CN112213371A

CN112213371A - 一种高通量琼脂糖凝胶电泳装置

Info

Publication number: CN112213371A
Application number: CN201910627826.3A
Authority: CN
Inventors: 林继伟; 王洪琦
Original assignee: Huada Qinglan Biotechnology Wuxi Co ltd
Current assignee: Huada Qinglan Biotechnology Wuxi Co ltd
Priority date: 2019-07-12
Filing date: 2019-07-12
Publication date: 2021-01-12

Abstract

本发明涉及一种琼脂糖凝胶电泳装置，其通过以下步骤制备获得：1)将两个固定挡板分别固定在一块玻璃方板一面的的两个相对侧，固定挡板上有限位孔，在玻璃方板的同一面另外两个相对侧放置活动挡板；2)将融化的琼脂糖胶液直接倒在放置有固定挡板和活动挡板的玻璃方板上；3)在琼脂糖胶液未凝固时，放入已在梳架上预排列好的梳子，梳架的支脚插入限位孔中；4)待琼脂糖胶液凝固后，除去梳架和梳子，在电泳槽外加样，加完后将琼脂糖凝胶连同玻璃方板一同放入电泳槽；5)在一个电泳槽叠加多层琼脂糖凝胶。

Description

一种高通量琼脂糖凝胶电泳装置

技术领域

本发明涉及一种电泳装置，尤其是一种可高通量检测样品的琼脂糖凝胶电泳装置。

背景技术

琼脂糖凝胶电泳技术是现代生物实验室必不可少的DNA检测和回收工具。琼脂糖作为一种高分子材料，其水溶液在高温时融化，低温时凝固，凝固后形成多孔状的结构，可用于不同长度DNA分子的分离。在琼脂糖凝固之前，在琼脂糖胶液中插入固定排列的齿，然后再在琼脂糖凝固后把齿拔掉，就可在琼脂糖上形成与齿形状相同的小孔。这种具有固定排列的齿被称为梳子。而这些在凝固的琼脂糖上出现的小孔被称为胶孔。

在琼脂糖电泳检测DNA样品时，含有DNA的溶液被转移到胶孔中，在电场的作用下，带负电的DNA就进入琼脂糖凝固后形成的多孔状结构之中。一般来说，较长的DNA分子在这种结构中移动较慢。因此不同长度的DNA分子就可以在凝胶中分离成不同位置的条带。用工具将含有这些条带的凝胶切下，可回收目标长度的DNA分子。

一块琼脂糖凝胶中一般有2-4排胶孔，每排胶孔有10-40个胶孔，根据功能的不同，凝胶的大小也不一样，一般胶孔的密度不超过0.5个/平方厘米。而每个电泳槽只能作1-2块凝胶的电泳。因此一次检测的DNA样品数(即通量)最多在200个。如果样品数超过1千，这种装置的通量就不够了。

发明内容

本发明通过提高胶孔密度，并增加凝胶层数的方式，可实现在一个正常大小的电泳槽中同时检测2000个样品的目的。

本发明提供一种琼脂糖凝胶电泳装置，所述装置通过下述步骤制备获得：

1)将两个固定挡板分别固定在一块玻璃方板一面的两个相对侧，固定挡板上有限位孔，在玻璃方板的同一面的另外两个相对侧放置活动挡板；

2)将融化的琼脂糖胶液直接倒在放置有固定挡板和活动挡板的玻璃方板上；

3)在琼脂糖胶液未凝固时，放入已在梳架上预排列好的梳子，梳架的支脚插入限位孔中；

4)待琼脂糖胶液凝固后，除去梳架和梳子；

5)在电泳槽外加样，加完后放入电泳槽；

6)在一个电泳槽中叠加多层琼脂糖凝胶。

在一些实施方案中，所述的玻璃方板，是一种耐热玻璃板，优选是高硼硅玻璃板，更优选是高硼硅钢化玻璃板。

在一些实施方案中，所述的玻璃方板，其长为15-40厘米，优选为30厘米；其宽为15-30厘米，优选为20厘米；其厚度为2-5毫米，优选为3毫米。

在一些实施方案中，所述的固定挡板，其长度与所述的玻璃方板的宽或长一致，厚度为3-10毫米，优选为5毫米。其宽度为10-40毫米，优选为29毫米；固定挡板上有2个或更多个固定排列的限位孔；固定挡板被固定在所述玻璃方板的两侧短边或两侧长边。

在一些实施方案中，所述的活动挡板，其位于固定挡板所在边之外的另两边，可方便拆卸；加了所述固定挡板和所述活动挡板的所述玻璃方板，被称为玻璃方槽；已经制备上琼脂糖凝胶，并拆卸了活动挡板的玻璃方槽，被称为玻璃方胶。

在一些实施方案中，所述的梳架，其上可预排列好梳子，只需将梳子和梳架移动到所述的玻璃方板上即可完成梳子的放置，一个梳架上可放置2-10枚梳子，优选是4枚；梳架两侧支脚插入所述的限位孔；一个所述的玻璃方板可放置2-10个梳架，优选是放置4个梳架。

在一些实施方案中，所述的梳子，其梳齿的单位间距为2.25毫米、4.5毫米或其它2.25毫米的倍数，梳齿的单位间距是指相邻两个梳齿的左边缘之间的距离；一枚梳子上有16-97个梳齿，优选是24-25个梳齿。

在一些实施方案中，所述的电泳槽，其槽内有一个放胶平台，平台的长为20-40厘米，优选为30.1厘米；平台的宽为15-30厘米，优选为18厘米；放胶平台与槽内最高液面之差为2-10厘米，优选为5-6厘米。

在一些实施方案中，所述的玻璃方胶，其点样操作可不在所述的电泳槽内进行，这样方便并行点样。

在一些实施方案中，所述的玻璃方胶，可以叠加起来，一起放置到所述的电泳槽中电泳，叠加的玻璃方胶，其数量为1-10，优选是2-5。

本发明的电泳槽具有很高的通量，可以在一个电泳槽中一次电泳完成2000个或更多的样品的检测。

附图说明

通过以下详细的描述并结合附图将更充分地理解本发明，其中：

图1是玻璃边槽的示意图。

图2是梳子的示意图。

图3是梳架的示意图。

图4显示了将4个梳架放入玻璃边槽。

图5是电泳槽的示意图。

具体实施方式

本发明的一个具体实施方案是一个可同时检测2000个样品的电泳装置，其特征为：

所述的玻璃方板，其长为30厘米，宽为20厘米，厚为3毫米(参见图1玻璃方板)，其材质为高硼硅钢化玻璃；

所述的固定挡板，其长为20厘米，宽为2.9厘米，高为5毫米，在固定挡板上有4个所述的限位孔(参见图1固定挡板)，将其固定到所述玻璃方板的宽边一侧，固定挡板的长边与玻璃方板的宽边对齐，形成的装置被称为玻璃边槽(参见图1玻璃边槽)。固定用的是RTV硅橡胶。固定挡板的两端有向内的斜面，用于放置厚为5毫米、宽为1厘米、长为30厘米的硅胶条。当两条硅胶条紧密贴合所述玻璃方板的两个长边以及所述的固定挡板的4个斜面时，可以起到不让融化的琼脂糖渗漏的作用，即构成了两个活动挡板。硅胶条可用夹子临时固定到所述的玻璃边槽。

所述的梳子(图2)，其梳齿的单位间距为4.5毫米，单位间距是指相邻两个梳齿的左侧边缘之间的距离；每枚梳子上有24或25个梳齿(图2中有25个梳齿)；梳子的梳把两侧有向外的突起，用于将其架到梳架上。

所述的梳架，可以固定4枚梳子，其形状如图3梳架所示，梳架上有4条与所述的梳子匹配的狭缝，其宽度比所述的梳子的厚度略大，例如大0.1-0.5毫米，以使梳子能够通过狭缝插入；狭缝的两侧有可供梳子搁置的平台，当梳子被放入梳架后，所有梳齿与梳架支脚站立平面的距离为1毫米。梳架上表面具有下陷的半圆柱槽，用于在拔梳子时捏住梳子的。梳架下方有与所述的限位孔匹配的梳脚(即支脚)，每侧2个梳脚。梳架的作用是可以快速将多枚梳子同时插入到凝胶中，以防插梳子的时间太长，琼脂糖提前凝固。尤其是当琼脂糖浓度很高时适用。

所述的玻璃方槽，在灌上融化的琼脂糖胶液后，可以放置4个所述的梳架(图4)，梳架的梳脚插入限位孔，另一侧的梳脚直接放置在玻璃方板上。此时所有的梳子，其梳齿底部与所述的玻璃方板的上表面之间有1毫米的距离，这样形成的所述的胶孔，其底部还有1毫米的凝胶，即使在随后的使用中，凝胶与玻璃发生错位，也不会导致样品渗漏。

当琼脂糖凝固后，所述的梳子需要一枚一枚拔出，只需拔出5毫米即可，这样梳子还留在梳架的狭缝中，当一个梳架的4枚梳子都这样拔出后，这个梳架可以整体移出去，不至于使得众多梳子散落各处。

当4个梳架都移动出去后，再卸下两个活动挡板，留下的是所述的玻璃方胶，在这块玻璃方胶上，一共有400个胶孔，可加入400个待测DNA样品。

所述的电泳槽(图5)，其放胶平台的长边长度30.1厘米，宽边长为18厘米，放胶平台与电泳槽最高液面之差为5.5厘米，最多可层叠放置10面所述的玻璃方胶，优选为5层玻璃方胶，可同时进行2000个样品的检测。所述的玻璃方胶，放置到电泳槽时，其固定挡板与放胶平台的宽边平行，放置时，最好放置在整个电泳槽的正中。

9)当有多层所述的玻璃方胶一起电泳时，凝胶的发热量会很大，因此电泳时，电源电压不宜太高，优选是不高于100V，即不高于5V/厘米凝胶。同时电泳所在房间的气温也不宜太高，优选为不高于25摄氏度。当马上需要进行第二轮电泳时，优选是将电泳缓冲液替换成室温或更低温的。

本发明的实施方式并不限于上述实施例所述，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，本领域普通技术人员可以在形式和细节上对本发明做出各种改变和改进，而这些均被认为落入了本发明的保护范围。

Claims

1.一种琼脂糖凝胶电泳装置，所述装置通过下述步骤制备获得：

1)将两个固定挡板分别固定在一块玻璃方板的一面的两个相对侧，固定挡板上有限位孔，在玻璃方板的同一面的另外两个相对侧放置活动挡板；

4)待琼脂糖胶液凝固后，除去梳架和梳子，卸下两个活动挡板，得到制备上琼脂糖凝胶并拆卸了活动挡板的玻璃方板，称为玻璃方胶；

5)在电泳槽外加样，加完后将玻璃方胶放入电泳槽；

6)在一个电泳槽中叠加多层玻璃方胶。

2.根据权利要求1所述的电泳装置，其中所述玻璃方板是耐热玻璃板，优选是高硼硅玻璃板，更优选是高硼硅钢化玻璃板。

3.根据权利要求1所述的电泳装置，其中所述玻璃方板的长为15-40厘米，优选为30厘米；其宽为15-30厘米，优选为20厘米；其厚度为2-5毫米，优选为3毫米。

4.根据权利要求1所述的电泳装置，其中所述固定挡板的长度与所述玻璃方板的宽或长一致，厚度为3-10毫米，优选为5毫米；所述固定挡板的宽度为10-40毫米，优选为29毫米；所述固定挡板上有2个或更多个固定排列的限位孔；所述固定挡板被固定在所述玻璃方板的两侧短边或两侧长边。

5.根据权利要求1所述的电泳装置，其中一个所述梳架上预排列有2-10枚梳子，优选4枚，梳架两侧支脚插入所述限位孔；一个所述玻璃方板上放置2-10个梳架，优选放置4个梳架。

6.根据权利要求1所述的电泳装置，其中梳子的梳齿的单位间距为2.25毫米、4.5毫米或其它2.25毫米的倍数，梳齿的单位间距是指相邻两个梳齿的左边缘之间的距离；一枚梳子上有16-97个梳齿，优选有24-25个梳齿。

7.根据权利要求1所述的电泳装置，其中所述电泳槽的槽内有一个放胶平台，平台的长为20-40厘米，优选为30.1厘米；平台的宽为15-30厘米，优选为18厘米；放胶平台与槽内最高液面之差为2-10厘米，优选为5-6厘米。

8.根据权利要求1所述的电泳装置，其中电泳槽中叠加的玻璃方胶的数量为1-10，优选为2-5。