CN113423387A - 提供持久眼部润滑的眼用制剂 - Google Patents

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Abstract

本公开内容涉及一种提供持久益处的用于干眼和其他眼部适应症的眼用制剂。本文描述的制剂提供持久的缓解，并且比目前市售的产品在眼睛上持续的时间长两倍至十倍。本公开内容还提供了减轻干眼的症状的方法、用于递送眼用药物的方法以及制备持久眼用制剂的方法。

Description

提供持久眼部润滑的眼用制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求于2018年12月10日提交的，发明人为Timothy Willis和Ralph Stone，标题为“OPHTHALMIC FORMULATIONS PROVIDING LONG-LASTING EYE LUBRICATION”的美国临时申请62/777,588的权益，所述美国临时申请在此通过引用以其整体并入。
1.领域
本公开内容提供了一种用于干眼和其他眼部适应症(ocular indications)的眼部治疗的新型持久眼用制剂。本文描述的制剂为干眼提供了比目前市售产品持续时间长2倍至10倍的缓解。还提供了治疗方法、药物递送方法和制备方法。
2.背景
2.1.引言
本文提供的“背景”描述是为了总体呈现本公开内容的背景的目的。目前署名的发明人的工作在本背景部分中描述的程度，以及在申请时可能本来就不符合作为现有技术的描述的方面，均未被明确承认或隐含地承认作为针对本公开内容的现有技术。
干眼是一种眼科医疗状况，目前存在于全球超过3.2亿患者和超过15％的US人口中。由干眼状况引起的不适可能包括眼干涩(ocular dryness)、沙粒感(grittiness)、灼烧、酸痛、擦伤或异物反应。不适的程度取决于受试者以及受试者的状况。提出的干眼的病因、治疗和症状在以下文章的汇编中描述：由Holly编著的The Preocular Tear Film inHealth,Disease,and Contact Lens Wear,The Dry Eye Institute,Lubbock,Tex.1986；由David A.Sullivan编著的Lacrimal Gland,Tear Film,and Dry Eye Syndromes,1994,Plenum Press,New York；由David A.Sullivan等人编著的Lacrimal Gland,Tear Film,and Dry Eye Syndromes 2,1998,Plenum Press,New York；由David A.Sullivan等人编著的Lacrimal Gland,Tear Film,and Dry Eye Syndromes 3,A部分和B部分,2002,KluwerAcademic/Plenum Publishers,New York,The2007DEWS Report Ocular Surface July2007,The DEWS II Report Ocular Surface July 2017，所述文章通过引用它们对干眼状况及其治疗的教导而并入本文。
此外，对于许多患者，与干眼相关的症状通常因使用眼睛假体诸如隐形眼镜而加剧。在一些情况下，单独或部分由于干眼及其症状，个体将停止佩戴隐形眼镜。此外，从眼睛蒸发的速率因隐形眼镜材料和表面的性质而加快。隐形眼镜的物理存在导致具有另外的物理和蒸发效应的弯月形成(menisci formation)，即使受试者具有足够的泪膜。对于许多受试者，隐形眼镜不耐受不能通过局部应用眼泪替代物来克服。因此，需要用于治疗干眼状况和用于改善对眼睛假体的耐受性的改善的组合物和方法。此外，当患者经历干眼或当佩戴眼睛假体时，患者可能呈现出眼部征象，包括眼睑刷上皮病变和角膜染色(cornealstaining)。
用于干眼的最常见治疗涉及通过局部应用人造眼泪替代物来暂时减轻干眼症状，所述人造眼泪替代物向眼睛和邻近组织(例如眼睑、角膜)的表面提供一定体积的液体。典型的商购可得眼泪替代物组合物包含水溶性聚合物溶液。这些水溶性聚合物溶液由于在眼睛上平均驻留的时间少于15分钟而仅提供有限的缓解。这样的溶液的实例包括以下的盐水溶液：聚乙烯醇、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素。美国专利第4,421,748号教导了一种人造眼泪组合物，所述人造眼泪组合物包含卵磷脂的水性低渗溶液和粘度调节剂诸如可溶性纤维素溶液。水性泪液膜在眼表面上扩展并且维持湿润且润滑的眼表面。还已知来自眼睛的水分的脱水可能导致不适。此外，市场上可获得意在用于干眼治疗的组合物。商购可得的组合物主要是水性物质，其通过将水溶性聚合物的膜添加在眼睛的表面上来补充泪膜。这些膜是短寿命的并且提供有限的缓解。
许多用于干眼治疗的改善的组合物在美国专利第4,914,088号、第5,278,151号、第5,294,607号、第5,578,586号和第9,161,905号中公开，每一篇美国专利都通过引用其对如何在眼睛的表面上形成油膜(包括组合物和用途)的教导而并入本文。美国专利第4,914,088号教导了使用某些带电荷的磷脂进行干眼症状的治疗。将带电荷的磷脂添加到眼睛中被认为帮助复制出在眼睛中自然存在的泪膜。根据该专利，磷脂组合物，优选以水乳液的形式，被局部应用至眼睛，其中它被认为分散在眼表面上并形成膜，该膜复制出由眨眼期间主要从睑板腺分泌的天然存在的脂质的扩散而形成的脂质层。因为磷脂在应用至眼睛时携带有净负电荷，据信排列的分子相互排斥，防止了复杂的团聚物形成，从而产生稳定的磷脂膜。该专利提出由带电荷的磷脂形成的膜帮助形成屏障膜，减少水层的蒸发，从而保护泪膜的理论。其他人提出磷脂也发挥作为表面活性剂的功能，维持乳液稳定性的理论。
上文提到的美国专利第5,278,151号、第5,294,607号、第5,578,586号、第9,279,095号和第9,375,401号公开了干眼治疗中的另外的改善。在这些专利中，美国专利第4,914,088号的干眼治疗组合物通过将油添加至干眼治疗组合物而改善，所述油优选非极性油，诸如由烃成分组成的矿物油。油被添加以通过以下来改善干眼治疗组合物的性能：通过由于在眼表面上形成发挥作为蒸发屏障的功能的油膜，即通过在泪膜的外表面上提供和/或增厚脱水屏障(油层)，从而增加在眼睛上形成的泪膜的寿命。因此，油提高了干眼治疗溶液的功效，并降低了受试者与受试者之间的表现变异性。它还补充了从睑板腺提供的油，在干眼的许多病例中，睑板腺不能提供足够的油来提供足够的脂质泪液层。在上文提到的专利中公开的优选的实施方案是包含介稳水包油乳液的干眼治疗组合物，其中水相包含带电荷的磷脂，该磷脂被认为既发挥作为乳化剂的功能，又发挥作为表面活性剂的功能，帮助油在眼睛上扩散以形成使油结合到泪膜的水层的非模糊膜。乳液合意地是“介”稳的，因此在乳液被应用至眼睛时，当它首次与眼环境接触时，它会迅速破坏(break)并扩散在眼表面上。
在上文描述的专利文献中，配制了介稳乳液，其中添加至眼睛的油的总量优选不超过25μL，更优选在约1μL和10μL之间变化，并且最优选在约1μL和5μL之间变化。如果添加至眼睛的油的量超过25μL，眼睛的表面上的油层可能过厚，导致眼睛的表面上形成油滴。这些滴可能导致延长的视力模糊。为了实现对添加至眼睛的油的量的控制，乳液中的油的浓度限值被控制在合理的限值内。含有浓度为按总组合物的重量计至少0.1％的油的乳液提供了一定益处，优选的浓度为治疗组合物的重量的至少1.0％，并且最优选的油含量在乳液的重量的约2.5％和12.5％之间变化。
美国专利第5,371,108号教导了一种产生包含油和蜡的凝胶以在眼表面上形成泪膜的方法，并且凝胶中蜡的存在可以延长油的驻留时间。由于以使得不引起超过大多数消费者可接受的视觉模糊的方式使蜡均质化中的困难，含蜡的凝胶尚未在商业上生产和销售。具体地，高压灭菌以对含蜡制剂进行灭菌导致增加的颗粒尺寸，其导致刺激和视力模糊。凝胶是具有低粘度的半固体制剂。相比之下，本公开内容涉及在室温表现为流动液体的介稳乳液。乳液的行为与液体相同，并且因此不表现出静态内部结构。
美国专利第5,278,151号教导了水包油乳液可以包含天然蜡。
关于天然眼泪，Shimizu和同事报道了典型的泪液体积为12.4±6.2μL。Shimizu等人,1993Nippon Ganka Gakkai Zasshi.97(9):1047-52。其他人报道了小体积6.2±2.0μL。Mishima等人,1996,IOVS 1966；5:264-76。
目前商购可得的产品，包括油和水乳液产品，通常通过油、水溶液和黏液模拟物(mucomimetic)的各种组合来补充泪膜的一层或更多层。这些脂质乳液提供了足够的润滑和防止干燥，但是它们在保持在眼睛上并提供持久缓解(其为最期望的临床结果)的能力方面仍然不足。然而，这些组合物不能与间质层结合，导致这些层在眼睛的表面上失去其天然稳定性并因此而具有有限的缓解，因为其在眼睛上的驻留时间少于45分钟。在没有与膜的每个后续层的连接性的情况下，脂质层、水层和黏蛋白层，无论是天然的、人造的还是它们的某种组合，倾向于在太短的时间段内被表达以至于不能提供来自干眼的症状的持久舒适。参见图1的眼睛和泪膜的层和界面的组分的放大视图。正常泪膜为3-6μm厚。泪膜上具有线的两张插图示出了脂质/水界面和水/黏蛋白界面的放大视图。第三张插图示出了与干眼相关的层和界面的变薄。特别地，它示出了(i)、(ii)和(iii)的变薄：角膜上皮细胞的表面上的(i)水层，(ii)未结合的黏蛋白层，和(iii)结合的黏蛋白层。现有产品不能使泪膜的不同层和界面包括脂质层稳定。因此，现有产品不能产生稳定的脂质层并提供长期的益处。
历史上，用于量化干眼治疗溶液的眼泪替代物的有效性的方法尚未被标准化，并且用于量化使用这样的眼泪替代物组合物获得的结果的许多方法通常是不准确的。出于这个原因，报道的使用已知眼泪替代物使干眼症状缓解在受试者与受试者之间有相当大的变化，并且无论用于量化使用眼泪替代物的缓解的方法如何，缓解通常不超过几分钟。
对于提供持久缓解的疗法，它不仅必须补充泪膜的有缺陷的层，还必须具有促进眼表面上的这些层的内稳态所必需的化学和结合性质。为了使任何解决方案对具有在病因和程度中变化很大的症状的大量患者可行，疗法需要尽可能接近地模仿天然的人类泪膜的性质。尽管有研究报道泪膜中蜡的存在，但其目的尚未被良好理解。
因为泪膜的一个目的是保护眼表面并为眼表面提供润滑，所以泪膜提供了用于药物递送的有吸引力的载体，然而小浓度的活性药物成分(API)的递送是业界面临的一个挑战。参见Patel等人2013,“Ocular drug delivery systems:An overview”WorldJ.Pharmacol 2(2)47-64。为了使赋形剂成为活性药物成分(API)的良好载体，需要模拟天然泪膜的性质和容量渗透摩尔浓度(osmolarity)，并在眼睛上保持延长的时间段。这样的产品会增加角膜上皮细胞的API生物利用度，其为眼部药物(ocular drugs)的长期期望的途径。
3.公开内容的概述
本文公开了一种以若干方式重建泪膜的水包油乳液，其中将天然蜡酯或合成蜡酯或者蜡酯的合适组合纳入泪膜中。特别地，它通过增加间质层自身的完整性来重建泪膜，使黏蛋白层与水层和/或角膜细胞结合并且使水层与脂质层结合，以及建立和增厚黏蛋白层、水层和脂质层本身。通过蜡酯及其水解产物来实现的结合和增厚过程以及随后的内稳态允许泪膜的层相互贴附，从而模拟天然泪膜并提供在眼睛上保持延长的时间段的泪膜。这种媒介物模拟泪膜，以及提供待用于如本文指出的药物递送的媒介物。
在一种实施方案中，本公开内容提供了一种眼用溶液，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；蜡酯，所述蜡酯可以是蜂蜡或是蜡酯的合适组合；并且其中眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。在一些实施方案中，眼用溶液在眼睛上提供约2小时至约5小时润滑。在其他实施方案中，眼用溶液在眼睛上提供约2小时至约8小时或1小时至10小时润滑。可选地，眼用溶液可以在眼睛上提供大于3小时、大于5小时、大于8小时或大于10小时润滑。
一种眼用溶液，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；蜡酯，诸如蜂蜡，包含蜡酯和除了这些酯的部分水解产物之外的其他蜡酯组合物；其中眼用溶液中的蜡酯组合物与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层相互作用，并发挥作用以维持黏蛋白层和水层之间的间质层、水层和脂质层之间的间质层的完整性。
一种眼用溶液，所述眼用溶液包含介稳乳液，所述介稳乳液包含水；脂质；表面活性剂；抗炎成分，诸如灭活的啤酒酵母(brewer’s yeast)或衍生物，诸如ADP核糖，蜡酯和除了这些酯的部分水解产物之外的其它蜡酯组合物；其中眼用溶液中的蜡酯组合物与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以维持黏蛋白层和水层之间的间质层、水层和脂质层之间的间质层的完整性，同时增强泪膜并减少由干眼引起的眼部炎症。
在另一种实施方案中，本公开内容提供了一种眼用溶液，所述眼用溶液包含基于脂质和蜡的乳液；所述乳液包含水；油和蜡或蜡酯成分，诸如鲸油或海豹油或者它们的合成形式成分；表面活性剂；以及除了这些酯的部分水解产物之外的其他蜡酯组合物；其中眼用溶液中的蜡酯组合物与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以增强和维持黏蛋白层和水层之间的间质层、水层和脂质层之间的间质层的完整性。
在另一种实施方案中，本公开内容提供了一种用于减轻干眼的症状的方法，所述方法包括使眼睛与眼用溶液接触，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述乳液包含：水；油；表面活性剂；蜡酯，诸如蜂蜡和部分水解的产物；并且其中眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。在一些实施方案中，方法在眼睛上提供约2小时至约5小时润滑。在其他实施方案中，方法在眼睛上提供约2小时至约8小时或1小时至10小时润滑。可选地，方法可以在眼睛上提供大于3小时润滑、大于5小时、大于8小时或大于10小时润滑。
在另一种实施方案中，本公开内容提供了制备眼用溶液的方法，所述眼用溶液在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑，其中所述溶液是介稳水包油乳液，其中所述方法包括：在去离子水溶液中制备包含蜡酯诸如蜂蜡和表面活性剂的蜡酯分散体；在去离子水溶液中制备包含油的水包油乳液；在合适的条件下分别高压灭菌蜂蜡分散体和水包油乳液；以及使经高压灭菌的蜡酯分散体和水包油乳液中无菌地共混，以制备在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑的介稳水包油乳液眼用溶液。在优选的实施方案中，脂质级分是均匀的油-蜂蜡乳化液滴。在一种实施方案中，组合物用于递送非处方或处方(仿制的(generic)或专有的(proprietary))药物。
4.附图简述
图1示出了具有不同区域的泪膜的放大视图。正常的泪膜为3-6微米厚。该图示出了脂质层、脂质/水界面、水层、水/黏蛋白界面、黏蛋白层和角膜。两张插图示出了脂质/水界面和水/黏蛋白界面的放大视图。第三张插图示出了与干眼症相关的层和界面的变薄。特别地，第三张插图示出了以下(i)、(ii)和(iii)的变薄：(i)水层，(ii)未结合的黏蛋白层，和(iii)与角膜上皮细胞表面结合的经结合的黏蛋白层。
图2示出了1％蜡酯原型产品(实线)对比商购可得的水溶性聚合物溶液(虚线)(n＝2)随以分钟计的时间(或以分钟计的驻留时间)的泪膜评分。
图3示出了1％蜡酯原型产品(实线)对比商购可得的水溶性聚合物溶液(虚线)(n＝5)随以分钟计的时间(或以分钟计的驻留时间)的泪膜评分。
图4示出了1％蜡酯原型产品(实线)对比商购可得的水溶性聚合物溶液(虚线)(n＝5)随以分钟计的时间(或以分钟计的驻留时间)的泪膜评分。
图5示出了1％蜡酯原型产品对比若干商购可得的溶液的以分钟计的驻留时间和泪膜评分的一些比较数据的图。灰色实线是使用EternaTearTM原型1％蜡酯产品的两项实验，灰色虚线是第一代商购可得的眼用产品。黑色虚线是第二代商购可得的眼用产品。
图6示出了在高压灭菌2x(实线)、3x(虚线)和4x(空心环)浓缩的乳液后乳液粒度分布的变化。上图示出了“制成(as made)”产品的粒度分布，而下图示出了对这些样品高压灭菌的效果。
图7示出了亚微米蜡酯颗粒在高压灭菌之前(黑色实线)和之后(虚线)的粒度分布。
图8示出了在具有辛苯昔醇40(Octoxynol-40)的水中的乳化过程中获得的蜡酯颗粒的粒度分布。黑色实线是制成的样品，而虚线是高压灭菌后所得的分布。
5.公开内容的详述
本发明涉及一种用于在眼睛的眼表面上形成人造泪膜的乳液组合物，该组合物能够提供增强的眼润滑，同时减少蒸发，并且比目前可获得的产品在眼睛上保持的时间长2倍至10倍。组合物还可用于将药物递送到眼表面，并用于治疗佩戴眼睛假体诸如隐形眼镜的个体，因为组合物润湿眼表面和假体表面两者并为眼表面和假体表面两者提供润滑。更具体地，本发明涉及一种乳液组合物，所述乳液组合物能够增强和维持眼表面上的稳定泪膜持续2小时和6小时之间的时间段，和/或向眼睛递送药物而不引起重大的视力模糊或不适。乳液期望地是乳液的形式，并且其特征在于使用蜡或蜡酯与油和适当表面活性剂和间质成分进行组合以增加在眼表面上的驻留时间，同时提供适于形成这样的乳液并在高压灭菌期间维持乳液的完整性的组合。
在一些实施方案中，本发明是一种具有天然蜡酯诸如蜂蜡的水包油乳液，其中天然蜡酯诸如蜂蜡以以下方式溶解：使其可以以受控方式递送，并且它在人造泪膜组合物中的存在通过规定介稳水包油乳液中的蜡酯的组成、浓度和粒度导致显著增加的在眼睛上的驻留时间。这种含蜡乳液可以使用一种或更多种表面活性剂来实现本领域技术人员接受作为制备、储存和应用于眼表面所期望的介稳性质。此外，这些表面活性剂中的一种或两种可以是阴离子极性磷脂。
添加天然蜡酯或合成的蜡酯及它们的部分水解产物诸如蜂蜡及其在乳液的各个相中的正常分布，具有通过允许润滑要素在正常条件下在眼睛上保持大于1小时和最高12小时的时间段来改善组合物的功效的效果。
本发明的化学组成和实现该组成的制备方法不仅通过使用脂质、水溶液和黏液模拟物来复制泪膜的离散的层(discrete layers)，而且通过引入浓度上接近地模拟天然泪膜的均质化蜡酯来补充其间质结合性质并建立和增厚泪膜。这样，实现了由眼睛润滑剂和共存的药物提供的缓解的持续时间的显著提高。
提出，蜡酯及其水解产物在泪膜中的作用维持了间质层本身的完整性，使黏蛋白层与水层结合，并且使水层与脂质层结合。此外，蜡酯本身用于建立增厚的黏蛋白层、水层和脂质层。由蜡酯实现的结合过程和随后的内稳态允许泪膜层相互贴附，从而允许整个泪膜在眼睛上保持延长的时间段。眼用组合物渗透泪膜的所有层，包括先前没有产品掺入的间质层。虽然对正常泪膜在这方面的理解还未完全已知或了解，但内部研究帮助我们得出结论：分泌蜡和蜡酯的眼睑的腺体(包括克劳泽腺、Wolfring腺和莫尔腺)，与分泌脂质的睑板腺和分泌水样分泌物的泪腺组合，由于正常眨眼活动，在眼睑的眼睑刷作用下，建立正常且稳定的眼泪膜。
本文描述的眼用溶液的粘度可以使用本领域技术人员熟知的技术来测量。测量粘度的方法的非限制性实例包括落球粘度计、粘度杯、稠度计(测量斜面上的流)、毛细管玻璃粘度计或旋转粘度计。许多仪器是商购可得的(Cole-Palmer Instrument Co.,VernonHills,IL,USA)。
延长的在眼睛上的驻留时间和与天然泪膜共享的特征进一步给予乳液这样的能力：不仅发挥作为用于眼睛和眼睛假体的润滑剂的作用，而且发挥作为能够增强递送药物的生物利用度的赋形剂的作用。
这种含蜡乳液维持在7.0和7.7之间的生理pH从而不引起患者不适，并用合适的缓冲体系来维持。油相处于按重量计约1.0％和高至约12.5％之间的浓度。优选地，油以约1％至约7.5％的范围存在。在优选的实施方案中，矿物油是具有不同分子量的两种油的混合物。
本发明的制剂可以包括上文的成分的组合，其中一些可能需要添加防腐剂，该防腐剂已被本领域技术人员公认为在眼睛上使用是安全的且可接受的。防腐剂的实例包括苯扎氯铵、
Figure BDA0003204615360000101
(Bio-Cide International Inc.,Norman,OK,USA)、
Figure BDA0003204615360000102
(Alcon Laboratories,Inc.,Fort Worth,TX,USA)、
Figure BDA0003204615360000103
(NovartisOphthalmics,East Hanover,NJ,USA)、聚六亚甲基双胍(ICI)、
Figure BDA0003204615360000104
(AbbottLaboratories Inc.,Chicago,IL,USA)、
Figure BDA0003204615360000105
(OCuSOFT,Rosenberg,TX,USA)。参见Moshirfar等人,2014,“Artificial tears potpourri:a literature review”ClinOphthalmol.8:1419-1433。在具有防腐剂的制剂中，通常还包括乙二胺四乙酸盐(EDTA)。
无论是制备用于无菌多剂量容器的制剂还是包含防腐剂的制剂，还都可以包含硼酸盐缓冲液。可选地，可以使用磷酸盐缓冲液。
在优选的实施方案中，眼用溶液不含防腐剂。在一些实施方案中，由于与传统的多次使用应用相关的细菌污染的风险，不含防腐剂的溶液以一次性使用包装进行递送。在另一种实施方案中，眼用溶液以无菌多剂量瓶进行递送。若干配置是已知的。作为实例，AptarPharma(Crystal Lake,IL,USA)销售机械地操作和利用过滤膜的多剂量挤压分配器。参见PCT公布第WO 2017/074420号和第WO 2017/132190号(Aptargroup,Inc.)。该技术用于为ALLEGAN RESTASIS MULTIDOSETM产品递送环孢菌素眼用乳液。该技术还用于递送CLEAR
Figure BDA0003204615360000106
PURE
Figure BDA0003204615360000107
产品。另一种无菌多次使用系统是JOTTM产品。JOTTM产品是使用压力来递送受控的滴剂并提供替代当前分配器的水平递送的滴眼剂分配器。http:// jotteq.com/about/。
本发明的治疗组合物是一种水包油乳液，所述水包油乳液具有水相和蜡组分，含有各自存在的油滴，此外还具有表面活性剂组合，所述表面活性剂组合用于使乳液稳定和在将乳液应用于眼睛之后使乳液在眼表面上扩展的双重目的。表面活性剂组合可以包含主要表面活性剂和次要表面活性剂，并且是这样的表面活性剂组合：能够形成在制备中和在储存期间稳定但期望地在应用于眼表面时是介稳的乳液，—即，是这样的表面活性剂组合：当应用于眼睛时快速分化从而在眼表面上快速形成非模糊的油膜，并且使蜡酯通过乳液的每一相播散。在制备和储存期间稳定的乳液是这样的乳液：可以在静置期间分离成单独的相，但可以通过单纯的摇动进行重构。不稳定的乳液是这样的乳液：通常分离形成不能通过单纯的摇动来消除的油膜或浮油(slick)。在一些实施方案中，表面活性剂是非离子表面活性剂，诸如聚山梨醇酯80、辛苯昔醇40或二磷脂酰甘油诸如二肉豆蔻酰磷脂酰甘油。在其他实施方案中，表面活性剂是阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂可以是阴离子极性磷脂，诸如溶血磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油或磷脂酰丝氨酸。在优选的实施方案中，阴离子表面活性剂是二磷脂酰甘油。在优选的实施方案中，表面活性剂是两种表面活性剂的混合物。
使用期间介稳的乳液是本发明的目的合意的。虽然稳定乳液可用于干眼症状的缓解，但与介稳乳液相反，稳定乳液在应用于眼表面时不会快速分化(differentiate)。出于以下原因，这是不期望的。乳液由于两个不同的相的存在通常是光学不透明的。因此，眼睛的表面上的不透明乳液可能引起模糊。模糊的持续时间取决于乳液分化并形成复制泪膜的单独的层所需的时间。此外，乳液最容易以标准滴从滴眼器(eyedropper)添加至眼睛。眼睛能够容纳小于25μL体积的有限体积的液体。25μL的体积显著小于标准滴的体积。因此，如果乳液是稳定的并且在应用于眼睛之后未能快速分化，过量的乳液在眨眼期间从眼睛排出。乳液从眼睛排出将导致治疗溶液的有效组分在可以形成持久泪膜之前从眼睛排出。由于这个原因，可能不能获得足够量的有效组分来形成期望的泪膜。因此，尽管稳定乳液可以减轻干眼的症状持续有限的时间段，但它是本发明的次优选的实施方案。
如本文使用的术语介稳乳液是这样的乳液：在储存中稳定或分化成两个分离的层，但在使用前容易地通过单纯的摇动进行重构。当介稳乳液作为标准滴添加至眼睛时，介稳乳液快速分化，允许在角膜表面上快速形成油膜，而不因眨眼而具有过量的油排出。优选地，乳液在应用至眼睛之后约10次眨眼内分化，更优选地在小于约1分钟的时间内分化。模糊可能发生在将大量的过量液体从眼睛排出所需的时间期间。在乳液的分化期间和之后，油膜的形成通过使用表面活性剂组合来辅助，该表面活性剂组合用于帮助形成乳液并在乳液破坏时促进油在眼睛的表面上的扩展。因此，介稳乳液是本发明的优选的实施方案。
本发明的乳液包含水包油乳液。用于形成乳液的油可以源自动物、植物、坚果、石油等。源自动物、植物种子和坚果的那些与脂肪类似，并且主要是甘油酯或脂肪酸，并且因此包含大量的赋予相同极性的酸和/或酯基团，并且不太优选用于本发明的目的。这些油的实例是红花油、玉米油、菜籽油、鲸油和海豹油或化学上类似的油。可选地，源自石油的油通常是本质上不含极性取代并因此适用于本发明的目的的脂肪烃或芳香烃，条件是油被改进为与人类组织(诸如眼表面)相容。优选地，油是具有10个至150个碳原子的直链烃油，并且更优选地，油是具有10个至26个碳原子的饱和正烷烃或异烷烃。不饱和烯烃可以被使用，但化学上较不稳定。在优选的实施方案中，油是具有不同分子量的两种油的混合物。在一些实施方案中，矿物油是用于本发明的目的的优选的油。优选的矿物油的实例是
Figure BDA0003204615360000121
15和
Figure BDA0003204615360000122
35。
可用于配制合适的水包油乳液的另外的油可以是植物油，诸如蓖麻油、杏仁油、月桂油、玉米油、花生油、菜籽油、红花油、可乐果油、轻质橄榄油、月桂叶油，或被列为适合用于眼用制剂的其他公认安全(generally recognized as safe,GRAS)油。可选地，油可以是适合用于形成脂质体的油。
乳液内的油组分可以在合理的限值内变化，条件是在其应用于眼睛之后保持在眼睛上的油的量在受控体积内，并且不超过25μL。优选地，体积不超过15μL，更优选地在约1μL和10μL之间变化，并且最优选地在约1μL和5μL之间变化。如果添加至眼睛的油的量超过15μL，眼睛的表面上的油层可能会过厚，并且导致延长的模糊。含有浓度为按总组合物的重量计至少0.1％的油的治疗组合物提供了一定益处。油的优选浓度为治疗组合物的重量的至少1.0％。优选地，治疗溶液的油含量在按组合物的重量计约1％和12.5％之间变化。
在一种优选的实施方案中，蜂蜡是白蜂蜡(Cera Alba)或黄蜂蜡(Cera Flava)。蜂蜡可以是USDA认证的有机蜂蜡或传统的天然蜂蜡。可选地，蜂蜡可以是可从各种来源，包括Koster Keunen(Watertown,CT,USA)购买的合成蜡。这样的蜡可能在乳液的制备期间含有部分水解产物。
本文描述的制剂中使用的蜡的量可以变化。在一些实施方案中，当油的百分比趋于范围～7.5wt.％的上部时，蜂蜡的相对重量百分比较低，例如0.5wt.％或更少。类似地，当油趋于其范围的较低部分时，蜂蜡的相对重量百分比较高，0.75wt.％至1.25wt.％。
治疗组合物中可以存在其他添加剂。这样的物质包括少量的中性脂质和油，诸如一种或更多种甘油三酯、部分水解的酯、胆固醇酯、高分子量类异戊二烯；稳定剂、另外的表面活性剂；抗炎化合物；黏液模拟物；防腐剂；pH调节剂，以提供优选地具有约6.5和7.8之间并且最优选地约7.2和7.5之间的pH的组合物；足够浓度的盐、缓冲剂、甘油或糖，以形成轻度低渗组合物，使得乳液在眼部环境中不稳定；等等，所有这些对于本领域技术人员来说都是明显的。
5.1.具有药物的制剂
另一类有用的添加剂包括药物。因为使用本发明的乳液组合物在眼睛的表面上形成的油膜的长期稳定性，所以由于药物在眼睛上的增加的接触时间，得到了药物递送至眼睛的延长且改善的递送。适用于使用本发明的成膜组合物递送至眼睛的药物是可溶于组合物的水相或油相中的那些药物，尽管优选的是药物可溶于油相中。说明性药物包括抗生素、抗病毒剂、抗炎剂和抗青光眼剂，诸如1983年10月26日公布的欧洲专利申请第0 092453号第5.3.1节和第5.3.2节或者2015年4月23日公布的PCT公布第WO 2015/05531号第5页第5-22行中部分说明的，所述文献通过引用并入本文。
适用于本发明的一些常见眼用药物或活性剂包括但不限于腺苷二磷酸核糖、安他唑啉、安普乐定、安普乐定、阿托品、氮卓斯汀、贝泊斯汀(bepotastine)、倍他洛尔、倍他洛尔、比马前列素、溴莫尼定、布林佐胺、溴芬酸、溴芬酸、卡替洛尔、西曲溴胺(cetrimide)、氯霉素、环丙沙星、地塞米松、双氯芬酸、多佐胺、依美斯汀、依匹斯汀、依匹斯汀、氟比洛芬、硫酸新霉素B(framycetin sulphate)、庆大霉素、短杆菌肽、金缕梅水、后马托品、透明质酸、富马酸酮替芬、拉坦前列素、左布诺洛尔、左氧氟沙星、洛度沙胺、氯替泼诺、莫西沙星、萘甲唑啉、萘甲唑啉、马来酸奈多罗米(nedocromil maleate)、氧氟沙星、奥洛他定、哌加他尼(pegaptanib)、非尼拉敏、毛果芸香碱、普拉洛芬、泼尼松龙、ranibizumab、利美索龙、丁卡因钠、四氢唑林、硫柳汞(thiomersal)、噻吗洛尔、妥布霉素、trafluprost、曲伏前列素、酮咯酸氨丁三醇、氨丁三醇、赛洛唑啉，和组合诸如曲伏前列素/噻吗洛尔、多佐胺/噻吗洛尔、比马前列素/噻吗洛尔、溴莫尼定/噻吗洛尔、拉坦前列素/噻吗洛尔、布林佐胺/噻吗洛尔。在优选的实施方案中，眼用药物是水或油相可溶的。
5.2.优选组合物制剂
优选的制剂的实例为按重量百分比的以下：
蜡酯：优选0.25％至1.0％，范围：0.10％-1.25％。在一些实施方案中，蜡酯可以以以下存在：0.25％至0.35％；0.30％至0.40％；0.35％至0.45％；0.40％至0.50％；0.45％至0.55％；0.50％至0.60％；0.55％至0.65％；0.60％至0.70％；0.65％至0.75％；0.70％至0.80％；0.75％至0.85％；0.80％至0.90％；0.85％至0.95％；0.90％至1.00％；0.95％至1.05％；1.00％至1.10％；1.05％至1.15％；1.10％至1.20％；或1.15％至1.25％。在一些实施方案中，蜡酯可以是蜂蜡，例如天然存在的蜂蜡或合成蜂蜡。
油：优选3.5％至5.5％，使用两种不同重量的油(例如，l.0％
Figure BDA0003204615360000141
15&4.5％
Figure BDA0003204615360000142
35)。范围：1.0％至6.5％。在一些实施方案中，油可以以以下存在：1.0％至1.5％；1.25％至1.75％；1.5％至2.0％；1.75％至2.25％；2.0％至2.5％；2.25％至2.75％；2.5％至3.0％；2.75％至3.25％；3.0％至3.5％；3.25％至3.75％；3.5％至4.0％；3.75％至4.25％；4.0％至4.5％；4.25％至4.75％；4.5％至5.0％；5.75％至6.25％；或6.0％至6.5％。
聚山梨醇酯80：优选0.4％，范围：0.2％至0.7％。在一些实施方案中，聚山梨醇酯80可以以以下存在：0.2％至0.4％；0.3％至0.5％；0.4％至0.6％；0.5％至0.7％。
在优选的实施方案中，使用第二种表面活性剂，其可以是辛苯昔醇40或阴离子极性磷脂(APP)。如果第二种表面活性剂是辛苯昔醇40：优选0.3％，范围0.1％至0.6％。在一些实施方案中，辛苯昔醇40可以以以下存在：0.1％至0.2％；0.15％至0.25％；0.2％至0.3％；0.25％至0.35％；0.3％至0.4％；0.35％至0.45％；0.4％至0.5％；0.45％至0.55％；或0.5％至0.6％。如果第二种表面活性剂是阴离子极性磷脂(APP)，它优选地是二磷脂酰甘油，诸如二肉豆蔻酰磷脂酰甘油：优选0.25％，范围为0.1％至0.75％。在一些实施方案中，APP可以以以下存在：0.1％至0.2％；0.15％至0.25％；0.2％至0.3％；0.25％至0.35％；0.3％至0.4％；0.35％至0.45％；0.4％至0.5％；0.45％至0.55％；0.5％至0.6％；0.55％至0.65％；0.6％至0.7％；或0.65％至0.75％。
二氢磷酸盐和一氢磷酸盐(Monobasic and Dibasic Phosphate)：0.25％和0.30％，具有0.01％至0.5％的范围。
氯化钠：0.67％，范围0.60％至0.75％。
制剂pH：7.6+0.1,-0.6
重量渗透摩尔浓度：优选230mOsmol/kg至260mOsmol/kg，范围210mOsmol/kg至260mOsmol/kg
去离子水
任选地，EDTA。如果存在的话，优选0.01％，范围按重量计0.007％至0.02％。通常，如果制剂中存在防腐剂，则使用EDTA。
任选地，抗炎化合物，诸如失活的啤酒酵母或腺苷二磷酸核糖，如果存在的话，优选按重量计0.02％至1％。
任选地，可以包括黏液模拟物诸如HP Guar，糖基氨基聚糖诸如透明质酸(HA)或透明质酸钠。用于眼用溶液的典型HA浓度的范围为0.1％-0.4％。可以掺入其他添加剂，诸如润肤剂(emollient)或缓和剂(demulcent)。非限制性实施例包括以下的聚合物：环氧乙烷、环氧丙烷或环氧丁烷。另外的实例为羧甲基纤维素(CMC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚丙烯酸(PAA)、聚乙二醇(PEG)、丙二醇(PG)或聚乙烯醇(PVA)。液体多元醇的具体浓度范围：甘油，0.2％至1％；聚乙二醇300，0.2％至1％；聚乙二醇400，0.2％至1％；丙二醇，0.2％至1％；或聚乙烯醇，0.1％至4％。纤维素衍生物的具体浓度范围：羧甲基纤维素钠，0.2％至2.5％；羟乙基纤维素，0.2％至2.5％；羟丙基甲基纤维素，0.2％至2.5％；和甲基纤维素，0.2％至2.5％。参见Pucker,AD等人.,2016,“Over the counter(OTC)artificial teardrops for dry eye syndrome”,Cochrane Database Syst Rev.Feb 23；2:CD009729。
眼用溶液通过使用酸诸如HCl或柠檬酸或者碱诸如NaOH达到合适的pH。
5.3.定义
尽管认为以下术语是本领域普通技术人员充分理解的，但阐述以下定义以促进对本公开内容的主题的解释。
如本文使用的，“蜡酯”意指具有长的或非常长的碳链并且在最高60℃或100℃是固体。蜡酯可以天然地来自动物、植物、细菌来源，或者是合成的，诸如蜂蜡、中国蜡(Chinese wax)、虫胶蜡(Shellac Wax)和鲸蜡(Spermaceti wax)。优选的蜡酯是蜂蜡，蜂蜡是若干组分的蜡或蜡酯的混合物，所述组分具有C15H31COOC30H61的典型近似化学式。对于天然蜂蜡，主要组分是棕榈酸酯、棕榈油酸酯以及长链脂肪醇的油酸酯，其中两种主要组分三十烷基棕榈酸酯(triacontanyl palmitate)CH3(CH2)29O-CO-(CH2)14CH3与蜡酸CH3(CH2)24COOH的比例为约6:1。蜂蜡的化学组成为单酯，30％至55％；烃，10％至18％；游离脂肪酸，10％至15％；二酯&复合酯，8％至18％；羟基单酯，3％至6％；羟基聚酯，7％至10％；游离脂肪醇，1％至2％；次要组分，2％至7％。参见Leray,Claude,“Waxes”Kirk-OthmerEncyclopedia of Chemical Technology,Sept.15,2016,John Wiley&Sons,vol.25,pp.1-25；2018年9月27日登录的www.wikipedia.org“Beeswax”。天然蜂蜡也作为白蜂蜡或黄蜂蜡(白色蜂蜡或黄色蜂蜡)商购可得。可选地，蜂蜡可以是合成蜂蜡。通常，合成蜂蜡是以下的共混物：脂肪酯(C32至C62)、高分子量烃(C21至C34)、脂肪酸(C16至C36)和脂肪醇(C16至C36)。对于合成蜂蜡，酯是最丰富的，其次是烃、酸并且然后是醇。合成蜂蜡的实例可以在Anderson,美国专利第4,151,001号中找到。在乳液的制备期间，作为商业方法的一部分，蜡酯可以水解形成另外的酸和/或醇。
在整个说明书中，术语“约(about)”和/或“大约/近似(approximately)”可以与数值和/或范围结合使用。术语“约”被理解为意指在所叙述的值附近的那些值。例如，“约40[单位]”可以意指在40的±25％内(例如30至50)，在±20％、±15％、±10％、±9％、±8％、±7％、±6％、±5％、±4％、±3％、±2％、±1％，小于1±％，或其中或小于其的任何其他值或值范围内。可选地，根据上下文，术语“约”可以意指±二分之一标准偏差、±一个标准偏差或±两个标准偏差。此外，短语“小于约[值]”或“大于约[值]”应根据本文提供的术语“约”的定义来理解。术语“约”和“大约/近似”可以互换地使用。
在整个说明书中，提供了某些量的数值范围。应当理解，这些范围包括其中的所有子范围。因此，范围“50至80”包括其中所有可能的范围(例如51-79、52-78、53-77、54-76、55-75、60-70等)。此外，给定范围内的所有值可以是其所包含范围的端点(例如，范围50-80包括具有端点的范围，诸如55-80、50-75等)。
如本文使用的，在本说明书中和权利要求书中使用的动词“包含(comprise)”及其变形以其非限制性意义使用，以意指包括该词之后的项目，但是不排除没有具体提及的项目。
在整个说明书中，词“包含(comprising)”或变形诸如“包含(comprises)”或“包含(comprising)”，被理解为隐含包括陈述的要素、整数或步骤，或者要素、整数或步骤的组，但不排除任何其他要素、整数或步骤，或者要素、整数或步骤的组。本公开内容可以合适地“包含以下”、“由以下组成”或“基本上由以下组成”：权利要求书中描述的步骤、元件和/或试剂。
还应注意权利要求书可被撰写为排除了任何任选的要素。因此，此声明意在用作与权利要求要素的引述结合地使用这样的排他性术语诸如“唯一地(solely)”、“仅(only)”等等或使用“负面”限制的先行基础。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语和科学术语具有与由本公开内容所属的领域的普通技术人员通常理解的相同含义。描述了优选的方法、装置和材料，尽管在本公开内容的实践或测试中可以使用与本文描述的那些类似或等同的任何方法和材料。本文引用的所有参考文献通过引用以其整体并入。
5.4.评价泪膜的方法
存在许多诊断干眼的方法，包括患者报告的症状以及评估泪膜的眼部测试。一些人表示了对诊断金标准的缺乏的担忧。参见Pucker等人2016。
一种方法是
Figure BDA0003204615360000181
II眼表面干涉仪。它是一种经FDA批准的非接触诊断仪器，测量脂质层厚度、眨眼速率并对睑板腺成像。TearScience,Morrisville,NC,USA。参见Eom等人,2013,“Correlation between quantitative measurements of tear filmlipid layer thickness and Meibomian gland loss in patients with obstructiveMeibomian gland dysfunction and normal controls”Am J Ophthalmol.155(6)1104-1110；King-Smith等人,2010,“Application of a novel interferometric method toinvestigate the relation between lipid layer thickness and tear filmthinning”Invest Ophthalmol Vis Sci.2010；51(5):2418-2423；King-Smith等人,2009,“The contribution of lipid layer movement to tear film thinning and breakup”Invest Ophthalmol Vis Sci.2009；50(6):2747-2756；Blackie等人,2009,“Therelationship between dry eye symptoms and lipid layer thickness”Cornea 28(7)789-794。还参见Korb等人,美国专利第9,545,197号、第8,915,592号、第8,746,883号和第8,591,033号，所述文献的内容通过引用并入本文。
另一种测量泪膜的方法是眼泪破裂时间(tear breakup time,TBUT)。在这项测试中，荧光素染料用于在患者不眨眼时对眼睛进行染色。记录了泪膜破裂的时间，其中>10秒被认为是正常的，5-10秒是边际的(marginal)，并且<5秒是低的。Wang和Craig,2018,“Comparative Evaluation of Clinical Methods of Tear Film StabilityAssessment:A Randomized Crossover Trial”JAMA Ophthalmol.136(3):291-294。
5.4.1.评价泪膜的干涉图样
下文描述了使用光分析泪膜的另一种方法和观察到的干涉图样。在这种方法中，泪膜通过添加一标准滴的治疗溶液(40μL至50μL)在眼表面上形成。其后，形成的泪膜通过将光源投射到眼表面上并在视频屏幕上观察来自光源的反射图像来评估。光源及其位置被配置为照亮眼表面上大约10mm2的表面积。形成干涉图样，所述干涉图样的一种或更多种颜色指示眼表面上油层的厚度。波的颜色与已知膜厚度的标准相关。这样，泪膜被评估经过实时的时间段，并首先根据以下等级进行评级。也参见Yokoi等人,1996,“Correlation oftear lipid layer interference patterns with the diagnosis and severity of dryeye”Am J Ophthalmol 122 818-824。已知由下文表1的膜特征列中的干涉图样确定的脂质膜厚度与泪膜中的实际脂质膜厚度相关。实际脂质膜的厚度转而与眼睛上泪膜的总体厚度相关。泪膜的不同层参见图1。
表1
Figure BDA0003204615360000191
关于上述类别，需要认识到的是，由于评估为D和F类的薄膜的广泛劣化，膜厚度是粗略的近似。在已经如上文描述的对泪膜进行评级时，然后数字格式用于表示泪膜厚度的变化。1.0的数字等级表示一个字母等级的变化，例如，如果将泪膜在应用治疗组合物的滴之前的C基线发现改善至B评级，则给出1.0的数字等级。2.0的数字等级表示两个字母等级的改善；并且3.0的数字等级表示三个字母等级的改善。对于许多以下实施例：3.0的数字等级代表着从D到A的改善，所述改善是根据使用的测试方法的最大改善，因为具有F等级的受试者被筛选并从测试中消除。表格中使用了这些等级。
在一些实施例中，给出了超过3.0的评级。在这样的情况下，所形成的膜是异常的和超出等级的(off scale)。在大多数实施例中，对使用治疗组合物形成的泪膜的评价经过了4小时的时间段，以确定膜在眼睛上的驻留时间。因此，随着时间的推移，数字等级降低，但在所有情况下，数字等级基于添加治疗组合物之前的基线泪膜。
以下实施例进一步说明本公开内容，并且不意在限制范围。特别地，应当理解，本公开内容不限于所描述的特定实施方案，因为这样的实施方案当然可以变化。还应当理解本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，且并非意在限制，因为本公开内容的范围将仅被所附的权利要求书限制。
6.实施例
6.1.含蜡酯的制剂
本节讨论了几个主要目标：用于改善泪膜稳定性的眼用制剂；一种用于制备胶体蜡酯颗粒的受控的可重复方法，所述胶体蜡酯颗粒以0.1wt.％至1.5wt.％水平掺入到最终乳液中；以及形成满足非处方(OTC)使用要求的介稳乳液。
通过用单硬脂酸甘油酯(GMS)代替磷脂1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-(磷酸-rac-(1-甘油)盐(DMPG二钠)制备了易于再乳化的制剂，并且建立了用于形成蜡颗粒以添加到这些乳液中的可再现方法。
6.1.1.含蜡酯的产品的泪膜稳定性
在本组实验中，将含蜡酯的水包油乳液与若干其他商购可得产品进行了比较。
含蜂蜡的眼用溶液：H714：5.0Dr-21、10.0％Bee’s Milk(蜂蜡、芝麻油、卵磷脂、对羟基苯甲酸甲酯和水)(Koster Keunan)、0.18吐温-80、0.1EDTA和b.a./NaCl至100mOsm。
水溶性聚合物溶液#1：*DUASORB*(含有0.1％右旋糖酐70、0.3％羟丙基甲基纤维素2910的聚合体系)、0.001％聚季铵盐-1、硼酸钠、KCl、NaCl、H2O以及HCl和/或NaOH。
6.1.2.水溶性聚合物溶液#1对比蜡酯的泪膜功效。
泪膜性能使用标准对侧眼实验通过如上文第5.4.1节所描述地对干涉图样进行观察进行评估。
递送方法
大约50μL的标准完整液滴递送到五名受试者的眼睛。
结果
蜡酯制剂H714对比水溶性聚合物溶液#1：H714在泪膜厚度的干涉分析中表现非常好。最初，H714在前两小时被评分为高于基线2.5个等级，并且三小时后回到基线。在另一方面，在一组实验中，水溶性聚合物溶液最初高于基线2.0个等级，但在30分钟内很迅速地消退。在另一组实验中，H714和水溶性聚合物两者在滴注后都处于高于基线约1.8个等级。15分钟后，水溶性聚合物溶液#1几乎回到了基线，而H714(～1％蜂蜡)在眼睛上保持了超过两个小时。显示最初的2.0评分变化的水溶性聚合物#1在1小时时显示基本回到基线。(参见图2)。
在另一个实验中，H714制剂对比第二种水溶性制剂进行了测试。蜡酯制剂最初显示出2评分增加，并在3小时和4小时之间回到基线(小于0.5评分变化)。水溶性聚合物制剂#2最初仅显示出约0.7评分变化，并在不到30分钟内回到低于0.5评分变化(参见图3)。在第三个实验中，蜡酯制剂对比水溶性聚合物#1进行了评价。最初，两种制剂都显示出1.8个等级的评分增加。水溶性制剂在15分钟内基本上回到基线，而蜡酯制剂保持其评分改善超过3小时(参见图4)。图4中示出了含蜡制剂H714对比水溶性聚合物溶液#1的泪膜分析结果。该图显示含蜡酯的产品保护泪膜的时间明显长于商购可得的水溶性聚合物溶液产品。图5示出了图3和图4中示出的结果的复合。数据展示，包含蜡酯的产品提供了比其他商购可得的产品基本上更长的泪膜保护持续时间。换句话说，蜡酯制剂提供大于3小时的持久眼睛润滑。
定性地讲，第二种水溶性聚合物溶液的外观在整个测试期间都是自然的，而H714的外观的范围则根据个体不同为自然的到珠状的，到细丝状的，再到综合的(synthetic)。然而，在15分钟内，H714产品在所有受试者中产生了自然外观、彩色的和高骑行(high-riding)波。蜡酯制剂中的任一种均未报告模糊，而2/5的受试者报告在递送H714后的轻度刺痛。
6.1.3.乳液
最初的研究目标是为了满足几个要求，包括去除DMPG钠(允许用另一种表面活性剂对其进行代替)和最小化或消除EDTA二钠以增加使用者舒适性。为此，EDTA二钠组分被排除在所研究的制剂之外。
先前的工作表明，DMPG钠在介稳乳液的产生中起着关键作用。因此，为了形成商业上可接受的乳液，可以使用不同的表面活性剂来代替DMPG钠。
初步实验表明，来自矿物油的“稳定”乳液可以通过优化
Figure BDA0003204615360000221
和聚山梨醇酯-80的表面活性剂混合物的亲水亲油平衡(HLB)水平以及优化浓度和加工参数(温度、均质化)来制备。从化学降解的角度来看，该产品是“稳定”乳液，但从胶体动力学的角度来看，不一定如此。事实上，期望乳液关于相分离是介稳的。
在下文所描述的研究中，乳液制剂用作模型系统，其中我们根据需要更换组分以满足商业需要。
6.1.4.不具有磷脂(用GMS代替DMPG钠))的乳剂
乳液通过用处于基于总组合物的0.15wt.％和0.30wt.％的表面活性剂浓度的GMS代替Na-DMPG来制备。(在这些实验中，不将EDTA二钠添加到制剂)。改变Myrj-52和GMS的比例以调整表面活性剂混合物的计算的HLB。乳化相由～5.0wt.％Drakeol-35矿物油组成。样品组成列于表2中。水相含有0.67g NaCl和0.05g Na2HPO4(无水)/100ml水相。
HLB g Myrj-52 g GMS g Drakeol 35 表面活性剂含量
1 11.1 0.094 0.065 5.700 0.15％
2 12.0 0.102 0.054 5.334 0.15％
3 13.0 0.112 0.042 5.508 0.15％
4 13.7 0.127 0.037 5.404 0.15％
11 14.2 0.130 0.030 5.284 0.15％
12 15.1 0.139 0.020 5.284 0.15％
13
14 16.1 0.298 0.017 5.309 0.30％
15 15.0 0.279 0.042 5.300 0.30％
16 14.0 0.258 0.065 5.283 0.30％
17 12.9 0.233 0.091 5.308 0.31％
18 12.0 0.207 0.108 5.303 0.30％
表2：不具有DMPG钠的乳液的样品组成和计算的HLB值
所描述的条件产生了在相分离后易于再乳化的乳液。一般地，计算的HLB的值的增加导致静置时更完全的相分离，如由水相的浊度的降低表明的。在延长的时间段后，表2中示出的制剂中的一些油没有保持分散状态。
由于表2中列出的组合物看起来是有前景的，因此进行了进一步的研究以确定增加的表面活性剂浓度、0.1wt.％的EDTA二钠和添加到制剂中的轻质矿物油的影响。
6.1.5.具有蜡酯的乳液(分散在水相中的颗粒)
乳液和分散的蜂蜡颗粒共混物通过将蜂蜡颗粒分散体(在高离子强度介质中)添加到先前制备的具有表2中示出的组成的乳液中来制备。共混物中所得的蜂蜡(BW)的浓度如表3中示出的。
HLB BW含量 表面活性剂含量
11.05 0.11％ 0.13％
11.99 0.11％ 0.12％
13.03 0.10％ 0.12％
13.70 0.10％ 0.13％
15.11 0.09％ 0.13％
16.13 0.09％ 0.26％
15.04 0.09％ 0.26％
14.04 0.09％ 0.26％
12.91 0.10％ 0.26％
12.03 0.09％ 0.26％
表3：使乳液与蜡酯颗粒分散体共混后的乳液蜂蜡荷载。
已经发现，分散在水相(在组成上类似于乳液的连续相)中的BW颗粒可以与乳液成功地共混，而不具有BW颗粒的团聚。
6.2.含蜡酯的乳液和高压灭菌
由于许多用于干眼的现有产品的局限性，研究了用于制备第二代产品的各种方法。实例是通过共乳化技术进行制备。尽管如上文提及的，这是一种临床上可行的产品，但该样品没有表现出足够的商业稳定性特征。
通常，注意到显示出良好临床结果和在高压灭菌器中的足够稳定性的眼用乳液在与所添加的蜡酯(诸如上文公开的那些)进行高压灭菌时失败。在典型的实验中，失败由严重的蜡团聚(gross wax aggregation)组成，其中蜡酯作为一个单独的相被排除：在高压灭菌完成后，蜂蜡颗粒没有保持分散。如果团聚发生，递送到眼睛的浓度变得不稳定，并且蜡颗粒可能刺激眼睛。
为了确定这种失败的原因，分别研究了乳液和蜂蜡颗粒分散体的表现，其中最终目标是形成用于临床测试的合适的共混物。这项工作导致了一种制备具有改善的稳定性和性能的含蜡酯的“第二代”眼用乳液的方法。
研究表明，用于生产产品的方法需要被修改以成功地制备含蜡酯的乳液，该乳液也是货架稳定的(shelf stable)。修改的程序由蜡酯颗粒分散体和乳液组分的单独制备和高压灭菌，随后是确保产品无菌的无菌共混步骤组成。不同的步骤分别描述在下文描述。
6.2.1.蜡酯乳液组分加工
由于不可能用单个高压灭菌步骤产生最终的含蜡酯的乳液产品，所以开发了两步制备方法，其中最终的无菌共混步骤将组分组合。这样做是为了防止乳液的化学组成/性质(chemistry)影响蜡酯颗粒在高压灭菌条件下的稳定性。
由于在共混期间发生的相互稀释效应，乳液组分如上文描述地进行制备，但所有内容物的浓度相对于水倍增。增加的乳化油混合物浓度影响了乳液在高压灭菌器中的表现，其中增加的荷载(分散的乳液组分的量)最终导致高压灭菌期间的乳液失败。图6示出了在高压灭菌之前(上图)和之后(下图)从2x(实线)、3x(虚线)和4x(空心环)浓缩的乳液获得的粒度分布的重叠。
图6示出了可以制备具有足够高压灭菌稳定性的双倍或三倍浓缩的蜂蜡乳液样品，并且然后用稳定的蜡酯分散体稀释以获得样品中期望的蜡酯浓度。这些发现的主要结果是，可以定义一种生产方法，其中乳液以浓缩形式制备，高压灭菌，然后在最终包装步骤中与之前高压灭菌的蜡颗粒分散体无菌地共混。高压灭菌的结果是粒度分布的平均尺寸的伴随的浓度依赖性增加，导致增加的介稳态性。
最后的共混步骤(用下文描述的蜡酯分散体)将乳液组分稀释回期望的最终浓度，并为“第二代”眼用乳液提供蜡颗粒。该步骤还提供了一种“微调”蜡酯和矿物油的相对浓度以提供最佳的临床表现的方法。
6.2.2.蜡酯颗粒分散体的制剂
蜡颗粒分散体通过将融熔的蜂蜡(～1.0％)在蒸馏水中与添加的辛苯昔醇-40(～0.2％)在例如～75℃进行均质化来制备。辛苯昔醇-40的高浊点(>100℃)意味着它的乳化效率在较高的温度通过其水溶性的降低(有效降低HLB值)而提高。因此，在高压灭菌条件下，预计辛苯昔醇-40会通过从水相中的溶解状态重新分配到颗粒/液滴表面上并防止絮凝来使融熔的蜡滴稳定。
由于蜂蜡的熔点为～63℃，蜂蜡在高压灭菌条件下完全融熔，并且分散体由水中的蜂蜡液滴和表面活性剂组成。随着样品温度在高压灭菌过程中持续升高，辛苯昔醇-40变得越来越不溶于水并倾向于向颗粒表面(液滴/水界面)迁移，有助于使融熔的蜂蜡液滴稳定。然而，在这些实验中使用的低表面活性剂浓度，该机制单独可能无法为这些颗粒/液滴提供足够的稳定性。
先前的实验显示出，水中的亚微米蜂蜡颗粒带有很高的负电荷(ζ电势的高负值)，并且所导致的静电排斥对它们的稳定性有重大贡献。事实上，亚微米尺寸的颗粒可以高压灭菌，其中它们的粒度分布只有小的变化。然而，在这些分散体中不存在表面活性剂。这一事实证明了静电排斥模型作为稳定化机制的重要性，甚至在不存在表面活性剂的情况下作为稳定化机制的重要性。
亚微米尺寸的颗粒在高压灭菌前(黑线)和高压灭菌后(红线)的尺寸分布在图7中示出。然而，由于复杂的加工，预计亚微米尺寸的颗粒不可用于具有持久效果的用于干眼的商业产品。
在不存在添加的表面活性剂的情况下，不能制备大尺寸的颗粒分散体。操作颗粒形成机制不同于用于形成亚微米尺寸分散体的简单成核和颗粒生长模型。在这种情况下，使用了乳化技术，其中添加的表面活性剂在均质化序列期间使生长的蜂蜡液滴稳定。表面活性剂对于防止高压灭菌后冷却时间段期间的液滴团聚也是重要的。
除了化学考虑因素外，加工方法承担着关键作用：这些颗粒的高压灭菌的成功或失败完全取决于所用的方法。体系的化学组成/性质产生了在高压灭菌器中稳定的颗粒分散体(作为融熔的蜂蜡液滴)，但是在样品冷却期间样品温度降低到接近蜂蜡的熔点(结晶温度)后，颗粒分散体就不可逆地团聚。
虽然不能在高压灭菌条件下测量ζ电势值，但目视观察到，密封的蜂蜡颗粒/液滴分散体在分散在水中时在121℃保持稳定(伴有轻轻搅动)。图8示出了高压灭菌之前和之后蜡酯颗粒在水和辛苯昔醇-40中(通过乳化过程获得)的典型粒度分布。
鉴于蜡颗粒电荷在其稳定性中的重要性，盐含量也成为一个基本参数。即，在高离子强度(盐浓度)，颗粒倾向于团聚，在软蜡的情况下，这导致在高压灭菌条件下不可逆的聚并(甚至在存在某种表面活性剂的情况下)。这一发现的结果是蜂蜡颗粒不能在含有高浓度的盐(高离子强度体系)的水相中高压灭菌。
6.2.3.乳液共混
共混步骤(浓缩的乳液和蜂蜡分散体)确保合适的量可以被组合以实现提交的产品中矿物油、蜂蜡和其他组分的期望的最终浓度。该程序也允许最终产品中蜂蜡总含量的变化，同时维持恒定的乳液组分组成。本质上，在这个过程中，乳液以增加的组分水平制备，而蜂蜡颗粒在蒸馏水中用添加的表面活性剂乳化。两个级分中各种组分的浓度(在高压灭菌前)可以进行调整以允许最终乳液组合物的相对宽的变化。
蜡在高压灭菌条件下的不可逆团聚(蜡突发(breakout))的机制看起来涉及相对高的(近似等渗的)盐浓度的存在。这种高离子荷载导致显著降低蜡酯颗粒的ζ电势，当这些分散体经受高压灭菌条件时，这基本上去除了重要的稳定化机制。辛苯昔醇-40的存在有助于在高压灭菌器中存在的高温使蜂蜡乳液稳定。
激光衍射分析显示，乳液在以这种方式制备时不经历大量的颗粒团聚。这是预计共混的乳液显示出良好长期稳定性特征的主要原因。
然后将两种组分分别高压灭菌，并以相等的比例(按质量)混合，以产生包含0.5wt.％或1.0wt.％蜡酯的最终产品。
7.公开内容的概括性陈述
以下编号的陈述提供了对公开内容的一般性描述，并且不意在限制所附的权利要求书。
陈述1：本公开内容提供了一种眼用溶液，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；蜡酯，所述蜡酯以约0.1重量％至约1.5重量％的浓度存在；并且其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。眼用溶液提供了稳定且适当的正常泪膜厚度，这可以通过干涉测量术(interferometry)或泪膜破裂时间(TBUT)或其他诊断方法来证明。
陈述2：本公开内容提供了陈述1所述的眼用溶液，其中在与眼睛接触时与以下相互作用：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)脂质层和水层之间的界面；和(vii)水层和黏蛋白层之间的界面，和/或角膜细胞。
陈述3：本公开内容提供了陈述1-2中任一项所述的眼用溶液，其中所述蜡酯是天然蜂蜡或合成蜂蜡，诸如白蜂蜡或黄蜂蜡。
陈述4：本公开内容提供了陈述1-3中任一项所述的眼用溶液，其中所述蜡酯以约0.1重量％至约1.25重量％的浓度存在。
陈述5：本公开内容提供了陈述1-4中任一项所述的眼用溶液，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
陈述6：本公开内容提供了陈述1-5中任一项所述的眼用溶液，其中矿物油以约1.0重量％至约7.5重量％的浓度存在。
陈述7.陈述6所述的眼用溶液，其中所述油是矿物油。
陈述8.陈述6所述的眼用溶液，其中所述油是植物油。
陈述9.陈述1-8中任一项所述的眼用溶液，其中所述表面活性剂包括磷脂。
陈述10.陈述1-9中任一项所述的眼用溶液，其中所述表面活性剂包括非离子表面活性剂。
陈述11.陈述1-10中任一项所述的眼用溶液，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
陈述12.陈述10所述的眼用溶液，其中所述两种或更多种表面活性剂的混合物包含聚山梨醇酯80、辛苯昔醇40或阴离子极性磷脂(APP)。
陈述13.陈述1所述的眼用溶液，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜂蜡是浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的白蜂蜡或黄蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
陈述14.陈述1-13中任一项所述的眼用溶液，还包含药物。
陈述15.陈述1-14中任一项所述的眼用溶液，被包装在无菌多次使用容器或一次性使用容器中。
陈述16.陈述1-15中任一项所述的眼用溶液，被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
陈述17.陈述1-14中任一项所述的眼用溶液，还包含防腐剂，诸如稳定化的氧氯复合物
Figure BDA0003204615360000291
或聚六亚甲基双胍(PHMB)或聚季铵盐-1(Alcon)。
陈述18.陈述1-14中任一项所述的眼用溶液，用于作为用于眼修复的再润湿和/或润滑溶液使用。
陈述19.一种眼用溶液，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；包含蜡酯和部分水解的酯的蜂蜡；其中所述眼用溶液中的蜡酯和部分水解的酯与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以维持所述黏蛋白层和所述水层之间的间质层、所述水层和所述脂质层之间的间质层的完整性。
陈述20.陈述18所述的眼用溶液，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层或所述脂质层的厚度。
陈述21.陈述19所述的眼用溶液，其中所述蜡酯发挥作用以增强所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层。
陈述22.陈述19-21中任一项所述的眼用溶液，其中由所述蜡酯实现的结合和内稳态允许泪膜的所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层彼此相互作用，从而允许泪膜在眼睛上保持延长的时间段。
陈述23.一种向受试者递送药物或活性剂的方法，所述方法包括向受试者的眼睛施用包含药物和水包油乳液的眼用溶液；所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；蜂蜡；并且其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。
陈述24.陈述23所述的方法，其中所述药物是水溶性药物。
陈述25.陈述23所述的方法，其中所述药物是油溶性药物。
陈述26.一种用于减轻干眼的症状的方法，所述方法包括使眼睛与包含水包油乳液的眼用溶液接触，所述水包油乳液包含：水；油；表面活性剂；蜂蜡或蜡酯组合物；并且其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。
陈述27.陈述26所述的方法，其中所述眼用溶液在与眼睛接触时与以下相互作用：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)所述脂质层和所述水层之间的界面；和(vii)所述水层和所述黏蛋白层之间的界面。
陈述28.陈述26-27中任一项所述的方法，其中所述蜂蜡是白蜂蜡或黄蜂蜡。
陈述29.陈述26-28中任一项所述的方法，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
陈述30.陈述26-29中任一项所述的方法，其中所述油以约1.0重量％至约7.5重量％的浓度存在。
陈述31.陈述30所述的方法，其中所述油是矿物油。
陈述32.陈述30所述的方法，其中所述油是植物油。
陈述33.陈述26-30中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
陈述34.陈述26所述的方法，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1.0重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜂蜡是浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的白蜂蜡或黄蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
陈述35.陈述26所述的方法，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1.0重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)人造蜂蜡,所述人造蜂蜡为浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的蜡酯和部分水解的蜡酯的组合；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
陈述35.陈述26-35中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在无菌多次使用容器或无菌一次性使用容器中。
陈述36.陈述25-35中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
陈述37.一种制备眼用溶液的方法，所述眼用溶液在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑，其中所述溶液是介稳水包油乳液，其中所述方法包括：在去离子水溶液中制备包含蜂蜡或人造蜂蜡和表面活性剂的蜡分散体；在去离子水溶液中制备包含油的水包油乳液；将所述蜂蜡分散体和所述水包油乳液分别高压灭菌；并且将经高压灭菌的所述蜂蜡分散体和所述水包油乳液无菌地共混，以制备在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑的介稳水包油乳液眼用溶液。
陈述38.陈述37所述的方法，其中所述眼用溶液在与眼睛接触时渗透：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)所述脂质层和所述水层之间的界面；和(vii)所述水层和所述黏蛋白层之间的界面。
陈述39.陈述37-38中任一项所述的方法，其中所述蜂蜡是白蜂蜡或黄蜂蜡。
陈述40.陈述37-38中任一项所述的方法，其中所述蜡是人造蜂蜡。
陈述41.陈述37-40中任一项所述的方法，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
陈述42.陈述37-40中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
陈述41.陈述37所述的方法，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1.0重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜂蜡是浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的白蜂蜡或黄蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
陈述43.陈述37-42中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在无菌多次使用容器或无菌一次性使用容器中。
陈述44.陈述37-42中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
陈述45.一种制备眼用溶液的方法，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含水；油；表面活性剂；包含蜡酯的蜂蜡或人造蜂蜡；其中所述眼用溶液中的蜡酯或水解产物与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以维持所述黏蛋白层和所述水层之间的间质层以及所述水层和所述脂质层之间的间质层的完整性。
陈述46.陈述45所述的方法，其中所述蜡酯或水解产物发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层或所述脂质层的厚度。
陈述47.陈述45-46中任一项所述的方法，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层的厚度。
陈述48.陈述45-46中任一项所述的方法，其中由所述蜡酯或水解产物实现的结合和内稳态允许泪膜的所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层彼此相互作用，从而允许泪膜在眼睛上保持稳定持续延长的时间段。
陈述49.一种向受试者递送药物的方法，所述方法包括向受试者的眼睛施用包含药物和水包油乳液的眼用溶液，所述水包油乳液包含：(a)水；(b)油；(c)表面活性剂；(d)蜂蜡；和(e)其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)通过提供稳定和适当的正常泪膜厚度在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑，这可以通过干涉测量术或泪膜破裂时间(TBUT)或其他诊断方法来证明。
应当理解，上文的描述仅代表说明性实施方案和实例。为了方便读者，上文的描述集中在所有可能实施方案的有限数量的代表性实例上，所述实例教导了本公开内容的原理。描述没有试图穷竭地列举所有可能的变化形式或甚至所描述的那些变化形式的组合。替代实施方案可能没有针对本公开内容的特定部分而呈现，或者进一步地未描述的替代实施方案可能对部分而言是可得的，不应被视为那些替代实施方案的否认声明(disclaimer)。普通技术人员将理解，那些未描述的实施方案中的许多涉及技术和材料的差异，而不是本公开内容的原理的应用的差异。因此，本公开内容不意在被限制为小于以下权利要求书和等同物中阐述的范围。
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Claims (50)

1.一种眼用溶液，包含水包油乳液，所述水包油乳液包含
(a)水；
(b)油；
(c)表面活性剂；
(d)蜡酯，所述蜡酯以约0.1重量％至约1.5重量％的浓度存在；
和
(e)其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。
2.根据权利要求1所述的眼用溶液，其中在与眼睛接触时渗透：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)所述脂质层和所述水层之间的界面；和(vii)所述水层和所述黏蛋白层之间的界面，和/或角膜细胞。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的眼用溶液，其中所述蜡酯以约0.2重量％至约1.25重量％的浓度存在。
4.根据权利要求1所述的眼用溶液，其中所述蜡酯是合成蜂蜡或天然蜂蜡。
5.根据权利要求4所述的眼用溶液，其中所述蜡酯是白蜂蜡或黄蜂蜡。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，其中所述油以约1.0重量％至约7.5重量％的浓度存在。
8.根据权利要求7所述的眼用溶液，其中所述油是矿物油。
9.根据权利要求7所述的眼用溶液，其中所述油是植物油。
10.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，其中所述表面活性剂包括非离子表面活性剂。
11.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
12.根据权利要求11所述的眼用溶液，其中所述两种或更多种表面活性剂的混合物包含聚山梨醇酯80、辛苯昔醇40或阴离子极性磷脂(APP)。
13.根据权利要求1所述的眼用溶液，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜡酯是浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的天然蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
14.根据权利要求1所述的眼用溶液，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜡酯是浓度为约0.25重量％至约1.0重量％的合成蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
15.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，还包含药物或活性剂。
16.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，被包装在无菌多次使用容器或无菌一次性使用容器中。
17.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
18.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液，还包含防腐剂，诸如稳定化的氧氯复合物
Figure FDA0003204615350000021
或聚六亚甲基双胍(PHMB)或聚季铵盐-1(Polyquad)。
19.根据权利要求1-5中任一项所述的眼用溶液作为用于眼修复的再润湿和/或润滑溶液使用。
20.一种眼用溶液，包含水包油乳液，所述水包油乳液包含
(a)水；
(b)油；
(c)表面活性剂；
(d)蜡酯，所述蜡酯以约0.1重量％至约1.5重量％的浓度存在；
(e)其中所述眼用溶液中的蜡酯与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以维持或增强所述黏蛋白层和所述水层之间的间质层、所述水层和所述脂质层之间的间质层的完整性。
21.根据权利要求20所述的眼用溶液，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层或所述脂质层的厚度。
22.根据权利要求20所述的眼用溶液，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层的厚度。
23.根据权利要求19-22中任一项所述的眼用溶液，其中由所述蜡酯或水解产物实现的结合和内稳态允许泪膜的所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层彼此相互作用，从而允许泪膜在眼睛上保持延长的时间段。
24.一种用于向受试者递送药物或活性剂的方法，所述方法包括向所述受试者的眼睛施用包含药物和水包油乳液的眼用溶液，所述水包油乳液包含
(a)水；
(b)油；
(c)表面活性剂；
(d)蜡酯，所述蜡酯以约0.1重量％至约1.5重量％的浓度存在；
和
(e)其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述药物是水溶性药物。
26.根据权利要求24所述的方法，其中所述药物是油溶性药物。
27.一种用于减轻干眼的症状的方法，所述方法包括使眼睛与包含水包油乳液的眼用溶液接触，所述水包油乳液包含：
(a)水；
(b)油；
(c)表面活性剂；
(d)蜡酯，所述蜡酯以约0.1重量％至约1.5重量％的浓度存在；
和
(e)其中所述眼用溶液(i)形成在与眼睛接触时分离成油相和水相的介稳乳液；和(ii)在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述眼用溶液在与眼睛接触时与以下相互作用：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)所述脂质层和所述水层之间的界面；和(vii)所述水层和所述黏蛋白层之间的界面，和未受保护的角膜细胞。
29.根据权利要求27所述的方法，其中所述蜡酯是天然蜂蜡或合成蜂蜡。
30.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
31.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述油以约1.0重量％至约7.5重量％的浓度存在。
32.根据权利要求30所述的方法，其中所述油是矿物油。
33.根据权利要求30所述的方法，其中所述油是植物油。
34.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
35.根据权利要求27所述的方法，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1.0重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜡酯是以约0.25重量％至约1.0重量％的浓度存在的天然蜂蜡或合成蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
36.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在无菌多次使用容器或无菌一次性使用容器中。
37.根据权利要求27-29中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
38.一种制备眼用溶液的方法，所述眼用溶液在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑，其中所述溶液是介稳水包油乳液，其中所述方法包括：
(a)在去离子水溶液中制备蜡酯和表面活性剂；
(b)在去离子水溶液中制备包含油的水包油乳液；
(c)分别对蜂蜡分散体和所述水包油乳液进行高压灭菌；
(d)并且使经高压灭菌的所述蜂蜡分散体和所述水包油乳液无菌地共混，以制备在眼睛上提供约2小时至约12小时润滑的介稳水包油乳液眼用溶液。
39.根据权利要求38所述的方法，其中所述眼用溶液在与眼睛接触时渗透：眼睛的(iii)脂质层；(iv)水层；(v)黏蛋白层；(vi)所述脂质层和所述水层之间的界面；和(vii)所述水层和所述黏蛋白层之间的界面。
40.根据权利要求38所述的方法，其中所述蜡酯是天然蜂蜡。
41.根据权利要求38所述的方法，其中所述蜂蜡是合成蜂蜡。
42.根据权利要求38-41中任一项所述的方法，其中所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物。
43.根据权利要求38-41中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂是两种或更多种表面活性剂的混合物。
44.根据权利要求38所述的方法，其中(i)所述油是较轻分子量油和较重分子量油的混合物，并且以约1.0重量％至约5.5重量％的浓度存在；(ii)所述表面活性剂是浓度为约0.35重量％至约0.45重量％的聚山梨醇酯80和浓度为约0.3重量％至约0.4重量％的二肉豆蔻酰磷脂酰甘油的混合物；(iii)所述蜡酯是以约0.25重量％至约1.0重量％的浓度存在的天然蜂蜡或合成蜂蜡；并且所述眼用溶液具有约230mOsmol/kg至约260mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。
45.根据权利要求38-41中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在无菌多次使用容器或无菌一次性使用容器中。
46.根据权利要求38-41中任一项所述的方法，其中所述眼用溶液被包装在多剂量非保存(MDNP)容器中。
47.一种制备眼用溶液的方法，所述眼用溶液包含水包油乳液，所述水包油乳液包含
(a)水；
(b)油；
(c)表面活性剂；
(d)蜡酯；
(e)其中所述眼用溶液中的蜡酯与受试者的眼睛中的黏蛋白层、水层和脂质层结合，并发挥作用以维持所述黏蛋白层和所述水层之间的间质层以及所述水层和所述脂质层之间的间质层的完整性。
48.根据权利要求47所述的方法，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层或所述脂质层的厚度。
49.根据权利要求47中任一项所述的方法，其中所述蜡酯发挥作用以增加所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层的厚度。
50.根据权利要求47中任一项所述的方法，其中由所述蜡酯实现的结合和内稳态允许泪膜的所述黏蛋白层、所述水层和所述脂质层相互作用，从而允许所述泪膜在眼睛上保持延长的时间段。
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