CN113142143B - 一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，包括：S01、配制NaCL饲料；S02、在温度为25～27℃，湿度为70％～80％的条件下，将老龄滞育的松墨天牛幼虫置于培养箱中，利用NaCL饲料对滞育的松墨天牛幼虫进行饲养。本方案通过采用特定的饲料配方和特定的饲养环境，通过松墨天牛滞育幼虫打破滞育试验表明，大幅提高了松墨天牛滞育幼虫化蛹率，使得松墨天牛能够在人工环境下更好的生长繁殖。本方案适用冬季滞育松墨天牛幼虫打破滞育，使得松墨天牛幼虫进行正常发育，使松墨天牛幼虫生活史不受生长季节的束缚，在一年中可以正常生长发育。为人工条件下实现松墨天牛的传代饲养，构建实验种群，奠定良好的基础。
Description
技术领域
本发明涉及松墨天牛人工饲养技术领域，尤其涉及一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法。
背景技术
松墨天牛，又名松褐天牛，属于鞘翅目天牛科沟胫天牛亚科墨天牛属，在国内分布于福建、辽宁、河北、江西、安徽、河南、陕西、山东、湖南、湖北、江苏、浙江、广东、广西、四川、云南、贵州、西藏、台湾、香港等地，国外分布于日本、朝鲜、老挝、越南等国。松墨天牛是的一种主要蛀干害虫，松墨天牛1～2龄的天牛幼虫以松树表皮下韧皮部为食，破坏松树营养和水分运输管道，造成树势衰弱，生长受阻；3龄后的幼虫钻入木质部内部蛀食孔道，造成枝干木质疏松，易折断；成虫出孔后啃食嫩枝表皮，造成松针脱落，枝条死亡，产卵期在枝干表面啃咬产卵孔，导致松树易受其他各类病虫害侵染；最主要危害在于携带和传播松材线虫，导致松材线虫病的不断扩散和松林的大面积枯死，影响出材率、材质。松墨天牛主要寄主有马尾松，其次危害黑松、雪松、火炬松、落叶松、思茅松、华山松、云南松、云杉、冷杉等，主要为害衰弱木、濒死木和新伐倒木。松墨天牛是恒温动物，松墨天牛的生长发育程度受自然因素影响比较大，温度则是所有因素中影响最为显著的，气温较高时更有利于松墨天牛的生长发育，在低温环境条件下，一般以滞育形态低于外界不良因素。目前，对松墨天牛的生物学、生态学特性、综合防治等正进行全面系统的研究。
松墨天牛是松科树种的主要蛀干害虫。松墨天牛在我国仅南方极少数省份可1年发生2～3代，其他大部分地区1年发生1代，以3、4龄幼虫在树干木质部蛀道或蛹室内过冬，少量以3龄以下幼虫在树皮下越冬。2代区，越冬幼虫翌年4月上旬开始羽化，4月下旬羽化高峰，羽化20d左右开始产卵，7月上旬1代成虫开始羽化，8月上旬产卵，8月中旬幼虫孵化，入木取食，并以幼虫在树干或枝条木质部越冬；1代区，越冬幼虫一般在翌年4月上旬至5月上旬开始化蛹，成虫5月上旬至5月下旬羽化，6月份产卵，幼虫6月下旬至7月上旬孵化，危害至11月份开始越冬。
松墨天牛是传播松材线虫病的主要媒介，发生普遍，危害严重，使得松材线虫病能够在短时间内大范围扩散。松材线虫，是世界公认的检疫性有害生物，是松树萎蔫病的主要致病因子。在其原产地北美并不造成大面积危害，而被引入亚洲和欧洲等国家后，却大规模爆发，短时间内致死大量松树，并不断扩散蔓延。
已有的专利(CN 107156543 A)所述的人工饲养松墨天牛幼虫的饲料配方在打破滞育方面基本没有明显效果。本发明所述针对松墨天牛滞育幼虫的饲料配方饲养松墨天牛，有利于松墨天牛滞育幼虫更好的生长，本发明所述配方饲养的滞育松墨天牛较已有饲料配方饲养的滞育松墨天牛打破滞育时长明显缩短，为实验室松墨天牛种群的建立提供了更好的保障。
发明内容
针对冬季时，松墨天牛幼虫以滞育状态抵御不利因素的问题，本发明的目的在于提供一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，通过特地的饲养配方来达到打破滞育的效果，避免了现有松墨天牛幼虫在正常饲料饲养情况下幼虫大量滞育的缺陷。
为了实现上述的技术目的，本发明所采用的技术方案为：
一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，包括：
S01、配制NaCL饲料；
S02、在温度为25～27℃，湿度为70％～80％的条件下，将老龄滞育的松墨天牛幼虫置于培养箱中，利用NaCL饲料对滞育的松墨天牛幼虫进行饲养。
作为一种可能的实施方式，进一步，所述NaCL饲料的组成为：
作为一种可能的实施方式，进一步，所述的NaCL饲料还经高温高压灭菌处理。
作为一种可能的实施方式，进一步，所述NaCL饲料的配制方法包括如下步骤：
(1)将NaCL和无菌水混合配置成浓度为10～100mmol/L的NaCL溶液；
(2)将25～35g琼脂加入到250～350ml步骤(1)制得的NaCL溶液中进行搅拌至其融化，制得混合物A；
(3)往混合物A中继续加入35～45g蔗糖、55～65g麦麸、3～5g苯甲酸钠、1.5～2.5g山梨酸、8～12g虾粉、23～27g干酵母、140～160g木屑，且进行搅拌混合成糊状混合物，制得混合物B；
(4)将混合物B冷却后，将其分装于饲养容器中，然后经高温高压灭菌后，冷藏存储备用。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，步骤(1)中，将NaCL和无菌水混合配置成浓度为50mmol/L的NaCL溶液。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，步骤(2)中，将30g琼脂加入到300ml步骤(1)制得的NaCL溶液中进行搅拌至其融化，制得混合物A；
步骤(3)中，往混合物A中继续加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑，且进行搅拌混合成糊状混合物，制得混合物B。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，所述的木屑为松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎后，混合制得。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，步骤(4)中，分装在饲养容器中的混合物B经121℃、1.2Mpa灭菌处理3h。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，所述分装在饲养容器内的混合物B在高温高压灭菌处理前，还经压实处理，且其分装量为饲养容器容量的2/3。
作为一种较优的选择实施方式，优选的，所述老龄滞育的松墨天牛幼虫为在10月份松墨天牛幼虫滞育时从野外采集疫木，从疫木中收集松墨天牛幼虫，且按松墨天牛幼虫头宽和体长来选取幼虫。
基于上述打破滞育的方法，本发明还提供一种松墨天牛饲养方法，其包括上述所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法。
采用上述的技术方案，本发明与现有技术相比，其具有的有益效果为：本方案通过采用特定的饲料配方和特定的饲养环境，通过松墨天牛滞育幼虫打破滞育试验表明，大幅提高了松墨天牛滞育幼虫化蛹率，使得松墨天牛能够在人工环境下更好的生长繁殖。本方案适用冬季滞育松墨天牛幼虫打破滞育，使得松墨天牛幼虫进行正常发育，使松墨天牛幼虫生活史不受生长季节的束缚，在一年中可以正常生长发育。为人工条件下实现松墨天牛的传代饲养，构建实验种群，奠定良好的基础。
需要说明的是，本方案巧妙性通过单独加入了氯化钠进行调配饲养配方，利用氯化钠中的钠金属离子进行辅助饲养配方加速打破滞育，而配方组成中，苯甲酸钠亦具有一定的协同作用，相较于仅采用苯甲酸而言，采用苯甲酸钠亦具有一定的辅助协同作用，而传统松墨天牛在饲养时，其通常将苯甲酸钠作为营养成分，同时起到防止饲料发霉的作用，而通常情况下，松墨天牛饲养配方几乎不会特别加入其他金属离子组分，在打破滞育饲育上，几乎难以实现滞育打破效果，加之目前针对松墨天牛滞育打破方面的研究还罕有报道，故，本方案基于实验论证，提供了一种为松墨天牛打破滞育饲养的方法和饲养配方。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步的详细描述。特别指出的是，以下实施例仅用于说明本发明，但不对本发明的范围进行限定。同样的，以下实施例仅为本发明的部分实施例而非全部实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的人工饲料，包括以下组分：300ml无菌水、30g琼脂、40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑。
基于上述的饲料成分，本实施例提供一种制备上述用于松墨天牛滞育幼虫打破滞育的饲料的方法，包括以下步骤：
(1)300mL无菌水备用；
(2)将松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎，量取所需各组分原料备用；
(3)将300ml的50mmol/LNaCL溶液倒入锅中，加入30g琼脂搅拌至融化；
(4)加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑搅拌至匀糊状。
(5)冷却后，分装于50ml离心管中，每管装至容积2/3，高温灭菌，冷藏备用。
实施例2
本实施例提供一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的人工饲料，包括以下组分：300ml的10mmol/LNaCL溶液、30g琼脂、40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑。
基于上述饲料配方，本实施例提供对应人工饲料的制备方法，其包括以下步骤：
(1)用NaCL药品和无菌水配置10mmol/L的NaCL溶液，取300mL备用；
(2)将松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎，量取所需各组分原料备用；
(3)将300ml的10mmol/LNaCL溶液倒入锅中，加入30g琼脂搅拌至融化；
(4)加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑搅拌至匀糊状。
(5)冷却后，分装于50ml离心管中，每管装至容积2/3，高温灭菌，冷藏备用。
实施例3
本实施例一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的人工饲料，包括以下组分：300ml的50mmol/LNaCL溶液、30g琼脂、40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑。
基于上述饲料配方，本实施例提供对应人工饲料的制备方法，其包括以下步骤：
(1)用NaCL药品和无菌水配置50mmol/L的NaCL溶液，取300mL备用；
(2)将松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎，量取所需各组分原料备用；
(3)将300ml的50mmol/LNaCL溶液倒入锅中，加入30g琼脂搅拌至融化；
(4)加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑搅拌至匀糊状。
(5)冷却后，分装于50ml离心管中，每管装至容积2/3，高温灭菌，冷藏备用。
实施例4
本实施例一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的人工饲料，包括以下组分：300ml的100mmol/LNaCL溶液、30g琼脂、40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑。
基于上述饲料配方，本实施例提供对应人工饲料的制备方法，其包括以下步骤：
(1)用NaCL药品和无菌水配置100mmol/L的NaCL溶液，取300mL备用；
(2)将松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎，量取所需各组分原料备用；
(3)将300ml的100mmol/LNaCL溶液倒入锅中，加入30g琼脂搅拌至融化；
(4)加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑搅拌至匀糊状。
(5)冷却后，分装于50ml离心管中，每管装至容积2/3，高温灭菌，冷藏备用。
测试对比
取实施例1～实施例4制得的NaCL饲料，分别作为测试例，在温度为26℃，湿度为75％的条件下，将4组老龄滞育的松墨天牛幼虫分别置于不同培养箱中，利用实施例1～实施例4对应的NaCL饲料对滞育的松墨天牛幼虫进行饲养，然后观察松墨天牛幼虫生长情况，统计其打破滞育时间，获得表1所示数据，具体如下：
表1实施例1-4对松墨天牛滞育幼虫打破滞育结果统计
由表1数据可知：实施例1-4均能打破滞育，但实施例3和实施例4优于实施例2，实施例2优于实施例1，且结合实施例3和实施例4可推知，NaCL饲料中，NaCL溶液的最优浓度为50mmol/L。
以上所述仅为本发明的部分实施例，并非因此限制本发明的保护范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效装置或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (7)
1.一种松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，包括：
配制NaCL饲料；
在温度为26℃，湿度为75％的条件下，将老龄滞育的松墨天牛幼虫置于培养箱中，利用NaCL饲料对滞育的松墨天牛幼虫进行饲养；
所述NaCL饲料的组成为：
其中，所述NaCL饲料的配制方法包括如下步骤：
(1)将NaCL和无菌水混合配置成浓度为50mmol/L的NaCL溶液；
(2)将25～35g琼脂加入到250～350ml步骤(1)制得的NaCL溶液中进行搅拌至其融化，制得混合物A；
(3)往混合物A中继续加入35～45g蔗糖、55～65g麦麸、3～5g苯甲酸钠、1.5～2.5g山梨酸、8～12g虾粉、23～27g干酵母、140～160g木屑，且进行搅拌混合成糊状混合物，制得混合物B；
(4)将混合物B冷却后，将其分装于饲养容器中，然后经高温高压灭菌后，冷藏存储备用。
2.如权利要求1所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，步骤(2)中，将30g琼脂加入到300ml步骤(1)制得的NaCL溶液中进行搅拌至其融化，制得混合物A；
步骤(3)中，往混合物A中继续加入40g蔗糖、60g麦麸、4g苯甲酸钠、2g山梨酸、10g虾粉、25g干酵母、150g木屑，且进行搅拌混合成糊状混合物，制得混合物B。
3.如权利要求2所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，所述的木屑为松树木质部材料、韧皮部分别进行粉碎后，混合制得。
4.如权利要求2所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，步骤(4)中，分装在饲养容器中的混合物B经121℃、1.2Mpa灭菌处理3h。
5.如权利要求4所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，所述分装在饲养容器内的混合物B在高温高压灭菌处理前，还经压实处理，且其分装量为饲养容器容量的2/3。
6.如权利要求1所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法，其特征在于，所述老龄滞育的松墨天牛幼虫为在10月份松墨天牛幼虫滞育时从野外采集疫木，从疫木中收集松墨天牛幼虫，且按松墨天牛幼虫头宽和体长来选取幼虫。
7.一种松墨天牛饲养方法，其特征在于，其包括权利要求1至6之一所述的松墨天牛滞育幼虫打破滞育的方法。
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