CN112190594B - 一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 - Google Patents
一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112190594B CN112190594B CN202011104399.XA CN202011104399A CN112190594B CN 112190594 B CN112190594 B CN 112190594B CN 202011104399 A CN202011104399 A CN 202011104399A CN 112190594 B CN112190594 B CN 112190594B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cnt
- pda
- agnps
- antibacterial
- total mass
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
- A61K33/38—Silver; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/44—Elemental carbon, e.g. charcoal, carbon black
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C01—INORGANIC CHEMISTRY
- C01B—NON-METALLIC ELEMENTS; COMPOUNDS THEREOF; METALLOIDS OR COMPOUNDS THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASS C01C
- C01B32/00—Carbon; Compounds thereof
- C01B32/15—Nano-sized carbon materials
- C01B32/158—Carbon nanotubes
- C01B32/168—After-treatment
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Carbon And Carbon Compounds (AREA)
Abstract
本发明属于纳米材料技术领域,公开了一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法,碳纳米管表面聚多巴胺占总质量的4.3~8.5%,Ag纳米粒子占总质量的15.2~20.8%,赖氨酸占总质量的5.1~11.4%,碳纳米管占总质量的59.3~75.4%。其制备过程如下:将碳纳米管分散于Tris‑buffer溶液中,再加入多巴胺,搅拌、离心、水洗,得到CNT@PDA固体;然后将CNT@PDA分散于赖氨酸水溶液,并逐滴滴入硝酸银溶液,反应、分离、干燥,得到表面同时含有聚多巴胺、AgNPs和赖氨酸的碳纳米管。本发明能有效改善CNT的抗菌效能,同时可以显著提升含有AgNPs的CNT纳米复合材料的生物相容性。
Description
技术领域
本发明属于纳米材料技术领域,尤其涉及一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法。
背景技术
目前,由细菌感染导致的疾病和死亡一直是人类社会文明和健康的严重威胁,如:鼠疫杆菌、霍乱弧菌等在历史上都曾多次引发瘟疫导致世界各个区域人口大规模的死亡。而口腔细菌感染导致的以龋病为代表的牙体牙髓疾患一直是人类口腔健康的最大威胁之一,龋病的危害可导致牙体硬组织形态的破坏,减低牙齿的咀嚼效能,加重人体的消化系统负担;同时龋病形成的龋洞作为细菌聚集生长的病灶部位,若不及时治疗,可引发进一步的牙髓炎,根尖周炎等口腔局部炎症,严重者甚至可诱发菌血症和败血症等威胁人类生命存活的危害性疾病。而牙周炎、口腔颌面间隙感染和随着牙科种植体的兴起导致的种植体周围炎呈现出越来越高危的趋势,给口腔临床治疗带来的了巨大的挑战如:由于牙周炎和种植体周围炎导致的患牙和种植体的松动、脱落以及牙龈炎症;由牙源性、外伤性和腺源性等细菌感染导致口腔颌面间隙感染疾病,口腔颌面外科手术术后细菌感染、口腔颌面种植体修复治疗术后细菌感染导致的治疗失败等;这些不仅使患者的口腔生理功能受到损害,而且各种治疗带来的巨额费用更加重了患者心理上的负担。抗生素的发明和应用很大程度缓解了细菌感染对人类健康的危险,但随着抗生素的滥用和耐药菌的出现,使得抗菌治疗面临着新挑战。尤其是在口腔微环境中,牙齿表面还会形成获得性膜等生物膜,细菌产生的生物膜屏障对抗生素治疗的抵抗性比游离细菌要强很多。但金属纳米粒子在厚生物膜屏障作用下具有较强的降解能力,这些化合物的强大穿透力一直是它们对抗生物膜屏障的一个重要特性;不同抗生素与纳米银的联合应用以及万古霉素与银的联合应用,大大增强了对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌生物膜抑制作用。抗生素与铜和氧化锌纳米颗粒协同作用也有相似的结果。因此,越来越多的学者把研究焦点投向了开发新型无机纳米抗菌材料的应用当中。
无机纳米抗菌材料,由于它们优异的性能,不仅被广泛应用于光学,电子,能源,传感,还有许多生物医学领域。其中金属银、氧化铜、二氧化钛和氧化锌等已经成功的在口腔医学领域广泛应用,而碳纳米管(CNT)作为一个新型材料由于其良好的机械性能,优良的抗菌性能以及诱导骨分化能力是口腔新型材料研究的热点。
CNT在牙科的研究应用:CNT一般可分为单壁碳纳米管(Single-walled Carbonnanotube,SWCNT)和多壁碳纳米管(Multi-walled Carbon nanotube,MWCNT),两者性能相似而MWCNT成本更低,MWCNT尺寸一般在0-50nm,其在牙科的主要的研究应用包括以下:牙科种植体表面涂层技术:提升牙科种植体与骨细胞的黏附结合反应能力,并可以促进成骨细胞的分化。纳米仿生牙科材料加固填料(义齿和基托),抗菌防龋剂涂层,牙科骨组织工程加固填料,增加牙科粘接材料粘接性能,牙科X线生物成像,牙体表面涂层防止牙体磨耗。近年来,通过回顾性研究和材料性能以及体外实验,有学者归纳了MWCNT性能特点:优点:良好的机械性能,包括超高的表面积,良好的力学性能,高导电性,透明度,热稳定性。有一定的抗菌性能且不易耐药其机制为:对原核细胞和真核细胞的物理接触穿刺能力是其关键,另外CNT能释放ROS活性氧制造氧化压力破坏胞膜杀菌。生物相容性:CNT可提高骨结合,促进骨细胞分化(原理:提高骨细胞黏附,减少骨细胞的竞争细胞(成纤维细胞)黏附,提高种植体与骨结合的能力。缺陷:纯CNT具有疏水性(也称不可分散性),当与其他材料结合可导致复合材料的非同质性产生。CNT也有一定的细胞毒性:纯CNT有毒,也是由疏水性决定。纯CNT在杀灭细菌的同时,也会造成正常细胞凋亡。纯CNT在促进骨细胞分化的同时同样导致局部轻微的炎症反应抑制细胞的增殖。
然而目前对于CNT纳米材料的毒理学和安全性研究还是非常匮乏的,部分原因是未建立客观全面的标准化指标评测,以及研究材料的理化特性存在缺陷。因此,一些重要的问题,特别是材料的抗菌性能和生物相容性是否同时达到理想的标准,需要更深入研究并改善后才能更广泛地应用于临床实践。
为了提高CNT的抗菌性能,并改善CNT的生物相容性,许多研究提出CNT的表面功能化修饰是一个值得重点开发的方向:包括:多巴胺(PDA)功能化修饰CNT表面、重氮氧化法和CNT表面羧基功能化修饰等。通过这些方法来降低CNT材料的不可分散性,提高CNT的水溶性,来达到降低CNT纳米材料的毒性的目的。然后与通过共价或非共价结合其他生物材料进一步降低细胞毒性,同时赋予纳米复合材料促进组织修复和细胞分化增殖的能力,以将氧化金属或Ag离子与CNT结合提高复合材料抗菌性能。虽然目前尚不清楚CNT表面功能修饰后抗菌活性和生物相容性的提高仅仅是由于纳米管的聚集状态不同影响,还是由于不同缓冲液影响纳米管分散的稳定性而干扰了CNT抗菌活性和生物相容性的观察结果。有学者研究了羟基功能化CNT对脱氮假单孢菌(Pseudomonas denitrificant)的影响,他们观察到功能化的CNT具有更高的抗菌活性,并将这种活性的增强主要归因于化合物的分散性增强。
银纳米粒子(分子式为Ag)AgNPs:具有广谱抗菌,强效抗菌,抗菌时效长,不易耐药,也拥有对哺乳动物细胞毒性较小,对微生物细胞毒性较高可以杀死正常细菌细胞且抑制细菌细胞增殖等优点。用途广泛:常用于食品包装,水去污,药物包装等,在牙科领域,含银止牙痛药水、银汞合金牙体充填材料等均有广泛的应用。AgNPs的抗菌能力较好部分原因可能是由于纳米银尺寸较小,比表面积大,特殊表面活性区域较广。对AgNPs的抗菌作用机制研究认为:①AgNPs可以刺穿细菌的细胞膜,破坏细菌细胞的完整性;②蛋白质被AgNPs直接通过与细菌的硫醇群反应而失活;③诱发活性氧(ROS)等物质破坏细菌胞膜杀灭细菌;④渗入细菌内部,破坏细菌的翻译过程。然而,由于表面能极高,AgNPs很可能会聚集,且AgNPs固定强度较差,这些都会降低其抗菌性能;而有研究显示借助碳纳米材料如CNTS、石墨烯,碳纤维作为AgNPs的载体或许可以有效的解决这些问题。
赖氨酸(分子式为C6H14N2O2)作为丰富的活性氨基、良好的水溶性、良好的生物相容性和柔韧的分子骨架以及良好的生物可降解性,引起了人们对赖氨酸功能化纳米材料的兴趣。赖氨酸具有丰富的活性氨基酸基团,在促进细胞粘附和药物传递方面具有重要作用。赖氨酸功能化纳米材料在细胞标记、生物燃料电池、DNA电化学传感器等领域有着广泛的应用。赖氨酸不仅具有出色的生物相容性和良好的水溶性、并富含活性氨基基团、灵活的分子骨架等优点,现有技术1发现碳纳米材料如石墨烯氧化物中含有大量的环氧基团,赖氨酸分子链上的游离氨基与环氧基团以及其他剩余氨基交联,可以成为石墨烯片与生物活性分子之间相对“友好”和“柔软”的连接剂;因此,具有丰富氨基的石墨烯功能化(石墨烯-赖氨酸)薄片可能会为大量的机会开辟道路,如细胞标记、生物活性分子附着和纳米复合材料的制备。有实验利用赖氨酸并借助微波辐射法对CNT进行功能化修饰,并通过细菌培养实验和最低抑菌浓度测试以及细胞毒性测试等实验,结果显示赖氨酸功能化修饰后的CNT纳米复合材料其生物相容性和抗菌性能都比纯CNT有显著的提升。
多巴胺(DA,分子式为C8H11NO2)是一种类似贻贝分泌的黏附蛋白物质,这种属性赋予了其至关重要的黏附性能,在温和的反应条件下,如金属、金属氧化物和聚合物表面,多巴胺对大多数有机和无机表面都表现出良好的黏附力。有学者认为,在多巴胺水溶液中,单分子多巴胺可以通过浸涂基质的方法与有机表面形成高强度的不可逆共价键,与金属表面形成可逆的非共价键。反应机理可以总结如下:多巴胺经历原位自聚反应生产奎宁氧化邻苯二酚的弱碱性溶液,然后由分子内环合生成羟基基团和进一步氧化的5,6-吲哚醌,因此多巴胺分子可以通过自组装联系产生的自发原位沉积至基质表面形成聚多巴胺(polydopamine,PDA)涂层。5,6-吲哚醌可通过各种化学反应与各种官能团发生反应,如硫醇、胺和奎宁等。因此,多巴胺可作为化学改性剂和有效还原剂,多巴胺基复合材料可作为高效机械增强剂来发挥作用。生物激发的PDA已被用作在极端温和条件下对碳纳米管进行表面修饰的一种简单而有效的方法。亲水的PDA涂层不仅可以极大地改善CNTs在水中的分散性,而且为二次反应提供了一个通用的平台。
通过上述分析,现有技术存在的问题及缺陷为:
碳纳米管由于具有一定的生物毒性、分散性不佳的物理性质限制了碳纳米管的应用。
解决以上问题及缺陷的意义为:通过提高碳纳米管的分散性、抗菌性、生物相容性来拓展碳纳米管的应用范围。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法。
本发明主要内容是制备一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,所述碳纳米管表面同时含有聚多巴胺、Ag纳米粒子、赖氨酸;所述聚多巴胺占总质量的4.3~8.5%,Ag纳米粒子占总质量的15.2~20.8%,赖氨酸占总质量的5.1~11.4%,碳纳米管占总质量的59.3~75.4%。
进一步、聚多巴胺、赖氨酸、Ag纳米粒子及碳纳米管的质量比例为:8.5:11.4:20.8:59.3。
本发明的另一目的在于提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法,包括:
步骤一,将MWCNT加入Tris-buffer溶液中室温下超声处理,然后将PDA加入上述溶液中,得到CNT@PDA悬混液,离心,得到湿润的固体样本,再用超声去离子水洗数次得到CNT@PDA固体样本
步骤二,将赖氨酸溶解于去离子水中,再将得到CNT@PDA加入,滴入硝酸银溶液,反应24小时,离心分离、干燥,得到表面同时含有AgNPs和赖氨酸、聚多巴胺的碳纳米管。
进一步,CNT@PDA-Lys/AgNPs合成方法包括:
步骤一:将200㎎纯MWCNT加入200ml 10Mm Tris-buffer溶液中室温下超声处理4h,然后将200㎎PDA加入上述溶液中在室温下搅拌24h,得到CNT@PDA悬混液,8000-10000rpm离心机分离,得到湿润的固体样本,再用超声去离子水洗4次得到CNT@PDA固体样本;
步骤二:(1)将Lysine400㎎放入200ml去离子水中室温下搅拌4h并去除杂质;然后加入CNT@PDA固体样本后再逐滴滴入2.5ml0.1M硝酸银溶液室温下搅拌24h,得到CNT@PDA-Lys/AgNps悬混液;
(2)最后8000-10000rpm离心机分离得到湿润的固体样本,再用去离子水洗4次得到CNT@PDA-Lys/AgNPs。
进一步,步骤一中,Tris-buffer溶液pH=8.5。
进一步,步骤二中,所述离心包括:离心速度为8000-10000rp;离心时间为8min/次。
结合上述的所有技术方案,本发明所具备的优点及积极效果为:
本发明通过这种制备方法所获得的生物相容性良好的抗菌碳纳米管,较其它的制备方式所获得的纳米管拥有更好的生物相容性、更强的抗菌性能、更稳定的分散性,能够良好的稳定的分散于溶液中。
能够制备出拥有更稳定的分散性、更好的生物相容性、更强的抗菌性能的抗菌碳纳米管。
本发明采用聚多巴胺(PDA)功能化修饰碳纳米管(CNT)表面能有效改善CNT的抗菌效能;纳米银粒子(AgNPs)的沉积可以进一步提升CNT纳米材料对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗菌性能,而(赖氨酸)Lysine的沉积不仅不会影响含有AgNPs的CNT纳米复合材料的抗菌性能,同时可以显著提升含有AgNPs的CNT纳米复合材料的生物相容性。本发明通过PDA、纳米银离子,赖氨酸的修饰的碳纳米管,显著提高碳纳米管的抗菌效果,生物相容性。
本发明所用的多巴胺(DA)原位自发氧化聚合可以将聚多巴胺(PDA)包覆在许多有机和无机基体表面,特别是PDA层中存在的儿茶酚和含氮基团可以将(非)金属颗粒固定在其表面,制备(非)金属/基体纳米复合材料,该方法比传统如化学,电镀等合成方法更加绿色环保,成本低廉,因此,具有一定的创新性。本发明利用纳米银离子和赖氨酸同时沉积至PDA功能化修饰CNT表面并进行结构表征测试、抗菌性能测试和细胞毒性实验测试来探索研究具有更好抗菌性能和生物相容性的CNT材料,为提升新型纳米材料在医学领域的研究、开发提供实验依据。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案,下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍,显而易见地,下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的CNT@PDA-Lys/AgNPs的合成方法流程图。
图2是本发明实施例提供的生物相容性良好的抗菌碳纳米管制备原理图。
图3是本发明实施例提供的CNT和CNT@PDA的XPS图;
图中:a是CNT;b是CNT@PDA。
图4是本发明实施例提供的CNT@PDA-Lys/AgNPs的XPS扫描图;
图中:a是CNT@PDA-Lys/AgNPs的XPS宽扫描图谱;b是在Ag 3d核水平的窄范围扫描图谱。
图5是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA-Lys/AgNPs的XRD图。
图6是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs的SEM图;
图中:a为CNT的SEM图、b为CNT@PDA的SEM图、c为CNT@PDA@AgNPs的SEM图、d为CNT@PDA-Lys/AgNPs的SEM图。
图7是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs的TGA曲线图。
图8是本发明实施例提供的不同浓度下大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图;
图中:A表示2.5μg/ml(下大肠杆菌生长的曲线示意图;B表示2.5μg/ml下金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图;C表示5μg/ml下大肠杆菌生长的曲线示意图;D表示5μg/ml下金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图。
图9是本发明实施例提供的浓度分别为2.5μg/ml,12.5μg/ml,25μg/ml的样本CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs对小鼠颅骨细胞(MC3T3-E1)在不同培养时间后的MTT实验示意图;
图中:A表示培养24h;B表示48h;C表示72h。
图10是本发明实施例提供的超声处理后0分钟(a),30分钟(b),和1月后(c)的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA-Lys/AgNPs水溶液分散性实验效果图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法,下面结合附图对本发明作详细的描述。
本发明提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,所述碳纳米管表面同时含有聚多巴胺、Ag纳米粒子、赖氨酸;所述聚多巴胺占总质量的4.3~8.5%,Ag纳米粒子占总质量的15.2~20.8%,赖氨酸占总质量的5.1~11.4%,碳纳米管占总质量的59.3~75.4%。
本发明提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法,包括:
步骤一,将MWCNT加入Tris-buffer溶液中室温下超声处理,然后将PDA加入上述溶液中,得到CNT@PDA悬混液,离心,得到湿润的固体样本,再用超声去离子水洗数次得到CNT@PDA固体样本。
步骤二,将赖氨酸溶解于去离子水中,再将得到CNT@PDA加入,滴入硝酸银溶液,反应24小时,离心分离、干燥,得到表面同时含有Ag NPs和赖氨酸,聚多巴胺的碳纳米管。
步骤二中,所述离心包括:离心速度为8000-10000rp;离心时间为8min/次。
如图1所示,CNT@PDA-Lys/AgNPs合成方法包括:
S101,将200㎎纯MWCNT加入200ml 10Mm Tris-buffer溶液中室温下超声处理4h,然后将200㎎PDA加入上述溶液中在室温下搅拌24h,得到CNT@PDA悬混液,8000-10000rpm离心机分离,得到湿润的固体样本,再用去离子水洗4次得到CNT@PDA固体样本。
S102,将Lysine400㎎放入200ml去离子水中室温下搅拌4h并去除杂质;然后加入CNT@PDA固体样本后再逐滴滴入2.5ml 0.1M硝酸银溶液,室温下搅拌24h,得到CNT@PDA-Lys/AgNps悬混液。
S103,最后8000-10000rpm离心机分离得到湿润的固体样本,再用去离子水超声洗4次得到CNT@PDA-Lys/AgNPs样本并干燥得到固体沉淀。
步骤S101中,Tris-buffer溶液pH=8.5。
图2是本发明实施例提供的生物相容性良好的抗菌碳纳米管制备原理图。
本发明中,将碳纳米管加入Tris-buffer中再加入多巴胺,搅拌,离心,水洗,干燥得到CNT@PDA固体。把赖氨酸溶解于去离子水中,然后加入CNT@PDA固体样本,然后逐滴滴入硝酸银溶液,反应,离心分离、干燥,得到表面同时含有聚多巴胺、AgNPs和赖氨酸的碳纳米管。本发明采用聚多巴胺、AgNPs和赖氨酸同时功能化修饰碳纳米管表面,不仅仅能有效改善CNT的抗菌效能,同时可以显著提升含有AgNPs的CNT纳米复合材料的生物相容性
下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1
本发明提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,所述碳纳米管表面同时含有聚多巴胺,Ag纳米粒子、赖氨酸;所述聚多巴胺占8.5%,赖氨酸占总质量的11.4%,Ag纳米粒子占总质量的20.8%,碳纳米管占总质量的59.3%。
实施例2
本发明提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,所述碳纳米管表面同时含有聚多巴胺,Ag纳米粒子和赖氨酸;所述聚多巴胺占总质量的4.3~8.5%,赖氨酸占总质量的5.1~11.4%,Ag纳米粒子占总质量的15.2~20.8%,碳纳米管占总质量的59.3~75.4%。
碳纳米管、聚多巴胺、赖氨酸及Ag纳米粒子的质量比例为75.4:4.3:5.1:15.2。
实施例3
本发明提供一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,所述碳纳米管表面同时含有Ag纳米粒子和赖氨酸、聚多巴胺;碳纳米管、聚多巴胺、赖氨酸及Ag纳米粒子的质量比例为:68.2:6.5:7.2:18.1。
下面结合具体实验对本发明作进一步描述。
图3是本发明实施例提供的CNT和CNT@PDA的XPS图。
图中:a是CNT;b是CNT@PDA。
图4是本发明实施例提供的CNT@PDA-Lys/AgNPs的XPS扫描图。
图中:a是CNT@PDA-Lys/AgNPs的XPS宽扫描图谱;b是在Ag 3d核水平的窄范围扫描图谱。
图5是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA-Lys/AgNPs的XRD图。
图6是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs的SEM图。
图中:a为CNT的SEM图、b为CNT@PDA的SEM图、c为CNT@PDA@AgNPs的SEM图、d为CNT@PDA-Lys/AgNPs的SEM图。
图7是本发明实施例提供的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs的TGA曲线图。
图8是本发明实施例提供的不同浓度下大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图。
图中:A表示2.5μg/ml(下大肠杆菌生长的曲线示意图;B表示2.5μg/ml下金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图;C表示5μg/ml下大肠杆菌生长的曲线示意图;D表示5μg/ml下金黄色葡萄球菌的生长曲线示意图。
图9是本发明实施例提供的浓度分别为2.5μg/ml,12.5μg/ml,25μg/ml的样本CNT、CNT@PDA、CNT@PDA@AgNPs、CNT@PDA-Lys/AgNPs对小鼠颅骨细胞(MC3T3-E1)在不同培养时间后的MTT实验示意图。
图中:A表示培养24h;B表示48h;C表示72h。
本发明实验表明,超声处理后0分钟(a),30分钟(b),和1月后(c)的CNT、CNT@PDA、CNT@PDA-Lys/AgNPs水溶液分散性实验效果如图10。
在本发明的描述中,除非另有说明,“多个”的含义是两个或两个以上;术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”、“前端”、“后端”、“头部”、“尾部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管,其特征在于,所述碳纳米管表面同时含有聚多巴胺、Ag纳米粒子、赖氨酸。
2.如权利要求1所述的生物相容性良好的抗菌碳纳米管,其特征在于:所述聚多巴胺占总质量的4.3~8.5%,Ag纳米粒子占总质量的15.2~20.8%,赖氨酸占总质量的5.1~11.4%,碳纳米管占总质量的59.3~75.4%。
3.一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法,所述生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法包括:
步骤一,将200㎎纯MWCNT加入200ml 10mM Tris-buffer溶液中室温下超声处理4h,然后将200㎎PDA加入上述溶液中在室温下搅拌24h,得到CNT@PDA悬混液,离心机分离,再用去离子水洗涤得到CNT@PDA固体;
步骤二,(1)将Lysine400㎎放入200ml去离子水中室温下搅拌4h并去除杂质;然后加入CNT@PDA固体后,再逐滴滴入2.5ml 0.1M硝酸银溶液室温下搅拌24h,得到CNT@PDA-Lys/AgNps悬混液;
(2)最后8000-10000rpm离心机分离4次,8min/次,得到湿润的固体样本,再用超声去离子水洗数次得到CNT@PDA-Lys/AgNPs样本并干燥得到固体沉淀。
4.如权利要求3所述的生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法,其特征在于,步骤一中,Tris-buffer溶液pH=8.5。
5.如权利要求3所述的生物相容性良好的抗菌碳纳米管的制备方法,其特征在于,步骤二中,所述离心包括:离心速度为8000-10000rp;离心时间为8min/次。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011104399.XA CN112190594B (zh) | 2020-10-15 | 2020-10-15 | 一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202011104399.XA CN112190594B (zh) | 2020-10-15 | 2020-10-15 | 一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112190594A CN112190594A (zh) | 2021-01-08 |
CN112190594B true CN112190594B (zh) | 2022-11-15 |
Family
ID=74009744
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202011104399.XA Active CN112190594B (zh) | 2020-10-15 | 2020-10-15 | 一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112190594B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113694255B (zh) * | 2021-09-02 | 2022-07-22 | 南昌大学附属口腔医院(江西省口腔医院) | 一种医用植入物表面有机-无机抗菌复合涂层及其制备方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102432000A (zh) * | 2011-09-22 | 2012-05-02 | 西北师范大学 | 石墨烯/赖氨酸纳米复合材料及其制备方法 |
CN103520726A (zh) * | 2013-10-21 | 2014-01-22 | 郑州大学 | 一种隐形热敏脂质体的制备及其药物转运系统在肿瘤治疗药物中的应用 |
CN104498935A (zh) * | 2014-12-09 | 2015-04-08 | 浙江大学 | 碳纳米管复合涂层的制备方法 |
CN109771669A (zh) * | 2019-03-06 | 2019-05-21 | 武汉轻工大学 | 一种多巴胺功能化纳米银粒子的dna释放载体及其制备方法 |
CN109836577A (zh) * | 2019-02-21 | 2019-06-04 | 西北师范大学 | 一种还原氧化石墨烯-聚多巴胺-赖氨酸复合材料的制备及应用 |
CN110644239A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-01-03 | 南昌大学附属口腔医院(江西省口腔医院) | 一种抗菌聚乳酸纳米纤维及其制备方法和应用 |
-
2020
- 2020-10-15 CN CN202011104399.XA patent/CN112190594B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102432000A (zh) * | 2011-09-22 | 2012-05-02 | 西北师范大学 | 石墨烯/赖氨酸纳米复合材料及其制备方法 |
CN103520726A (zh) * | 2013-10-21 | 2014-01-22 | 郑州大学 | 一种隐形热敏脂质体的制备及其药物转运系统在肿瘤治疗药物中的应用 |
CN104498935A (zh) * | 2014-12-09 | 2015-04-08 | 浙江大学 | 碳纳米管复合涂层的制备方法 |
CN109836577A (zh) * | 2019-02-21 | 2019-06-04 | 西北师范大学 | 一种还原氧化石墨烯-聚多巴胺-赖氨酸复合材料的制备及应用 |
CN109771669A (zh) * | 2019-03-06 | 2019-05-21 | 武汉轻工大学 | 一种多巴胺功能化纳米银粒子的dna释放载体及其制备方法 |
CN110644239A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-01-03 | 南昌大学附属口腔医院(江西省口腔医院) | 一种抗菌聚乳酸纳米纤维及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
Antibacterial Properties of Multi-walled Carbon Nanotubes Decorated with Silver Nanoparticles;Liu YZ,等;《CURRENT NANOSCIENCE》;20161231;第12卷(第4期);第411-415页 * |
Efficient direct water dispersion of multi-walled carbon nanotubes by functionalization with lysine;Hu NT,等;《MATERIALS LETTERS》;20071231;第61卷(第30期);第5285-5287页 * |
Electrochemical chiral interface based on the Michael addition/Schiff base reaction of polydopamine functionalized reduced graphene oxide;Xing Yang,等;《Electrochimica Acta》;20191031;第319卷;第705-715页 * |
Poly(dopamine)-modified carbon nanotube multilayered film and its effects on macrophages;Sun X,等;《CARBON》;20170331;第113卷;第176-191页 * |
Surface modification of carbon nanotube with gelatin via mussel inspired method;Li DF,等;《MATERIALS SCIENCE & ENGINEERING C-MATERIALS FOR BIOLOGICAL APPLICATIONS》;20200731;第112卷;第1-5页 * |
聚多巴胺在生物材料表面改性中的应用;刘宗光等;《化学进展》;20150324;第27卷;第212-219页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112190594A (zh) | 2021-01-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jafari et al. | Biomedical applications of TiO2 nanostructures: recent advances | |
Nizami et al. | Graphene oxide: A new direction in dentistry | |
Yang et al. | Metal–organic framework/Ag-based hybrid nanoagents for rapid and synergistic bacterial eradication | |
Xie et al. | Synergistic bacteria killing through photodynamic and physical actions of graphene oxide/Ag/collagen coating | |
Derakhshi et al. | Two-dimensional nanomaterials beyond graphene for biomedical applications | |
Zhu et al. | Biomedical applications of functionalized ZnO nanomaterials: from biosensors to bioimaging | |
Agnihotri et al. | Development of nano-antimicrobial biomaterials for biomedical applications | |
Hong et al. | Attenuation of the in vivo toxicity of biomaterials by polydopamine surface modification | |
Avcu et al. | Biodegradable polymer matrix composites containing graphene-related materials for antibacterial applications: A critical review | |
Holban et al. | Inorganic nanoarchitectonics designed for drug delivery and anti-infective surfaces | |
Zhu et al. | Antimicrobial and antifouling surfaces through polydopamine bio-inspired coating | |
Arora et al. | Titanium dioxide nanocomposites | |
Ding et al. | Photothermal nanohybrid hydrogels for biomedical applications | |
CN112190594B (zh) | 一种生物相容性良好的抗菌碳纳米管及其制备方法 | |
Wang et al. | Synthesis and molecular dynamics simulation of CuS@ GO–CS hydrogel for enhanced photothermal antibacterial effect | |
Alharbi et al. | Antibiofilm activity of synthesized electrospun core-shell nanofiber composites of PLA and PVA with silver nanoparticles | |
Ding et al. | Surface modification of titanium implants with micro–nano-topography and NIR photothermal property for treating bacterial infection and promoting osseointegration | |
Badshah et al. | Bacterial cellulose-based metallic green nanocomposites for biomedical and pharmaceutical applications | |
Williams et al. | Graphene-based materials in dental applications: antibacterial, biocompatible, and bone regenerative properties | |
Du et al. | Ni nanocrystals supported on graphene oxide: antibacterial agents for synergistic treatment of bacterial infections | |
Laganà et al. | Antibacterial activity of nanoparticles and nanomaterials: a possible weapon in the fight against healthcare-associated infections. | |
Pieklarz et al. | Current progress in biomedical applications of chitosan-carbon nanotube nanocomposites: a review | |
Vahabi et al. | Applications of nanotechnology in dentistry: a review | |
Mamidi et al. | Metallic and carbonaceous nanoparticles for dentistry applications | |
Sivaraj et al. | Enhanced anti-biofilm and biocompatibility of Zn and Mg substituted β-tricalcium phosphate/functionalized multiwalled carbon nanotube composites towards A. baumannii and Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus, and MG-63 cells |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |