施方案或实施方案的方面使用术语“任选地”意指这样的实施方案或实施方案的方面可以作为本发明的主题的部分被包括，或可能不作为本发明的主题的部分被包括。这样的负面限制或排除条件是否应用将基于该负面限制或排除条件是否在所要求保护的主题中叙述。

在描述本发明的上下文中(尤其是在以下权利要求书的上下文中)使用的术语“一(a)”、“一(an)”、“该(the)”以及类似指示物应被解释为覆盖单数和复数两者，除非本文另外指示或与上下文明显矛盾。此外，用于标识的要素的序数指示符诸如“第一”、“第二”、“第三”等用于在要素之间区分，并且不指示或暗示这样的要素的必需或有限数量且不指示这样的要素的特定位置或顺序，除非另外明确地陈述。本文描述的所有方法可以以任何合适的顺序进行，除非本文另外指示或以其他方式与上下文明显矛盾。本文提供的任何和全部实施例，或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅仅意图更好地说明本发明而不是对另外要求保护的本发明的范围施加限制。本说明书中的语言不应被解释为指示任何未要求保护的要素对实施本发明必不可少。

当在权利要求书中使用时，无论作为已提交的或每次修改添加的，开放式过渡术语“包括”(连同其等效的开放式过渡短语诸如“包括”、“包含”和“具有”)涵盖单独地或与未叙述的主题组合的所有明确叙述的要素、限制、步骤和/或特征；提及的要素、限制和/或特征是必不可少的，但是可以添加其他未提及的要素、限制和/或特征，并且仍然形成在权利要求的范围内的构造。本文公开的具体实施方案可以在权利要求书中使用封闭式过渡短语“由......组成”或“基本上由......组成”来代替“包括”或作为“包括”的修改来进一步限定。当在权利要求书中使用时，无论作为已提交的或每次修改添加的，封闭式过渡短语“由......组成”排除在权利要求书中未明确叙述的任何要素、限制、步骤或特征。封闭式过渡短语“基本上由......组成”将权利要求的范围限制为明确叙述的要素、限制、步骤和/或特征，以及实质上不影响所要求保护的主题的基本和新颖特性的任何其他要素、限制、步骤和/或特征。因此，开放式过渡短语“包括”的含义被定义为涵盖所有具体叙述的要素、限制、步骤和/或特征以及任何任选的、另加的未指定的要素、限制、步骤和/或特征。封闭式过渡短语“由......组成”的含义被定义为仅包括在权利要求书中具体叙述的那些要素、限制、步骤和/或特征，而封闭式过渡短语“基本上由......组成”的含义被定义为仅包括在权利要求书中具体叙述的那些要素、限制、步骤和/或特征，以及实质上不影响所要求保护的主题的基本和新颖特性的那些要素、限制、步骤和/或特征。因此，作为限制情况，开放式过渡短语“包括”(连同其等效的开放式过渡短语)在其含义内包括由封闭式过渡短语“由......组成”或“基本由......组成”指定的要求保护的主题。因此，本文描述的或用短语“包括”要求保护的实施方案在本文中针对短语“基本上由......组成”和“由......组成”被清楚地或固有地明确地描述、启用和支持。

本说明书中引用和标识的所有专利、专利出版物和其他出版物通过引用以其整体出于描述和公开的目的被单独地和清楚地并入本文，例如，与本发明有关可以被使用的在这样的出版物中描述的组合物和方法论。这些出版物仅仅以其先于本申请的申请日的公开内容被提供。在这方面，任何内容不应被解释为本发明人没有资格借助在先发明或出于任何其他原因先于这样的公开内容的承认。关于日期或陈述，关于这些文件的内容的所有表述是基于对本申请人可用的信息，并且不构成关于这些文件的日期或内容的正确性的任何承认。

表1.蛋白缀合物的序列

序列表

<110> 艾克森埃缇克生物科学公司

<120> 使用糖聚唾液酸化治疗性蛋白的方法

<130> XN1-060WO

<160> 62

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 340

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> E124蛋白

<400> 1

Met Ala Asp Ser Val Lys Thr Phe Leu Gln Asp Leu Ala Arg Gly Ile

1 5 10 15

Lys Asp Ser Ile Trp Gly Ile Cys Thr Ile Ser Lys Leu Asp Ala Arg

20 25 30

Ile Gln Gln Lys Arg Glu Glu Gln Arg Arg Arg Arg Ala Ser Ser Val

35 40 45

Leu Ala Gln Arg Arg Ala Gln Ser Ile Glu Arg Lys Gln Glu Ser Glu

50 55 60

Pro Arg Ile Val Ser Arg Ile Phe Gln Cys Cys Ala Trp Asn Gly Gly

65 70 75 80

Val Phe Trp Phe Ser Leu Leu Leu Phe Tyr Arg Val Phe Ile Pro Val

85 90 95

Leu Gln Ser Val Thr Ala Arg Ile Ile Gly Asp Pro Ser Leu His Gly

100 105 110

Asp Val Trp Ser Trp Leu Glu Phe Phe Leu Thr Ser Ile Phe Ser Ala

115 120 125

Leu Trp Val Leu Pro Leu Phe Val Leu Ser Lys Val Val Asn Ala Ile

130 135 140

Trp Phe Gln Asp Ile Ala Asp Leu Ala Phe Glu Val Ser Gly Arg Lys

145 150 155 160

Pro His Pro Phe Pro Ser Val Ser Lys Ile Ile Ala Asp Met Leu Phe

165 170 175

Asn Leu Leu Leu Gln Ala Leu Phe Leu Ile Gln Gly Met Phe Val Ser

180 185 190

Leu Phe Pro Ile His Leu Val Gly Gln Leu Val Ser Leu Leu His Met

195 200 205

Ser Leu Leu Tyr Ser Leu Tyr Cys Phe Glu Tyr Arg Trp Phe Asn Lys

210 215 220

Gly Ile Glu Met His Gln Arg Leu Ser Asn Ile Glu Arg Asn Trp Pro

225 230 235 240

Tyr Tyr Phe Gly Phe Gly Leu Pro Leu Ala Phe Leu Thr Ala Met Gln

245 250 255

Ser Ser Tyr Ile Ile Ser Gly Cys Leu Phe Ser Ile Leu Phe Pro Leu

260 265 270

Phe Ile Ile Ser Ala Asn Glu Ala Lys Thr Pro Gly Lys Ala Tyr Leu

275 280 285

Phe Gln Leu Arg Leu Phe Ser Leu Val Val Phe Leu Ser Asn Arg Leu

290 295 300

Phe His Lys Thr Val Tyr Leu Gln Ser Ala Leu Ser Ser Ser Thr Ser

305 310 315 320

Ala Glu Lys Phe Pro Ser Pro His Pro Ser Pro Ala Lys Leu Lys Ala

325 330 335

Thr Ala Gly His

340

<210> 2

<211> 21

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 桃(PRUNUS PERSICA)的PRU P 3过敏原

<400> 2

Ala Ser Ser Asn Gly Ile Arg Asn Val Asn Asn Leu Ala Arg Thr Pro

1 5 10 15

Asp Arg Gln Ala Cys

20

<210> 3

<211> 138

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 肿瘤坏死因子受体(TNF)

<400> 3

Val Pro Ala Gln Trp Phe Pro Arg Ser Ile Pro Glu Pro Ser Asn Leu

1 5 10 15

Cys Gln Pro Arg Glu Tyr Tyr Asp Glu Arg Ala Gln Arg Arg Cys Ser

20 25 30

Gln Cys Pro Pro Gly Cys Arg Ala Lys Ser Phe Cys Asn Glu Thr Ser

35 40 45

Asp Thr Val Cys Val Pro Cys Glu Asp Ser Thr Tyr Thr Gln Leu Trp

50 55 60

Asn Trp Leu Pro Glu Cys Leu Ser Cys Gly Ser Arg Cys Ser Thr Gly

65 70 75 80

Gln Val Glu Thr Gln Ala Cys Thr Leu Lys Gln Asn Arg Ile Cys Thr

85 90 95

Cys Glu Pro Gly Arg Tyr Cys Ile Leu Pro Arg Gln Glu Gly Cys Gln

100 105 110

Val Cys Gly Leu Leu Arg Lys Cys Pro Pro Gly Phe Gly Val Ala Lys

115 120 125

Pro Gly Thr Ala Thr Ser Asn Trp Cys Ala

130 135

<210> 4

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> p38 γ蛋白抑制剂

<400> 4

Tyr Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Ala Arg Val Pro Lys

1 5 10 15

Glu Thr Ala Leu

20

<210> 5

<211> 37

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 基于抗癌肽的治疗剂

<400> 5

Arg Pro Met Arg Leu Glu Ser Phe Ser Ala Cys Ile Trp Val Lys Ala

1 5 10 15

Thr Asp Val Leu Asn Lys Thr Ile Leu Phe Ser Tyr Gly Thr Lys Arg

20 25 30

Asn Pro Tyr Glu Ile

35

<210> 6

<211> 40

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 基于抗癌肽的治疗剂

<400> 6

Gly Gly Gly Phe Asp Glu Thr Leu Ala Phe Ser Gly Arg Leu Thr Gly

1 5 10 15

Phe Asn Ile Trp Asp Ser Val Leu Ser Asn Glu Glu Ile Arg Glu Thr

20 25 30

Gly Gly Ala Glu Ser Cys His Ile

35 40

<210> 7

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> Tau蛋白

<400> 7

Lys His Gln Pro Gly Gly Gly

1 5

<210> 8

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> Tau蛋白

<400> 8

Lys His Val Pro Gly Gly Gly

1 5

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> Tau蛋白

<400> 9

His His Lys Pro Gly Gly Gly

1 5

<210> 10

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> Tau蛋白

<400> 10

Thr His Val Pro Gly Gly Gly

1 5

<210> 11

<211> 34

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> SERCA钙泵

<400> 11

Met Ala Glu Lys Glu Ser Thr Ser Pro His Leu Met Val Pro Ile Leu

1 5 10 15

Leu Leu Val Gly Trp Ile Val Gly Cys Ile Ile Val Ile Tyr Ile Val

20 25 30

Phe Phe

<210> 12

<211> 35

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> SERCA钙泵

<400> 12

Met Ala Glu Lys Ala Glu Ser Thr Ser Pro His Leu Met Val Pro Ile

1 5 10 15

Leu Leu Leu Val Gly Trp Ile Val Gly Cys Ile Ile Val Ile Tyr Ile

20 25 30

Val Phe Phe

35

<210> 13

<211> 34

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> SERCA钙泵

<400> 13

Met Ala Glu Lys Glu Ser Thr Ser Pro His Leu Ile Val Pro Ile Leu

1 5 10 15

Leu Leu Val Gly Trp Ile Val Gly Cys Ile Ile Val Ile Tyr Ile Val

20 25 30

Phe Phe

<210> 14

<211> 35

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> SERCA钙泵

<400> 14

Met Ala Glu Lys Ala Glu Ser Thr Ser Pro His Leu Ile Val Pro Ile

1 5 10 15

Leu Leu Leu Val Gly Trp Ile Val Gly Cys Ile Ile Val Ile Tyr Ile

20 25 30

Val Phe Phe

35

<210> 15

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 兴奋性神经毒性

<400> 15

Tyr Glu Lys Leu Leu Asp Thr Glu Ile

1 5

<210> 16

<211> 29

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 16

His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Ser

1 5 10 15

Arg Arg Ala Gln Asp Phe Val Gln Trp Leu Met Asn Thr

20 25

<210> 17

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 17

Glu Glu Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 18

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 18

Glu Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 19

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 19

Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 20

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 20

Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 21

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 21

Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 22

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 22

Lys Arg Asn Lys Asn Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 23

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 23

Lys Arg Asn Lys Asn Pro Pro Ser

1 5

<210> 24

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 24

Lys Arg Asn Lys Pro Pro Ile Ala

1 5

<210> 25

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 25

Lys Arg Asn Lys Pro Pro Pro Ala

1 5

<210> 26

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 26

Lys Arg Asn Lys Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 27

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 27

Lys Ser Ser Gly Lys Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 28

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 28

Pro Glu Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 29

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 29

Pro Lys Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 30

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 30

Pro Lys Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 31

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 31

Pro Lys Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 32

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 32

Pro Lys Ser Lys Glu Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 33

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 33

Pro Lys Ser Lys Glu Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 34

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 34

Pro Lys Ser Lys Gln Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 35

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 35

Pro Lys Ser Lys Ser Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 36

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 36

Pro Lys Ser Lys Ser Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 37

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 37

Pro Arg Asn Lys Asn Asn Pro Pro Ser

1 5

<210> 38

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 38

Pro Ser Lys Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 39

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 39

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Glu

1 5 10

<210> 40

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 40

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 41

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 41

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 42

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 42

Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser Ser

1 5 10

<210> 43

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 43

Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 44

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 44

Pro Ser Ser Gly Lys Lys Pro Pro Ser

1 5

<210> 45

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 45

Pro Ser Ser Gly Lys Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 46

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 46

Pro Ser Ser Gly Lys Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 47

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 47

Pro Ser Ser Gly Ser Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 48

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 48

Pro Ser Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 49

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 49

Pro Ser Ser Lys Glu Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 50

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 50

Pro Ser Ser Lys Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10

<210> 51

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 51

Pro Ser Ser Lys Gln Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 52

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 52

Pro Ser Ser Lys Ser Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 53

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 53

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 54

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> GLP1

<400> 54

Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

1 5

<210> 55

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> TP4

<400> 55

Phe Ile His His Ile Ile Gly Gly Leu Phe Ser Ala Gly Lys Ala Ile

1 5 10 15

His Arg Leu Ile Arg Arg Arg Arg Arg

20 25

<210> 56

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> BB屏障剂

<400> 56

Leu Arg Val Arg Leu Ala Ser His Leu Arg Lys Leu Arg Lys Arg Leu

1 5 10 15

Leu Arg Asp Ala

20

<210> 57

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 端粒酶抑制剂

<400> 57

Arg Arg Arg Gly Gly Asp Ala Ser Arg Ser Leu Pro Leu Pro Lys Arg

1 5 10 15

Pro Arg Arg

<210> 58

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 端粒酶抑制剂

<400> 58

Arg Arg Arg Gly Gly Glu Ala Ser Arg Ser Leu Pro Leu Pro Lys Arg

1 5 10 15

Pro Arg Arg

<210> 59

<211> 37

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 干扰素

<400> 59

Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Ala Pro Pro Pro Ser

1 5 10 15

Leu Pro Ser Pro Ser Arg Leu Pro Gly Pro Ser Asp Thr Pro Ile Leu

20 25 30

Pro Gln Asn Gly Ser

35

<210> 60

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 整联蛋白结合

<400> 60

Val Gly Asp Leu Thr Tyr Leu Lys

1 5

<210> 61

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 整联蛋白结合

<400> 61

Val Gly Asp Leu Thr Tyr Leu Lys Lys

1 5

<210> 62

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工的(artificial)

<220>

<223> 齐考诺肽

<400> 62

Cys Lys Gly Lys Gly Ala Lys Cys Ser Arg Leu Met Tyr Asp Cys Cys

1 5 10 15

Thr Gly Ser Cys Arg Ser Gly Lys Cys

20 25

Claims (14)

1.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：因子IX(FIX)、因子VIII(FVIII)、因子VIIa(FVIIa)、血管假性血友病因子(VWF)、因子FV(FV)、因子X(FX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、凝血酶(FII)、蛋白C、蛋白S、tPA、PAI-1、组织因子(TF)、ADAMTS13蛋白酶、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-11、集落刺激因子-1(CSF-1)、M-CSF、SCF、GM-CSF、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、EPO、干扰素-α(IFN-α)、复合干扰素、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-31、IL-32α、IL-33、血小板生成素(TPO)、Ang-1、Ang-2、Ang-4、Ang-Y、血管生成素样多肽1(ANGPTL1)、血管生成素样多肽2(ANGPTL2)、血管生成素样多肽3(ANGPTL3)、血管生成素样多肽4(ANGPTL4)、血管生成素样多肽5(ANGPTL5)、血管生成素样多肽6(ANGPTL6)、血管生成素样多肽7(ANGPTL7)、玻连蛋白、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素、激活蛋白A、激活蛋白B、激活蛋白C、骨形态发生蛋白-1、骨形态发生蛋白-2、骨形态发生蛋白-3、骨形态发生蛋白-4、骨形态发生蛋白-5、骨形态发生蛋白-6、骨形态发生蛋白-7、骨形态发生蛋白-8、骨形态发生蛋白-9、骨形态发生蛋白-10、骨形态发生蛋白-11、骨形态发生蛋白-12、骨形态发生蛋白-13、骨形态发生蛋白-14、骨形态发生蛋白-15、骨形态发生蛋白受体IA、骨形态发生蛋白受体IB、骨形态发生蛋白受体II、脑源性神经营养因子、心肌营养素-1、睫状神经营养因子、睫状神经营养因子受体、畸胎瘤衍化生长因子、cryptic、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2α、细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子2β、内皮细胞生长因子、内皮素1、表皮生长因子、epigen、上皮调节蛋白、上皮源性中性粒细胞引诱物、成纤维细胞生长因子4、成纤维细胞生长因子5、成纤维细胞生长因子6、成纤维细胞生长因子7、成纤维细胞生长因子8、成纤维细胞生长因子8b、成纤维细胞生长因子8c、成纤维细胞生长因子9、成纤维细胞生长因子10、成纤维细胞生长因子11、成纤维细胞生长因子12、成纤维细胞生长因子13、成纤维细胞生长因子16、成纤维细胞生长因子17、成纤维细胞生长因子19、成纤维细胞生长因子20、成纤维细胞生长因子21、酸性成纤维细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞系源性神经营养因子受体α1、胶质细胞系源性神经营养因子受体α2、生长相关蛋白、生长相关蛋白α、生长相关蛋白β、生长相关蛋白γ、肝素结合表皮生长因子、肝细胞生长因子、肝细胞生长因子受体、肝癌衍生生长因子、胰岛素样生长因子I、胰岛素样生长因子受体、胰岛素样生长因子II、胰岛素样生长因子结合蛋白、角质形成细胞生长因子、白血病抑制因子、白血病抑制因子受体α、神经生长因子、神经生长因子受体、神经生成素、神经营养因子-3、神经营养因子-4、抑癌蛋白M(OSM)、胎盘生长因子、胎盘生长因子2、血小板衍生内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、血小板衍生生长因子A链、血小板衍生生长因子AA、血小板衍生生长因子AB、血小板衍生生长因子B链、血小板衍生生长因子BB、血小板衍生生长因子受体α、血小板衍生生长因子受体β、前B细胞生长刺激因子、干细胞因子(SCF)、干细胞因子受体、TNF、TNF0、TNF1、TNF2、转化生长因子α、转化生长因子β、转化生长因子β1、转化生长因子β1.2、转化生长因子β2、转化生长因子β3、转化生长因子β5、潜在转化生长因子β1、转化生长因子β结合蛋白I、转化生长因子β结合蛋白II、转化生长因子β结合蛋白III、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、肿瘤坏死因子受体I型、肿瘤坏死因子受体II型、尿激酶型纤溶酶原激活物受体、磷脂酶激活蛋白(PUP)、胰岛素、凝集素、蓖麻毒素、催乳素、绒毛膜促性腺激素、促卵泡激素、促甲状腺激素、组织纤溶酶原激活物、IgG、IgE、IgM、IgA和IgD、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、DNA酶、胎球蛋白、促黄体激素、雌激素、胰岛素、白蛋白、脂蛋白、胎蛋白、转铁蛋白、血小板生成素、尿激酶、整联蛋白、凝血酶、瘦蛋白、Humira(阿达木单抗)、Prolia(地诺单抗)或其生物活性片段、衍生物或变体。

2.一种治疗HIV的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与在gp120-gp41界面处结合HIV包膜糖蛋白的蛋白共价地连接的PSA。

3.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：碳酸酐酶IX、α-甲胎蛋白、α-辅肌动蛋白-4、A3(对A33抗体特异性的抗原)、ART-4、B7、Ba-733、BAGE、BrE3-抗原、CA125、CAMEL、CAP-1、CASP-8/m、CCCL19、CCCL21、CD1、CDla、CD2、CD3、CD4、CDS、CD8、CDl-lA、CD14、CD15、CD16、CD18、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、CD40、CD40L、CD45、CD46、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a-e、CD67、CD70、CD74、CD79a、CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CDC27、CDK-4/m、CDK 2A、CXCR4、CXCR7、CXCL12、HIF-l-α、结肠特异性抗原-p(CSAp)、CEA(CEACAM5)、CEACAM6、c-met、DAM、EGFR、EGFRvIII、EGP-1、EGP-2、ELF2-M、Ep-CAM、Flt-1、Flt-3、叶酸受体、G250抗原、GAGE、GROB、HLA-DR、HM1.24、人类绒毛膜促性腺激素(HCG)及其亚基、HER2/neu、HMGB-1、低氧诱导因子(HIF-1)、HSP70-2M、HST-2或1a、IGF-1R、IFN-γ、IFN-α、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、KC4-抗原、KS-1-抗原、KS1-4、Le-Y、LDR/FUT、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、MAGE、MAGE-3、MART-1、MART-2、NY-ESO-1、TRAG-3、mCRP、MCP-1、MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUC1、MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、MUM-1/2、MUM-3、NCA66、NCA95、NCA90、胰腺癌粘蛋白、胎盘生长因子、p53、PLAGL2、前列腺酸性磷酸酶、PSA、PRAME、PSMA、P1GF、ILGF、ILGF-1R、IL-6、IL-25、RS5、RANTES、T101、SAGE、S100、存活素、存活素-2B、TAC、TAG-72、腱生蛋白、TRAIL受体、TNF-α、Tn-抗原、Thomson-Friedenreich抗原、肿瘤坏死抗原、VEGFR、ED-B纤连蛋白、WT-1、17-lA-抗原、补体因子C3、C3a、C3b、C5a、C5、血管生成标志物、bcl-2、bcl-6、Kras、cMET、癌基因标志物和癌基因产物。

4.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与识别间皮素的抗体或结合蛋白共价地连接的PSA。

5.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与选自以下的蛋白共价地连接的PSA：来自酯酶组的酶，所述酯酶组包含金属蛋白酶、枯草杆菌酶或脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、枯草杆菌酶、金属蛋白酶、胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶或CT、胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶、枯草杆菌酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、金属蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、-胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶；酶聚合物缀合物，诸如酯酶-聚合物缀合物，所述酯酶-聚合物缀合物包含胰凝乳蛋白酶-pDMAEMA(CT-pDMAEMA)缀合物、金属蛋白酶-pOEGMA缀合物、嗜热菌蛋白酶-pOEGMA缀合物、枯草杆菌蛋白酶-离子液体聚合物缀合物、枯草杆菌酶-离子液体聚合物缀合物或脂肪酶-pDMAA缀合物。

6.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与抗体-药物缀合物共价地连接的PSA，所述抗体-药物缀合物包含以下抗体：抗HER2单克隆抗体诸如曲妥珠单抗和帕妥珠单抗，抗CD20单克隆抗体诸如利妥昔单抗、奥法木单抗、托西莫单抗和替伊莫单抗，抗CA125单克隆抗体诸如奥戈伏单抗，抗EpCAM(17-1A)单克隆抗体诸如依决洛单抗，抗EGFR单克隆抗体诸如西妥昔单抗、帕尼单抗和尼妥珠单抗，抗CD30单克隆抗体诸如本妥昔单抗，抗CD33单克隆抗体诸如吉妥珠单抗和huMy9-6，抗血管整联蛋白α-vβ-3单克隆抗体诸如伊瑞西珠单抗，抗CD52单克隆抗体诸如阿仑单抗，抗CD22单克隆抗体诸如依帕珠单抗，抗CEA单克隆抗体诸如labetuzumab，抗CD44v6单克隆抗体诸如bivatuzumab，抗FAP单克隆抗体诸如sibrotuzumab，抗CD19单克隆抗体诸如huB4，抗CanAg单克隆抗体诸如huC242，抗CD56单克隆抗体诸如huN901，抗CD38单克隆抗体诸如达雷木单抗，抗CA6单克隆抗体诸如DS6，抗IGF-IR单克隆抗体诸如西妥木单抗和3B7，抗整联蛋白单克隆抗体诸如CNTO 95，以及抗多配体聚糖-1单克隆抗体诸如B-B4。

7.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-蛋白缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与结合分子-药物缀合物共价地连接的PSA，所述结合分子-药物缀合物包含以下非抗体的结合化合物：除了抗体之外的结合蛋白也可以被用作用于配体-药物缀合物的细胞结合配体，包括但不限于干扰素诸如IFN-a、IFN-f3和IFN-y、转铁蛋白、表皮生长因子(EGF)和EGF样结构域、胃泌素释放肽(GRP)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF)、痘苗生长因子(VGF)、胰岛素和胰岛素样生长因子(IGF)诸如IGF-1和IGF-2、其他合适的激素诸如促甲状腺素释放激素(TRH)、促黑激素(MSH)、类固醇激素(例如雌激素和雄激素)和生长抑素、淋巴因子诸如IL-2、IL-3、IL-4和IL-6、集落刺激因子(CSF)诸如G-CSF、M-CSF和GM-CSF、铃蟾肽、胃泌素和叶酸。

8.一种治疗疾病的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-凝血酶缀合物，其中所述PSA-凝血酶缀合物包含与凝血酶共价地连接的PSA。

9.根据权利要求1或3-8中任一项所述的方法，其中所述疾病是癌症或自身免疫性紊乱。

10.一种治疗基因表达紊乱的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-核酸缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与选自以下的RNA寡核苷酸共价地连接的PSA：双链RNA、单链RNA或短干扰RNA(siRNA)。

11.一种治疗基因表达紊乱的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-核酸缀合物，其中所述PSA-缀合物包含经由可裂解的接头部分与RNA寡核苷酸共价地连接的PSA。

12.一种治疗基因表达紊乱的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-核酸缀合物，其中所述PSA分子任选地经由接头与至少一个RNA分子在所述RNA 3’末端碱基处缀合。

13.一种治疗基因表达紊乱的方法，所述方法包括向有相应需要的患者施用有效量的PSA-核酸缀合物，其中所述PSA-缀合物包含与RNA寡核苷酸共价地连接的PSA，其中所述RNA寡核苷酸包含编码多肽或其互补序列的编码区，其中所述多肽选自VEGF、载脂蛋白B、肌营养不良蛋白的外显子51、SMN2、甲状腺素运载蛋白、CEP290 c.2991+1655A>G突变、KRAS、补体5(C5)蛋白、EphA2、CTGF、TRPV1、LDHA、TGF-β1、Cox-2、KRAS G12D、P53、胱天蛋白酶-2、抗凝血酶、FANCA、凝血因子VIII、凝血因子IX、ANK1、PIG-A、UROD、腺苷脱氨酶、JAK3、RAG1/2、Artemis、IL7R-α、IL-2Rγ、T细胞表面糖蛋白CD3δ链、CD3.ε、CDKN2、NF1、NF2、LIM激酶、弹性蛋白、ALDP、CFTR、肝杀菌肽、ABCA3、表面活性蛋白B、ADAMTS13、α1-抗胰蛋白酶或GAA。

14.根据权利要求10-13中任一项所述的方法，其中所述基因表达紊乱是以下中的至少一种：高血压、升高的胆固醇水平、癌症、神经退行性紊乱、精神疾病、囊性纤维化、血友病(或其他凝血疾病)、神经精神紊乱诸如精神分裂症、双相情感障碍、重性抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默病和自闭症谱系紊乱、白化病、安格曼综合征、强直性脊柱炎、阿佩尔综合征、腓骨肌萎缩症、先天性肾上腺增生、囊性纤维化、唐氏综合征、软骨发育不全、α-1抗胰蛋白酶缺乏症、抗磷脂综合征、注意力缺陷多动障碍、自闭症、常染色体显性多囊肾病、腓骨肌萎缩症、猫叫综合征、克罗恩病、囊性纤维化、痛性肥胖症、眼球后缩综合征、杜氏肌营养不良、V因子Leiden血栓形成倾向、家族性高胆固醇血症、家族性地中海热、脆性X综合征、戈谢病、血色沉着病、前脑无裂畸形、亨廷顿病、先天性代谢缺陷、克兰费尔特综合征、马凡综合征、甲基丙二酸血症、肌强直性营养不良、神经纤维瘤病、努南综合征、成骨不全症、帕金森病、苯丙酮尿症、Poland Anomaly、卟啉症、早衰症、色素性视网膜炎、重症联合免疫缺陷、镰状细胞病、脊髓性肌萎缩、家族性黑蒙性白痴、地中海贫血、三甲基胺尿症、特纳综合征、腭心面综合征或威尔逊病。