CN113009041A - 一种同时测定植物油中八种维生素e异构体的方法 - Google Patents

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Abstract

本申请公开了一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，涉及成分检测技术领域。同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，用反相超高效液相色谱法，包括以下步骤：S1标准储备液配制：称取标准品，无水乙醇定容，得标准储备液；S2标准中间液配制：取标准储备液，无水乙醇定容，得中间液；S3标准工作液配制：取中间液，丙酮定容；得标准工作液；S4待测样预处理：取待测植物油样品，加入含磷分子筛，混合均匀，过滤，得脱胶样品；取脱胶样品，加入丙酮，混合均匀，得待测试样溶液；S5液相色谱检测：注入液相色谱柱检测，计算各维生素E异构体含量。同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法具有可保护色谱仪的优点。

Description

一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法
技术领域
本申请涉成分检测领域，尤其涉及一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法。
背景技术
维生素E为脂溶性维生素，包含多种生育酚和生育三烯酚。根据苯环上甲基取代基数目和位置的不同，维生素E分为α-、β-、γ-、δ-生育酚和α-、β-、γ-、δ-生育三烯酚8种异构体，具有抗肿瘤、防止动脉硬化、改善心脑血管疾病、延缓衰老、增强免疫力等多种作用。维生素E是人体必需的植物源维生素，人体自身无法合成，只能通过食物摄入。植物油中含有丰富的生育酚和生育三烯酚，是人类摄取维生素E的主要来源。不同维生素E异构体的生物活性不同，其中α-型的生物活性最强，δ-型的抗氧化性最强。不同品种植物油中维生素E组成及含量不同，其营养价值有很大差异。对植物油中维生素E各异构体的含量测定，能为消费者科学选购植物油提供参考。
目前同时检测植物油中八种维生素E异构体比较高效的方法是用反相液相色谱法，为了更好地分离八种维生素E异构体的色谱峰，目前常用的反相液相色谱法用甲醇与水的混合液作流动相。
针对上述相关技术，发明人认为，植物油中一般含有少量的磷脂，磷脂在含有水的流动相中流动时容易发生水化反应而粘附在色谱管线内部的现象，在长期检测植物油的过程中，尤其是长期检测磷脂含量较高的大豆、菜籽等植物毛油过程中，随着水化磷脂的积累，容易出现堵塞等现象，对色谱仪造成一定的损害。
发明内容
为了降低对色谱仪的损害，本申请提供一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法。采用如下的技术方案：
一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，用反相超高效液相色谱法，包括以下步骤：
S1标准储备液配制：分别称取α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准品，加无水乙醇溶解，定容，分别配制成浓度均为1000μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液；
S2标准中间液配制：分别量取步骤S1配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液，加入棕色容量瓶，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度均为100μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液；
S3标准工作液配制：分别从步骤S2配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液中取样，加入棕色容量瓶，用丙酮定容至刻度；分别配制成得到浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的δ-生育三烯酚系列标准工作液；
S4待测样预处理：取待测植物油样品，加入1-2％待测植物油样品重量的含磷分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品；取脱胶样品，加入丙酮溶解，混合均匀，制得待测试样溶液；
S5液相色谱检测：分别将标准工作液和待测试样溶液注入液相色谱柱进行检测，测出峰面积，计算出各维生素E异构体含量；
所述液相色谱柱为PFP柱，规格为4.6mm×100mm，2.7μm；流动相为甲醇与水组合物。
通过采用上述技术方案，本申请将植物油样品经含磷分子筛吸附后，用丙酮直接溶解植物油样，释放出维生素E后直接上液相检测。对于溶解植物油的有机溶剂的选择需满足以下两个条件：一是需要使用脂溶性溶剂，能使油脂能够完全溶解；二是应与后续的分析方法具有匹配性。可溶解油样的溶剂有正己烷、石油醚、丙酮、异丙醇等溶剂，针对反相色谱中的后续流动相，正已烷、石油醚等与流动相不兼容，从而选择直接用丙酮或异丙醇稀释后上样检测；而丙酮溶解油脂效果优于异丙醇，且丙酮毒性较小，故选择丙酮为提取溶剂。本申请用丙酮作提取溶剂，使用甲醇与水的组合物作流动相，选用PFP超高效液相色谱柱，有助于更好地分离维生素E异构体，可同时检测八种维生素E异构体，测试结果稳定，操作简单快捷，提高了检测效率。本申请用含磷分子筛对植物油进行预处理，分子筛具有一定的比表面积，而分子筛中的磷元素对磷脂具有较强的吸附性，对植物油中的油脂和维生素等其它组分无吸附作用，用含量分子筛对磷脂进行吸附，脱除待测试样溶液中的磷脂，有助于防止长期检测过程中因磷脂水化反应形成胶体吸附并积累在色谱仪管路内壁而对色谱仪造成的损坏，降低对色谱仪的损害，更好地保护色谱仪，有助于延长色谱仪使用寿命，降低色谱仪维护成本。
优选的，所述流动相为甲醇与水按97:3的体积比组成的组合物。
通过采用上述技术方案，流动相中甲醇含量较高，水含量较低，甲醇虽然是极性溶剂，但其同时具有亲水性和亲脂性，植物油脂在甲醇中具有一定的溶解性，甲醇与步骤S4中加入的丙酮共同作用，可完全溶解植物油中的油脂组分，可抵消因流动相中含有的水分对油脂组分溶解性带来的不利影响，有助于防止色谱柱因油脂与水相容性不佳而造成色谱柱堵塞等问题，有助于降低色谱柱维护成本。由于维生素E是脂溶性，因而流动相中的甲醇比例应尽量高，而甲醇比例太高的时候α-生育三烯酚和δ-生育酚这两个色谱峰也会有部分重叠，选用最佳的甲醇与水的比例，有助于防止色谱柱堵塞的同时保持较高的分离效果。
优选的，所述液相色谱检测温度为30℃，进样量为1μL；流动相流速为0.4mL/min，洗脱方式为等度洗脱。
通过采用上述技术方案，选用合适的进样量和流动相流速，有助于提高分离效果，提高检测灵敏度，由于无杂质干扰，节省了溶剂的耗费和及耗材成本；分析时间约为12min，缩短了维生素E的分析检测时间，提高了检测效率。
优选的，所述液相色谱采用荧光检测器检测。
通过采用上述技术方案，维生素E在紫外检测器和荧光检测器上均有响应，而选用荧光检测器，可提高响应灵敏度，有助于提高检测精度。
优选的，所述激发波长为295nm，发射波长为330nm。
通过采用上述技术方案，控制检测的波长条件，能同时检测出八种维生素E异构体的色谱图，结合特定的流动相组成和色谱柱，通过一次检测则能得到八种维生素E异构体的色谱图，进而计算出各维生素E异构体的含量，检测效率高，准确度高。
优选的，所述步骤S4称取1.000g的脱胶样品，用10mL丙酮溶解，涡旋混合器上充分混匀后，过0.22μm尼龙滤膜后，制得待测试样溶液。
通过采用上述技术方案，本申请采用丙酮作溶剂，同时提取处理八种维生素E异构体，使得后续色谱检测时，在特定的流动相条件下同时检测得到八种维生素E异构体的色谱图，进而计算得到各八种维生素E异构体的含量，提高了提取和检测的效率，准确度高。
优选的，所述含磷分子筛为VPI-5分子筛。
通过采用上述技术方案，VPI-5分子筛孔径较大，在磷元素的吸附作用下能吸附磷脂，不吸附油脂和维生素E，对磷脂进行选择性吸附，有助于防止色谱仪管路堵塞，减少色谱仪损坏，降低色谱仪维护成本。
优选的，所述步骤S4取VPI-5分子筛，500-600℃活化不少于60min，降至室温，制得活化VPI-5分子筛；向待测植物油样品加入活化VPI-5分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，制得脱胶样品。
通过采用上述技术方案，在使用前对VPI-5分子筛进行活化，有助于更好地吸附磷脂，有助于防止色谱仪管路堵塞，减少色谱仪损坏，降低色谱仪维护成本。
优选的，还包括VPI-5分子筛再生处理步骤：向步骤S4使用后的VPI-5分子筛中加入不少于4倍VPI-5分子筛重量的氯仿，混合均匀，过滤，烘干，制得再生VPI-5分子筛。
通过采用上述技术方案，可对使用后的VPI-5分子筛进行再生回收利用，实现固体废物回收利用，可降低运行成本。
综上所述，本申请包括以下至少一种有益技术效果：
1.本申请通过选用合适的流动相，用丙酮溶解植物油，选用合适的检测条件，可分离维生素E的八种异构体，可同时检测维生素E的八种异构体，提高检测效率；本申请通过用含磷分子筛对植物油样品进行预处理，脱除植物油中的磷脂，有助于防止色谱仪管路堵塞，减少对色谱仪的损坏，更好地保护色谱仪，降低色谱仪维护成本；
2.本申请选用VPI-5分子筛，VPI-5分子筛中的磷元素对植物油中的磷脂具有较强的吸附作用，对油脂和维生素E不具有吸附作用，选择性吸附磷脂，有助于更好地保护色谱仪，降低色谱仪维护成本；
3.本申请通过对使用后的VPI-5分子筛进行再生回收利用，可降低运行成本。
附图说明
图1是八种维生素E异构体液相色谱图。
具体实施方式
发明人在研究过程中发现，在测试植物油中八种维生素E异构体含量时，为了更好地分离各维生素E异构体的色谱峰，往往需要用有机溶剂与水的组合物作流动相，而植物油中一般含有磷脂，磷脂在流动相中的水分作用下，磷脂水化形成具有一定粘度的溶胶，容易聚集吸附在色谱仪管路内壁上，在长期使用过程中累积，尤其是长期检测磷脂含量较高的菜籽和葵花等毛油时，色谱仪容易堵塞，给色谱仪带来一定的损坏，而色谱仪价格昂贵，提高了维护成本。本申请基于上述技术背景，提出一种可保护色谱仪的技术方案，具体通过以下具体实施方式说明。
生育酚和生育三烯酚的β-和γ-异构体结构相似，疏水性质差异不大，在以C18柱为固定相，乙腈+水，甲醇+乙腈，甲醇+水的流动相中，β-和γ-生育酚和生育三烯酚异构体相互重叠，不能有效分离。PFP色谱柱表面键合五氟苯基，有很强的几何尺寸和立体形状选择性，能分离一些结构相似、用烷基固定相很难分离的位置异构体。故本申请选择PFP色谱柱作为分析柱。本申请使用PFP超高效液相色谱柱，与普通PFP色谱柱相比，配合合适的流动相比例和洗脱梯度，具有更好地分离效果。本申请中使用的VPI-5分子筛参照文献【赵永记，王敬中，等.超大孔VPI-5分子筛的合成与表征[J].南开大学学报(自然科学)，1991，(1)：74-79】公开的方法制得。可根据待测植物油中磷脂的含量调整VPI-5分子筛用量，植物油中磷脂含量较多时，可适当增加VPI-5分子筛用量，植物油中磷脂含量较少时，可适当减少VPI-5分子筛用量。VPI-5分子筛使用前于550℃焙烧60min完成活化。使用后的VPI-5分子筛中加入4倍VPI-5分子筛重量的氯仿，混合均匀，过滤，于100℃干燥120min，制得再生VPI-5分子筛，再生VPI-5分子筛可用于步骤S4脱除植物油中的磷脂。标准储备液于-20℃以下避光储存，储存期限不超过3个月，标准溶液使用前需进行标定。
本申请通过配制标准溶液，绘制标准曲线，再计算组分含量，含量计算公式为：Xr＝Cr×V/m。式中：Xr为样品中维生素E各异构体含量，单位为mg/kg；m为样品质量，单位为g；V为样品定容体积，单位为mL；Cr为测定用样液中维生素E各异构体的浓度，单位为μg/mL。
以下结合附图对本申请作详细说明。
实施例
以下实施例中α-生育酚纯度为99.6％、β-生育酚纯度为96.8％、γ-生育酚纯度为98.2％、δ-生育酚纯度为97.6％、α-生育三烯酚纯度为98.6％、β-生育三烯酚纯度为97.4％、γ-生育三烯酚纯度为97.9％、δ-生育三烯酚纯度为98.3％，均由德国Merk公司提供。超高效液相色谱仪为：WatersAcquityHClass型，配荧光检测器，美国Waters公司提供。旋窝振荡器：Talboys型，美国Talboys公司。分析天平：ME204型，瑞士梅特勒—托利多公司。使用的水为纯水仪制得的纯水，纯水仪：MILLI-Q型，美国Millipore公司。无水乙醇、丙酮、甲醇均为色谱纯，由国药集团化学试剂有限公司提供。
实施例1：同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，采用反相超高效液相色谱法，包括以下步骤：
S1标准储备液配制：分别称取50mg(精确到0.1mg)的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准品，无水乙醇溶解，转移至50mL棕色容量瓶中定容至刻度，分别配制成浓度均为1000μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液。
S2标准中间液配制：分别量取10mL步骤S1配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液，加入至100mL棕色容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度均为100μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液。
S3标准工作液配制：分别从步骤S2配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液中各取出0.04、0.08、0.16、0.40、0.80、1.60和4.00mL溶液至7个10mL棕色容量瓶，用丙酮定容至刻度；分别配制成得到浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的δ-生育三烯酚系列标准工作液。
S4待测样预处理：取500g待测菜籽毛油样品，加入5g的VPI-5分子筛，混合均匀，密封静置240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品；取1.000g脱胶样品，加入10mL丙酮溶解，涡旋混合器上充分混匀后过0.22μm尼龙滤膜，涡旋过程避免丙酮蒸发，整个过程中注意避光，制得待测试样溶液，上机待测。
S5液相色谱检测：分别将标准工作液和待测试样溶液注入液相色谱柱进行检测，荧光检测器检测，测出峰面积，计算出各维生素E异构体含量。八种维生素E异构体的色谱图如图1所示。八种维生素E异构体标准物质配置成(0.4，0.8，1.6，4.0，8.0，16.0，40.0μg/mL)进样，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制得标准曲线。液相色谱柱为PFP柱，规格为4.6mm×100mm，2.7μm；流动相为甲醇与水按97:3的体积比配制成的组合物。液相色谱检测温度为30℃，进样量为1μL；流动相以0.4mL/min流速等度洗脱。激发波长为295nm，发射波长为330nm。计算得检出限，线性方程及相关系数详见表1。
表1八种维生素E异构体的线性方程和相关系数
Figure BDA0002978357660000081
Figure BDA0002978357660000091
由表1可知：该方法各维生素E异构体在0.4-40μg/mL范围内线性关系良好，相关系数较好。
回收率和精密度：对大豆油样品，各维生素E异构体分别添加3个浓度水平(4，8，20mg/kg)，每个水平进行6次试验，得到样品中8种维生素E异构体的回收率及相对标准偏差，详见表2。
表2大豆油中8种维生素E异构体样品添加回收率和精密度
Figure BDA0002978357660000092
Figure BDA0002978357660000101
由表2可知：各个浓度水平的添加回收率均在90％以上，精密度为0.235％-0.77％。
维生素E异构体保留时间及分离度：各维生素E异构体保留时间和相互之间分离度见表3、4。
表3八种维生素E异构体出峰顺序、保留时间、基线宽度
项目 保留时间/min 基线宽度/min
δ-生育三烯酚 5.11 0.3
β-生育三烯酚 5.62 0.3
γ-生育三烯酚 6.05 0.3
α-生育三烯酚 6.43 0.3
δ-生育酚 6.77 0.3
β-生育酚 7.53 0.3
γ-生育酚 8.09 0.3
α-生育酚 8.81 0.3
表4各异构体之间分离度
Figure BDA0002978357660000111
由表3、4可知：八种维生素E异构体能够完全分离。
从市面上随机选取15种不同品种的植物油，采用与实施例1相同的检测方法检测其维生素E中的异构体构成，检测结果见表5。
表5植物油中维生素E含量(单位:mg/kg)
Figure BDA0002978357660000112
Figure BDA0002978357660000121
对实施例1使用的菜籽毛油经VPI-5分子筛吸附处理前后进行检测，检测经VPI-5分子筛吸附处理前后菜籽油中的磷脂含量和维生素E八种异构体的含量，维生素E八种异构体的含量与实施例1相同，磷脂含量检测参照GB/T5537-2008《粮油检验磷脂含量的测定》公开的钼蓝比色法，实验结果如表6。
表6 VPI-5分子筛吸附处理前后检测结果对比
Figure BDA0002978357660000122
Figure BDA0002978357660000131
备注：只检测出了α-生育酚、γ-生育酚、γ-生育酚，未检测出其它维生素E异构体。
由表6可以看出，用VPI-5分子筛吸附处理前后维生素E异构体检测结果差别不大，用VPI-5分子筛吸附处理不影响维生素E异构体的检测结果。而用VPI-5分子筛吸附处理后样品中的磷脂含量显著降低，有助于防止色谱仪管路堵塞，有助于更好地保护色谱仪，有助于降低设备维护成本。
通过对植物油样品检测前预处理的优化，用VPI-5对待测在植物油样品进行处理脱除磷脂，采用丙酮溶解样品后上样，在合适的色谱条件下，PFP色谱柱超高效液相色谱法能很好地将维生素E的八种异构体分离开，测定结果准确，测试流程简单。丙酮直接溶解提取法检测维生素E损失更少，结果更准确；相较于正相色谱分离，本方法分析时间更短，重现性更好。采用本方法检测了15种常用植物油中维生素E各异构体的含量，满足实际样品分析的需求。而VPI-5分子筛对植物油样品进行预处理，脱除植物油中的磷脂，有助于防止色谱仪管路堵塞，减少对色谱仪的损坏，更好地保护色谱仪，降低色谱仪维护成本。
本具体实施方式的实施例均为本申请的较佳实施例，并非依此限制本申请的保护范围，故：凡依本申请的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本申请的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于，采用反相超高效液相色谱法，包括以下步骤：
S1标准储备液配制：分别称取α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准品，加无水乙醇溶解，定容，分别配制成浓度均为1000μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液；
S2标准中间液配制：分别量取步骤S1配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的标准储备液，加入棕色容量瓶，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度均为100μg/mL的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液；
S3标准工作液配制：分别从步骤S2配制得到的α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、γ-生育三烯酚、δ-生育三烯酚的中间液中取样，加入棕色容量瓶，用丙酮定容至刻度；分别配制成得到浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的α-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的β-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的γ-生育三烯酚系列标准工作液，浓度为0.4、0.8、1.6、4.0、8.0、16.0和40.0μg/mL的δ-生育三烯酚系列标准工作液；
S4待测样预处理：取待测植物油样品，加入1-2%待测植物油样品重量的含磷分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品；取脱胶样品，加入丙酮溶解，混合均匀，制得待测试样溶液；
S5液相色谱检测：分别将标准工作液和待测试样溶液注入液相色谱柱进行检测，测出峰面积，计算出各维生素E异构体含量；
所述液相色谱柱为PFP柱，规格为4.6mm×100mm，2.7μm；流动相为甲醇与水组合物。
2.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述流动相为甲醇与水按97:3的体积比组成的组合物。
3.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述液相色谱检测温度为30℃，进样量为1μL；流动相流速为0.4mL/min，洗脱方式为等度洗脱。
4.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述液相色谱采用荧光检测器检测。
5.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述激发波长为295nm，发射波长为330nm。
6.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述步骤S4称取1.000g的脱胶样品，用10mL丙酮溶解，涡旋混合器上充分混匀后，过0.22μm尼龙滤膜后，制得待测试样溶液。
7.根据权利要求1所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述含磷分子筛为VPI-5分子筛。
8.根据权利要求7所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于：所述步骤S4取VPI-5分子筛，500-600℃活化不少于60min，降至室温，制得活化VPI-5分子筛；向待测植物油样品加入活化VPI-5分子筛，混合均匀，密封静置不少于240min，过滤，取滤液，制得脱胶样品。
9.根据权利要求7所述的同时测定植物油中八种维生素E异构体的方法，其特征在于，还包括VPI-5分子筛再生处理步骤：向步骤S4使用后的VPI-5分子筛中加入不少于4倍VPI-5分子筛重量的氯仿，混合均匀，过滤，烘干，制得再生VPI-5分子筛。
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