CN113453673A - 非激素男女通用避孕药 - Google Patents

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L·G·卡辛
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Abstract

非激素男女通用避孕药产品、组合物、制剂和使用方法，其包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂。

Description

非激素男女通用避孕药
相关申请的交叉引用
本申请要求于2019年2月22日提交的第62/808,861号美国临时申请的优先权权益，将其全部内容并入本文。
序列表的并入
于2020年2月20日创建的且大小为11KB的名为B19-097_ST25.txt的文件的内容在此通过引用整体并入。
政府支持
本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的授权号为GM111802、GM118939和HD081403的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。
背景
全世界对避孕的迫切需求关系到数十亿人。根据国家卫生统计报告，采取避孕的62％的育龄妇女主要依赖激素药片和宫内节育器(IUD)21。然而，许多报告表明，尽管非常有效，但与激素避孕药相关的不希望的副作用经常导致其停止使用6,8,9。因为类固醇激素对各种细胞类型的多效作用模式，类固醇激素与强的副作用，如抑郁、体重增加、异位妊娠等相关。由于副作用，几乎三分之一的美国女性在使用激素避孕药的第一年内停止使用。另外，男性避孕的唯一现代选择是现实生活中失败率很高的避孕套以及外科手术侵入性的输精管切除术。因此，对新的非激素男女通用避孕药的大量需求未得到满足。这样的避孕药可能被全球数十亿人使用。
概述
本发明证明靶向温和线粒体解偶联剂DNP、氯硝柳胺和BAM15使精子线粒体解偶联。最有效的化合物氯硝柳胺在低至1μM的浓度下也将精子摆动频率从14Hz降低至6Hz(图6A)，抑制过度激活(图6C)。
本发明提供非激素男女通用避孕产品、组合物、制剂和使用方法，其包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂。
本发明提供促进避孕的方法，其包括向有其需要的人给予包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂的组合物。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺或其盐，例如其乙醇胺盐，例如氯硝柳胺乙醇胺(NEN)。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物选自：氯硝柳胺、溴氯水杨酰苯胺、羟氯柳苯胺(oxyclozanide)、碘醚柳胺(rafoxanide)、3-叔丁基-5-氯-N-(2-氯-4-硝基苯基)-2-羟基-6-甲基苯甲酰胺、二溴柳苯胺(dibromsalan)、美溴沙仑(metabromsalan)、三溴沙仑(tribromsalan)和2-碘-N-苯基苯甲酰胺(麦锈灵(benodanil))。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物具有以下结构：
Figure BDA0003219704790000021
其中R1和R2独立地是卤素，如F、Cl、Br或I，取代的选自O和N的杂原子，如-OH、-NO2或O-Ph-Cl，或低级(C1-C4)烷基，如Me、Et或叔丁基，m是整数1、2、3或4，并且n是整数1、2、3、4或5。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是BAM15(N5,N6-双(2-氟苯基)-[1,2,5]噁二唑并[3,4-b]吡嗪-5,6-二胺)或其盐。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物通过口服途径、局部途径、直肠途径或阴道途径给予。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物作为丸剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂给予。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物口服给予并且所述组合物作为丸剂给予。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物局部给予并且所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物阴道内给予并且所述组合物作为乳膏、贴剂、阴道环或阴道膜给予。
在本发明的方法的一些实施方案中，所述组合物直肠内给予并且所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
本发明提供了本发明的靶向温和线粒体解偶联剂作为避孕药的用途。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺或其盐，例如其乙醇胺盐，例如氯硝柳胺乙醇胺(NEN)。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺化合物或其盐，所述水杨酰苯胺化合物选自：氯硝柳胺、溴氯水杨酰苯胺、羟氯柳苯胺、碘醚柳胺、3-叔丁基-5-氯-N-(2-氯-4-硝基苯基)-2-羟基-6-甲基苯甲酰胺、二溴柳苯胺、美溴沙仑、三溴沙仑和2-碘-N-苯基苯甲酰胺(麦锈灵)。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物具有以下结构：
Figure BDA0003219704790000031
其中R1和R2独立地是卤素，如F、Cl、Br或I，取代的选自O和N的杂原子，如-OH、-NO2或O-Ph-Cl，或低级(C1-C4)烷基，如Me、Et或叔丁基，m是整数1、2、3或4，并且n是整数1、2、3、4或5。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述解偶联剂包含或者是BAM15(N5,N6-双(2-氟苯基)-[1,2,5]噁二唑并[3,4-b]吡嗪-5,6-二胺)或其盐。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物通过口服途径、局部途径、直肠途径或阴道途径给予。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物作为丸剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂给予。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物口服给予并且其中所述组合物作为丸剂给予。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物局部给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物阴道内给予并且其中所述组合物作为乳膏、贴剂、阴道环或阴道膜给予。
在本发明的用途的一些实施方案中，所述组合物直肠内给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
本发明提供包含靶向温和线粒体解偶联剂的避孕制剂。在一些实施方案中，所述避孕制剂包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂。在一些实施方案中，所述避孕制剂呈丸剂、胶囊、栓剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂的形式。
本发明包括本发明的特定实施方案的所有组合。
附图简述
图1A-C是一系列示意图，其显示精子细胞依靠其线粒体来产生能量。(A)线粒体内能量转换的总图。(B)线粒体ATP和热产生的机制。线粒体有两个膜，外线粒体膜(OMM，对于离子和小于1500Da的小分子可自由渗透)和IMM(其具有严密得多的受控的渗透性并且包含用于产生ATP和热的装置)。电子传递链(ETC)跨IMM产生电位(ΔΨ)，ATP合酶(AS)使用该电位产生ATP和H+泄漏途径使用该电位产生热量。修改自1。(C)精子依赖于它们的线粒体产生的能量，这些线粒体紧密地堆积在尾部的中段区域。质子梯度由ETC建立，为ATP的合成提供动力。在活跃的游动精子细胞中，细胞ATP消耗经由ANT引起活性APT/ADP交换，其抑制ANT介导的H+泄漏，并且ΔΨ仅用于产生ATP：(#1)。当细胞活性降低时，消耗的ATP减少，导致ΔΨ和活性氧物质(ROS)的产生增加：(#2)2,3。为了防止这种情况发生，通过ANT的质子泄漏增加，因为现在它不受活性ADP/ATP交换的抑制(#3)。该质子泄漏将ΔΨ转化为热，使ΔΨ恢复到正常值并减少ROS的产生。然而，当ΔΨ被在精子中由ANT2和ANT4携带的质子泄漏降低时，线粒体以热的形式耗散能量，并且不能产生足够的ATP以为精子运动提供动力12。
图2是以下温和线粒体解偶联剂的一系列化学结构：氯硝柳胺、BAM15和2,4-二硝基苯酚。
图3A-B是描绘线粒体膜片钳的一对示意图。(A)丝状体(整个IMM的囊泡)的制备：(1)通过离心从细胞裂解物中分离线粒体；(2)使用低压弗氏压碎器(French press)去除OMM；(3)在KCl溶液中分离丝状体。OMM的残余物(箭头)附着在IMM上。(B)来自丝状体的膜片钳记录。在形成千兆欧姆密封(丝状体附着构型)后，移液管下的膜贴片可以被高振幅电压脉冲破坏，以形成用于记录跨整个IMM的电流(I)的整个丝状体构型。供选择地，可以从丝状体取出贴片移液管，以形成用于记录单通道活性的由内而外的模式(inside-out mode)。
图4是一系列图(上图)和示意图(下图)，其显示了ANT介导的H+电流(IH)的调节器。左图：IH被2μM花生四烯酸(AA)激活，然后被1mM浴ADP瞬时抑制(2)，并且随后恢复(3)。控制电流以黑色显示。中间图：左图的IH时间进程。骨骼肌丝状体。在从0至-160mV步进时测量IH振幅。右图：在点2和3中IH的ADP抑制。在-160mV下测量的剩余IH显示为对照的百分比，n＝8。胞质腺嘌呤核苷酸对瞬时IH抑制的解释。在易位途径中具有脂肪酸(FA)阴离子时，处于c状态的ANT介导IH(1)。胞质ADP3-以c状态结合并排出FA阴离子/阻断易位途径，导致IH抑制(2)。ANT构象改变时，ADP分解为基质(移液管)溶液(2和3)。FA阴离子与处于m状态的ANT重新结合，使IH恢复(4和5)。当AAC处于m状态时，胞质ADP不能抑制IH(5)。初步数据来自(Bertholet,A.M.Chouchani.,E.T.；Kazak,L.；Angelin,A.；Fedorenko,A.；Long,J.Z.；Vidoni,S.；Garrity,R.；Cho,J.；Terada,N.；Wallace,D.C.；Spiegelman,B.M.；andKirichok,Y.Proton Transport is an Integral Function of the Mitochondrial ADP/ATP Carrier Nature Jul；571(7766):515-520(2019))。
图5A-B是一系列图，其证明了由FA和DNP激活的H+泄漏需要ANT。a，由2μM AA在心脏WT和ANT1-/-丝状体中诱导的代表性电流。右图：WT和ANT1-/-丝状体在-160mV处的IH电流密度。b，由50μM DNP在心脏WT和ANT1-/-丝状体中诱导的代表性电流。右图：在WT和ANT1-/-丝状体中由50和200μM DNP在-160mV处诱导的IH电流密度。
图6A-C是一系列图，其证明了线粒体解偶联剂(MU)对精子生理和受精能力的影响。氯硝柳胺显著降低精子运动、使线粒体解偶联并阻止受精。A)通过上游法纯化人类精子，并如(Mannowetz,N.,Naidoo,N.M.,Choo,S.A.,Smith,J.F.&Lishko,P.V.Slo1 is theprincipal potassium channel of human spermatozoa.eLife 2,e01009,doi:10.7554/eLife.01009(2013))中所述，在对照HS溶液(1)中；在溶媒对照((2)；二甲基亚砜)的存在下，和在MU:1μM氯硝柳胺乙醇胺(NEN)、0.76μM BAM15和5μM DNP存在的情况下，测量它们的基础摆动频率(BF，以Hz为单位)。数据是标准的箱线图，中线代表中值，箱的上限和下限代表第一个和第三个四分位数，触须代表最大值和最小值，不包括异常值。X代表样本的平均值，并且点代表单个数据点。B)人精子线粒体膜电位(MMP)评估。人精子在0.1％DMSO(溶媒对照)存在下，在1μM NEN或0.75μMBAM15存在下孵育15分钟。然后评估每种条件下的样品(每种条件下至少100个精子中段)的荧光强度，用45nM的MitoRed测量，MitoRed是细胞膜可渗透的若丹明基(rhodamine-based)染料。MitoRed定位于线粒体，并发出红色荧光。MitoRed与线粒体的相互作用取决于线粒体的膜电位。解偶联的线粒体发出的荧光较少。数据是标准箱线图，如(A)中所示。C)sMU对人获能精子过度激活运动性的影响。如(11)所述使细胞获能4小时。在成像前2分钟添加4μM孕酮以触发过度激活(HA)。细胞被评估为过度激活或未过度激活。N>45个细胞。误差条代表通过Wilson/Brown方法计算的95％CI。
详述
线粒体通过偶联线粒体电子传递链(ETC)和ATP合酶22的H+转运活性产生ATP，线粒体电子传递链(ETC)和ATP合成酶22是位于线粒体内膜(IMM)中的两种巨大转运蛋白复合物。具体而言，由Krebs循环提供的高能电子供体驱动的ETC将H+泵出线粒体基质，以跨IMM产生电化学H+梯度(ΔΨ)。然后ATP合酶将H+沿着ΔΨ返回到线粒体基质中，并利用释放的能量由ADP和无机磷酸盐合成ATP。为了使ETC和ATP合酶之间的能量转移最大化，化学渗透理论假设H+(和其他离子)的IMM电导率必须接近于零。然而，现在公认的是，任何组织的IMM对H+都是“泄漏的”。跨IMM的H+泄漏(IH)由解偶联蛋白(UCP)介导。类似于ATP合酶，UCP将H+沿着ΔΨ返回到线粒体基质中，但不产生ATP，而是将释放的能量作为热耗散。被称为线粒体解偶联的该现象对线粒体的功能和完整性至关重要(图1)。游离脂肪酸(FA)是经由UCP的H+泄漏的生理激活剂。专门产热组织棕色和米色脂肪中的线粒体解偶联有助于维持核心体温和控制体重3,23-25，并经由棕色和米色脂肪特异性的解偶联蛋白1(UCP1)发生。与棕色脂肪相反，常规躯体和生殖组织的线粒体只是“温和”解偶联，这意味着IH更小。然而，由于该温和解偶联发生在大多数组织中，它可能对产热、体重、健康代谢和生殖能力有显著影响3,26。
此外，温和解偶联减少了线粒体活性氧物质(ROS)的产生，以保持线粒体完整性12。电子不受控制地从线粒体ETC逃逸到氧是细胞中ROS的主要来源。略微降低跨IMM的电位的温和线粒体解偶联是阻止由ETC产生ROS的主要机制。事实上，显示温和解偶联被FA、ROS和被超极化ΔΨ增强/激活12,27。尽管温和线粒体解偶联是重要的，但除了棕色脂肪外，所有组织中UCP(多种UCP)的分子特性仍然难以捉摸。
因此，化学质子载体，例如2,4-二硝基苯酚(DNP)，已被广泛用于诱导IH和线粒体解偶联，用于研究和治疗目的。DNP是疏水性的、可溶于膜的弱酸，可以在没有膜转运蛋白帮助的情况下携带H+跨过生物膜。它们与FA(也是疏水性弱酸，但为差的质子载体)的区别在于，它们不仅能够以质子化形式扩散通过膜，而且还能够以不含H+的、带负电荷的形式扩散通过膜。根据经典模型，质子化形式的DNP携带H+通过脂质双层以将它释放到相对侧上。然后，它们以阴离子形式跨膜扩散回来，结合另一个H+，并重复循环。DNP用来证明ΔΨ对于线粒体ATP的产生是必不可少的22 , 28，为化学渗透理论提供关键证据。随后，显示DNP增加身体能量消耗和产热，同时显著减少脂肪沉积和体重29。然而，DNP对人有显著的副作用，由于它被认为是没有蛋白质靶点的简单化学质子载体，DNP的效率和安全性无法改善29。
然而，最近的报道挑战了经典的教条，即已知的线粒体解偶联剂如DNP充当膜质子载体2,30。这些数据有力地证明，温和线粒体解偶联剂主要通过与腺苷核苷酸转运(ANT)蛋白相互作用来诱导H+泄漏。
在人和小鼠中，ANT蛋白具有几种具有组织特异性表达模式的同种型，其中ANT4在睾丸和精子细胞中特异性表达，而在其他器官中完全被抑制。已经表明ANT4缺陷的雄性小鼠表现出精子发生受损并且完全不育13。重要的是注意到这些小鼠是存活的，并且在其他方面表现出正常的发育和生理机能13。ANT4先前被提出作为避孕药靶点，并进行了药物筛选14以寻找抑制ANT4的ATP/ADP交换蛋白(exchanger)活性的化合物；然而，发现先导化合物是非特异性的，因为它们也抑制了其他人类ANT同种型，因此表现出广泛的细胞毒性。
本发明关注于完全不同的ANT转运方式-响应某些药理学干预而传导质子并因此使线粒体解偶联的能力。温和线粒体解偶联现在被认为是实现减肥、治疗糖尿病以及甚至抗癌疗法的一种方式15。因此，预期这种ANT功能不对靶细胞产生细胞毒性作用，而是降低它们的ATP产生效率。
在本发明的一些实施方案中，ANT4蛋白可以包含ADP/APT转位酶4(ANT4)(UniProtKB-Q9H0C2；也称为溶质载体家族25成员31(SLC25A31)；转录变体1)的氨基酸序列或由其组成：
Figure BDA0003219704790000081
或由包含以下序列或由以下序列组成的核酸编码：
Figure BDA0003219704790000082
Figure BDA0003219704790000091
在本发明的一些实施方案中，ANT4蛋白可以包含ADP/APT转位酶4(ANT4)(UniProtKB-Q9H0C2；也称溶质载体家族25成员31(SLC25A31)；转录变体2)的氨基酸序列或由其组成：
Figure BDA0003219704790000092
或由包含以下序列或由以下序列组成的核酸编码：
Figure BDA0003219704790000093
Figure BDA0003219704790000101
我们已经确定了一类化合物，如氯硝柳胺乙醇胺(NEN)和BAM15(N5,N6-双(2-氟苯基)-[1,2,5]噁二唑并[3,4-b]吡嗪-5,6-二胺)，其充当精子中靶向温和线粒体解偶联剂，并且可用作精子失能剂。这个基本原理是精子线粒体解偶联(sMU)消耗精子的能量，并使精子无法找到卵子并使卵子受精。对经由精子表达的ANT的H+泄漏的特定激活剂的探究是开发非激素避孕药的新策略。事实上，根据我们的数据，NEN使人精子线粒体解偶联，显著降低精子摆动频率和过度激活。NEN是一种口服水杨酰苯胺衍生物，自1958年以来已被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于人治疗寄生虫绦虫感染16,28。已经表明，它充当线粒体解偶联剂，通过跨线粒体内膜转运质子，导致葡萄糖和脂肪酸氧化的无效循环2,15,31,32。虽然NEN的线粒体解偶联足以杀死胃肠道绦虫，但NEN已经在人中表现出优异的安全性20，不像DNP那样具有轻度毒性，并且与不可接受的显著不良反应的高发生率有关29。根据药物再利用筛选研究，氯硝柳胺对抗生素耐药性细菌具有强的体内和体外活性33，并且根据另一项研究，还可能抑制寨卡(Zika)病毒复制19。此外，氯硝柳胺最近被表征用于糖尿病32、人胶质母细胞瘤34、结肠癌和卵巢癌15,18,35。虽然氯硝柳胺解偶联作用的确切分子机制尚不完全清楚，但与FA和DNP类似，它应该通过经由ANT激活H+泄漏来使线粒体解偶联，并且根据我们的数据，它对精子线粒体也是如此。因此，我们的数据、氯硝柳胺优异的安全性及其抗菌和抗病毒性质表明，基于NEN的产品除了其抗菌和抗病毒性质外，还表现出避孕性质。
除非有相反指示或另有说明，在这些描述和整个申请文件中，术语“一(a)”和“一个(an)”表示一个或多个，术语“或”表示和/或。本文描述的实施例和实施方案仅用于说明目的，并且将提示本领域技术人员根据实施例和实施方案的各种修改或变化，并且将被包括在本申请的精神和范围以及所附权利要求的范围内。本文引用的所有出版物、专利和专利申请，包括其中的引用，出于所有目的在此通过引用整体并入。
实施例
实施例1：作为非脂肪组织中主要线粒体解偶联蛋白的ANT的确定。
我们采用来自整个完整线粒体内膜(IMM；所谓的丝状体，图3)的囊泡的直接膜片钳记录，其实现对它们的天然膜环境中的线粒体离子通道和转运蛋白的高分辨率功能分析10,36,37。我们最近使用该方法来表征脂肪酸(FA)经由解偶联蛋白1(UCP1)诱导H+泄漏的机制，该蛋白负责棕色脂肪中的线粒体产热37。然而，UCP1是脂肪特异性的，并且对构成身体大部分的非脂肪组织中的产热机制仍知之甚少。在这里，我们证明了全IMM膜片钳可用于直接测量非脂肪组织中不依赖于UCP1的FA诱导的H+泄漏。
ANT负责跨非脂肪组织的IMM的H+泄漏，并且仅在存在脂肪酸(FA)的情况下传导H+(图4和5)10。另外，使用全IMM膜片钳，该组表明，线粒体解偶联剂DNP经由ANT强烈且特异性地激活质子泄漏，并且可以通过模拟ANT内源性激活剂-FA充当ANT依赖性线粒体解偶联的药理学调节剂。由ANT介导的IH被经典的ANT抑制剂羧基苍术苷(carboxyatractyloside)(CATR，图5)阻断。
我们记录了ANT1缺陷小鼠的心脏中DNP诱导的IH(ANT1是该组织中ANT的主要同种型)。这些实验证明DNP诱导的IH主要取决于ANT(图5B-D)。这些结果表明，与之前提出的模型相反，DNP没有作为简单的化学质子载体使线粒体解偶联，而是靶向ANT。因此，数据表明可以使用膜片钳方法跨整个IMM记录线粒体解偶联剂激活的IH，并且该电流由ANT介导。
实施例2：人精子线粒体的解偶联降低精子运动性并阻止受精。
在这里，我们研究了DNP、氯硝柳胺和BAM15三种已知的线粒体解偶联剂对它们使精子线粒体解偶联的能力的影响13,38,39。如图6B所示，如通过线粒体去极化评估的，BAM15和NEN均引发强sMU。重要的是，两种化合物中最有效的氯硝柳胺在低至1μM的浓度下也使精子摆动频率从14Hz降低至6Hz(图6A)，抑制过度激活(图6C)。
参考文献
1 Krauss,S.,Zhang,C.Y.&Lowell,B.B.The mitochondrial uncoupling-protein homologues.Nat Rev Mol Cell Biol 6,248-261,doi:10.1038/nrm1572(2005).
2 Terada,H.Uncouplers of oxidative phosphorylation.Environmentalhealth perspectives 87,213-218,doi:10.1289/ehp.9087213(1990).
3 Cannon,B.&Nedergaard,J.Brown adipose tissue:function andphysiological significance.Physiol Rev 84,277-359,doi:10.1152/physrev.00015.2003(2004).
4 Lishko,P.V.等人.The control of male fertility by spermatozoan ionchannels.Annu Rev Physiol 74,453-475(2012).
5 Wendler,A.,Albrecht,C.&Wehling,M.Nongenomic actions of aldosteroneand progesterone revisited.Steroids 77,1002-1006,doi:10.1016/j.steroids.2011.12.023(2012).
6 Daniels,K.&Mosher,W.D.Contraceptive methods women have ever used:United States,1982-2010.National health statistics reports,1-15(2013).
7 Sedgh,G.,Singh,S.&Hussain,R.Intended and unintended pregnanciesworldwide in 2012and recent trends.Studies in family planning 45,301-314,doi:10.1111/j.1728-4465.2014.00393.x(2014).
8 Skovlund,C.W.,Morch,L.S.,Kessing,L.V.&Lidegaard,O.Association ofHormonal Contraception With Depression.JAMA psychiatry 73,1154-1162,doi:10.1001/jamapsychiatry.2016.2387(2016).
9 Skovlund,C.W.,Morch,L.S.,Kessing,L.V.,Lange,T.&Lidegaard,O.Association of Hormonal Contraception With Suicide Attempts andSuicides.The American journal of psychiatry 175,336-342,doi:10.1176/appi.ajp.2017.17060616(2018).
10 Bertholet,A.M.Chouchani.,E.T.；Kazak,L.；Angelin,A.；Fedorenko,A.；Long,J.Z.；Vidoni,S.；Garrity,R.；Cho,J.；Terada,N.；Wallace,D.C.；Spiegelman,B.M.；和Kirichok,Y.Proton Transport is an Integral Function of the MitochondrialADP/ATP Carrier Nature Jul；571(7766):515-520(2019).
11 Mannowetz,N.,Naidoo,N.M.,Choo,S.A.,Smith,J.F.&Lishko,P.V.Slo1 isthe principal potassium channel of human spermatozoa.eLife 2,e01009,doi:10.7554/eLife.01009(2013).
12 Azzu,V.&Brand,M.D.The on-off switches of the mitochondrialuncoupling proteins.Trends in biochemical sciences 35,298-307,doi:10.1016/j.tibs.2009.11.001(2010).
13 Brower,J.V.,Lim,C.H.,Jorgensen,M.,Oh,S.P.&Terada,N.Adeninenucleotide translocase 4deficiency leads to early meiotic arrest of murinemale germ cells.Reproduction 138,463-470,doi:10.1530/REP-09-0201(2009).
14 Zhang,Y.等人.Human Adenine Nucleotide Translocase(ANT)ModulatorsIdentified by High-Throughput Screening of Transgenic Yeast.Journal ofbiomolecular screening 21,381-390,doi:10.1177/1087057115624637(2016).
15 Kumar,R.等人.Mitochondrial uncoupling reveals a novel therapeuticopportunity for p53-defective cancers.Nat Commun 9,3931,doi:10.1038/s41467-018-05805-1(2018).
16 Al-Hadiya,B.M.Niclosamide:comprehensive profile.Profiles of drugsubstances,excipients,and related methodology 32,67-96,doi:10.1016/S0099-5428(05)32002-8(2005).
17 World Health Organization,W.H.WHO Model List of EssentialMedicines(19th List).(2015).
18 Walters Haygood,C.L.等人.Niclosamide Analogs for Treatment ofOvarian Cancer.International journal of gynecological cancer:official journalof the International Gynecological Cancer Society 25,1377-1385,doi:10.1097/IGC.0000000000000506(2015).
19 Xu,M.等人.Identification of small-molecule inhibitors of Zikavirus infection and induced neural cell death via a drug repurposingscreen.Nature medicine 22,1101-1107,doi:10.1038/nm.4184(2016).
20 U.S.National Library of Medicine(NLM),T.ToxNet:Niclosamide(Oralroute).(2018).
21 Current Contraceptive Use in the United States,2006–2010,andChanges in Patterns of Use Since 1995,<www.cdc.gov/nchs/data/nhsr/nhsr060.pdf>(2012).
22 Mitchell,P.Coupling of phosphorylation to electron and hydrogentransfer by a chemi-osmotic type of mechanism.Nature 191,144-148(1961).
23 Enerback,S.等人.Mice lacking mitochondrial uncoupling protein arecold-sensitive but not obese.Nature 387,90-94,doi:10.1038/387090a0(1997).
24 Shabalina,I.G.等人.UCP1 in brite/beige adipose tissue mitochondriais functionally thermogenic.Cell reports 5,1196-1203,doi:10.1016/j.celrep.2013.10.044(2013).
25 Cohen,P.&Spiegelman,B.M.Brown and Beige Fat:Molecular Parts of aThermogenic Machine.Diabetes 64,2346-2351,doi:10.2337/db15-0318(2015).
26 Rolfe,D.F.&Brown,G.C.Cellular energy utilization and molecularorigin of standard metabolic rate in mammals.Physiol Rev 77,731-758,doi:10.1152/physrev.1997.77.3.731(1997).
27 Parker,N.,Affourtit,C.,Vidal-Puig,A.&Brand,M.D.Energization-dependent endogenous activation of proton conductance in skeletal musclemitochondria.Biochem J 412,131-139,doi:10.1042/BJ20080006(2008).
28 Weinbach,E.C.&Garbus,J.Mechanism of action of reagents thatuncouple oxidative phosphorylation.Nature 221,1016-1018(1969).
29 Grundlingh,J.,Dargan,P.I.,El-Zanfaly,M.&Wood,D.M.2,4-dinitrophenol(DNP):a weight loss agent with significant acute toxicity and risk ofdeath.Journal of medical toxicology:official journal of the American Collegeof Medical Toxicology 7,205-212,doi:10.1007/s13181-011-0162-6(2011).
30 McLaughlin,S.G.&Dilger,J.P.Transport of protons across membranesby weak acids.Physiol Rev 60,825-863,doi:10.1152/physrev.1980.60.3.825(1980).
31 Kadenbach,B.Intrinsic and extrinsic uncoupling of oxidativephosphorylation.Biochim Biophys Acta 1604,77-94(2003).
32 Tao,H.,Zhang,Y.,Zeng,X.,Shulman,G.I.&Jin,S.Niclosamideethanolamine-induced mild mitochondrial uncoupling improves diabetic symptomsin mice.Nature medicine 20,1263-1269,doi:10.1038/nm.3699(2014).
33 Rajamuthiah,R.等人.Repurposing salicylanilide anthelmintic drugsto combat drug resistant Staphylococcus aureus.PLoS One 10,e0124595,doi:10.1371/journal.pone.0124595(2015).
34 Wieland,A.等人.Anticancer effects of niclosamide in humanglioblastoma.Clinical cancer research:an official journal of the AmericanAssociation for Cancer Research 19,4124-4136,doi:10.1158/1078-0432.CCR-12-2895(2013).
35 Alasadi,A.等人.Effect of mitochondrial uncouplers niclosamideethanolamine(NEN)and oxyclozanide on hepatic metastasis of colon cancer.Celldeath&disease 9,215,doi:10.1038/s41419-017-0092-6(2018).
36 Kirichok,Y.,Krapivinsky,G.&Clapham,D.E.The mitochondrial calciumuniporter is a highly selective ion channel.Nature 427,360-364,doi:10.1038/nature02246(2004).
37 Fedorenko,A.,Lishko,P.V.&Kirichok,Y.Mechanism of fatty-acid-dependent UCP1 uncoupling in brown fat mitochondria.Cell 151,400-413,doi:10.1016/j.cell.2012.09.010(2012).
38 Rodic,N.等人.DNA methylation is required for silencing of ant4,anadenine nucleotide translocase selectively expressed in mouse embryonic stemcells and germ cells.Stem Cells 23,1314-1323,doi:10.1634/stemcells.2005-0119(2005).
39 Lim,C.H.,Hamazaki,T.,Braun,E.L.,Wade,J.&Terada,N.Evolutionarygenomics implies a specific function of Ant4 in mammalian and anole lizardmale germ cells.PLoS One 6,e23122,doi:10.1371/journal.pone.0023122(2011).
序列表
<110> 加利福尼亚大学董事会（The Regents of the University of California）
<120> 非激素男女通用避孕药
<130> FIC21210060P
<150> 62/808,861
<151> 2019-02-22
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 315
<212> PRT
<213> human
<400> 1
Met His Arg Glu Pro Ala Lys Lys Lys Ala Glu Lys Arg Leu Phe Asp
1 5 10 15
Ala Ser Ser Phe Gly Lys Asp Leu Leu Ala Gly Gly Val Ala Ala Ala
20 25 30
Val Ser Lys Thr Ala Val Ala Pro Ile Glu Arg Val Lys Leu Leu Leu
35 40 45
Gln Val Gln Ala Ser Ser Lys Gln Ile Ser Pro Glu Ala Arg Tyr Lys
50 55 60
Gly Met Val Asp Cys Leu Val Arg Ile Pro Arg Glu Gln Gly Phe Phe
65 70 75 80
Ser Phe Trp Arg Gly Asn Leu Ala Asn Val Ile Arg Tyr Phe Pro Thr
85 90 95
Gln Ala Leu Asn Phe Ala Phe Lys Asp Lys Tyr Lys Gln Leu Phe Met
100 105 110
Ser Gly Val Asn Lys Glu Lys Gln Phe Trp Arg Trp Phe Leu Ala Asn
115 120 125
Leu Ala Ser Gly Gly Ala Ala Gly Ala Thr Ser Leu Cys Val Val Tyr
130 135 140
Pro Leu Asp Phe Ala Arg Thr Arg Leu Gly Val Asp Ile Gly Lys Gly
145 150 155 160
Pro Glu Glu Arg Gln Phe Lys Gly Leu Gly Asp Cys Ile Met Lys Ile
165 170 175
Ala Lys Ser Asp Gly Ile Ala Gly Leu Tyr Gln Gly Phe Gly Val Ser
180 185 190
Val Gln Gly Ile Ile Val Tyr Arg Ala Ser Tyr Phe Gly Ala Tyr Asp
195 200 205
Thr Val Lys Gly Leu Leu Pro Lys Pro Lys Lys Thr Pro Phe Leu Val
210 215 220
Ser Phe Phe Ile Ala Gln Val Val Thr Thr Cys Ser Gly Ile Leu Ser
225 230 235 240
Tyr Pro Phe Asp Thr Val Arg Arg Arg Met Met Met Gln Ser Gly Glu
245 250 255
Ala Lys Arg Gln Tyr Lys Gly Thr Leu Asp Cys Phe Val Lys Ile Tyr
260 265 270
Gln His Glu Gly Ile Ser Ser Phe Phe Arg Gly Ala Phe Ser Asn Val
275 280 285
Leu Arg Gly Thr Gly Gly Ala Leu Val Leu Val Leu Tyr Asp Lys Ile
290 295 300
Lys Glu Phe Phe His Ile Asp Ile Gly Gly Arg
305 310 315
<210> 2
<211> 1856
<212> DNA
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<400> 2
gcagcttttc cgcacgcgcc tcgccggcgc gcggctctct cagcgtccca agagccactt 60
tctcgccagt acgatgctgc agcggttttc cggttttccg cttcccttca tcgtagctcc 120
cgtactcatt tttagccact gctgccggtt tttatatcct tctccatcat gcatcgtgag 180
cctgcgaaaa agaaggcaga aaagcggctg tttgacgcct catccttcgg gaaggacctt 240
ctggccggcg gagtcgcggc agctgtgtcc aagacagcgg tggcgcccat cgagcgggtg 300
aagctgctgc tgcaggtgca ggcgtcgtcg aagcagatca gccccgaggc gcggtacaaa 360
ggcatggtgg actgcctggt gcggattcct cgcgagcagg gtttcttcag tttttggcgt 420
ggcaatttgg caaatgttat tcggtatttt ccaacacaag ctctaaactt tgcttttaag 480
gacaaataca agcagctatt catgtctgga gttaataaag aaaaacagtt ctggaggtgg 540
tttttggcaa acctggcttc tggtggagct gctggggcaa catccttatg tgtagtatat 600
cctctagatt ttgcccgaac ccgattaggt gtcgatattg gaaaaggtcc tgaggagcga 660
caattcaagg gtttaggtga ctgtattatg aaaatagcaa aatcagatgg aattgctggt 720
ttataccaag ggtttggtgt ttcagtacag ggcatcattg tgtaccgagc ctcttatttt 780
ggagcttatg acacagttaa gggtttatta ccaaagccaa agaaaactcc atttcttgtc 840
tcctttttca ttgctcaagt tgtgactaca tgctctggaa tactttctta tccctttgac 900
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ttagactgct ttgtgaagat ataccaacat gaaggaatca gttccttttt tcgtggcgcc 1020
ttctccaatg ttcttcgcgg tacagggggt gctttggtgt tggtattata tgataaaatt 1080
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gtagcgtctt ttaaattgct attcatttaa tatacctgtt ttcccatctt ttgaagtcat 1500
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<210> 4
<211> 1908
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Claims (24)

1.一种促进避孕的方法，其包括向有其需要的人给予包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂的组合物。
2.权利要求1所述的方法，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺或其盐，例如其乙醇胺盐，例如氯硝柳胺乙醇胺(NEN)。
3.权利要求1所述的方法，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物选自：氯硝柳胺、溴氯水杨酰苯胺、羟氯柳苯胺、碘醚柳胺、3-叔丁基-5-氯-N-(2-氯-4-硝基苯基)-2-羟基-6-甲基苯甲酰胺、二溴柳苯胺、美溴沙仑、三溴沙仑和2-碘-N-苯基苯甲酰胺(麦锈灵)。
4.权利要求1所述的方法，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物具有以下结构：
Figure FDA0003219704780000011
其中R1和R2独立地是卤素，如F、Cl、Br或I，取代的选自O和N的杂原子，如-OH、-NO2或O-Ph-Cl，或低级(C1-C4)烷基，如Me、Et或叔丁基，m是整数1、2、3或4，并且n是整数1、2、3、4或5。
5.权利要求1所述的方法，其中所述解偶联剂包含BAM15(N5,N6-双(2-氟苯基)-[1,2,5]噁二唑并[3,4-b]吡嗪-5,6-二胺)或其盐。
6.权利要求1、2、3、4或5所述的方法，其中所述组合物通过口服途径、局部途径、直肠途径或阴道途径给予。
7.权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述组合物作为丸剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂给予。
8.权利要求6所述的方法，其中所述组合物口服给予并且其中所述组合物作为丸剂给予。
9.权利要求6所述的方法，其中所述组合物局部给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
10.权利要求6所述的方法，其中所述组合物阴道内给予并且其中所述组合物作为乳膏、贴剂、阴道环或阴道膜给予。
11.权利要求6所述的方法，其中所述组合物直肠内给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
12.靶向温和线粒体解偶联剂作为避孕药的用途。
13.权利要求12所述的用途，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺或其盐，例如其乙醇胺盐，例如氯硝柳胺乙醇胺(NEN)。
14.权利要求12所述的用途，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物选自：氯硝柳胺、溴氯水杨酰苯胺、羟氯柳苯胺、碘醚柳胺、3-叔丁基-5-氯-N-(2-氯-4-硝基苯基)-2-羟基-6-甲基苯甲酰胺、二溴柳苯胺、美溴沙仑、三溴沙仑和2-碘-N-苯基苯甲酰胺(麦锈灵)。
15.权利要求12所述的用途，其中所述解偶联剂包含水杨酰苯胺化合物或其盐，并且所述水杨酰苯胺化合物具有以下结构：
Figure FDA0003219704780000021
其中R1和R2独立地是卤素，如F、Cl、Br或I，取代的选自O和N的杂原子，如-OH、-NO2或O-Ph-Cl，或低级(C1-C4)烷基，如Me、Et或叔丁基，m是整数1、2、3或4，并且n是整数1、2、3、4或5。
16.权利要求12所述的用途，其中所述解偶联剂包含BAM15(N5,N6-双(2-氟苯基)-[1,2,5]噁二唑并[3,4-b]吡嗪-5,6-二胺)或其盐。
17.权利要求12、13、14、15或16所述的用途，其中所述组合物通过口服途径、局部途径、直肠途径或阴道途径给予。
18.权利要求12-16中任一项所述的用途，其中所述组合物作为丸剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂给予。
19.权利要求17所述的用途，其中所述组合物口服给予并且其中所述组合物作为丸剂给予。
20.权利要求17所述的用途，其中所述组合物局部给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
21.权利要求17所述的用途，其中所述组合物阴道内给予并且其中所述组合物作为乳膏、贴剂、阴道环或阴道膜给予。
22.权利要求17所述的用途，其中所述组合物直肠内给予并且其中所述组合物作为乳膏或贴剂给予。
23.一种避孕药制剂，其包含有效量的靶向温和线粒体解偶联剂。
24.权利要求23所述的制剂，其呈丸剂、胶囊、栓剂、乳膏、阴道环、阴道膜或贴剂的形式。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB202101933D0 (en) * 2021-02-11 2021-03-31 Imp College Innovations Ltd Glioma therapy

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1314152A (zh) * 2001-03-24 2001-09-26 岳阳师范学院 硝苯柳胺作为杀精剂的应用
WO2013142408A1 (en) * 2012-03-20 2013-09-26 Monell Chemical Senses Center Method of modifying fertility
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Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002543770A (ja) * 1999-04-09 2002-12-24 ヒューマン ジノーム サイエンシーズ， インコーポレイテッド 脱共役タンパク質
CA3024610A1 (en) * 2016-05-18 2017-11-23 David J. Augeri Novel mitochondrial uncouplers for treatment of metabolic diseases and cancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1314152A (zh) * 2001-03-24 2001-09-26 岳阳师范学院 硝苯柳胺作为杀精剂的应用
WO2013142408A1 (en) * 2012-03-20 2013-09-26 Monell Chemical Senses Center Method of modifying fertility
US20180280372A1 (en) * 2016-11-22 2018-10-04 Washington University Compositions and methods for inhibiting autophagy and contraception

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ELIZABETH S CHILDRESS等: "Small Molecule Mitochondrial Uncouplers and Their Therapeutic Potential", J MED CHEM, vol. 61, no. 11, pages 4641 - 4655, XP055601616, DOI: 10.1021/acs.jmedchem.7b01182 *
H BREITBART等: "Molecular mechanisms of gossypol action on sperm motility", INT J BIOCHE, vol. 21, no. 10, pages 1097 - 1102, XP023406454, DOI: 10.1016/0020-711X(89)90049-9 *

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