CN112322682A - 一种制备无苦味植物寡肽的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于制备无苦味植物寡肽的酶解植物寡肽的生产方法，选择食品级植物蛋白为原料，加入酶水解，水解过程中通过加入酸碱维持水解液的pH在9.0±0.5，水解度为40%‑‑60%，高速离心澄清酶解液，酶解时间为7‑8h，膜精细分离，浓缩、灭菌，喷雾干燥后获得无苦味的植物寡肽；通过工业生产中使用的温度计随时监控温度，然后随时补充燃料保持温度的不变使酶解时间增长至7‑8个小时，本申请的方法能达到年产量200吨，得到的小分子活性肽收率高达70‑90%。

Description

一种制备无苦味植物寡肽的方法

技术领域

本发明涉及酶解法应用及植物寡肽的生产方法，具体涉及一种用于制备无苦味植物寡肽的酶解植物寡肽的生产方法。

背景技术

肽是氨基酸的线性聚合物，含氨基酸残基50 个以上的通常称为蛋白质，低于50个氨基酸残基的称为肽。最简单的肽由两个氨基酸残基组成，称为二肽，含3个、4个、5个氨基酸残基的肽分别称为三肽、四肽、五肽。通常把含几个至十几个氨基酸残基的肽链统称为寡肽，更长的肽链称为多肽（polypeptide）。有的学者把超过12个而不多于20个氨基酸残基的称为寡肽，含20个以上氨基酸残基的称为多肽或低聚肽。植物寡肽是以大豆或大豆蛋白为原料，经过水解、分离、灭菌、干燥等工艺制备的寡肽。

与植物蛋白相比，植物寡肽除氨基酸组成与植物蛋白一样具有优质蛋白的特点外，还具有植物蛋白所不具备的良好加工性能：无豆腥味、无蛋白变性、酸性不沉淀、加热不凝固、易溶于水、流动性好等，而且具有高营养易吸收、降血压、降胆固醇、促进脂质代谢、促进微生物生长、低抗原、调节血糖、提高耐力、促进矿物质吸收等多种有益生理功能，因而其应用广泛，附加值极高。

植物蛋白在水解过程中会产生有苦味的肽，使得植物蛋白水解产物-植物寡肽有苦味，其苦味与植物蛋白的水解度直接相关，合适的水解度一般为8%—10%，但是实际生产时为了提高植物寡肽的产率及功能特性，水解度一般不低于40%，所以一般植物寡肽都有苦味，有的甚至苦的不能入口，大大限制了植物寡肽的应用，进而大大降低了其附加值。

植物寡肽苦味的除苦方法常有活性炭吸附法、控制水解度法、微生物法、掩盖法、酶法等。活性炭吸附法虽大大降低了植物寡肽的得率，但难以工业化生产，而且改变了植物寡肽的氨基酸组成比例，进而大大降低了其营养价值，破坏了一些有益的生理功能。控制水解度法使植物寡肽的得率太低，根本无法工业化生产，且丢失了一些有益的生理功能。微生物法使植物寡肽的工艺变复杂，难以稳定，尚处于探索阶段，还没有工业化。掩盖法无法完全除去苦味，且由于添加了一些掩盖成分，其成本大大增加，应用范围也大大受限。酶法是目前探索得较多的方法，酶法反应时间长，设备要求较高，且酶是蛋白质易引起糖液过滤困难。

中国申请“无苦味大豆寡肽的生产工艺”，公开了一种无苦味大豆寡肽的生产工艺，包括选料、酶解、离心、膜分解与浓缩、灭菌和干燥程序，该方法得到的寡肽产量有局限性，年产量不超过1吨，不能工业化大量生产，且酶解的时间不能超过5个小时，小分子活性肽收率只有40%左右，苦味在某些情况下还是会出现。专利“一种复合酶组合物、其应用及大豆寡肽的生产方法”，公开了使用大豆蛋白水解酶与风味酶制备无苦味的大豆寡肽，该方法的可获得的大豆寡肽无苦味，溶解性好，但是该工艺的产量不够高，损耗严重，年产量只有1吨左右；而且最小分子量的肽含量不稳定不够高，只有6%左右。

针对现有工艺的缺点，本申请的目的及所要解决的技术问题.能更大工业化量产，满足市场需求，并且增加酶解的时间（可达7到8个小时），得到更高收率的小分子活性肽含量。通过检索，我们发现目前尚未有文献报道通过酶法可以获得工业化生产、收率高，且不改变植物寡肽的氨基酸组成比例（人体所需的17种氨基酸）、不破坏植物寡肽有益的生理功能的无苦味植物寡肽的生产方法。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于通过对水解酶的种类和用量配比的改进，提供一种植物寡肽的生产方法，尤其提供一种用于制备无苦味植物寡肽的酶解法。用本发明的生产方法获得的植物寡肽完全无苦味，工艺简单、得率高，适合工业化生产。

发明人经过大量试验和不懈努力，最终获得了一种制备无苦味植物寡肽的方法，选择食品级植物蛋白为原料，加入酶水解，水解过程中通过加入酸碱维持水解液的pH在9.0±0.5，水解度为40%--60%，高速离心澄清酶解液，酶解时间为7-8h，膜精细分离，浓缩、灭菌，喷雾干燥后获得无苦味的植物寡肽；通过工业生产中使用的温度计随时监控温度，然后随时补充燃料保持温度在40—45℃不变使酶解时间增长。

所述酶由植物蛋白水解酶与风味酶按4:3-5:6的重量比组成，其用量为植物蛋白重量的0.6%-0.8%；

所述植物蛋白水解酶的酶活为7.2万U/g，风味酶的酶活为500LAPU/g。

本申请中的水解酶为植物蛋白水解酶与风味酶，“一种复合酶组合物、其应用及大豆寡肽的生产方法”中使用的酶为大豆蛋白水解酶，大豆蛋白水解酶用的是盐法水解，而植物蛋白水解酶用的是酶法水解，该酶法水解工艺难度较大，但是此方法能最大限度保留原料的风味，对敏感氨基酸没有破坏；且本申请通过控制温度的方法使酶解时间增长，在工艺上增加了一套设备，这样生产出来的产品肽含量更高，并且产量更多。

与现有技术相比，本发明制备无苦味植物寡肽的方法，具有以下优点和显著的进步：（1）获得的植物寡肽完全无苦味，无需活性炭吸附或通过掩盖法去除苦味。（2）酶解法的植物蛋白水解酶与风味酶原料充足，成本低。（3）不改变植物寡肽的氨基酸组成比例，不破坏植物寡肽有益的生理功能。（4）工艺简单且得率高，适合工业化生产。（5）本申请的方法能达到年产量200吨，并且酶解时间可以达到7-8个小时，这样得到的小分子活性肽收率更高，有70-90%左右。

附图说明

图1为生产工艺流程图。

具体实施方式

为能清楚说明本发明方案的技术特点，下面结合具体实施例，对本发明进行阐述。但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。

实施例1

植物蛋白水解酶Promatex，酶活力为7.2万U/g，Flavourzyme风味酶，酶活力为500LAPU/g，均为工业化食品及蛋白酶。

一种制备无苦味植物寡肽的方法：选择食品级植物蛋白为原料，加入酶水解，其中酶由植物蛋白水解酶与风味酶按5:3的重量比组成，用量为植物蛋白重量的0.6%，水解过程中通过加入酸碱维持水解液的pH8.5，水解度为40%，高速离心澄清酶解液，酶解时间为7小时，膜精细分离，浓缩、灭菌，喷雾干燥后获得无苦味的植物寡肽固粉。通过工业生产中使用的温度计随时监控温度，然后随时补充燃料保持温度的不变使酶解时间增长。

上述步骤详细说明：开启高速离心机，然后通过泵将调好应罐内的物料送入高速离心机内进行分离；将分离后得到的沉渣转入第一套中和灭菌罐内进行中和灭菌，再通过泵将经中和灭菌后的沉渣送入第一套喷雾干燥系统中的喷塔内，进行喷雾干燥后，即可获得大豆浓缩蛋白。将上述分离的液清提取，再先后通过过滤膜、浓缩膜进行过滤并浓缩、备用；将上述的过滤并浓缩好的液清泵入第二套中和灭菌罐内进行中和灭菌；将前面步骤所述进行中和灭菌后的液清再泵入第二套喷雾干燥系统中的喷塔内，进行喷雾干燥后，即获得无苦味大豆寡肽粉。

检测结果显示：产品完全无苦味，固粉中总蛋白含量(干基)85.5%；酸溶蛋白含量占总蛋白含量95%。

检测方法：称取0.2-0.5g粉剂，放入100ml烧杯中，加入50ml水，煮沸5min，在40-50℃下保温30min，徐徐混入10ml6%的硫酸铜摇匀，静置1h，过滤，残渣按凯氏定氮法将残渣消化，蒸馏，测定收集液中氨，计算出含氮量。

实施例2

植物蛋白水解酶Promatex，酶活力为7.2万U/g，Flavourzyme风味酶，酶活力为500LAPU/g，均为工业化食品及蛋白酶。

一种制备无苦味植物寡肽的方法：选择食品级植物蛋白为原料，加入酶水解，其中酶由植物蛋白水解酶与风味酶按4:3的重量比组成，用量为植物蛋白重量的0.8%，水解过程中通过加入酸碱维持水解液的pH9.0，水解度为60%，高速离心澄清酶解液，酶解时间为8小时；膜精细分离，浓缩、灭菌获得无苦味的植物寡肽液体样产品。通过工业生产中使用的温度计随时监控温度，然后随时补充燃料保持温度的不变使酶解时间增长。

检测结果显示：肽液体样产品完全无苦味，含固量为15%，总蛋白含量(干基)

95.5%；酸溶蛋白含量占总蛋白含量98%。

对比实施例1

制备方法同实施例1，但酶为植物蛋白碱性酶与风味酶的混合物，其重量比为 5:3 ；酶的添加量同实施例1，植物蛋白碱性酶的酶活力为7.2万U/g。

检测结果显示：产品完全无苦味，固粉中总蛋白含量(干基)55.5%；酸溶蛋白含量占总蛋白含量65%。

对比实施例2

制备方法同实施例2，但酶为中性蛋白酶与植物水解酶的混合物，其重量比为3:4；酶的添加量同实施例1，中性蛋白酶的酶活力为6.5万U/g。

检测结果显示：肽液体样产品完全无苦味，含固量为13%，总蛋白含量(干基)

58.5%；酸溶蛋白含量占总蛋白含量55%。

对比实施例3

制备方法同实施例1，但酶为植物蛋白水解酶与风味酶的混合物，其重量比为 5:7；酶的添加量同实施例1。

检测结果显示：产品完全无苦味，总蛋白含量(干基)60.5%；酸溶蛋白含量占总蛋白含量75%。

我们将实施例1制备的多肽与本公司现有技术生产的多肽（一种复合酶组合物、其应用及大豆寡肽的生产方法）进行了分子量的检测，具体结果见下表1、表2。

表1 现有技术生产多肽的分子量检测

表2 实施例1生产多肽的分子量检测

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Claims (5)

1.一种制备无苦味植物寡肽的方法，其特征在于：在植物蛋白原料中加入复合酶水解，水解过程中通过加入酸碱维持水解液的pH在9.0±0.5，水解度为40%--60%，高速离心澄清酶解液，酶解时间7-8h，膜精细分离，浓缩、灭菌，喷雾干燥后获得无苦味的植物寡肽；

所述复合酶由植物蛋白水解酶、风味酶组成。

2.如权利要求1所述的一种制备无苦味植物寡肽的方法，其特征在于：所述复合酶由中植物蛋白水解酶、风味酶的重量比为4:3-5:6。

3.如权利要求1所述的一种制备无苦味植物寡肽的方法，其特征在于：所述复合酶的用量为植物蛋白原料重量的0.6%-0.8%。

4.如权利要求1所述的一种制备无苦味植物寡肽的方法，其特征在于：酶解过程中还需控制温度，可通过补充燃料保持温度在40—45℃。

5.如权利要求2所述的一种制备无苦味植物寡肽的方法，其特征在于：所述植物蛋白水解酶的酶活为7.2万U/g，风味酶的酶活为500LAPU/g。

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