CN113543778A - 使用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗癌症的治疗方法和组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供通过向需要其的患者施用治疗有效量的6,8‑双苄硫基‑辛酸和自噬抑制剂治疗癌症的方法和组合物。

Description

使用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗癌症的治疗方法 和组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年12月20日提交的美国临时专利申请序列号62/782,928；2019年1月17日提交的美国临时专利申请序列号62/793,667；2019年4月16日提交的美国临时专利申请序列号62/834,475；和2019年5月30日提交的美国临时专利申请序列号62/854,599的权益和优先权；将其中每篇的内容通过引用并入本文中。

发明领域

本发明提供通过施用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗癌症的方法和组合物。本发明还提供通过施用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗除透明细胞肉瘤以外的癌症的方法和组合物。

背景技术

CPI-613(6,8-双-苄硫基-辛酸)是第一类研究中的小分子(硫辛酸盐(lipoate)类似物)，其靶向其对许多癌细胞常见的改变的能量代谢。CPI-613已经在多个I、I/II和II期临床研究中进行了评价，并且已经被授予了用于治疗胰腺癌、急性骨髓性白血病(AML)、外周T细胞淋巴瘤(PTCL)、伯基特淋巴瘤和骨髓增生异常综合征(MDS)的孤儿药资格认证(orphan drug designation)。

需要提高用CPI-613治疗癌症的安全性和功效。本发明满足了这种需要并提供了其它相关的优点。

发明简述

本发明提供通过向需要其的人类患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗所述患者中的癌症的方法和组合物。癌症可以是复发性或难治性的。癌症可以是淋巴瘤、白血病、癌瘤、肉瘤、黑素瘤、骨髓瘤、脑或脊髓癌、胚细胞瘤、生殖细胞瘤、胰腺癌、结肠直肠癌、骨髓增生异常综合征或前列腺癌。在某些实施方案中，癌症是淋巴瘤、白血病、癌瘤、肉瘤、黑素瘤或骨髓瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，包括本妥昔单抗(brentuximab vedotin)和PD-1抑制剂失败的患者中的复发性或难治性霍奇金淋巴瘤、复发性或难治性T细胞非霍奇金淋巴瘤、复发性或难治性伯基特淋巴瘤、或具有MYC和BCL2和/或BCL6重排的高级别B细胞淋巴瘤。

本发明还提供通过向需要其的人类患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗所述患者中的除透明细胞肉瘤之外的癌症的方法和组合物。癌症可以是复发性或难治性的。癌症可以是淋巴瘤、白血病、癌瘤、非透明细胞肉瘤、黑素瘤、骨髓瘤、脑或脊髓癌、胚细胞瘤、生殖细胞瘤、胰腺癌、结肠直肠癌、骨髓增生异常综合征或前列腺癌。在某些实施方案中，癌症是淋巴瘤、白血病、癌瘤、非透明细胞肉瘤、黑素瘤或骨髓瘤。

在以下详细说明中，更详细地描述了本发明的前述方面与另外的实施方案。

附图简述

图1描述了在K562和MFL2 AML细胞中6,8-双-苄硫基-辛酸诱导自噬。HBSS＝Hanks's平衡盐溶液。

图2描述了用氯喹和CPI-613的组合体外处理K562和OCI-AML3细胞。所列的所有浓度均为μM。

图3描述了用CPI-613和氯喹的组合治疗C57Bl/6小鼠中的MFL2同源肿瘤。

图4描述了用二甲双胍和CPI-613的组合体外处理MFL2细胞。所列的所有浓度均为μM。Met＝二甲双胍，CPI＝CPI-613。

图5描述了用二甲双胍和CPI-613(Met+CPI)的组合治疗C57Bl/6小鼠中的MFL2同源肿瘤。

图6描述了用2-脱氧葡萄糖和CPI-613的组合体外处理MFL2细胞。CPI＝CPI-613(μM)，2DG＝2-脱氧葡萄糖(mM)。

图7描述了用氯喹、2-脱氧葡萄糖和CPI-613的组合体外处理OCI-AML3细胞和MFL2细胞。

图8描述了单独或组合使用氯喹、羟氯喹或CPI-613体外处理PANC-1细胞。

图9描述了单独或组合使用氯喹、羟氯喹或CPI-613体外处理AsPC-1细胞。

图10描述了单独或组合使用氯喹、羟氯喹或CPI-613体外处理BxPC-3细胞。

图11描述了单独或组合使用氯喹或CPI-613体外处理MIA PaCa-2细胞。

图12描述了用氯喹和CPI-613的组合体外处理CoLo 205和LoVo细胞。

图13描述了用氯喹和CPI-613的组合体外处理SW620和HT-29细胞。

图14描述了用氯喹和CPI-613的组合体外处理H460细胞。

图15描述了口服6,8-双-苄硫基-辛酸在小鼠中的人非小细胞肺癌异种移植物中的抗肿瘤功效。

图16描述了口服6,8-双-苄硫基-辛酸在小鼠中的人胰腺癌异种移植物中的抗肿瘤功效。

图17呈现了6,8-双-苄基硫基-辛酸与Eudragit L100或醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)的固体无定形分散体制剂(分别为顶部和中部衍射图案)和晶体6,8双-苄硫基-辛酸(底部衍射图案)的X射线粉末衍射图案。

详细说明

本发明提供通过向需要其的人类患者施用治疗有效量的6,8双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗所述患者中的癌症的方法和组合物。本发明还提供了通过向需要其的人类患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂治疗所述患者中除透明细胞肉瘤之外的癌症的方法和组合物。

除非另有说明，否则本发明的实施采用药物化学、药理学和生物化学的常规技术。本发明的各个方面在以下部分中进行阐述；然而，在一个特定部分中描述的本发明的各个方面不限于任何特定部分。

I.定义

为了便于理解本发明，多个术语和短语的定义如下。

除非上下文不适当，否则如本文使用的术语“一个(种)”指“一个(种)或多个(种)”，并且包括复数。

术语“6,8-双-苄硫基-辛酸”指被称为devimistat或CPI-613的化合物，具有化学结构

本发明的组合物中包含的某些化合物可以以特定的几何或立体异构形式存在。本发明包括所有这类化合物，包括顺式和反式异构体、R-和S-对映异构体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体、其外消旋混合物及其它混合物，这些都落入本发明的范围内。

如本文使用的术语“患者”指需要癌症治疗的人。

如本文使用的术语“治疗”包括导致病症、疾病、障碍等或其症状的改善、稳定或减缓进展的任何作用，例如减轻、减少、调节、改善或消除。例如，治疗可以包括减轻病症的症状或完全根除病症。作为另一个实例，治疗可以包括减缓疾病的进展，或预防或延迟其复发，例如维持治疗以预防或延迟复发。

“治疗有效量”是指足以抑制、停止或引起特定患者或患者群体中治疗的障碍或病症改善的化合物的量。例如，治疗有效量可以是足以减缓疾病进展或预防或延迟其复发(例如维持治疗以预防或延迟复发)的药物量。治疗有效量可以是对于特定疾病和待治疗患者，在实验室或临床环境中通过实验确定，或者可以是美国食品和药品管理局或同等国外机构的指南需要的量。应当理解，合适的剂型、剂量和给药途径的确定都在药学和医学领域的普通技术人员的水平范围内。

如本文使用的术语“药物组合物”指活性剂与惰性或活性赋形剂的组合，使得该组合物适于施用于人。

本文使用的短语“可药用的”指在合理判断的范围内，适用于与人类的组织进行接触，具有可接受的毒性、刺激、变态反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。

如本文使用的术语“可药用赋形剂”指适用于人类的任何标准药物赋形剂。对于赋形剂的实例，参见例如Martin,Remington's Pharmaceutical Sciences，第15版，MackPubl.Co.,Easton,PA[1975]。

如本文使用的术语“可药用盐”指适于施用人的本发明化合物的任何盐(例如酸或碱)。如本领域技术人员已知的，本发明化合物的“盐”可衍生自无机或有机酸和碱。酸的实例包括，但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯对磺酸、酒石酸、醋酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。碱的实例包括，但不限于碱金属(例如，钠)氢氧化物、碱土金属(例如，镁)氢氧化物、氨和式NW₃的化合物，其中W为C_1-4烷基等。

盐的其它实例包括使用美国专利No.8,263,653中描述的离子配对剂制备的盐，将其全部内容通过引用并入本文中。更进一步的离子配对剂可以根据“Handbook ofPharmaceutical Salts Properties,Selection and Use,UIPAC,Wiley-VCH,P.H.Stahl版”的指导进行选择，将其全部内容通过引用并入本文中。

对于治疗用途，本发明的化合物的盐预期是可药用的。然而，非可药用的酸或碱的盐也可发现其用于例如制备或纯化可药用化合物。

整个说明书中，当组合物被描述为具有、包括或包含特定组分时，或当方法和方法被描述为具有、包括或包含特定步骤时，预期另外存在基本上由所述组分组成或由所述组分组成的本发明的组合物，并且存在基本上由所述步骤组成或所述步骤组成的本发明的方法和方法。

作为一般情况，除非另有说明，否则指定百分比的组合物是按重量计的。此外，如果变量没有伴随有定义，则以该变量的之前定义为准。

II.治疗应用

本发明提供用于治疗需要其的人类患者中的癌症的方法和组合物，包括向所述患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂的步骤。本发明进一步提供用于治疗需要其的人类患者中除透明细胞肉瘤之外的癌症的方法和组合物，包括向患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂的步骤。

本发明人发现当暴露于CPI-613时，癌细胞显示自噬增加。不希望受到理论的束缚，本发明人假设当CPI-613干扰癌细胞的改变的代谢途径时，细胞开始饥饿并通过使用自噬应答以帮助供应其代谢需要。在治疗方案中，包括自噬抑制剂抑制癌细胞利用自噬来对抗CPI-613的作用，显著提高了效力。

癌症类型

在某些实施方案中，癌症与改变的能量代谢相关。在某些实施方案中，当与CPI-613接触时，癌症显示自噬增加。如本文使用的术语“癌症”包括骨髓增生异常综合征，并且在本发明的某些实施方案中，癌症是骨髓增生异常综合征。在某些实施方案中，癌症是高危骨髓增生异常综合征(MDS)。在某些实施方案中，癌症是当低甲基化治疗时无反应、进展或复发的患者中的高危MDS。

所述方法可根据癌症的严重性或类型进一步表征。在某些实施方案中，癌症是I期或早期癌症，其中癌症较小且仅在一个区域中。在某些实施方案中，癌症是II期或III期，其中癌症较大且已生长到附近组织或淋巴结中。在某些实施方案中，癌症是IV期或晚期或转移性的，其中癌症已扩散至身体的其它部分。

在某些实施方案中，癌症是I期淋巴瘤，其中癌症是在一个淋巴结区域中发现，或者癌症已经侵入一个淋巴外器官或部位，但没有侵入任何淋巴结区域。在某些实施方案中，癌症是II期淋巴瘤，其中癌症是在膈膜同侧的两个或更多个淋巴结区域中发现的，或者癌症涉及一个器官及其局部淋巴结，在膈膜同侧的其它淋巴结区域中有或没有癌症。在某些实施方案中，癌症是III期淋巴瘤，其中在膈膜两侧的淋巴结中存在癌症。在某些实施方案中，癌症是IV期淋巴瘤，其中癌症已经扩散到淋巴结之外的一个或多个器官。

在某些实施方案中，癌症是进行性的或难治性的。在某些实施方案中，癌症是转移性的。在某些实施方案中，癌症是复发性的(recurrent)或复发性的(relapsed)。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的。在某些实施方案中，癌症是先前未治疗的。在某些实施方案中，癌症先前未用全身性疗法治疗。在某些实施方案中，癌症先前未用全身性疗法或用化放疗的局部疗法治疗。在某些实施方案中，患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，患者已接受造血细胞移植。

在某些实施方案中，癌症是淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是T细胞淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是B细胞淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是套细胞淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是白血病。在某些实施方案中，癌症是急性骨髓性白血病。在某些实施方案中，癌症是慢性髓细胞样白血病。在某些实施方案中，癌症是急性成淋巴细胞性白血病。在某些实施方案中，癌症是癌瘤。在某些实施方案中，癌症是肉瘤。在某些实施方案中，癌症不是肉瘤。在某些实施方案中，癌症是骨髓瘤。在某些实施方案中，癌症是透明细胞癌(clear cellcancer)。在某些实施方案中，癌症不是透明细胞癌。在某些实施方案中，癌症是透明细胞肉瘤。在某些实施方案中，癌症不是透明细胞肉。

在某些实施方案中，癌症是非透明细胞肉瘤。在某些实施方案中，癌症是透明细胞癌瘤(clear cell carcinoma)。在某些实施方案中，癌症不是软组织癌症。在某些实施方案中，癌症不是透明细胞癌瘤。在某些实施方案中，癌症是脑癌或脊髓癌。在某些实施方案中，癌症是黑素瘤。在某些实施方案中，癌症是胚细胞瘤。在某些实施方案中，癌症是生殖细胞肿瘤。

在某些实施方案中，癌症是胰腺癌。在某些实施方案中，癌症是转移性胰腺癌。在某些实施方案中，所述癌症是局部晚期胰腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且可测量的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的和可测量的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未治疗的可测量的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未治疗的可测量的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未用全身性疗法治疗的可测量的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未用全身性疗法治疗的可测量的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未用全身性疗法或用化放疗的局部疗法治疗的可测量的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是组织学或细胞学记录的并且先前未用全身性疗法或用化放疗的局部疗法治疗的可测量的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未治疗的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未治疗的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未用全身性疗法治疗的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未用全身性疗法治疗的转移性胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未用全身性疗法或用化放疗的局部疗法治疗的局部晚期胰腺腺癌。在某些实施方案中，癌症是先前未用全身性疗法或用化放疗的局部治疗的胰腺腺癌。

在某些实施方案中，癌症是前列腺癌。在某些实施方案中，癌症是去势抗性前列腺癌。在某些实施方案中，癌症是肺癌。在某些实施方案中，癌症是非小细胞肺癌。在某些实施方案中，癌症是结肠癌。在某些实施方案中，癌症是直肠癌。在某些实施方案中，癌症是结肠直肠癌。在某些实施方案中，所述癌症是宫颈癌。在某些实施方案中，癌症是神经内分泌肿瘤。在某些实施方案中，癌症是胃肠胰神经内分泌肿瘤。在某些实施方案中，癌症是肝癌。在某些实施方案中，癌症是子宫癌。在某些实施方案中，癌症是宫颈癌。在某些实施方案中，癌症是膀胱癌。在某些实施方案中，癌症是肾癌。在某些实施方案中，癌症是乳腺癌。在某些实施方案中，癌症是卵巢癌。

在某些实施方案中，癌症是伯基特淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的伯基特淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的伯基特淋巴瘤，其中患者采用至少一个先前的治疗线失败。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的伯基特淋巴瘤，其中患者在骨髓移植之前失败。在某些实施方案中，癌症是双打击弥漫性大B细胞淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是具有MYC和BCL2和/或BCL6(DHL/THL)重排的高级别B细胞淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是非霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是T-细胞非霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的非霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的T细胞非霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案中，癌症是霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是霍奇金淋巴瘤，其中患者接受了造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是非霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是非霍奇金淋巴瘤，其中患者接受了造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是T细胞非霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是T细胞非霍奇金淋巴瘤，其中患者已经接受了造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者已接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的非霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者已经接受或未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者经历本妥昔单抗(brentuximab vedotin)和PD-1抑制剂治疗失败。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者经历本妥昔单抗和PD-1抑制剂失败，并且接受了造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤，其中患者经历本妥昔单抗和PD-1抑制剂失败，并且未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的非霍奇金淋巴瘤，其中患者已接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的T细胞非霍奇金淋巴瘤，其中患者未接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性T细胞的非霍奇金淋巴瘤，其中患者已经接受造血细胞移植。在某些实施方案中，癌症是复发性或难治性的T细胞非霍奇金淋巴瘤，其中患者已经接受或未接受造血细胞移植。

向患者施用治疗剂的一般方面

通常，治疗剂-即6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂-以足以治疗癌症的治疗有效量递送至患者。治疗可以包括在一天或多天内一次或多次施用，并且剂量可以由个体医师调整以获得预期效果。优选地，每种试剂的剂量应该足以主要与疾病细胞相互作用，而使正常细胞相对不受伤害。

剂量可以以单剂量或以单独的分开剂量形式施用，例如每天一次、两次、三次或四次。在某些实施方案中，以单剂量施用日剂量。在患者在某一剂量的应答不足的情况下，可以施用更高或更频繁的剂量以达到患者耐受的程度。

对于本发明的组合疗法，每种试剂可以根据治疗周期以特定的顺序和/或在相同或不同的天施用。例如，可以在施用自噬抑制剂之前，例如在治疗周期的之前立即(immediately prior)、当前早些时候(earlier in the day)或更早的一天(on anearlier day)，向患者施用一个剂量的6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，活性剂可以在治疗周期的同一天施用，例如同时或一个紧接着另一个共同施用。在某些实施方案中，在施用6,8-双-苄硫基-辛酸之前，例如在治疗周期的之前立即、当前早些时候或前一天(immediately prior,earlier in the day,or on an earlier day)，向患者施用一个剂量的自噬抑制剂。在某些实施方案中，治疗周期可以重复一次或多次，以使患者的益处最大化。

6,8-双-苄硫基-辛酸

6,8-双-苄硫基-辛酸可以以任何合适的形式(包括作为固体或液体、游离酸或盐)施用。6,8-双-苄硫基-辛酸可以是晶体、无定形的或溶于溶液中。在某些实施方案中，6,8-双-苄基硫代辛酸作为盐或离子对施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸作为与三乙醇胺的盐或离子对施用给患者。可以使用的示例性的离子配对剂包括例如叔胺(比如三乙胺或三乙醇胺)、其它胺如二乙胺、二乙醇胺、单乙醇胺、甲芬那酸和氨丁三醇、及其组合。在某些实施方案中，离子配对剂是有机布朗斯台德碱。在某些其它实施方案中，离子配对剂是胺化合物。在仍然其它实施方案中，离子配对剂是单烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、氨基取代的脂族醇、羟基单烷基胺、羟基二烷基胺、羟基三烷基胺、氨基取代的杂脂族醇、烷基二胺、取代的烷基二胺或含有至少一个环氮原子的任选取代的杂芳基。在某些实施方案中，治疗剂是6,8-双-苄硫基-辛酸与离子配对剂的盐，所述离子配对剂是按照如下指导选择的：Berge等人的"Pharmaceutical Salts,"J.of Pharmaceutical Science,1977；66:1-19或Handbook of Pharmaceutical Salts Properties,Selection and Use,IUPAC,Wiley-VCH,P.H.Stahl编著，将其全部内容通过引用并入本文中。在后一种情况中特别关注的离子对剂包括但不限于第342页表5中所列的那些。

其它示例性离子配对剂包括例如聚乙烯亚胺、聚谷氨酸、氨、L-精氨酸、苯乙苄胺苄星(benethamine benzathine)、甜菜碱、氢氧化钙、胆碱、丹醇(deanol)、二乙醇胺(2,2'-亚氨基双(乙醇))、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、海巴明、1H-咪唑、赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、氢氧化钠、三乙醇胺(2,2',2″-次氮基三(乙醇))、氨丁三醇和氢氧化锌。在某些其它实施方案中，离子配对剂是二异丙醇胺、3-氨基-1-丙醇、葡甲胺、吗啉、吡啶、烟酰胺、三(羟甲基)氨基甲烷、2-((2-二甲基氨基)乙氧基)乙醇、2-(二甲基氨基)乙醇、1-(2-羟乙基)吡咯烷或氢氧化铵。在某些其它实施方案中，离子配对剂是碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物，例如氢氧化铯。

在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约50％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约60％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约70％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约80％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约90％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约95％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄基硫代辛酸具有至少约96％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约97％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约98％(w/w)的纯度。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸具有至少约99％(w/w)的纯度。

自噬抑制剂

一种或多种自噬抑制剂可以以任何合适的形式(包括作为固体或液体、游离酸或盐)施用。自噬抑制剂可以是晶体、无定形的或溶于溶液中。在某些实施方案中，自噬抑制剂作为盐或离子对施用于患者。当自噬抑制剂是碱性化合物，例如氯喹或羟氯喹时，其可以作为与无机酸或有机酸的离子对施用。酸的实例包括，但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯对磺酸、酒石酸、醋酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸等。在某些实施方案中，治疗剂是自噬抑制剂与离子配对剂的盐，所述离子配对剂是按照如下指导选择的：“Pharmaceutical Salts”J.of Pharmaceutical Science,1977；66:1-19或Handbook ofPharmaceutical Salts Properties,Selection and Use,IUPAC,Wiley-VCH,P.H.Stahl编著，，将其全部内容通过引用并入本文中。在后一种情况中特别关注的离子对剂包括但不限于第342页表5中所列的那些。

可以使用任何合适的自噬抑制剂。在某些实施方案中，自噬抑制剂选自4-氨基喹啉、3-甲基腺嘌呤(3-MA，CAS#5142-23-4)、MHY1485(CAS#326914-06-1SP600125)、3-甲基-6-(3-甲基哌啶-1-基)-3H-嘌呤、6-氯-N-(1-乙基哌啶-4-基)-1,2,3,4-四氢吖啶-9-胺、4-(((1-(2-氟苯基)环戊基)-氨基)甲基)-2-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯酚、6-氟-N-[4-氟苄基]喹唑啉-4-胺、N-乙酰基-L-半胱氨酸、L-天冬酰胺、N2,N4-二苄基喹唑啉-2,4-二胺、(2S,3S)-反式-环氧琥珀酰-L-亮氨酰氨基-3-甲基丁烷乙酯、N-[6-(4-氯苯氧基)己基]-N'-氰基-N″-4-吡啶基-胍、亮肽素、2-(4-吗啉基)-8-苯基-1(4H)-苯并吡喃-4-酮、4,6-二-4-吗啉基-N-(4-硝基苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺、胃酶抑素A、2-((5-溴-2-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)-N-甲基苯甲酰胺、6-氟-N-[(4-氟苯基)甲基]-4-喹唑啉胺、毒胡萝卜素、阿莫地喹、青蒿素、甲氟喹、伯氨喹、哌喹、奎吖因、U0126、3-甲基腺嘌呤、巴佛洛霉素A1、氯喹、羟氯喹、维替泊芬、LY294002、SB202190、SB203580、SC79和渥曼青霉素。在某些实施方案中，自噬抑制剂选自氯喹、羟氯喹和维替泊芬。在某些实施方案中，自噬抑制剂选自羟氯喹和维替泊芬。在某些实施方案中，自噬抑制剂是4-氨基喹啉。在某些实施方案中，自噬抑制剂是氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是磷酸氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是硫酸氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是盐酸氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是羟氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是硫酸羟氯喹。在某些实施方案中，自噬抑制剂是维替泊芬。

自噬抑制剂可以抑制任何合适类型的自噬(例如，大自噬、微自噬、伴侣蛋白介导的自噬、线粒体自噬(mitophagy)或脂噬(lipophagy))，并且可以通过任何合适的机制(例如，通过影响自噬体或其承载物的形成)来抑制自噬。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制大自噬或线粒体自噬。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制大自噬。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制线粒体自噬。在某些实施方案中，线粒体自噬抑制剂是Mdivi-1。在某些实施方案中，线粒体自噬抑制剂是环孢菌素A。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制微自噬。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制伴侣蛋白-介导的自噬。在某些实施方案中，自噬抑制剂抑制脂噬。

施用途径

6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂可以通过任何合适的途径施用于患者。例如，在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸和/或自噬抑制剂口服施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂口服施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸口服施用于患者。在某些实施方案中，自噬抑制剂口服施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸和/或自噬抑制剂皮下施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸和/或自噬抑制剂静脉内施用于患者。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸作为IV输注经两小时施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸经由中心静脉导管作为IV输注方式经2小时施用。

6,8-双-苄硫基-辛酸的口服施用的优点在于，与IV相比，它允许实质上增加给药灵活性。在现有技术中，6,8-双-苄硫基辛酸被配制成在1M(150mg/mL)的三乙醇胺水溶液中的50mg/mL溶液，在通过中心静脉导管作为IV输注经30-120分钟施用之前，用注射用无菌5％的右旋糖(D5W)将其从50mg/mL稀释至低至4mg/mL(例如12.5mg/mL)。这样输注对于患者是不方便的，并且有效地排除了涉及频繁和/或延长给药的方案。由于在IV给药之后6,8-双-苄硫基-辛酸的半衰期仅为约1-2小时(Pardee,T.S.et al.,Clin Cancer Res.2014,20,5255-64)，更频繁和/或延长的给药可有利地用于增加患者对药物的暴露。

例如，用于治疗高危MDS的可能的IV方案包括在28天周期的第1-5天口服施用羟氯喹(600mg至1,200mg)，随后每天施用6,8-双-苄基硫代辛酸(2,000mg/m²)IV。如果口服施用，则医师在6,8-双-苄硫基-辛酸的剂量和方案方面将具有更大的灵活性。6,8-双-苄硫基-辛酸可以在28天周期的第1-5天以单一日剂量口服施用，如IV方案中那样。或者，6,8-双-苄硫基-辛酸可以以两个或更多个(例如，三个、四个或五个)分开的剂量施用。单剂量或分开剂量可以在周期的第1-5天或周期的更少和/或另外的天，最多且包括每天施用。

口服给药的另一个优点是它使得维持治疗可行。例如，用一线疗法成功治疗的患者(用或不用6,8-双-苄硫基-辛酸)和其癌症部分或完全缓解的患者可以在长期基础上用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂(例如，羟氯喹)口服治疗以延迟或预防复发。维持治疗可以包括例如每天一次、两次、三次、四次或五次剂量的6,8-双-苄硫基-辛酸和定期例如每天或每周的自噬抑制剂。在某些实施方案中，维持疗法用于治疗胰腺癌。

药物组合物

任何合适的药物组合物可以用于将6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂施用于患者。治疗剂可以在相同的药物组合物(例如，固定剂量组合)中一起施用或在不同的药物组合物中分开施用。本发明的药物组合物有多种合适的制剂(参见，例如Remington:TheScience and Practice of Pharmacy,第20版.,Gennaro et al.编著,LippincottWilliams and Wilkins,2000)。在某些实施方案中，一种或多种治疗剂以无水口服剂型的药物组合物施用。在某些实施方案中，药物组合物是选自片剂、丸剂、胶囊、囊片、粉末、颗粒剂、溶液、悬浮液和凝胶的口服剂型。口服剂型可以包括可药用赋形剂，比如载体、稀释剂、稳定剂、增塑剂、粘合剂、助流剂、崩解剂、增量剂、润滑剂、增塑剂、着色剂、成膜剂、调味剂、防腐剂、给药载体(dosing vehicles)、以及任何前述的任何组合。

药物组合物将通常包括至少一种惰性赋形剂。赋形剂包括药学上相容的粘合剂、润滑剂、润湿剂、崩解剂等。片剂、丸剂、胶囊、锭剂等可以含有任何以下赋形剂或类似性质的化合物：粘合剂，如微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，如淀粉或乳糖，分散剂如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；或调味剂，如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂。当剂量单位形式是胶囊时，其可以含有液体赋形剂，例如脂肪油。另外，剂量单元形式可以含有改变单元形式的物理形式的各种其它材料，例如糖、虫胶或肠溶剂的包衣。此外，除了活性化合物之外，糖浆可以含有蔗糖作为甜味剂和某些防腐剂、染料、着色剂和调味剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约5％至约99％，如约10％至约85％的量的赋形剂，其中治疗剂占剩余部分。在某些实施方案中，可药用赋形剂占组合物总重量的约20％至约80％。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约40％的量的治疗剂，以及一种或多种赋形剂占剩余部分。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约50％的量的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约60％的量的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约70％的量的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约80％的量的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计至少约90％的量的治疗剂。

用于固体(例如口服)组合物的稀释剂包括，但不限于微晶纤维素(例如

)、微细纤维素、乳糖、淀粉、预胶化淀粉、碳酸钙、硫酸钙、糖、葡萄糖结合剂、糊精、右旋糖、磷酸氢钙二水合物、磷酸三钙、高岭土、碳酸镁、氧化镁、麦芽糖糊精、甘露醇、聚甲基丙烯酸酯(例如Eudragit)、氯化钾、粉状纤维素、氯化钠、山梨醇和滑石。

用于固体(例如口服)药物组合物的粘合剂包括，但不限于阿拉伯胶、黄蓍胶、蔗糖、葡萄糖、海藻酸、卡波姆(例如卡波普)、羧甲基纤维素钠、糊精、乙基纤维素、明胶、瓜尔胶、氢化植物油、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素(例如

)、羟丙基甲基纤维素(例如，

)、液体葡萄糖、硅酸镁铝、麦芽糖糊精、甲基纤维素、聚甲基丙烯酸酯、聚维酮(例如

)、预胶化淀粉、海藻酸钠和淀粉。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.5％至约25％、如约0.75％至约15％的量的粘合剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约1％至约10％的量的粘合剂。

压制的固体药物组合物在患者胃中的溶出速率可以通过向组合物中加入崩解剂来提高。崩解剂包括但不限于藻酸、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠(例如，

)、胶体二氧化硅、交联羧甲纤维素钠、交联聚维酮(例如，

)、瓜尔胶、硅酸铝镁、甲基纤维素、微晶纤维素、粉状纤维素、预胶化淀粉、藻酸钠、淀粉羟乙酸钠(例如

)和淀粉。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.2％至约30％、如约0.2％至约10％的量的崩解剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.2％至约5％的量的崩解剂。

药物组合物任选地包含一种或多种可药用润湿剂。优选地选择这样的润湿剂以保持API与水紧密结合，这是被认为改善组合物的生物利用度的条件。可以用作润湿剂的表面活性剂的非限制性实例包括季铵化合物，例如苯扎氯铵、苄索氯铵和氯化十六烷基吡啶、磺基琥珀酸二辛酯钠、聚氧乙烯烷基苯基醚例如壬苯醇醚9、壬苯醇醚10和辛苯醇醚9、泊洛沙姆(聚氧乙烯和聚氧丙烯嵌段共聚物)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和油例如聚氧乙烯、辛酸/癸酸甘油单酯和甘油二酯(例如，Gattefosse的Labrasol^TM)、聚氧乙烯蓖麻油和聚氧乙烯氢化蓖麻油；聚氧乙烯烷基醚，例如聚氧乙烯十六十八烷基醚、聚氧乙烯脂肪酸酯例如聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯，例如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80(例如，ICI的Tween^TM 80)、丙二醇脂肪酸酯，例如丙二醇月桂酸酯(例如，Gattefosse的Lauroglycol^TM)、月桂基硫酸钠，脂肪酸及其盐例如油酸、油酸钠和三乙醇胺油酸酯，甘油基脂肪酸酯例如单硬脂酸甘油酯，脱水山梨糖醇酯例如脱水山梨糖醇单月桂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇单棕榈酸酯和脱水山梨糖醇单硬脂酸酯，泰洛沙泊及其混合物。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.25％至约15％，如约0.4％至约10％的量的润湿剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.5％至约5％的量的润湿剂。在某些实施方案中，药物组合物包含为阴离子表面活性剂的润湿剂。在某些实施方案中，药物组合物包含作为润湿剂的月桂基硫酸钠。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.25％至约7％，如约0.4％至约4％的量的月桂基硫酸钠。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.5％至约2％的量的月桂基硫酸钠。

可以加入润滑剂(例如，抗粘剂或助流剂)以改善固体组合物的流动性和/或降低片剂制剂在压制期间组合物和设备之间的摩擦。可以起润滑剂作用的赋形剂包括，但不限于胶体二氧化硅、三硅酸镁、粉状纤维素、淀粉、滑石和三元磷酸钙。合适的润滑剂进一步包括山嵛酸甘油酯(glyceryl behapate)(例如，Gattefosse的Compritol^TM 888)；硬脂酸及其盐，包括硬脂酸镁、硬脂酸钙和硬脂酸钠；硬脂酸锌；单硬脂酸甘油酯；棕榈酰硬脂酸甘油酯；氢化蓖麻油；氢化植物油(例如，Abitec的Sterotex^TM)；蜡；硼酸；苯甲酸钠；乙酸钠；硬脂酰富马酸钠；富马酸钠；氯化钠；DL-亮氨酸；PEG(例如Dow Chemical Company的Carbowax^TM4000和Carbowax^TM 6000)；油酸钠；月桂基硫酸钠；和月桂基硫酸镁。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.1％至约10％，如约0.2％至约8％的量的润滑剂。在某些实施方案中，药物组合物包含按组合物的重量计约0.25％至约5％的量的润滑剂。在某些实施方案中，药物组合物包含作为润滑剂的硬脂酸镁。在某些实施方案中，药物组合物包含胶体二氧化硅。在某些实施方案中，药物组合物包含滑石粉。在某些实施方案中，组合物包含按组合物的重量计约0.5％至约2％的量的硬脂酸镁或滑石粉。

调味剂和增味剂使剂型对患者更可口。可以包括在本发明的组合物中的用于药物产品的常用调味剂和增味剂包括麦芽酚、香草醛、乙基香草醛、薄荷醇、柠檬酸、富马酸乙基麦芽酚和酒石酸。

组合物还可以使用任何可药用的着色剂着色，以改善它们的外观和/或促进患者对产品和单位剂量水平的鉴别。本发明的制剂可以通过加入合适的缓冲剂来缓冲。

在本发明的某些实施方案中，治疗剂可以配制成药学可接受的油；脂质体；水包油或水包油包脂质(lipid-oil-water)乳液或纳米乳液；或液体。因此，为了便于这样的制剂，治疗剂可以与可药用赋形剂组合。

如下文详细描述的，药物组合物可以特别地被配制用于固体或液体形式施用，包括适于肠胃外施用的那些，例如通过皮下、肌内、静脉内或硬膜外注射，例如无菌溶液或悬浮液，或缓释释放制剂。

6,8-双-苄硫基-辛酸的药物制剂的其它实例描述在美国专利号8,263,653中，将其全部公开内容通过引用并入本文。

制备药物制剂或药物组合物的方法包括将本发明的化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分结合的步骤。通常，通过将本发明的化合物与液体载体或细碎的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后如有必要，使产物成形，来制备制剂。

在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是喷雾干燥的分散体。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含至少一种选自以下的聚合物的喷雾干燥的分散体：聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚(乙烯基吡咯烷酮)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含至少一种选自以下的聚合物的喷雾干燥的分散体：Eudragit L100、聚(乙烯基吡咯烷酮)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含至少一种选自以下的聚合物的喷雾干燥的分散体：EudragitL100、粘度等级K30的聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP K30)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、邻苯二甲酸乙酸纤维素(CAP)和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含至少一种选自Eudragit L100和醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)的聚合物的喷雾干燥的分散体。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含Eudragit L100的喷雾干燥的分散体。在某些实施方案中，包含第一治疗剂的药物组合物是包含醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)的喷雾干燥的分散体。

本发明的适于肠胃外施用的药物组合物包含一种或多种本发明的化合物与一种或多种可药用无菌等渗水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液、或可在临用前重构成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末的组合，其可包含糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质或助悬剂或增稠剂。

在某些实施方案中，一种或多种治疗剂通过胃肠内施用来施用。在某些其它实施方案中，一种或多种治疗剂被配制用于以气雾剂、喷雾剂、粉剂、凝胶、洗剂、乳膏、栓剂、软膏等形式吸入、口服、局部、经皮、鼻、眼、肺、直肠、经粘膜、静脉内、肌内、皮下、腹膜内、胸内、胸膜内、子宫内、肿瘤内或输注方法或施用，或其任何组合。如上所述，如果期望这样的制剂，则可以包括本领域已知的其它添加剂以赋予制剂期望的稠度和其它性质。

在某些实施方案中，本发明的药物组合物是单位剂量组合物。在某些实施方案中，药物组合物含有约1mg至约5000mg的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含约100mg至约3000mg的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物包含约200mg至约2000mg的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物含有约50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、700mg、800mg、900mg、1000mg、1100mg、1200mg、1300mg、1400mg、1500mg、1600mg、1700mg、1800mg、1900mg、2000mg、2500mg或3000mg的治疗剂。在某些实施方案中，药物组合物含有约300mg、500mg、700mg或1000mg的治疗剂。

在某些实施方案中，本发明的药物组合物包含如在美国专利7,220,428中描述的乳液、颗粒或凝胶。在某些实施方案中，药物组合物是具有约0.1％至约75％w/w的脂质或脂肪酸组分的固体或液体制剂。在某些实施方案中，制剂含有约0.1％至约15％w/v的脂质和脂肪酸组分。在某些实施方案中，脂肪酸组分包含饱和或不饱和的C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11或C12脂肪酸和/或这些脂肪酸的盐。脂质可以包括胆固醇及其类似物。

在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸的药物组合物包含三乙醇胺和6,8-双-苄硫基-辛酸，三乙醇胺与6,8-双-苄硫基-辛酸的摩尔比为约10:1至约1:10。在某些实施方案中，三乙醇胺与6,8-双-苄硫基-辛酸的摩尔比为约10:1至约5:1。在某些实施方案中，三乙醇胺与6,8-双-苄硫基-辛酸的摩尔比为约8:1。在某些实施方案中，药物组合物包含6,8-双-苄硫基-辛酸在1M的三乙醇胺水溶液中的50mg/mL溶液。在某些实施方案中，药物组合物包含6,8-双-苄硫基-辛酸在1M的三乙醇胺水溶液中的溶液，该溶液用注射用无菌5％右旋糖水溶液(D5W)从50mg/mL稀释至低至12.5mg/mL。在某些实施方案中，药物组合物包含6,8-双-苄硫基-辛酸在1M的三乙醇胺水溶液中的溶液，该溶液用注射用无菌5％右旋糖水溶液(D5W)从50mg/mL稀释至约12.5mg/mL。

几种自噬抑制剂的药物组合物是可商购的。在某些实施方案中，自噬抑制剂的药物组合物是包含相当于150mg的游离碱的量的磷酸氯喹的口服片剂。在某些实施方案中，自噬抑制剂的药物组合物是包含相当于300mg的游离碱的量的磷酸氯喹的口服片剂。在某些实施方案中，自噬抑制剂的药物组合物是包含200mg的硫酸羟氯喹(相当于155mg的游离碱)的口服片剂。在某些实施方案中，自噬抑制剂的药物组合物是包含相当于40mg/mL的游离碱的量的盐酸氯喹的可注射液体。

给药量&方案

6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂可以根据任何合适的方案以任何合适的剂量施用于患者。剂量和方案将基于治疗的癌症而变化，并且可以由本领域普通技术人员考虑当单独施用或与其他试剂组合施用时在现有技术中使用的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂的剂量和方案以及本文提供的指导而容易地确定。在某些实施方案中，剂量是最大耐受剂量。

在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约150mg/m²至约3000mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约250mg/m²至约2500mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，第一个6,8-双-苄硫基-辛酸以约500mg/m²至约2000mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约150mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约200mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约250mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约300mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约350mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约400mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约450mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约500mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约600mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约700mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约800mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约900mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1000mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1100mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1200mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1300mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1400mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1500mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1600mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1700mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1800mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1900mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约2000mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约2500mg/m²的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约3000mg/m²的日剂量施用。

在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1mg至约10,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约10mg至约7,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约100mg至约5,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约200mg至约4,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约300mg至约3,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约400mg至约2,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约500mg至约2,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约100mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约300mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约400mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约600mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约700mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约800mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约900mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1,250mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约1,750mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约2,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约2,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约3,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约3,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约4,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约4,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约5,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约6,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约7,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约8,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约9,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸以约10,000mg的日剂量施用。

6,8-双-苄硫基-辛酸的日剂量可以作为一个剂量给药，或者分成两个或更多个剂量施用-例如b.i.d.(一天两次)、t.i.d.(一天三次)或q.i.d.(一天四次)。在某些实施方案中，日剂量可以分成在一天内定期施用的五个剂量。在较高的日剂量下和/或当口服或皮下给药时，将6,8-双-苄硫基-辛酸的日剂量b.i.d.、t.i.d.或q.i.d施用通常是有益的。因为6,8-双-苄硫基-辛酸在血液中具有相对短的半衰期，分开日剂量可以通过延长暴露时间来提高功效，并且还可以通过降低峰血浆浓度来提高安全性。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用一次、两次、三次、四次或五次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用一次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用两次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用三次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用四次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约0.5g至1.5g，并且每天施用五次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用一次、两次、三次、四次或五次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用一次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用两次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用三次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用四次。在某些实施方案中，6,8-双-苄硫基-辛酸或其可药用盐的每个剂量为约1g，并且每天施用五次。

6,8-双-苄硫基-辛酸可以按照治疗方案进行施用，所述治疗方案包括其中施用6,8-双-苄硫基-辛酸的剂量的天数和其中没有施用6，8-双-苄基硫代辛酸的剂量的天数。例如，6,8-双-苄硫基-辛酸可以按照6,8-双-苄硫基-辛酸在周期的前期施用，而在周期的后期不施用的方案施用。在某些实施方案中，在28天周期的第1-5天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在四周周期的第1、8和15天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在两周周期的第1天和第3天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在三周周期的第1-5天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在两周周期的第1-5天施用6,8-三-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在三周周期的第1-3天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，在两周周期的第1-3天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，每天施用6,8-双-苄硫基-辛酸。在某些实施方案中，每隔一天施用6,8-双-苄基硫代-辛酸。在某些实施方案中，每周施用6,8-双-苄硫基-辛酸三天。在某些实施方案中，每周施用6,8-双-苄硫基-辛酸两天。在某些实施方案中，每周施用6,8-双-苄硫基-辛酸一天。

在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约50mg至约1500mg的日剂量施用。在某些实施方式中，硫酸羟氯喹以约100mg至约1500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约200mg至约1200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约300mg至约1200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约400mg至约1200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约600mg至约1200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约600mg至约1000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约100mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约300mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约400mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约600mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约700mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约800mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约900mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,100mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,200mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,300mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1400mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,500mg的日剂量施用。

在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约2mg/kg至约25mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约5mg/kg至约20mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约6.5mg/kg至约19.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约2.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约3mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约3.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约4mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约4.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约5.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约6mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约6.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约7mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约7.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约8mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约8.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约9mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约9.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约10mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约10.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约11mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约11.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约12mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约12.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约13mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约13.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约14mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约14.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约15mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约15.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约16mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约16.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约17mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约17.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约18mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约18.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约19mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约19.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约20mg/kg的日剂量施用。

硫酸羟氯喹的日剂量可以作为一个剂量施用或分成两个或更多个剂量施用-例如，b.i.d。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹的日剂量作为一个剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹的日剂量被分成两个剂量且每日两次施用。

在某些实施方案中，磷酸氯喹以约50mg至约2000mg的日剂量施用，其相当于以氯喹基础计的约30mg至约1200mg。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约150mg至约1800mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约250mg至约1500mg的日剂量施用。在某些实施方式中，磷酸氯喹以约500mg至约1500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约500mg至约1000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约1000mg至约1500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约250mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约750mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约1000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,250mg的日剂量施用。在某些实施方案中，硫酸羟氯喹以约1,500mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约1750mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约2000mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约2250mg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约2500mg的日剂量施用。

在某些实施方案中，磷酸氯喹以约2mg/kg至约25mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约5mg/kg至约20mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约6.5mg/kg至约19.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约2.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约3mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约3.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约4mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约4.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约5.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约6mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约6.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约7mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约7.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约8mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约8.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约9mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约9.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约10mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约10.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约11mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约11.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约12mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约12.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约13mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约13.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约14mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约14.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约15mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约15.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约16mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约16.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约17mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约17.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约18mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约18.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约19mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约19.5mg/kg的日剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹以约20mg/kg的日剂量施用。

磷酸氯喹的日剂量可以作为一个剂量施用或分成两个或更多个剂量-例如，b.i.d.。在某些实施方案中，磷酸氯喹的日剂量作为一个剂量施用。在某些实施方案中，磷酸氯喹的日剂量被分成两个剂量且b.i.d施用。

为了简单起见，自噬抑制剂通常将按照与6,8-双-苄硫基-辛酸的每个治疗周期长度相同的治疗周期(例如，2周、三周、四周等)施用。与6,8-双-苄硫基-辛酸的周期类似，自噬抑制剂周期可以包括其中施用自噬抑制剂剂量的天数和其中没有施用自噬抑制剂剂量的天数。例如，自噬抑制剂可以按照一定的方案施用，其中自噬抑制剂在施用6,8-双-苄硫基-辛酸的同一天施用，并且在不施用6,8-双-苄硫基-辛酸的天数不施用。或者，自噬抑制剂可以在施用6,8-双-苄硫基-辛酸的一些天施用但不是所有天都施用，和/或可以在不施用6,8-双-苄硫基-辛酸的一些天施用但不是所有天都不施用。在某些实施方案中，自噬抑制剂可以在所述周期的每天施用。

在某些实施方案中，给药周期重复至少一次。在某些实施方案中，本发明的方法包括用两个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用三个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用四个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用五个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用六个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用七个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用八个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用九个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用十个或更多个周期治疗。在某些实施方案中，本发明的方法包括用6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂进行定期治疗，包括基于每日或每周，持续一段时间，例如至少一个月、六个月、一年、两年、三年或更长。

用于治疗的患者

治疗方法可以根据待治疗的患者进一步表征。在本发明中，患者是人类。在某些实施方案中，患者是成年人。在某些实施方案中，患者是至少60岁的成年人。在某些实施方案中，患者是至少50岁的成年人。在某些实施方案中，患者是儿童。

治疗功效和安全性

本发明的治疗方法的特征可以通过治疗功效和安全性进一步表征。优选地，所述方法提供可接受的安全性特征，具有超出风险的治疗益处。当在至少10名癌症患者的II期或III期临床试验中测试时，本发明的方法优选提供至少约10％的总应答率、至少约1个月的应答持续时间、至少约1个月的无进展生存期(PFS)和/或至少约1个月的总生存期(OS)。优选地，II期或III期临床试验包括至少15名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少20名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少25名患者。优选地，II期或III期临床试验包括至少50名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少100名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少200名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少300名患者。优选地，II期或III期临床试验包括至少400名患者。更优选地，II期或III期临床试验包括至少500名患者。优选地，本发明的方法提供至少约20％患者的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约30％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约40％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约50％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约60％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约70％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约80％的总应答率。更优选地，本发明的方法提供至少约90％的总应答率。优选地，本发明的方法提供至少约2个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约3个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约4个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约5个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约6个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约7个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约8个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约9个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约10个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约11个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约12个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约14个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约16个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约18个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约20个月的应答持续时间、PFS和/或OS。优选地，本发明的方法提供至少约24个月的应答持续时间、PFS和/或OS。在某些实施方案中，在II期临床试验中测量上述的总应答率、应答持续时间和无进展生存期。在某些实施方案中，在III期临床试验中测量上述总反应率、应答持续时间和无进展生存期。

等同物

以上描述了本发明的多个方面和实施方案，包括治疗应用、治疗方法和药物组合物。本专利申请特别地考虑了各方面和实施方案的所有组合和排列。

III.实施例

现在一般性描述的本发明是通过参照下述实施例更容易理解的，所述实施例被包括仅仅用于示例性说明本发明的一些方面和实施方案，而不打算限制本发明。

实施例1–CPI-613在体外诱导AML细胞中的自噬

在37℃下，在5％CO₂下，用单独的CPI-613(200μM)或分别在早期和晚期在自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3MA)或巴佛洛霉素A(BafA)的存在下，培养在含有10％胎牛血清(FBS)(100,000个细胞/mL)的Roswell Park Memorial Institute(RPMI)培养基中的K562细胞或在45％伊斯科夫改良杜尔贝科培养基(Iscove's Modified Dulbeccos'Medium)(IMDM)/45％杜尔贝科改良伊格尔培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)(DMEM)/10％FBS(50,000个细胞/mL)中的MFL2细胞(Pardee,T.S.et al.,Experimental Hematology,2011,39,473-485)4小时，然后对LC3-II进行印迹，所述LC3-II是在自噬期间(被3MA还原产生)产生和在完成时消耗(被BafA还原降解)。分别使用完全培养基(“完全”)和Hank's平衡盐溶液培养基(HBSS)作为自噬的阴性对照和阳性对照。

结果呈现在图1中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸在AML细胞中诱导自噬。

实施例2–氯喹在体外使AML细胞对CPI-613敏感

在37℃下，在5％CO₂下，用CPI-613(100μM)、氯喹(25μM或50μM)或CPI-613(100μM)和氯喹(25μM或50μM)的组合，培养在含有10％FBS的RPMI培养基中的K562或OCI-AML3(100,000个细胞/mL)72小时，然后使用Promega CellTiter-Glo分析评价生存力。

结果呈现在图2中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸和氯喹的组合在体外杀死AML细胞显著优于单独的任一种试剂。

实施例3–氯喹在体内使AML细胞对CPI-613敏感

在第0天和第7天开始，向C57Bl/6小鼠的尾静脉中注射1百万个MFL2细胞，当通过生物发光成像确认植入时，除了周末，每日通过管饲CPI-613(300mg/kg，在0.05N NaOH中的5％右旋糖中的50mg/mL溶液，用4％冰醋酸调节至pH 7.5-8；1只动物)处理直至死亡，除了周末，每日通过腹膜内(IP)给予氯喹(200μL(约100mg/kg)，在PBS中的10mg/mL溶液；Chlr；3只动物)直至死亡，或CPI-613(每日300mg/kg，如同所述管饲)和氯喹(每日200μL，如同所述IP)(4只动物)的组合，接着测定存活率。对照动物(1)接受口服和IP载体。通过对数秩检验测定P值。

结果呈现在图3中。本实施例证实，与相同浓度的单独的任一种试剂相比，6,8-双-苄硫基-辛酸和氯喹的组合显著在体内延长了携带AML肿瘤的小鼠的存活。

实施例4–二甲双胍在体外使AML细胞对CPI-613敏感

在37℃下，在5％CO₂下，用CPI-613(50μM)、二甲双胍(1μM、2.5μM或5μM)或CPI-613(50μM)和二甲双胍(1μM、2.5μM或5μM)的组合，培养在45％IMDM/45％DMEM/10％FBS中的MFL2细胞(Pardee，T.S.等人，Experimental Hematology，2011，39,473-485)(50,000个细胞/mL)72小时，然后使用Promega CellTiter-Glo分析评价生存力。

结果呈现在图4中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸和二甲双胍的组合在体外杀死AML细胞显著优于相同浓度的单独的任一种试剂。

实施例5–二甲双胍在体内使AML细胞对CPI-613敏感

在第0天和第7天开始，向C57Bl/6小鼠的尾静脉中注射1百万个MFL2细胞，当通过生物发光成像确认植入时，除了周末，每日通过管饲施用CPI-613(300mg/kg，CPI-613在0.05N NaOH中的5％右旋糖中的50mg/mL溶液，用4％冰醋酸调节至pH 7.5-8)处理直至死亡，用二甲双胍(在饮用水中1mg/mL，随意获取(ad lib access))处理，或二甲双胍(在饮用水中1mg/mL，随意获取，如上所述)+CPI-613(300mg/kg，每日管饲，如上所述)(Met+CPI)，接着测定存活率。通过对数秩检验测定P值。

结果呈现在图5中。本实施例证实，6,8-双-苄硫基-辛酸和二甲双胍的组合显著在体内延长了携带AML肿瘤的小鼠的存活。

实施例6–2-脱氧葡萄糖在体外使AML细胞对CPI-613敏感

在37℃下，在5％CO₂下，用CPI-613(50μM)、2-脱氧葡萄糖(0.25mM或0.5mM)、或CPI-613(50μM)和2-脱氧葡萄糖(0.25mM或0.5mM)的组合，培养在45％IMDM/45％DMEM/10％FBS中的MFL2细胞(Pardee,T.S.et al.,Experimental Hematology,2011,39,473-485)(50,000个细胞/mL)72小时，然后使用Promega CellTiter-Glo分析评价生存力。

结果呈现在图6中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸和2-脱氧葡萄糖的组合在体外杀死AML细胞显著优于相同浓度的单独的任一种试剂。

实施例7–氯喹和2-脱氧葡萄糖的组合在体外使AML细胞对CPI-613敏感

在37℃下，在5％CO₂下，用CPI-613(50μM)、氯喹(对于OCI为25μM；对于MFL2为10μM)、2-脱氧葡萄糖(对于OCI为10mM；对于MFL2为0.25mM)或CPI-613(50μM)、氯喹(对于OCI为25μM；对于MFL2为10μM)和2-脱氧葡萄糖(对于OCI为10mM；对于MFL2为0.25mM)的组合，培养在含有10％FBS的RPMI培养基中的OCI-AML3细胞(100,000个细胞/mL)或在45％IMDM/45％DMEM/10％FBS中的MFL2细胞(50,000个细胞/mL)(Pardee,T.S.等人，ExperimentalHematology,2011,39,473-485)72小时，并使用Promega CellTiter-Glo分析评价生存力。

结果呈现在图7中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸、氯喹和2-脱氧葡萄糖的组合在体外杀死AML细胞显著优于相同浓度的单独的三种试剂中的任一种。

实施例8–氯喹在体外使PDAC细胞对CPI-613敏感

将胰管腺癌细胞(PDAC)系AsPC-1、PANC-1、BxPC-3或MIA Paca-2细胞以每孔30,000个细胞接种在96孔板中的完全RPMI培养基中，并培养18小时。然后，通过在无血清的RPMI中培养20小时，接着在改良的Earle's平衡盐溶液(EBSS)(CBS2培养基)中培养3小时，使细胞适应类似肿瘤营养条件的营养耗尽条件。将药物施用于CBS2培养基中，并培养20小时。用无血清的RPMI替换含有药物的培养基，并培养过夜。所有培养都在37℃和5％CO₂的湿润培养箱中进行。用Promega CellTiter-Glo分析评价细胞生存力，其中发光单位与活细胞的数量成比例。零(0)发光单位表示所有细胞都被杀死。

对于PANC-1和ASPC-1细胞，药物处理是：12.5μM、25μM、50μM、100μM或200μM的氯喹或羟氯喹，10μM、20μM或40μM的CPI-613，或这些浓度的氯喹或羟氯喹与CPI-613的组合。对于BxPC-3细胞，药物处理是：12.5μM、25μM、50μM、100μM或200μM的氯喹或羟氯喹，7.5μM、15μM或30μM的CPI-613，或这些浓度的氯喹或羟氯喹与CPI-613的组合。对于MIA PaCa-2细胞，药物处理是：12.5μM、25μM、50μM、100μM或200μM的氯喹，10μM、20μM或40μM的CPI-613，或这些浓度的氯喹和CPI-613的组合。

结果呈现在图8-11中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸和氯喹或羟氯喹的组合在体外杀死PDAC细胞优于单独的任一种试剂。

实施例9–氯喹在体外使结肠直肠癌细胞对CPI-613敏感

将CoLo 205细胞以60,000个细胞/孔接种在完全RPMI培养基中；将LoVo细胞以60,000个细胞/孔接种在完全F12-K培养基中，并将SW620和HT29细胞以60,000个细胞/孔接种在96孔板中的完全McCoys培养基中，并培养18小时。然后，通过在无血清的相应培养基中培养20小时，接着在改良的EBSS(CBS2培养基)中培养3小时，使细胞适应类似肿瘤营养条件的营养耗尽条件。将药物施用于CBS2培养基中，并培养20小时。用无血清的RPMI替换含有药物的培养基，并培养过夜。所有培养都在37℃和5％CO₂的湿润培养箱中进行。用PromegaCellTiter-Glo分析评价细胞生存力。

药物处理是：12.5μM、25μM、50μM或100μM的氯喹，12.5μM、25μM或50μM的CPI-613，单独或组合使用。

结果呈现在图12和13中。本实施例证实较高的CPI-613浓度下，6,8-双-苄硫基-辛酸和氯喹或羟氯喹的组合在体外杀死结肠直肠癌细胞优于单独的任一种试剂。

实施例10–氯喹在体外使非小细胞肺癌细胞对CPI-613敏感

将H460细胞以30,000个细胞/孔接种于96孔板中的完全RPMI培养基中，并培养18小时。然后，通过在无血清的RPMI中培养20小时，接着在改良的EBSS(CBS2培养基)中培养3小时，使细胞适应类似肿瘤营养条件的营养耗尽条件。将药物施用于CBS2培养基中，并培养5小时。用无血清的RPMI替换含有药物的培养基，并培养过夜。所有培养都在37℃和5％CO₂的湿润培养箱中进行。用Promega CellTiter-Glo分析评价细胞生存力。

药物治疗是：12.5μM、25μM、50μM、100μM或200μM的氯喹，10μM、20μM或40μM的CPI-613，单独或组合使用。

结果呈现在图14中。本实施例证实6,8-双-苄硫基-辛酸和氯喹的组合在体外杀死非小细胞肺癌细胞优于单独的任一种试剂。

实施例11–使用CPI-613和羟氯喹的组合治疗低甲基化疗法(HypomethylatingTherapy)已失败的人类患者的高风险MDS

这是单臂开放标记研究。研究者和研究对象对治疗不知情。而且，患者的分配将不是随机的，因为在该研究中仅有一个单臂。

该研究的主要目标是确定用CPI-613和最大耐受剂量(maximally tolerateddose)的羟氯喹(HCQ)的组合治疗低甲基化试剂失败的高危MDS患者的总反应率(完全缓解(CR)、骨髓CR、部分缓解(PR)、血液学改善(HI))。第二个目标是评价该组合的安全性、无进展生存期(PFS)、定义为从研究招募到任何原因导致死亡的时间的总生存期(OS)和输血频率的变化。

研究设计

CPI-613的剂量是2,000mg/m²。HCQ的最大试验剂量将是1,200mg。对于1/2期试验，样品量将是在HCQ的MTD组合下治疗的总共17名患者。该数字基于Simon的两阶段设计，其中9名患者将参加阶段1。如果9名患者中没有一名患者具有应答，则由于缺乏功效而停止研究。如果一名或多名患者有应答，则继续该试验，直到总共17名患者已经用在HCQ的MTD组合下治疗。如果17名患者中有2名或更多的患者有应答，则认为该组合具有足够的活性，值得进行另外的研究。

研究的初始阶段是在每28天的第1-5天输注CPI-613之前2小时，给予600mg至1200mg PO的固定剂量(flat dose)的剂量递增的羟氯喹。CPI-613的剂量将是2,000mg/m²，且将不会递增。3名患者组各自将用600、接着800、之后1,200mg的HCQ以如下所述的3+3剂量递增设计进行治疗。

如果给定组中没有患者发展剂量限制性毒性(参见以下DLT定义)，则在3名患者组中将继续剂量递增。然而，如果在任何剂量水平下在患者(无论是3名预期患者中的第一名、第二名还是第三名)中观察到DLT，则该剂量水平组将扩展至最多6名患者。如果在最多6名患者之外的另一名患者中没有观察到DLT，则对于随后的组，在3名患者中将继续剂量递增过程，直到达到1,200mg的最终剂量。然而，一旦在任何剂量水平下总共2名患者中观察到DLT，在该剂量水平的患者中HCQ的给药将立即停止，即使最后一组的患者总数可能少至2名。剂量递增被认为完成。在2名或更多名患者中诱导DLT的剂量水平被认为高于MTD，而在≥2名患者中诱导DLT的剂量水平之下紧邻的剂量水平被认为是MTD。如果证实600mg的初始剂量高于MTD，则HCQ剂量将降至剂量水平-1(400mg)。如果该剂量(400mg)产生2个DLT，则结束研究，并在任何另外的招募之前再检查毒性数据。如果1,200mg组在前3名患者中没有DLT或在前6名患者中没有第二个DLT的情况下完成，则HCQ的剂量递增将完成。所有随后的患者将以该剂量水平治疗。将HCQ剂量水平概括在表1中。

表1

剂量水平	HCQ剂量(固定)
		-1	400mg
1	600mg
		2	800mg
3	1,200mg

DLT的定义：剂量限制性毒性定义为任何临床相关的≥3级毒性的发生，该毒性可能或明确与HCQ和CPI-613的组合有关。从定义DLT中排除了以下毒性：对止吐药应答的3级恶心和呕吐，对抗腹泻疗法应答的3级腹泻，3级肿瘤溶解综合征，归因于肿瘤溶解综合征的3级或4级代谢紊乱或用口服或IV补充进行校正的抗微生物药物。血液学毒性可能仅在如果它们表现出从基线值显著下降(≥50％)时，才能作为DLT。感染性毒性可能仅在如果它们是ANC从基线下降≥20％的结果(在治疗研究者看来)，而不是复发或难治性MDS的自然史的结果时，才能作为DLT。

纳入标准

1)组织学证实的MDS，其疾病在低甲基化试剂作用下没有应答、进展或复发。

1)招募时中等、高或非常高的修正国际预后评分系统(IPSS-R)评分。

2)ECOG性能状态≤3。

3)年龄为18岁或更大的男性和女性。

4)预期存活＞2个月。

5)在研究期间，具有生育潜力的妇女(即，绝经前或未手术绝育的女性)必须使用可接受的避孕方法(节欲、宫内避孕器[IUD]、口服避孕药或双屏障装置)，并且必须在治疗开始之前1周内具有阴性血清或尿妊娠试验结果。

6)在研究期间，能生育的男性必须实施有效的避孕方法，除非记录存在不育症。

7)患者必须从任何先前用细胞毒性药物、放射疗法或其它抗癌形式治疗的急性、非血液学、非感染性毒性中完全恢复。来自先前治疗的具有持续、非血液学、非感染性毒性的患者≤2级是合格的，但是必须如此记录。

8)在招募之前≤2周获得的实验室值必须证实足够的肝功能、肾功能和如下定义的凝血：

a.天门冬氨酸氨基转移酶[AST/SGOT]≤3x正常上限[UNL]

b.丙氨酸氨基转移酶[ALT/SGPT]≤3x UNL

c.胆红素≤2x UNL

d.血清肌酐≤1.5mg/dL或133μmol/L

e.白蛋白＞2.0g/dL或>20g/L.

9)精神健全、有理解能力且愿意签署IRB批准的书面知情同意书。

10)经由中心线(例如，内置式输入导管(portacath))进入。

排除标准

排除具有以下特征的患者：

1)严重的医学疾病，例如显著的心脏病(例如，症状性充血性心力衰竭、不稳定型心绞痛、症状性冠状动脉病、在过去3个月内发生心肌梗塞、不受控制的心律失常、心包疾病或纽约心脏协会III或IV类)或严重的使人衰弱的肺病，其将潜在地增加患者的毒性风险。

2)患有活性中枢神经系统(CNS)或硬膜外肿瘤的患者。

3)任何活性不受控制的出血或出血素质(例如活性消化性溃疡疾病)。

4)任何在研究者看来可能损害他的或她的安全性的病症或异常。

5)孕妇或具有生育能力但不使用可靠避孕手段的女性。

6)在研究期间不愿意实施避孕方法的能生育的男性。

7)哺乳期女性。

8)预期寿命小于2个月。

9)不愿意或不能遵循协议要求。

10)正在进行的不受控制的严重感染的迹象。

11)需要包括手术的任何类型的立即姑息治疗。

12)不受控制的HIV感染的患者。

13)在CPI-613治疗开始之前的过去2周内，接受放射疗法、手术、用细胞毒性剂(除了低甲基化剂，即氮杂胞苷或地西他滨之外)治疗、用生物剂、免疫疗法或任何类型的任何其它抗癌疗法治疗或任何其它用于其癌症的标准或研究性治疗或用于任何适应症的任何其它研究性试剂治疗的患者。

14)在前6个月接受了用干细胞支持的化疗方案的患者。

研究程序

表2提供了在研究前筛选和每个治疗周期期间进行的评估和程序的概述。

表2

用CPI-613和羟基氯喹治疗

如表3所示，将CPI-613施用于患者。简言之，在28天周期的第1至5天给予CPI-613，在每次给药前2小时口服羟氯喹。患者将接受治疗前止吐和支持性措施，如由他们的治疗医师确定。默认的术前用药将包括在治疗前15分钟IV输注或30分钟口服的16mg昂丹司琼和在治疗前30分钟口服洛哌丁胺2mg组成(除非患者在过去48小时内没有排便)。

基线输血频率应记录为登记前8周内接受的输血次数。一旦患者开始协议治疗，则应在每2个治疗周期结束时评估输血频率。

表3

安全性评估

从CPI-613的第一剂量到最后一个剂量之后1个月，评估CPI-613的安全性。该评估将基于：症状、生命体征、ECOG性能状态和生存期、临床化学(和利用Cockcroft-Gault公式进行肾功能评价)和血液学的评估。所有安全性评估试验都在筛选期间进行(在用CPI-613治疗前2周内进行)。另外，在每个治疗日评价症状、生命体征、ECOG和生存期，可在施用CPI-613之前24小时内可获得的结果供审查。临床化学(利用Cockcroft-Gault公式进行肾功能评估)、血液学和凝学将在每个治疗周期的第1天进行，在施用CPI-613之前24小时内可获得的结果供审查。

对于归因于至少可能与CPI-613有关的毒性，将如在下面表4中概述剂量调整。

表4

一旦毒性已经消退至低于1级(或恢复至基线)，患者可根据治疗研究者的判断再递增CPI-613的剂量。具有初始毒性复发的患者则不适于再递增剂量。

应答的评估

肿瘤应答将基于RR、PFS和OS(如Cheson B.D.et al.,Clinical application andproposal for modification of the International Working Group(IWG)responsecriteria in myelodysplasia.Blood.108:419-425,2006)描述的以及从基准的输血频率变化进行评估。在基线，在第3、6和12周的第4周期间，然后在之后的每6个治疗周期直到疾病进展，评估来源于血液学和骨髓检查的RR和PFS。

基线输血频率应记录为招募之前8周期间接受的输血次数。一旦患者开始协议治疗，则输血频率应当在每2个治疗周期结束时评估。.

在研究期间评估生存期，并在患者退出试验之后通过治疗医生接触来监测。ECOG性能状态量表(Oken M.M.et al.,Toxicity And Response Criteria Of The EasternCooperative Oncology Group.Am J Clin Oncol5:649-655,1982)将用于评估患者的疾病如何进展和评估疾病如何影响患者的日常生活能力。ECOG 0级＝正常活动。活动自如，能够不受限制地进行疾病前的所有活动。ECOG 1级＝有症状，但能走动。重体力活动受限，但能走动和能从事轻体力或坐立的工作(例如，轻家务劳动、办公室工作)。ECOG 2级＝＜50％的时间卧床；能走动和能完全自理，但不能从事任何工作活动；多于50％的清醒时间可以起床活动。ECOG 3级＝＞50％的时间卧床；仅能部分自理，多于50％的清醒时间局限于床上或椅子上。ECOG 4级：100％卧床。完全失能；不能自理；完全局限于床上或椅子上。ECOG 5级＝死亡。

将记录来自骨髓检查的以下参数：形态学、免疫表型、细胞构成、核型(适用的细胞遗传学和FISH)、分子标记物、骨髓成髓细胞％、发育异常％、WHO分类。

用于改变MDS的天生史的修正的国际工作组(Modified International WorkingGroup)(IWG)-2006应答标准描述在下表5中。

表5

为了将血红素从克/分升转换为克/升，将克/分升乘以10。

MDS表示骨髓增生异常综合征；Hgb，血红素；CR，完全缓解；HI，血液学改善；PR，部分缓解；FAB，法国-美国-英国；AML，急性髓细胞性白血病；PFS，无进展生存期；DFS，无病生存期。

^*发育不良变化应考虑异常变化(修正)的正常范围。

对IWG应答标准的修改。

在一些情况下，协议治疗可能需要在4周的时间之前开始进一步的治疗(例如巩固、维持)。这样的患者可以包括在开始治疗时他们适合的应答类别中。在重复的化疗过程中的暂时性血细胞减少不应视为中断应答的耐久性，只要他们恢复到之前过程的改善的计数。

用于血液学改善的修正的国际工作组(Modified International WorkingGroup)(IWG)-2006应答标准描述在下表6中。

表6

IWG应答的删除部分没有显示。

Hgb表示血红素；RBC：红细胞；HI：血液学改善。

^*≥1周间隔的至少2次测量(未受输血影响)的预治疗计数的平均值(修改)

对IWG应答标准的修改。

在不存在另一种解释的情况下，例如急性感染、重复的化疗过程(修改)、胃肠出血、溶血等。建议整体以及通过个体应答模式报道2类红细胞和血小板应答。

只要治疗医师认为存在临床益处，就应当继续用CPI-613和HCQ治疗，除非或直到：患者表现出疾病进展；尽管剂量减少，但CPI-613和HCQ仍具有不可接受的毒性；患者撤回同意书；研究者决定从研究中撤出患者，因为继续参与研究不是患者的最佳兴趣；并发症(与研究正在研究的预期疾病无关的病症、损伤或疾病，其使得继续治疗不安全或不可能定期随访)；患者病症的一般变化或特定变化，其使得患者不适合进一步的研究性治疗；不依从研究性治疗、协议所需的评估或随访；或终止临床试验。在取消试验时，一旦患者离开试验，将通过随访医师就诊监测患者的生存期和研究后癌症治疗。在治疗之后，所有患者都将被随访5年，或直到死亡(除非同意撤回跟踪)。

CPI-613

CPI-613在10-mL琥珀色玻璃小瓶中提供。每个小瓶含有10mL浓度为50mg/mL的CPI-613，相当于500mg的CPI-613。CPI-613的药物产品是不含任何颗粒物质的澄清无色溶液。

经由IV导管，以约125-150mL/hr的速率，用D5W运行通过IV输注施用CPI-613。为了避免在施用部位和其周围的局部反应，应当经由中心静脉导管施用CPI-613。

CPI-613可能引起DEHP从IV输注装置和IV袋中的滤出。因此，含有DEHP的IV输液装置、IV袋或注射器不应当用于CPI-613的混合或施用。不含DEHP并因此可用于施用CPI-613的IV装置、IV袋和注射器的实例是：

·用于注射泵使用的延伸装置：来自MED-RX的所有延伸装置都不包含DEHP。

·注射器：所有Monoject注射器都是无DEHP的。

·IV输液装置：可用于施用CPI-613的IV输液装置是：

οPVC材料-

Primary IV Set，具有Universal Spike,BackcheckValve,2个注射部位，无DEHP且无Latex，15滴/mL，REF V14453，B Braun Medical Inc.

οLatex材料-

System Secondary Medication Set,10滴/mL,2C7451,Baxter Healthcare Corporation

οPVC材料-Surshield^TM Safety Winged Infusion Set,0.19mL Volume,无Latex，无DEHP，SV*S25BLS,Terumo Medical Products Hangzhou Co.Ltd.

ο聚乙烯材料-

System Paclitaxel Set by Baxter HealthCare,不含Non DEHP：聚乙烯管，具有0.22微过滤器Item#2C7558，10滴/mL

·注射器：CPI-613药物产品(50mg/mL)和用D5W稀释到各种浓度(1.6-25mg/mL)的药物产品与各种类型的注射器相容，如下所列。因此，任何这些类型的注射器和由相同材料制成的注射器都可用于施用CPI-613。而且，也可以使用玻璃注射器，因为玻璃(例如，玻璃容器)与CPI-613药物产品相容。

οNorm-Ject，聚乙烯桶，聚乙烯活塞，无乳胶(Henke Sass Wolf GMBH)注射器

οBecton Dickinson注射器

οTerumo注射器

οMonoject注射器

οGlass注射器。

CPI-613在给施用前必须用5％右旋糖水(D5W)从50mg/mL稀释至12.5mg/mL(即，用3份的D5W稀释1份CPI-613)。为了清楚起见，应当目测检查稀释的药物产品。如果观察到混浊、沉淀或着色(不同于无色)，则不使用稀释的药物产品给药。在用无菌D5W稀释之后，溶液变澄清，pH为8.4-8.8。已经发现在室温和冷藏温度下，稀释的CPI-613药物产品稳定24小时。

CPI-613必须经由IV导管进行IV施用，所述导管是自由流动的且在IV导管的死区中没有空气，以使CPI-613的血管刺激、炎症和急性毒性最小化。根据动物研究，在CPI-613施用期间，在IV导管的死区中意外地共同施用额外的空气已经证明了诱导CPI-613急性毒性的潜力。而且，根据动物研究，在IV施用期间CPI-613意外泄漏到血管周围间隙中，其延长了血管周围组织对CPI-613的暴露，可诱导显著的局部炎症。为了避免在施用部位及其周围的局部反应，CPI-613必须经由中心静脉导管施用。

CPI-613不必呈推注形式施用，而是经由中心静脉导管通过D5W运行以～0.5mL/min的速率输注，该导管以约125-150mL/hr的速率运行。根据动物研究，这是为了使CPI-613的潜在急性毒性最小化。

当施用CPI-613时，必须采取以下预防措施：

·确认IV管线的放置，以确保CPI-613不泄漏到血管周围间隙中。

·确认IV管线是自由流动的。

·确认IV管线没有封闭空间。

·如研究协议中指导的，用D5W稀释CPI-613药物产品。

·通过输注，而不是呈推注施用CPI-613。

·在施用CPI-613之后，用～10mL的D5W冲洗IV管线以除去残留的CPI-613。

·为了避免在施用部位及其周围的局部反应，应当经由中心静脉导管施用CPI-613。

在每个剂量水平下，CPI-613的量基于患者的BSA。BSA值将基于筛选期间采集的身高和体重计算，并且在整个研究中使用该BSA值。除非在研究期间体重从基线的变化＞10％。此时，应当根据新的体重和身高修正BSA。新的BSA值将从那时起用于研究的剩余部分，除非体重变化另外＞10％，这将需要BSA的另外修正。

其它试剂

在进行该研究时，患者不能接受针对其MDS的任何标准或研究性治疗(除了CPI-613和羟氯喹之外)，或针对任何非癌症适应症的任何其它研究性药物。必须记录所有另外允许的伴随药物(包括商品名和通用名称、剂量和剂量时间表)。允许治疗疾病相关症状(例如恶心)。在这种情况下，施用的药物将被认为是伴随药物，并且应当相应地记录。支持性治疗可以包括止吐药、抗腹泻药、退热药、抗过敏药、抗高血压药、镇痛药、抗生素、别嘌呤醇和其它例如血液制品。患者可以根据ASCO指南在治疗研究者的判断下使用生长因子。

不良事件

不良事件的NCI通用术语标准的CTEP活性形式(CTCAE4.0)将用于AE报告。其被鉴定并位于CTEP网站http://ctep.cancer.gov/protocolDevelopment/electronic_ applications/ctc.htm。所有合适的治疗区域应该可以使用CTCAE的CTEP活性形式的拷贝。

不良事件(AE)的属性：

·确定—AE明确地与研究治疗相关。

·很可能—AE可能与研究治疗相关。

·可能—AE可以与研究治疗相关。

·不太可能-AE不能确定与研究治疗有关。

·不相关-AE显然与研究治疗不相关。

要报告的不良事件列表：腹痛；碱性磷酸酶；ALT(SGPT)；厌食症；AST(SGOT)；胆红素；(高胆红素血症)；钙(高钙血症、低钙血症)；肌酐；腹泻；潮红；血红蛋白(贫血)；注射部位反应；白细胞；淋巴细胞减少；恶心；中性粒细胞(嗜中性白细胞减少症)；血小板(血小板减少症)；钾；钠；呕吐。所有3级、4级、5级不良事件都应当记录在流程图和ORIS中，无论它们是否存在于该清单上。报告在这些试验中所有意想不到的4级和所有5级SAE供再审查。

任何未预料到的涉及对受试者或其他人造成风险的问题和不良事件都应立即报告给IRB。无论资金来源、研究赞助者或事件是否涉及研究性或市售药物、生物制品或装置，都需要报告给IRB。可报告的事件不限于物理伤害，而是包括心理、经济和社会危害。可报告的事件可以作为药物、生物制剂、装置、手术或其他介入的结果，或者作为问卷、调查、观察或与研究对象的其他交互的结果而出现。

研究小组的所有成员负责向IRB和其他适用团体合适地报告涉及对受试者或其他人造成风险的未预料到的问题。然而，主要研究者最终负责确保向IRB及时报告涉及对受试者或其它人造成风险的未预料到的问题。主要研究者还负责确保审查他们接收的所有报告的对受试者和其他人造成的未预料到的风险，以确定该报告是否代表对研究参与者的风险和/或益处的改变，以及是否需要知情同意书、协议或其它研究相关文档的任何改变。

在研究已被IRB批准的场所发生的任何未预料到的问题(包括对受试者或其他人的风险)都，必须报告给IRB。改变研究风险与潜在益处并因此保证研究协议或知情同意过程/文件的实质性改变以便确保研究对象的安全性、权利或福利的任何事件、事故、经验或结果都必须报告给IRB。

统计学考虑

对于1/2期试验，样品量将是在HCQ的MTD下治疗的总共17名患者。这个数字基于Simon的两阶段设计(Simon R，Controlled Clinical Test，1989，10:1-10)，其中9名患者将参加阶段1。如果9名患者中没有一名患者具有应答，则由于缺乏功效而停止研究。如果一名或多名患者有应答，则继续该试验，直到总共17名患者已经用在HCQ的MTD组合下治疗。如果17名患者中2名或更多名患者具有应答，则认为该组合具有足够的活性，值得另外的研究。这些参数给出0.0466的α和0.8122的幂(power)，以检测与没有介入的差异(设置为5％的响应率)。

数据管理和报告时间表

将基于RR、PFS和OS(如Cheson B.D.et al.,Clinical application andproposal for modification of the International Working Group(IWG)responsecriteria in myelodysplasia.Blood.108:419-425,2006)描述的以及输血频率从基线的变化来评估疾病应答。在以下特定的时间点评估来源于血液学和骨髓检查的RR和PFS：

·基线

·每2个治疗周期的第4周直至第6个周期

·此后每3个治疗周期(即，周期9、周期12、周期15等)，直到疾病进展的迹象。

应当在每个特定时间点记录骨髓检查结果。

实施例12–6,8-双-苄硫基-辛酸在非小细胞肺癌中的口服功效

人H460 NSCLC细胞获自美国典型细胞培养物(American Type Cell Culture)(ATCC)(目录号HTB-177，Manassas，VA)。在从ATCC收到肿瘤细胞时，使用Charles RiverLabs Molecular Division进行的小鼠抗体产生(MAP)试验，测试这些细胞的病毒污染阴性。在37℃下，在湿润的5％CO₂气氛中，将肿瘤细胞保持在T225组织培养瓶中，所述培养瓶含有50mL的具有10％胎牛血清(FBS)和2mM L-谷氨酰胺的Roswell Park MemoryInstitute(RPMI)-1640溶液。通过胰蛋白酶消化，使细胞每2-3天以1:10的比例分裂，并再悬浮在新烧瓶中的新培养基中。以相同的方式，收获在70-90％融合的细胞进行实验。

CD1-Nu/Nu雌性小鼠，约4-6周龄，获自Charles River Laboratories。将小鼠5只圈养在位于Stony Brook的the Department of Animal Laboratory Research of NewYork State University(SUNY)的微隔离器室中的笼子中。每天进行光-暗循环12小时，从上午7点到下午7点。无限制供应食物(Purina啮齿动物食物)和水(蒸馏的无菌过滤水，pH7)。协议和程序符合规定且经SUNY Institutional Animal Care and Use Committee(IACUC)批准。

在肿瘤接种之前动物到达研究地点和实验之间，允许7天的适应期。使用具有27-5/8规格针头的1cc注射器，在右胁部皮下(SC)接种悬浮于0.1mL Dulbeco磷酸盐缓冲盐(PBS)溶液中的2×10⁶人H460 NSCLC或BxPC3胰腺癌细胞。在治疗之前、治疗期间和治疗之后，每天测量肿瘤尺寸(长度和宽度)(使用游标卡尺)，并且使用长椭球体公式计算肿瘤体积：(长度×宽度²)/2。当肿瘤为约300mm³时，在肿瘤细胞植入后8天开始用试验制品或对照制品处理。

每组11只动物，6,8-双-苄硫基-辛酸的口服剂量为100mg/kg。将100mg的6,8-双-苄硫基-辛酸悬浮在5％右旋糖中的小体积0.01-0.05N NaOH中，并用4％冰醋酸滴定至pH7.0，至50mg/mL。在施用前，将悬浮液用5％右旋糖稀释至12.5mg/mL，以通过使动物接受胃管饲法递送的100mg/kg，剂量体积约0.2mL。在肿瘤细胞植入后，在第8天、第15天、第22天和第29天处理小鼠。

在接种2×10⁶BxPC-3细胞的CD-1裸鼠(n＝9)中进行类似的研究。当肿瘤达到平均大小150mm³(第0天)时开始研究，并以100mg/周的口服剂量施用4周的CPI-613。以25mg/kg的每周剂量用IP处理进行比较组(n＝9)。

结果呈现在图15和16中。显然，用6,8-双-苄硫基-辛酸处理的小鼠中的肿瘤比用5％右旋糖处理或未处理的小鼠中的肿瘤生长慢得多。该作用在BxPC3肿瘤中特别显著。该实施例证实当口服给药时，6,8-双-苄硫基-辛酸治疗癌症有效。

实施例13–6,8双-苄硫基-辛酸的喷雾干燥的分散体口服制剂

通过将API与以下聚合物之一1:4混合制备6,8-双-苄硫基-辛酸(API)的固体无定形分散体制剂：Eudragit L100、聚(乙烯基吡咯烷酮)粘度等级K30(PVP K30)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、乙酸邻苯二甲酸纤维素(CAP)、或醋酸羟丙基甲基纤维素琥珀酸酯(HPMCAS-M)，并且使用具有35kg/hr干燥气体流速能力的小型Bend Lab干燥器(BLD-35)从甲醇或丙酮中喷雾干燥。两种代表性的喷雾干燥分散体(SDD)制剂(每种75g)的条件、产率和残留溶剂水平呈现在下表中。

使用扫描电子显微镜(SEM)定性地测定两种SDD制剂的颗粒形态，并研究是否视觉上存在任何程度的融合或结晶。颗粒显示塌陷的球形形态，注意到没有结晶或融合。

X射线衍射通常对具有LOD为样品质量的约1％的结晶材料的存在敏感。对于任一种SDD制剂，通过PXRD均未检测到结晶度。与结晶的6,8-双-苄硫基-辛酸API相比的衍射图可以参见图17，其中顶部衍射图是Eudragit L100制剂，中间衍射图是HPMCAS-M制剂，底部衍射图是结晶的6,8-双-苄硫基-辛酸。

实施例14–6,8-双-苄硫基-辛酸的乳剂口服制剂

在装有磁性搅拌棒的圆底烧瓶中，在聚山梨醇酯-80(2.5mL)中，将月桂酸单甘油酯(131mg)和6,8-双-苄硫基-辛酸(93mg)加热至50℃。在完全溶解成澄清溶液之后，在50℃下，加入水(7.5mL)，同时强力搅拌，得到乳液。

将6,8-双-苄硫基-辛酸(312mg)与聚山梨醇酯80(6.25g)、大豆油(1.25g)和脂质混合物(100mg)混合，所述脂质混合物包含胆固醇(14g)、乙酸胆固醇酯(14g)、苯甲酸胆固醇酯(14g)、月桂酸单甘油酯(25.4g)和棕榈酸单甘油酯(32.6g)，并将混合物加热至50℃直到固体溶解(30分钟)。将右旋糖(11.25g)溶于236mL的水中，并将得到的右旋糖水溶液加入到上述油溶液中。在室温下，将得到的两相混合物搅拌30分钟，然后通过0.22μm过滤器真空过滤。

实施例15–6,8-双-苄硫基-辛酸的液体制剂

通过以下步骤制备6,8-双-苄基硫代辛酸溶液：(a)提供50mg/mL的6,8-双-苄硫基-辛酸在1M三乙醇胺水溶液中的溶液，和(b)用5％右旋糖水溶液将该50mg/mL溶液稀释至5mg/mL的浓度。在以下实施例16中，将得到的5mg/mL溶液称为“15A”。

通过以下步骤制备混悬剂载体：(a)在14mL蒸馏水中混合tris缓冲液(48mg)和HPMCAS-HF(20mg)，(b)用稀氢氧化钠将pH值调节到7.4，以溶解HPMCAS-HF，(c)将得到的溶液加热至约90℃，(d)向热溶液中加入Methocel A4M Premium(100mg)，(e)强力搅拌混合物以悬浮未溶解的Methocel A4M，(f)用冰浴冷却，并搅拌混合物直到Methocel A4M溶解(约10分钟)，(g)用蒸馏水/去离子水稀释溶液，以使总体积达到20mL，和(h)用稀乙酸或稀氢氧化钠将pH值调节到7.4，得到混悬剂载体。

如下制备实施例13的喷雾干燥制剂的混悬剂：通过将400mg各自的SDD制剂加入到研钵中，缓慢加入4mL的混悬剂载体(在每次少量加入后用研杵充分混合以均匀分散)，然后转移到烧瓶中，并在施用前搅拌一分钟。得到的Eudragit L100 SDD制剂(20mg/mL的6,8-双-苄硫基-辛酸)的混悬剂在以下实施例16中称为“15B”。得到的HPMCAS-M SDD制剂(20mg/mL的6,8-双-苄硫基-辛酸)的混悬剂在以下实施例16中称为“15C”。

以同样的方式，如下制备6,8-双苄硫基-辛酸的20mg/mL混悬剂：通过将80mg的6,8-双-苄硫基-辛酸加入到研钵中，缓慢加入4mL的混悬剂悬浮载体(在每次少量加入后用研杵充分混合以均匀分散)，然后转移到烧瓶中，并在施用前搅拌一分钟。得到的6,8-双-苄硫基-辛酸的混悬剂在以下实施例16中称为“15D”。

如下制备6,8-双-苄硫基-辛酸的溶液：将

(聚氧乙烯15羟基硬脂酸酯(polyoxyl 15hydroxystearate)；

HS 15)(3克)溶于蒸馏水(7mL)中，形成30％溶液，加入6,8-双-苄硫基-辛酸(50mg)，到5mL的该30％溶液，涡旋1分钟，然后超声处理45分钟，得到无色透明溶液(10mg/mL，pH7)。将得到的溶液在以下实施例16中称为“15E”。

实施例16–6,8-双-苄硫基-辛酸的口服生物利用度

以六种不同的方式，向每组16只BALB/c裸鼠(8只雄性和8只雌性)的六个组施用6,8-双-苄硫基-辛酸：(1)5μL/g IV注射(尾静脉)实施例15的三乙醇胺/右旋糖水溶液(25mg/kg；5mL/kg；实施例15A)；(2)5μL/g IP注射实施例15的三乙醇胺/右旋糖水溶液(25mg/kg；5mL/kg；15A)；(3)5μL/g口服施用实施例15的Eudragit L100 SDD混悬剂(100mg/kg；5mL/kg；15B)；(4)5μL/g口服施用实施例15的HPMCAS-M SDD混悬剂(100mg/kg；5mL/kg；15C)；(5)5μL/g口服施用20mg/mL实施例15的6,8-双-苄硫基-辛酸混悬剂(100mg/kg；5mL/kg；15D)；或(6)10μL/g口服施用10mg/mL实施例15的SOLUTOL溶液(100mg/kg；10mL/kg；15E)。在每个实验中，在给药后0.083、1、4和24小时，从4只雄性和4只雌性小鼠的一个亚组中收集约80μL血液，并在0.5、2和8小时，从4只雄性和4只雌性小鼠的另一个亚组中收集约80μL血液。通过LC-MS/MS分析来自收集的血液样品的血浆中6,8-双-苄硫基-辛酸的存在。

该实施例证实了6,8-双-苄硫基辛酸是可口服生物利用的。

通过引用并入

出于所有目的，将本文提及的每篇专利文件和科学论文的全部公开内容通过引用并入。

等同物

在没有背离本发明的精神或基本特征下，可以以其它特定形式实施本发明。因此，前述实施方案应当被认为在所有方面是说明性的，而不是限制本文所述的本发明。因此，本发明的范围是由附加的权利要求书而不是前述说明书来指定，并且在该权利要求书的等同性的含义和范围内的所有变化均旨在被包括在其中。

Claims (38)

1.一种用于治疗需要其的人类患者中的癌症的方法，其包括向所述患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂的步骤。

2.权利要求1的方法，其中所述癌症的特征在于响应与CPI-613的接触而显示自噬增加。

3.权利要求1的方法，其中所述癌症是淋巴瘤。

4.权利要求3的方法，其中所述淋巴瘤是复发性或难治性的霍奇金淋巴瘤。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述患者经历本妥昔单抗和PD-1抑制剂失败。

6.权利要求3的方法，其中所述淋巴瘤是复发性或难治性的T-细胞非霍奇金淋巴瘤。

7.根据权利要求6所述的方法，其进一步包括向所述患者施用治疗有效量的盐酸苯达莫司汀的步骤。

8.权利要求3的方法，其中所述淋巴瘤是复发性或难治性的伯基特淋巴瘤。

9.权利要求3的方法，其中所述淋巴瘤是具有MYC和BCL2和/或BCL6重排的高级别B细胞淋巴瘤。

10.权利要求1的方法，其中所述癌症是白血病。

11.权利要求1的方法，其中所述癌症是癌瘤。

12.权利要求1的方法，其中所述癌症是肉瘤。

13.权利要求1的方法，其中所述癌症是骨髓瘤。

14.权利要求1的方法，其中所述癌症是透明细胞癌。

15.权利要求14的方法，其中所述癌症是透明细胞肉瘤。

16.权利要求14的方法，其中所述癌症是透明细胞癌瘤。

17.权利要求16的方法，其中所述癌症是透明细胞肾癌。

18.权利要求1的方法，其中所述癌症是实体瘤。

19.权利要求1的方法，其中所述癌症是脑或脊髓癌。

20.权利要求1的方法，其中所述癌症是黑素瘤。

21.权利要求1的方法，其中所述癌症是胚细胞瘤。

22.权利要求1的方法，其中所述癌症是生殖细胞肿瘤。

23.权利要求1的方法，其中所述癌症是胰腺癌。

24.权利要求1的方法，其中所述癌症是前列腺癌。

25.权利要求1的方法，其中所述癌症是骨髓增生异常综合征。

26.权利要求25的方法，其中所述癌症是高危骨髓增生异常综合征。

27.权利要求26的方法，其中所述癌症是当低甲基化治疗时无反应、进展或复发的患者中的高危骨髓增生异常综合征。

28.权利要求1或2的方法，其中所述癌症不是透明细胞癌。

29.权利要求1或2的方法，其中所述癌症不是透明细胞肉瘤。

30.权利要求1或2的方法，其中所述癌症是非透明细胞肉瘤。

31.权利要求1或2的方法，其中所述癌症不是软组织癌。

32.权利要求1或2的方法，其中所述癌症不是透明细胞癌瘤。

33.任一项前述权利要求的方法，其中所述自噬抑制剂为4-氨基喹啉。

34.权利要求33的方法，其中所述自噬抑制剂为羟氯喹。

35.权利要求34的方法，其中所述羟氯喹作为硫酸羟氯喹施用给患者。

36.权利要求33的方法，其中所述自噬抑制剂为氯喹。

37.权利要求36的方法，其中所述氯喹作为磷酸氯喹施用给患者。

38.一种用于治疗需要其的人类患者中的除了透明细胞肉瘤之外的癌症的方法，其包括向所述患者施用治疗有效量的6,8-双-苄硫基-辛酸和自噬抑制剂的步骤。

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