CN113142422A - 一种养殖鱼用护肝剂及护肝饲料 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种养殖鱼用护肝剂及护肝饲料，属于养殖技术领域。此护肝剂由2‑4份垂盆草黄酮类、10‑30份甜菜碱、40‑60份胆碱、4‑8份肌醇、2‑4份L‑肉碱组成，饲料中本护肝剂的的添加范围是0.29‑0.51％。本发明鱼用护肝剂使得实验养殖鱼的增重率、肥满度都较好，添加了鱼用护肝剂的饲料可使得养殖鱼的肝脏和肌肉脂肪含量都有所降低,较好地促进养殖鱼的生长，并且能够有效的预防养殖中鱼的脂肪肝。

Description

一种养殖鱼用护肝剂及护肝饲料
技术领域
本发明涉及养殖技术领域，尤其涉及一种鱼用护肝剂及护肝饲料。
背景技术
近年来，我国水产养殖业快速发展，由于养殖密度大，饲料投喂不当、 营养失衡和渔药滥用都会诱发鱼类脂肪肝病，导致养殖鱼生长速度下降、饲 料转化效率降低、肌肉品质下降、免疫、抗应激能力降低、高温季节大量死 亡等，给实际生产造成严重损失。国内外虽已有相关鱼类脂肪肝的研究，但 鱼类脂肪肝发病及炎症修复机理尚未完全探明；养殖鱼类脂肪肝病，是困扰 水产养殖业多年的广发性病害，虽经多年研究和防治实践，至今尚不能得到 根本遏制。因此，寻找有效的脂肪肝病防治方法对水产养殖持续健康发展具 有重要的意义。
我国集约化鱼养殖业发展迅猛，与此同时也暴露出一个严峻的问题：对 养殖鱼营养、生理、病理和生态等方面的基础理论和应用技术研究明显滞后 于产业的发展。由于缺乏充分的科技支撑，以致生产中经常出现强化投饲、 滥施药物、饲料营养组成不平衡以及添加变质(如酸败油脂和霉变原料)或禁 用物质(如某些激素和抗生素)等诸多问题，造成养殖中鱼病害频繁发生，其 中以损伤肝脏和诱发肝脏病变为特征的疾病危害甚大。因为肝脏是鱼体内最 主要的代谢器官，其损伤或者病变往往导致鱼机体代谢机能紊乱和抗病力降 低，极易造成继发传染性疾病的爆发和综合症的肆虐，严重制约着集约化鱼 养殖业的持续健康发展。养殖中鱼肝脏病变中最常见和最主要的表现形式是 脂肪肝，尤以营养性脂肪肝危害最突出，患了脂肪肝的鱼生长缓慢，食欲不 振，病理检查发现患病鱼肝脏肥大，颜色苍白，脂肪大量累积，肝脏脂肪滴 增大，肝组织脂肪变性明显且空泡化，细胞核偏移，甚至出现肝组织萎缩坏 死,患“脂肪肝”症还会继发细菌感染,对鱼危害极大,致死率较高。
造成这一病症主要是投喂的饲料配方不合理，营养不全面，缺少某些维 生素。脂肪肝是目前对鱼集约化养殖危害较严重的一种疾病，严重影响着鱼 养殖的经济效益，给生产造成巨大的损失。具有脂肪肝病变的养成商品鱼,由 于其肌肉脂肪含量也会明显升高,导致其品质下降。
鉴于养殖中鱼脂肪肝病的严重性，因此需要设计一种鱼用护肝剂及护肝 饲料，提高养殖中对脂肪肝病的防范意识，实现在饲料投喂这一步骤通过在 饲料中添加护肝剂达到预防鱼脂肪肝的目的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鱼用护肝剂及护肝饲料，解决现有养殖中鱼 脂肪肝病的严重的技术问题。
一种鱼用护肝剂，由2-4份垂盆草黄酮类、10-30份甜菜碱、40-60份胆 碱、4-8份肌醇、2-4份L-肉碱组成。
一种鱼用护肝鱼饲料，由0.29-0.51％权利要求1的护肝剂、花生麸 9.99-10.21％、鱼粉5.0％、豆粕20.0％、花生麸10.0％、菜子饼25.0％、玉米 15.0％、麦麸20.0％、复合矿物质2.5％、复合维生素0.5％、鱼油0.5％、食盐 0.6％、黏合剂0.1％、防霉剂0.1％和诱食剂0.2％组成。
本发明采用了上述技术方案，本发明具有以下技术效果：
本发明鱼用护肝剂使得养殖鱼的增重率、肥满度都较好，鱼的肝脏指数 呈最小后逐渐增大的趋势，但各组之间差异不显著，肝脏脂肪含量在试验组 中最低，添加了鱼用护肝剂的饲料使得养殖鱼肝脏和肌肉脂肪含量都有所降 低,较好地促进鱼的生长，并且能够有效地预防养殖鱼脂肪肝，在池塘小网箱 养殖条件下，平均体重为231.57g/尾的养殖鱼在添加了护肝剂的试验4组饲 料的喂养时，肥满度最高，为3.77±0.86，饲料系数最低，为2.07±0.06， 增重率最高，为198.91±6.29，所以饲料4组对鱼的生长优势明显。
附图说明
图1是本发明的不同配方饲料对养殖鱼肥满度的影响柱形图。
图2是本发明的不同配方饲料对鱼饲料系数的影响柱形图。
图3是本发明的不同配方饲料对养殖鱼增重率的影响柱形图。
图4是本发明的不同配方饲料对养殖鱼肝脏指数的影响柱形图。
图5是本发明的不同配方饲料对养殖鱼肝脏脂肪的影响柱形图。
图6是本发明的不同配方饲料对养殖鱼肌肉脂肪的影响柱形图。
图7是本发明鱼肝脏切片的肝细胞图。
具体实施方式
(一)试验
试验时间从2019年7月4日起至2019年10月13日止，实验饲养时 间总共为110天。
(二)试验地点
试验完成于广西大学水产教学实习基地，饲料营养试验室。
(三)试验用鱼
试验用鱼是从广西水产研究所购进的单雄性健康罗非鱼鱼种，规格较大， 平均体重231.57g。鱼体健康，活动力强，镜检无寄生虫。将试验鱼随机分为 15组，每组200尾，驯养一周后，开始投喂试验饲料。
(四)试验条件
试验在那马水产基地的池塘小网箱中进行。池塘面积6670m2，水深2m， 塘中不设增氧机。选择避风、向阳、水流平稳、水面较开阔、水体交换好、 无污染的水域进行网箱的设置。网箱规格为2m×3m×2m，网目大小以所养的 鱼不能够逃逸为度。网箱在池塘中一字排开，箱间间距为半个箱。
(五)试验饲料配制
试验中，护肝剂Ⅰ由2份垂盆草黄酮类、20份甜菜碱、40份胆碱、6份 肌醇、3份L-肉碱组成；护肝剂Ⅱ由护肝剂由2份垂盆草黄酮类、20份甜菜 碱、50份胆碱、6份肌醇、3份L-肉碱组成；护肝剂Ⅲ由3份垂盆草黄酮类、 20份甜菜碱、50份胆碱、6份肌醇、3份L-肉碱组成；护肝剂Ⅳ由2份垂盆 草黄酮类、40份甜菜碱、60份胆碱、6份肌醇、3份L-肉碱组成。可另外设置；
按照0.5％护肝剂添加入饲料，各护肝剂的份数配比相当于饲料中含护肝 剂占比：护肝剂Ⅰ占饲料0.355％；护肝剂Ⅱ占饲料0.405％；护肝剂Ⅲ占饲料 0.41％；护肝剂Ⅳ占饲料0.455％。
将护肝剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ分别添加于饲料之中，相应制成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和 Ⅳ试验饲料，对试验鱼进行饲养试验以鱼粉、豆粕、花生麸、菜子饼、玉米、 麦麸、鱼油、复合矿物质和复合维生素等为基础饲料，在此基础上添加4种 护肝剂，配制成5组试验饲料，其中1组为不添加，2、3、4和5组分别添加 0.5％的护肝剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ，差额部分用玉米补足，护肝剂在饲料中的的 添加范围是0.29-0.51％。，基础饲料配方见表1。
在池塘小网箱养殖条件下，平均体重为231.57g/尾的试验鱼种在添加了 鱼用护肝剂的试验4组饲料的喂养时，肥满度最高，为3.77±0.86，饲料系 数最低，为2.07±0.06，增重率最高，为198.91±6.29，所以饲料4组对鱼 种生长优势明显。
表1基础饲料配方
Figure BDA0002964461240000041
根据表中的各种成分的比例计算各种原料的实际用量后，用天平准确称量 并充分混合。
(六)饲养管理
每种饲料设3个水平组，每个平行组养鱼200尾。试验鱼在试验前，进 行适应性驯养一个星期。视水质情况定期换水，以保持水质清新。每天分别 记录各网箱的饲料投喂量，水温，鱼活动摄食等情况。每天投喂2次，时间 分别在上午8—9时和下午4—5时，投喂以鱼达到九成饱为度，即每次投食 在一小时内吃完为宜。鱼进入生长最快的时期，日投饵量保持在鱼体重的 1％～2％，饲养试验共110天。日常管理与病害防治基本上同网箱养鱼。
(七)指标值的计算
生长指标的计算
评价不同饲料配方对养殖鱼生长的影响一般常用的是生物学评定法，本 试验就是采用生物学评定法中的测定体重评定法，计算指标值有：
(1).增重率
Figure BDA0002964461240000042
式中：Wt——饲喂t时间后鱼的体重；
Wo——放养时鱼的体重
(2).饲料系数(FCR)
Figure BDA0002964461240000051
(3).肥满度
Figure BDA0002964461240000052
式中：L——鱼的体长
脂肪含量的测定
(1).肝脏脂肪含量的测定
将试验鱼解剖，取出肝脏装入事先滤纸袋中，在鼓风烘箱中烘干至恒重， 准确称量后使用GB6433-86索氏抽提法抽去脂肪，经24小时的抽提后将滤纸 袋再于鼓风烘箱烘干至恒重并准确称量，从而得到肝脏脂肪含量。样品的脂 肪含量从而得出。
(2).肌肉脂肪含量的测定
测定方法同肝脏脂肪含量的测定方法。
(八)指标试验数据处理
试验数据处理:数据处理采用spss软件进行显著性检验，P>0.05为差异 不显著，P<0.05为差异显著。
一.试验结果与分析
(一)不同配方饲料对试验鱼成活率、增重率、饲料系数和肥满度的影响
表2不同配方饲料对试验鱼生长指标的影响
Figure BDA0002964461240000053
1、不同配方饲料对鱼肥满度的影响
根据表2和图1中肥满度的增长与变化情况发现，2组、3组与4组中的 试验鱼肥满度大，其中4组的值最大，为3.77±0.86。5组中的数值最小， 为3.37±0.19％。根据分析，4组中饲料系数与其他四组的数据具有显著性差 异(P<0.05)，余下各组间的无显著性差异(P>0.05)。
2、不同配方饲料对饲料系数的影响
根据表2和图2中饲料系数的增长变化情况发现，1组、2组、3组,5 组中的饲料系数大，4组中的饲料系数最小，为2.07±0.06。接着，5组中的 饲料系数突然增大。4组中饲料系数与其他四组的数据具有显著性差异 (P<0.05)，而其他各组间的无显著性差异(P>0.05)。
3、不同配方饲料对增重率的影响
从表2和图3的数据观察，4组中的增重率最大，达到了198.91±6.29， 其值显著大于5组，与2组、5组差异显著(P<0.05)，而与1组、3组没有 显著差异(P>0.05)。值最小为5组，值为184.86±12.41。根据分析，与1 组、3组、4组差异显著(P<0.05)，而与2组没有显著差异(P>0.05)。
(二)不同配方饲料对试验鱼肝脏及肌肉脂肪含量的影响
表3不同配方饲料对试验鱼肝脏及肌肉脂肪含量的影响
Figure BDA0002964461240000061
1、不同配方饲料对肝脏指数的影响
肝脏指数，系肝脏重占鱼体重的百分率。根据表3和图4的数据，肝脏 指数最大的是2组，为2.30±0.17，最小为3组，其值为2.02±0.19。根据 分析，5组之间的数据均无显著差异(P>0.05)。
2、不同配方饲料对肝脏脂肪含量的影响
根据表3和图5的数据，肝脏脂肪含量最高为1组，值为14.81±0.39， 它与3组、5组的数据有显著性差异(P>0.05)，与2组、4组的数据没有显 著的差异(P>0.05)。肝脏脂肪含量最低的是3组，值为11.67±0.66，明显 低于其1、2、4组，与1组、2组、4组具有显著性差异(P<0.05)，与5组 的数据没有显著的差异(P>0.05)。2组数据仅次与1组，它与3组、5组的 数据有显著性差异(P>0.05)，与1组、4组的数据没有显著的差异(P>0.05)。
3、不同配方饲料对肌肉脂肪含量的影响
根据表3和图6中的数据，肌肉脂肪含量最高的为1组，其值为3.60± 0.35，它与2组、4组、5组的数据有显著性差异(P<0.05)，与3组的数据 没有显著的差异(P>0.05)。最低为4组，为2.24±0.51。它与1组、3组、 5组的数据有显著性差异(P<0.05)，与2组的数据没有显著的差异(P>0.05)。 2组的数据仅高与4组，它与1组、3组的数据有显著性差异(P<0.05)，与 4组、5组的数据没有显著的差异(P>0.05)。3组、5组的数据没有显著的 差异(P>0.05)。
(三)对肝脏切片的观察
从鲜活的试验鱼取下小片肝脏细胞放到固定液中保存，以维持细胞的形 态结构。利用HE染色法对其染色,制成切片,从其中选出较典型的如图7所示。 说明:
图7(a)为对照组的切片，肝细胞异常，呈大量空白。HE染色，40×10。
图7(b)为第2组的切片,肝细胞异常，出现少量空白。HE染色，40×10。
图7(c)为第3组的切片,肝细胞正常。HE染色，40×10。
图7(d)为第4组的切片,肝细胞异常，但不明显。HE染色，40×10。
图7(e)为第5组的切片,肝细胞正常。HE染色，40×10。
从本实验的结果数据来看,试验鱼经110多天的饲养,饲料中添加了护肝 剂的试验组与没有添加护肝剂的对照组相比，养殖鱼的成活率差异不大，而 肥满度，增重率，饲料系数就出现不同，添加了护肝剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的肥满度 有所增加，添加了护肝剂Ⅳ的却降低；饲料中添加了护肝剂的试验组饲料系 数都明显降低；添加了护肝剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ的增重率低于对照组，添加了护肝 剂Ⅲ的却高于对照组，因添加了护肝剂Ⅲ的第4组的肥满度最大,为3.77± 0.86；增重率最大，达到198.91±6.29；饲料系数最小，为2.07±0.06，故 单从生长的角度来分析，添加了护肝剂Ⅲ的饲料更适宜养殖鱼的生长。但是， 我们不能够单从生长指标来判断饲料的优劣，还要从其对生化生理的影响大 小，成本高低等来判断。
不同配方饲料对试验鱼肝脏和肌肉脂肪含量的影响
本实验研究了不同配方饲料对试验鱼肝脏指数的影响,从实验结果的数 据来看，肝脏指数的变化明显，但从总体来看，各组之间没有显著差异。各 组之间的差异不显著，原因可能是试验的条件、方法，试验鱼的种类、发育 阶段或是试验周期不同等造成的。
脂肪既是能源又是必需脂肪酸的来源，同时脂肪又能促进脂溶性维生素 的吸收，因此在饲料配方中具有重要地位，但是过量的脂肪会使鱼体内的代 谢出现紊乱，最终使大量脂肪存积于肝脏，形成脂肪肝。
本实验中还研究了不同配方饲料对试验鱼肌肉脂肪含量的影响，从结果 来看，有显著的差异，即各饲料对试验鱼的肌肉脂肪含量的影响大。原因可 能是饲料中各营养成分对于肌肉中脂肪的影响明显。各种饲料添加剂(包括 肌醇)可能对鱼类的作用机理存在种间差异，添加剂可能对某种鱼的指标影 响大，也有可能对别的种类具有明显的作用，所以不能一概而论。这种种间 差异还有待今后用实验对它的作用机制作进一步的研究。
从本试验的结果数据来看，也体现上面所述。添加了护肝剂的试验组与 没有添加护肝剂的对照组相比，鱼的肝脏脂肪含量和肌肉脂肪含量都有所降 低。肝脏脂肪含量最高为对照组，值为14.81±0.39，它与3组、5组的数据 有显著性差异(P<0.05)，与2组、4组的数据没有显著的差异(P>0.05)。 肝脏脂肪含量最低的是3组，值为11.67±0.66，明显低于其1、2、4组，与 1组、2组、4组具有显著性差异(P<0.05)，与5组的数据没有显著的差异 (P>0.05)。2组数据仅次与1组，它与3组、5组的数据有显著性差异(P<0.05)， 与1组、4组的数据没有显著的差异(P>0.05)。反映了护肝剂的添加是具有 抗脂肪肝效应的，在添加护肝剂Ⅱ和护肝剂Ⅳ下抗脂肪肝的效果越发明显， 护肝剂Ⅱ抗脂肪肝的效果最好。肌肉脂肪含量最高的也是对照组，其值为3.60 ±0.35，它与2组、4组、5组的数据有显著性差异(P<0.05)，与3组的数 据没有显著的差异(P>0.05)。最低为4组，为2.24±0.51。它与1组、3 组、5组的数据有显著性差异(P<0.05)，与2组的数据没有显著的差异 (P>0.05)。说明护肝剂的添加对鱼的肌肉脂肪含量影响大，降低了肌肉中 脂肪的含量，其中以护肝剂Ⅰ和护肝剂Ⅲ的效果越发明显，护肝剂Ⅲ最好。
好的配方饲料对于养殖鱼的生长有较好的促进作用，并且能够在一定程 度上预防养殖鱼脂肪肝的的发生，但并不是所有的饲料都可以完全预防和控 制脂肪肝的发生，这还涉及到多方面的因子，包括养殖条件，养殖模式，养 殖的种类，饲料营养的全面性等。从本次实验的结果来看，试验鱼在添加了 护肝剂Ⅰ的饲料喂养下，它的抗脂肪肝效果不明显，抗脂肪肝的效果是在添 加了护肝剂Ⅱ和护肝剂Ⅳ组中明显起来，但是其有一定的限度，不是越多越 好，更不能盲目搭配。鱼类对营养是必需的，但是鱼类对营养的要求受其生 长发育阶段、生理状况、饲料组成与品质、环境条件、营养素之间的相互作 用、加工条件与工艺、投喂技术等因素的影响，要根据实际情况进行适当的 操作，不能以偏概全。饲料中营养素的组配对鱼类肝脏脂肪积累和营养性脂 肪肝的诱发机制尚有待于深入研究。评价鱼类脂肪肝症状的生理生化指标还 不够完善，应当借鉴医学和畜禽研究领域对脂肪肝研究取得的成果，建立简 便、快捷、高效的鱼类脂肪肝病变检测体系，并且有必要分析饲料中蛋白质、 脂肪和糖类在鱼体代谢中的相互作用关系，探索饲料成分的合理组配方式； 进一步对鱼类肝脏脂肪的来源和去路及脂肪细胞的形成展开研究，探寻鱼类 肝脏脂肪的生成、利用和转化规律；深入研究脂肪肝物质的作用机制，寻找 高效抗脂肪肝物质，以便通过营养调控的方式预防鱼类营养性脂肪肝的发生， 为集约化水产养殖的健康发展提供科技支撑。
肝脏脂肪肝的病症和病理变化：
脂肪肝是一种可以由多种诱因引起的疾病.同时也是多种肝脏疾病发展 中的一种病理过程，是最常见的弥漫性肝病之一，其以肝细胞内甘油三酯蓄 积过多为主要病理改变。具有脂肪肝病变的养成商品鱼，由于其肌肉脂肪含 量也会明显升高，导致其品质下降。脂肪肝病已成为养殖者的难题之一。 鱼类的肝脏脂肪主要来自对饲料中脂肪的直接吸收以及饲料中过量蛋白质和 糖类的转化合成。当这些脂肪运至肝脏后，若不能及时转运出去.则会堆积 于肝脏中引起肝脏代谢紊乱。肝脏中蓄积的脂肪以脂蛋白的形式被输送到血液，然后转运至其他组织中再利用或在脂肪组织中储存。作为脂类载体，脂 蛋白在这个过程中发挥着重要作用。脂蛋白在肝细胞粗糙内质网上合成.与 肝脂结合，然后通过高尔基体分泌到细胞质中，随血液运至肝脏。当脂蛋白 的合成量不足时，肝细胞中的脂肪不能及时运出，就会造成脂肪在肝脏中积 聚。一方面，肝脏脂肪含量升高，另一方面，血浆脂肪含量降低。
本次实验的结果---肝脏切片的观察,也明显有上述特点:在对照组中, 大量肝细胞的细胞质充满脂肪,经染色处理后,大量的脂肪颗粒被脱去,使得 出现大量空白,细胞核从肝细胞中央移向边缘，如图7(a)。在图7(b)中也 出现了类似空白的地方，但数量低于图7(a)的。在图7(d)中，肝细胞也出现 了异常，但不是很明显。图7(c)和图7(e)的肝细胞正常。从这几组图非常明 显的看出脂肪肝的症状特点。
二.结论
本试验的结果显示，在试验3组的喂养下，试验鱼的增重率、肥满度都较 好，鱼的肝脏指数呈最小后逐渐增大的趋势，但各组之间差异不显著。肝脏 脂肪含量在试验组中最低，与对照组有显著性差异(P<0.05)。
通过对本试验的结果进行综合的评定与分析得到：
(一)在池塘小网箱养殖条件下，平均体重为231.57g/尾的试验鱼种在 添加了护肝剂Ⅲ的试验4组饲料的喂养时，肥满度最高，为3.77±0.86，饲料 系数最低，为2.07±0.06，增重率最高，为198.91±6.29，所以饲料4组对试 验鱼种生长优势明显。
(二)在添加了护肝剂饲料的喂养下，试验鱼肝脏和肌肉脂肪含量都有 所降低,可较好地促进养殖鱼的生长，并且能够有效的预防鱼脂肪肝。而以在 添加护肝剂Ⅰ和护肝剂Ⅲ的饲料喂养下肌肉中脂肪含量降低明显；在添加护 肝剂Ⅱ和护肝剂Ⅳ的饲料喂养下肝脏脂肪含量降低明显，抗脂肪肝效应明显。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普 通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润 饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (2)

1.一种养殖鱼用护肝剂，其特征在于：由以下重量份原料组成：垂盆草黄酮类2-4份、甜菜碱10-30份、胆碱40-60份、肌醇4-8份、L-肉碱2-4份。
2.一种鱼用护肝饲料，其特征在于：由0.29-0.51％权利要求1的鱼用护肝剂、花生麸9.99-10.21％、鱼粉5.0％、豆粕20.0％、菜子饼25.0％、玉米15.0％、麦麸20.0％、复合矿物质2.5％、复合维生素0.5％、鱼油0.5％、食盐0.6％、黏合剂0.1％、防霉剂0.1％和诱食剂0.2％组成。
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