CN112840211A - Rp182组合物及方法 - Google Patents
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Abstract
提出了用于结构域特异性靶向CD206的组合物和方法，其中选定的试剂与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合。在本发明主题的某些方面，结合是特异性的，导致CD206发生构象变化，并诱导肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用和/或M2巨噬细胞死亡。
Description
本申请要求2018年8月27日提交的序列号为62/723,411的我们共同未决的美国临时专利申请的优先权，并且将其通过引用并入本文中。
序列表
名为102719.0019PCT_ST25、大小为7kb的序列表的ASCII文本文件的内容创建于2019年8月23日，通过EFS-Web与本申请一起以电子方式提交，将其内容通过引用以其整体并入。
技术领域
本发明的技术领域是靶向CD206的组合物和方法，特别涉及激活肿瘤相关巨噬细胞并减少或消除M2巨噬细胞的化合物的鉴定和用途。
背景技术
背景描述包括可用于理解本发明的信息。这不是承认本文提供的任何信息为现有技术或与当前要求保护的发明有关，也不是承认明确或隐含引用的任何出版物为现有技术。
本文中所有出版物和专利申请都通过引用并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请均被明确地和单独地指出通过引用并入一样。在并入的参考文件中术语的定义或用法与本文提供的术语的定义不一致或相反时，本文提供的该术语的定义适用而在该参考文件中该术语的定义不适用。
CD206(甘露糖受体)是一种复杂的受体，通常在巨噬细胞表面发现，并被认为识别通常在各种微生物的糖蛋白中发现的甘露糖、N-乙酰葡糖胺和岩藻糖。因此，CD206似乎在先天免疫应答中起作用。但是，调节巨噬细胞活性的选择剂仍然难以捉摸，部分是由于CD206的复杂结构。因此，仍然存在对选择性靶向CD206的组合物和方法的需求。
发明内容
本文披露了用于结构域特异性靶向CD206的各种组合物和方法，其中选定的试剂与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合。这类结合是特异性的，导致CD206发生构象变化，并诱导肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用和/或M2巨噬细胞死亡。
在本发明主题的一个方面，诸位发明人预期了筛选药学试剂的方法，其包括建模或鉴定作为CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的选择性结合剂的试剂的步骤；定量该试剂对CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的亲和力的步骤；以及在确认该试剂与CRD4和CRD5结合后，在药物配制品中使用该试剂的步骤。
在一些实施例中，预期的方法进一步包括在建模或鉴定步骤中使用CD206的分子模型的步骤，进一步包括在结合该试剂后鉴定CD206的构象变化的步骤，进一步包括该试剂与巨噬细胞在体外结合的步骤，进一步包括体外测试该试剂对吞噬活性的诱导的步骤，和/或进一步包括体外测试对M2巨噬细胞的凋亡的诱导的步骤。最典型地，该试剂是RP182、RP182衍生物或RP182类似物(例如，细菌毒力蛋白或其类似物、胶原变体或其类似物)。还预期该药物配制品是抗癌配制品。
因此，诸位发明人预期(1)使用与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合以诱导CD206的构象变化的试剂，(2)使用与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合以激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的试剂，(3)使用与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合以诱导M2巨噬细胞死亡或将M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的试剂，以及(4)使用与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合以鉴定表达CD206的细胞的试剂，其中该试剂偶联至可检测标记偶联。
从不同的角度来看，诸位发明人预期了诱导M2巨噬细胞死亡的方法，其包括使该M2巨噬细胞与有效诱导M2巨噬细胞死亡的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触的步骤。
可替代地，诸位发明人预期了将M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的方法，其包括使该M1/M2巨噬细胞群与有效地将该M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触的步骤。
此外，诸位发明人还预期了激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的方法，其包括使该肿瘤相关巨噬细胞与有效激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触的步骤。
例如，在这类方法中，该化合物是RP182类似物、细菌毒力蛋白或其类似物、或胶原变体或其类似物，和/或接触的步骤在体内进行。
根据以下对优选实施例的详细描述以及附图，本发明主题的各种目的、特征、方面和优点将变得更加明显，在附图中相同的附图标记表示相同的组件。
附图说明
图1显示了RP182与CD206结合的示例性结果(相对于对照肽RP426)。
图2显示了在指定的温度范围内特异性靶接合PBS相对于RP-182的示例性结果。
图3描绘了RP肽与微生物细胞表面蛋白的结构相似性。
图4描绘了CD206配体的设计过程的示例性说明。
图5描绘了与免疫系统激活或巨噬细胞清除有关的天然蛋白，用于与RP182和对照肽进行比较。
图6描绘了示例性结果，其表明与天然配体相比，RP182对C型凝集素结构域显示出更高的亲和力。
图7描绘了导致计算机模拟鉴定甘露糖受体CD206为RP182的特异性C型凝集素受体靶标的示例性结果。
图8描绘了示例性数据，其中RP182对CD206的亲和力高于所评估的任何天然肽。
图9描绘了CD206的许多可能的结构模型，并推导了最佳拟合模型以拟合小角度X射线数据。
图10是建立CD206的拓扑结构和关键结构域/氨基酸位置的分子模型。
图11示出了RP肽靶向的特定结构域的鉴定。
图12显示了预测的RP182对接和CD206受体的构象变化。
图13描绘了电子显微镜检查的结果，以验证RP182处理下的构象变化。
图14描绘了RP182(20μM)在CD206+/CD11b+细胞上的结合％的结果。
图15描绘了显示RP182刺激吞噬活性的结果。
图16描绘了显示RP182刺激M2样巨噬细胞和TAM的吞噬作用的结果。
图17描绘了显示RP182处理后标记的KPC细胞的吞噬作用的结果。
图18描绘了显示RP-182的抗M2巨噬细胞活性是CD206依赖性的结果。
图19示出了在自噬抑制剂存在下RP182肽引起的M2巨噬细胞的自噬和凋亡的测定。
图20是RP-182对鼠M2巨噬细胞的细胞活力的剂量反应曲线的图。
图21是显示RP182处理导致M2巨噬细胞活力降低的图。
具体实施方式
诸位发明人现已发现，天然抗微生物肽可用作鉴定与CD206选择性相互作用的试剂的起点，特别是结合候选化合物的计算机模拟分析与CD206模型结合使用时。有利地，被鉴定为CD206，尤其是CDD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的选择性结合剂的分子可以用作药学试剂，这些药学试剂刺激肿瘤相关巨噬细胞的吞噬活性，并使M1/M2巨噬细胞群朝着M2含量降低的群体极化。显而易见，这类试剂将有利地激活对肿瘤细胞的吞噬作用，同时减少免疫抑制性M2巨噬细胞。值得注意的是，诸位发明人发现结合CRD4-5的试剂中的至少一些(如果不是全部的话)将选择性地与这些结构域结合并诱导CD206的构象变化，这可能向巨噬细胞提供特异性信号。
例如，一种活性化合物(RP182)衍生自模拟微生物细胞表面蛋白的天然抗微生物肽，并通过巨噬细胞群向活化的/吞噬性M1表型的转变在激活免疫细胞方面显示出显著作用。然后，如下更详细地显示的，对另外的合成类似物进行工程化，并筛选CD206结合、构象变化的诱导以及对各种细胞群(特别是巨噬细胞)的生物效应。在他们的研究过程中，诸位发明人发现这类化合物的靶受体是CD206。在验证性实验中，RP182被证明具有远高于各种天然配体的亲和力。此外，CD206的新型3D建模的使用允许鉴定特异性靶结构域，并预测构象变化(已通过实验验证，如下更详细地显示的)。
容易理解的是，与CD206结合，尤其是与糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合的试剂在制造可免疫刺激/激活肿瘤相关巨噬细胞并减少在肿瘤微环境中具有免疫抑制功能的M2巨噬细胞的数量的药物组合物中是特别有益的。
基于较早的考虑(未显示)，诸位发明人首先证实了RP182(一种衍生自天然抗微生物肽的化合物)确实与CD206结合。为此，进行了SPR分析，其中定量了RP182与CD206的结合。从图1可以看出，RP182与CD206选择性并紧密结合，而对照肽(RP426)的结合亲和力明显较低。图2描绘了另外的验证性实验的结果，其中进行了细胞热位移测定(CETSA)以证明靶接合。在此，将阴性对照(PBS)与RP182和对照肽RP426进行比较。可以看出，Tagg值(来自重复进行的两个独立实验的平均值和SD)清楚地表明与RP182的特异性相互作用超出了对照。
为了验证各种合成肽将模拟抗微生物肽的概念，进行了结构建模，并且图3中提供了用于比较的示例性结果，其中合成肽在顶部，抗微生物肽在底部。计算机模拟进一步评估了大量肽片段的其他变体，并对选定的肽进行了活性筛选。值得注意的是，在该过程中，已经确定通过用具有其他类似特征的其他氨基酸替代丙氨酸来降低疏水性产生了预测的对多种可能靶标(最初包括NFkB、TRAIL、CD206等)的亲和力的提高。当CD206被确定为靶标，使用ClusPro模型生成了对预测亲和力的计算机模拟计算(也参见后面使用CD206的3D模型产生的图)。图4描绘了选定的肽和计算的结合能，以及这些肽的结构预测。图4所示的合成序列具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5的肽序列。图5列出了与RP182相似的、天然来源的另外的示例性肽。图5所示的序列具有根据SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ IDNO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28的肽序列。因此，应当理解，所有这些肽序列及其类似物均被认为适合用于本文。例如，最适合免疫调节肽结构/功能范例结构域的宿主防御蛋白发现于URL：aps.unmc.edu/AP/main.php utilizingMolly font。提供对该数据库的调查，列出了431种肽中的129种，占29.93％，其结构域与活性所需的结构决定簇一致。对RP182进行优化，使其具有最大两亲性、疏水性和正电荷密度，如Molly字体所示。RP426是测试疏水性对于活性的重要性的对照。Molly字体描述于：“Structure/Function Link Between Cytokine Domains and Natural and DesignedLytic Peptides:Medical Promise[细胞因子结构域与天然和设计的裂解肽之间的结构/功能联系：医学前景](2012).”Jesse M.Jaynes和Gregory C.Bernard，在Small Wonders:Peptides for Disease Control[小奇迹：用于疾病控制的肽],21-45，American ChemicalSociety[美国化学学会]，通过引用并入本文。然后以类似的方式从URL：www.ncbi.nlm.nih.gov的蛋白质数据库中找到的蛋白质中选择毒力和胶原蛋白部分中的肽。
已经描述了17个不同的人类C型凝集素组，参见“C-type lectins in immunityand homeostasis.[在免疫和体内平衡中的C型凝集素]”Brown,GD等人Nat Rev Immunol.[自然免疫学评论]2018年6月；18(6):374-389。所有已知成员的完整列表可以在URL：www.imperial.ac.uk/research/animallectins/ctld/mammals/humanvmousedata.html的动物凝集素数据库中找到。从该资源中，列举了88种不同的C型凝集素人类蛋白。在这88种蛋白质中，选出28种用于计算机模拟研究，因为它们具有可用的晶体结构以及3种不同的toll样受体。利用ClusPro，研究了晶体结构与所示生物类似物的单个10聚体序列的结合。根据与每个类别中的10聚体序列最相似的序列选择生物类似物。图6左侧的表显示了结果，首先按照组排序，其次按照归一化聚类结合能(NCBE)的平均值排序。显示了每种受体/配体组合的三个最低的结合能(以kcal/mol为单位)。第一部分比较了所有肽与该公开中描述的28种选定的人类C型凝集素的计算机模拟结合。另外的列显示了以下结果，首先按照具有列出的-BE的组排序，其次按照归一化聚类结合能(NCBE)的平均值排序。
然后使用ClusPro，研究了28种人类C型凝集素和TLR的晶体结构与RP182的结合。图7左侧的两个表显示了以下结果，首先按照组排序，其次按照归一化聚类结合能(NCBE)的平均值排序。最差结合蛋白/配体对的前十对显示在右侧图中。
接下来，为了证实与其他生物类似物相比，RP182与MRC1/CD206结合的选择性，诸位发明人使用SAXS衍生的全长CD206结构，重复了上述生物类似物和RP182的对接研究。最后一部分数据来自使用晶体结构PDB 5XTS进行的计算机模拟测量，该晶体结构描述于“Structural Insights into the pH-Dependent Conformational Change and CollagenRecognition of the Human Mannose Receptor[对人类甘露糖受体的pH依赖性构象变化和胶原识别的结构洞察].”Hu Z等人Structure[结构].2018年1月2日；26(1):60-71。结果如图8所示。可以看出，RP182对全长CD206的结合亲和力也高于根据其与免疫激活或巨噬细胞清除的相关性而选择的任何天然肽。
在进一步的工作中，开发了CD206的各种结构模型，并推导出了最佳拟合模型以拟合小角度X射线数据。参见图9。然后将该模型如下用于后续的肽设计工作，并将其示于图10中。在此，人巨噬细胞甘露糖受体1蛋白(也称为MMR-1或CD206)是单通路I型膜信号传导蛋白。关键的拓扑特征是大的胞外区(1371aa)，然后是螺旋跨膜(TM)结构域和相对较小的胞质区(46aa)。人CD206的蛋白质序列(1,456aa)从UniProt(UniProt ID P22897-1 NCBI ID：NP_002429.1)获得，并包含两个N-末端结构域(蓖麻毒蛋白-B型凝集素和II型纤连蛋白)、然后是八个C型凝集素结构域(编号1至8)、以及一个TM结构域和一个胞质结构域。人CD206的3D结构信息仅适用于非常小的区段(644-787aa；C型凝集素4结构域)。在这项工作中，诸位发明人使用迭代线程和组装改进软件(the Iterative Threading and ASSEmblyRefinement software)I-TASSER(Web服务器版本；URL：zhanglab.ccmb.med.umich.edu/I-TASSER/用于模型构建)倡导的最可靠(基于CASP实验)方法中的一种构建了CD206的完整3D模型。I-TASSER使用分层方法，该方法使用多线程方法从RCSB-PDB(www.rcsb.org)鉴定3D模板。最后，通过迭代模板片段组装模拟构建了全长模型。为了进一步帮助建模，诸位发明人提供了使用序列相似性作为距离限制输入而鉴定的距离限制二硫键信息。I-TASSER鉴定的顶部线程模板为5ao5、3jav、5ao6和4igl。这些模型的归一化B因子值(表明模型的局部精度)在零附近波动。在I-TASSER中，模型置信度由C分数测量。C分数在-5与2之间，值越高表示置信度越高。前4个模型具有以下C分数：-0.35、-1.93、-2.89和-2.97。
分析了前4个模型，并且基于小角度X射线散射模型(SAXS；参见A)和I-TASSER置信度和C分数的比较的排名最高的I-TASSER模型被确定为CD206的可能结构折叠。中间分图详细展示了I-TASSSER一级模型。纤连蛋白II型结构域似乎被蓖麻毒蛋白的c-末端区域和C型凝集素-1结构域部分包埋和包围。其他C型凝集素结构域似乎是紧密堆积的。螺旋跨膜结构域后面是胞质结构域的两个短螺旋区域。右分图是在Pymol中生成的表面模型。
然后将如此获得的模型用于鉴定RP肽靶向的特异性CD206结构域，如图11示例性所示。值得注意的是，从图12中可以看出，该模型预测了RP182对接和CD206受体的构象变化。为了证实构象变化确实不是伪像，诸位发明人在存在和不存在RP182的情况下使用了CD206的电子显微镜检查，典型结果如图13所示。
另外的体外实验表明，配体与糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的结合具有各种期望的效果，包括(a)与CD206的牢固且选择性结合(SPR、微尺度热泳、细胞热位移测定)，(b)与CD206+细胞的牢固且选择性结合，(c)对CD206分子构象变化的诱导，(d)对吞噬活性的刺激，以及(e)M2巨噬细胞的减少，如下所述。
更具体地，图14描绘了示例性化合物(RP182)与CD206+CD11b+细胞结合的FACS结果，而图15描绘了选择性刺激M2极化的巨噬细胞的吞噬作用、自噬和凋亡的结果。从图中可以看出，在用RP-182处理2小时后，RP-182诱导了早期和晚期吞噬作用，而没有影响CD206水平。对极化成M1和M2并被抗Rab5等染色的BMDM进行免疫荧光法，RP182(而不是对照肽RP-426和MART-1)在M2极化巨噬细胞中诱导吞噬作用。此外，RP182诱导凋亡(通过半胱天冬酶裂解测量；左图)和自噬(通过抗LC-3测量；右图)，选择性杀死小鼠和人M2极化巨噬细胞，但不使M2复极化成M1巨噬细胞。用RP-182处理M2巨噬细胞后，作为M1功能的量度的产量都有增加。
图16描绘了示出RP182刺激M2样巨噬细胞和TAM的吞噬作用的示例性结果。在图17中，在RP182处理后，显著显示了标记的KPC细胞的吞噬作用，并且图18中的结果表明，RP-182的抗M2巨噬细胞活性是CD206依赖性的。值得注意的是，即使自噬被阻断，RP182处理的凋亡活性仍然很强，这表明该活性是不依赖于内化的信号传导事件，如从图19的结果可以看出。最后，图20显示了RP-182对鼠M2巨噬细胞的细胞活力的剂量反应曲线，并且图21表明RP182处理导致M2巨噬细胞活力降低。
在一些实施例中，用于描述和要求保护本发明某些实施例的表示成分、特性(如浓度)、反应条件等的量的数字应被理解为在一些情况下由术语“约”来修饰。因此，在一些实施例中，书面说明书和所附权利要求中列出的数值参数是近似值，其可以根据特定实施例试图获得的所需特性而变化。在一些实施例中，数值参数应按照报告的有效数字的数量以及通过应用普通的舍入技术来解释。虽然阐述本发明一些实施例的广泛范围的数值范围和参数是近似值，但是在具体实例中阐述的数值被尽可实行地精确地报告。在本发明的一些实施例中呈现的数值可以含有必然由其各自测试测量中所发现的标准偏差引起的某些误差。除非上下文指示相反，否则本文所列出的所有范围应被解释为包括其端点，并且开放式范围应被解释为包括商业实用值。类似地，除非上下文指出相反的情况，否则应将所有值的列表视为包含中间值。
如本文的说明书和随后的整个权利要求中所使用，“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”以及“该(the)”的含义包括复数参照物，除非上下文清楚地另外指明。而且，如本文的说明书中所使用，“在……中(in)”的含义包括“在……中(in)”和“在……上(on)”，除非上下文另有明确说明。而且，并且除非上下文另有指示，否则术语“偶联至”旨在包括直接偶联(其中两个彼此偶联的元件彼此接触)和间接偶联(其中至少一个另外的元件位于两个元件之间)。因此，术语“偶联至”和“与……偶联”同义使用。
此外，如本文所使用，短语“A和B中的至少一个”旨在指‘A’和/或‘B’，而与‘A’和‘B’的性质无关。例如，在一些实施例中，‘A’可以是单一不同物种，而在其他实施例中，‘A’可以表示称为‘A’的属内的单一物种。同样地，在一些实施例中，‘B’可以是单一不同物种，而在其他实施例中，‘B’可以表示称为‘B’的属内的单一物种。
对于本领域技术人员应当清楚的是，在不脱离本文的发明构思的情况下，除了已经描述的那些之外，更多修改是可能的。因此，本发明主题仅受限于所附权利要求的范围。此外，在解释说明书和权利要求时，所有术语应当以与上下文一致的尽可能广泛的方式解释。特别地，术语“包含/包括”(“comprises”和“comprising”)应当被解释为以非排他性方式提及要素、组分或步骤，从而指示所提及的要素、组分或步骤可以与未明确提及的其他要素、组分或步骤一起存在、或使用、或组合。在说明书权利要求书提及选自由A、B、C……和N组成的组的某物的至少一种的情况下，该文字应当被解释为只需要该组中的一个要素，而不是A加N、或B加N等。
Claims (20)
1.一种筛选药学试剂的方法，该方法包括：
建模或鉴定作为CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的选择性结合剂的试剂；
定量该试剂对CD206的该糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的亲和力；以及
在确认该试剂与该CRD4和CRD5结合后，在药物配制品中使用该试剂。
2.根据权利要求1所述的方法，该方法进一步包括在建模或鉴定步骤中使用CD206的分子模型的步骤。
3.根据权利要求1所述的方法，该方法进一步包括在结合该试剂后鉴定CD206的构象变化的步骤。
4.根据权利要求1所述的方法，该方法进一步包括将该试剂与巨噬细胞体外结合的步骤。
5.根据权利要求1所述的方法，该方法进一步包括体外测试该试剂对吞噬活性的诱导的步骤。
6.根据权利要求1所述的方法，该方法进一步包括体外测试对M2巨噬细胞的凋亡的诱导的步骤。
7.根据权利要求1所述的方法，其中该试剂是RP182衍生物。
8.根据权利要求1所述的方法，其中该试剂是RP182类似物、细菌毒力蛋白或其类似物、或胶原变体或其类似物。
9.根据权利要求1所述的方法，其中该药物配制品是抗癌配制品。
10.与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合的试剂用于诱导CD206的构象变化的用途。
11.与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合的试剂用于激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的用途。
12.与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合的试剂用于诱导M2巨噬细胞死亡或将M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的用途。
13.与CD206的糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)结合的试剂用于鉴定表达CD206的细胞的用途，其中该试剂偶联至可检测标记。
14.一种诱导M2巨噬细胞死亡的方法，该方法包括：
使该M2巨噬细胞与有效诱导M2巨噬细胞死亡的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触。
15.根据权利要求14所述的方法，其中该化合物是RP182类似物、细菌毒力蛋白或其类似物、或胶原变体或其类似物。
16.一种将M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的方法，该方法包括：
使该M1/M2巨噬细胞群与有效地将该M1/M2巨噬细胞群转变为M2巨噬细胞含量耗竭的群体的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触。
17.根据权利要求16所述的方法，其中该化合物是RP182类似物、细菌毒力蛋白或其类似物、或胶原变体或其类似物。
18.一种激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的方法，该方法包括：
使这些肿瘤相关巨噬细胞与有效激活肿瘤相关巨噬细胞的吞噬作用的量的、靶向糖识别域4(CRD4)和糖识别域5(CRD5)的化合物接触。
19.根据权利要求18所述的方法，其中该化合物是RP182类似物、细菌毒力蛋白或其类似物、或胶原变体或其类似物。
20.根据权利要求14-19中任一项所述的方法，其中该接触步骤在体内进行。
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| CUZZOLIN ALBERTO等: "DockBench:An Integrated Informatic Platform Bridging the Gap between the Robust Validation of Docking Protocols and Virtual Screening Simulations", MOLECULES, vol. 20, no. 6, pages 9977 - 9993, XP055852620, DOI: 10.3390/molecules20069977 * |
| HADAR FEINBERG等: "Structure of a C-type Carbohydrate Recognition Domain from the Macrophage Mannose Receptor", JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 275, no. 28, pages 21539 - 21548, XP055748251, DOI: 10.1074/jbc.M002366200 * |
| MULLIN, N. P.等: "Characterization of ligand binding to a carbohydrate-recognition domain of the macrophage mannose receptor", JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 269, no. 45, pages 28405 - 28413, XP055390066 * |
| NICHOLAS P.MULLIN 等: "Characterization of Ligand Binding to a Carbohydrate-recognition Domain of the Macrophage Mannose Receptor", 《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》, vol. 269, no. 45, 11 November 1994 (1994-11-11), pages 28405 - 28423 * |
| 侯丽娜: "巨噬细胞表面的主要模式识别受体研究进展", 国外医学.免疫学分册, no. 04, 5 July 2005 (2005-07-05), pages 249 - 252 * |
| 王青山;倪虹;魏晓丽;李玉皓;向荣;王悦;: "IL-6对M1型巨噬细胞向肿瘤相关M2型巨噬细胞转化过程的诱导作用", 解放军医学杂志, no. 08, 1 August 2009 (2009-08-01), pages 927 - 931 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3844500A1 (en) | 2021-07-07 |
| US20210293789A1 (en) | 2021-09-23 |
| EP3844500A4 (en) | 2022-05-11 |
| WO2020046835A1 (en) | 2020-03-05 |
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