CN113185347A - 一种适用于有机农业的生物有机肥料及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种适用于有机农业的生物有机肥料及其制备方法和应用，它包括有机肥原料以及有机肥原料重量1‰‑5‰的腐熟剂、有机肥原料重量1‰‑5‰的功能菌剂；所述有机肥原料包括以下重量份的原料；油枯8‑12份、磷矿粉0.5‑1份、钾长石0.5‑1份、腐植酸1‑2份；所述生物有机肥料应用在豌豆种植。本发明的有益效果：使用在豌豆的种植领域，对豌豆的生长发育具有促进作用，增加了豌豆的产量，提高了经济效益。同时，本发明的有机肥可分解土壤中不溶性磷、钾元素，促进植物吸收利用，增加产值，提高经济效益。

Description

一种适用于有机农业的生物有机肥料及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及肥料领域，尤其涉及一种适用于有机农业的生物有机肥料及其制备方法和应用。
背景技术
长期施用化肥，给人类的生存环境带来了一些负面影响。化肥的大量施用，使湖、河、水库水体富营养化程度日益严重，地下水的硝酸盐浓度也急剧增高，严重影响人民群众的生活。随着环保意识的不断增强，以及绿色食品和生态农业的发展，人们开始考虑适当减少化肥用量。
生物有机肥是在微生物技术和有机肥商品化使用的基础上开发的新型肥料，它充分利用了自然资源中的秸秆、草炭、禽畜粪等农业和畜牧业的废弃物或有机垃圾为基质和载体，科学性地加入具有发酵、加快腐熟、除臭和干燥等功能的分解菌、固氮菌、解磷菌、解钾菌以及适量的无机元素，经微生物发酵、除臭和腐熟等特殊工艺加工而成。
豌豆是一种使用价值较高的蔬菜，在我国各地被广泛种植，除了可以直接食用之外，还可以经过二次加工，制成各种食品。豌豆含有的蛋白质中含有人体需要的氨基酸，能够帮助人的生长发育；含有的植物凝集素和赤霉素，比普通的蔬菜更具药用价值，可以杀菌，促进新陈代谢。在豌豆的种领域，目前还没有比较适用的有机肥。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供一种适用于有机农业的生物有机肥料及其制备方法和应用。
为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现。
一种适用于有机农业的生物有机肥料，它包括有机肥原料以及有机肥原料重量1‰-5‰的腐熟剂、有机肥原料重量1‰-5‰的功能菌剂；
所述有机肥原料包括以下重量份的原料；油枯8-12份、磷矿粉0.5-1份、钾长石0.5-1份、腐植酸1-2份；
所述腐熟剂为腐熟剂发酵液，由一株嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌混合复配，嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌的保藏登记号分别为CGMCC No.15852、CGMCCNo.15842、CGMCC No.15844；
所述功能菌剂为功能菌剂发酵液，由一株臭曲霉、一株胶冻样芽孢杆菌、一株米曲霉、一株侧孢芽孢杆菌混合复配，臭曲霉、胶冻样芽孢杆菌、米曲霉、侧孢芽孢杆菌的保藏登记号分别为CGMCC No.5857、CGMCC No.15853、CGMCC No.19923、CGMCC No.20153。
其制备方法包括以下步骤：
第一步，芽孢杆菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的芽孢杆菌菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养24h-48h，得到菌种的活化培养液，所述芽孢杆菌属菌种为嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌；
第二步，霉菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养48h-120h，得到菌种的活化培养液，所述霉菌属菌种为臭曲霉、米曲霉；
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第一步中芽孢杆菌属活化培养液中的种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h-72h，得芽孢杆菌属种子液；用无菌接种环刮取一环第二步中霉菌属菌种活化培养液中的种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养72h-120h，得霉菌属种子液；
第四步，腐熟剂发酵液的制备：将第三步中制备的嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌的种子液按照1‰-5‰的重量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得发酵液，然后将三种发酵液按照0.5-1.5∶1-3∶0.5-2的质量比进行复配，得腐熟剂发酵液；
第五步，功能菌剂发酵液的制备：将第三步中制备的胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌的种子液按照1‰-5‰的质量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得胶冻样芽孢杆菌发酵液、侧孢芽孢杆菌发酵液；
将第三步中制备的臭曲霉、米曲霉的种子液按照1‰-5‰的质量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为25℃-28℃，转速为120rpm/min条件下培养72h-96h，得臭曲霉发酵液、米曲霉发酵液；
将臭曲霉发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液、米曲霉发酵液、侧孢芽孢杆菌发酵液按照质量1-4∶2-3:1.5-3.5：2-5进行复配，得功能菌剂发酵液；
第六步，生物有机肥料制备：将油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸按质量比为油枯8-12份、磷矿粉0.5-1份、钾长石0.5-1份、腐植酸1-2份混合，然后将第四步中所得的腐熟剂发酵液按照重量比1‰-5‰加入混合，调整物料水分含量为45％-55％，C/N＝25-30，pH为7.2-7.8，物料堆成圆锥体进行发酵，发酵温度达到40℃以上，三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，发酵温度降至温度后停止翻堆，再将第五步中所得的功能菌剂发酵液按照重量比1‰-5‰加入，混合均匀，得生物有机肥料。
进一步的，所述第四步中腐熟剂发酵液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
进一步的，所述第五步中的功能菌剂发酵液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
进一步的，所述第一步、第二步中的牛肉膏蛋白胨固体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15-25g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
进一步的，所述第三步中牛肉膏蛋白胨液体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
进一步的，所述第三步中PDB液体培养基的组成成分及其配比为：土豆200g、蔗糖14g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
进一步的，所述第五步中的发酵培养液的组成成分及其重量份数比为：黄豆粉2-4份、蔗糖0.5-1份、牛肉膏1-3份、玉米粉2-3份、碳酸钙0.8-1.5份、鱼粉1-2份、磷酸二氢钾0.05-0.1份、磷酸氢二钾0.05-0.1份、氯化钠1-5份、消泡剂0.1-0.3份，用盐酸、氢氧化钠调节pH，pH为6.8-7.5。
所述生物有机肥料应用在豌豆种植。
本发明的有益效果：本发明的有机肥料组成成分中所用油枯为油菜籽压榨后的片枯，磷矿粉为天然来源的高品位磷矿粉，钾长石为天然来源的矿物钾长石，腐植酸为矿物源黄腐酸，所有原料均满足有机农业生产的原料要求。使用在豌豆的种植领域，对豌豆的生长发育具有促进作用，增加了豌豆的产量，提高了经济效益。同时，本发明的有机肥可分解土壤中不溶性磷、钾元素，促进植物吸收利用，增加产值，提高经济效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不局限于说明书上的内容。
一种适用于有机农业的生物有机肥料，它采用油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸等物料作为生物有机肥的原料，通过高效腐熟菌剂的定制开发和促生长功能微生物菌剂的筛选组配，发酵腐熟得到适用于有机农业的生物有机肥。
本发明中适用于有机农业生物有机肥的腐熟菌剂由一株嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌混合复配,其中，
嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus),其编号为WSWFJ-12,保藏登记号为CGMCC No.15852,保藏日期：2018年6月4日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其编号为WSWFJ-2,保藏登记号为CGMCCNo.15842,保藏日期：2018年6月4日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其编号为WSWFJ-4,保藏登记号为CGMCCNo.15844,保藏日期：2018年6月4日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明中微生物功能菌剂由一株臭曲霉、一株胶冻样芽孢杆菌、一株米曲霉、一株侧孢芽孢杆菌混合复配，其中
臭曲霉(Aspergillus foetidus),其编号为臭曲霉1号,保藏登记号为CGMCCNo.5857,保藏日期：2012年3月7日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus),其编号为WSWFJ-13,保藏登记号为CGMCC No.15853,保藏日期：2018年6月13日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
米曲霉(Aspergillus oryzae),其编号为WSWFJ32,保藏登记号为CGMCCNo.19923,保藏日期：2020年6月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus),其编号为WSWFJ43,保藏登记号为CGMCCNo.20153,保藏日期：2020年6月28日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
制备方法为：第一步，芽孢杆菌属(WSWFJ-12、WSWFJ-2、WSWFJ-4、WSWFJ-13、WSWFJ43)菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养24h-48h，分别得到上述五种菌种的活化培养液。
第二步，霉菌属(臭曲霉1号、WSWFJ32)菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养48h-120h，得到上述两种菌种的活化培养液。
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第一步中活化的芽孢杆菌属种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h-72h，分别得上述五种芽孢杆菌的种子液；在使用相同的方法将霉菌属种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养72h-120h，分别得到上述两种霉菌的种子液。
第四步，腐熟剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-12、WSWFJ-2、WSWFJ-4的种子液分别按照(占发酵培养液的质量比)1‰-5‰的比例，将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得发酵液，三种菌液按照质量比0.5-1.5∶1-3∶0.5-2进行复配，既得具有发酵作用的腐熟剂发酵液。
菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第五步，功能菌剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-13、WSWFJ43的种子液分别按照(占发酵培养液的质量比)1‰-5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得发酵液，将编号为臭曲霉1号、WSWFJ32的种子液分别按照(占发酵培养液的质量比)1‰-5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为25℃-28℃，转速为120rpm/min条件下培养72h-96h，得发酵液，将臭曲霉1号、WSWFJ-13、WSWFJ32、WSWFJ43发酵液按照质量比1-4∶2-3:1.5-3.5：2-5进行复配，既得具有促生长作用的功能菌剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第六步，生物有机肥料制备：按照NY 884《生物有机肥》标准，将油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸按一定质量配比混匀，具体配比为：油枯8-12份、磷矿粉0.5-1份、钾长石0.5-1份、腐植酸1-2份，再将第四步中所得的腐熟剂按照重量比(占油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸重量比)1‰-5‰加入，调整物料水分含量(质量含量)为45-55％左右，C/N＝25-30，pH 7.2-7.8，物料堆成圆锥体进行发酵，测量记录当时环境温度，当温度达到40℃以上,三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，15-20天后温度开始下降，直至温度接近环境温度后停止翻堆，既得有机肥料，之后再将第五步中所得的功能菌剂按照重量比(占油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸重量比)1‰-5‰加入，混合均匀，既得生物有机肥。
牛肉膏蛋白胨液体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、水1000ml，采用盐酸和氢氧化钠调节pH在6-8之间。
牛肉膏蛋白胨固体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15-25g、水1000ml，采用盐酸和氢氧化钠调节pH在6-8之间。
PDB液体培养基的组成成分及其配比为：土豆200g、蔗糖14g、水1000ml，采用盐酸和氢氧化钠调节pH在6-8之间。
发酵培养液的组成成分及其重量份数比为：黄豆粉2-4份、蔗糖0.5-1份、牛肉膏1-3份、玉米粉2-3份、碳酸钙0.8-1.5份、鱼粉1-2份、磷酸二氢钾0.05-0.1份、磷酸氢二钾0.05-0.1份、氯化钠1-5份、消泡剂0.1-0.3份，采用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8-7.5。
机肥料组成成分中所用油枯为油菜籽压榨后的片枯，磷矿粉为天然来源的高品位磷矿粉，钾长石为天然来源的矿物钾长石，腐植酸为矿物源黄腐酸，所有原料均满足有机农业生产的原料要求。
腐熟剂和功能菌剂需现配现用，以免有效活菌数的降低。
具体实施方式1
生物有机肥的制备步骤：
第一步，芽孢杆菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为38℃、转速为160rpm条件下活化培养24h，得到菌种的活化培养液。
第二步，霉菌活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为25℃、转速为120rpm条件下活化培养120h，得到菌种的活化培养液。
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第三步中活化的芽孢杆菌属种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h，得种子液；在使用相同的方法将霉菌种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为25℃、转速为120rpm条件下活化培养120h，得种子液。
第四步，腐熟剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-12、WSWFJ-2、WSWFJ-4的种子液分别按照1‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为38℃，转速为120rpm/min条件下培养60h，得发酵液，三种菌液按照0.5∶3∶0.5进行复配，既得具有发酵作用的腐熟剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第五步，功能菌剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-13、WSWFJ43的种子液分别按照5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃，转速为120rpm/min条件下培养48h，得发酵液。将编号为臭曲霉1号、WSWFJ32的种子液分别按照5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为25℃，转速为120rpm/min条件下培养72h，得发酵液。将臭曲霉1号、WSWFJ-13、WSWFJ32、WSWFJ43按照质量4∶2:1.5：5进行复配，既得具有促生长作用的功能菌剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第六步，生物有机肥料制备：按照NY 884《生物有机肥》标准，将油枯、磷矿粉、钾长石、黄腐酸按一定质量配比混匀，具体配比为：油枯8份、磷矿粉1份、钾长石0.5份、腐植酸2份。再将第四步中所得的腐熟剂按照重量比1‰加入，调整物料水分为50％左右，C/N＝30，pH 7.2，物料堆成圆锥体进行发酵，测量记录当时环境温度，当温度达到40℃以上三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，15-20天后温度开始下降，直至温度接近环境温度后停止翻堆，既得有机肥料，之后再将第五步中所得的功能菌剂按照重量比5‰加入，混合均匀，既得生物有机肥。
具体实施方式2
生物有机肥的制备步骤：
第一步，芽孢杆菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下活化培养48h，得到菌种的活化培养液。
第二步，霉菌活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为28℃、转速为120rpm条件下活化培养48h，得到菌种的活化培养液。
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第三步中活化的芽孢杆菌属种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下活化培养72h，得种子液；在使用相同的方法将霉菌种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为28℃、转速为120rpm条件下活化培养72h，得种子液。
第四步，腐熟剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-12、WSWFJ-2、WSWFJ-4的种子液分别按照5‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h，得发酵液，三种菌液按照1.5∶1∶0.5进行复配，既得具有发酵作用的腐熟剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第五步，功能菌剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-13、WSWFJ43的种子液分别按照1‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃，转速为120rpm/min条件下培养48h，得发酵液。将编号为臭曲霉1号、WSWFJ32的种子液分别按照1‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为28℃，转速为120rpm/min条件下培养72h，得发酵液。将臭曲霉1号、WSWFJ-13、WSWFJ32、WSWFJ43按照质量4：2：3.5：2进行复配，既得具有促生长作用的功能菌剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第六步，生物有机肥料制备：按照NY 884《生物有机肥》标准，将油枯、磷矿粉、钾长石、黄腐酸按一定质量配比混匀，具体配比为：油枯12份、磷矿粉0.5份、钾长石1份、腐植酸1份。再将第四步中所得的腐熟剂按照重量比5‰加入，调整物料水分为50％左右，C/N＝25，pH 7.8，物料堆成圆锥体进行发酵，测量记录当时环境温度，当温度达到40℃以上三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，15-20天后温度开始下降，直至温度接近环境温度后停止翻堆，既得有机肥料，之后再将第五步中所得的功能菌剂按照重量比1‰加入，混合均匀，既得生物有机肥。
具体实施方式3
生物有机肥的制备步骤：
第一步，芽孢杆菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为37℃、转速为160rpm条件下活化培养36h，得到菌种的活化培养液。
第二步，霉菌活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为26℃、转速为120rpm条件下活化培养80h，得到菌种的活化培养液。
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第三步中活化的芽孢杆菌属种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为37℃、转速为160rpm条件下活化培养50h，得种子液；在使用相同的方法将霉菌种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为27℃、转速为120rpm条件下活化培养90h，得种子液。
第四步，腐熟剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-12、WSWFJ-2、WSWFJ-4的种子液分别按照3‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下培养50h，得发酵液，三种菌液按照1∶1.5∶1进行复配，既得具有发酵作用的腐熟剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第五步，功能菌剂发酵液制备：将编号为WSWFJ-13、WSWFJ43的种子液分别按照2‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为36℃，转速为120rpm/min条件下培养50h，得发酵液。将编号为臭曲霉1号、WSWFJ32的种子液分别按照3‰的比例将菌种种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为27℃，转速为120rpm/min条件下培养80h，得发酵液。将臭曲霉1号、WSWFJ-13、WSWFJ32、WSWFJ43按照质量2∶2.5:2：3进行复配，既得具有促生长作用的功能菌剂发酵液。
所述菌液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
第六步，生物有机肥料制备：按照NY 884《生物有机肥》标准，将油枯、磷矿粉、钾长石、黄腐酸按一定质量配比混匀，具体配比为：油枯10份、磷矿粉0.8份、钾长石0.7份、腐植酸1.5份。再将第四步中所得的腐熟剂按照重量比3‰加入，调整物料水分为50％左右，C/N＝28，pH 7.5，物料堆成圆锥体进行发酵，测量记录当时环境温度，当温度达到40℃以上三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，15-20天后温度开始下降，直至温度接近环境温度后停止翻堆，既得有机肥料，之后再将第五步中所得的功能菌剂按照重量比4‰加入，混合均匀，既得生物有机肥。
采用本专利实施例中的产品进行验证：探究生物有机肥对作物生长发育的影响，验证生物有机肥料具有促生长作用。
一、试验背景
豌豆是一种使用价值较高的蔬菜，在我国各地被广泛种植，除了可以直接食用之外，还可以经过二次加工，制成各种食品。豌豆含有的蛋白质中含有人体需要的氨基酸，能够帮助人的生长发育；含有的植物凝集素和赤霉素，比普通的蔬菜更具药用价值，可以杀菌，促进新陈代谢。为了提升豌豆的产量，探索生物有机肥对豌豆产量的影响，在洱海流域洱源县牛街乡进行试验。
二、材料和方法
1.试验地点：
大理州洱海流域洱源县牛街乡。
2.试验材料
供试作物：当地品种豌豆
供试材料：具有促生长作用的功能菌剂(有效活菌数为2.0×1010cfu/g)、生物有机肥料，均由云南省微生物发酵工程研究中心有限公司提供。
3.试验设计
处理1：具体实施例1的生物有机肥200kg/亩播种前一次性全部施用,现花期水溶性硫酸钾25kg/亩叶面喷施。
处理2：具体实施例2的生物有机肥200kg/亩播种前一次性全部施用,现花期水溶性硫酸钾25kg/亩叶面喷施。
处理3：具体实施例3的生物有机肥200kg/亩播种前一次性全部施用,现花期水溶性硫酸钾25kg/亩叶面喷施。
处理4：功能菌肥(市售)120kg/亩播种前一次性全部施用，出苗后5-7天功能生物菌剂2L/亩兑水稀释2000倍浇施，现花期水溶性硫酸钾25kg/亩叶面喷施。
处理5：当地常规施肥，顺丰固体有机肥100kg/亩播种时一次性全部施用，现花期液体有机肥25kg/亩5-7天兑水浇施。
4.调查记录及方法
豌豆生长情况调查记录：在豌豆开花期前记录其生长状态，第一次采收前每个处理选取5株记录其结果数量，每次采收前记录单株结果数。
豌豆产量调查记录：各处理分类采收，每次采收时记录采收量，采收结束后统计各处理采收量。
豌豆产值调查记录：各处理分类采收后根据当地售卖价格进行产值统计记录。
三、试验结果
1.豌豆田间农艺性状表
表1分枝期农艺性状平均值表
Figure BDA0002692449070000171
表2孕蕾期农艺性状平均值表
Figure BDA0002692449070000172
表3花荚期农艺性状平均值表
Figure BDA0002692449070000181
表4成熟期农艺性状平均值表
Figure BDA0002692449070000182
2.豌豆产量调查现状分析
表5产值产量表
Figure BDA0002692449070000191
四、试验总结
通过对豌豆的农艺性状、产值产量进行对比后可知，使用云南省微生物发酵工程研究中心有限公司生产的生物有机肥料后，对豌豆的生长发育具有促进作用，增加了豌豆的产量，提高了经济效益。
显然，本发明的上述实施方式仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (9)

1.一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：它包括有机肥原料以及有机肥原料重量1‰-5‰的腐熟剂、有机肥原料重量1‰-5‰的功能菌剂；
所述有机肥原料包括以下重量份的原料；油枯8-12份、磷矿粉0.5-1份、钾长石0.5-1份、腐植酸1-2份；
所述腐熟剂为腐熟剂发酵液，由一株嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌混合复配，嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌的保藏登记号分别为CGMCC No.15852、CGMCCNo.15842、CGMCC No.15844；
所述功能菌剂为功能菌剂发酵液，由一株臭曲霉、一株胶冻样芽孢杆菌、一株米曲霉、一株侧孢芽孢杆菌混合复配，臭曲霉、胶冻样芽孢杆菌、米曲霉、侧孢芽孢杆菌的保藏登记号分别为CGMCC No.5857、CGMCC No.15853、CGMCC No.19923、CGMCC No.20153。
2.根据权利要求1所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：
第一步，芽孢杆菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的芽孢杆菌菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养24h-48h，得到菌种的活化培养液，所述芽孢杆菌属菌种为嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌；
第二步，霉菌属菌种活化：将-80℃条件下采用甘油保存的菌株保存液取0.1ml接种到10ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养48h-120h，得到菌种的活化培养液，所述霉菌属菌种为臭曲霉、米曲霉；
第三步，种子液制备：用无菌接种环刮取一环第一步中芽孢杆菌属活化培养液中的种子菌落接种到50ml牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在温度为35℃-38℃、转速为160rpm条件下活化培养48h-72h，得芽孢杆菌属种子液；用无菌接种环刮取一环第二步中霉菌属菌种活化培养液中的种子菌落接种到50ml PDB液体培养基中，在温度为25℃-28℃、转速为120rpm条件下活化培养72h-120h，得霉菌属种子液；
第四步，腐熟剂发酵液的制备：将第三步中制备的嗜热脂肪芽孢杆菌、两株枯草芽孢杆菌的种子液按照1‰-5‰的重量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得发酵液，然后将三种发酵液按照0.5-1.5∶1-3∶0.5-2的质量比进行复配，得腐熟剂发酵液；
第五步，功能菌剂发酵液的制备：将第三步中制备的胶冻样芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌的种子液按照1‰-5‰的质量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为35℃-38℃，转速为120rpm/min条件下培养48h-60h，得胶冻样芽孢杆菌发酵液、侧孢芽孢杆菌发酵液；
将第三步中制备的臭曲霉、米曲霉的种子液按照1‰-5‰的质量比，分别将种子液接种到发酵罐中的发酵培养液中，在温度为25℃-28℃，转速为120rpm/min条件下培养72h-96h，得臭曲霉发酵液、米曲霉发酵液；
将臭曲霉发酵液、胶冻样芽孢杆菌发酵液、米曲霉发酵液、侧孢芽孢杆菌发酵液按照质量1-4∶2-3:1.5-3.5：2-5进行复配，得功能菌剂发酵液；
第六步，生物有机肥料制备：将油枯、磷矿粉、钾长石、腐植酸按质量比为油枯8-12份、磷矿粉0.5-1份、钾长石0.5-1份、腐植酸1-2份混合，然后将第四步中所得的腐熟剂发酵液按照重量比1‰-5‰加入混合，调整物料水分含量为45％-55％，C/N＝25-30，pH为7.2-7.8，物料堆成圆锥体进行发酵，发酵温度达到40℃以上，三小时后开始翻堆，每天进行1次翻堆，发酵温度降至温度后停止翻堆，再将第五步中所得的功能菌剂发酵液按照重量比1‰-5‰加入，混合均匀，得生物有机肥料。
3.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第四步中腐熟剂发酵液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
4.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第五步中的功能菌剂发酵液的有效活菌数大于2.0×1010cfu/g。
5.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第一步、第二步中的牛肉膏蛋白胨固体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、琼脂15-25g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
6.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第三步中牛肉膏蛋白胨液体培养基的组成成分及其配比为：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、氯化钠5.0g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
7.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第三步中PDB液体培养基的组成成分及其配比为：土豆200g、蔗糖14g、水1000ml，用盐酸和氢氧化钠调节pH，pH为6-8。
8.根据权利要求2所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述第五步中的发酵培养液的组成成分及其重量份数比为：黄豆粉2-4份、蔗糖0.5-1份、牛肉膏1-3份、玉米粉2-3份、碳酸钙0.8-1.5份、鱼粉1-2份、磷酸二氢钾0.05-0.1份、磷酸氢二钾0.05-0.1份、氯化钠1-5份、消泡剂0.1-0.3份，用盐酸、氢氧化钠调节pH，pH为6.8-7.5。
9.根据权利要求1所述的一种适用于有机农业的生物有机肥料，其特征在于：所述生物有机肥料应用在豌豆种植。
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