CN113567219A - 一种蛋白凝胶电泳染色装置及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种蛋白凝胶电泳染色装置，其结构包括：蛋白凝胶电泳槽和染色拍照装置。采用多板组合和适当位置开孔解决胶条和胶板之间漏胶问题，在玻璃板上设置水平线实现凝胶液的准确滴入和胶面的水平，在染色过程中采用多泵依次冲淋和洗胶盘晃动实现胶片的均匀染色，在拍照过程中采用外接光源和可移动支架实现实验数据记录。该装置不仅能够降低实验人员的工作的劳累程度，还能对液体进行回收再利用，从而减少实验人员与药剂接触的次数，降低实验药剂对环境的污染。
Description
技术领域
本发明属于生物化学实验装置与方法领域，具体涉及一种蛋白质凝胶电泳染色装置及使用方法。
背景技术
伴随科学技术的不断发展以及对科学研究的深入，从蛋白质层面解析科学问题成为一种重要的实验技术，凝胶电泳作为一种重要研究手段，被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学。聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis）简称PAGE，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。其具有极高的分辨率，覆盖范围在10-3000bp的DNA片段，因此常用于分离、纯化蛋白质。其可划分为两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）。
有三种常用的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法：blue native（BN-PAGE），clearnative（CN-PAGE），quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）。BlueNative PAGE是最古老的Native-PAGE技术，是以考马斯亮蓝作为电泳分离后蛋白质鉴定染料的一种电泳方法。在分析蛋白质-蛋白质相互作用以及膜蛋白复合物方面有很大的优势，其分离范围在100KDa-10MDa。Clear Native PAGE是通过除染色以的其它方法如SLS鉴定蛋白的电泳技术。然而，这种方法最大的应用还是研究蛋白质-蛋白质相互作用，特别是和质谱联用。Clear Native PAGE是在聚丙烯酰胺凝胶中分离酸性水溶性蛋白和膜蛋白（PI<7）的电泳技术，分辨率通常比BN-PAGE低。迁移距离决定于蛋白的固有电荷和凝胶孔径大小。QPNC-PAGE（quantitative preparative native continuous polyacrylamide gelelectrophoresis）是一种应用于生物化学和生物有机化学的根据等电点分离蛋白的高分辨技术。这种凝胶电泳被生物学家应用于独立活性或天然金属蛋白样品或正确或非正确折叠的可溶性的与金属辅助因子结合的蛋白混合物的鉴定。
SDS-PAGE （十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰胺，sodium dodecyl sulfate –polyacrylamide gel electrophoresis）凝胶电泳是一种可以根据蛋白质的分子量分离样本中蛋白的技术。在电荷的影响下分离大分子称为电泳（electrophoresis）。在SDS-PAGE中使用的凝胶是聚丙烯酰胺（polyacrylamide），使蛋白质呈线性化的试剂是SDS，因此得名SDS-PAGE。
Western blot是一项在复杂样本中检测蛋白质表达水平的技术，至今已有超过40年的历史，并成为了蛋白质研究中最常用的工具之一。其操作流程包括：首先通过SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳使蛋白质样本分离，再将凝胶上的蛋白电泳转移到固相载体上（NC膜或者PVDF膜），方便后续印迹显影操作，然后使用封闭液将封闭非特异位点，以避免抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白质即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过化学发光法或荧光方法进行蛋白条带显影。其中SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳条件是关系到蛋白条带是否均一、整齐、干净的关键步骤。
现有蛋白凝胶电泳染色存在以下问题：1.无法准确判断浓缩胶和分离胶的体积比；2.玻璃板与胶条之间存在漏胶现象和底部封胶困难；3.胶片易破碎；4.浓缩胶中的样品不在同一水平线；5.染色和拍照过程费时费力。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于提供一种蛋白凝胶电泳染色装置及使用方法，采用多板组合和适当位置开孔解决胶条和胶板之间漏胶问题，在玻璃板上设置水平线实现凝胶液的准确滴入和胶面的水平，在染色过程中采用多泵依次冲淋和洗胶盘晃动实现胶片的均匀染色，在拍照过程中采用外接光源和可移动支架实现实验数据记录。为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种蛋白凝胶电泳染色装置，其结构包括：蛋白凝胶电泳槽和染色拍照装置。
优选的，蛋白凝胶电泳槽，装置包括：撬孔位于玻璃板一侧边缘位置，且大小与撬片相似，电热丝预埋在玻璃板边缘，在玻璃板的三分之一处有一条水平线，水平线的中间位置设有水平仪，水平仪的内部有水准泡；支架置于上胶条和下胶条的内部，在上胶条的底端偏向外侧位置设有弹簧扣，下胶条顶端偏外侧位置设有卡扣；下胶条顶端偏内侧设有引导齿，上胶条底端偏内侧位置设有引导齿孔；电泳固定架上下两端设有固定孔，电泳固定架中部偏下位置设有注胶口；固定螺栓贯穿电泳固定架上的固定孔起到固定作用，在固定螺栓的两侧有固定螺母，水平调节旋钮位于电泳固定架的底部。
优选的，水平线的中间位置所设的水平仪能够指示装置是否处于水平状态，并能够通过转动水平调节旋钮进行调节；
优选的，水平仪中间的水准泡是一个处于液体介质的小气泡，当装置处于水平面时，小气泡恰好位于液体介质的中间位置；
优选的，水平线可进行位置的水平调节，一般状态下则处于玻璃板的三分之一处；
优选的，电热丝可通过外接电源对玻璃板的边缘进行局部加热，能够减缓封胶液的凝固速度、增加流速从而实现快速均匀封胶的目的；
优选的，撬片下端平口外部包有硅胶质材料，防止在转动过程中对撬孔的物理磨损；
优选的，上胶条左右对称，内部含有由金属制成的支架，能够支撑上胶条使上胶条不易发生形变。
优选的，上胶条末端设有引导齿孔，引导齿插入引导齿孔而使上胶条和下胶条在连接过程中不易发生错位。
优选的，下胶条顶端偏外侧位置所设的卡扣在引导齿孔和引导齿的作用下使弹簧扣准确插入并达到上胶条和下胶条的紧密连接；
优选的，电泳固定架中部偏下位置所设的注胶口能够对玻璃板和下胶条之间的缝隙进行填充，防止漏胶；
优选的，电泳固定架外侧的2个固定孔能够将装置以“电泳固定架-玻璃板-电泳固定架”此类连接方式进行组装，实现了多胶板共同工作的功能；
优选的，染色拍照装置由箱体、盖子以及上部支架组成。装置内设有4个升降柱且均匀分布在四周，中心位置设有1个固定柱，右侧设有染液槽和冲洗槽，在染液槽和冲洗槽内部设有独立水泵，水泵末端分别设有排废口和染液出口以及冲洗液出口；箱体上部四周设有灯带，在灯带的上方有一可拆卸盖子。盖子一侧位置标有刻度尺。外壳最上方有拍照设备固定架，支撑杆用球状关节将拍照设备固定架和外壳连接，固定模块位于升降柱中部位置，并且用伸缩弹簧将固定模块和装置底部连接，拨动杆位于升降柱底部。洗胶盘四周设有排列紧密的洗液流动口，在洗胶盘底部位置设有升降柱固定卡扣，且卡扣位置与装置内的4个升降柱、中心位置的固定柱相匹配，开关位于外壳正面一侧。
优选的，装置内壁采用光滑且易清洗的材质进行涂装。
优选的，装置四周设计的灯带能够通过控制灯光开关实现灯带的开关和光源的明暗程度。
优选的，实验过程中需要进行多染液染色时，可利用染液槽排废口对使用过的染色液进行回收利用。
优选的，固定柱升降开关可控制固定柱的升降实现胶片与染液、冲洗液的分离。
优选的，盖子的一侧设置的刻度尺不仅能够起到拍摄调节位置的作用，还能够对目的蛋白进行预判（依照蛋白Marker在不同时间、电压条件下迁移速度快慢）。
优选的，染液槽水泵的一端伸入染液槽所盛的染色液中，另一端连接染色液出口，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色。
优选的，冲洗槽水泵的一端伸入冲洗槽所盛的冲洗液中，另一端连接冲洗液出口，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色。
优选的，支撑杆采用多节连接，能够在拍摄过程中调节视野大小
优选的，支撑杆设有4根，通过球状关节实现拍照设备固定夹的灵活转动。当拍摄时可以灵活移动拍照设备固定夹实现胶片不同区域的拍摄。
优选的，洗胶盘底部设置的5个升降柱固定卡扣与4个升降柱、固定柱之间均用球状关节进行连接。
优选的，洗胶盘底部设置的5个升降柱固定卡扣能够对洗胶盘进行固定，使洗胶盘在匀速转动过程中不发生位移，并且5个升降柱固定卡扣的位置与4个升降柱和固定柱相对应。
优选的，洗胶盘四周设有排布均匀的洗液流动口，使得染色液和冲洗液得以均匀流动。
优选的，升降柱底部的拨动杆通过角度差转动实现洗胶盘的匀速晃动，并且4个拨动杆之间的角度差为90°。
优选的，伸缩弹簧通过弹簧拉力拉伸固定模块将升降柱进行复位。
一种蛋白凝胶电泳染色方法，具体包括：
（1）玻璃板组装：将玻璃板嵌套入下胶条中；下胶条顶端偏向内侧的引导齿准确插入位于上胶条底端偏向内侧的引导齿孔中确保上胶条底端偏向外侧的弹簧扣插入位于下胶条顶端偏向外侧的卡扣中。
（2）电泳槽总装：将已被上胶条和下胶条固定的玻璃板依次按照“电泳固定架-玻璃板-固定架”进行组装；固定螺栓通过固定孔将上一步所组装的装置连接在一起。
（3）装置水平调节：将上一步组装的电泳槽放置于桌面，通过旋转位于电泳固定架底部的水平调节旋钮使得水准泡位于水平仪的正中间进而使装置处于水平面。
（3）封胶：接通外接电源使电热丝加热玻璃板的边缘，打开位于电泳固定架上的注胶口，将封胶液滴入。
（4）制胶电泳：将配制好的胶液从玻璃板的边缘位置倒入，待胶片凝固后接通电源进行实验。
（5）剥胶：将已结束电泳的装置按照封胶制胶过程中的步骤（1）和（2）操作进行反向拆除，将仅剩玻璃板的装置水平放置，撬片插入撬孔中，通过顺时针旋转撬片实现剥胶工作。
（6）固定洗胶盘：将剥离的胶片平铺在洗胶盘中，并将洗胶盘底部设置的升降柱固定卡扣与装置内部设置的升降柱以及固定柱相连接达到固定的目的，合上盖子。
（7）染色及冲洗：在染液槽中加入相对应的染色液，打开染液槽水泵开关使染液槽水泵运行，打开升降柱开关使得洗胶盘开始规则的旋转摇晃；关闭染液槽水泵开关使染液槽水泵停止运行并打开冲洗槽水泵开关使冲洗槽水泵开关工作对胶片进行冲洗；完成冲洗工作后，打开固定柱升降开关使得洗胶盘中多余的液体排出。
（8）拍照：将拍照设备固定在拍照设备固定夹上，打开灯光开关通过旋转调节灯光亮度；通过调节4个支撑杆确定最佳拍摄位置。
有益效果：本发明提供了一种蛋白凝胶电泳染色装置及使用方法，该装置包括蛋白凝胶电泳槽和蛋白凝胶电泳染色拍照装置。蛋白凝胶电泳槽特殊的开孔设计能够对底部漏胶现象进行解决；其中玻璃板边缘位置设计的电热丝能够减缓封胶液凝固速度从而达到封胶边缘的平整；玻璃板三分之一处设计的水平线、水平仪以及水准泡使得装置能够在水平面上进行实验操作，从而极大程度上减轻了拍摄时候胶片角度摆放工作；蛋白凝胶电泳染色拍照装置中的灯带设计能够在拍摄过程中进行补光；上方的拍摄装置不但能够随意转动寻求最佳视野，而且对拍照设备没有具体的要求。总而言之，该装置不仅能够降低实验人员的工作的劳累程度，还能对液体进行回收再利用，从而减少实验人员与药剂接触的次数，降低实验药剂对环境的污染。
附图说明
图1是一种蛋白凝胶电泳槽玻璃板示意图。
图2是一种蛋白凝胶电泳槽胶条结构示意图。
图3是一种蛋白凝胶电泳槽结构示意图。
图4是一种蛋白凝胶电泳染色拍照结构示意图。
图5是一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置盖子结构示意图。
图6是一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置内部结构示意图。
图7是一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置支撑杆示意图。
图8是一种蛋白凝胶电泳洗胶盘底部结构示意图。
图9是一种蛋白凝胶电泳洗胶盘结构示意图。
图10是一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置中升降柱工作原理图。
图中，上胶条1，弹簧扣2，引导齿3，支架4，下胶条5，注胶口6，撬片7，撬孔8，电热丝9，水平线10，水平仪11，水准泡12，电泳固定架13，固定螺母14，固定螺栓15，水平调节旋钮16，卡扣17，玻璃板18，引导齿孔19，固定孔20。灯带21，升降柱22，固定柱23，支撑杆24，拍照设备固定夹25，排废口26（染液槽排废口26-1、冲洗槽排废口26-2），开关27（染液槽水泵开关27-1、升降柱开关27-2、冲洗槽水泵开关27-3、灯光开关27-4、固定柱升降开关27-5），外壳28，染液槽29，冲洗槽30，水泵31（染液槽水泵31-1、冲洗槽水泵31-2），染液出口32，冲洗液出口33，盖子34，刻度尺35，洗胶盘36，洗液流动口37，升降柱固定卡扣38，球状关节39，固定模块40，伸缩弹簧41，拨动杆42。
具体实施方法
本发明专利下述实施例中使用方法和装置，如无特殊说明，均为常规方法和装置；所用器材、试剂均为试剂公司购买的常规器材和试剂。为使本发明专利的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例对本发明专利的具体实施方式进行详细说明。这些优选实施方式的示例在具体实施例中进行了例示。
在此，还需要说明的是，为了避免因不必要的细节而模糊了本发明专利的技术方案，在实施例中仅仅示出了与根据本发明专利的方案密切相关的技术方案和/或处理步骤，而省略了关系不大的其他细节。
实施例1
本实施例提供一种蛋白凝胶电泳槽，如附图1-3所示，其结构包括：撬孔8位于玻璃板18一侧边缘位置，且尺寸略大于撬片7，电热丝9预埋在玻璃板18边缘，在玻璃板18的三分之一处有一条水平线10，水平线10的中间位置设有水平仪11，水平仪11的内部有水准泡12；支架4置于上胶条1和下胶条5的内部，在上胶条1的底端偏向外侧位置设有弹簧扣2，下胶条5顶端偏外侧位置设有卡扣17；下胶条5顶端偏内侧设有引导齿3，上胶条1底端偏内侧位置设有引导齿孔19；电泳固定架13外侧设有2个固定孔20，电泳固定架13中部偏下位置设有注胶口6；固定螺栓15贯穿电泳固定架13上的固定孔20起到固定作用，在固定螺栓15的两侧有固定螺母14，水平调节旋钮16位于电泳固定架13的底部。
进一步地，水平线10的中间位置所设的水平仪11能够指示装置是否处于水平状态，并能够通过转动水平调节旋钮16进行调节。
进一步地，水平仪11中间的水准泡12是一个处于液体介质的小气泡，当装置处于水平面时，小气泡12恰好位于液体介质的中间位置。
进一步地，水平线10可进行位置的水平调节，一般状态下则处于玻璃板18的三分之一处。
进一步地，电热丝9可通过外接电源对玻璃板18的边缘进行局部加热，能够减缓封胶液的凝固速度、增加流速从而实现快速均匀封胶的目的。
进一步地，撬片7下端平口外部包有硅胶质材料，防止在转动过程中对撬孔8的物理磨损。
进一步地，上胶条1左右对称，内部含有由金属制成的支架4，能够支撑上胶条1使上胶条1不易发生形变。
进一步地，上胶条1末端设有引导齿孔19，引导齿3插入引导齿孔19而使上胶条1和下胶条5在连接过程中不易发生错位。
进一步地，下胶条5顶端偏外侧位置所设的卡扣17在引导齿孔19和引导齿3的作用下使弹簧扣2准确插入并达到上胶条1和下胶条5的紧密连接。
进一步地，电泳固定架13中部偏下位置所设的注胶口6能够对玻璃板18和下胶条5之间的缝隙进行填充，防止漏胶。
进一步地，电泳固定架13外侧的2个固定孔20能够将装置以“电泳固定架13-玻璃板18-电泳固定架13”此类连接方式进行组装，实现了多胶板共同工作的功能。
实施例2
本实施例提供一种蛋白凝胶电泳电泳槽使用方法，结合实施例1所述的装置，包括如下步骤：
（1）玻璃板组装：将玻璃板18嵌套入下胶条5中；下胶条5顶端偏向内侧的引导齿3准确插入位于上胶条1底端偏向内侧的引导齿孔19中确保上胶条1底端偏向外侧的弹簧扣2插入位于下胶条5顶端偏向外侧的卡扣17中。
（2）电泳槽总装：将已被上胶条1和下胶条5固定的玻璃板18依次按照“电泳固定架13-玻璃板18-固定架13”进行组装。固定螺栓15通过固定孔20将上一步所组装的装置连接在一起。
（3）装置水平调节：将上一步组装的电泳槽放置于桌面，通过旋转位于电泳固定架13底部的水平调节旋钮16使得水准泡12位于水平仪11的正中间进而使装置处于水平面。
（3）封胶：接通外接电源使电热丝9加热玻璃板18的边缘，打开位于电泳固定架13上的注胶口6，将封胶液滴入。
（4）制胶电泳：将配制好的胶液从玻璃板18的边缘位置倒入，待胶片凝固后接通电源进行实验。
（5）剥胶：将已结束电泳的装置按照封胶制胶过程中的（1）、（2）操作进行反向拆除，将仅剩玻璃板18的装置水平放置，撬片7插入撬孔8中，通过顺时针旋转撬片7实现剥胶工作。
实施例3
本实施例提供一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置，如附图4-10所示，装置包括：
装置内设有4个升降柱22且均匀分布在四周，中心位置设有1个固定柱23，右侧设有染液槽29和冲洗槽30，在染液槽29和冲洗槽30内部设有独立水泵（染液槽水泵31-1、冲洗槽水泵31-2），水泵（染液槽水泵31-1和冲洗槽水泵31-2）末端分别设有排废口26（染液槽排废口26-1、冲洗槽排废口26-2）和染液出口32以及冲洗液出口33。箱体上部四周设有灯带21，在灯带21的上方有一可拆卸盖子34。盖子34一侧位置标有刻度尺35。外壳28最上方有拍照设备固定架25，支撑杆24用球状关节39将拍照设备固定架25和外壳连接28，固定模块40位于升降柱22中部位置，并且用伸缩弹簧41将固定模块40和装置底部连接，拨动杆42位于升降柱22底部。洗胶盘36四周设有排列紧密的洗液流动口37，在洗胶盘36底部位置设有升降柱固定卡扣38，且卡扣位置与装置内的4个升降柱22、中心位置的固定柱23相匹配，开关27（染液槽水泵开关27-1、升降柱开关27-2、冲洗槽水泵开关27-3、灯光开关27-4、固定柱升降开关27-5）位于外壳28正面一侧。
进一步地，装置内壁采用光滑且易清洗的材质进行涂装。
进一步地，如图4所示，装置四周设计的灯带21能够通过控制灯光开关27-4实现灯带21的开关和光源的明暗程度。
进一步地，如图4所示，实验过程中需要进行多染液染色时，可利用染液槽排废口26-1对使用过的染色液进行回收利用。
进一步地，如图4所示，固定柱升降开关27-5可控制固定柱23的升降实现胶片与染液、冲洗液的分离。
进一步地，如图5所示，盖子34的一侧设置的刻度尺35不仅能够起到拍摄调节位置的作用，还能够对目的蛋白进行预判（依照蛋白Marker在不同时间、电压条件下迁移速度快慢）。
进一步地，如图6所示，染液槽水泵31-1的一端伸入染液槽29所盛的染色液中，另一端连接染色液出口32，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色。
进一步地，如图6所示，冲洗槽水泵31-2的一端伸入冲洗槽30所盛的冲洗液中，另一端连接冲洗液出口33，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色。
进一步地，如图7所示，支撑杆24采用多节连接，能够在拍摄过程中调节视野大小
进一步地，如图7所示，支撑杆24设有4根，通过球状关节39实现拍照设备固定夹25的灵活转动。当拍摄时可以灵活移动拍照设备固定夹25实现胶片不同区域的拍摄。
进一步地，洗胶盘36底部设置的5个升降柱固定卡扣38与4个升降柱22、固定柱23之间均用球状关节进行连接。
进一步地，如图8所示，洗胶盘36底部设置的5个升降柱固定卡扣38能够对洗胶盘36进行固定，使洗胶盘36在匀速转动过程中不发生位移，并且5个升降柱固定卡扣38的位置与4个升降柱22和固定柱23相对应。
进一步地，如图9所示，洗胶盘36四周设有排布均匀的洗液流动口37，使得染色液和冲洗液得以均匀流动。
进一步地，如图10所示，升降柱22底部的拨动杆42通过角度差转动实现洗胶盘36的匀速晃动，并且4个拨动杆之间的角度差为90°。
进一步地，如图10所示，伸缩弹簧41通过弹簧拉力拉伸固定模块40将升降柱22进行复位。
实施例4
本实施例提供了一种蛋白凝胶电泳染色拍照方法，采用实施例3所述的一种蛋白凝胶电泳染色拍照装置，包括以下步骤：
（1）固定洗胶盘：将剥离的胶片平铺在洗胶盘36中，并将洗胶盘36底部设置的升降柱固定卡扣38与装置内部设置的升降柱22以及固定柱23相连接达到固定的目的，合上盖子34。
（2）染色及冲洗：在染液槽29中加入相对应的染色液，打开染液槽水泵开关27-1使染液槽水泵31-1运行，打开升降柱开关27-2使得洗胶盘36开始规则的旋转摇晃；关闭染液槽水泵开关27-1使染液槽水泵31-1停止运行并打开冲洗槽水泵开关27-3使冲洗槽水泵开关31-2工作对胶片进行冲洗；完成冲洗工作后，打开固定柱升降开关27-5使得洗胶盘36中多余的液体排出。
（3）拍照：将拍照设备固定在拍照设备固定夹25上，打开灯光开关27-4通过旋转调节灯光亮度；通过调节4个支撑杆24确定最佳拍摄位置。
实施例5
本实施例提供了一种蛋白凝胶电泳染色装置使用方法，采用实施例1和实施例3的工具，结合实施例2和实施例4的方法，具体包括：
（1）玻璃板组装：将玻璃板18嵌套入下胶条5中；下胶条5顶端偏向内侧的引导齿3准确插入位于上胶条1底端偏向内侧的引导齿孔19中确保上胶条1底端偏向外侧的弹簧扣2插入位于下胶条5顶端偏向外侧的卡扣17中。
（2）电泳槽总装：将已被上胶条1和下胶条5固定的玻璃板18依次按照“电泳固定架13-玻璃板18-固定架13”进行组装；固定螺栓15通过固定孔20将上一步所组装的装置连接在一起。
（3）装置水平调节：将上一步组装的电泳槽放置于桌面，通过旋转位于电泳固定架13底部的水平调节旋钮16使得水准泡12位于水平仪11的正中间进而使装置处于水平面。
（3）封胶：接通外接电源使电热丝9加热玻璃板18的边缘，打开位于电泳固定架13上的注胶口6，将封胶液滴入。
（4）制胶电泳：将配制好的胶液从玻璃板18的边缘位置倒入，待胶片凝固后接通电源进行实验。
（5）剥胶：将已结束电泳的装置按照封胶制胶过程中的（1）、（2）操作进行反向拆除，将仅剩玻璃板18的装置水平放置，撬片7插入撬孔8中，通过顺时针旋转撬片7实现剥胶工作。
（6）固定洗胶盘：将剥离的胶片平铺在洗胶盘36中，并将洗胶盘36底部设置的升降柱固定卡扣38与装置内部设置的升降柱22以及固定柱23相连接达到固定的目的，合上盖子34。
（7）染色及冲洗：在染液槽29中加入相对应的染色液，打开染液槽水泵开关27-1使染液槽水泵31-1运行，打开升降柱开关27-2使得洗胶盘36开始规则的旋转摇晃；关闭染液槽水泵开关27-1使染液槽水泵31-1停止运行并打开冲洗槽水泵开关27-3使冲洗槽水泵开关31-2工作对胶片进行冲洗；完成冲洗工作后，打开固定柱升降开关27-5使得洗胶盘36中多余的液体排出。
（8）拍照：将拍照设备固定在拍照设备固定夹25上，打开灯光开关27-4通过旋转调节灯光亮度；通过调节4个支撑杆24确定最佳拍摄位置。
以上所述仅是本申请的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本申请的保护范围。
Claims (10)
1.一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于结构包括：蛋白凝胶电泳槽和染色拍照装置；所述蛋白凝胶电泳槽结构包括：撬孔位于玻璃板一侧边缘位置，且大小与撬片相似，电热丝预埋在玻璃板边缘，在玻璃板的三分之一处有一条水平线，水平线的中间位置设有水平仪，水平仪的内部有水准泡；支架置于上胶条和下胶条的内部，在上胶条的底端偏向外侧位置设有弹簧扣，下胶条顶端偏外侧位置设有卡扣；下胶条顶端偏内侧设有引导齿，上胶条底端偏内侧位置设有引导齿孔；电泳固定架上下两端设有固定孔，电泳固定架中部偏下位置设有注胶口；固定螺栓贯穿电泳固定架上的固定孔起到固定作用，在固定螺栓的两侧有固定螺母，水平调节旋钮位于电泳固定架的底部；
所述染色拍照装置由箱体、盖子以及上部支架组成，装置内设有4个升降柱且均匀分布在四周，中心位置设有1个固定柱，右侧设有染液槽和冲洗槽，在染液槽和冲洗槽内部设有独立水泵，水泵末端分别设有排废口和染液出口以及冲洗液出口；箱体上部四周设有灯带，在灯带的上方有一可拆卸盖子，盖子一侧位置标有刻度尺，外壳最上方有拍照设备固定架，支撑杆用球状关节将拍照设备固定架和外壳连接，固定模块位于升降柱中部位置，并且用伸缩弹簧将固定模块和装置底部连接，拨动杆位于升降柱底部；洗胶盘四周设有排列紧密的洗液流动口，在洗胶盘底部位置设有升降柱固定卡扣，且卡扣位置与装置内的4个升降柱、中心位置的固定柱相匹配，开关位于外壳正面一侧。
2.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述水平线的中间位置所设的水平仪能够指示装置是否处于水平状态，并能够通过转动水平调节旋钮进行调节；所述水平仪中间的水准泡是一个处于液体介质的小气泡，当装置处于水平面时，小气泡恰好位于液体介质的中间位置。
3.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述水平线可进行位置的水平调节，一般状态下则处于玻璃板的三分之一处；所述电热丝可通过外接电源对玻璃板的边缘进行局部加热，能够减缓封胶液的凝固速度、增加流速从而实现快速均匀封胶的目的。
4.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述撬片下端平口外部包有硅胶质材料，防止在转动过程中对撬孔的物理磨损；所述上胶条左右对称，内部含有由金属制成的支架，能够支撑上胶条使上胶条不易发生形变；所述上胶条末端设有引导齿孔，引导齿插入引导齿孔而使上胶条和下胶条在连接过程中不易发生错位。
5.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述下胶条顶端偏外侧位置所设的卡扣在引导齿孔和引导齿的作用下使弹簧扣准确插入并达到上胶条和下胶条的紧密连接；所述电泳固定架中部偏下位置所设的注胶口能够对玻璃板和下胶条之间的缝隙进行填充，防止漏胶；所述电泳固定架外侧的2个固定孔能够将装置以“电泳固定架-玻璃板-电泳固定架”此类连接方式进行组装，实现了多胶板共同工作的功能。
6.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述固定柱升降开关可控制固定柱的升降实现胶片与染液、冲洗液的分离；所述盖子的一侧设置的刻度尺不仅能够起到拍摄调节位置的作用，还能够对目的蛋白进行预判；所述染液槽水泵的一端伸入染液槽所盛的染色液中，另一端连接染色液出口，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色。
7.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述冲洗槽水泵的一端伸入冲洗槽所盛的冲洗液中，另一端连接冲洗液出口，若对实验有特殊要求时，可在此末端连接喷淋头，实现液体的混匀和均匀染色；所述支撑杆采用多节连接，能够在拍摄过程中调节视野大小；所述支撑杆设有4根，通过球状关节实现拍照设备固定夹的灵活转动，当拍摄时可以灵活移动拍照设备固定夹实现胶片不同区域的拍摄。
8.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述洗胶盘底部设置的5个升降柱固定卡扣与4个升降柱、固定柱之间均用球状关节进行连接；所述洗胶盘底部设置的5个升降柱固定卡扣能够对洗胶盘进行固定，使洗胶盘在匀速转动过程中不发生位移，并且5个升降柱固定卡扣的位置与4个升降柱和固定柱相对应。
9.根据权利要求1所述的一种蛋白凝胶电泳染色装置，其特征在于所述洗胶盘四周设有排布均匀的洗液流动口，使得染色液和冲洗液得以均匀流动；所述升降柱底部的拨动杆通过角度差转动实现洗胶盘的匀速晃动，并且4个拨动杆之间的角度差为90°；所述伸缩弹簧通过弹簧拉力拉伸固定模块将升降柱进行复位。
10.一种蛋白凝胶电泳染色方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）玻璃板组装：将玻璃板嵌套入下胶条中；下胶条顶端偏向内侧的引导齿准确插入位于上胶条底端偏向内侧的引导齿孔中确保上胶条底端偏向外侧的弹簧扣插入位于下胶条顶端偏向外侧的卡扣中；
（2）电泳槽总装：将已被上胶条和下胶条固定的玻璃板依次按照“电泳固定架-玻璃板-固定架”进行组装；固定螺栓通过固定孔将上一步所组装的装置连接在一起；
（3）装置水平调节：将上一步组装的电泳槽放置于桌面，通过旋转位于电泳固定架底部的水平调节旋钮使得水准泡位于水平仪的正中间进而使装置处于水平面；
（3）封胶：接通外接电源使电热丝加热玻璃板的边缘，打开位于电泳固定架上的注胶口，将封胶液滴入；
（4）制胶电泳：将配制好的胶液从玻璃板的边缘位置倒入，待胶片凝固后接通电源进行实验；
（5）剥胶：将已结束电泳的装置按照封胶制胶过程中的步骤（1）和（2）操作进行反向拆除，将仅剩玻璃板的装置水平放置，撬片插入撬孔中，通过顺时针旋转撬片实现剥胶工作；
（6）固定洗胶盘：将剥离的胶片平铺在洗胶盘中，并将洗胶盘底部设置的升降柱固定卡扣与装置内部设置的升降柱以及固定柱相连接达到固定的目的，合上盖子；
（7）染色及冲洗：在染液槽中加入相对应的染色液，打开染液槽水泵开关使染液槽水泵运行，打开升降柱开关使得洗胶盘开始规则的旋转摇晃；关闭染液槽水泵开关使染液槽水泵停止运行并打开冲洗槽水泵开关使冲洗槽水泵开关工作对胶片进行冲洗；完成冲洗工作后，打开固定柱升降开关使得洗胶盘中多余的液体排出；
（8）拍照：将拍照设备固定在拍照设备固定夹上，打开灯光开关通过旋转调节灯光亮度；通过调节4个支撑杆确定最佳拍摄位置。
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| CN202110833392.XA CN113567219A (zh) | 2021-07-22 | 2021-07-22 | 一种蛋白凝胶电泳染色装置及方法 |
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