CN112322556B - 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 - Google Patents
耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112322556B CN112322556B CN202011416462.3A CN202011416462A CN112322556B CN 112322556 B CN112322556 B CN 112322556B CN 202011416462 A CN202011416462 A CN 202011416462A CN 112322556 B CN112322556 B CN 112322556B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- staphylococcus nepalensis
- nepalensis
- staphylococcus
- fermentation
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/44—Staphylococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种能耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌的培养方法。耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，其特征在于，所述的尼泊尔葡萄球菌于2020年9月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO:M 2020505。本发明所提供的尼泊尔葡萄球菌的培养方法，包括以下的步骤：S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基；S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基；S3：发酵培养。本发明的有益效果在于：本发明所提供的尼泊尔葡萄球菌，其耐高盐特性优异，能适应在高盐环境下处理废水，为高盐发酵废水处理提供了一种新的微生物处理方法；本发明的菌株，处理高盐废水效果优异；可使发酵废水中的残糖含量降低至0.3～0.8%。
Description
技术领域
本发明属于微生物培养技术领域，具体涉及一种耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，以及该菌株的培养方法。
背景技术
关于尼泊尔葡萄球菌菌株的培养方法、以及其能作用于废水尤其是高盐发酵废水并且能针对废水进行有效的处理，目前鲜有文献披露。
而关于高盐发酵废水，CN109136095A披露了一种味精发酵生产废水，采用三种微生物，能够有效地利用废水来制备微生物菌体蛋白，同时净化了废水，但是对于这三种微生物是否具有高耐盐性能以及在高盐环境下是否也具有良好的净化废水的能力，上述的专利并未涉及。而事实上，在有机酸及氨基酸发酵生产废水中，盐含量非常高，若采用微生物处理上述废水，微生物必须具有优异的耐盐性能。
因此，需要寻找并培养一种合适的耐盐的微生物，使其在高盐环境下能快速的降解有机酸及氨基酸发酵生产废水中残糖。
发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种能在高盐环境下快速降解有机酸及氨基酸发酵生产废水中残糖的尼泊尔葡萄球菌；还提供了上述菌株的培养方法；
耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，于2020年9月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO:M 2020505。
上述的耐盐菌尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1在LB 培养基中，37℃培养24h后，培养基中呈现浅黄色不透明的单菌落，表面湿润有光泽，边缘为光滑，直径3-4mm；革兰氏染色阳性G+,细胞为圆形或卵圆形，呈葡萄状排列，无鞭毛，无荚膜，不产生芽孢。
上述的耐盐菌尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的 16sRNA其核苷酸序列如序列表1所示。
上述的耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌的培养方法，包括以下的步骤：
S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.3～0.5％，蛋白胨0.5～1.5％，氯化钠0.5～0.8％；
S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有质量百分比浓度为10～25wt％(以下均为质量百分比)硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH或氨水调节pH值为5.0～7.5，无需高温灭菌。
S3：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在25～40℃下培养12～18h，然后按照0.25～8％的接种量接入发酵培养基中，在25～40℃下培养40～90h。
在制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基时，所采用的NaOH的浓度为4M。
优选的，S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.4％，蛋白胨0.8％，氯化钠0.6％；
优选的，S2中：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有质量百分比浓度为20％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH调节pH值为6.0，此过程无需高温灭菌；
优选的，S3中：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在37℃下培养15h，然后按照4％的接种量接入发酵培养基中，在37℃下培70h。
优选的，上述的培养方法包括以下的步骤：
S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.4％，蛋白胨0.8％，氯化钠0.6％；
S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有质量百分比浓度为20％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH调节pH值为6.0；
S3：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在37℃下培养15h，然后按照0.4％的接种量接入发酵培养基中，在37℃下培70h。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明所提供的尼泊尔葡萄球菌，其耐高盐环境优异，能适应在高盐环境下处理废水，为高盐发酵废水处理提供了一种新的微生物处理方法；本发明的菌株，处理高盐废水效果优异；可使发酵废水中残糖的含量降低至0.3～ 0.8％；
(2)本发明在对尼泊尔葡萄球菌进行培养时，所提供的培养基，其主体成分为高盐废水，盐浓度达到10～20％左右，能够抑制绝大多数微生物的生长繁殖，为尼泊尔葡萄球菌提供了天然选择培养基，因此，该培养基无需灭菌，大大减少了发酵成本。
(3)采用本发明的菌株对高盐废水进行降解，最终使得高盐废水中含有 0.6％左右的残糖，为本发明所提供的尼泊尔葡萄球菌提供了丰富的营养成分，可使得该菌株快速生长，菌体蛋白干重可达20～38g/L。
具体实施方式
为了能使本领域技术人员更好的理解本发明，现结合具体实施方式对本发明进行更进一步的阐述。
实施例1
耐盐菌尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1于2020年9月 16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO:M 2020505；保藏地址：中国武汉武汉大学。其所具有的特点如下：
菌株在LB培养基中，37℃培养18h后，培养基中呈现浅黄色不透明的单菌落，表面湿润有光泽，边缘为光滑，直径3-4mm；革兰氏染色阳性G+,细胞为圆形或卵圆形，常葡萄状排列，无鞭毛，无荚膜，不产生芽孢。
上述的尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的16sRNA序列表如序列1所示。
上述的尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1，其摇瓶培养方法如下：
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.5％，蛋白胨1％，氯化钠0.55％；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的摇瓶发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有18wt％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用4M NaOH调节pH值为7，发酵培养基无需灭菌；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1活化培养方法为：将 LB平板上的单菌落接种于的种子培养基中，在温度39℃下，180rpm摇床震荡培养15h，后按照5％的接种量接入未灭菌的发酵培养基中，在温度37℃下，180rpm 摇床震荡培养80小时，残糖由2.56％降至0.46％，菌体量24h达8.6g/L，48h达 19.6g/L，72h达到23.5g/L，80h下瓶时菌体量干重达到26.5g/L。
实施例2
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.35％，蛋白胨0.75％，氯化钠0.75％；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的摇瓶发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有14.56wt％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用氨水调节pH值为7.2；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1活化培养方法为：将 LB平板上的单菌落接种于的种子培养基中，在温度40℃下，180rpm摇床震荡培养16h，后按照5％的接种量接入发酵培养基中，在温度37℃下，180rpm摇床震荡培养72小时，残糖由2.61％降至0.56％，菌体干重达到22.3g/L。
实施例3
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.45％，蛋白胨1.2％，氯化钠0.65％；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的摇瓶发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有10.23wt％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用氨水调节pH值为5.0；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1活化培养方法为：将 LB平板上的单菌落接种于的种子培养基中，在温度40℃下，180rpm摇床震荡培养18h，后按照4％的接种量接入发酵培养基中，在温度40℃下，180rpm摇床震荡培养82小时，残糖由2.41％降至0.79％，菌体干重达到20.1g/L。
实施例4
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.4％，蛋白胨0.95％，氯化钠0.5％；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1的摇瓶发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有23.5％硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用液氨调节pH值为7.5；
尼泊尔葡萄球菌(Staphylococcus nepalensis)A-A10-1活化培养方法为：将 LB平板上的单菌落接种于的种子培养基中，在温度36.5℃下，180rpm摇床震荡培养12h，后按照8％的接种量接入发酵培养基中，在温度37℃下，180rpm摇床震荡培养90小时，残糖由2.56％降至0.68％，菌体干重达到17.1g/L。
实施例5
通过向高盐发酵废水处理系统中投加耐高盐高效降解的尼泊尔葡萄球菌，达到快速降解发酵废水中残糖的目的，并通过固液分离除去菌体后，浓缩回收发酵废水所含粗盐。
取含盐20.36％(质量百分比)，含糖量3.08％的谷氨酸废水装入发酵罐，初始pH采用液氨调节为7.0，发酵温度为34.5℃，按照3％(质量百分比)接入 OD600达到6.5的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养65小时后，其含糖量降至为0.65％。
发酵液加热至70℃，并加入0.15‰的聚丙烯酸钠絮凝剂，实现蛋白絮凝，后采用板框压滤进行固液分离，板框滤布目数200目，过滤获得的菌体蛋白粗品量达25.3g/L。滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度85℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例6
取含盐16.36％，含糖量2.65％的谷氨酸废水装入发酵罐，初始pH采用液氨调节为5.0，发酵温度为37℃，按照1％接入OD600为7.8的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养56小时后，其含糖量降至为0.74％。
发酵液加热至70℃，并加入0.15‰的聚丙烯酸钠絮凝剂，实现蛋白絮凝，后采用板框压滤进行固液分离，板框滤布目数600目，过滤获得的菌体蛋白粗品量达37.8g/L。滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度80℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例7
取含盐13.69％，含糖量2.36％的谷氨酸废水装入发酵罐，初始pH采用液氨调节为6.0，发酵温度为30℃，按照1％接入OD600为8.6的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养59小时后，其含糖量降至为0.71％。
通过碟片离心机固液分离，菌体蛋白经进一步烘干，其粗品量达23.6g/L；滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度100℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例8
取含盐12.04％，含糖量1.96％的谷氨酸废水装入发酵罐，初始pH用液氨调节为6.5，发酵温度为33℃，按照1％接入OD600为7.06的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养48小时后，其含糖量降至为0.69％。
通过碟片离心机固液分离，菌体蛋白经进一步烘干，其粗品量达21.9g/L；滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度60℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例9
取含盐10.06％，含糖量2.31％的赖氨酸废水装入发酵罐，初始pH用液氨调节为7.0，发酵温度为40℃，按照1％接入OD600为8.12的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养70小时后，其含糖量降至为0.63％。
通过碟片离心机固液分离，菌体蛋白经进一步烘干，其粗品量达24.6g/L；滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度90℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例10
本发明通过向高盐发酵废水处理系统中投加耐高盐高效降解的尼泊尔葡萄球菌，达到快速降解发酵废水中残糖的目的，并通过固液分离除去菌体后，浓缩回收发酵废水所含粗盐。
取含盐17.51％，含糖量2.13％的苏氨酸废水装入发酵罐，初始pH用液氨调节为5.5，发酵温度为28℃，按照1％接入OD600为5.39的尼泊尔葡萄球菌种子液，通风培养63小时后，其含糖量降至为0.58％。
通过碟片离心机固液分离，菌体蛋白经进一步烘干，其粗品量达21.3g/L；滤液采用先多效蒸发，随后流化床干燥，干燥温度90℃，制得硫酸铵粗盐。
实施例11
实施例5～10以及CK例中降糖量、粗盐回收率等指标相比较的结果如下表1所示：
CK为空白样，即不使用任何菌剂或者是处理剂的试样。
表1实施例对发酵生产废水处理的效果
传统生物处理方法的处理效果受盐分影响较大，高浓度无机盐可通过升高环境渗透压破坏微生物的细胞膜和菌体内的酶，从而破坏微生物的生理活动，对废水生物处理产生毒害作用。通过向高盐发酵废水处理系统中投加耐高盐高效降解的尼泊尔葡萄球菌，提高系统的生物处理效率，达到快速降解发酵废水中残糖的目的，并通过固液分离除去菌体后，浓缩回收发酵废水所含粗盐。从以上的对比可以看出，在温度较高，通风时长长的情况下，粗盐得率高。
序列表
<110> 济南航晨生物科技有限公司
山东晨彰生物科技有限公司
山东卓苒生物科技有限公司
<120> 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1457
<212> DNA
<213> 16s基因序列(gene sequence)
<400> 1
ccgggggggg gtgctataca tgcaagtcga gcgaacagat aaggagcttg ctcctttgac 60
gttagcggcg gacgggtgag taacacgtgg gtaacctacc tataagactg gaataactcc 120
gggaaaccgg ggctaatgcc ggataatatt tagaaccgca tggttctaaa gtgaaagatg 180
gttttactat cacttataga tggacccgcg ccgtattagc tagttggtgg ggtaatggct 240
taccaaggca acgatacgta gccgacctga gagggtgatc ggccacactg gaactgagac 300
acggtccaga ctcctacggg aggcagcagt agggaatctt ccgcaatggg cgaaagcctg 360
acggagcaac gccgcgtgag tgatgaaggt cttcggatcg taaaactctg ttattaggga 420
agaacaaatg tgtaagtaac tgtgcacgtc ttgacggtac ctaatcagaa agccacggct 480
aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt aggtggcaag cgttatccgg aattattggg 540
cgtaaagcgc gcgtaggcgg tttcttaagt ctgatgtgaa agcccacggc tcaaccgtgg 600
agggtcattg gaaactggga aacttgagtg cagaagagga aagtggaatt ccatgtgtag 660
cggtgaaatg cgcagagata tggaggaaca ccagtggcga aggcgacttt ctggtctgta 720
actgacgctg atgtgcgaaa gcgtggggat caaacaggat tagataccct ggtagtccac 780
gccgtaaacg atgagtgcta agtgttaggg ggtttccgcc ccttagtgct gcagctaacg 840
cattaagcac tccgcctggg gagtacgacc gcaaggttga aactcaaagg aattgacggg 900
gacccgcaca agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgaaga accttaccaa 960
atcttgacat cctttgacaa ctctagagat agagtcttcc ccttcggggg acaaagtgac 1020
aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga 1080
gcgcaaccct taagcttagt tgccagcatt aagttgggca ctctaagttg actgccggtg 1140
acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcatg ccccttatga tttgggctac 1200
acacgtgcta caatggacaa tacaaagggc agctaaaccg cgaggtcatg caaatcccat 1260
aaagttgttc tcagttcgga ttgtagtctg caactcgact acatgaagct ggaatcgcta 1320
gtaatcgtag atcagcatgc tacggtgaat acgttcccgg gtcttgtaca caccgcccgt 1380
cacaccacga gagtctgtaa cacccgaagc cggtggagta accatttatg gagctagccg 1440
tcgaaggtga caaaagg 1457
Claims (9)
1.耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，其特征在于，所述的尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis）A-A10-1于2020年9月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO: M 2020505。
2.如权利要求1所述的耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，其特征在于，所述的尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis）A-A10-1在LB培养基中，于37℃培养24h后，培养基中呈现浅黄色不透明的单菌落，表面湿润有光泽，边缘为光滑，直径3-4mm；革兰氏染色阳性G+，细胞为圆形或卵圆形，呈葡萄状排列，无鞭毛，无荚膜，不产生芽孢。
3.如权利要求1所述的耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌，其特征在于，所述的尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis）A-A10-1菌株的16sRNA核苷酸序列如序列表中序列1所示。
4.如权利要求1所述的耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌的培养方法， 包括以下的步骤：
S1：准备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.3～0.5%，蛋白胨0.5～1.5%，氯化钠0.5～0.8%；
S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1 的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有10～25wt%硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH或氨水调节pH值为5.0～7.5；
S3：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在25～40℃下培养12～18h，然后按照0.25～8%的接种量接入发酵培养基中，在25～40℃下培养40～90h。
5.如权利要求4所述的培养方法，其特征在于， NaOH的浓度为4M。
6.如权利要求4所述的培养方法，其特征在于，S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.4%，蛋白胨0.8%，氯化钠0.6%。
7.如权利要求4所述的培养方法，其特征在于，S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1 的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有20wt%硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH调节pH值为6.0。
8.如权利要求4所述的培养方法，其特征在于，S3：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在37℃下培养15h，然后按照4%的接种量接入发酵培养基中，在37℃下培养70h。
9.如权利要求4所述的培养方法，包括以下的步骤：
S1：制备尼泊尔葡萄球菌培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.4%，蛋白胨0.8%，氯化钠0.6%；
S2：制备尼泊尔葡萄球菌发酵培养基：
尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1 的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有质量百分比浓度为20%硫酸铵的谷氨酸高浓废液，采用NaOH调节pH值为6.0；
S3：发酵培养：
在培养尼泊尔葡萄球菌（Staphylococcus nepalensis ）A-A10-1时，具体的步骤为：将LB平板上的单菌落接种于种子培养基中，在37℃下培养15h，然后按照0.4%的接种量接入发酵培养基中，在37℃下培养70h。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011416462.3A CN112322556B (zh) | 2020-12-07 | 2020-12-07 | 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011416462.3A CN112322556B (zh) | 2020-12-07 | 2020-12-07 | 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112322556A CN112322556A (zh) | 2021-02-05 |
| CN112322556B true CN112322556B (zh) | 2022-02-18 |
Family
ID=74301630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011416462.3A Active CN112322556B (zh) | 2020-12-07 | 2020-12-07 | 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112322556B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113371848B (zh) * | 2021-06-29 | 2022-09-16 | 内蒙古阜丰生物科技有限公司 | 氨基酸废水的综合处理工艺 |
| CN113402124B (zh) * | 2021-07-02 | 2022-09-16 | 内蒙古阜丰生物科技有限公司 | 一种氨基酸废水的降糖收盐方法 |
| CN117187109B (zh) * | 2023-07-26 | 2024-03-15 | 中国海洋大学 | 一种尼泊尔葡萄球菌及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111733106A (zh) * | 2020-07-06 | 2020-10-02 | 山东卓苒生物科技有限公司 | 松鼠葡萄球菌f-e8-1的培养方法及应用 |
| CN111763642A (zh) * | 2020-07-06 | 2020-10-13 | 山东卓苒生物科技有限公司 | 能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌f-e8-1、应用及应用方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105358141A (zh) * | 2013-05-01 | 2016-02-24 | 尼奥酷里私人有限公司 | 治疗细菌感染的方法 |
-
2020
- 2020-12-07 CN CN202011416462.3A patent/CN112322556B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111733106A (zh) * | 2020-07-06 | 2020-10-02 | 山东卓苒生物科技有限公司 | 松鼠葡萄球菌f-e8-1的培养方法及应用 |
| CN111763642A (zh) * | 2020-07-06 | 2020-10-13 | 山东卓苒生物科技有限公司 | 能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌f-e8-1、应用及应用方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112322556A (zh) | 2021-02-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112322556B (zh) | 耐受高盐环境的尼泊尔葡萄球菌及培养方法 | |
| CN112408607B (zh) | 尼泊尔葡萄球菌在降解发酵工业有机废水中残糖的应用 | |
| CN107354188A (zh) | 大肠埃希氏菌JL‑GlcN发酵生产N‑乙酰氨基葡萄糖的工艺 | |
| CN113430151B (zh) | 一株谷氨酸棒杆菌及其在发酵生产l-缬氨酸中的应用 | |
| CN110655198B (zh) | 利用异养硝化-好氧反硝化的副球菌菌株处理含氮废水的方法 | |
| CN111662848B (zh) | 耐盐地衣芽孢杆菌a-a2-10的培养方法及应用 | |
| CN106434421A (zh) | 一株ε‑聚赖氨酸高产菌株及生产ε‑聚赖氨酸方法 | |
| CN111733106B (zh) | 松鼠葡萄球菌f-e8-1的培养方法及应用 | |
| CN106278493A (zh) | 分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法 | |
| CN110791462B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其在发酵生产腺苷中的应用 | |
| CN102994430B (zh) | 一株细菌纤维素产生菌株及其应用 | |
| CN110218682B (zh) | 一株假真菌样芽孢杆菌及其在污泥减量中的应用 | |
| CN111763642B (zh) | 能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌f-e8-1、应用及应用方法 | |
| CN110656057B (zh) | 异养硝化-好氧反硝化的副球菌菌株、种子液及其制备方法和应用 | |
| CN116716231B (zh) | 一株大肠埃希氏菌及其在发酵生产色氨酸中的应用 | |
| CN104232552A (zh) | 一种清洁生产谷氨酸钠的环保工艺 | |
| CN113817635A (zh) | 一种利用大豆乳清废水培养芽孢杆菌的方法 | |
| El-Rab et al. | Costless and huge hydrogen yield by manipulation of iron concentrations in the new bacterial strain Brevibacillus invocatus SAR grown on algal biomass | |
| CN104211610A (zh) | 一种谷氨酸钠提取新工艺 | |
| CN111378592A (zh) | 地衣芽孢杆菌及该菌处理恶臭有机废水净化水体的方法 | |
| CN104211611A (zh) | 一种谷氨酸钠发酵新工艺 | |
| CN103468606A (zh) | 一株产酸克雷伯氏菌及其在生产蒜糖醇中的应用 | |
| CN114230380A (zh) | 一种7-氨基头孢烷酸生产废弃物的利用方法 | |
| CN112760228A (zh) | 一种菌-藻共生絮凝体系的制备方法 | |
| CN109234328B (zh) | 一种生产γ-聚谷氨酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |