CN113046266B - 一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于土壤改良技术领域，公开了一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法，所述防止土壤板结的液体微生物菌剂按照质量份数计，由嗜酸乳杆菌4～5份、土壤短芽孢杆菌3～4份、双歧杆菌3～4份、水稻秸秆6～20份、纤维素酶6～8份、长链脂肪醇2～3份、蒸馏水10～30份组成。本发明提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂适合进行土壤的修复，不会对环境造成二次污染，不会额外造成负担，属于环境友好亲和型微生物菌剂产品，能够实现对土壤的修复，减少土壤板结，提高土壤肥力以及提高土壤透气性，促进植物的生长。同时，本发明提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法简单，操作方便，产品方便储运和投放。

Description

一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法
技术领域
本发明属于土壤治理技术领域，尤其涉及一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
目前，现有农作物在生长的过程中，一般都需要对土壤进行施肥，为土壤提供营养成分，但是一般情况下的是农作物所使用的施肥装置，都是直接对农作物种植在农田中，种植完之后，才对农作物及种植农作物的土壤进行施肥，而农作物所采用的肥料一般都会影响土壤本身的有效成分，后期土壤中的养分流失过快，现有技术中暂无可以促进农作物生长，同时又可以让土壤保证活性的微生物菌剂，无法防止防止土壤板结现象。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有技术中暂无可以促进农作物生长，同时又可以让土壤保证活性的微生物菌剂，无法防止防止土壤板结现象。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法。
本发明是这样实现的，一种防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一，进行菌种活化通用培养基的制备：将花生进行粉碎后过筛得到花生碎屑，将花生碎屑置于浸出液中，加热浸泡，回收浸出液得到花生蛋白；按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取；将花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠进行混合，置于研磨机中进行湿法研磨，研磨混合料；将琼脂加热至融化，冷却至35～40℃，加入研磨混合料，搅拌均匀，得到菌种活化通用培养基；
步骤二，进行嗜酸乳杆菌的活化得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入磷酸二氢钾，搅拌均匀，静置晾凉，得到嗜酸乳杆菌活化培养基；将嗜酸乳杆菌接种于嗜酸乳杆菌活化培养基中，设定活化温度为35～40℃，活化时间为2～3h，对嗜酸乳杆菌进行活化；活化结束后，将嗜酸乳杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液；
步骤三，进行土壤短芽孢杆菌的活化得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入麦芽汁，搅拌均匀，静置晾凉，得到土壤短芽孢杆菌活化培养基；将土壤短芽孢杆菌接种于土壤短芽孢杆菌活化培养基中，设定活化温度为25～40℃，活化时间为1～2h，对土壤短芽孢杆菌进行活化；活化结束后，将土壤短芽孢杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液；
步骤四，进行双歧杆菌的活化得到活化后的双歧杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入汽水硫酸镁，搅拌后滴加甘油，搅拌均匀静置晾凉，得到双歧杆菌活化培养基；将双歧杆菌接种于双歧杆菌活化培养基中，设定活化温度为45～50℃，活化时间为2～3h，对双歧杆菌进行活化；活化结束后，将双歧杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的双歧杆菌菌液；
步骤五，进行水稻秸秆的酶解以及进行防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备：将纤维素酶与长链脂肪醇按照质量份数进行混合，加入蒸馏水，搅拌均匀得到酶解液；将水稻秸秆进行粉碎得到水稻秸秆碎屑，将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，得到酶解产物；对酶解产物进行过滤，滤除水稻秸秆碎屑，得到酶解产液；将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，得到防止土壤板结的液体微生物菌剂。
进一步，步骤一中，所述浸出液为乙醇-己烷混合液。
进一步，步骤一中，所述加热浸泡的温度为60～80℃，加热浸泡的时间为3～4h。
进一步，步骤一中，所述按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取，包括：
按照质量份数分别称取花生蛋白1～2份、琼脂1～2份、蛋白胨2～3份、葡萄糖2～4份、酵母浸粉1～3份、氯化钠1～2份、蒸馏水5～10份。
进一步，步骤一中，所述湿法研磨的粒径＜30μm。
进一步，步骤五中，所述水稻秸秆碎屑的粒径＜5mm。
进一步，步骤五中，所述将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，包括：将水稻秸秆碎屑置于酶解液中，将酶解液加热至85℃并进行1～2h保温，对水稻秸秆碎屑进行酶解。
进一步，步骤五中，所述将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，还包括对混合物进行超声分散。
进一步，所述超声分散的55～60kHz，超声分散的时间为15～20min。
本发明的另一目的在于提供一种应用所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法制备得到的防止土壤板结的液体微生物菌剂，所述防止土壤板结的液体微生物菌剂按照质量份数计，由嗜酸乳杆菌4～5份、土壤短芽孢杆菌3～4份、双歧杆菌3～4份、水稻秸秆6～20份、纤维素酶6～8份、长链脂肪醇2～3份、蒸馏水10～30份组成。
结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂中不含致病菌，不含重金属和有毒害化学物质，适合进行土壤的修复，不会对环境造成二次污染，不会额外造成负担，属于环境友好亲和型微生物菌剂产品，能够实现对土壤的修复，减少土壤板结，提高土壤肥力以及提高土壤透气性，促进植物的生长。同时，本发明提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法简单，操作方便，产品方便储运和投放。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法流程图。
图2是本发明实施例提供的进行菌种活化通用培养基的制备方法流程图。
图3是本发明实施例提供的进行嗜酸乳杆菌的活化得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液的方法流程图。
图4是本发明实施例提供的进行土壤短芽孢杆菌的活化得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液的方法流程图。
图5是本发明实施例提供的进行双歧杆菌的活化得到活化后的双歧杆菌菌液的方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种防止土壤板结的液体微生物菌剂及其制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
本发明实施例提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂按照质量份数计，由嗜酸乳杆菌4～5份、土壤短芽孢杆菌3～4份、双歧杆菌3～4份、水稻秸秆6～20份、纤维素酶6～8份、长链脂肪醇2～3份、蒸馏水10～30份组成。
如图1所示，本发明实施例提供的防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：
S101，进行菌种活化通用培养基的制备；
S102，进行嗜酸乳杆菌的活化得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液；
S103，进行土壤短芽孢杆菌的活化得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液；
S104，进行双歧杆菌的活化得到活化后的双歧杆菌菌液；
S105，进行水稻秸秆的酶解以及进行防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备。
如图2所示，本发明实施例提供的进行菌种活化通用培养基的制备，包括：
S201，将花生进行粉碎后过筛得到花生碎屑，将花生碎屑置于浸出液中，加热浸泡，回收浸出液得到花生蛋白；
S202，按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取；
S203，将花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠进行混合，置于研磨机中进行湿法研磨，研磨混合料；
S204，将琼脂加热至融化，冷却至35～40℃，加入研磨混合料，搅拌均匀，得到菌种活化通用培养基。
步骤S201中，本发明实施例提供的浸出液为乙醇-己烷混合液。
步骤S201中，本发明实施例提供的加热浸泡的温度为60～80℃，加热浸泡的时间为3～4h。
步骤S202中，本发明实施例提供的按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取，包括：
按照质量份数分别称取花生蛋白1～2份、琼脂1～2份、蛋白胨2～3份、葡萄糖2～4份、酵母浸粉1～3份、氯化钠1～2份、蒸馏水5～10份。
步骤S203中，本发明实施例提供的湿法研磨的粒径＜30μm。
如图3所示，本发明实施例提供的进行嗜酸乳杆菌的活化得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液，包括：
S301，对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入磷酸二氢钾，搅拌均匀，静置晾凉，得到嗜酸乳杆菌活化培养基；
S302，将嗜酸乳杆菌接种于嗜酸乳杆菌活化培养基中，设定活化温度为35～40℃，活化时间为2～3h，对嗜酸乳杆菌进行活化；
S303，活化结束后，将嗜酸乳杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液。
如图4所示，本发明实施例提供的进行土壤短芽孢杆菌的活化得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液，包括：
S401，对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入麦芽汁，搅拌均匀，静置晾凉，得到土壤短芽孢杆菌活化培养基；
S402，将土壤短芽孢杆菌接种于土壤短芽孢杆菌活化培养基中，设定活化温度为25～40℃，活化时间为1～2h，对土壤短芽孢杆菌进行活化；
S403，活化结束后，将土壤短芽孢杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液。
如图5所示，本发明实施例提供的进行双歧杆菌的活化得到活化后的双歧杆菌菌液，包括：
S501，对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入汽水硫酸镁，搅拌后滴加甘油，搅拌均匀静置晾凉，得到双歧杆菌活化培养基；
S502，将双歧杆菌接种于双歧杆菌活化培养基中，设定活化温度为45～50℃，活化时间为2～3h，对双歧杆菌进行活化；
S503，活化结束后，将双歧杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的双歧杆菌菌液。
本发明实施例提供的进行水稻秸秆的酶解以及进行防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备：将纤维素酶与长链脂肪醇按照质量份数进行混合，加入蒸馏水，搅拌均匀得到酶解液；将水稻秸秆进行粉碎得到水稻秸秆碎屑，将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，得到酶解产物；对酶解产物进行过滤，滤除水稻秸秆碎屑，得到酶解产液；将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，得到防止土壤板结的液体微生物菌剂。
本发明实施例提供的水稻秸秆碎屑的粒径＜5mm。
本发明实施例提供的将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，包括：将水稻秸秆碎屑置于酶解液中，将酶解液加热至85℃并进行1～2h保温，对水稻秸秆碎屑进行酶解。
本发明实施例提供的将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，还包括对混合物进行超声分散。
本发明实施例提供的超声分散的55～60kHz，超声分散的时间为15～20min。
下面结合具体实施例对本发明技术方案作进一步描述。
1、土壤准备
选择土壤板结的田块，建立大棚。所选田块的土壤容重为1.5～1.7，总孔隙度为20～30％，通气孔隙度为7～9％，重金属总含量为500～700mg/kg。
2、育苗
(1)将辣椒种子实行温汤浸种，水温55～65℃，浸种30～40min，边浸边搅。
(2)药剂处理：用1％的磷酸三钠浸种20～40min，用福尔马林100倍液浸种20～30min，备用。
(3)将处理好的种子放入充满育苗基质的穴盘内育苗。
(4)在穴盘育苗至30～50cm高时准备移栽、定植。
3、定植
苗高30～50cm时，于1月份定植于大棚内。定植时在种植区挖好苗穴，一穴一株，每株间距20～30cm，行距50～60cm。
定植后及时浇一遍小水，不可大水漫灌，防止将刚定植好的辣椒冲倒。
4、田间管理
采取沟灌或滴灌，灌水量：全生育期灌水5～6次，每次灌水量50～60m3/亩，小水勤灌，保持土壤潮湿。
5、施肥
将本发明制备得到的防止土壤板结的液体微生物菌剂加入水中，混合均匀，然后随水冲施或者滴灌，亩用量10～12L左右。
经试验验证，使用本发明制备得到的防止土壤板结的液体微生物菌剂能明显改善土壤，种植辣椒效果好，且有效降解土壤中重金属残留，种植一年后，土壤中重金属总量为200～240mg/kg。
以上所述，仅为本发明较优的具体的实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：
步骤一，进行菌种活化通用培养基的制备：将花生进行粉碎后过筛得到花生碎屑，将花生碎屑置于浸出液中，加热浸泡，回收浸出液得到花生蛋白；按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取；将花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠进行混合，置于研磨机中进行湿法研磨，研磨混合料；将琼脂加热至融化，冷却至35～40℃，加入研磨混合料，搅拌均匀，得到菌种活化通用培养基；
步骤二，进行嗜酸乳杆菌的活化得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入磷酸二氢钾，搅拌均匀，静置晾凉，得到嗜酸乳杆菌活化培养基；将嗜酸乳杆菌接种于嗜酸乳杆菌活化培养基中，设定活化温度为35～40℃，活化时间为2～3h，对嗜酸乳杆菌进行活化；活化结束后，将嗜酸乳杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的嗜酸乳杆菌菌液；
步骤三，进行土壤短芽孢杆菌的活化得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入麦芽汁，搅拌均匀，静置晾凉，得到土壤短芽孢杆菌活化培养基；将土壤短芽孢杆菌接种于土壤短芽孢杆菌活化培养基中，设定活化温度为25～40℃，活化时间为1～2h，对土壤短芽孢杆菌进行活化；活化结束后，将土壤短芽孢杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的土壤短芽孢杆菌菌液；
步骤四，进行双歧杆菌的活化得到活化后的双歧杆菌菌液：对菌种活化通用培养基进行加热，向菌种活化通用培养基中加入汽水硫酸镁，搅拌后滴加甘油，搅拌均匀静置晾凉，得到双歧杆菌活化培养基；将双歧杆菌接种于双歧杆菌活化培养基中，设定活化温度为45～50℃，活化时间为2～3h，对双歧杆菌进行活化；活化结束后，将双歧杆菌活化培养基置于离心机中离心，弃除固态物质，得到活化后的双歧杆菌菌液；
步骤五，进行水稻秸秆的酶解以及进行防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备：将纤维素酶与长链脂肪醇按照质量份数进行混合，加入蒸馏水，搅拌均匀得到酶解液；将水稻秸秆进行粉碎得到水稻秸秆碎屑，将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，得到酶解产物；对酶解产物进行过滤，滤除水稻秸秆碎屑，得到酶解产液；将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，得到防止土壤板结的液体微生物菌剂；所述防止土壤板结的液体微生物菌剂按照质量份数计，由嗜酸乳杆菌4～5份、土壤短芽孢杆菌3～4份、双歧杆菌3～4份、水稻秸秆6～20份、纤维素酶6～8份、长链脂肪醇2～3份、蒸馏水10～30份组成；
步骤一中，所述浸出液为乙醇-己烷混合液。
2.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述加热浸泡的温度为60～80℃，加热浸泡的时间为3～4h。
3.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述按照质量份数分别进行花生蛋白、蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、琼脂的称取，包括：
按照质量份数分别称取花生蛋白1～2份、琼脂1～2份、蛋白胨2～3份、葡萄糖2～4份、酵母浸粉1～3份、氯化钠1～2份、蒸馏水5～10份。
4.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述湿法研磨的粒径＜30μm。
5.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述水稻秸秆碎屑的粒径＜5mm。
6.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述将水稻秸秆碎屑置于酶解液中浸泡，包括：将水稻秸秆碎屑置于酶解液中，将酶解液加热至85℃并进行1～2h保温，对水稻秸秆碎屑进行酶解。
7.如权利要求1所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述将酶解产液、活化后的嗜酸乳杆菌菌液、活化后的土壤短芽孢杆菌菌液活化后的双歧杆菌菌液混合，还包括对混合物进行超声分散。
8.如权利要求7所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述超声分散的55～60kHz，超声分散的时间为15～20min。
9.一种应用如权利要求1～8任意一项所述防止土壤板结的液体微生物菌剂的制备方法制备得到的防止土壤板结的液体微生物菌剂，其特征在于，所述防止土壤板结的液体微生物菌剂按照质量份数计，由嗜酸乳杆菌4～5份、土壤短芽孢杆菌3～4份、双歧杆菌3～4份、水稻秸秆6～20份、纤维素酶6～8份、长链脂肪醇2～3份、蒸馏水10～30份组成。
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Title
An Investigation of Petrol Metabolizing Bacteria Isolated from Contaminated Soil Samples Collected from Various Fuel Stations;Fatima Muccee 等;《Pol J Microbiol.》;20190628;第68卷(第2期);摘要 *
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