CN112358333A - 轻度盐碱地改良菌剂的制备方法 - Google Patents

轻度盐碱地改良菌剂的制备方法 Download PDF

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CN112358333A CN202011359357.0A CN202011359357A CN112358333A CN 112358333 A CN112358333 A CN 112358333A CN 202011359357 A CN202011359357 A CN 202011359357A CN 112358333 A CN112358333 A CN 112358333A
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乔梅
杨铭
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Abstract

本发明提供一种轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,包括:S1、取厨余垃圾堆肥样品并培养、收集、稀释得悬浮菌液;S2、取悬浮菌液并涂布至初次筛选培养基上,保温振荡培养后,分离固氮菌并接种至培养基表面,得初步筛选菌种;S3、取初步筛选菌种并稀释后涂布至二次筛选培养基上,培养得二次筛选菌种;S4、取二次筛选菌种并接种三次筛选培养基上,培养得最终筛选菌种;S5、取脱硫石膏制备改性基质,将改性基质与蛭石混合,制备菌剂基质;S6、取最终筛选菌种并稀释得筛选菌种液,混合干燥,制备得轻度盐碱地改良菌剂。根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,有效修复盐碱地环境,固化土壤肥力的同时,提高修复后盐碱地的修复稳定性。

Description

轻度盐碱地改良菌剂的制备方法
技术领域
本发明属于生物材料技术领域,更具体地,涉及一种轻度盐碱地改良菌剂的制备方法。
背景技术
盐碱地是盐碱土的俗称,包含盐土、盐化土、碱化土和碱土多种类型。盐碱土壤中含有大量的可溶性盐类或者土壌呈轻~重的碱性,导致其理化性质恶劣,从而影响多数植物正常生长。
土壤微生物是土壤肥力最活跃的因子之一,研究证明施用微生物肥料可以提高土壤肥力。一些微生物代在谢过程中可产生有机酸,为土壤提供迟效氮磷钾,从而可以改善土壤的理化性质。但是现有的微生物改良后的盐碱地,虽然能有效种植产物,但是其肥效不佳且改良效果时好时坏,稳定性不高,所以对其进行改进很有必要。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。
有鉴于此,本发明提供一种轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,该轻度盐碱地改良菌剂有效修复盐碱地环境,固化土壤肥力的同时,有效提高修复后盐碱地的修复稳定性。
根据本发明实施例的无膻味羊脂油的制备方法,包括:S1、取厨余垃圾堆肥样品并与无菌水,经培养并收集悬浮母液,稀释得悬浮菌液;S2、取悬浮菌液并涂布至初次筛选培养基上,保温振荡培养后,分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得初步筛选菌种;S3、取初步筛选菌种并稀释后涂布至二次筛选培养基上,保温振荡培养后,再次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得二次筛选菌种;S4、取二次筛选菌种并稀释后涂布至三次筛选培养基上,保温振荡培养后,第三次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得最终筛选菌种;S5、取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过筛,紫外灭菌得菌剂基质;S6、取最终筛选菌种并稀释得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得所述轻度盐碱地改良菌剂。
根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,通过对厨余垃圾堆肥中的固氮菌进行筛选,具体模拟轻度盐碱地环境下固氮菌的生存环境并通过三次筛选处理,筛选出能稳定生存在轻质盐碱土环境下的固氮菌,同时,再选取脱硫石膏为菌剂基体,由于脱硫石膏的添加,能显著降低盐碱地中土壤盐离子CO3 2-HCO3 -和Cl-的含量,并为植物生长提供了所需营养元素Ca2+和SO4 2-,从而改善盐碱地中植物生长环境,与此同时,固氮菌的在盐碱地土壤中有效负载并固氮处理,提高整体盐碱地中的肥效,使改良后的盐碱地具有稳定的改良效果。
根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法还可以具有以下附加技术特征:
根据本发明的一个实施例,步骤S2中所述初次筛选培养基为按质量比1:50,将筛选改性液与LB培养基混合制备而成。
根据本发明的一个实施例,步骤S3中所述二次筛选培养基为按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。
根据本发明的一个实施例,步骤S4中所述三次筛选培养基为按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。
根据本发明的一个实施例,所述筛选改性液为按重量份数计,选取45~50份去离子水、1~2份氯化钠、1~2份氯化镁、0.5~1.0份氯化钾、2~3份氯化钙和1~2份硫酸镁混合制备而成。
根据本发明的一个实施例,所述悬浮菌液的稀释度为10-5
根据本发明的一个实施例,步骤S2~S4中任一项所述保温振荡培养为:在250~300r/min、温度为37℃下的培养箱中,振荡培养7天。
根据本发明的一个实施例,步骤S2~S4中任一项所述涂布量为100μL。
根据本发明的一个实施例,所述发泡剂为椰油酰胺基丙基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱、月桂酰胺丙基甜菜碱、α-烯基磺酸钠发泡剂和十二烷基硫酸钠中的任意一种。
根据本发明的一个实施例,所述菌剂基质粒径为500目。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解,其中:
图1为根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法的流程图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例在附图中示出,其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的,仅用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
在本发明的描述中,需要理解的是,术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中,除非另有说明,“多个”的含义是两个或两个以上。
在本发明的描述中,需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
下面结合附图具体描述根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法。
如图1所示,根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法包括:
S1、取厨余垃圾堆肥样品并与无菌水,经培养并收集悬浮母液,稀释得悬浮菌液;
S2、取悬浮菌液并涂布至初次筛选培养基上,保温振荡培养后,分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0~5下保存,得初步筛选菌种;
S3、取初步筛选菌种并稀释后涂布至二次筛选培养基上,保温振荡培养后,再次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0~5℃下保存,得二次筛选菌种;
S4、取二次筛选菌种并稀释后涂布至三次筛选培养基上,保温振荡培养后,第三次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0~5℃下保存,得最终筛选菌种;
S5、取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过筛,紫外灭菌得菌剂基质;
S6、取最终筛选菌种并稀释得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得轻度盐碱地改良菌剂。
换言之,先通过在厨余垃圾堆肥样品内筛选菌种并培养,继续筛选分离出固氮菌后,将固氮菌菌种稀释,收集稀释菌种液后,通过模拟轻质盐碱地环境,逐次筛选最优菌种后,培养并保留,收集得筛选菌种,再通过以脱硫石膏为原料,将其与蛭石混合研磨并负载筛选菌种后,制备得改良菌剂。
由此,根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,通过对厨余垃圾堆肥中的固氮菌进行筛选,具体模拟轻度盐碱地环境下固氮菌的生存环境并通过三次筛选处理,筛选出能稳定生存在轻质盐碱土环境下的固氮菌,同时,再选取脱硫石膏为菌剂基体,由于脱硫石膏的添加,能显著降低盐碱地中土壤盐离子CO3 2-HCO3 -和Cl-的含量,并为植物生长提供了所需营养元素Ca2+和SO4 2-,从而改善盐碱地中植物生长环境,与此同时,固氮菌的在盐碱地土壤中有效负载并固氮处理,提高整体盐碱地中的肥效,使改良后的盐碱地具有稳定的改良效果。
根据本发明的一个实施例,步骤S2中初次筛选培养基为按质量比1:50,将筛选改性液与LB培养基混合制备而成。
也就是说,先通过对LB培养基中添加筛选改性液,制备初级筛选培养基对固氮菌进行筛选培养。
在本发明的一些具体实施方式中,步骤S3中二次筛选培养基为按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。通过再次提高浓度,进一步筛选耐盐碱的固氮菌菌种。
进一步地,步骤S4中三次筛选培养基为按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。
也就是说,通过不断的提高筛选培养基的浓度,既能使部分固氮菌有效适应盐碱地生存环境,又能真正筛选出具有优异耐盐碱性能的固氮菌菌种。
可选地,筛选改性液为按重量份数计,选取45~50份去离子水、1~2份氯化钠、1~2份氯化镁、0.5~1.0份氯化钾、2~3份氯化钙和1~2份硫酸镁混合制备而成。通过选取轻质盐碱地中含有的成分浓度较高的盐分物质,混合模拟制备出与轻质盐碱地菌种生存环境大致相同的成分,从而对其后续添加至盐碱地改良时,提高其存活率和稳定性。
在本发明的一些具体实施方式中,步骤S1中悬浮菌液的稀释度为10-5。筛选稀释度不高的悬浮菌液,使培养筛选菌种方便和快捷。
根据本发明的一个实施例,步骤S2~S4中任一项保温振荡培养为:在250~300r/min、温度为37℃下的培养箱中,振荡培养7天。选择适宜的环境和温度进行培养,使其在固定时间内繁殖能力达到最强,便于后续的筛选和收集。
可选地,步骤S2~S4中任一项涂布量为100μL。通过控制涂布量,使涂布后的筛选培养基上的微生物能有效适应环境并繁殖,防止涂布过低无法有效繁殖,涂布量过筛又导致筛选的菌种质量不高的问题。
根据本发明的一个实施例,发泡剂为椰油酰胺基丙基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱、月桂酰胺丙基甜菜碱、α-烯基磺酸钠发泡剂和十二烷基硫酸钠中的任意一种。
在本发明的一些具体实施方式中,菌剂基质粒径为500目。制备并选取合适的菌剂颗粒,使其施用后单位面积内的微生物达到最优值,既能有效改良土壤,又能进一步提高改良稳定性能。
下面结合具体实施例描述根据本发明的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法。
实施例1
取厨余垃圾堆肥样品并按质量比1:10,将其与无菌水搅拌混合,在室温下静置20min后,收集混合样品并置于250/min培养箱中,振荡培养45min,收集培养物并充分振荡,收集悬浮母液并用无菌水稀释至10-5稀释度的悬浮菌液;选取LB培养基为基体,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基,控制筛选改性液与LB培养基质量比为1:50,筛选改性液为按重量份数计,选取45份去离子水、1份氯化钠、1份氯化镁、0.5份氯化钾、2份氯化钙和1份硫酸镁置于搅拌机中,搅拌混合并收集得筛选改性液,待将筛选培养基制备完成后,用无菌玻璃棒取100μL的悬浮菌液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃下保存,得初步筛选菌种;再按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得二次筛选培养基,将初步筛选菌种稀释至10-5后,得初步筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的初步筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,二次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃下保存,得二次筛选菌种;再按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得三次筛选培养基,将二次筛选菌种稀释至10-5后,得二次筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的二次筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,第三次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃下保存,得最终筛选菌种;取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并按质量比1:15,将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过500目筛,紫外灭菌得菌剂基质;取最终筛选菌种与无菌水混合稀释至10-5后,得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得轻度盐碱地改良菌剂1。
实施例2
取厨余垃圾堆肥样品并按质量比1:10,将其与无菌水搅拌混合,在室温下静置25min后,收集混合样品并置于275r/min培养箱中,振荡培养52min,收集培养物并充分振荡,收集悬浮母液并用无菌水稀释至10-5稀释度的悬浮菌液;选取LB培养基为基体,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基,控制筛选改性液与LB培养基质量比为1:50,筛选改性液为按重量份数计,选取47份去离子水、1份氯化钠、1份氯化镁、0.7份氯化钾、2份氯化钙和1份硫酸镁置于搅拌机中,搅拌混合并收集得筛选改性液,待将筛选培养基制备完成后,用无菌玻璃棒取100μL的悬浮菌液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在2℃下保存,得初步筛选菌种;再按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得二次筛选培养基,将初步筛选菌种稀释至10-5后,得初步筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的初步筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,二次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在2℃下保存,得二次筛选菌种;再按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得三次筛选培养基,将二次筛选菌种稀释至10-5后,得二次筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的二次筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,第三次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在2℃下保存,得最终筛选菌种;取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并按质量比1:15,将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过500目筛,紫外灭菌得菌剂基质;取最终筛选菌种与无菌水混合稀释至10-5后,得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得轻度盐碱地改良菌剂2。
实施例3
取厨余垃圾堆肥样品并按质量比1:10,将其与无菌水搅拌混合,在室温下静置30min后,收集混合样品并置于300r/min培养箱中,振荡培养60min,收集培养物并充分振荡,收集悬浮母液并用无菌水稀释至10-5稀释度的悬浮菌液;选取LB培养基为基体,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基,控制筛选改性液与LB培养基质量比为1:50,筛选改性液为按重量份数计,选取50份去离子水、2份氯化钠、2份氯化镁、1.0份氯化钾、3份氯化钙和2份硫酸镁置于搅拌机中,搅拌混合并收集得筛选改性液,待将筛选培养基制备完成后,用无菌玻璃棒取100μL的悬浮菌液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在5℃下保存,得初步筛选菌种;再按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得二次筛选培养基,将初步筛选菌种稀释至10-5后,得初步筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的初步筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,二次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在5℃下保存,得二次筛选菌种;再按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备得三次筛选培养基,将二次筛选菌种稀释至10-5后,得二次筛选菌种悬浮液,用无菌玻璃棒取100μL的二次筛选菌种悬浮液涂布纸培养基表面并置于37℃下保温培养7天,待培养完成后,第三次分离出固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在5℃下保存,得最终筛选菌种;取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并按质量比1:15,将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过500目筛,紫外灭菌得菌剂基质;取最终筛选菌种与无菌水混合稀释至10-5后,得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得轻度盐碱地改良菌剂3。
实施例4
取厨余垃圾堆肥样品并按质量比1:10,将其与无菌水搅拌混合,在室温下静置30min后,收集混合样品并置于300r/min培养箱中,振荡培养60min,收集培养物并充分振荡,收集悬浮母液并用无菌水稀释至10-5稀释度的悬浮菌液;取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并按质量比1:15,将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过500目筛,紫外灭菌得菌剂基质;取悬浮菌液与无菌水混合稀释至10-5后,得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即对照例1。
对上述实施例进行膻味感官测试,实施例1~3为实验组,实施例4为对照组,具体测试如下:
分别将实施例1~3和对照组制备的菌剂(30kg/亩)、秸秆粉(30kg/亩)与植物所需肥料(常规用量)均匀撒入供试区域土壤后翻耕,散播植物种子。其中,供试植物为上海青,十字花科。以不添加改良剂、不施肥的土壤作为对照。
于40天上海青收获日采样,详细记录每个区域收获蔬菜的鲜重,以每小区全部称重计算产量。取外观、大小近似的蔬菜进行品质测定,各区域取5株用来测定叶绿素含量后,用塑封袋密封,于-20℃冰箱中保存。
取碾磨后的上海青样品20g,加入100mL去离子水,菜水比1:5混合,在25℃、2000rpm的恒温摇床上振荡15min后,过滤至具筛锥形瓶中,上清液置于4℃冰箱中待测。
株高和鲜重的测定:将待测整株青菜用蒸馏水清洗干净,用吸水纸将青菜表面水分吸干,测定每颗青菜株高和鲜重。
上海青硝酸盐:GB/T5009.33食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法;
上海青维生素C:2,6-二氯靛酚滴定法。
具体测试结果如下表表1。
表1. 性能对照表
Figure 106564DEST_PATH_IMAGE002
由上述测试结果显示,实施例4中的治理性能较实施例1~3效果有明显差异,说明通过体模拟轻度盐碱地环境下固氮菌的生存环境并通过三次筛选处理,再选取脱硫石膏为菌剂基体,能显著降低盐碱地中土壤盐离子CO32-HCO3-和Cl-的含量,即本发明制备的实施例1~3的菌剂对轻质盐碱地具有良好的改良效果。
总而言之,根据本发明实施例的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,通过对厨余垃圾堆肥中的固氮菌进行筛选,具体模拟轻度盐碱地环境下固氮菌的生存环境并通过三次筛选处理,筛选出能稳定生存在轻质盐碱土环境下的固氮菌,同时,再选取脱硫石膏为菌剂基体,由于脱硫石膏的添加,能显著降低盐碱地中土壤盐离子CO3 2-HCO3 -和Cl-的含量,并为植物生长提供了所需营养元素Ca2+和SO4 2-,从而改善盐碱地中植物生长环境,与此同时,制备并选取合适的菌剂颗粒,使其施用后单位面积内的微生物达到最优值,既能有效改良土壤,又能进一步提高改良稳定性能。
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,本领域的普通技术人员可以理解:在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1.一种轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,具体制备步骤为:
S1、取厨余垃圾堆肥样品并与无菌水,经培养并收集悬浮母液,稀释得悬浮菌液;
S2、取悬浮菌液并涂布至初次筛选培养基上,保温振荡培养后,分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得初步筛选菌种;
S3、取初步筛选菌种并稀释后涂布至二次筛选培养基上,保温振荡培养后,再次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得二次筛选菌种;
S4、取二次筛选菌种并稀释后涂布至三次筛选培养基上,保温振荡培养后,第三次分离固氮菌并接种至LB斜面培养基表面,再在0℃~5℃下保存,得最终筛选菌种;
S5、取脱硫石膏并加水混合,收集混合浆液并将发泡剂添加至混合浆液中,搅拌混合并浇注至模具中,自然养护至绝干后,收集改性基质并按质量比1:5,将改性基质与蛭石混合破碎研磨过筛,紫外灭菌得菌剂基质;
S6、取最终筛选菌种并稀释得筛选菌种液,按质量比1:10,将菌剂基质与筛选菌种液混合并真空冷冻干燥,即可制备得所述轻度盐碱地改良菌剂。
2.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S2中所述初次筛选培养基为按质量比1:50,将筛选改性液与LB培养基混合制备而成。
3.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S3中所述二次筛选培养基为按质量比1:30,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。
4.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S4中所述三次筛选培养基为按质量比1:15,将筛选改性液与LB培养基混合制备得筛选培养基混合制备而成。
5.根据权利要求2~4中任一项中所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,所述筛选改性液为按重量份数计,选取45~50份去离子水、1~2份氯化钠、1~2份氯化镁、0.5~1.0份氯化钾、2~3份氯化钙和1~2份硫酸镁混合制备而成。
6.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S1中所述悬浮菌液的稀释度为10-5
7.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S2~S4中任一项所述保温振荡培养为:在250~300r/min、温度为37℃下的培养箱中,振荡培养7天。
8.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S2~S4中任一项所述涂布量为100μL。
9.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,步骤S5中所述发泡剂为椰油酰胺基丙基甜菜碱、十二烷基二甲基甜菜碱、月桂酰胺丙基甜菜碱、α-烯基磺酸钠发泡剂和十二烷基硫酸钠中的任意一种。
10.根据权利要求1所述的轻度盐碱地改良菌剂的制备方法,其特征在于,所述菌剂基质粒径为500目。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106833667A (zh) * 2016-12-30 2017-06-13 东莞市联洲知识产权运营管理有限公司 一种适用于盐碱土的复合土壤改良剂及其制备方法
CN107056521A (zh) * 2016-10-19 2017-08-18 宁波创蓝环境科技有限公司 一种用于盐碱土壤改良增肥的微生物肥料及其制造方法
CN109234183A (zh) * 2018-05-18 2019-01-18 苏州农业职业技术学院 一种耐盐促生菌菌株、筛选方法及应用
CN111411068A (zh) * 2020-03-26 2020-07-14 中国科学院南京土壤研究所 一种耐盐纤维素分解菌的快速分离方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107056521A (zh) * 2016-10-19 2017-08-18 宁波创蓝环境科技有限公司 一种用于盐碱土壤改良增肥的微生物肥料及其制造方法
CN106833667A (zh) * 2016-12-30 2017-06-13 东莞市联洲知识产权运营管理有限公司 一种适用于盐碱土的复合土壤改良剂及其制备方法
CN109234183A (zh) * 2018-05-18 2019-01-18 苏州农业职业技术学院 一种耐盐促生菌菌株、筛选方法及应用
CN111411068A (zh) * 2020-03-26 2020-07-14 中国科学院南京土壤研究所 一种耐盐纤维素分解菌的快速分离方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
薛婷婷等: "黄河三角洲盐碱地固氮细菌的分离鉴定和生长特性研究", 《山东化工》 *

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