CN113186080A - 一种多头一体化核酸提取试管及方法 - Google Patents
一种多头一体化核酸提取试管及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113186080A CN113186080A CN202110590972.0A CN202110590972A CN113186080A CN 113186080 A CN113186080 A CN 113186080A CN 202110590972 A CN202110590972 A CN 202110590972A CN 113186080 A CN113186080 A CN 113186080A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nucleic acid
- magnetic
- wall
- zone
- main pipe
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims abstract description 86
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims abstract description 86
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 86
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims abstract description 83
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 46
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 41
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract description 34
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 29
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 28
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000005336 cracking Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 26
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 claims description 9
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 claims description 6
- 238000011901 isothermal amplification Methods 0.000 claims description 6
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 239000012943 hotmelt Substances 0.000 claims description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 3
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 239000013013 elastic material Substances 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000013536 elastomeric material Substances 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000003793 prenatal diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
- C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
- C12N15/1013—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by using magnetic beads
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及核酸提取和检测领域，尤其涉及一种多头一体化核酸提取试管及方法。该试管包括主管；主管内部腔体从上到下依次设置有裂解区、洗涤区和洗脱区；裂解区与洗涤区以及洗涤区与洗脱区之间分别设置有疏水密封层分隔开，并在洗涤区和洗脱区内分别设置有磁珠洗涤液和核酸洗脱液；所述的主管内部腔体还设置有由裂解区延伸至洗脱区的磁道；洗脱区内部腔体设置有多个隔板将洗脱区分隔为多个相互独立的支管；该试管提高核酸提取效率，使得磁珠运动时更加平稳。同时，在主管底端设置多个独立支管分别对磁珠进行洗脱，提高提取结果准确性。
Description
技术领域
本发明涉及核酸提取和检测领域，尤其涉及一种多头一体化核酸提取试管及方法。
背景技术
随着基因检测、个性化给药、产前诊断等的普及，在生物行业各领域都追求高通量、自动化的今天，传统DNA提取方法的局限越来越明显。由于磁珠法提取核酸能够实现自动化提取，进行大批量操作，并且操作简单、用时短，因而磁珠法提取核酸越来越受到重视。
中国发明专利申请（公开号CN108796038B，公开日：20191018）公开了一种核酸一体化检测方法及检测试剂管，通过在主管内设置多个呈上下布置的分隔塞，并在每个分隔塞上设置液相或固相的疏水层，从而将检测试剂管内的裂解液、清洗液和反应液进行隔离；将样品加入裂解液中进行混匀和裂解,并利用纳米磁珠对样品中的核酸进行提取，然后利用外部磁性体带动纳米磁珠携带核酸沿着检测试剂管内壁上的磁珠通道依次穿过各个疏水层进入清洗液和反应液，实现核酸的清洗和扩增，其中，反应液所需的生物试剂储藏在反应液上方的分隔塞内，最后外部设备通过光学检测实现对样品核酸的检测，从而实现在同一个检测试剂管内进行核酸提取、清洗和扩增反应多个步骤。本发明具有能够减少检测误差和降低操作难度的特点。
现有技术存在以下不足：主管内壁的磁珠通道数量少并且磁珠通道宽度较窄，磁体从主管外壁一次带动的磁珠数量较少，从而造成核酸提取效率较低；磁珠通道宽度较窄使得磁珠之间容易相互堆叠而不能均匀分布在磁珠通道内壁，从而造成磁珠运动时不平稳。同时，磁棒带动所有洗涤后的磁珠在相同的洗脱区同时进行洗脱，不能将磁珠分开洗脱进行结果对照进而排除误差影响因素，从而降低了提取结果的准确性。
发明内容
本发明的目的是：针对上述问题，提出在主管内部设置磁道，磁棒插入磁道内孔进而带动磁珠贴合磁道外壁并且随着磁棒运动；从而使得磁珠下移不受磁珠通道数量限制，一次带动较多数量的磁珠，提高核酸提取效率；磁珠在面积较大的磁道外壁上均匀分布而不相互堆叠，使得磁珠运动时更加平稳。同时，在主管底端设置多个独立支管分别对磁珠进行洗脱，提高提取结果准确性的一种多头一体化核酸提取试管及方法。
为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：
一种多头一体化核酸提取试管，该试管包括主管；主管内部腔体从上到下依次设置有裂解区、洗涤区和洗脱区；裂解区与洗涤区以及洗涤区与洗脱区之间分别设置有疏水密封层分隔开，并在洗涤区和洗脱区内分别设置有磁珠洗涤液和核酸洗脱液；所述的主管内部腔体还设置有由裂解区延伸至洗脱区的磁道，所述的磁道一端封闭，另一端设置有供磁棒伸入的开口；洗脱区内部腔体设置有多个隔板，多个隔板在径向两端分别与洗脱区腔体内壁和磁道外壁相连接，从而将洗脱区分隔为多个相互独立的支管；两个相邻的隔板相对分布，洗脱区腔体内壁和磁道外壁相对分布从而组成支管四壁，洗脱区底面与支管四壁底端相连接形成支管底面。
另外，本发明还公开了一种一体化核酸提取和检测装置，包括所述的一体化核酸提取试管和磁棒，磁棒外壁与磁道内孔相配合。
作为优选，主管内部腔体设置有第一分隔塞和第二分隔塞；磁道外壁与第一分隔塞和第二分隔塞之间都存在环形缝隙；疏水密封层分别位于第一分隔塞和第二分隔塞内并且将所在位置的主管内部腔体填充密封。
作为优选，疏水密封层为石蜡或者液相疏水层；第一分隔塞和第二分隔塞都为弹性材料。支管底端为相互独立的圆柱形状。多个支管沿着主管中心呈圆周形状分布；磁道轴向中心轴线与主管轴向中心轴向重合。
作为优选，第一分隔塞包括第一塞体、第一圆弧面、第一棱柱面和第一中心孔；主管内壁上端为圆弧形状，主管内壁下端为六棱柱形状；第一圆弧面为圆弧形状并且与主管上端的圆弧内壁过盈配合，第一棱柱面为六棱柱形状并且与主管下端的六棱柱内壁过盈配合；第一中心孔被磁道贯穿并且与磁道外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。
作为优选，第二分隔塞包括第二塞体、第二棱柱面和第二中心孔；主管内壁还设置有第二台阶面；水平方向的第二塞体底面与水平方向的第二台阶面相接触；第二棱柱面与主管下端的六棱柱内壁过盈配合，第二中心孔被磁道贯穿并且与磁道外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。
作为优选，主管顶端设置有管盖，管盖通过内螺纹与主管外壁的外螺纹相旋合；管盖设置有竖直贯穿的定位孔，定位孔与磁道外壁相配合。
另外，本发明还公开了一种核酸提取和检测方法，该方法采用所述的一种多头一体化核酸提取试管，该方法包括以下的步骤：
（S1）先在裂解区内预置裂解液和磁珠，将管盖拧开后把待检测样本细胞添加至裂解区，样本细胞被裂解液裂解并释放出完整核酸并且与磁珠相互结合；或者直接将裂解后含有待检测样本细胞和磁珠的溶液添加至裂解区；
（S2）将磁棒从磁道开口插入裂解区并且下移至洗涤区，磁棒吸引磁珠贴合磁道外壁并且跟随磁棒穿过第一分隔塞内的疏水密封层下移至洗涤区；当疏水密封层为石蜡时，先对主管加热使得石蜡热熔；
（S3）磁珠洗涤液除去与磁珠相结合的核酸中的蛋白质和无机盐等一些杂质后，磁棒带动磁珠继续下移穿过第二分隔塞内热熔的疏水密封层至洗脱区并且分别进入多个不同支管内；
（S4）核酸洗脱液与洗涤后的磁珠相接触将磁珠上结合的核酸洗脱至不同支管的核酸洗脱液中；
（S5）核酸在核酸洗脱液中进行PCR或等温扩增反应，并且核酸洗脱液中引入分子信标，使得外部设备通过荧光定量检测即可实时观察到PCR或等温扩增反应，并通过分析荧光值得到样品核酸的数量从而实现对样品核酸的检测；而后将不同支管中洗脱磁珠后的核酸洗脱液的检测结果分别对比完成一体化核酸提取和检测过程。
本发明采用上述技术方案的一种多头一体化核酸提取试管及方法的优点是：
疏水密封层分别将裂解区内的细胞裂解液与洗涤区内的磁珠洗涤液以及洗涤区内的磁珠洗涤液与洗脱区内的核酸洗脱液分开；磁棒从磁道顶端开口放入磁道内孔后利用其自身的磁力将裂解区内的磁珠吸取贴合至磁道外壁；磁棒下移进而带动磁珠下移穿过疏水密封层分别进入洗涤区和洗脱区进行洗涤和洗脱从而完成核酸的提取；而此种方式中，磁珠贴合磁道外壁并且随着磁棒运动，整个磁道外壁都可以供磁珠运动而不受磁珠通道条数的限制，一次可以带动较多数量的磁珠，提高核酸提取效率；同时，磁珠在面积较大的磁道外壁上均匀分布而不相互堆叠，使得磁珠运动时更加平稳。而且，此种方式中磁棒上的磁珠进入洗脱区时被隔板分隔为多个部分，并且分别在多个相互独立的支管内进行洗脱从而完成磁珠分开洗脱过程；而后对多个相互独立的支管洗脱后的溶液进行对照分析排除误差影响因素，从而提高了提取结果的准确性。
附图说明
图1为本发明的结构示意图。
图2为第一分隔塞的结构示意图。
图3为第二分隔塞的结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的具体实施方式进行详细的说明。
实施例1
如图1所示的一种多头一体化核酸提取试管，该试管包括主管1；主管1内部腔体从上到下依次设置有裂解区2、洗涤区4和洗脱区6；裂解区2与洗涤区4以及洗涤区4与洗脱区6之间分别设置有疏水密封层分隔开，并在洗涤区4和洗脱区6内分别设置有磁珠洗涤液和核酸洗脱液；所述的主管1内部腔体还设置有由裂解区2延伸至洗脱区6的磁道7，所述的磁道7一端封闭，另一端设置有供磁棒伸入的开口；洗脱区6内部腔体设置有多个隔板61，多个隔板61在径向两端分别与洗脱区6腔体内壁和磁道7外壁相连接，从而将洗脱区6分隔为多个相互独立的支管62；两个相邻的隔板61相对分布，洗脱区6腔体内壁和磁道7外壁相对分布从而组成支管62四壁，洗脱区6底面与支管62四壁底端相连接形成支管62底面。此种方式中，疏水密封层分别将裂解区内的2的细胞裂解液与洗涤区4内的磁珠洗涤液以及洗涤区4内的磁珠洗涤液与洗脱区6内的核酸洗脱液分开；磁棒从磁道7顶端开口放入磁道7内孔后利用其自身的磁力将裂解区2内的磁珠吸取贴合至磁道7外壁；磁棒下移进而带动磁珠下移穿过疏水密封层分别进入洗涤区4和洗脱区6进行洗涤和洗脱从而完成核酸的提取；而此种方式中，磁珠贴合磁道7外壁并且随着磁棒运动，整个磁道7外壁都可以供磁珠运动而不受磁珠通道条数的限制，一次可以带动较多数量的磁珠，提高核酸提取效率；同时，磁珠在面积较大的磁道外壁上均匀分布而不相互堆叠，使得磁珠运动时更加平稳。而且，此种方式中磁棒上的磁珠进入洗脱区6时被隔板61分隔为多个部分，并且分别在多个相互独立的支管62内进行洗脱从而完成磁珠分开洗脱过程；而后对多个相互独立的支管62洗脱后的溶液进行对照分析排除误差影响因素，从而提高了提取结果的准确性。
另外，本发明还公开了一种一体化核酸提取和检测装置，包括所述的一体化核酸提取试管和磁棒，磁棒外壁与磁道7内孔相配合。
主管1内部腔体设置有第一分隔塞3和第二分隔塞5；磁道7外壁与第一分隔塞3和第二分隔塞5之间都存在环形缝隙；疏水密封层分别位于第一分隔塞3和第二分隔塞5内并且将所在位置的主管1内部腔体填充密封。
疏水密封层为石蜡或者液相疏水层；第一分隔塞3和第二分隔塞5都为弹性材料。支管62底端为相互独立的圆柱形状。多个支管62沿着主管1中心呈圆周形状分布；磁道7轴向中心轴线与主管1轴向中心轴向重合。
如图2所示，第一分隔塞3包括第一塞体31、第一圆弧面32、第一棱柱面33和第一中心孔34；主管1内壁上端为圆弧形状，主管1内壁下端为六棱柱形状；第一圆弧面32为圆弧形状并且与主管1上端的圆弧内壁过盈配合，第一棱柱面33为六棱柱形状并且与主管1下端的六棱柱内壁过盈配合；第一中心孔34被磁道7贯穿并且与磁道7外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。第一圆弧面32和第一棱柱面33分别与主管1内壁过盈配合，从而将第一分隔塞3卡紧定位至主管1内壁。
如图3所示，第二分隔塞5包括第二塞体51、第二棱柱面52和第二中心孔53；主管1内壁还设置有第二台阶面11；水平方向的第二塞体51底面与水平方向的第二台阶面11相接触；第二棱柱面52与主管1下端的六棱柱内壁过盈配合，第二中心孔53被磁道7贯穿并且与磁道7外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。第二台阶面11与第二塞体51底面相接触对第二分隔塞5进行轴向限位，第二棱柱面52与主管1内壁过盈配合对第二分隔塞5进行径向限位；从而使得第二分隔塞5能够利用其自身弹性以及主管1内壁的限位卡紧在主管1内壁上。
如图1所示，主管1顶端设置有管盖18，管盖18通过内螺纹与主管1外壁的外螺纹相旋合防止外部污染物进入主管1；管盖18设置有竖直贯穿的定位孔181，定位孔181与磁道7外壁相配合从而对磁道7上部进行进一步限位，防止其发生偏移。
另外，本发明还公开了一种核酸提取和检测方法，该方法采用所述的一种多头一体化核酸提取试管，该方法包括以下的步骤：
（S1）先在裂解区2内预置裂解液和磁珠，将管盖18拧开后把待检测样本细胞添加至裂解区2，样本细胞被裂解液裂解并释放出完整核酸并且与磁珠相互结合；或者直接将裂解后含有待检测样本细胞和磁珠的溶液添加至裂解区2；
（S2）将磁棒从磁道7开口插入裂解区2并且下移至洗涤区4，磁棒吸引磁珠贴合磁道7外壁并且跟随磁棒穿过第一分隔塞3内的疏水密封层下移至洗涤区4；当疏水密封层为石蜡时，先对主管1加热使得石蜡热熔；
（S3）磁珠洗涤液除去与磁珠相结合的核酸中的蛋白质和无机盐等一些杂质后，磁棒带动磁珠继续下移穿过第二分隔塞5内热熔的疏水密封层至洗脱区6并且分别进入多个不同支管62内；
（S4）核酸洗脱液与洗涤后的磁珠相接触将磁珠上结合的核酸洗脱至不同支管62的核酸洗脱液中；
（S5）核酸在核酸洗脱液中进行PCR或等温扩增反应，并且核酸洗脱液中引入分子信标，使得外部设备通过荧光定量检测即可实时观察到PCR或等温扩增反应，并通过分析荧光值得到样品核酸的数量从而实现对样品核酸的检测；而后将不同支管62中洗脱磁珠后的核酸洗脱液的检测结果分别对比完成一体化核酸提取和检测过程。
Claims (10)
1.一种多头一体化核酸提取试管，该试管包括主管（1）；主管（1）内部腔体从上到下依次设置有裂解区（2）、洗涤区（4）和洗脱区（6）；裂解区（2）与洗涤区（4）以及洗涤区（4）与洗脱区（6）之间分别设置有疏水密封层分隔开，并在洗涤区（4）和洗脱区（6）内分别设置有磁珠洗涤液和核酸洗脱液；其特征在于，所述的主管（1）内部腔体还设置有由裂解区（2）延伸至洗脱区（6）的磁道（7），所述的磁道（7）一端封闭，另一端设置有供磁棒伸入的开口；洗脱区（6）内部腔体设置有多个隔板（61），多个隔板（61）在径向两端分别与洗脱区（6）腔体内壁和磁道（7）外壁相连接，从而将洗脱区（6）分隔为多个相互独立的支管（62）；两个相邻的隔板（61）相对分布，洗脱区（6）腔体内壁和磁道（7）外壁相对分布从而组成支管（62）四壁，洗脱区（6）底面与支管（62）四壁底端相连接形成支管（62）底面。
2.一种一体化核酸快提和检测装置，其特征在于，包括所述的一体化核酸提取试管和磁棒，磁棒外壁与磁道（7）内孔相配合。
3.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，主管（1）内部腔体设置有第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）；磁道（7）外壁与第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）之间都存在环形缝隙；疏水密封层分别位于第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）内并且将所在位置的主管（1）内部腔体填充密封。
4.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，疏水密封层为石蜡或者液相疏水层；第一分隔塞（3）和第二分隔塞（5）都为弹性材料。
5.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，支管（62）底端为相互独立的圆柱形状。
6.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，多个支管（62）沿着主管（1）中心呈圆周形状分布；磁道（7）轴向中心轴线与主管（1）轴向中心轴向重合。
7.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，第一分隔塞（3）包括第一塞体（31）、第一圆弧面（32）、第一棱柱面（33）和第一中心孔（34）；主管（1）内壁上端为圆弧形状，主管（1）内壁下端为六棱柱形状；第一圆弧面（32）为圆弧形状并且与主管（1）上端的圆弧内壁过盈配合，第一棱柱面（33）为六棱柱形状并且与主管（1）下端的六棱柱内壁过盈配合；第一中心孔（34）被磁道（7）贯穿并且与磁道（7）外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。
8.根据权利要求3所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，第二分隔塞（5）包括第二塞体（51）、第二棱柱面（52）和第二中心孔（53）；主管（1）内壁还设置有第二台阶面（11）；水平方向的第二塞体（51）底面与水平方向的第二台阶面（11）相接触；第二棱柱面（52）与主管（1）下端的六棱柱内壁过盈配合，第二中心孔（53）被磁道（7）贯穿并且与磁道（7）外壁之间的缝隙被疏水密封层填充密封。
9.根据权利要求1所述一种多头一体化核酸提取试管，其特征在于，主管（1）顶端设置有管盖（18），管盖（18）通过内螺纹与主管（1）外壁的外螺纹相旋合；管盖（18）设置有竖直贯穿的定位孔（181），定位孔（181）与磁道（7）外壁相配合。
10.一种核酸提取方法，其特征在于，该方法采用权利要求1所述的一种多头一体化核酸提取试管，该方法包括以下的步骤：
（S1）先在裂解区（2）内预置裂解液和磁珠，将管盖（18）拧开后把待检测样本细胞添加至裂解区（2），样本细胞被裂解液裂解并释放出完整核酸并且与磁珠相互结合；或者直接将裂解后含有待检测样本细胞和磁珠的溶液添加至裂解区（2）；
（S2）将磁棒从磁道（7）开口插入裂解区（2）并且下移至洗涤区（4），磁棒吸引磁珠贴合磁道（7）外壁并且跟随磁棒穿过第一分隔塞（3）内的疏水密封层下移至洗涤区（4）；当疏水密封层为石蜡时，先对主管（1）加热使得石蜡热熔；
（S3）磁珠洗涤液除去与磁珠相结合的核酸中的蛋白质和无机盐等一些杂质后，磁棒带动磁珠继续下移穿过第二分隔塞（5）内热熔的疏水密封层至洗脱区（6）并且分别进入多个不同支管（62）内；
（S4）核酸洗脱液与洗涤后的磁珠相接触将磁珠上结合的核酸洗脱至不同支管（62）的核酸洗脱液中；
（S5）核酸在核酸洗脱液中进行PCR或等温扩增反应，并且核酸洗脱液中引入分子信标，使得外部设备通过荧光定量检测即可实时观察到PCR或等温扩增反应，并通过分析荧光值得到样品核酸的数量从而实现对样品核酸的检测；而后将不同支管（62）中洗脱磁珠后的核酸洗脱液的检测结果分别对比完成一体化核酸提取和检测过程。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110590972.0A CN113186080B (zh) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 一种多头一体化核酸提取试管及方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110590972.0A CN113186080B (zh) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 一种多头一体化核酸提取试管及方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113186080A true CN113186080A (zh) | 2021-07-30 |
| CN113186080B CN113186080B (zh) | 2024-03-22 |
Family
ID=76986390
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110590972.0A Active CN113186080B (zh) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 一种多头一体化核酸提取试管及方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113186080B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113186098A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-07-30 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化下开口核酸快提试管、快提检测装置及方法 |
| CN113234591A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-08-10 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化核酸快提试管、快提检测装置和方法 |
| CN115678751A (zh) * | 2022-12-30 | 2023-02-03 | 北京金诺美科技股份有限公司 | 一种样品管 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014083040A (ja) * | 2012-10-26 | 2014-05-12 | Seiko Epson Corp | 核酸抽出用器具及びそれを用いた核酸抽出方法 |
| CN103897987A (zh) * | 2014-02-18 | 2014-07-02 | 中国农业大学 | 基于纳米磁珠的核酸自动提取装置及其方法 |
| US20140273198A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-09-18 | Seiko Epson Corporation | Cartridge for nucleic acid amplification reacion |
| CN105349530A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种新型的核酸检测方法及检测管 |
| JP2016151444A (ja) * | 2015-02-16 | 2016-08-22 | セイコーエプソン株式会社 | 核酸増幅反応カートリッジセット |
| CN108796038A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-11-13 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种核酸一体化检测方法及检测试剂管 |
| CN209989407U (zh) * | 2019-03-21 | 2020-01-24 | 合肥海关技术中心 | 一种基于磁珠法便于拆装磁棒的植物组dna提取试剂盒 |
| CN216946986U (zh) * | 2021-05-28 | 2022-07-12 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种多头一体化核酸提取试管及提取和检测装置 |
-
2021
- 2021-05-28 CN CN202110590972.0A patent/CN113186080B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014083040A (ja) * | 2012-10-26 | 2014-05-12 | Seiko Epson Corp | 核酸抽出用器具及びそれを用いた核酸抽出方法 |
| US20140273198A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-09-18 | Seiko Epson Corporation | Cartridge for nucleic acid amplification reacion |
| CN103897987A (zh) * | 2014-02-18 | 2014-07-02 | 中国农业大学 | 基于纳米磁珠的核酸自动提取装置及其方法 |
| JP2016151444A (ja) * | 2015-02-16 | 2016-08-22 | セイコーエプソン株式会社 | 核酸増幅反応カートリッジセット |
| CN105349530A (zh) * | 2015-12-11 | 2016-02-24 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种新型的核酸检测方法及检测管 |
| CN108796038A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-11-13 | 杭州优思达生物技术有限公司 | 一种核酸一体化检测方法及检测试剂管 |
| CN209989407U (zh) * | 2019-03-21 | 2020-01-24 | 合肥海关技术中心 | 一种基于磁珠法便于拆装磁棒的植物组dna提取试剂盒 |
| CN216946986U (zh) * | 2021-05-28 | 2022-07-12 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种多头一体化核酸提取试管及提取和检测装置 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 刘洪波;刘晓雷;罗小铭;: "核酸提取方法进展", 现代生物医学进展, no. 16 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113186098A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-07-30 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化下开口核酸快提试管、快提检测装置及方法 |
| CN113234591A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-08-10 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化核酸快提试管、快提检测装置和方法 |
| CN113234591B (zh) * | 2021-05-28 | 2024-03-22 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化核酸快提试管、快提检测装置和方法 |
| CN113186098B (zh) * | 2021-05-28 | 2024-03-26 | 宁波康程德诺生物医药有限公司 | 一种一体化下开口核酸快提试管、快提检测装置及方法 |
| CN115678751A (zh) * | 2022-12-30 | 2023-02-03 | 北京金诺美科技股份有限公司 | 一种样品管 |
| CN115678751B (zh) * | 2022-12-30 | 2023-04-18 | 北京金诺美科技股份有限公司 | 一种样品管 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113186080B (zh) | 2024-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113186080B (zh) | 一种多头一体化核酸提取试管及方法 | |
| US11242552B2 (en) | Nucleic acid integrated detection method and detection reagent tube | |
| CN113186098B (zh) | 一种一体化下开口核酸快提试管、快提检测装置及方法 | |
| CN113234591B (zh) | 一种一体化核酸快提试管、快提检测装置和方法 | |
| US10647979B2 (en) | Nucleic acid extraction apparatus and method of operation | |
| EP0891369B1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur isolierung von nukleinsäuren | |
| CN111876468B (zh) | 一种全自动核酸检测方法及试管 | |
| US20180067021A1 (en) | Reaction Vessel for Sample Preparation | |
| CN108315389B (zh) | 一种微体积细胞核酸扩增方法 | |
| CN216614688U (zh) | 一种一体化下开口核酸快提试管及快提和检测装置 | |
| CN216837995U (zh) | 一种一体化核酸快提试管以及快提和检测装置 | |
| EP3140663A1 (en) | Fluid transfer from digital microfluidic device | |
| WO2002044327A9 (en) | Method and apparatus for protein manipulation | |
| CN216946986U (zh) | 一种多头一体化核酸提取试管及提取和检测装置 | |
| US20220410155A1 (en) | Method for using microfluidic chip and device thereof | |
| CN113174317B (zh) | 一种一体化上开口核酸快提试管、快提检测装置及方法 | |
| US8518346B1 (en) | Multidimensional bioseparation with modular microfluidics | |
| CN113337398A (zh) | 一种微流控芯片 | |
| US20050029440A1 (en) | Machine and method for processing biomolecules | |
| US20200190506A1 (en) | Device with controlled fluid dynamics, for isolation of an analyte from a sample | |
| US20060083659A1 (en) | Solid phase extraction apparatus and method | |
| EP4021690A1 (en) | Detergent-free simultaneous multiomics sample preparation method using novel new vesicle design | |
| US20220119863A1 (en) | Nucleic acid integrated detection method | |
| US20220126286A1 (en) | Nucleic acid integrated detection reagent tube | |
| CN206096052U (zh) | 萃取柱阵列 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |