CN112773897B - 一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 - Google Patents
一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112773897B CN112773897B CN202110161748.XA CN202110161748A CN112773897B CN 112773897 B CN112773897 B CN 112773897B CN 202110161748 A CN202110161748 A CN 202110161748A CN 112773897 B CN112773897 B CN 112773897B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydrogel
- nir
- tumor
- nano
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims abstract description 112
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 title description 4
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 title description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 84
- 239000002135 nanosheet Substances 0.000 claims abstract description 63
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 claims abstract description 6
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims description 35
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 20
- 239000002064 nanoplatelet Substances 0.000 claims description 13
- 230000001023 pro-angiogenic effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 9
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 238000001027 hydrothermal synthesis Methods 0.000 claims description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 5
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 claims description 5
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 4
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 4
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 claims description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 2
- 238000011946 reduction process Methods 0.000 claims description 2
- PBYZMCDFOULPGH-UHFFFAOYSA-N tungstate Chemical compound [O-][W]([O-])(=O)=O PBYZMCDFOULPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 claims 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 claims 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 claims 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 abstract description 27
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 26
- 239000002114 nanocomposite Substances 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 abstract description 13
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 abstract description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 11
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 abstract description 6
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 3
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 abstract 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 25
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 10
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 6
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 3
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 3
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 3
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 102100032742 Histone-lysine N-methyltransferase SETD2 Human genes 0.000 description 3
- 101000654725 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase SETD2 Proteins 0.000 description 3
- 101000614347 Homo sapiens Prolyl 4-hydroxylase subunit alpha-2 Proteins 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 3
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 3
- 102100040478 Prolyl 4-hydroxylase subunit alpha-2 Human genes 0.000 description 3
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004630 atomic force microscopy Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 3
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000001931 thermography Methods 0.000 description 3
- QWMFKVNJIYNWII-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(2,5-dimethylpyrrol-1-yl)pyridine Chemical compound CC1=CC=C(C)N1C1=CC=C(Br)C=N1 QWMFKVNJIYNWII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000011122 anti-angiogenic therapy Methods 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000002055 nanoplate Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229910052573 porcelain Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 description 1
- 102100030351 Membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710104263 Membrane-associated phosphatidylinositol transfer protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- FSUOQVGBXADQGH-UHFFFAOYSA-M [9-cyano-6-(diethylamino)xanthen-3-ylidene]-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-6-oxohexyl]-ethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=C2OC3=CC(N(CC)CC)=CC=C3C(C#N)=C2C=CC1=[N+](CC)CCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FSUOQVGBXADQGH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- -1 bevacizumab Substances 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 230000008867 communication pathway Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 description 1
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000013532 laser treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001795 light effect Effects 0.000 description 1
- 230000004298 light response Effects 0.000 description 1
- 239000003509 long acting drug Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 description 1
- 230000008816 organ damage Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 238000001420 photoelectron spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011076 safety test Methods 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 230000007847 structural defect Effects 0.000 description 1
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003685 thermal hair damage Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001392 ultraviolet--visible--near infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0052—Thermotherapy; Hyperthermia; Magnetic induction; Induction heating therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/15—Oximes (>C=N—O—); Hydrazines (>N—N<); Hydrazones (>N—N=) ; Imines (C—N=C)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B21/00—Nitrogen; Compounds thereof
- C01B21/20—Nitrogen oxides; Oxyacids of nitrogen; Salts thereof
- C01B21/24—Nitric oxide (NO)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01G—COMPOUNDS CONTAINING METALS NOT COVERED BY SUBCLASSES C01D OR C01F
- C01G41/00—Compounds of tungsten
- C01G41/02—Oxides; Hydroxides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2002/00—Crystal-structural characteristics
- C01P2002/70—Crystal-structural characteristics defined by measured X-ray, neutron or electron diffraction data
- C01P2002/72—Crystal-structural characteristics defined by measured X-ray, neutron or electron diffraction data by d-values or two theta-values, e.g. as X-ray diagram
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2002/00—Crystal-structural characteristics
- C01P2002/80—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70
- C01P2002/82—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70 by IR- or Raman-data
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2002/00—Crystal-structural characteristics
- C01P2002/80—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70
- C01P2002/84—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70 by UV- or VIS- data
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2002/00—Crystal-structural characteristics
- C01P2002/80—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70
- C01P2002/85—Crystal-structural characteristics defined by measured data other than those specified in group C01P2002/70 by XPS, EDX or EDAX data
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2004/00—Particle morphology
- C01P2004/01—Particle morphology depicted by an image
- C01P2004/04—Particle morphology depicted by an image obtained by TEM, STEM, STM or AFM
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01P—INDEXING SCHEME RELATING TO STRUCTURAL AND PHYSICAL ASPECTS OF SOLID INORGANIC COMPOUNDS
- C01P2004/00—Particle morphology
- C01P2004/60—Particles characterised by their size
- C01P2004/62—Submicrometer sized, i.e. from 0.1-1 micrometer
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明属于抗癌纳米复合物水凝胶技术领域,具体为一种在WO2.9纳米片改造下的水凝胶(WB@hydrogel)。此外,本发明还涉及该纳米复合物水凝胶的制备及其在抗癌纳米复合物水凝胶中的应用。本发明研究发现,该种纳米材料具有近红外二区(NIR‑II)光响应活性和重编程促血管生成的肿瘤微环境的能力,能够意外地应用于抗癌领域,即在NIR‑II激光作用下,在肿瘤组织部位产生一氧化氮(NO),并逆转肿瘤微环境中促血管生成因子和抗血管生成因子的相对表达量,从而解决传统肿瘤血管抑制药物抗癌能力不足,易复发等诸多缺陷。
Description
技术领域
本发明属于抗癌纳米复合物水凝胶开发技术领域,涉及一种NIR-II光响应的琼脂糖水凝胶,特别涉及一种逆转促血管生成的肿瘤微环境的抗癌纳米复合物水凝胶。
背景技术
癌症,又称恶性肿瘤,具有细胞转移性强、增殖异常,生长不可控制等特点。由于发病初期难以被发现,晚期难以得到有效控制而导致的高致死率,已经使癌症成为威胁人类生命健康的疾病之一。尽管免疫疗法,放射疗法和化学疗法在抗击癌症方面已经取得了重大进展,但是在癌症治疗方面仍然存在巨大挑战。治疗失败的原因之一是由于肿瘤微环境下血管会发生异常扩张,这有利于M2型免疫抑制的巨噬细胞表达和酸性微环境的产生,从而导致肿瘤的恶性进展和对放射疗法与化学疗法的抵抗。基于贝伐珠单抗,索拉非尼,雷珠单抗等血管生成抑制药物的抗血管生成疗法对遏制新血管的形成无疑具有巨大的潜力,可以预防血管扩张,肿瘤复发和转移。然而,初步的临床结果表明,抗血管生成治疗的效果远未达到预期目标。最近的研究表明,正常的组织器官中抗血管生成因子和促血管生成因子是平衡的,而肿瘤微环境的促血管生成因子的表达量远大于抑血管生成因子,故导致肿瘤部位血管异常增殖。通常来说,临床使用的血管生成抑制药物原理是靶向其中一个或多个促血管生成因子,并抑制下游促血管生成信号的继续表达。但其忽略了肿瘤部位抗血管生成因子是持续低表达的。这可能导致替代性的促血管生成信号通路的重新激活和抗血管生成信号通路的钝化。因此,在临床上将促血管生成的肿瘤微环境转变为抗血管生成的肿瘤微环境将更加合理地用于肿瘤抗血管生成疗法并可减少对传统血管生成抑制药物的耐药性和癌症复发等问题。最近,在生物医学领域中,几种具有肿瘤微环境调节能力的气体信使引起了极大的关注。例如,NO被证明可以调节血管状态,血流量和神经传递或防御病原体和抗肿瘤。更新的报导表明NO参与了血管生成的通讯途径,具有根除肿瘤血管的巨大治疗潜力,使用气态信使调节肿瘤微环境的血管生成倾向和调节血管状态是抗血管生成治疗的重要方向。
可注射的光敏水凝胶具有多孔结构,长期保留和精确靶向的内在优势,因此是一种有吸引力的气体输送系统。通过照射时间和光强度可以简单而精确地对气体释放进行时空控制。因此,将光敏水凝胶用于抗血管生成治疗是提高抗肿瘤效率或重塑肿瘤促血管生成微环境的有前途的策略。不幸的是,受光穿透深度和健康组织中非局部热损伤的限制,大多数NIR-1(650–950nm)感光水凝胶药物系统的治疗效果均不理想,从而限制了其进一步应用。NIR-II(1000–1700nm)激光敏感水凝胶被认为是下一代临床水凝胶。据报道,对NIR-II敏感的水凝胶具有较低的光子散射,组织吸收以及更深的光子穿透,从而获得更高的光穿透效率和更好的空间分辨率。因此,开发更具临床应用价值的NIR-II敏感水凝胶非常重要。
发明内容
针对现有的抗血管生成疗法可能产生耐药性和NIR-II响应水凝胶匮乏等问题,本发明第一目的在于,提供一种NIR-II响应水凝胶,旨在提供一种可注射的、可以长期保留和精确靶向并可控释放NO气体,具有血管抑制能力与高生物安全性的抗癌纳米复合物水凝胶(以下称为WB@hydrogel)。
本发明的第二目的在于,提供所述的NIR-II响应水凝胶的制备方法。
本发明的第三目的在于,提供所述的NIR-II响应水凝胶在重编程促血管生成的肿瘤微环境上的应用。
一种NIR-II响应水凝胶,为包覆有WO2.9纳米片和NO前驱体的水凝胶。
本发明尝试提供一种包覆有NO前驱体的抗癌水凝胶材料,但研究早期发现,不管是进行光或热处理,均难于使水凝胶中的NO前驱体稳定有效释放出NO气体信号,难于发挥其抗癌效果。针对该技术难点,本发明人经过深入研究,意外地发现,具有缺陷构造的WO2.9纳米片具有特殊的NIR-II响应激发特性,将其和NO前驱体联合包覆在水凝胶中,能够意外地在NIR-II波段下促进NO前驱体的NO气体信号的有效释放,有效扭转肿瘤区域的促血管生成的肿瘤微环境,有效抑制肿瘤区域的血管增殖;此外,成分以及所述的水凝胶包覆结构还存在协同作用,能够基于NIR-II光热以及抑制血管增殖的双重协同机制,显著改善肿瘤消融效果,不仅如此,还具有较低的生物组织毒性。此外,通过水凝胶的包覆,游离的WO2.9纳米片和NO前驱体不容易快速被组织代谢,并可以在体外对病灶部位进行远程控制治疗,减少了对癌症病人反复注射药物所带来的痛苦。
本发明研究发现,所述的WO2.9纳米片的缺陷结构以及片状形貌的控制是实现其和NO前驱体和水凝胶协同,改善NO前驱体的NO释放,并基于所述的双重协同机制改善抗癌活性,降低正常组织毒性的关键。
作为优选,所述的WO2.9纳米片处于纳米二维尺度,其二维平面呈现近似长方形的形貌,平面直径为150~300nm,进一步优选为200nm。
优选地,所述的WO2.9纳米片厚度为2~4nm,进一步优选为3nm。
本发明中,所述的WO2.9纳米片的制备过程为:将包含硝酸和钨酸盐的溶液进行水热反应,制得WO3纳米片;随后经氢化还原处理,即得。
作为优选,所述的水热温度为160~200℃。水热反应时间为1~5h。
本发明中,所述的还原剂为硼氢化钠。
作为优选,所述的氢化还原过程的温度为450~550℃。
作为优选,氢化还原的时间为4~8h。
本发明优选的制备方法,将HNO3溶液和二水合钨酸钠混合,随后将混合液进行水热反应,并在180~200℃加热1~5h;得到WO3纳米片。将WO3纳米片和硼氢化钠在500℃~550下真空下加热6~8h进行氢化还原,即得WO2.9纳米片。
本发明中,所述的NO前驱体为能释放出NO的物质。
作为优选,所述的NO前驱体为BNN6、S-硝基-硫醇、普力诺中的至少一种;优选为BNN6。
本发明中,所述的水凝胶中的成胶物质为琼脂糖、结冷、壳聚糖、琼脂中的至少一种。
本发明中,所述的NIR-II响应水凝胶中,所述的WO2.9纳米片的含量为200μg mL-1~300μg mL-1。NO前驱体的含量为250μg mL-1~350μg mL-1。成胶物质的含量为0.8%~1.2%。
本发明优选的NIR-II响应水凝胶,为分散有WO2.9纳米片和BNN6的琼脂糖水凝胶。
本发明所述的材料,是具有NIR-II窗口响应的水凝胶。本发明研究发现,通过对无NIR-II光响应的WO3纳米片进行缺陷构造,意外地发现获得的WO2.9纳米片具有强烈的NIR-II光热响应。通过与琼脂糖和BNN6共包裹,获得的琼脂糖水凝胶同样具有NIR-II光热响应性能。研究发现,本发明所述的材料能够意外地通过WO2.9在NIR-II的光热效果触发热响应的NO前驱体BNN6产生NO并从琼脂糖水凝胶的多孔结构中扩散至肿瘤微环境中并对其进行重编程,解决传统的血管抑制药物与对肿瘤血管抑制容易产生耐药性和易复发等问题。
本发明中,还提供了所述的NIR-II响应水凝胶的制备方法,将WO2.9纳米片分散在水溶液中,随后加入成胶物质,溶解后再加入NO前驱体,即得到所述的NIR-II响应水凝胶。
本发明还提供了所述的NIR-II响应水凝胶在用于制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明所述的应用,将所述的NIR-II响应水凝胶用于制备在重编程促血管生成的肿瘤微环境的抗肿瘤药物。
本发明中,所述NIR-II响应的水凝胶产生的NO,是使其具有重编程肿瘤微环境并逆转促血管生成因子和抗血管生成因子的相对表达量,从而形成抗血管生成的肿瘤微环境并产生抗癌效果的关键。
进一步优选的应用,将所述的NIR-II响应水凝胶用于制备基于NIR-II光响应的抑制肿瘤区域血管增殖的抗肿瘤药物。
本发明中,所述的NIR-II的光响应的波长为1000–1700nm。
有益效果
(1)本发明首次发现所述的WO2.9纳米片具有特殊的NIR-II光响应特性,可以在1000–1700nm实现光热效应,并具有优异的效果。
(2)本发明创新地发现,将所述的WO2.9纳米片和NO前驱体联合包覆在水凝胶中,能够有效解决NO前驱体在水凝胶中难于释放的问题,可以在NIR-II光响应下实现NO前驱体的NO气体信号的有效释放;能够逆转肿瘤血管生长微环境,另外,所述的WO2.9纳米片和NO前驱体以及所述的水凝胶包覆结构的联合协同,能够基于NIR-II光效应和抑制血管生长的双重协同机制,有效改善肿瘤的消融效果;
(3)本发明所述的复合凝胶,基于成分的相互作用,能够有效改善其物相特性,例如,改善其流变性、触变性、可逆性,改善其抗癌稳定性以及长效性。
附图说明
图1为WO2.9纳米片的mapping图(比例尺=50nm)
图2为WO3纳米片氢气还原为WO2.9纳米片前后颜色变化。
图3为WO2.9纳米片和WO3纳米片的X射线衍射(XRD)图。
图4为XPS图,其中,A为WO3纳米片的W4fX射线光电子能谱(XPS)图;B为WO3纳米片的O1s XPS图。C为WO2.9纳米片的W4fXPS图;D为WO2.9纳米片的O1s XPS图。
图5为AFM图,其中,A为WO2.9纳米片的原子力显微镜(AFM)图;B为蓝线部分的厚度曲线图。
图6为WO2.9纳米片和WO3纳米片的紫外-可见光-近红外分光光谱图。
图7为合成以及NMR图;其中,A为BNN6的合成路线示意图。B为BNN6的分解和NO的产生示意图。C为反应物BPA和产物BNN6的核磁共振氢谱:1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.75--7.10(4H),5.05-4.67(2H),1.83-1.51(4H),1.41(t,J=6.8Hz,2H),1.19(t,J=6.7Hz,4H,1.00(q,J=7.1Hz,2H),0.78(dd,J=12.8,7.2Hz,4H)。
图8为琼脂糖水凝胶,BNN6,WO2.9纳米片和WB@hydrogel的傅里叶红外(FTIR)光谱。
图9为实施例1水凝胶性能测定图;其中,A为WB@hydrogel 25℃下的剪切速率依赖性粘度。B为在37℃下的应变依赖性模量。C为通过在37℃下交替进行0.1%和100%的应变扫描进行模量的恢复测试。D为25℃至70℃的温度相关模量。
图10为实施例2水凝胶光热以及NO释放图;其中,A为实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶依赖于WO2.9纳米片浓度的光热性能曲线;B为其光热稳定性曲线。
图11为实施例1不同光强度NO释放图;其中,A为实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶依赖于1064nm激光下的NO释放曲线;B为其可控释放NO的释放曲线。
图12为实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶胞内一氧化氮释放效果图;
图13A为实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶体内光热效果图;B为其体内一氧化氮释放效果图;C为其体内长效药物保留性质测试图。
图14为通过实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶第8天时qPCR测定的促血管生成因子(VEGF和bFGF)和抗血管生成因子(TSP-1和P4HA2)的mRNA和空白对照的mRNA表达量的相对比率图。
图15为通过实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶第8天时肿瘤切片CD31免疫荧光染色图和HIF-1α免疫荧光染色图。
图16为通过实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶肿瘤生长能力测试的小鼠肿瘤曲线图。
图17为通过实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶在治疗后第14天时小鼠肿瘤质量评估图。
图18为通过实施例1的步骤制得的WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶生物安全性测试的小鼠主要器官——心、肝、脾、肺、肾的苏木精/伊红染色图。
具体实施方式
以下将结合附图,对本发明的优选实施例进行详细的描述:应当理解,优选实施例仅为了说明本发明,而不是为了限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后,基于本发明的原理对本发明所做出的各种改动或修改同样落入本发明权利要求书所限定。
第一部分:WB@hydrogel的制备
实施例1
步骤(1):将5mL 65%硝酸缓慢滴加到25mL去离子水中搅拌10分钟形成溶液A。同时,将0.5g二水合钨酸钠加入10mL去离子水中,形成透明溶液B。然后将溶液B注入溶液A,逐渐出现沉淀,颜色从白色变为黄色。继续搅拌30分钟后,将混合溶液转移至高压反应釜中,并在180℃加热3小时。冷却至室温后,离心收集黄色产物,分别用去离子水和乙醇洗涤3次,并在60℃的真空中干燥12小时形成WO3纳米片。将200mg WO3纳米片和93.75mg硼氢化钠放入矩形瓷舟中,然后将一个装有WO3纳米片的容器放在另一个带有硼氢化钠的容器的顶部,并旋转15°。将瓷舟放在管式炉中,在500℃真空下加热6h进行氢化还原获得WO2.9纳米片。
步骤(2):将250μL的1mg mL-1WO2.9纳米片水溶液和0.01g低熔点琼脂糖混合,并将混合物在65℃搅拌直至琼脂糖完全溶解形成溶液A。将10mg BNN6溶解到5ml二甲基亚砜中,然后添加去离子水至10ml的恒定体积形成溶液B。将300μL溶液B与溶液A快速混合后,将最终溶液放入冰浴中以快速冷却以形成WB@hydrogel。
图1~图9为通过实施例1的步骤制得的NIR-II光响应的水凝胶的各项基础表征图。
由图1可见,通过氢化作用该二维WO2.9纳米片呈现近似长方形的形貌,平面直径约为200nm,元素W和元素O均一地分布在纳米片的表面;
由图2可见,WO3纳米片还原成WO2.9纳米片会获得明显的颜色转变,从淡黄色转变为深蓝色;
由图3可见,该二维WO2.9纳米片和WO3纳米片的各角度X射线衍射峰均与WO2.9和WO3的X射线衍射的标准卡片(JCPDS no.05-0386和JCPDS no.71-2141)中各角度X射线衍射峰匹配,这证实了还原前物质为WO3纳米片,还原后产物为WO2.9纳米片。
由图4可见,元素组成通过XPS进一步表征。图4A中原始WO3的W4f光谱由37.56eV的W4f7/2和35.46eV的W4f5/2组成,表明样品中的W仅以+6价存在。图4C中WO2.9纳米片的W4f光谱的特征结合能峰出现了37.11eV和34.41eV,表明氢化后存在W5+。此外,相比于图4B中WO3纳米片,WO2.9纳米片在531.61eV出现了多余的峰,这是WO2.9中的O峰,这证实了缺陷的成功构造。
由图5可见,WO2.9纳米片的厚度约为3nm。
由图6可见,应用紫外-可见光-近红外光分光度计对WO3和WO2.9的光吸收进行表征。证实了构造缺陷前,WO3纳米片在NIR-II几乎无吸收。缺陷构造成功后,所得的WO2.9纳米片在NIR-II具有非常强的光吸收。这是WO2.9纳米片具有NIR-II光响应的关键。
由图7可见,核磁共振氢谱证实BNN6被成功制备。
由图8可见,傅立叶变换红外(FTIR)光谱法证实WB@hydrogel的成功制备。1014和1405cm-1的不同峰由BNN6的C–N和–N–N=O贡献。910cm–1处的吸收峰表示W=O的不对称振动。WB@hydrogel包含了BNN6和WO2.9的全波段,说明WO2.9和BNN6被成功包覆在琼脂糖水凝胶中。
由图9A、图9B、图9C和图9D分别为:(A)25℃下的剪切速率依赖性粘度。(B)在37℃下的应变依赖性模量。(C)37℃下交替进行0.1%和100%的应变扫描进行模量的恢复测试。(D)25℃至70℃的温度相关模量。通过流变仪测量WB@hydrogel的流变学特性。首先,由如图9A可见,通过剪切速率依赖性粘度研究了WB@hydrogel在25℃下的可注射性。当剪切速率从0.01增至10s-1时,WB@水凝胶的粘度从~3000Pa s降低至~10Pa s,当剪切速率从10降至0.01s-1时,WB@水凝胶的粘度大致恢复至原始状态。证明了WB@hydrogel具有良好的可注射性。图9B研究了WB@hydrogel的触变性,记录了从0.01%到100%的连续应变下G′和G”的变化。从0.01%提高到5.65%,G’高于G”。当应变超过5.65%时,G'变得低于G“,表明WB@水凝胶完全解聚,这说明WB@hydrogel具有良好的触变性。此外,图9C的应变扫描表明,WB@hydrogel的G'在0.1%和100%5个循环之间的变化迅速恢复。对应于触变性,高应变(100%)下的G′从1200Pa急剧降低到21Pa,这意味着完全破坏的WB@水凝胶介导了凝胶到溶胶的转变。当应变下降到0.1%时,G’和G”立即恢复到原始状态,表明WB@hydrogel具有出色的可逆性。由图9D温度扫描显示,G’和G”在25℃至60℃的范围内保持稳定,即使温度升高到70℃,G’和G”也没有交集。由于WB@hydrogel的良好可逆性,温度降低后,G’和G”均迅速恢复,说明WB@hydrogel的在高温度下的稳定性,可以保证WO2.9纳米片稳定的光热输出和NO的稳定释放;
第二部分:WB@hydrogel的体外光热响应特性和一氧化氮释放测试
按实施例1的方法,区别只是控制步骤(2)过程的WO2.9纳米片的浓度,分别为0、50、100、150、200和250μgmL-1;分别制得不同的复合水凝胶材料。
将实施例1所制得的NIR-II光响应的水凝胶作为抗癌水凝胶以供注射用。
体外光热性能测试:使用1064nm激光以1.5W cm-2将照射WB@hydrogel,其中WO2.9浓度分别为0、50、100、150、200和250μgmL-1。BNN6和琼脂糖的含量分别为300μg mL-1和1%。用红外热成像仪记录不同WO2.9浓度,相同光照强度下WB@hydrogel的光热性能。
体外光稳定性测试:固定WO2.9浓度为250μg mL-1,BNN6和琼脂糖的含量分别为300μg mL-1和1%。使用1064nm激光以1.5W cm-2将WB@hydrogel从26℃照射至60℃,然后使其从60℃自然降温冷却至26℃。每30秒记录一次温度,持续5个循环。
一氧化氮释放能力测试:将0.5mLWB@hydrogel(250μg mL–1WO2.9、300μg mL–1BNN6、1%琼脂糖)模制在样品瓶中,并在凝胶顶部添加额外的1mL水。用1064nm激光以密度1.5Wcm-2照射WB@hydrogel以引发NO向上清液的释放。在5分钟内每分钟抽取50μL上清液,以10000rpm离心,并通过NO检测试剂盒进行检测(添加Griss试剂后,在振荡器中孵育15分钟,并在酶标仪中测量吸光度)。并根据结果计算NO浓度。
一氧化氮可控释放测试:将0.5mLWB@hydrogel(250μg mL–1WO2.9、300μg mL–1BNN6、1%琼脂糖)模制在样品瓶中,并在凝胶顶部添加额外的1mL水。用1064nm激光以密度1.5Wcm-2每三分钟开关交替共18分钟照射WB@hydrogel以引发NO向上清液的释放。在每三分钟抽取50μL上清液,以10000rpm离心,并通过NO检测试剂盒进行检测(添加Griss试剂后,在振荡器中孵育15分钟,并在酶标仪中测量吸光度)。并根据结果计算NO浓度。
一氧化氮胞内释放测试:将4T1细胞以每孔10000个细胞的密度接种在96孔板中24小时。加入RBSP探针(20μM)的DMSO溶液并孵育2小时。随后,用PBS,BNN6(300μg mL–1)+50℃处理5分钟,BNN6(300μg mL–1)+1064nm激光处理5分钟,WB@水凝胶(250μgmL–1WO2.9)处理不同的孔。300μg mL–1BNN6、1%琼脂糖)+1064nm激光分别处理5分钟。再孵育1小时后,将细胞用PBS洗涤并在倒置荧光显微镜下成像。
由图10A可见,实施例1所制得的WB@hydrogel在1064nm激光辐照下表现出WO2.9质量依赖的温度升高行为。WB@hydrogel的温度在5分钟的辐射中升高了42.4℃以上,而BNN6@水凝胶仅升高了2.2℃。这证实了实施例1所制得的WB@hydrogel在1064nm激光辐照下具有良好的光热性能;
由图10B可见,实施例1所制得的WB@hydrogel在1064nm激光辐照下,5次交替打开和关闭1064nm激光后,WB@水凝胶的温度升高趋势保持稳定这证实了实施例1所制得的WB@hydrogel具有极高的光稳定性;
由图11A可见,实施例1所制得的WB@hydrogel在1064nm激光辐照下释放NO的能力主要取决于激光的功率。在2W cm–2的功率下,在1064nm激光照射5分钟后,大约产生20μMNO,而没有激光照射则几乎没有NO释放。
由图11B可见,实施例1所制得的WB@hydrogel通过重复照明3次。其中照明3分钟,然后在黑暗中放置3分钟,三个开-关循环内的温度。WB@hydrogel的温度随辐照的开启而迅速升高,而当辐照关闭时则缓慢降低。同时,辐照下的NO释放速率比未辐照下的NO释放速率高得多,这证明WB@水凝胶可以通过1064nm激光可用作遥控器控制NO释放。这证实了实施例1所制得的WB@hydrogel具有良好可再现性和稳定性。
由图12可见,仅通过加热或通过NIR-II激光照射处理的BNN6(也即是纯BNN6,其中,WO2.9纳米片含量为0),观察到微弱的荧光信号。当用NIR-II激光照射实施例1所制得的WB@hydrogel 5分钟时,检测到强烈的红色荧光,这证实NO不能通过简单的光(图12标记为BNN6+NIR)或热处理(图12标记为BNN6+50℃)从BNN6释放出来,而只能从用NIR-II照射的WB@hydrogel中释放出来。上述证据表明,可以通过WB@hydrogel上的照射时间和光强度来简单地对NO在肿瘤细胞内的释放进行精确的时空控制。
第三部分:WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶体内响应能力测试
在中南大学湘雅医学院实验动物中心的批准下,按照道德与伦理学规范进行了动物实验。
以小鼠乳腺癌细胞荷瘤Balb/c小鼠(雄性,4周龄)作为动物模型,当肿瘤大小达到125mm3以上时开始实验。
将实施例1所制得的NIR-II光响应的水凝胶作为抗癌水凝胶以供注射用。
体内光热效果测试:对小鼠注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,在第一天、第二天、和第三天分别用1064nm近红外光对瘤内部位照射5分钟后,期间每一分钟用红外热成像仪对肿瘤部位进行拍摄;
瘤内一氧化氮释放水平测试:对小鼠注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,用1064nm近红外光对瘤内部位照射5分钟后,人道地处死小鼠并收集肿瘤组织。通过细胞和组织裂解缓冲液裂解组织,用NO定量检测试剂盒计算出NO在肿瘤中的浓度。
药物保留能力测试:对小鼠注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,在第一天、第二天、和第三天分别用1064nm近红外光对瘤内部位照射5分钟后,期间每一分钟用红外热成像仪对肿瘤部位温度进行记录;
将在各测试条件下进行的测试标记为WB@hydrogel+NIR组。
参比测试——对比例2
与上述各测试条件相比,体内光热效果测试区别仅在于使用纯琼脂糖水凝胶代替NIR-II光响应的水凝胶,将之标记为hydrogel组。瘤内一氧化氮释放水平测试区别在于(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为control组;(2)使用纯琼脂糖水凝胶代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为hydrogel+NIR-II组;(3)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并不施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel组;(4)使用WB@hydrogel但不施加光照,将之标记为WB@hydrogel组;(5)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel+NIR组;(6)为实施例1WB@hydroge+NIR-II。药物保留能力测试区别仅在于不使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片和BNN6,采用直接注射的方式,将之标记为WB组。
图13A为小鼠肿瘤部位的热成像图,肿瘤部位亮度反应肿瘤部位的温度情况。其中实验组为所述的测试条件,而hydrogel组区别仅在于使用纯琼脂糖水凝胶代替NIR-II光响应的水凝胶;
图13B为小鼠肿瘤部位一氧化氮的释放情况,其中实验组为所述的测试条件,而对照组组(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为Control组;(2)使用纯琼脂糖水凝胶代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为hydrogel+NIR-II组;(3)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并不施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel组;(4)使用WB@hydrogel但不施加光照,将之标记为WB@hydrogel组;(5)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel+NIR组。(6)为实施例1WB@hydroge+NIR-II
图13C小鼠肿瘤部位的药物保留能力情况,其中WB@hydrogel组为所述的测试条件,而WB组测试区别仅在于不使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片和BNN6,采用注射材料游离态的方式。
由图13A可见WB@hydrogel组注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠肿瘤部位在5分钟内温度明显升高,而注射纯hydrogel并施加NIR-II光照时,小鼠肿瘤部位5分钟内温度仅有轻微升高。这证实WB@hydrogel在体内能表现出敏感的NIR-II光响应特性。
由图13B可见,实施例1所制得的WB@hydrogel施加NIR-II光照后能够在肿瘤内产生大量一氧化氮。而其余对照组的小鼠肿瘤只有极少量一氧化氮被检测到。这证实了实施例1所制得的WB@hydrogel能够在体内响应NIR-II光照并产生大量一氧化氮,进而调控肿瘤微环境。
由图13C可见,在注射实施例1所制得的WB@hydrogel后三天施加NIR-II光照后,温度基本维持稳定,而不包裹琼脂糖水凝胶的WB温度明显降低,说明代谢使得WO2.9纳米片和BNN6被排出肿瘤部位,而水凝胶固定后不容易排出肿瘤部位,能够有效提高药物保留度,降低了反复给药给病人带来的痛苦。
第四部分:WB@hydrogel作为抗癌纳米复合物水凝胶抗血管生成能力和抑制肿瘤生长能力测试
在中南大学湘雅医学院实验动物中心的批准下,按照道德与伦理学规范进行了动物实验。
以小鼠乳腺癌细胞荷瘤Balb/c小鼠(雄性,4周龄)作为动物模型,当肿瘤大小达到125mm3以上时开始实验。
将实施例1所制得的WB@hydrogel作为抗癌水凝胶以供注射用。
抗血管生成能力测试:自开始实验后持续共计8天。在第1天时由小鼠肿瘤内注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,且在第1天至第8天每隔两天进行一次5分钟1064nm激光照射。并在第1天至第14天每两天记录一次小鼠肿瘤体积与小鼠体重;在第8天时处死小鼠并切除肿瘤,进行mRNA测试和CD31免疫荧光染色以及HIF-1α免疫荧光染色。
抑制肿瘤生长能力测试:自开始实验后持续共计14天。在第1天时由小鼠肿瘤内注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,且在第1天至第8天每隔两天进行一次5分钟1064nm激光照射。并在第1天至第14天每两天记录一次小鼠肿瘤体积与小鼠体重;在第14天时处死小鼠并切除肿瘤,称量肿瘤质量并对肿瘤情况进行评估。
生物安全性测试:自开始实验后持续共计14天。在第1天时由小鼠肿瘤内注射150μL实施例1所制得的WB@hydrogel,且在第1天至第8天每隔两天进行一次5分钟1064nm激光照射,并在第14天时处死小鼠,切除小鼠主要器官(心、肝、脾、肺、肾)进行苏木精/伊红染色,对生物安全性进行评估。
将在各测试条件下进行的测试标记为WB@hydrogel+NIR组。
参比测试——对比例3
与上述各测试条件相比,区别仅在于(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为Control组;(2)使用纯琼脂糖水凝胶代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为hydrogel+NIR-II组;(3)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并不施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel组;(4)使用WB@hydrogel但不施加光照,将之标记为WB@hydrogel组;(5)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel+NIR组;(6)为实施例1WB@hydroge+NIR-II。
图14为WB@hydrogel+NIR组相比于Control组四种血管生长相关因子的倍数。其中VEGF、bFGF为促血管生成因子;TSP-1、P4HA2为抗血管生成因子;其中WB@hydrogel+NIR为所述的测试条件,而Control组区别仅在于使用生理盐水代替WB@hydrogel+NIR;
图15为小鼠肿瘤的CD31免疫荧光染色图,能直接反映8天内肿瘤处血管的表达量;HIF-1α免疫荧光染色图,能间接反映8天内肿瘤血管的缺氧程度;
图16为小鼠肿瘤曲线,记录了14天内小鼠肿瘤体积变化过程。其中(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为Control组;(2)使用纯琼脂糖水凝胶代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为hydrogel+NIR-II组;(3)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并不施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel组;(4)使用WB@hydrogel但不施加光照,将之标记为WB@hydrogel组;(5)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel+NIR组。(6)为WB@hydrogel+NIR-II;
图17为第14天时小鼠肿瘤评估图,代表了14天内消融肿瘤的最终程度。(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为Control组;(2)使用纯琼脂糖水凝胶代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为hydrogel+NIR-II组;(3)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并不施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel组;(4)使用WB@hydrogel但不施加光照,将之标记为WB@hydrogel组;(5)使用琼脂糖水凝胶包裹WO2.9纳米片代替WB@hydrogel并施加NIR-II光照,将之标记为WO2.9@hydrogel+NIR组。(6)为WB@hydrogel+NIR-II;
图18为小鼠主要器官——心、肝、脾、肺、肾的苏木精/伊红染色图,能直接反映小鼠各主要器官的受损程度。(1)使用生理盐水代替WB@hydrogel组,将之标记为Blank组;(2)WB@hydrogel+NIR-II组,将之标记为Experimental组。
由图14可见,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠的促血管生成因子(例如VEGF和bFGF)mRNA的表达量相比于未注射WB@hydrogel并未施加NIR-II光照时少于1倍,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠的抗血管生成因子(例如TSP-1和P4HA2)mRNA的表达量相比于未注射WB@hydrogel并未施加NIR-II光照时大于1倍。这说明实施例1所制得的WB@hydrogel在NIR-II光照下明显逆转了肿瘤微环境中促血管生成因子和抗血管生成因子的相对表达量。
由图15可见,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II区光照的小鼠的血管生长明显受到抑制,肿瘤部位并因此表现出明显缺氧;而注射WO2.9@hydrogel并施加NIR-II光照时,肿瘤血管生长未受到明显抑制,肿瘤部位的未表现出明显缺氧,说明光热效果不会对血管造成抑制效果;
由图16可见,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠肿瘤生长明显受到抑制,而注射WO2.9@hydrogel并施加NIR-II光照时,肿瘤生长抑制效果明显低于血管抑制后的效果,说明血管抑制对光热治疗具有明显协同效果;
由图17可见,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠肿瘤质量最终明显小于注射WO2.9@hydrogel并施加NIR-II光照时小鼠肿瘤质量。这证实了实施例1所制得的WB@hydrogel在NIR-II光照下具有明显的抑制肿瘤生长的能力,在一定程度上可以消融肿瘤,且作用效果明显强于单独的光热作用效果;
由图18可见,注射了上述实施例1所制得的WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠肿瘤主要器官与未注射WB@hydrogel并未施加NIR-II光照的小鼠肿瘤主要器官的苏木精/伊红染色图近似。这证实了注射了上述实施例1所制得WB@hydrogel并施加NIR-II光照的小鼠主要器官并未受到破坏,说明WB@hydrogel用于制备抗癌纳米复合物水凝胶并进行瘤内注射和治疗并不会引起主要器官损伤,具有较好的生物安全性。
通过以上实施例,申请人以举例的方式证明了NIR-II光响应的水凝胶的制备及其在用于重编程促血管生成的肿瘤微环境上的应用。以上所述仅为本发明的较佳实施例,本发明的保护范围不限于上述的实施案例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化和修饰,皆应属本发明的涵盖范围,本申请所要求的保护范围如本申请权利要求书所示。
Claims (11)
1.一种NIR-II响应水凝胶,其特征在于,为包覆有WO2.9纳米片和NO前驱体的水凝胶;
所述的WO2.9纳米片的制备过程为:将包含硝酸和钨酸盐的溶液进行水热反应,制得WO3纳米片;随后经氢化还原处理,即得;
所述的水热温度为160~200℃;水热反应时间为1~5h;
所述的氢化还原过程的温度为450~550℃;氢化还原的时间为4~8h。
2.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述的WO2.9纳米片二维平面呈现长方形的形貌,平面直径为150~300nm。
3.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述的WO2.9纳米片厚度为2~4nm。
4.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述氢化还原 的还原剂为硼氢化钠。
5.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述的NO前驱体为BNN6、S-硝基-硫醇、普力诺中的至少一种。
6.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述的水凝胶中的成胶物质为琼脂糖、结冷、壳聚糖、琼脂中的至少一种。
7.如权利要求1所述的NIR-II响应水凝胶,其特征在于,所述的NIR-II响应水凝胶中,所述的WO2.9纳米片的含量为200μg mL-1~300μg mL-1;NO前驱体的含量为250μg mL-1~350μg mL-1;成胶物质的含量为0.8%~1.2%。
8.一种权利要求1~7任一项所述的NIR-II响应水凝胶在用于制备抗肿瘤药物中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,将其用于制备在重编程促血管生成的肿瘤微环境的抗肿瘤药物。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于,将所述的NIR-II响应水凝胶用于制备基于NIR-II光响应的抑制肿瘤区域血管增殖的抗肿瘤药物。
11.如权利要求10所述的应用,其特征在于,所述的NIR-II的光响应的波长为1000–1700nm。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110161748.XA CN112773897B (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110161748.XA CN112773897B (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112773897A CN112773897A (zh) | 2021-05-11 |
CN112773897B true CN112773897B (zh) | 2021-11-09 |
Family
ID=75761044
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110161748.XA Expired - Fee Related CN112773897B (zh) | 2021-02-05 | 2021-02-05 | 一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112773897B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114129727B (zh) * | 2021-12-06 | 2022-09-27 | 大连理工大学 | 一种硼纳米片复合材料及其制备方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2983410B1 (fr) * | 2011-12-06 | 2016-09-23 | Centre Nat De La Rech Scient - Cnrs | Application medicale ou therapeutique d'un materiau composite de ruthenium a ligand nitrosyle. |
CN102921006B (zh) * | 2012-11-13 | 2015-05-13 | 东华大学 | 钨氧化物基纳米材料在制备近红外光热诊疗药物中的应用 |
CN106853248B (zh) * | 2015-12-09 | 2020-05-05 | 首都师范大学 | 一种光热复合纳米材料及其制备方法与应用 |
CN107961375B (zh) * | 2017-10-24 | 2020-12-08 | 中国科学院高能物理研究所 | 一种金属硫化物纳米材料及其制备方法和应用 |
CN109276537B (zh) * | 2018-09-12 | 2020-11-10 | 中南大学 | 一种共负载血管阻断剂与近红外光热响应纳米粒子的复合水凝胶及其制备和应用 |
CN111481737A (zh) * | 2020-05-07 | 2020-08-04 | 华东理工大学 | 近红外光控释放一氧化氮的磁性温敏性水凝胶及其制备和应用 |
-
2021
- 2021-02-05 CN CN202110161748.XA patent/CN112773897B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112773897A (zh) | 2021-05-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Guo et al. | CsxWO3 nanorods coated with polyelectrolyte multilayers as a multifunctional nanomaterial for bimodal imaging‐guided photothermal/photodynamic cancer treatment | |
Sun et al. | Shape tunable gallium nanorods mediated tumor enhanced ablation through near-infrared photothermal therapy | |
Lei et al. | Ultrafast synthesis of ultrasmall poly (Vinylpyrrolidone)‐protected Bismuth Nanodots as a multifunctional theranostic agent for in vivo dual‐modal CT/Photothermal‐imaging‐guided photothermal therapy | |
Hou et al. | Responsive agarose hydrogel incorporated with natural humic acid and MnO 2 nanoparticles for effective relief of tumor hypoxia and enhanced photo-induced tumor therapy | |
Zhang et al. | MnO2 motor: a prospective cancer-starving therapy promoter | |
Yu et al. | Oxygen self-sufficient NIR-activatable liposomes for tumor hypoxia regulation and photodynamic therapy | |
Ren et al. | Light-activated oxygen self-supplied starving therapy in near-infrared (NIR) window and adjuvant hyperthermia-induced tumor ablation with an augmented sensitivity | |
Liu et al. | Combined photothermal and photodynamic therapy delivered by PEGylated MoS 2 nanosheets | |
Zhang et al. | Near-infrared-triggered in situ hybrid hydrogel system for synergistic cancer therapy | |
KR101234334B1 (ko) | 활성 입자, 그 제조 방법 및 사용 방법 | |
Tang et al. | Thermochromism-induced temperature self-regulation and alternating photothermal nanohelix clusters for synergistic tumor chemo/photothermal therapy | |
Li et al. | Engineering of tungsten carbide nanoparticles for imaging-guided single 1,064 nm laser-activated dual-type photodynamic and photothermal therapy of cancer | |
Sun et al. | MnO 2 nanoflowers as a multifunctional nano-platform for enhanced photothermal/photodynamic therapy and MR imaging | |
Hao et al. | A robust hybrid nanozyme@ hydrogel platform as a biomimetic cascade bioreactor for combination antitumor therapy | |
JP6839196B2 (ja) | 金ナノ粒子および環境に優しい製造方法 | |
Liu et al. | Responsive functionalized MoSe2 nanosystem for highly efficient synergistic therapy of breast cancer | |
Zeng et al. | A one-pot synthesis of multifunctional Bi 2 S 3 nanoparticles and the construction of core–shell Bi 2 S 3@ Ce6–CeO 2 nanocomposites for NIR-triggered phototherapy | |
Zhang et al. | An injectable hydrogel co-loading with cyanobacteria and upconversion nanoparticles for enhanced photodynamic tumor therapy | |
Chen et al. | A tumor-targeted theranostic nanomedicine with strong absorption in the NIR-II biowindow for image-guided multi-gradient therapy | |
Lin et al. | Preparation of NIR-sensitive, photothermal and photodynamic multi-functional Mxene nanosheets for laryngeal cancer therapy by regulating mitochondrial apoptosis | |
He et al. | Near-infrared light-controllable bufalin delivery from a black phosphorus-hybrid supramolecular hydrogel for synergistic photothermal-chemo tumor therapy | |
CN112773897B (zh) | 一种nir-ii光响应的水凝胶及其制备方法与用于制备抗癌药物中的应用 | |
Yao et al. | Injectable and Temperature-Sensitive Titanium Carbide-Loaded Hydrogel System for Photothermal Therapy of Breast Cancer | |
Tang et al. | pH-Responsive Au@ Pd bimetallic core–shell nanorods for enhanced synergistic targeted photothermal-augmented nanocatalytic therapy in the second near-infrared window | |
Qi et al. | Injectable and self‐healing polysaccharide hydrogel loading molybdenum disulfide nanoflakes for synergistic photothermal‐photodynamic therapy of breast cancer |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20211109 |