CN112543757A

CN112543757A - 对结核菌具有抗菌活性的缩合氮杂杂芳基化合物

Info

Publication number: CN112543757A
Application number: CN201980049637.0A
Authority: CN
Inventors: 兰吉特·德赛; 弗拉杰什·潘德亚; 梅于尔·普哈拉; 阿尼尔·阿加德; 吉格尼什·乔希; 安舒尔·萨蒂亚南德
Original assignee: Cadila Healthcare Ltd
Current assignee: Zydus Lifesciences Ltd
Priority date: 2018-06-15
Filing date: 2019-06-14
Publication date: 2021-03-23
Also published as: US20210292333A1; WO2019239382A1; KR20210021042A

Abstract

本发明涉及可用于治疗细菌感染的新的通式(I)化合物、其对映体、其非对映体、其可药用盐、或其前药。通式(I)化合物表现出DprE1酶抑制活性。

Description

对结核菌具有抗菌活性的缩合氮杂杂芳基化合物

技术领域

本发明涉及对结核菌(tuberculosis bacteria)具有优异抗菌活性的新的通式(I)化合物，包括其互变异构形式、其立体异构体、其可药用盐、包含它们的药物组合物、其制备方法、这些化合物在医药中的用途、及其制备中涉及的中间体。通式(I)化合物具有DprE1酶抑制活性。

背景技术

结核(tuberculosis，TB)是世界上由感染性疾病导致的人死亡的主要原因之一。据认为，约33％的世界群体感染了导致TB病的病原体结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，Mtb)(WHO“Global Tuberculosis Report 2016”，世界卫生组织(WorldHealth Organization)，2017)。目前治疗具有治愈药物敏感性TB的潜力，然而，抗药性或多重抗药性TB(multi drug-resistant TB，MDR-TB)的治疗具有挑战性，并且需要组合化学治疗两年(WHO“Multidrug-Resistant Tuberculosis(MDR-TB)2016 Update”，世界卫生组织，2016)。对MDR-TB和广泛抗性TB(XDR-TB)的目前治疗的抗性凸显了对具有新作用机制的新药物的需求。

作为解决Mtb感染的新治疗策略，酶DprE(癸异戊二烯基磷酰基-β-D-核糖2’-差向异构酶)受到了显著关注。该酶由由dprE1和dprE2基因编码的两种蛋白质构成。DprE1酶是含FAD的氧化还原酶，而DprE2是NADH依赖性还原酶，二者均充当癸异戊二烯基磷酰基-β-D-呋喃阿拉伯糖(decaprenylphosphoryl-β-D-arabinofuranose，DPA)生物合成中的关键酶。DPA是分枝杆菌细胞壁阿拉伯聚糖的前体(Wolucka B.A.et al.FEBS J.275，2691-2711(2008))。因此，抑制DprE1酶提供了抑制细菌细胞壁生物合成的方法，以及提供了新机制来鉴定治疗TB的新药物。此外，DprE1酶仅在细菌中表达，而在人中不表达，这使其成为更安全的抗菌靶标。

DprE1靶标通过BTZ-043确定来验证，BTZ-043为DprE1酶的一种共价抑制剂(Trefzer，C.et al.J.Am.Chem.Soc.132，13663-13665，(2010))，其已在TB小鼠模型中证明体内效力(Makarov et al.Science，324，801-804，(2009))。下一代苯并噻嗪酮衍生物PBTZ-169已显示出比BTZ-043改善的抗菌活性(Makarov et al.EMBO Mol.Med.6，372-383，(2014))。WO2015009525描述了用于治疗分枝杆菌感染或结核的氮杂吲哚衍生物。WO2016031255描述了杂环化合物及其用于治疗结核的用途。WO2017146246描述了对结核分枝杆菌具有抗菌活性的哌啶衍生物。WO2018055048描述了用于治疗哺乳动物感染的新系列的苯并噻嗪酮化合物。

根据WHO报道(2018)，2017年有558000人发生了对利福平(rifampicin)(最有效的一线药物)具有抗性的TB，并且这些中有82％患有多重抗药性TB(MDR-TB)。10％的MDR患者转变为XDR-TB(广泛抗药性TB)。这凸显了可解决MDR-TB问题的具有新作用机制(例如DprE1)的新抗TB药物的重要性。

TB治疗结局的临床前评价主要发生在小鼠模型中(The Journal of infectiousdiseases 211(Suppl 3)，S83-95，2015)。因此，期望研究的化合物在小鼠中显示出良好的经口生物利用度和高血液暴露。除所期望的生物活性之外，本发明的化合物还在小鼠中显示出优异的经口生物利用度和血液暴露(表3)。

发明内容

本发明公开了对结核菌具有优异抗菌活性的新的通式(I)化合物。本发明的化合物通过调节DprE1酶而可用于治疗人体或动物体。因此，本发明的化合物适合于治疗结核或分枝杆菌感染。

具体实施方式

本发明的主要目的是提供适合于治疗结核或分枝杆菌感染的新的通式(I)化合物、其互变异构形式、参与其合成的新中间体、其可药用盐、其可药用溶剂合物以及包含它们的药物组合物或其混合物。

在一个实施方案中，提供了用于制备以下的方法：新的通式(I)化合物、其互变异构形式、参与其合成的新中间体、其可药用盐、可药用溶剂合物和包含它们的药物组合物。

在另一个实施方案中，提供了包含通式(I)化合物、其互变异构形式、其可药用盐、溶剂合物及其混合物的药物组合物，所述药物组合物具有可药用的载体、溶剂、稀释剂、赋形剂和在其制造中通常使用的其他介质。

在另一个实施方案中，提供了本发明的新化合物用于治疗哺乳动物感染(例如结核)的用途，其通过向哺乳动物施用治疗有效且无毒量的式(I)化合物或其可药用组合物。

在另一个实施方案中，提供了包含式(I)化合物和用于治疗哺乳动物感染(例如结核)的第二合适治疗剂的药物组合物。

发明详述

因此，本发明涉及通式(I)化合物，

其中，

“A”表示如下给出的任选取代的6元环体系：

“X”和“Y”独立地表示CH或N；前提是X和Y二者不能同时为CH；

R₁独立地选自包含以下的组：氢、卤素、卤代烷基氰基、-OR₄、-S(O)_pR₄、-NR₄R₅、-COOR₄、任选取代的(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基和杂环基衍生物；

前提是，当R₁为H时，则“A”表示除苯基和吡啶之外的环状环；

R₂独立地选自包含以下的组：卤素、-OR₆和-S(O)_pR₆；

R₃在每次出现时独立地选自包含以下的组：氢、卤素、氰基、卤代烷基、-NR₄R₅、S(O)_pR₄、-OR₄和任选取代的(C₁-C₆)烷基；

R₄和R₅各自在每次出现时独立地选自氢、任选取代的(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、环烷基烷基(cycloalkanyl alkyl)、杂环基、卤代烷基；或者，R₄和R₅与它们所连接的N原子一起可形成5至8元环状环，所述环状环可包含另外的杂原子O、-S(O)_p和-NR₆；

R₆选自H或(C₁-C₆)烷基；

在一个实施方案中，如本文中前面所使用的(C₁-C₆)烷基链可进一步被以下取代：氢、羟基、氰基、卤素、卤代烷基、氧代、(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、杂环基、烷基磺酰基氧基、-COOR₄、-OR₄、-S(O)_pR₄、-NR₄R₅、-CONR₄R₅、-N(R₄)COR₅、-SO₂NR₄R₅、-N(R₄)SO₂R₅衍生物；其中R₄和R₅如前所限定；

p表示0至2的整数；m表示1至5的整数；

另一些优选实施方案是下文公开的那些。

优选的“A”可选自以下基团；

优选的R₁基团选自-CH₃、-OCH₃和卤素；

优选的R₂基团是羟基；

优选的R₃基团选自-CH₃、-OR₄、-SCH₃、-N(CH₃)₂和卤素，其中R₄如前所限定；

在另一个实施方案中，上述基团可选自以下：

-单独或与其他基团组合使用的“烷基”表示包含1至6个碳原子的线性或支链基团，选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基、正戊基、正己基等；

-单独或与其他基团组合使用的“环烷基”或“脂环族”基团选自包含3至6个碳的环状基团，更优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基等；

-“卤代烷基”选自适当地被一个或更多个卤素取代的如上限定的烷基；例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、经单卤素或多卤素取代的甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基；

-单独或与其他基团组合使用的“杂环基”或“杂环”基团选自包含一个或更多个选自氮、硫和氧的杂原子的合适的饱和、部分饱和或不饱和的芳香族或非芳香族的单、双或三环基团，更优选地选自氮丙啶基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌啶基、4-氧代哌啶基、2-氧代哌嗪基、3-氧代哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、2-氧代吗啉基、氮杂

基(azepinyl)、二氮杂

基(diazepinyl)、氧杂

基(oxapinyl)、硫氮杂

基(thiazepinyl)、

唑烷基、噻唑烷基、二氢噻吩、二氢吡喃、二氢呋喃、二氢噻唑、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基(benzopyranonyl)、苯并二氢呋喃基、苯并二氢噻吩基、吡唑并嘧啶酮基(pyrazolopyrimidonyl)、氮杂喹唑啉酮基(azaquinazolinoyl)、噻吩并嘧啶酮基(thienopyrimidonyl)、喹唑酮基(quinazolonyl)、嘧啶酮基(pyrimidonyl)、苯并

嗪基(benzoxazinyl)、苯并

嗪酮基(benzoxazinonyl)、苯并噻嗪基、苯并噻嗪酮基、噻吩并哌啶基等；在一个实施方案中，杂环基团在适当的情况下可由适当数目的碳原子组成，并且包含1至4个选自N、O和S(O)_p的杂原子，p＝0至2；

-单独或与其他基团组合使用的“芳基”或“芳香族”基团选自合适的芳香族体系，例如苯基等；

-单独或与其他基团组合使用的“杂芳基”或“杂芳香族”基团选自包含一个或更多个选自N的杂原子的芳香族杂环基团，更优选地，所述基团选自吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、吡嗪基等；

-单独或与其他基团组合使用的“环烷基烷基”选自包含与如上限定的烷基直接连接的如上限定的环烷基的基团；

-单独或组合使用的“烷基磺酰基氧基”是指与氧原子直接连接的烷基磺酰基，其中合适的如上限定的烷基与磺酰基连接；

-单独(-C＝O-)或与其他基团(例如上述烷基)组合使用的“氧代”或“羰基”，例如“烷基羰基”表示被上述烷基取代的羰基(-C＝O-)，例如酰基或烷酰基；

合适的基团和基团上取代基可选自说明书中任何地方描述的那些。

根据本发明的优选化合物包括但不限于：

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-甲氧基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-吗啉代嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-(氧杂环丁烷-3-基氧基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(乙硫基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(二氟甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-氟环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2，6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((3，5-二甲基吡嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

6-氯-N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-(2，4-二甲基苄基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺；

5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-(乙硫基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

5-((6-(乙硫基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-(二氟甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-(二氟甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-氟环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-氟环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2，6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2，6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((3，5-二甲基吡嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((3，5-二甲基吡嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

3-(二甲基氨基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

3-氰基-N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

3-乙氧基-N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-异丙氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-(二氟甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((6-(二氟甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2，6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2，6-二甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((3，5-二甲基吡嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((3，5-二甲基吡嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-氟环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-氟环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

1-((5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺.

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-(甲硫基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

3-环丙基-N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-(氧杂环丁烷-3-基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

3-(环丙基甲氧基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-(2-甲氧基乙氧基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-N-((1-(甲硫基)环丙基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-4-甲基哒嗪-3-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

5-((4-(二甲基氨基)-6-甲基-1，3，5-三嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺；

本发明的新化合物可使用如以下方案中所示和本节中描述的反应和技术来制备。反应在适合于所使用的试剂和物料的溶剂中进行并且适合于影响转化。本领域技术人员理解，出于对形成本发明化合物进行优化的目的，可改变所提出的合成步骤的性质和顺序。也将很好地理解，可通过本领域技术人员已知的技术将一种或更多种反应物保护和脱保护以易于合成。还将理解，一种或更多种的本发明化合物可以以立体异构和/或非对映形式存在。这样的立体异构体和/或非对映体以及它们的旋光对映体应解释为在本发明的范围内。还将充分理解，这些化合物中的一种或更多种基于化合物上存在的特定基团可转化为其盐和其他衍生物，本领域技术人员可很好地理解它们。视情况而定，这样的盐和/或其他衍生物也应被解释为在本发明的范围内。

方案1：通式(I)化合物的合成

其中R’是烷基，例如甲基、乙基等。

L＝合适的离去基团，例如Cl、Br、I、甲磺酰基等。

通式(II)化合物可如文献(Faming Zhuanli Shenqing，102911174，(2013)、WO201481732、WO2017120429和WO2018049271)中所述使用技术人员公知的适当修改来制备。化合物(IV)可通过在溶剂(例如THF、DMF、甲醇等)中在存在碱(例如碳酸钠、碳酸钾、氢化钠等)的情况下使式(II)与(III)的化合物反应来获得。通式(V)化合物可由(IV)通过在溶剂(例如水、THF、甲醇，或其混合物)中使用无机碱(例如LiOH、NaOH、KOH等)将酯基水解而获得。然后，通式(I)化合物通过如例如Tetrahedron 2005，61，10827中所述使用多种酰胺键形成技术使(V)与通式(VI)胺反应来获得。

通过下文给出的实施例进一步详细解释本发明，所述实施例仅通过举例说明提供，并且因此不应解释为限制本发明的范围。

¹H NMR谱在Brucker Avance-400波谱仪(400MHz)上记录。化学位移(δ)以在CDCl₃或DMSO-d₆溶液中相对于四甲基硅烷(tetramethyl silane，TMS)的百万分率(ppm)报道。质谱(ESI-MS)在Shimadzu LC-MS 2010-A谱仪上获得。

缩写表

CBr₄：四溴甲烷

CDCl₃：氘代氯仿

CHCl₃：氯仿

CH₃OH：甲醇

DIPEA：二异丙基乙胺

EtOH：乙醇

DMF：二甲基甲酰胺

DCM：二氯甲烷

DMF-DMA：N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛

DMSO：二甲基亚砜

DMSO-d₆：六氘代二甲基亚砜

EDC.HCl：N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐

HOBT：1-羟基苯并三唑

HCl：盐酸

K₂CO₃：碳酸钾

LiAlH₄：氢化铝锂

Na₂SO₄：硫酸钠

NaH：氢化钠

NaHCO₃：碳酸氢钠

NaNO₂：亚硝酸钠

NaOH：氢氧化钠

NaOEt：乙醇钠

NaOCH₃：甲醇钠

NH₄Cl：氯化铵

NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮

Pd/C：钯炭(palladium charcoal)

Pd(dppf)Cl₂：[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)

POCl₃：磷酰氯

THF：四氢呋喃

TPP：三苯基膦

¹H NMR：质子核磁共振(Proton Nuclear Magnetic Resonance)

h：小时

min：分钟

J：耦合常数，以Hz单位计

Hz：赫兹

MABA：微板阿尔玛蓝测定(Microplate Alamar Blue Assay)

化合物的制备

实施例1

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(中间体1A)的制备

步骤1：2-(5-甲基-3-硝基吡啶-2-基)丙二酸1-(叔-丁基)3-乙酯

在15分钟时期内，向60％NaH(3.5g，87mmol)在无水DMF(100ml)中的搅拌混悬液逐滴添加丙二酸叔丁基乙酯(14.18g，75mmol)。在15分钟时期内向其分批添加2-氯-5-甲基-3-硝基吡啶(10g，57.9mmol)，并将所得混合物在25至30℃下搅拌6小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用水(500ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×200ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至40％乙酸乙酯)进一步纯化以得到12.3g标题产物。ESI-MS(m/z)：323.04(M-H)。

步骤2：2-(5-甲基-3-硝基吡啶-2-基)乙酸乙酯

在10至15℃下，向步骤1的产物(12.2g，37.6mmol)在DCM(250ml)中的搅拌溶液添加三氟乙酸(29ml，376mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌10小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NaHCO₃饱和溶液(150ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到7.5g标题产物。ESI-MS(m/z)：225.18(M+H)⁺。

步骤3：2-(3-氨基-5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯

向步骤2的产物(7.5g，33.5mmol)在CH₃OH(75ml)中的搅拌溶液添加Pd/C(10％)(0.712g，6.69mmol)。将反应混合物在25至30℃下于H₂压力下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物通过Hyflo过滤。使滤液蒸发以得到5.1g标题产物。ESI-MS(m/z)：195.19(M+H)⁺。

步骤4：6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在0至5℃下在30分钟时期内，向步骤3的产物(5.0g，25.7mmol)在浓HCl(50ml)中的搅拌溶液添加NaNO₂溶液(10ml水中的3.0g(48.3mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌30分钟。通过使用10％NaOH溶液将反应混合物的pH调节至7。在25至30℃下，继续搅拌另外60分钟。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用50ml水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至30％乙酸乙酯)纯化以得到2.2g标题产物。ESI-MS(m/z)：206.17(M+H)⁺。

4-(氯甲基)-6-甲氧基-5-甲基嘧啶(中间体1B)的制备

步骤1：2-甲基-3-氧代琥珀酸二乙酯

在室温下，向草酸二乙酯(100g，684mmol)和丙酸乙酯(69.9g，684mmol)在600ml无水EtOH中的溶液添加NaOEt(69.8g，1026mmol)。将混合物搅拌过夜。在冷却之后，将混合物用6N HCl调节至pH＝7。将残余物用水稀释，并随后用DCM萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩以得到作为红色液体的标题产物。

步骤2：6-羟基-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

向步骤1的产物(92g，455mmol)和乙酸甲脒(71.1g，682mmol)在EtOH(700ml)中的搅拌溶液添加NaOEt(46.40g，682mmol)，并将反应混合物加热至回流，持续12小时。在冷却之后，将反应混合物用6N HCl调节至pH＝7。将混合物在真空下浓缩。将残余物用水稀释，并随后用DCM萃取。将合并的DCM层用水洗涤，并蒸发以得到粗制产物。将粗制产物与200ml正己烷一起搅拌30分钟，并过滤以得到作为产物的淡黄色固体。ESI-MS(m/z)：183.05(M+H)⁺。

步骤3：6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

将步骤2的产物(29.0g，455mmol)在POCl₃(290ml)中的搅拌溶液加热至回流，持续4小时。在冷却之后，将过量的POCl₃在减压下除去，并将残余物用冷水(500ml)稀释，并通过正己烷萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：201.02(M+H)⁺。

步骤4：6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

在0至5℃下，向步骤3的产物(7.0g，38.4mmol)在无水CH₃OH(70ml)中的搅拌溶液添加NaOCH₃(2.7g，50.0mmol)。将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用冷水(25ml)稀释，并通过乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS(m/z)：197.08(M+H)⁺。

步骤5：(6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下，在10分钟时期内，向步骤4的产物(5.6g，28.5mmol)在CH₃OH(56ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(1.62g，42.8mmol)。将反应混合物搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用冷水(100ml)稀释，并通过乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS(m/z)：155.30(M+H)⁺。

步骤6：4-(氯甲基)-6-甲氧基-5-甲基嘧啶

在5至10℃下，向步骤5的产物(4.0g，25.9mmol)在DCM(40ml)中的搅拌溶液添加亚硫酰氯(3.80ml，51.9mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，使溶剂在减压下蒸发以得到残余物。向残余物添加50ml DCM，并使溶剂蒸发以得到作为标题产物的淡黄色固体。ESI-MS(m/z)：173.04(M+H)⁺。

步骤1：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向中间体1A产物(0.500g，2.43mmol)和K₂CO₃(0.505g，3.65mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加中间体1B(0.505g，2.92mmol)，并将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至20％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：342.15(M+H)⁺。

步骤2：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向以上制备的步骤1的产物(0.5g，1.46mmol)在EtOH(4ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的90mg(2.19mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用稀HCl酸化。将反应混合物通过乙酸乙酯(2×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESl-MS(m/z)：314.10(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

在25至30℃下，向步骤2的产物(150mg，0.479mmol)在DCM(3ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(184mg，0.958mmol)和HOBT(147mg，0.958mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙醇(83mg，0.958mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。然后将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在减压下除去溶剂以得到作为黄色固体的产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.88-8.85(t，J＝5.6Hz，1H)，8.59-8.58(d，J＝1.2Hz，1H)，8.40(s，1H)，8.07(s，1H)，5.89(s，2H)，5.52(s，1H)，3.94(s，3H)，3.54-3.53(d，J＝5.6Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.25(s，3H)，0.63-0.56(m，4H).ESI-MS(m/z)：383.18(M+H)⁺.

实施例2

1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-甲氧基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

在25至30℃下，向1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸(150mg，0.479mmol)在DCM(3ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(184mg，0.958mmol)、HOBT(147mg，0.958mmol)和DIPEA(124mg，0.958mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加(1-甲氧基环丙基)甲胺(97mg，0.958mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。然后将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在减压下除去溶剂得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。

¹H NMR(CDCl₃)：8.99-8.97(t，J＝5.6Hz，1H)，8.55(s，1H)，8.518-8.514(d，J＝1.6Hz，1H)，7.74(s，1H)，5.71(s，2H)，3.99(s，3H)，3.81-3.79(d，J＝5.6Hz，2H)，3.42(s，3H)，2.52(s，3H)，2.27(s，3H)，0.91-0.88(m，2H)，0.74-0.71(m，2H).ESI-MS(m/z)：397.13(M+H)⁺.

实施例3

1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

4-(氯甲基)-6-乙氧基-5-甲基嘧啶(中间体3B)的制备

步骤1：6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

在0至5℃下，向6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯(7.0g，38.4mmol)在无水EtOH(70ml)中的搅拌溶液添加NaOEt(3.4g，50.0mmol)。将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用冷水稀释，并通过乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS(m/z)：211.15(M+H)⁺。

步骤2：(6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下在10分钟时期内，向步骤1的产物(5.4g，25.7mmol)在EtOH(54ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(1.45g，38.5mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃。将反应混合物用冷水稀释)，并通过乙酸乙酯萃取)。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS(m/z)：169.09(M+H)⁺。

步骤3：4-(氯甲基)-6-乙氧基-5-甲基嘧啶

在5至10℃下，向步骤2的产物(4.0g，23.78mmol)在DCM(40ml)中的搅拌溶液添加亚硫酰氯(3.50ml，47.6mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，使溶剂在减压下蒸发以得到残余物。向残余物添加50ml DCM，并使溶剂蒸发以得到作为标题产物的淡黄色固体。ESI-MS(m/z)：187.20(M+H)⁺。

步骤1：1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(0.200g，0.975mmol)和K₂CO₃(0.229g，1.65mmol)在无水DMF(2ml)中的搅拌混悬液添加中间体3B(0.273g，1.46mmol)。将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水稀释并通过乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至20％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：356.21(M+H)⁺。

步骤2：1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤1的产物(0.16g，0.45mmol)在乙醇(2ml)中的搅拌溶液添加NaOH(0.5ml水中的27mg(0.675mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物用DCM萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：328.10(M+H)⁺。

步骤3：1-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤2的产物(100mg，0.305mmol)在DCM(3ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(100mg，0.519mmol)，随后添加HOBT(70mg，0.158mmol)和DIPEA(80mg，0.611mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙醇(53mg，0.611mmol)，并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。然后将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色固体的产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。

¹H NMR(CDCl₃)：9.09-9.07(m，1H)，8.52(s，1H)，8.49-8.48(d，J＝1.2Hz，1H)，7.79(s，1H)，5.71(s，2H)，4.45-4.40(m，2H)，4.09(s，1H)，3.75-3.74(d，J＝6.0Hz，2H)，2.54(s，3H)，2.29(s，3H)，1.42-1.39(t，J＝7.2Hz，3H)，0.91-0.88(m，2H)，0.73-0.70(m，2H).ESI-MS(m/z)：397.19(M+H)⁺.

实施例4

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

4-(溴甲基)-5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶(中间体4B)的制备

步骤1：5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-羧酸乙酯

在0至5℃下，向6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯(2g，9.97mmol)在无水DMF(10ml)中的搅拌溶液添加硫代甲醇钠(1.4g，19.94mmol)。将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用冷水(25ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至5％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：213.05(M+H)⁺。

步骤2：(5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下在10分钟时期内，向步骤1的产物(1.70g，8.01mmol)在EtOH(17.00ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(0.515g，13.61mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NH₄Cl饱和溶液(15ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：171.60(M+H)⁺。

步骤3：4-(溴甲基)-5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶

在5至10℃下，向步骤2的产物(1.0g，5.87mmol)在DCM(25ml)中的搅拌溶液添加TPP(2.0g，7.64mmol)，随后添加CBr₄(2.53g，7.64mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用15ml水进一步稀释。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至5％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：234.96(M+H)⁺。

步骤1：6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(0.400g，1.94mmol)和K₂CO₃(0.404g，2.92mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加中间体4B(0.545g，2.33mmol)，并将所得混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用冷水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至50％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：358.25(M+H)⁺。

步骤2：6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤1的产物(0.55g，1.53mmol)在EtOH(10ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的92mg(2.30mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物用DCM萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：330.14(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-(甲硫基)嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤2的产物(100mg，0.304mmol)在DCM(6ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(99mg，0.516mmol)，随后添加HOBT(70mg，0.455mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(53mg，0.607mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色油状物的产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.88-8.87(m，1H)，8.59-8.58(d，J＝2.4Hz，2H)，8.06(s，1H)，5.94(s，2H)，5.53(brs，1H)，3.54-3.53(d，J＝5.6Hz，2H)，2.54(s，3H)，2.50(s，3H)，2.33(s，3H)，0.64-0.56(m，4H)，ESI-MS(m/z)：399.11(M+H)⁺.

实施例5

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

4-(氯甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶(中间体5B)的制备

步骤1：6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

在0℃下在15分钟时期内，向60％NaH(0.916g，22.93mmol)在无水THF(10ml)中的搅拌混悬液逐滴添加2-甲氧基乙醇(1.6g，20.93mmol)。在5分钟时期内向其分批添加6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯(2g，9.97mmol)，并将所得混合物在0至5℃下搅拌15分钟。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用冷水(25ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至40％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：241.10(M+H)⁺。

步骤2：(6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下在10分钟时期内，向步骤1的产物(1.0g，4.16mmol)在EtOH(5.00ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(0.315g，8.32mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NH₄Cl饱和溶液(15ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：199.14.(M+H)⁺。

步骤3：4-(氯甲基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶

在25至30℃下，向步骤2的产物(0.65g，3.28mmol)在DCM(5ml)中的搅拌溶液添加亚硫酰氯(0.585g，4.92mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，使溶剂在真空下蒸发，并将残余物用冷水(25ml)稀释，并通过DCM(2×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：217.50(M+H)⁺。

N-((1.羟基环丙基)甲基)-1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在25至30℃下，向6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(0.200g，0.975mmol)和K₂CO₃(0.202g，1.46mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加中间体5B(0.275g，1.26mmol)。将反应混合物在25至30℃下进一步搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用冷水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至50％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：386.15(M+H)⁺。

步骤2：1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤1的产物(0.150g，0.389mmol)在EtOH(3ml)中的搅拌溶液添加NaOH(0.5ml水中的23mg(0.584mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(10ml)稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物通过DCM(4×30ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：358.11(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-(2-甲氧基乙氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤2的产物(120mg，0.336mmol)在DCM(6ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(129mg，0.672mmol)，随后添加HOBT(87mg，0.571mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(44mg，0.504mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色油状物的粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.88-8.85(m，1H)，8.59-8.58(d，J＝1.6Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.07(s，1H)，5.90(s，2H)，5.53(s，1H)，4.49-4.46(m，2H)，3.70-3.67(m，2H)，3.54-3.52(d，J＝6.0Hz，2H)，3.34(s，3H)，2.53(s，3H)，2.29(s，3H)，1.24(m，3H)，0.61-0.56(m，4H).ESI-MS(m/z)：427.16(M+H)⁺.

实施例6

1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：(6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下在10分钟时期内，向6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯(3.0g，14.95mmol)在CH₃OH(15ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(1.13g，29.9mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并将反应混合物用冷水(100ml)稀释，随后用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，其无需进一步纯化即可使用。ESI-MS(m/z)：159.38(M+H)⁺。

步骤2：4-氯-6-(氯甲基)-5-甲基嘧啶

在5至10℃下，向步骤1的产物(2.2g，13.87mmol)在DCM(22ml)中的搅拌溶液添加亚硫酰氯(1.50ml，20.81mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到作为油状物的产物。ESI-MS(m/z)：178.34(M+H)⁺。

步骤3：1-((6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(1.2g，5.85mmol)和K₂CO₃(1.20g，8.77mmol)在无水DMF(12ml)中的搅拌混悬液添加4-氯-6-(氯甲基)-5-甲基嘧啶(1.24g，7.02mmol)。将所得混合物在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×50ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至20％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：346.15.(M+H)⁺。

步骤4：1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向步骤3的产物(0.350g，1.01mmol)和K₂CO₃(0.20g，1.51mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加二甲胺盐酸盐(0.413g，5.06mmol)，并将所得混合物在50℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至20％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：355.33(M+H)⁺。

步骤5：1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-IH-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤4的产物(0.26g，0.73mmol)在EtOH(3ml)中的搅拌溶液添加NaOH(0.5ml水中的44mg(1.10mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(10ml)稀释，并通过使用5％HCl溶液将pH调节至4。将反应混合物通过DCM(3×30ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：327.10(M+H)⁺。

步骤6：1-((6-(二甲基氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤5的产物(100mg，0.306mmol)在DCM(3ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(117mg，0.613mmol)，随后添加HOBT(80mg，0.521mmol)和DIPEA(79mg，0.613mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙醇(40mg，0.460mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在减压下除去溶剂以得到作为黄色固体的产物，将其通过柱色谱(乙酸乙酯中的3％至5％CH₃OH)进一步纯化以得到标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.87-8.85(m，1H)，8.58(s，1H)，8.19(s，1H)，8.06(s，1H)，5.79(s，2H)，5.53(brs，1H)，3.54(d，J＝6Hz，2H)，2.50(s，3H)，2.96(s，6H)，2.30(s，3H)，0.61-0.56(m，4H).ESI-MS(m/z)：396.19(M+H)⁺.

实施例7

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-吗啉代嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：6-甲基-1-((5-甲基-6-吗啉代嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向1-((6-氯-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(0.350g，1.01mmol)和K₂CO₃(0.21g，1.51mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌溶液添加吗啉(0.176g，2.02mmol)，并将所得混合物在50℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(20ml)稀释，并通过乙酸乙酯(3×20ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至40％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：397.21(M+H)⁺。

步骤2：6-甲基-1-((5-甲基-6-吗啉代嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤1的产物(0.275g，0.69mmol)在EtOH(3ml)中的搅拌溶液添加NaOH(0.5ml水中的42mg(1.10mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(10ml)稀释，并通过使用5％HCl溶液将pH调节至4。将反应混合物通过DCM(4×30ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：369.51(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1-((5-甲基-6-吗啉代嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤2的产物(100mg，0.271mmol)在DCM(3ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(104mg，0.543mmol)，随后添加HOBT(71mg，0.461mmol)和DIPEA(70mg，0.543mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙醇(35mg，0.407mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色固体的产物，将其通过柱色谱(乙酸乙酯中的3％至5％CH₃OH)进一步纯化以得到标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.88-8.85(m，1H)，8.589-8.585(d，J＝1.6Hz，1H)，8.33(s，1H)，8.06(s，1H)，5.84(s，2H)，5.53(brs，1H)，3.73-3.71(t，J＝4.0Hz，4H)，3.54-3.53(d，J＝5.6Hz，2H)，3.30-3.27(t，J＝4.8Hz，4H)，2.54(s，3H)，2.29(s，3H)，0.63-0.56(m，4H).ESI-MS(m/z)：438.21(M+H)⁺.

实施例8

1-((6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯

在0℃下在15分钟时期内，向60％NaH(0.299g，7.48mmol)在无水THF(10ml)中的搅拌混悬液逐滴添加环丙基甲醇(0.359g，4.98mmol)。在5分钟时期内向其分批添加6-氯-5-甲基嘧啶-4-羧酸乙酯(1g，4.98mmol)，并将所得混合物在0至5℃下搅拌另外15分钟。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用冷水(15ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×15ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至30％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：237.10(M+H)⁺。

步骤2：(6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲醇

在25至30℃下在10分钟时期内，向步骤1的产物(550mg，2.328mmol)在EtOH(17ml)中的搅拌溶液分批添加硼氢化钠(106mg，2.79mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NH₄Cl饱和溶液(15ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：195.10(M+H)⁺。

步骤3：4-(溴甲基)-6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶

在5至10℃下，向步骤2的产物(350mg，1.802mmol)在DCM(10ml)中的搅拌溶液添加TPP(614mg，2.343mmol)和CBr₄(777mg，2.343mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用15ml水稀释。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至5％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：259.01(M+H)⁺。

步骤4：1-((6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在5至10℃下，向6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(160mg，0.780mmol)和K₂CO₃(162mg，1.169mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加步骤3的产物(241mg，0.936mmol)，并将所得混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用冷水(10ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至50％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：382.17(M+H)⁺。

步骤5：1-((6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

向步骤4的产物(220mg，0.577mmol)在EtOH(10ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的34.6mg(0.865mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物通过DCM(3×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：354.15(M+H)⁺。

步骤6：1-((6-(环丙基甲氧基)-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤5的产物(170mg，0.481mmol)在DCM(6ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(157mg，0.818mmol)，随后添加HOBT(111mg，0.722mmol)和DIPEA(0.252ml，1.443mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(84mg，0.962mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(CDCl₃)：9.07(bs，1H)，8.52-8.49(m，2H)，7.80(d，J＝0.8Hz，1H)，5.71(s，2H)，4.21(d，2H)，3.75(d，2H)，2.54(s，3H)，2.32(s，3H)，1.28-1.22(m，1H)，0.77-0.70(m，2H)，0.66-0.63(m，2H)，0.61-0.59(m，2H)，0.38-0.34(m，2H).ESI-MS(m/z)：423.17(M+H)⁺.

实施例9

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶-3-甲腈

在0℃下，向NaOEt(5.97g，88mmol)在乙醚(95ml)中的搅拌混悬液添加甲酸乙酯(6.44ml)在丙酮(5.85ml，80mmol)中的溶液。将反应混合物在30至40℃下搅拌2小时。使乙醚在50℃下蒸发。向其添加溶解于水(40ml)中的2-氰基乙酰胺(6.70g，80mmol)，随后添加乙酸哌啶(2.011g，13.95mmol)。将反应混合物加热至100℃持续2小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至0℃，并添加乙酸直至pH＝5以得到固体产物。将反应混合物过滤以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：135.12(M+H)⁺。

步骤2：6-甲基-2-氧代-1，2-二氢吡啶-3-羧酸

将步骤1的产物(7g，52.2mmol)和20％NaOH水溶液(26ml)在140至145℃下加热16小时。将反应混合物冷却，并用35％HCl将pH调节至8，并用DCM萃取。将水相酸化以得到黄色固体，将其过滤，用水洗涤，并干燥以得到标题化合物。ESI-MS(m/z)：154.05(M+H)⁺。

步骤3：2-甲氧基-6-甲基烟酸甲酯

向步骤2的产物(2.50g，16.33mmol)在CHCl₃(80ml)中的搅拌溶液添加碳酸银(4.50g，16.33mmol)，随后添加碘甲烷(3.06ml，49.0mmol)，并将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用CHCl₃和水稀释。将有机层分离，干燥并蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱进行纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：182.11(M+H)⁺。

步骤4：(2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲醇

在5至10℃下，向步骤3的甲基产物(1.75g，9.66mmol)在THF(15ml)中的搅拌溶液添加LiAlH₄(0.403g，10.62mmol)，并搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用2ml水淬灭。倾析有机层，用水洗涤并蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：154.11(M+H)⁺。

步骤5：3-(溴甲基)-2-甲氧基-6-甲基吡啶

在5至10℃下，向步骤4的产物(1.60g，10.45mmol)在DCM(25ml)中的搅拌溶液添加TPP(4.11g，15.67mmol)和CBr₄(5.02g，15.15mmol)，并在25至30℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用DCM(20ml)和水(10ml)稀释。将有机层用水洗涤，干燥并蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱进行纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：217.98(M+H)⁺。

步骤6：1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在25至30℃下，向步骤5的产物(0.3g，1.462mmol)在DMF(10ml)中的搅拌溶液添加K₂CO₃(0.303g，2.193mmol)和中间体1A(0.379g，1.754mmol)并搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用乙酸乙酯(50ml)和水(10ml)稀释。将有机层用水洗涤，干燥并蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱进行纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：341-30(M+H)⁺。

步骤7：1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸

在25至30℃下，向步骤6的产物(0.440g，1.293mmol)在EtOH(8.80ml)和水(1.76ml)中的搅拌溶液添加NaOH(0.078g，1.939mmol)，并搅拌3小时。将反应混合物用水(10ml)稀释。通过35％HCl酸化至pH＝4至5得到固体产物，将其过滤以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：313.30(M+H)⁺。

步骤8：N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤7的产物(120mg，0.384mmol)在DCM(6ml)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(125mg，0.653mmol)和HOBT(88mg，0.576mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(50mg，0.576mmol)，并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色油状物的产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.87-8.84(m，1H)，8.593-8.590(d，J＝1.2Hz，1H)，8.15(s，1H)，7.25-7.23(d，J＝7.2Hz，1H)，7.80-7.79(d，J＝7.6Hz，1H)，5.60(s，2H)，5.50(brs，1H)，3.82(s，3H)，3.53-3.51(d，J＝5.6Hz，2H)，2.51(s，3H)，2.36(s，3H)，0.60-0.55(m，4H)，ESI-MS(m/z)：382.14(M+H)⁺.

实施例10

1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

在25至30℃下，向1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[4，3-b]吡啶-3-羧酸(100mg，0.319mmol)在DCM(3mL)中的搅拌溶液添加EDC.HCl(122mg，0.638mmol)和HOBT(98mg，0.638mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌10分钟。向其添加2-甲氧基乙胺(71mg，0.638mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到作为黄色油状物的产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至60％乙酸乙酯)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.76-8.73(t，J＝5.2Hz，1H)，8.575-8.571(d，J＝1.6Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.06(s，1H)，5.89(s，2H)，3.94(s，3H)，3.61-3.57(m，2H)，3.52-3.49(m，2H)，3.33(s，3H)，2.51(s，3H)，2.23(s，3H).ESI-MS(m/z)：371.20(M+H)⁺.

实施例11

N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺的制备

步骤1：6-氯-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-胺

向3-溴-6-氯吡嗪-2-胺(10g，48.0mmol)在67ml三乙胺中的搅拌溶液添加碘化铜(I)(0.822g，4.32mmol)，随后添加双(三苯基膦)钯(II)(1.684g，2.399mmol)和乙炔基三甲基硅烷(5.18g，52.8mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(100ml)和100ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：226.09(M+H)⁺。

步骤2：3-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪

向步骤1的产物(6g，26.6mmol)在NMP(50ml)中的搅拌溶液添加叔丁醇钾(5.96g，53.2mmol)，并将反应混合物回流12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(100ml)和100ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到油状产物。ESI-MS(m/z)：154.04(M+H)⁺。

步骤3：3-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向步骤2的产物(20mg，0.130mmol)在乙酸(1ml)和水(2.0ml)中的搅拌溶液添加六亚甲基四胺(20.08mg，0.143mmol)，并将反应混合物在120℃下加热5小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：180.00(M-H)。

步骤4：3-氯-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向4-(氯甲基)-6-甲氧基-5-甲基嘧啶(47.5mg，0.275mmol)和步骤3的产物(50mg，0.275mmol)在DMF(5ml)中的搅拌溶液添加K₂CO₃(114mg，0.826mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥，蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：318.07(M+H)⁺。

步骤5：5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向步骤4的产物(50mg，0.157mmol)在2ml二氧六环中的搅拌溶液添加Pd(dppf)Cl₂(5.76mg，7.87μmol)，随后添加K₂CO₃(65.2mg，0.472mmol)和甲基硼酸(11.30mg，0.189mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：298.30(M+H)⁺。

步骤6：5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-羧酸

向步骤5的产物(20mg，0.067mmol)在叔丁醇(2ml)中的搅拌溶液添加溶解于1mL水中的亚氯酸钠(30.4mg，0.336mmol)和磷酸二氢钠(38.2mg，0.269mmol)的溶液。将反应混合物在25至30℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：314.20(M+H)⁺。

步骤7：N-((1-羟基环丙基)甲基)-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

向步骤6的产物(100mg，0.319mmol)在DCM(5.0ml)中的搅拌溶液添加EDC∶HCl(86mg，0.451mmol)，随后添加HOBT(58.8mg，0.372mmol)。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(28.2mg，0.312mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.51(s，1H)，8.40(s，1H)，8.37-8.35(d，J＝8.4Hz，2H)，5.76(s，2H)，5.50(s，1H)，3.94(s，3H)，3.51-3.32(m，2H)，2.67(s，3H)，2.33(s，3H)，0.63-0.55(m，2H)，3.57-3.55(m，2H).ESI-MS(m/z)：383.18(M+H)⁺.

实施例12

N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺的制备

步骤1：3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向3-氯-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛(10mg，0.0.031mmol)在CH₃OH(1ml)中的搅拌溶液添加Na OCH₃(2.55mg，0.047mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌5小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：314.10(M+H)⁺。

步骤2：3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-羧酸

向步骤1的产物(20mg，0.067mmol)在叔丁醇(2ml)中的搅拌溶液添加溶解于1ml水中的亚氯酸钠(30.4mg，0.336mmol)和磷酸二氢钠(38.2mg，0.269mmol)的溶液，并将反应混合物在25至30℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：330.31(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲氧基-5-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺

向步骤2的产物(100mg，0-319mmol)在DCM(5.0ml)中的搅拌溶液添加EDC∶HCl(87mg，0.459mmol)和HOBT(55.8mg，0.364mmol)。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(26.5mg，0.304mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.46(s，1H)，8.26(s，2H)，8.17(s，1H)，5.58(s，2H)，5.48(s，1H)，3.94(s，3H)，3.89(s，3H)，3.49-3.48(d，J＝5.6Hz，2H)，2.32(s，3H)，1.05-1.03(t，J＝6.4Hz，2H)，0.61-0.60(d，J＝3.6Hz，2H)，0.57-0.56(d，J＝3.6Hz，2H).ESI-MS(m/z)：399.16(M+H)⁺.

实施例13

5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺的制备

步骤1：3-氯-5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向4-(氯甲基)-6-乙氧基-5-甲基嘧啶(50mg，0.281mmol)和3-氯-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛(55mg，0.281mmol)在DMF(5ml)中的搅拌溶液添加K₂CO₃(122mg，0.831mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：332.73(M+H)⁺。

步骤2：5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲醛

向步骤1的产物(100mg，0.32mmol)在2mL二氧六环中的搅拌溶液添加Pd(dppf)Cl₂(11.46mg，15.67μmol)，随后添加K₂CO₃(13.4mg，0.94mmol)和甲基硼酸(22.60mg，0.38mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：312.20(M+H)⁺。

步骤3：5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-羧酸

向步骤2的产物(60mg，0.20mmol)在叔丁醇(2ml)中的搅拌溶液添加溶解于1mL水中的亚氯酸钠(90.9mg，0.99mmol)和磷酸二氢钠(114.2mg，0.78mmol)的溶液。将反应混合物在25至30℃下搅拌3小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：328.20(M+H)⁺。

步骤4：5-((6-乙氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺的制备

向步骤3的产物(100mg，0.319mmol)在DCM(5.0ml)中的搅拌溶液添加EDC∶HCl(87mg，0.459mmol)和HOBT(55.8mg，0.364mmol)。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(26.5mg，0.304mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.51(s，1H)，8.37-8.34(m，3H)，5.64(s，2H)，5.50(s，1H)，4.41-4.39(q，J＝7.2Hz，2H)，3.51-3.49(d，J＝8.4Hz，2H)，2.28(s，3H)，1.36-1.32(t，J＝7.2Hz，3H)，0.61-0.57(m，4H).ESI-MS(m/z)：397.18(M+H)⁺.

实施例14

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺的制备

步骤1：2-(3，5-二氯吡嗪-2-基)-2-氧代乙酸乙酯

在-60℃下在15分钟时期内，向2，6-二氯吡嗪(2g，13.43mmol)和草酸二乙酯(2.158g，14.77mmol)在无水THF(20ml)中的搅拌溶液添加2，2，6，6-四甲基哌啶锂(593mg，4.03mmol)，并将所得混合物在-30℃下搅拌6小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(50ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×50ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至40％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：250.04(M+H)⁺。

步骤2：2-(3，5-二氯吡嗪-2-基)-2-亚肼基乙酸乙酯

向步骤1的产物(660mg，2.65mmol)在EtOH(10ml)中的搅拌溶液添加氢溴酸肼(299mg，2.65mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌10小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NaHCO₃饱和溶液(150ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：263.0(M+H)⁺。

步骤3：6-氯-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸乙酯

在0℃下，向步骤2的产物(1g，3.80mmol)在THF(10ml)中的搅拌溶液添加氢化钠(0.27g，11.40mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌2小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至10℃，并用NaHCO₃饱和溶液(150ml)洗涤。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：225.0(M-H)。

步骤4：6-氯-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸乙酯

向步骤3的产物(1g，4.41mmol)在DMF(10ml)中的搅拌溶液添加4-(氯甲基)-6-甲氧基-5-甲基嘧啶(0.914g，5.30mmol)和K₂CO₃(0.915g，6.62mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌12小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物添加至冷水。将沉淀的产物过滤，用水洗涤，并干燥以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：363.05(M+H)⁺。

步骤5：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸乙酯

向步骤4的产物(10mg，0.028mmol)在二氧六环(2ml)中的搅拌溶液添加Pd(dppf)Cl₂(2.017mg，2.76μmol)，随后添加甲基硼酸(3.30mg，0.055mmol)和碳酸铯(13.47mg，0.041mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌12小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水稀释。将沉淀的产物过滤，用水洗涤，干燥以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：343.30(M+H)⁺。

步骤6：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸

向步骤5的产物(150mg，0.438mmol)在EtOH(4ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的52.6mg(1.314mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物通过乙酸乙酯(2×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：315.20(M+H)⁺。

步骤7：N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺

向步骤6的产物(80mg，0.242mmol)在DCM(5ml)中的搅拌溶液添加EDC∶HCl(65mg，0.399mmol)和HOBT(55.6mg，0.363mmol)。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(31.7mg，0.363mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.86(s，1H)，8.37-8.38(m，2H)，5.90(s，2H)，5.53(s，1H)，3.95(s，3H)，3.52-3.50(d，J＝5.6Hz，2H)，2.67(s，3H)，2.27(s，3H)，1.04-1.03(d，J＝6.0Hz，1H)，0.63-0.56(m，4H).ESI-MS(m/z)：384.13(M+H)⁺.

实施例15

N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺的制备

步骤1：6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸乙酯

向6-氯-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸乙酯(150mg，0.413mmol)在CH₃OH(1ml)中的搅拌溶液添加NaOCH₃(22.34mg，0.413mmol)，并将反应混合物在25至30℃下搅拌5小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。ESI-MS(m/z)：359.10(M+H)⁺。

步骤2：6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-羧酸

向步骤1的产物(110mg，0.307mmol)在EtOH(4ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的36.8mg(0.92mmol))。将反应混合物在25至30℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用稀HCl进行酸化。将反应混合物通过乙酸乙酯(2×10ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：331.10(M+H)⁺。

步骤3：N-((1-羟基环丙基)甲基)-6-甲氧基-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡嗪-3-甲酰胺的制备

向步骤2的产物(80mg，0.242mmol)在DCM(5ml)中的搅拌溶液添加EDC∶HCl(65mg，0.399mmol)和HOBT(55.6mg，0.363mmol)。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(31.7mg，0.363mmol)。将反应混合物在25至30℃下搅拌16小时。在反应完成之后，将其用乙酸乙酯(10ml)和10ml水稀释。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并蒸发以得到所期望产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.79-8.43(m，3H)，8.28(s，1H)，5.77(s，2H)，5.52(s，1H)，4.48(m，2H)，3.98(s，3H)，3.48(s，3H)，2.67(s，3H)，2.26-2.50(m，4H)，0.63-0.56(m，4H).

使用合适的起始物料以及对以上实施例中描述方法的合适修改，包括在必要时适当地添加和/或删除步骤，完全在本领域技术人员的范围内，以类似的方式制备以下化合物。

表1：

实施例85

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺的制备

步骤1：3-(二甲基氨基)-2-(5-甲基-3-硝基吡啶-2-基)丙烯酸乙酯

在25至30℃下，向2-(5-甲基-3-硝基吡啶-2-基)乙酸乙酯(8.7g，38.8mmol)在DMF(87ml)中的搅拌溶液添加DMF-DMA(5g，58.2mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物冷却至15℃。将反应混合物用水(500ml)稀释，并通过乙酸乙酯(2×200ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到标题产物。获取粗制物料用于下一步而无需进一步纯化。ESI-MS(m/z)：280.18.(M+H)⁺。

步骤2：6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在25至30℃下在氢化容器中，向步骤1的产物(10g，35.8mmol)在EtOH(200ml)中的搅拌溶液添加10％Pd/C(50％湿)(1.9g，17.9mmol)。将反应混合物在氢气压力下于25至30℃下搅拌16小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物通过硅藻土床过滤，并在减压下蒸发以得到标题产物。获取粗制物料用于下一步而无需进一步纯化。ESI-MS(m/z)：205.10(M+H)⁺。

步骤3：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-羧酸乙酯

在10至15℃下，向步骤2的产物(1.0g，4.90mmol)和K₂CO₃(1.0g，7.34mmol)在无水DMF(5ml)中的搅拌混悬液添加4-(氯甲基)-6-甲氧基-5-甲基嘧啶(1.0g，7.88mmol)，并将所得混合物在55至60℃下搅拌3小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(20ml)稀释，并通过DCM(3×30ml)萃取。将有机层分离，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，并在减压下蒸发以得到粗制产物，将其通过柱色谱(己烷中的0至50％乙酸乙酯)进一步纯化以得到标题产物。ESI-MS(m/z)：341.16(M+H)⁺。

步骤4：1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-羧酸

向步骤3的产物(1.0g，2.94mmol)在EtOH(10ml)中的搅拌溶液添加NaOH(1ml水中的235mg(5.88mmol))。将反应混合物在55至60℃下搅拌1小时。在起始物料完全转化之后，将反应混合物用水(5ml)稀释，并通过使用5％HCl溶液将pH调节至4。将沉淀过滤，用水洗涤并干燥以得到作为固体的标题产物。ESI-MS(m/z)：311.03(M-H)。

步骤5：N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺

在25至30℃下，向步骤4的产物(150mg，0.48mmol)在DCM(6mL)中的搅拌溶液添加EDC-HCl(184mg，0.960mmol)和HOBT(125mg，0.816mmol)。在25至30℃下，将反应混合物搅拌10分钟。向其添加1-(氨基甲基)环丙烷-1-醇(63mg，0.720mmol)并搅拌16小时。在16小时之后，将反应混合物用DCM(10ml)稀释。将反应混合物用NaHCO₃饱和溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥并过滤。在减压下除去溶剂得到粗制产物，将其通过柱色谱(乙酸乙酯中的0至5％CH₃OH)进一步纯化以得到作为固体的标题产物。

¹H NMR(DMSO-d₆)：8.92-8.89(t，J＝5.6Hz，1H)，8.42(s，1H)，8.35(s，1H)，8.12(s，1H)，7.75(s，1H)，5.64(s，2H)，5.48(s，1H)，3.94(s，3H)，3.51-3.50(d，J＝5.6Hz，2H)，2.40(s，3H)，2.24(s，3H)，0.62-0.54(m，4H).ESI-MS(m/z)：382.11(M+H)⁺.

实施例80至84是使用合适的起始物料以及实施例85中所述方法的适当修改制备的。

可通过类似于上述那些的操作并对反应、反应条件、试剂和试剂量进行适当变化来制备以下化合物，这在本领域技术人员的范围内。

5-((4-(二甲基氨基)-6-甲基-1，3，5-三嗪-2-基)甲基)-N-((1-羟基环丙基)甲基)-3-甲基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-7-甲酰胺。

生物学评价：

最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)确定

为了评估本发明化合物的细菌生长抑制作用，用结核分枝杆菌H37Rv的对数期培养物进行MABA测定。在7H9培养基中将光密度为0.6至0.8的细菌培养物稀释至最终密度为0.02。将100μl经稀释的结核分枝杆菌H37Rv与受试化合物在微量滴定板中孵育。还制备了也包含DMSO的无药物对照。在将化合物与培养物在37℃下孵育7天之后，在每个孔中添加20μl的0.02％阿尔玛蓝(新鲜制备)。使颜色在37℃下显影16小时。孔中的蓝色表示无生长，而粉红色表示孔中的生长。将MIC值定义为防止颜色从蓝色变为粉红色的最低浓度。在530nm激发和590nm发射下测量荧光。所选择化合物的MIC值示于表2中。

表2：

实施例	Mtb MIC(μM)
		1	1.25
3	≤0.625
		10	5
11	0.5
		12	0.25
13	0.25
		85	≤0.0625

化合物的药动学

Balb/c小鼠获自Zydus研究中心(Zydus Research Centre)，Ahmedabad India，AAALAC认证。将所有动物饲养在具有合适的光/暗循环的温度控制室中。在经口强饲给药之前，将动物禁食过夜，但是可随意饮水。在给药之后4小时提供食物。所有动物研究均根据Zydus研究中心的机构动物护理和伦理委员会(Institutional Animal Care and EthicsCommittee)审查并批准的方案进行。将化合物在小鼠中以单剂量作为在生理盐水中10％NMP和10％Solutol中的溶液(静脉内(IV)，1mg/kg)以及在0.5％甲基纤维素中0.5％吐温80中的均质混悬剂(经口(PO)，3mg/kg)给药。对于小鼠，生成了复合PK谱。在给药之后0.08(仅IV)、0.25、0.5、1、2、4、6、7.5和24小时，在经肝素Na包被的微型离心管中收集血液样品。将血液样品离心以分离出血浆，然后将其在-70℃储存直至分析。使用Phoenix(PharsightCorp.，Mountain View，California)通过非房室分析计算PK参数。基于血管(IV推注)或血管外(PO)施用途径选择模型。对于PO途径，假定在零时时的浓度为零。出于计算平均血浆浓度值的目的，将低于定量限的血浆浓度处理为零浓度。所选择化合物的药动学参数，例如最大血浆浓度(Cmax)、浓度随时间推移的曲线下面积(AUC(0-t))和绝对经口生物利用度(F(％))示于表3中。

表3：

实施例No.	Cmax(ng/mL)	AUC(0-t)(ng.h/mL)	F(％)
				1	1726	2849	100
3	2723	2814	100
				9	1570	2158	78
10	4004	5129	100
				11	1661	2567	100
12	1716	2919	100
				13	1317	2152	100
14	1605	1682	90
				85	1467	2176	94

如公知的可根据技术和方法以及浓度通过与合适的赋形剂组合将本发明的新化合物配制成合适的可药用组合物。包含本发明化合物的药物组合物可包含合适的黏合剂、合适的填充剂和/或稀释剂以及可能必要的任何其他合适的试剂。

通过施用治疗活性且无毒量的式(I)化合物或其可药用组合物，本发明的新化合物可用于治疗哺乳动物感染，例如结核。

在对象中治疗抗结核感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的式(I)化合物或其合适的药物组合物。

根据本发明的药物组合物可以以多种形式存在。在一些实施方案中，药物组合物表面、经口或肠胃外施用。

在某些实施方案中，提供的组合或其组合物与其他治疗剂组合施用，所述治疗剂例如异烟肼(isoniazide)、利福平(rifampin)、利福喷丁(rifapentine)、利福布汀(rifabutin)、乙胺丁醇(ethambutol)、吡嗪酰胺(pyrazinamide)、链霉素(streptomycin)、阿米卡星(amikacin)、左氧氟沙星(levofloxacin)、氧氟沙星(ofloxacin)、对氨基水杨酸(p-aminosalicylicacid)。

Claims

1.通式(I)化合物，

其中，

“A”表示以下给出的任选取代的6元环体系：

R₂独立地选自包含以下的组：卤素、-OR₆和-S(O)_pR₆；

R₄和R₅各自在每次出现时独立地选自氢、任选取代的(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、环烷基烷基、杂环基、卤代烷基；或者，R₄和R₅与它们所连接的N原子一起可形成5至8元环状环，所述环状环可包含另外的杂原子O、-S(O)_p和-NR₆；

R₆选自H或(C₁-C₆)烷基；

本文中前面所使用的(C₁-C₆)烷基链可进一步被以下取代：氢、羟基、氰基、卤素、卤代烷基、氧代、(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₆)环烷基、杂环基、烷基磺酰基氧基、-COOR₄、-OR₄、-S(O)_pR₄、-NR₄R₅、-CONR₄R₅、-N(R₄)COR₅、-SO₂NR₄R₅、-N(R₄)SO₂R₅衍生物；其中R₄和R₅如前文所限定；

p表示0至2的整数；m表示1至5的整数。

2.如权利要求1所述的式(I)化合物，其中A选自以下基团：

3.如权利要求1所述的式(I)化合物，其中R₁选自-CH₃、-OCH₃和卤素。

4.如权利要求1所述的式(I)化合物，其中R₂是羟基。

5.如权利要求1所述的式(I)化合物，其中R₃基团选自-CH₃、-OR₄、-SCH₃、-N(CH₃)₂和卤素。

6.化合物，其选自：

N-((1-羟基环丙基)甲基)-1-((6-甲氧基-5-甲基嘧啶-4-基)甲基)-6-甲基-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶-3-甲酰胺；

7.药物组合物，其包含治疗有效量的如前述权利要求中任一项所述的化合物以及任选的一种或更多种可药用的载体、稀释剂或赋形剂。

8.如任一前述权利要求所述的化合物在制备用于预防或治疗抗结核感染的药物中的用途。

9.治疗抗结核感染的方法，其包括向有此需要的患者施用有效量的如前述权利要求中任一项所述的式(I)化合物或其合适的药物组合物。

10.如前述权利要求中任一项所述的式(I)化合物或其药物组合物，其与选自以下的一种或更多种合适的药物活性剂组合：异烟肼、利福平、利福喷丁、利福布汀、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、链霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、氧氟沙星、对氨基水杨酸。