CN112195131A - 一种用于制取黄腐酸的发酵菌液 - Google Patents

一种用于制取黄腐酸的发酵菌液 Download PDF

Info

Publication number
CN112195131A
CN112195131A CN202011146838.3A CN202011146838A CN112195131A CN 112195131 A CN112195131 A CN 112195131A CN 202011146838 A CN202011146838 A CN 202011146838A CN 112195131 A CN112195131 A CN 112195131A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fulvic acid
liquid
bacterial
bacterial liquid
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011146838.3A
Other languages
English (en)
Inventor
张洪江
张翔
贾汝振
张勇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN202011146838.3A priority Critical patent/CN112195131A/zh
Publication of CN112195131A publication Critical patent/CN112195131A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/02—Other organic fertilisers from peat, brown coal, and similar vegetable deposits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C05F17/20—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation using specific microorganisms or substances, e.g. enzymes, for activating or stimulating the treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21C—PRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00—Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/005—Treatment of cellulose-containing material with microorganisms or enzymes
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Abstract

本发明属于微生物应用技术领域，涉及一种生物发酵技术，特别涉及一种用于制取黄腐酸的发酵菌液，通过培养获得真菌和细菌菌液并按照一定比例进行混合获得发酵菌液，利用发酵菌液从秸秆中提取生化黄腐酸，并能保留秸秆中天然植物纤维，既避免了矿源黄腐酸的生产因矿物开采带来的一系列环境问题，又为农业生产提供优质肥料，并使作物秸秆变成真正意义上的可再生资源，解决了秸秆处理所产生的环境问题，取之于农用之于农，使农业资源最大化利用。

Description

一种用于制取黄腐酸的发酵菌液
技术领域
本发明属于微生物应用技术领域，涉及一种生物发酵技术，特别涉及一种用于制取黄腐酸的发酵菌液。
技术背景
黄腐酸是一种腐殖酸，是一种成分非常复杂的有机物质，本质为芳香族羟基羧酸类物质，是一种天然植物生长调节剂，能促进植物生长、强壮植株根系，对抗旱有重要作用，且能提高植物抗逆能力，增产和改善品质、改良土壤的板结，以黄腐酸代替化学合成肥料还可减少土壤中重金属的含量和农药的残留，提高作物安全性。于人类及动物而言可黄腐酸可增加肌体免疫力，调整肠胃功能，抗肿瘤，具有止血、消炎及活血化淤作用。可被用于动物饲料及美容保健，且于医疗上黄腐酸对高血压、妇科疾病疗效更佳。甚至在工业上黄腐酸还可被用于雪茄烟的染色剂、陶瓷添加剂、选矿抑制剂、蓄电池阴极膨胀剂、重金属离子吸附剂等。
目前国内外生产的黄腐酸多是矿物源黄腐酸，其生产以分馏煤炭资源为主，面对国际化石燃料资源紧张的现状，矿源黄腐酸的生产浪费了大量可作为燃料资源的煤炭，生产成本高昂。同时无论是矿物的开采还是矿源黄腐酸的生产，均造成了环境的不良影响。矿源黄腐酸同煤矿资源一样均为不可再生资源并非取之不尽，我们应寻找一种可循环利用黄腐酸的方式替代矿源开采。
目前全国以水稻，玉米，小麦产生的秸秆年产值可达到8亿吨，其中4亿吨直接用来焚烧，这将带来严重的环境污染和安全隐患问题，且从能源角度讲这是一种资源的浪费。而传统对稻草秸秆的深埋处理分解效率低下，土壤腐殖质含量增长不明显且极易造成病虫害的加剧。
发明内容
为解决上述现有技术中的技术问题，本发明目的在于提供一种高效降解秸秆木质素、生产黄腐酸的菌液配方，利用微生物发酵从秸秆中提取生化黄腐酸，在保留作物中天然植物纤维前提下以秸秆作为原料生产生化黄腐酸，既避免了矿源黄腐酸的生产因矿物开采带来的一系列环境问题，又为农业生产提供优质肥料并使作物秸秆变成真正意义上的可再生资源，解决了秸秆处理所产生的环境问题，取之于农用之于农，使农业资源最大化利用。
为达成以上目的，本发明采取如下技术方案：
一种用于制取黄腐酸的发酵菌液，包含真菌菌种黄孢原毛平革菌、哈茨木霉、康宁木霉(康氏木霉)、绿色木霉、酿酒酵母、产朊假丝酵母，和细菌菌种解淀粉芽孢杆菌、谷氨酸棒状杆菌，真菌菌种和细菌菌种分别培养后，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个/ml，所述真菌菌种和细菌菌种按照菌液体积比例 4:2:2:1:3:1:1:0.5进行混合。
所述发酵菌液中真菌菌种的培养基配方为：马铃薯浸出粉10g/L、葡萄糖20g/L、氯霉素0.1g/L，培养温度为25-30℃，pH值5-5.5，培养时间为4-6天。
所述发酵菌液中细菌菌种的培养基配方为：蛋白胨5g/L、酵母浸膏5g/L、葡萄糖20g/L，培养基温度为30-35℃，pH值4-4.5，培养时间为1-2天。
本发明的有益的技术效果：
1、本发明菌液配方可用于大多数常见作物秸秆的降解。
2、本发明菌液配方各菌种无冲突，可在植物组织降解时协同共生。
3、本发明菌液配方主要降解黄腐酸的主要来源物质木质素，对纤维素及半纤维素的影响较小，可在生产黄腐酸的同时获得高纯度的天然植物纤维，以供用于造纸磨浆、制造高档家具、装饰板材、生产可降解天然植物地膜等产品的生产，高效综合利用农业废弃物、满足农业需求，为广大农民朋友增收。
具体实施方式
现对本发明中的技术方案进行清楚完整的描述，所描述的实施例仅为本发明的一部分实施例，并非全部实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，均在本发明保护的范围内。
实施例1
按照如下方式制得发酵菌液：
第一组菌种选取初代或二代黄孢原毛平革菌、哈茨木霉、康宁木霉(康氏木霉)、绿色木霉、酿酒酵母、产朊假丝酵母，分别采用真菌液体培养基扩培，培养基成分为马铃薯浸出粉10g/L、葡萄糖 20g/L、氯霉素0.1g/L，培养温度为25-30℃，pH值5-5.5，培养时间为4-6天，培养生成高浓度高密度的活菌菌悬液，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个/ml；
第二组选取初代或二代解淀粉芽孢杆菌、谷氨酸棒状杆菌，在第一组菌种扩培的第四天，分别采用细菌液体培养基进行扩培，培养基成分为为蛋白胨5g/L、酵母浸膏5g/L、葡萄糖20g/L，培养基温度为30-35℃，pH值4-4.5，培养时间为1-2天，培养生成高浓度高密度的活菌菌悬液，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个 /ml；
所述菌液稀释倾注查数法如下：
用生理盐水将菌液逐级稀释，取稀释浓度为10-7、10-8、10-9三个浓度范围分别使用倾注法取一毫升菌液进行菌种培养，10-8稀释浓度培养平板上清晰可见多个菌落，说明原菌液浓度为108个/毫升。
将第一组菌液与第二组菌液按体积比例混合，混合比例为黄孢原毛平革菌：哈茨木霉：康宁木霉(康氏木霉)：绿色木霉：酿酒酵母：产朊假丝酵母：解淀粉芽孢杆菌：谷氨酸棒状杆菌＝4:2:2:1:3:1:1:0.5，配置混合菌液。
将菌液喷淋至含水量8.8％的3t稻草秸秆中，准备上述混合菌液 547.2L与含尿素和磷酸二胺各1％的喷淋液4.3728t，将混合菌液与喷淋液混匀后喷淋至稻草秸秆中，并保证喷淋后稻草秸秆含水不低于70％，发酵后测得产出生化黄腐酸有机肥0.759t，并获得天然稻草纤维2.091t。
实施例2
按照如下方式制得发酵菌液：
第一组菌种选取初代或二代黄孢原毛平革菌、哈茨木霉、康宁木霉(康氏木霉)、绿色木霉、酿酒酵母、产朊假丝酵母，分别采用真菌液体培养基扩培，培养基成分为马铃薯浸出粉10g/L、葡萄糖 20g/L、氯霉素0.1g/L，培养温度为25-30℃，PH值5-5.5，培养时间为4-6天，培养生成高浓度高密度的活菌菌悬液，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个/ml；
第二组选取初代或二代解淀粉芽孢杆菌、谷氨酸棒状杆菌，在第一组菌种扩培的第四天，分别采用细菌液体培养基进行扩培，培养基成分为为蛋白胨5g/L、酵母浸膏5g/L、葡萄糖20g/L，培养基温度为30-35℃，pH值4-4.5，培养时间为1-2天，培养生成高浓度高密度的活菌菌悬液，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个 /ml；
所述菌液稀释倾注查数法如下：
用生理盐水将菌液逐级稀释，取稀释浓度为10-7、10-8、10-9三个浓度范围分别使用倾注法取一毫升菌液进行菌种培养，10-8稀释浓度培养平板上清晰可见多个菌落，说明原菌液浓度为108个/毫升。
将第一组菌液与第二组菌液按体积比例混合，混合比例为黄孢原毛平革菌：哈茨木霉：康宁木霉(康氏木霉)：绿色木霉：酿酒酵母：产朊假丝酵母：解淀粉芽孢杆菌：谷氨酸棒状杆菌＝4:2:2:1:3:1:1:0.5，配置混合菌液。
将菌液喷淋至含水量8.2％的5t稻草秸秆中，准备上述混合菌液 918L与含尿素和磷酸二胺各1％的喷淋液9.382t，将混合菌液与喷淋液混匀后喷淋至稻草秸秆中，并保证喷淋后稻草秸秆含水不低于70％，发酵后测得产出生化黄腐酸有机肥1.24t，并获得天然稻草纤维 3.51t。

Claims (3)

1.一种用于制取黄腐酸的发酵菌液，其特征在于，包含真菌菌种黄孢原毛平革菌、哈茨木霉、康宁木霉(康氏木霉)、绿色木霉、酿酒酵母、产朊假丝酵母，和细菌菌种解淀粉芽孢杆菌、谷氨酸棒状杆菌，真菌菌种和细菌菌种分别培养后，通过菌液稀释倾注查数法确保菌数大于等于108个/ml，将所述真菌菌种和细菌菌种按照菌液体积比例4:2:2:1:3:1:1:0.5进行混合即得到制取黄腐酸发酵用菌液。
2.如权利要求1所述的用于制取黄腐酸的发酵菌液，其特征在于，所述发酵菌液中真菌菌种的培养基配方为：马铃薯浸出粉10g/L、葡萄糖20g/L、氯霉素0.1g/L，培养温度为25-30℃，pH值5-5.5，培养时间为4-6天。
3.如权利要求1所述的用于制取黄腐酸的发酵菌液，其特征在于，所述发酵菌液中细菌菌种的培养基配方为：蛋白胨5g/L、酵母浸膏5g/L、葡萄糖20g/L，培养基温度为30-35℃，pH值4-4.5，培养时间为1-2天。
CN202011146838.3A 2020-10-23 2020-10-23 一种用于制取黄腐酸的发酵菌液 Pending CN112195131A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011146838.3A CN112195131A (zh) 2020-10-23 2020-10-23 一种用于制取黄腐酸的发酵菌液

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011146838.3A CN112195131A (zh) 2020-10-23 2020-10-23 一种用于制取黄腐酸的发酵菌液

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112195131A true CN112195131A (zh) 2021-01-08

Family

ID=74011034

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011146838.3A Pending CN112195131A (zh) 2020-10-23 2020-10-23 一种用于制取黄腐酸的发酵菌液

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112195131A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116514611A (zh) * 2023-07-03 2023-08-01 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种农业废弃物协同生产黄腐酸肥的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101058792A (zh) * 2007-02-13 2007-10-24 韩农 一种高效秸秆分解复合菌群
CN102206102A (zh) * 2011-03-11 2011-10-05 四川省兰月农化科技开发有限责任公司 利用稻草生产黄腐酸的方法
CN106478187A (zh) * 2016-10-26 2017-03-08 秦皇岛五弦维爱科技开发有限公司 一种复合肥增效剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101058792A (zh) * 2007-02-13 2007-10-24 韩农 一种高效秸秆分解复合菌群
CN102206102A (zh) * 2011-03-11 2011-10-05 四川省兰月农化科技开发有限责任公司 利用稻草生产黄腐酸的方法
CN106478187A (zh) * 2016-10-26 2017-03-08 秦皇岛五弦维爱科技开发有限公司 一种复合肥增效剂及其制备方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116514611A (zh) * 2023-07-03 2023-08-01 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种农业废弃物协同生产黄腐酸肥的方法
CN116514611B (zh) * 2023-07-03 2023-09-12 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 一种农业废弃物协同生产黄腐酸肥的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101941851B (zh) 采用餐厨废弃物制备生化腐植酸的技术与工艺
CN103922818B (zh) 利用制糖滤泥生产生物腐殖酸的技术及工艺
CN103031254B (zh) 一种高效秸秆腐熟剂及其制备工艺
CN104926541A (zh) 一种联合麸皮秸秆酒糟海藻混菌发酵高效生物有机肥的生产工艺
CN101838613A (zh) 一种快速降解农作物秸秆的腐熟剂菌种组合
CN104262008A (zh) 一种酶解发酵制备海藻液体肥料的工艺
CN103113167A (zh) 一种复合型微生物有机肥及其制备方法
CN103898032A (zh) 复合菌剂及其应用以及利用其制备有机肥的方法
CN104261981A (zh) 海藻有机肥料的制备方法及用该方法制成的有机肥料
CN101786911A (zh) 生物有机肥用微生物和酶粉状复合生物制剂
CN106631248A (zh) 一种高含菌量生物有机肥生产工艺
CN101255402A (zh) 利用蔗糖滤泥发酵生产生物有机肥的菌体
CN104446708A (zh) 微生物菌肥及其制备方法和用途
CN102517217A (zh) 一种环保秸秆发酵剂
CN103073354A (zh) 一种特种有机肥及其制备方法
CN103418353B (zh) 基于胺化增强改性秸秆吸附材料的制备方法
CN104193508B (zh) 一种复合有机型环保育苗基质块的制备方法
CN103333824A (zh) 一种微生物有机肥及其制备方法
CN103121862A (zh) 一种农作物秸秆田间就地生产原位有机肥的方法和应用
CN104692866A (zh) 一种生物有机肥料
CN103194392A (zh) 降解秸秆的微生物复合菌剂及其降解秸秆的方法
CN104692844A (zh) 生物有机肥料的制备方法
CN103274841A (zh) 一种大蒜专用复合微生物肥料及其制备方法
CN105075655B (zh) 平菇菌糠添加沼渣沼液栽培双孢蘑菇的方法
CN102173899B (zh) 一种含氨基酸液体肥及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20210108