CN111970930A - 复合颗粒 - Google Patents

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Abstract

用于细菌、病毒、真菌和dsRNA的递送方法，其中通过将所述细菌、病毒、真菌或dsRNA封装在也包含UV阻断剂的蜡颗粒中来保护细菌、病毒、真菌或dsRNA免受UV光的降解。该制剂还可包括其他化学物质，例如杀虫剂。所述颗粒可被昆虫及其幼虫食用，导致昆虫或幼虫消化细菌、病毒、真菌和/或dsRNA，从而对其进行控制。

Description

复合颗粒
技术领域
本发明涉及将生物制剂(例如细菌、病毒、真菌和dsRNA)递送至植物和动物以控制害虫侵扰(特别是昆虫害虫)的复合颗粒，以及用于此类递送的颗粒。
背景技术
全球生物农药销售额已从2003年的约6亿美元增长至今天的约30亿美元，预计到2025年将达到110亿美元。生物农药的复合年增长率(CAGR)为16％至17％，是农作物保护市场部门目前增长最快的部门。
目前，生物农药市场占整个农作物保护市场的3％。据估计，基于病毒的生物农药不到其10％，具有巨大的增长潜力。
已知某些昆虫病原的生物制剂(例如昆虫病原的细菌、病毒、真菌和dsRNA)可有效防治植物和动物害虫。然而，将此类生物制剂递送至此类害虫存在问题，因为它们都非常容易被UV(例如在阳光下)降解。通常，此类生物制剂会在田间持续几天，例如2天至7天。目前的递送制剂包括液体制剂中的细菌、病毒、真菌和/或dsRNA(细菌、病毒、真菌和/或dsRNA悬浮于液体制剂中)，并且包括溶解在液体中的UV阻断剂。然而，在递送至植物或动物时，细菌、病毒、真菌和/或dsRNA与UV阻断剂分离，只有极少的UV阻断剂在细菌、病毒、真菌或dsRNA附近。还已尝试了利用聚合物质的封装技术，其中二氧化钛或炭黑作为光吸收剂。这些技术也未能保护生物制剂免受UV降解。结果，将细菌、病毒、真菌和dsRNA用于控制植物和动物中的害虫十分受限。
发现了GM农作物的一个特殊的问题，该农作物被设计成引起食用该农作物的害虫死亡。害虫已开始对此种农作物产生抗药性。一种解决方案是用细菌、病毒、真菌和dsRNA处理此类害虫。但是，当前可用的制剂在UV下会降解，因此无法在合适的时间段内保持活性。使用细菌、病毒、真菌和dsRNA的一个优势是它们趋于具有狭窄的宿主昆虫范围，并且感染力仅限于宿主属或科。通常，这些生物制剂具有对脊椎动物(例如哺乳动物，包括人类)基本无毒的附加优点，普遍未显示它们对有益昆虫、鸟类或水生生物有毒。
与常规市售制剂有关的另一个问题是选择的病毒通常以裸露形式悬浮在水性制剂中，这有助于通过氧化过程的作用来限制或减少病毒的生存期。
下文讨论了已知制剂的具体实例。
GB 2481307公开了复合颗粒，该复合颗粒包含：(i)粘附至至少一种谷物储藏节肢动物表皮的疏水颗粒；以及(ii)昆虫病原性真菌的孢子，其粘附至所述颗粒且能在至少一种谷物储藏节肢动物的表皮上发芽。还公开了包含此类颗粒的组合物。
US 5885603公开了包含活性杀虫成分、聚合物和无机阻光剂的生物农药组合物。
WO2018/050860公开了一种产品形式，该产品形式包含无生命的基质，例如肥料颗粒，该肥料颗粒包含(i)活性剂和(ii)载体颗粒，该载体颗粒至少包含外表面，该外表面包含有机物成分；其中，所述活性剂结合在载体颗粒内和/或载体颗粒的表面上，载体颗粒为：a)干燥的颗粒形式并携带至少静电表面电荷；以及b)至少基本均匀地分布在无生命基质(例如肥料颗粒)的外表面上。
US 6113950涉及一种农药组合物，该农药组合物包含生物农药的颗粒和持久性TiO2(TiO2的改性形式)的颗粒。
WO 2017/017234涉及复合颗粒，该复合颗粒包含：(i)至少一种杆状病毒颗粒；以及(ii)用于(i)的杆状病毒颗粒的蜡包封涂层，该蜡包封涂层由至少一种可降解和/或可溶于节肢动物种的幼虫的肠道的蜡组成。
Mgm Blanco等报告了评估苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensisisraelensis)的基于聚合物的颗粒制剂针对幼虫伊蚊的研究结果。颗粒制剂包含UV防护剂孔雀石绿。优选的制剂包含明胶或阿拉伯胶作为聚合物。
Ibargutxi M A等研究了选择的光增白剂对苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的杀虫活性的影响。
当前，尚无有效、经济上可行的市售解决方案来改善生物农药对UV的抵抗力。
因此，需要提供替代且优选改进的UV稳定制剂，用于将生物制剂(例如细菌、病毒、真菌和/或dsRNA)递送至植物和动物。此外，还需要提供生物制剂(例如细菌、病毒、真菌和/或dsRNA)对氧化的敏感性较低的制剂。
发明内容
根据本发明的第一方面，提供了一种复合颗粒，该复合颗粒的体积中值直径为2μm至200μm，该复合颗粒包含：
i.至少一种生物制剂，该生物制剂选自细菌、病毒、真菌、核酸以及它们中两种或三种的组合；
ii.至少一种UV阻断剂；以及
iii.蜡。
此类颗粒可被施加到并且将粘附至植物和动物。侵害植物或动物的任何昆虫都可能接触并通常食用该颗粒，从而被细菌、病毒、真菌和/或核酸(例如dsRNA、siRNA或RNAi)感染，这将控制昆虫侵染。
优选地，蜡为在昆虫或其幼虫的肠中可降解和/或可溶的蜡。合适的蜡包括在幼虫肠道环境(例如碱性pH)中溶解或降解或表面蚀刻而足以释放活性的那些蜡。此类蜡通常选自幼虫可摄取的天然蜡，例如巴西棕榈蜡、米糠蜡、小烛树蜡、甘蔗蜡、小冠椰子蜡(ouricouri wax)。其他合适的蜡包括合成蜡，例如酰胺蜡、聚乙烯蜡、官能化的聚乙烯蜡、氧化的聚乙烯蜡或它们中两种以上的混合物或共混物。优选的蜡包括：巴西棕榈蜡、蜂蜡、米糠蜡和小烛树蜡及它们的混合物。通常，根据设计，本发明中使用的蜡的熔融温度≥40℃。适用于本发明的天然蜡包括熔点优选≥50℃的蜡，最优选由熔点≥70℃的硬蜡组成。本发明中使用的天然蜡的实例包括：巴西棕榈蜡、蜂蜡、中国蜡、虫胶蜡、鲸蜡、软脂酸蜂花酯(myricyl palmitate)、鲸蜡醇棕榈酸酯(cetyl palmitate)、小烛树蜡、蓖麻蜡(castorwax)、小冠椰子蜡(ouricury wax)、羊毛蜡、甘蔗蜡、阿根廷波尼西亚灌木蜡(retamo wax)、米糠蜡等。
UV阻断剂可为能够阻隔UV的不利影响的任何试剂，例如二氧化钛、Blanophophor产品、烃氧基甲氧基肉桂酸酯(oxyl methoyxcinnimate)、改性大豆油、氧化锌纳米颗粒、β-胡萝卜素、对氨基苯甲酸、二苯乙烯型UV防护剂(例如白藜芦醇)及它们的混合物。其他辐照防护剂可为减少UV影响的已知化合物，例如碳素制品、抗氧化剂或氧化酶。
特别优选的UV阻断剂为二氧化钛。
本发明的颗粒通常包含蜡的至多20wt％(优选至多10wt％，优选至少0.5％，优选至少1％)的UV阻断剂。％可根据阻断剂的效力而变化。在特定实施例中，我们使用的TiO2为约5％w/w(50g TiO2/1Kg)、Blankophor PO1为约2％w/w(20g/Kg)、Blankophor DSA为约2％(20g/Kg)和Blankophor DS为约2％w/w(20g/Kg)。
通常，颗粒可进一步包含化学活性剂。优选地，化学活性剂为杀虫剂。或者，化学试剂可为昆虫引诱剂或化学信息素。合适的杀虫剂包括拟除虫菊酯或有机磷酸酯杀虫剂。可添加到本发明的复合颗粒中的合适杀虫剂包括：α-氯氰菊酯、λ-氯氟氰菊酯、[氰基-(3-苯氧基苯基)-甲基]-3-(2,2-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙烷-1-羧酸酯(溴氰菊酯)、τ-氟胺氰菊酯、甲基吡嘧磷、毒死蜱、马拉硫磷、特丁磷、亚胺硫磷、噻虫嗪(tiamethoxam)、噻虫胺(clothiandin)、啶虫脒、多杀菌素、氯虫苯甲酰胺(rynaxapyr)等。
视需要，颗粒可进一步包含添加的进食刺激剂(feed stimulant)，例如以颗粒或液体形式混合的糖类(例如蔗糖、果糖、棕榈糖、金蔗糖浆等)、糖蜜、蜂蜜、山梨糖醇或其他人工或有机诱饵，包括选自醇类、酯类和芳族化合物的挥发物(例如乙酸乙酯、3-甲基丁醇、己酸乙酯、2-苯基乙醇、辛酸乙酯、(E)-4-癸烯酸乙酯、癸酸乙酯、十二烷酸乙酯等)或其他植物提取物或幼虫引诱剂(例如幼虫聚集信息素，例如苹果蠹蛾(Cydia pomonella)的幼虫聚集信息素)。
颗粒可包括其他添加剂，例如着色剂，例如光增白剂和可商购的着色剂，例如食品着色剂，增塑剂(例如甘油或豆油)，抗氧化剂(例如维生素E、叔丁基羟基茴香醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、可能存在的其他抗氧化剂)或它们的混合物。
所述生物制剂可包含有效控制昆虫(特别是侵染农作物的昆虫)的任何细菌。优选的细菌包括需氧细菌。合适的细菌包括苏云金芽孢杆菌、球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)和日本甲虫类芽孢杆菌(Paenibacillus popilliae)。
优选的细菌为苏云金芽孢杆菌。苏云金芽孢杆菌(或Bt)是革兰氏阳性土壤寄居细菌，通常用作生物农药。Bt还天然存在于各种类型的蛾和蝴蝶的毛虫的肠中，以及叶表面、水生环境、动物粪便、昆虫丰富的环境以及面粉厂和谷物储藏设施中。还观察到苏云金芽孢杆菌会寄生其他蛾类(例如Cadra calidella)，在用C.calidella进行的实验室实验中，许多蛾由于此种病原体而患病。
适于包含在生物制剂中的病毒包括杆状病毒和颗粒体病毒。合适的真菌包括昆虫病原性真菌(例如白僵菌属(Beauveria)物种和被毛孢属(Hirsutella)物种)。
通常，核酸适合用作本发明中的生物制剂。核酸可为DNA或RNA，可为单链或双链(ss或ds)。特别地，颗粒中可能含有RNA以用于防治害虫的RNAi途径–例如，参见Mamta，B.和Rajam，M.V.的综述Physiol Mol Biol Plants(2017)23:487。
优选的生物制剂是细菌、真菌和核酸，特别是细菌和核酸，特别是RNA。
本发明的颗粒通常包含蜡的至多20wt％(优选至多10wt％，优选至少0.1％，优选至少0.5％)的生物制剂。％可根据制剂效力而改变。
已知包含蜡的颗粒容易获得静电荷，这使它们能够粘附至植物和动物。至多200μm(优选至多100μm)的任何尺寸(方便地以体积中值直径VMD来测量)的颗粒均适合用于本发明，包括用于粘附至植物和动物。在优选的实施方式中，颗粒为适合于被昆虫或其幼虫食用的尺寸。优选地，颗粒的VMD为2μm至200μm，更优选地，颗粒的VMD为5μm至100μm，最优选地颗粒的VMD为5μm至50μm或5μm至50μm。实施例中使用的颗粒的VMD为约10μm至15μm。
可被本发明的复合颗粒靶向的节肢动物种包括鳞翅目的农作物害虫物种、双翅目的害虫物种和鞘翅目的害虫物种，例如金龟子科的害虫物种。可使用本发明的复合颗粒靶向的昆虫害虫通常为侵染食品加工和食物存储场所的鳞翅目的成员(包括鳞翅目物种的幼虫)，例如烟叶螟，也称为仓库螟(Ephestia elutella)、地中海粉斑螟(EphestiaKuehniella)(也称为“印度粉斑螟”和“磨粉机螟(Mill moth)”)、葡萄干斑螟(Cadrafigulilella)、粉斑螟(Cadra cautella)和印度谷螟(Plodia interpunctella)。可使用本发明的复合颗粒靶向的侵染生长农作物的其他昆虫害虫包括：玉米穗蛾(Corn earworm)(也称为番茄螟蛉或烟青虫[Helicoverpa zea])、棉铃虫、豆荚蛀虫[Helicoverpaarmigera]、甜菜夜蛾[Spodoptera exigua]、埃及棉叶虫[Spodoptera littoralis]、非洲粘虫[Spodoptera exempta]、黎豆夜蛾(velveteen caterpillar)[Anticarsiagemmatalis]、舞毒蛾(Gypsy moth)[Lymantria dispar]、苹果蠹蛾[Cydia pomonella]、小菜蛾[Plutella xylostau]、伪苹果卷叶蛾[Thaumatotibia leucotreta]、马铃薯块茎蛾[Phthorimaea operculella]、苹果小卷蛾(Summer fruit tortrix moth)[Adoxphyesorana]、东方茶卷叶蛾(Oriental tea tortrix moth)[Homona magnanima]和小茶卷叶蛾(Smaller tea tortrix moth)[Adoxophyes honmai]的幼虫。
优选地，所述颗粒通过以下方法制备：
i)熔化至少一种蜡；
ii)在i)的熔融蜡中添加至少一种UV阻断剂；
iii)将细菌、病毒、真菌和核酸(例如dsRNA或RNAi)中的至少一种添加到ii)的熔融蜡中并与其混合；
iv)将iii)的产物冷却至固体；以及
v)将iv)的产物粗磨并粉碎至如其他地方所述的粒径。
在步骤i)中，蜡可为单一蜡或蜡的混合物。在步骤ii)中也可添加其他添加剂，例如化学添加剂、诱饵或进食刺激剂。优选冷却步骤iv)快速完成。例如，这可通过将iii)的液体混合物倒入大的浅盘或其他合适的容器中，然后将其放置在合适的冷冻装置(例如冰箱)内并保持在约-5℃至-30℃(例如-24℃)的温度下。实现步骤i)中快速熔化以及步骤iv)中快速冷却iii)的产物的其他方法包括使用市售的罩壳容器，例如可从Lee Industries(Philipsburg，美国)商购的带有超级夹套的D型釜，其能在将冷却的液体倒入容器(例如托盘)中并进一步冷冻以形成固体之前，将本发明的混合物加热至高液化温度然后快速冷却至中间温度(例如共混物的熔融温度)。最后，添加UV阻断剂和生物制剂的顺序并不重要，可颠倒顺序，也可同时添加。
一旦完成iv)的冷却步骤，就可将所得的蜡块进行粗磨、粉碎和微粉化至所需直径的粒径。
细菌、病毒、真菌和核酸可能对温度敏感，可能无法承受蜡的熔化温度。在此种情况下，其他制备颗粒的方法是已知的，例如来自气体饱和溶液的颗粒。在此种方法和其他方法中，使用高压可降低蜡的熔化温度，从而使生物制剂的活力得以保留。
第一方面的颗粒可用于将生物制剂递送至植物或动物以治疗昆虫侵染的方法中。该治疗可为预防性治疗。可在昆虫已产生抗性的GM植物上使用。
第一方面的颗粒还可用于化妆品制剂、生物修复和食品制造中。
本发明的优选组合物是包含多个根据前述权利要求中任一项所述颗粒的组合物。
在其他方面，本发明提供了本发明的复合颗粒或组合物，用于控制植物或动物的昆虫侵染。
在其他方面，本发明提供了复合颗粒或组合物根据本发明的用途，用于控制GM植物的昆虫侵染，例如控制对GM植物有抗性的昆虫侵染。
在优选的实施方式中，复合颗粒或组合物是干燥的。
在另外的优选实施方式中，复合颗粒或组合物为液体悬浮液的形式，例如适合用于喷涂施用。
根据本发明的第二方面，提供了一种干燥复合颗粒，该颗粒用于控制植物或动物的昆虫侵染，其中，该颗粒包含：
i.至少一种生物制剂，该生物制剂选自细菌、病毒、真菌和dsRNA；
ii.至少一种UV阻断剂；以及
iii.蜡；
所形成的颗粒使得UV阻断剂分布在整个蜡中，并且细菌、病毒、真菌和/或dsRNA被完全封装在蜡和UV阻断剂中。
根据本发明的第三方面，提供了一种液体制剂，该液体制剂包含悬浮在液体中的颗粒，用于控制植物或动物的昆虫侵染，其中，所述颗粒包含：
iv.至少一种生物制剂，该生物制剂选自细菌、病毒、真菌和dsRNA；
v.至少一种UV阻断剂；以及
vi.蜡；
所形成的颗粒使得UV阻断剂分布在整个蜡中，并且细菌、病毒、真菌和/或dsRNA被完全封装在蜡和UV阻断剂中。
关于本发明的第二方面和第三方面，复合颗粒如关于第一方面所述。
液体制剂可为水性液体制剂或油性液体制剂。
水性制剂可包括表面活性剂，该表面活性剂选自以以下商标出售的市售表面活性剂范围，例如Libsorb、Silwet、Tween、Span、Tensiofix、Brij、Torpedo、Newmans、Lansurf、Atplus、Atlox、Synperonic、Fortune、Guard、Rhino、Biopower等。在这些表面活性剂中，Tensiofix和Span是最优选的。
如上所述，本发明的此方面的液体制剂可包括液体或固体形式的另外的进食刺激剂。
根据本发明此方面的液体制剂可应用于选自植物组织的真核组织，例如叶、茎、子实体和花。
油质制剂，即油分散体(OD)制剂，可包含任何适用于本发明的油，其可选自石油，例如本领域已知的石蜡油、夏季喷雾油、溶剂的
Figure BDA0002701622720000071
范围、石油精和冬季喷雾油，以及植物油，例如菜籽油、大豆油、向日葵油、棕榈油等。
一旦本发明的复合颗粒被递送至目标表面，随组合物的水性成分蒸发，复合颗粒就能够粘附在目标表面上，或者在油性成分的情况下，油分散开来而可被进食的目标幼虫摄取。
优点
本发明制剂的一个优点是改进了用于农药使用的活性生物制剂(例如细菌和/或核酸)的UV防护。配制的蜡颗粒中包含的保护剂可防止活性剂在田间施用期间被UV降解，并可能有助于减少储存期间的氧化损伤(oxidative stress)。据发现，药剂受到叶表面上的制剂保护，在昆虫中肠的碱性条件下被活化。
另一个优点是，本发明的含蜡颗粒可与已知可吸收或反射UV并提高功效的佐剂共配制，而无需在田间混合罐中的UV稳定剂-后一种方法显示不具有成本效益，因为需要高比率才能显示出积极的效果。此外，根据现有技术，罐混合可能需要的颗粒添加剂的量使喷雾性受到不利影响，这是本发明中可避免的另一缺点。
本发明的颗粒在负载活性剂-病毒的颗粒内掺入了UV阻断剂佐剂，改善了UV防护并大大减少了所需的量，因此降低了制剂成本。
现在，以下实施例对本发明进行说明。应理解，这些实施例不以任何方式解释为限制本发明。
附图说明
以下为附图，其显示了：
图1、2和3显示了本发明的制剂中杆状病毒生物农药对UV辐照的保护。
具体实施方式
实施例1
介绍
将生物制剂(病毒)配制成包含UV阻断剂的蜡颗粒。
索引：
BV：杆状病毒包涵体(Baculovirus Occlusion Bodies)原材料
NPV：核型多角体病毒，包括在BV伞(BV umbrella)下的杆状病毒科的病毒的属
GV：颗粒病毒，包括在BV伞下的杆状病毒科的病毒的属
1、材料：
来自NRI的活性成分(所选物种的BV–靶向Spodoptera littoralis或埃及棉叶蠕虫的SpliNPV)
小烛树蜡和米糠蜡。
二氧化钛(TiO2)
2、设备：
加热至150℃的加热板(Stuart Scientific Ltd)
小数点后两位天平
Figure BDA0002701622720000081
可冷却至至少-24℃的冰箱(任何品牌/型号均可)
高剪切混合机/均质机(
Figure BDA0002701622720000082
T18数字)
粗磨机(KT处理限量型号04)
粉碎机(
Figure BDA0002701622720000083
LTD 314s型)
气流粉碎机(任何品牌/型号均可)
合适尺寸的样品罐
3、详细程序
3.1使用校准的天平称出所需量的载体蜡–125.0克米糠蜡、125.0克小烛树蜡和12.50克TiO2。
将小烛树蜡：米糠蜡(％w/w)的50:50混合物放入锅中，置于设定为120℃的加热板上。加热蜡直至完全熔化，观察到无固体的澄清液体。
使用校准的天平称出一定量的1％w/w的活性BV。
3.1.1在60秒的总时间内，将BV和TiO2一起快速添加到熔融蜡中，通过高剪切混合(使用高剪切混合器
Figure BDA0002701622720000091
T18)将其分散在熔融蜡中，以确保在蜡内均匀分布。
3.2然后将蜡转移到箔衬里的浅盘中，并转移到设定为-24℃的冷冻机中，以在约1至2小时内迅速冷却并固化。
3.3将配制好的材料冷冻成完全固体的块或板后，将其破碎成大块，送去研磨。将这些块在粗磨机(KT Handling Limited，型号04)中研磨成平均直径为约2mm的颗粒。
3.4然后将粗磨的物料在粉碎机(
Figure BDA0002701622720000092
Ltd 314s型)中粉碎成较小的颗粒，使其平均直径为150μm。
3.5将粉碎后的物料在气流粉碎机(
Figure BDA0002701622720000093
Alpine Jet AFG 100流化床气流粉碎机)中进一步微粉化，制得粒径为约10um的颗粒。
3.6含有杆状病毒颗粒和TiO2的微粉化材料在4℃的冷藏条件下储存在合适的样品容器中，直至使用。
将该颗粒用于检测相对于对照的害虫死亡率。
主要发现
研究结果显示了制剂中杆状病毒生物农药对UV辐射的持续防护作用。参见图1。
重复的生物测定表明，含UV阻断剂的制剂具有持续效果(上线)，暴露于UV 16小时(相当于在田间暴露于阳光下5天)后保留>80％的功效，与之相比，原始NPV病毒(中线)或市售生物农药产品(下线)为约30％。进一步的生物测定表明，即使暴露于UV 96小时(相当于田间约30天)后，仍能保留>80％的功效。参见图2。
将单剂量的原始NPV、市售标准品或本发明的制剂喷洒到番茄或卷心菜植株上，然后将它们在紫外线模拟阳光下每天暴露12小时，持续0天、1天、2天、3天、4天或5天，结果表明，与市售标准品(下两行)(功效为约30％)相比，本发明的两种制剂(上两行)在5天后的功效>90％。
番茄植物试验
进行了另一个实施例，将本发明的制剂与市售产品(Littovir(SpliNPV))进行比较。获得了感染至多8天后的死亡率数据，显示与Littovir的10％(8天后死亡率降至对照组(即水)的死亡率)相比，暴露于UV 8天后死亡率保持在60％。参见图3。
随后的分析表明，本发明制剂的活性丧失发生在UV暴露的第一小时内。这可能是由于任何存在的非包封病毒的降解；在此种情况下，制剂赋予的保护作用可能会使病毒保持基本上不会因暴露于紫外线而被降解。
讨论
使用生物制剂(例如杆状病毒)作为生物防治剂的局限性之一为：它们会由于被UV灭活而在田间条件下失去活性。
当在田间使用时，本发明的制剂可延长(甚至显著延长)活性剂(例如生物农药)的田间寿命，这意味着农民可减少保护农作物所需的喷洒次数和/或生物农药生产商可明显减少达到相同效果的有效成分的量。由于本发明实现了长寿命，现在可选择预防性喷洒生物农药。实施例使用了病毒，但本发明可应用于其他对UV敏感的生物制剂。
本发明的UV稳定制剂还可增加用于病毒生物农药施用的植物范围和生长条件。
实施例2
已知Bt毒素会被阳光迅速分解。例如，在初步研究中，24小时后检测到残留百分之四十一(41％)的毒素。在植物表面，阳光分解Bt；Bt毒素的半衰期可能为1天至4天。
我们检测了本发明的制剂防止UV引起的失活的能力。结果表明，在UV灯箱中放置96小时(相当于在田间放置一个月)后，Bt制剂是有效的，如下表所示：
Figure BDA0002701622720000101
Bt是需氧微生物，需要氧气来生长(被活化)。结果表明：
1)它在>120度的热熔包合工艺(inclusion process)中存活；
2)它在蜡封装中存活；
3)在UV阻断剂存在的情况下，死亡率未显著降低。
因此，本发明提供了体积中值直径为2μm至200μm的复合颗粒，该复合颗粒包含活性物质和至少一种UV阻断剂。

Claims (15)

1.复合颗粒，所述复合颗粒的体积中值直径为2μm至200μm，其中，所述复合颗粒包含：
i.至少一种生物制剂，所述生物制剂选自细菌、真菌、核酸，以及它们中两种或三种的组合；
ii.至少一种UV阻断剂；以及
iii.蜡。
2.根据权利要求1所述的复合颗粒，其中，所述UV阻断剂分布在整个蜡中。
3.根据权利要求1或2所述的复合颗粒，其中，所述UV阻断剂的存在量至多为所述颗粒的20wt％。
4.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述生物制剂的存在量至多为所述颗粒的20wt％。
5.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述核酸包含RNAi或dsRNA。
6.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述生物制剂包括细菌。
7.根据权利要求6所述的复合颗粒，其中，所述细菌为苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis。
8.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述蜡选自天然蜡、合成蜡、矿物蜡及它们的混合物。
9.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述复合颗粒还包含化学活性剂。
10.根据前述权利要求中任一项所述的复合颗粒，其中，所述复合颗粒的体积中值直径为5μm至100μm。
11.组合物，其包含多个前述权利要求中任一项所述的颗粒。
12.前述权利要求中任一项所述的复合颗粒或组合物在控制植物或动物的昆虫侵染中的用途。
13.根据权利要求12所述的复合颗粒或组合物的用途，其中，所述用途为控制GM植物的昆虫侵染，例如控制对GM植物有抗性的昆虫侵染。
14.根据权利要求12或13所述的复合颗粒或组合物的用途，其中，所述复合颗粒或组合物是干燥的。
15.根据权利要求12或13所述的复合颗粒或组合物的用途，其中，所述复合颗粒或组合物为液体悬浮液的形式。
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