CN112105346A - 制备脂质基涂层的通用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种制备脂质涂覆的基质的方法，该方法包括以下步骤：a、提供在水混溶性有机溶剂中的磷脂的脂质溶液(A)，所述磷脂的浓度在25至450mg/ml之间；b、提供pH值在4至8之间的水溶液(B)；c、搅拌所述水溶液(B)，并将所述脂质溶液(A)分配到所述水溶液(B)中，以制备包含脂质囊泡的水分散体(C)，所述囊泡的数均尺寸在80至120nm之间，所述数均尺寸采用动态光散射测量，所述水分散体中磷脂的浓度在0.05mg/ml至2mg/ml之间；以及d、将所述水分散体(C)施用到基质上并形成脂质基涂层；其中所述水分散体(C)包含至少95重量％的水。本发明还涉及包括脂质基涂层的医疗设备，例如隐形眼镜和导管。

Description

制备脂质基涂层的通用方法
技术领域
本发明涉及一种易于使用的在基质上制备脂质基涂层的方法。
背景技术
基材的涂层是本领域已知的。一般来说，涂层是可以应用于基材的覆盖物。涂料可以是例如装饰性的、功能性的或两者都有。装饰性涂层包括例如漆和/或涂料。功能性涂层包括例如胶粘性的、光学的、催化的、光敏的、磁性的、电性的、导电的、绝缘的、气味特性的和/或保护性的。功能性(保护性)涂层包括例如防腐的、防刮的、防水的、抗微生物的、抗炎的、防污的、润滑的、疏水的、亲水的和/或生物活性的。
可以采用例如气相沉积、化学和电化学技术、喷涂、辊对辊涂覆工艺、旋涂和浸涂等方法来施用涂层。气相沉积的例子是化学气相沉积(如金属有机气相外延、静电喷涂辅助气相沉积(ESAVD)和或渗碳化)、物理气相沉积(如阴极电弧沉积)、电子束物理气相沉积(EBPVD)、离子镀、离子束辅助沉积(IBAD)、磁控溅射、脉冲激光沉积、溅射沉积、真空沉积、真空蒸发、蒸发(沉积)。化学和电化学技术的例子是转换涂层(conversion coatings)，如阳极氧化、铬酸盐转换涂层、等离子体电解氧化、磷酸盐(涂层)、离子束混合、酸洗和涂油、无电电镀和/或电镀。喷涂的例子为喷漆、高速氧燃料(HVOF)、等离子喷涂、热喷涂和/或等离子体转移电弧热喷涂。辊对辊涂覆工艺的例子为气刀涂布、网纹辊涂布机、柔版涂布机、间隙涂布、凹版涂布、热熔涂布、浸渍涂布、吻式涂布、计量杆(迈耶棒)涂布、辊式涂布、丝网印刷涂布机、狭缝挤压涂布、喷墨印刷、平版印刷和柔版印刷。
通常使用通过超声或挤压制备的囊泡施加典型的脂质基涂层，不限于支撑脂质双分子层(SLBs)，所述囊泡具有不同的尺寸和组成。SLBs通常是通过囊泡融合制备的，自首次报道以来，已被广泛用于研究中(McConnel和Tamm 1985)。SLBs作为防污表面已经显示出巨大的前景，并且其表面成分和功能是可以调整的。SLBs的防污性质及其可调节的成分使其成为在固体材料上用作表面涂层的理想选择。然而，SLBs在商业应用中的使用一直受到限制。部分原因是它们在空气中缺乏稳定性。最近，已经描述了能够形成更适于商业用途的空气稳定型SLBs的方法。
例如，在US2008/0241942中描述了一种用于制备空气稳定的SLBs的方法。在此，将双层涂敷在固体表面上，优选地在阵列上。该方法包括以下步骤：
提供一个覆有分子膜的固体表面；
将甾醇基团共价地连接到分子膜上；以及
使甾醇官能化的分子膜与脂质溶液接触，其中脂质溶液是通过挤压制备的。
US2008/0241942中所述方法的缺点是，必须在固体表面上涂抹分子膜，例如亲水性聚合物或水凝胶涂层，以便能够附着双层。双层并不是直接附着在基材上，而是仅通过附着在固体表面上的分子膜附着。该分子膜包含会与甾醇基团发生共价反应的活性基团，然后该甾醇基团与SLB结合。这种化学步骤可能不适用于所有材料，并且会导致不必要的并发症。此外，分子膜在支持上的应用是一个额外的步骤，这是耗时的并且增加了系统的复杂性。不仅需要控制SLB的制备，而且还需要控制底物与分子膜之间的相互作用和粘附力，以及分子膜的稳定性。此外，分子膜不能施加在所有类型的固体表面上。因此，在选择用于制作SLB的基材时存在局限性。另一个缺点是，通过施加分子膜，可以改变固体表面的化学和机械性能。
这些局限性可以通过使用WO2014/184383中所述的方法来克服。该方法消除了对分子膜的需求，并且可以被更广泛地应用。在此，描述了一种用于制备产生稳定的SLB涂层的基材的方法，该方法包括以下步骤：
提供具有表面的物体；
用含有活性氧的等离子体处理该物体的表面，使该物体的表面具有活性基团A；
将甾醇基团共价连接到活性基团A上，以及；
使被甾醇基团活化的物体与脂质溶液接触以形成脂质双层。
这些改进使得探索脂质涂层的商业用途成为可能。然而，下一个障碍是克服制备脂质涂层的一个主要瓶颈，即脂质(囊泡)溶液的制备。在上述方法中或在制备传统的SLB时，通常通过使用脂质囊泡溶液来制备脂质涂层，该脂质囊泡溶液是利用挤压工艺制备的。
例如，这样的挤压方法描述在Jasper van Weerd:"novel biomedicalapplications of supported lipid bilayers",Thesis博士，2015年1月16日(XP055482572)、WO01/58910和其他文件中。
采用挤压工艺制备脂质囊泡溶液是耗时的(通常数小时至一天)，并且通常以小批量进行。
用挤压法制备脂质囊泡溶液通常包括以下步骤：
在玻璃容器中制备干燥脂质膜；
使用水溶液水合干燥脂质膜；
可选择地采用超声处理和/或冻融循环来辅助水合作用；
并将所得溶液通过具有明确孔径的膜挤出数次，通常挤出11次以上，以产生脂质囊泡溶液，或可作为该溶液使用。
对于脂质涂层的商业化应用，需要一种更简单的方法来形成脂质囊泡溶液，以在基材上制备脂质涂层，这种方法更快，更容易规模化，并且更容易使用。
本发明涉及一种制备脂质涂层基材的通用方法，其包括以下步骤：
a)提供在水混溶性有机溶剂中的磷脂的脂质溶液(A)，磷脂浓度在25至450mg/ml之间；
b)提供pH值在4至8之间的水溶液(B)；
c)搅拌水溶液(B)，并将脂质溶液(A)分散到水溶液(B)中，以制备包含脂质囊泡的水分散体(C)，该囊泡的数均尺寸在80至120nm之间，所述数均尺寸采用根据动态光散射测量，所述水分散体中磷脂的浓度在0.05mg/ml和2mg/ml之间；以及
d)将水分散体(C)施用到基质上并形成脂质基涂层；
其中水分散体(C)包含至少95重量％的水。
本发明的方法的优点在于，它是一种的形成脂质囊泡的简单方法，该方法是快速的，且可用于制作传统的SLB和脂质涂层，也可与US2008/0241942和WO2014/184383等不同的基质预处理方法兼容。另外，溶液(A)和(B)可以预先制备为储备溶液，以进一步将涂层的形成加速至数秒。
在本发明的一个优选实施方式中，在水混溶性有机溶剂中制备含有磷脂浓缩物的溶液(A)，并将该溶液(A)分配到搅拌的含有基质的水溶液(B)中，从而产生脂质囊泡的水分散体(C，图1–模式1#1)，并且所述囊泡瞬间融合到基质上的脂质基涂层中(图1–模式1#2)。
在本发明的另一个实施方式中，在水混溶性有机溶剂中制备包含磷脂浓缩物的溶液(A)，并将该溶液(A)分配到搅拌的水溶液(B)中，导致形成囊泡(图1-模式2#3)。将所得到的脂质囊泡的水分散体(C)，经稀释或不经稀释，与基质接触(图1–模式2#4)，从而使囊泡立即融合到基质上的脂质基涂层中(图1–模式2#5)。
发明内容
本发明涉及一种用脂质基涂层涂覆基材的通用方法。
在第一步中，在容易与水混溶的有机溶剂中制备磷脂的溶液。
可与水混溶的有机溶剂的例子是乙酸、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环、醇类(如甲醇、乙醇、丙醇、甘油、聚乙二醇和四氢呋喃)。
优选的合适的有机溶剂的实例是甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、二甲基甲酰胺、甘油、聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜以及它们的混合物。更优选的溶剂是醇，最优选的溶剂是乙醇。
脂质溶液(A)的温度通常在-20至60℃之间，优选在10至50℃之间，最优选在15至30℃之间。温度应足够高以获得澄清的溶液。
溶液(A)中磷脂的浓度通常在25至450mg/ml之间，优选在40至200mg/ml之间。低于25mg/ml的磷脂浓度通常会导致分散液(C)中脂质囊泡的浓度过低，无法有效覆盖一层基质。高于500mg/ml的浓度使脂质囊泡具有不规则的形状和不受控制的囊泡尺寸分布。
脂质溶液(A)包含磷脂。脂质溶液可以进一步包含其他亲脂性化合物，例如跨膜蛋白、外周膜蛋白、两亲性肽、离子聚合物、糖分子、酶和药物成分和糖脂。可以使用脂类的混合物。相对于磷脂和亲脂性化合物的量，磷脂的量优选为至少97mol％。
一般来说，磷脂由一个头部基团和一个或多个脂肪酸尾部组成。磷脂头部基团的实例包括磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸。脂肪酸尾部组成的碳链长度可以在12至22个碳原子之间变化，并且可以在饱和度方面变化，其中C＝C双键可以给出顺式或反式异构体。饱和脂肪酸尾部的实例包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和山萮酸。不饱和脂肪酸尾部的实例包括肉豆蔻脑酸、棕榈油酸和油酸。脂肪酸尾部组成的变体共同称为特定磷脂头部基团的衍生物。
因此，磷脂的例子包括磷脂酰胆碱衍生物、磷脂酰酸衍生物、磷脂酰甘油衍生物、磷脂酰乙醇胺衍生物、磷脂酰丝氨酸衍生物、天然磷脂衍生物、聚甘油-磷脂、功能化的-磷脂、末端活化的-磷脂和聚乙二醇化磷脂。
磷脂酰胆碱衍生物的实例是1,2-二癸酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DDPC)、1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DMPC)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)、1,2-二芥酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DEPC)、DiynePC脂类，例如1,2-双(10,12-二十三碳二炔酰基)-sn-甘油-3-磷酸胆碱(1,2-bis(10,12-tricosadiynoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine)和1-棕榈酰基-2-(10,12-二十三碳二炔酰基)-sn-甘油-3-磷酸胆碱(1-palmitoyl-2-(10,12-tricosadiynoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine)。
磷脂酸衍生物的实例是1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸盐(DMPA)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸盐(DPPA)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸盐(DSPA)。
磷脂酰甘油衍生物的实例是1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3[磷酸-rac-(1-甘油)(DMPG)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3[磷酸-rac-(1-甘油)(DPPG)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3[磷酸-rac-(1-甘油)(DSPG)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3[磷酸-rac-(1-甘油)](POPG)。
磷脂酰乙醇胺衍生物的实例是1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DSPE)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、DiynePE脂类和缀合的磷酸乙醇胺，DiynePE脂类例如为1,2-双(10,12-二十三碳二炔酰基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺和1-棕榈酰基-2-(10,12-二十三碳二炔酰基)-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，缀合的磷酸乙醇胺与肽、蛋白质和荧光分子结合，但不限于上述结合基团，荧光分子例如为Texas Red-1,2-二十六烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(TR-DHPE)。
磷脂酰丝氨酸衍生物的例子是1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸丝氨酸(DOPS)。
聚乙二醇化磷脂的实例是与聚乙二醇(PEG)缀合的饱和的及不饱和的(例如14：0、16：0、18：0和18：1)的磷脂酰乙醇胺衍生物。聚乙二醇化磷脂中的PEG基团的MW优选为200-10,000。聚乙二醇化磷脂可以选自由1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油--3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-pho磺基乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二油酰基-sn-甘油--3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)，1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二油酰基-sn-糖ro-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)所组成的组。
优选的磷脂选自由1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DMPC)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)，例如mPEG-磷脂，例如1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)所组成的组。
更优选地，磷脂选自由1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)所组成的组。
一般来说，磷脂具有一个亲水的头部基团和两个疏水的尾部。当磷脂暴露在水中时，它们会排列成两层片状(双层)，其所有的尾部都指向片的中心，或者是作为胶束，其尾部相互指向对方。该双层和胶束的中心几乎不含水，并排除了溶于水但不溶于油的极性分子。
在给定温度下，磷脂双层可以以液相或凝胶(固态)相存在。所有的脂质都有一个特征温度，即相变温度，在这个温度下，它们从凝胶相转变(熔化)到液相。在这两个阶段中，大多数情况下都防止磷脂分子在双分子层上翻转，但是在液相双分子层中，给定的脂质将在一秒钟内与其邻近的脂质交换位置数百万次。与液相双层不同的是，凝胶相双层中的磷脂以非常有限的迁移率被锁定在适当的位置。
虽然磷脂的尾部主要调节双层相的行为，但决定双层表面化学性质的却是脂质的头部基团。在磷脂中，最常见的头部基团是磷脂酰胆碱(PC)。由于在磷酸基上具有负电荷，在胆碱上具有正电荷，因此磷脂酰胆碱是两性离子的头部基团，但是由于这些局部电荷平衡，因此在生理pH下不存在净电荷。另一个在生理pH下没有净电荷的头部基团的例子是磷脂酰乙醇胺。其他头部基团，如，磷脂酸、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰甘油在生理pH下带有负电荷。
由于其两性离子性质，磷脂酰胆碱衍生物优选用于涂料应用中；磷脂酰胆碱衍生物是一类带有磷脂酰胆碱头部基团的脂质，可以具有不同长度和组成(如饱和度)的天然的或合成的疏水尾部。天然的疏水尾部的例子是棕榈酰基、油酰基、二植烷酰基和肉豆蔻酰基。合成的疏水尾部的例子是二炔(diacetylenic)和含丙烯酸酯的尾部。优选地，脂质溶液(A)包含磷脂衍生物，这些衍生物产生易在基质上形成脂质基涂层的融合性(融合到基质表面的能力)脂质囊泡。通常，可从优选的脂质的组，即磷脂酰胆碱衍生物中制备融合性囊泡。
水溶液(B)包含水和任选的盐(例如NaCl和CaCl2)、缓冲剂、络合剂和/或水溶性药物组分。
合适水溶液的实例是milliQ水、除盐水、磷酸盐缓冲液(PBS)、HEPES缓冲液、盐溶液。
水溶液(B)的pH范围在4至9之间，优选在5至8之间。在该pH范围之外(低于pH值4，高于pH值9)，不容易形成具有所需粒径和分布的脂质囊泡，并且以下涂层工艺不是最佳的。
水溶液(B)的温度应高于0℃，并且还应超过溶液(A)中磷脂的最低相变温度。水溶液(B)的温度通常在0至60℃之间，优选在10至50℃之间，最优选在15至30℃之间。
在步骤III中，对水溶液(B)进行搅拌，同时将溶液(A)分配到搅拌的溶液(B)中。本领域技术人员将认识到可以采用不同的搅拌和分配方式，只要溶液(A)中的水混溶性溶剂能迅速溶解在溶液(B)中，从而使包含数均尺寸在40至140nm之间的脂质囊泡的水分散体(C)能够用于在基材上形成脂质基涂层。
水溶液(B)的搅拌有助于脂质溶液(A)的快速分散和水混溶性溶剂在水中的快速溶解，从而形成包含脂质的纳米颗粒(包含脂质囊泡的水分散体(C))。混合过程应以这样的方式进行，使得脂质可以形成脂质囊泡，其采用动态光散射测量的数均尺寸在80至120nm之间。在脂质溶液(A)的浓度过高、混合速度过低、脂质溶液(A)在水溶液(B)中的稀释系数过低时，会发生脂质颗粒的团聚，导致不规则形状的颗粒、具有宽尺寸分布的颗粒等。还可以通过非透明溶液观察到不规则和大颗粒的形成，该溶液会散射光线并呈现乳白色外观。当形成数均尺寸在40-140nm之间、最好在80-120nm之间的小颗粒时，所形成的分散体是透明的。可以由技术人员通过眼睛定性评估透明度，或者通过在600nm波长下的吸光度测量(OD600，光学密度)定量评估透明度。
有效地将溶液(B)和将溶液(A)分配到溶液(B)中的示例可以通过分别使用搅拌板或涡旋、以及将溶液(A)分配到(B)中的流体装置来进行。搅拌溶液(B)的一个例子是使用涂有特氟隆的搅拌棒和磁力搅拌板以100至600rpm的转速搅拌体积为25～1000毫升的溶液。在分配溶液(A)之前，水溶液(B)的搅拌应首先达到是稳定状态。合适的流体装置的例子是P10、P100、P200和P1000类型的空气置换微量移液器(air-displacement micropipette)，其中溶液(A)的体积在0.1-1秒内分配。优选地，获得几乎没有肉眼可见的颗粒的澄清分散体(C)。
通常，分配是通过采用分配系统将溶液(A)以每秒1-10ml的速度引入溶液(B)中，分配系统具有内径在0.1-2毫米之间的喷嘴，将其引入溶液(B)中。
当分配到溶液(B)中时，溶液(A)在溶液(B)中稀释。
根据所用方法的类型、脂质溶液(A)的浓度和水溶液的类型的不同，脂质溶液(A)在水溶液(B)中的稀释系数可以在100至2000之间。稀释系数是通过将(与溶液(A)混合前的)水溶液(B)的总体积除以要加入到水溶液(B)中的脂质溶液(A)的体积来计算的。在简单的分批操作中，稀释系数优选在500至2000之间，或在750至1500之间。在连续操作中，例如在微流体装置中，稀释系数可以较低，例如在100和1000之间，或在250和800之间。
在这些稀释系数下，获得所需的脂质囊泡，其可以容易地融合到基质上。在任何给定的溶液(A)的脂质浓度下，高稀释系数导致分散体(C)中水溶混性溶剂和脂质囊泡的含量降低。融合的能力可以取决于分散体(C)中脂质囊泡的量(脂质浓度)，还取决于所使用的水溶液(B)。与含有盐类(如CalCl2)的水溶液(B)相比，在水溶液(B)仅包含milliQ水的情况下，分散体(C)中的脂质浓度通常更高。通常，水分散体(C)中的磷脂的浓度在0.05和2.0mg/ml之间。更优选地，分散体(C)中的磷脂的浓度在0.1和1.0mg/ml之间。
通过搅拌溶液(B)和向溶液(B)中分配溶液(A)来制备水分散体(C)期间的温度应高于0℃，并且还应超过溶液(A)中磷脂的最低相变温度。温度通常在0至60℃之间，优选在10至50℃之间，最优选在15至30℃之间。
通过将溶液(A)分配到搅拌的溶液(B)中来制备水分散体(C)。通常，制备水分散体(C)的时间在1至60秒之间。制备水分散体(C)后，可以停止搅拌。
水分散体(C)包含至少95重量％的水，更优选至少98重量％的水。水分散体(C)还包含来自分配溶液(A)的溶剂，优选为醇，最优选为乙醇。
相对于水分散体(C)，来自分配溶液(A)的溶剂的量优选在0.05体积％至1体积％的范围内，优选在0.1体积％至0.5体积％的范围内。
可以将水分散体(C)施用于基质上。
原则上，可以使用任何基质，只要水分散体(C)中的脂质囊泡可以在基质上形成脂质基涂层。基质可以是任何尺寸和形状的材料和物体。基质可以是玻璃、塑料、金属等。例如玻璃和聚己内酯可以在没有特殊预处理的情况下进行涂覆，而一些塑料则可能需要进行一些预处理，例如等离子体处理、UV-臭氧处理、形成自组装单层或进一步的化学衍生化，如US2008/0241942和WO2014/184383中所述。可以将水分散体(C)施加到存在于水溶液(B)中的基质上，从而使得脂质囊泡立即融合到基质上的脂质基涂层中。或者，可以使所得的水分散体(C)与基质接触，稀释或不稀释，从而使囊泡立即融合到基质上的脂质基涂层中。
本发明还涉及包含如上定义的磷脂的水分散体(C)，其中磷脂以囊泡形式存在，其数均尺寸在40至140nm之间(采用动态光散射测量)，且磷脂浓度范围在0.05至2.0mg/ml之间，并且其中分散体包含至少95重量％的水。
磷脂优选选自磷脂酰胆碱衍生物，磷脂酸衍生物、磷脂酰甘油衍生物、磷脂酰乙醇胺衍生物、磷脂酰丝氨酸衍生物、天然磷脂衍生物、甾醇、胆固醇、链甾醇、羊毛甾醇和甾醇的衍生物、聚甘油-磷脂、官能化-磷脂、端基活的化-磷脂、N-[1-(2,3-二油酰氧基)丙基–N,N,N-三甲基铵甲基硫酸盐(DOTAP)、聚乙二醇化磷脂、蛋白质、多肽、两亲化合物、离子聚合物、糖分子、酶和药物成分。
优选地，含有磷脂囊泡的水分散体(C)包含磷脂酰胆碱衍生物和聚乙二醇化磷脂。更优选地，分散体(C)含有磷脂囊泡，所述磷脂囊泡包含90-95mol％(总磷脂含量)的1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)或1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)，以及5-10mol％(总磷脂含量)的聚乙二醇化磷脂，如1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)或1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)以及可选地0至5mol％(相对于总磷脂含量)的添加剂，这些添加剂选自荧光缀合物、蛋白质、多肽、两亲化合物、乙二醇、聚乙二醇(PEG)、离子聚合物、糖分子、酶和药物成分。
本发明还涉及一种在设备上制备脂质基涂层的方法，所述设备不限于隐形眼镜和导管等医疗设备、(微)流体设备和细胞培养设备等研发工具的涂层、食品生产设备、制药设备等。
本发明还涉及水分散体(C)用于制备医疗设备的脂质基涂层的用途，医疗设备例如为隐形眼镜、导管、(微)流体设备、细胞培养设备、食品生产设备、制药设备等。
本发明还涉及具有如上所述的脂质基涂层和/或根据本发明的方法制成的脂质基涂层的医疗器械。
附图说明
图1示出了将涂料涂覆到基体上的不同模式：在模式1中，在形成分散体(C)期间，基体是存在的，为基体涂覆是瞬间发生的。在模式2中，首先制备分散体(C)，在分散体中加入基体后，进行基体的涂覆。
图2示出了实验1-4的颗粒尺寸分布。
图3示出了实验5-8的颗粒尺寸分布和荧光光谱
图4示出了实验9-12的颗粒尺寸分布和荧光光谱。
具体实施方式
实验1(对照)
实验1是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的稀释系数过高，不会产生脂质基涂层。为了研究过高的稀释系数，使用总脂质含量99.8mol％的DOPC(Avanti极性脂质)和总脂质含量0.2mol％的TR-DHPE(Thermo Fisher)的乙醇(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)以50mg/ml的浓度制备溶液(A)。将溶液(A)在氩气下于-20℃的微型离心容器(VWR)中保存最多6周。所有脂质均按粉末状原料订购，并在氩气气氛下保存，并在-20℃下最多保存1年。水溶液(B)包含0.1M、pH值为7.4的PBS缓冲液(Sigma-Aldrich)。在室温下，在1.5mL的水溶液(B)中，添加0.75μL的溶液(A)，从而使用2000倍稀释系数稀释至每毫升0.025毫克磷脂。使用空气置换P10微量移液器(Eppendorf)将溶液(A)分配到水溶液(B)中。使用台式涡旋(labdancer，VWR)进行搅拌。使水溶液(B)涡旋直至达到稳态，此时在1秒内分配溶液(A)。使用动态光散射(DLS，Nanotrac wave，Microtrac)表征所得的水分散体(C)。数量加权直径(Mn)为90.8±29.6nm，并且通过肉眼观察，溶液呈透明状态。在96孔玻璃底板(SensoPlates，GreinerBio-one)的每孔中加入100μL分散体(C)。预先用300μL 2v/v％Hellmanex III(Sigma-Aldrich)溶液在室温下孵育(incubate)1小时，然后用除盐水冲洗96孔玻璃底板，以去除洗涤剂。将水分散体(C)静置孵育至少5分钟，以形成脂质基涂层，然后用milliQ清洗，通过添加100μL milliQ并去除100μL溶液进行系列洗涤稀释。进行至少16次连续稀释，以除去水分散体(C)的残余物。使用荧光显微镜对玻璃孔进行表征。为此，使用了以Xenon X-cite120PC为光源的Olympus倒置IX71落射荧光(epi-fluorescence)研究显微镜和用于图像采集的Olympus DR70数码相机，来采集荧光显微照片。TR-DHPE使用510≤λex≤550nm和λem>590nm成像。进行了光漂白后的荧光恢复(FRAP)实验。使用共聚焦显微镜(Nikon confocal A1)进行FRAP，通过横向扩散系数D来推断脂质涂层的特征迁移或不迁移。使用ImageJ(NIH)，Origin(Origin Lab)和Excel(微软)进行图像分析。使用如Soumpasis等人1983年所述的修正的贝塞尔函数推导出扩散系数。在图像采集过程中对数据进行漂白校正，并使用FRAP分析仪(卢森堡大学)进行了归一化和处理。
如DLS所示，尽管水分散体(C)含有正确大小的脂质囊泡，但是在玻璃表面的荧光检查之后，未发现脂质基涂层。脂质物质的浓度不足以在玻璃基板上形成脂质基涂层。
实验2：
实验2是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的适用稀释系数和在水分散体(C)中的适用磷脂浓度。
溶液(A)、水溶液(B)和玻璃基质的制备过程如实验1所述。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；1000倍[每毫升水分散体(C)中0.05mg磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，且其Mn为93.6±35.7nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导出的预期的横向迁移率(D)所示，在玻璃基板上观察到脂质基涂层形成。
实验3：
实验3是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的适用稀释系数和在水分散体(C)中的适用磷脂浓度。
如实验1中所述制备溶液(A)、水溶液(B)和玻璃基板。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；500倍[每毫升水分散体(C)中0.10毫克磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，实验3的Mn为93.0±29.6nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导出的预期的横向迁移率(D)所示，在玻璃基板上观察到脂质基涂层的形成。
实验4：
实验4是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的适用稀释系数和在水分散体(C)中的适用磷脂浓度。
如实验1中所述制备溶液(A)、水溶液(B)和玻璃基板。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；200倍[每毫升水分散体(C)中0.25毫克磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在水分散体(C)中，实验4的Mn为87.3±37.4nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导出的预期的横向迁移率(D)所示，在玻璃基板上观察到脂质基涂层形成。
实验5
实验5是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的适用稀释系数和在水分散体(C)中的适用磷脂浓度。
溶液(A)、水溶液(B)和玻璃基质的制备过程如实验1所述。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；100倍[每毫升水分散体(C)中0.50毫克磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，实验5的Mn为88.5±31.5nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导出的预期的横向迁移率(D)所示，在玻璃基板上观察到脂质基涂层的形成。
实验6(对照)：
实验6是为了证明溶液(A)在水溶液(B)中的稀释系数过低，不会产生脂质基涂层。溶液(A)和玻璃基质按实验1所述制备。水溶液(B)包含pH7.4的HEPES缓冲液(Sigma-Aldrich)，其中含有150mM NaCl(Sigma-Aldrich)和2mM CaCl2 pH(Sigma-Aldrich)。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，不同之处在于使用ta 50x稀释系数得到每毫升水分散体中1.00mg磷脂。DLS表征显示，脂质囊泡存在于Mn为55.5±16.2nm的水分散体(C)中。所测得的尺寸分布在Mn 80至Mn 120nm的所需范围之外。另外，与实验2-5相比，水分散体(C)的透明度较低。其结果是，如不存在荧光所指示的，在玻璃基板上未观察到脂质基涂层的形成。最有可能的是，由于稀释系数太低，水分散体(C)中存在浓度过高的乙醇。
实验7(对照)：
实验7是为了证明溶液(A)中磷脂浓度过高，不能产生脂质基涂层。用99.8mol％总脂质含量的DOPC(Avanti极性脂质)和0.2mol％总脂质含量的TR-DHPE(Thermo Fisher)在乙醇中(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)以500mg/ml的浓度制备溶液(A)。水溶液(B)由pH值为7.4的0.01M HEPES缓冲液(Sigma-Aldrich)组成，其中含有150mM NaCl(Sigma-Aldrich)和2mM CaCl2 pH(Sigma-Aldrich)。玻璃基质的制备如实验1中所述。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；10000倍[每毫升水分散体(C)中0.05mg磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡不存在于水分散体(C)中，并且无法推断出用于实验7的可靠Mn。结果，如不存在荧光所指示的，在玻璃基板上未观察到脂质基涂层的形成。最有可能的是，过高浓度的磷脂存在于溶液(A)中，阻止了水溶性溶剂的充分溶解和所需脂质囊泡的形成。
实验8(对照)：
实验8是为了证明溶液(A)中磷脂浓度过高，不能产生脂质基涂层。用99.8mol％总脂质含量的DOPC(Avanti极性脂质)和0.2mol％总脂质含量的TR-DHPE(Thermo Fisher)在乙醇中(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)以500mg/ml的浓度制备溶液(A)。水溶液(B)由pH值为7.4的0.01M HEPES缓冲液(Sigma-Aldrich)组成，其中含有150mM NaCl(Sigma-Aldrich)和2mM CaCl2 pH(Sigma-Aldrich)。玻璃基质的制备如实验1中所述。制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述，但使用以下稀释系数；5000倍[每毫升水分散体(C)中0.10毫克磷脂]。DLS表征显示，所需的脂质囊泡不存在于水分散体(C)中，并且无法推断出用于实验8的可靠的Mn。因此，如不存在荧光所指示的，没有在玻璃基板上观察到脂质基涂层的形成。最有可能的是，过高浓度的磷脂存在于溶液(A)中，阻止了水溶性溶剂的充分溶解和所需脂质囊泡的形成。
实验9：
实验9是为了证明本发明对医疗设备的适用性而进行的。溶液(A)和水溶液(B)的制备如实验3所述。基质为隐形眼镜医疗设备。更具体地说，基质是包括Menicon EX材料的RGP隐形眼镜。通过用乙醇(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)漂洗并随后用milliQ漂洗来清洗隐形眼镜基质。用N2气体干燥隐形眼镜基质，并用氧等离子体在200毫托、40瓦下处理60s(Plasma prep II，SPI supplies)。制备水分散体(C)的过程按照在水分散体(C)中每毫升所述磷脂那样进行。等离子体处理后，立即将隐形眼镜放入放置的24孔板(Greiner Bio-one)中，向其中加入1mL水分散体(C)。将水分散体(C)静置孵育至少5分钟，以形成脂质基涂层，随后通过加入1000微升的milliQ水和去除1000微升的溶液进行连续稀释，用milliQ水洗涤。进行至少16次连续稀释以除去水分散体(C)的残余物。隐形眼镜的表征如实验1中所述进行。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，Mn为107.7±44.2nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导的预期横向迁移率(D)所示，观察到在隐形眼镜医疗设备上的脂质基涂层的形成。
实验10：
实验10是为了证明本发明对医疗设备的适用性而进行的。溶液(A)和水溶液(B)的制备如实验3所述。基质为隐形眼镜医疗设备。更具体地说，基质是包含Menicon Z材料的RGP隐形眼镜。通过用乙醇(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)漂洗并随后用milliQ漂洗清洁隐形眼镜基质。用N2气体干燥隐形眼镜基质，并用氧等离子体在200毫托、40瓦下处理60s(Plasma prep II，SPI supplies)。制备水分散体(C)的过程按照每毫升水分散体(C)中所述的磷脂进行。等离子体处理后，立即将隐形眼镜放入放置的24孔板(Greiner Bio-one)中，向其中加入1mL水分散体(C)。将水分散体(C)静置孵育至少5分钟，以形成脂质基涂层，随后通过加入1000微升的milliQ水和去除1000微升的溶液进行串行稀释，用milliQ水洗涤。进行至少16次连续稀释以除去水分散体(C)的残余物。隐形眼镜的表征如实验1中所述进行。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，Mn为107.7±44.2nm。通过目测，水分散体(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导的预期横向迁移率(D)所示，观察到在隐形眼镜医疗设备上的脂质基涂层的形成。
实验11：
实验11是为了证明聚乙二醇化脂质基涂层的制备而进行的。溶液(A)和水溶液(B)的制备如实验6所述。对于实验11，使用94.5mol％总脂质含量的DOPC(Avanti极性脂质)、5mol％总脂质含量的DOPE-PEG2000(Avanti极性脂质)和0.5mol％总脂质含量的TR-DHPE(Thermo Fisher)在乙醇(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)中制备浓度为50mg/ml的溶液(A)。将溶液(A)在氩气下于-20℃下储存在微量离心容器(VWR)中最多保存6周。水溶液(B)的制备过程如实验3所述，玻璃基质的制备过程如实验1所述。除了使用1000倍稀释系数，使得每毫升水分散体(C)中含有0.05毫克磷脂外，制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，实验11的Mn为88.6±1.1nm。通过目视检查，实验11的水分散液(C)是透明的。另外，如荧光指示和使用FRAP推导的预期横向迁移率(D)所示，观察到在玻璃基板上的聚乙二醇化脂质基涂层的形成。
实验12：
实验12是为了证明聚乙二醇化脂质基涂层的制备而进行的。溶液(A)和水溶液(B)的制备如实验6所述。对于实验12，使用总脂质含量89.5摩尔％的DOPC(Avanti极性脂质)、总脂质含量10摩尔％的DOPE-PEG2000(Avanti极性脂质)和总脂质含量0.5摩尔％的TR-DHPE(Thermo Fisher)在乙醇中(乙醇绝对量≥99.8％，VWR)以50mg/ml的浓度制备溶液(A)。将溶液(A)在氩气下于-20℃下保存在微型离心容器(VWR)中，最长保存6周。水溶液(B)的制备过程如实验3所述，玻璃基质的制备过程如实验1所述。除了使用1000倍稀释系数，使得每毫升水分散体(C)中含有0.05毫克磷脂外，制备水分散体(C)、将水分散体(C)施用于玻璃基质及其表征的过程如实验1所述。DLS表征显示，所需的脂质囊泡存在于水分散体(C)中，实验12的Mn为80.4±3.6nm。通过目测，实验12的水分散体(C)是透明的。另外，如荧光所指示和使用FRAP推导的预期横向迁移率(D)所示，观察到在玻璃基板上的聚乙二醇化脂质基涂层的形成。
表1
Figure BDA0002651985860000201

Claims (15)

1.一种制备脂质涂覆的基质的方法，包括以下步骤：
a、提供在水混溶性有机溶剂中的磷脂的脂质溶液(A)，所述磷脂的浓度在25至450mg/ml之间；
b、提供pH值在4至8之间的水溶液(B)；
c、搅拌所述水溶液(B)，并将所述脂质溶液(A)分配到所述水溶液(B)中，以制备包含脂质囊泡的水分散体(C)，所述囊泡的数均尺寸在80至120nm之间，所述数均尺寸采用动态光散射测量，所述水分散体中所述磷脂的浓度在0.05mg/ml至2mg/ml之间；以及
d、将所述水分散体(C)施用到基质上并形成脂质基涂层；
其中所述水分散体(C)包含至少95重量％的水。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、二甲基甲酰胺、甘油、聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜和它们的混合物，优选地所述溶剂为醇，最优选地所述溶剂为乙醇。
3.根据权利要求1-2中任意一项所述的方法，其中，所述脂质溶液(A)的温度通常在-20至60℃之间，优选在10至50℃之间，最优选在15至30℃之间。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述磷脂选自由1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DMPC)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)、mPEG磷脂所组成的组，所述mPEG磷脂例如为1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)，1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述磷脂选自由1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)所组成的组。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，所述磷脂包含至少一种或多种聚乙二醇化磷脂，其中所述聚乙二醇化磷脂选自1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基](聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二油酰基-sn-甘油--3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-350](DSPE-PEG350)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-550](DSPE-PEG550)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-750](DSPE-PEG750)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油--3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-1000](DSPE-PEG1000)、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DSPE-PEG2000)、1,2-二油酰基-sn-甘油--3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-3000](DSPE-PEG3000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-5000](DSPE-PEG5000)所组成的组。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，所述聚乙二醇化磷脂选自由1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)所组成的组，例如选自mPEG-磷脂，所述mPEG-磷脂例如为1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)和1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)。
8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中，所述水溶液(B)含有水和可选的盐、缓冲剂、络合剂和/或水溶性药物组分，所述盐例如为NaCl和CaCl2。
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，所述水溶液为milliQ水、除盐水、磷酸盐缓冲液(PBS)、HEPES缓冲液、盐溶液。
10.根据权利要求1-9中任意一项所述的方法，其中，所述脂质溶液(A)在所述水溶液(B)中的稀释系数在100至2000之间，其中通过将所述水溶液(B)在与所述脂质溶液(A)混合之前的总体积除以要加入到所述水溶液(B)中的所述脂质溶液(A)的体积来计算所述稀释系数。
11.包含磷脂的水分散体(C)，其中，所述磷脂以数均尺寸在40至140nm之间的囊泡形式存在，所述数均尺寸采用动态光散射测量，其中所述磷脂的浓度在0.05至2.0mg/ml之间，其中所述分散体包含至少95wt％的水，其中所述分散体包含0.05体积％至1体积％的醇，并且其中所述磷脂选自磷脂酰胆碱衍生物、磷脂酸衍生物、磷脂酰甘油衍生物、磷脂酰乙醇胺衍生物、磷脂酰丝氨酸衍生物、天然磷脂衍生物、聚甘油磷脂、端基活化的磷脂、聚乙二醇化磷脂，其中衍生物是具有12至22个C原子的脂肪酸尾部。
12.根据权利要求11所述的水分散体(C)，其中，所述分散体包含磷脂囊泡，所述磷脂囊泡包含磷脂酰胆碱衍生物和聚乙二醇化磷脂。
13.根据权利要求11-12中任意一项所述的分散体，其中，所述分散体(C)含有磷脂囊泡，所述磷脂囊泡包含以总磷脂含量计90-95mol％的1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)或1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)、以总磷脂含量计5-10mol％的聚乙二醇化磷脂，以及任选的相对于总磷脂含量0至5摩尔％的添加剂；所述聚乙二醇化磷脂例如为1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DPPE-PEG2000)或1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](DOPE-PEG2000)，所述添加剂选自荧光缀合物、蛋白质、多肽、两亲化合物、乙二醇、聚乙二醇(PEG)、离子聚合物、糖分子、酶和药物成分。
14.权利要求11-13中任意一项所述的水性分散体(C)在制备医疗设备上的脂质基涂层的用途，所述用途例如为隐形眼镜、导管、(微)流体设备、细胞培养设备、食品生产设备、制药设备。
15.含有涂层的物体，所述涂层是根据权利要求1-10中任一项所述的方法制备的。
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