CN111920810B - 地氯雷他定在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌制剂中的应用 - Google Patents
地氯雷他定在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌制剂中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了地氯雷他定在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌制剂中的应用。鲍曼不动杆菌作为一种生命力极强的条件致病菌,是医院感染的常见致病菌。由于鲍曼不动杆菌对常见抗生素具有先天耐药性,并且容易产生药物耐药性。本发明目的在于为开发多重耐药鲍曼不动杆菌治疗药物提供具有前景的活性物质,并且依据本发明的研究结果,地氯雷他定对多重耐药鲍曼不动杆菌具有良好的抑制作用,有望作为活性物质应用于相关抗菌药物的开发。
Description
技术领域
本发明属于抗菌药物技术领域,具体涉及地氯雷他定在制备抗多重耐药鲍曼不动杆菌制剂中的应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
鲍曼不动杆菌已成为让全球卫生健康机构最棘手的病原体之一,由于鲍曼不动杆菌对一些常用抗生素具有先天耐药性,再加上广谱抗生素的大量和普遍应用,使得其对药物的耐药性逐渐增强,多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-resistant Acinetobacterbaumannii,MDRAB)、泛耐药鲍曼不动杆菌(Extensively drug-resistant Acinetobacterbaumannii,XDRAB)菌株日趋增多,甚至出现全耐药鲍曼不动杆菌(Pandrug-resistantAcinetobacter baumannii,PDRAB)菌株。另外,近年来碳青霉烯类药物耐药鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)菌株的发现给临床诊疗的发展形成了阻碍。2016年全国细菌耐药性监测网(China Antimicrobial ResistanceSurveillance System,CARSS)的报告显示,全国AB对碳青霉烯类药物的耐药率平均为60.00%,比2015年上升了1.00%,各个地区的AB对碳青霉烯类药物的耐药率范围在24.80%-81.20%之间。受鲍曼不动杆菌感染的病人如果对碳青霉烯类药物产生耐药性,那么其死亡率会有所增加,CRAB感染的死亡率为16.00%-76.00%,而碳青霉烯药物敏感AB感染的死亡率为5.00%-53.00%。鲍曼不动杆菌很容易对药物形成耐药,而且形成耐药的机制具有复杂性,难以医治。由于鲍曼不动杆菌耐药性持续快速的增长,找寻新的治疗方法十分关键。学者们已探究出一些新的治疗方法,如研制新的抗生素、抗菌肽、利用噬菌体、光动力疗法、干扰细菌微量金属元素等。
地氯雷他定(Desloratadine),属于三环长效型的第三代组织胺拮抗剂,选择性作用在H1接受体。一般用于缓解慢性特发性荨麻疹及常年过敏性鼻炎的全身及局部症状。目前,关于地氯雷他定抗鲍曼不动杆菌的研究尚处于空白阶段。
发明内容
针对上述研究,本发明目的在于为开发鲍曼不动杆菌治疗药物提供具有前景的活性物质。基于该目的,本发明研究表明地氯雷他定对于鲍曼不动杆菌具有良好的抑制作用,特别是对于耐药株也具有良好的抑制效果。
基于上述技术目的,本发明提供以下技术方案:
本发明第一方面,提供地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用。
鲍曼不动杆菌属于医院感染中一种常见的致病菌,可能会引起菌血症、肺炎、脑膜炎、腹膜炎、心内膜炎以及泌尿道和皮肤感染。本发明研究表明地氯雷他定在体外试验中能够抑制多重耐药抗鲍曼不动杆菌的生长。
该研究结果丰富了抗鲍曼不动杆菌的活性单体成分。抗组胺药物在抗菌领域的应用也较为空白,本发明的研究结果对鲍曼不动杆菌的抑制及探索其耐药机制均具有重要的意义。
本发明第二方面,提供一种抗菌制剂,所述抗菌制剂中,地氯雷他定作为活性物质。
本发明第三方面,提供一种鲍曼不动杆菌感染的治疗方法,所述治疗方法包括采用地氯雷他定进行治疗。
以上一个或多个技术方案的有益效果是:
目前临床上针对多重耐药鲍曼不动杆菌感染尚没有有效的治疗方法,本发明研究结果进一步丰富了具有多重耐药鲍曼不动杆菌抑制作用的活性物质,地氯雷他定对多重耐药鲍曼不动杆菌具有良好的抑制效果,不仅为多重耐药鲍曼不动杆菌的临床治疗提供了更多的可能,也为研究相关细菌的耐药机制做出了贡献。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例2中所述地氯雷他定抗多重耐药鲍曼不动杆菌AB11的时间-杀菌曲线。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的,为了进一步筛选具有抑制鲍曼不动杆菌的活性物质,为了解决如上的技术问题,本发明提供了地氯雷他定在制备抗鲍曼不动杆菌药剂中的应用。
本发明第一方面,提供地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用。
优选的,所述抗菌制剂为用于治疗不动杆菌引发疾病的药物制剂。
进一步的,所述鲍曼不动杆菌包括敏感型鲍曼不动杆菌及耐药型鲍曼不动杆菌。
更进一步的,所述耐药型鲍曼不动杆菌为多重耐药鲍曼不动杆菌。
在上述优选技术方案的一些具体实施方式中,所述地氯雷他定体外完全抑制多重耐药鲍曼不动杆菌的最低浓度为64-128μg/mL。
在本发明研究中发现,地氯雷他定在体外对于多重耐药鲍曼不动杆菌能够实现完全的抑制作用,最低抑制浓度为64-128μg/mL。如针对AB11菌株的最低抑制浓度即为64μg/mL,由于试验条件的限制,地氯雷他定浓度达到128μg/mL时对其他多重耐药菌株显示出完全抑制作用。说明地氯雷他定在64-128μg/mL浓度范围内即可实现对多重耐药鲍曼不动杆菌的完全抑制作用。
在上述优选技术方案的一些具体实施方式中,所述地氯雷他定体外显著抑制多重耐药鲍曼不动杆菌的最低浓度为25μg/mL。
经验证,地氯雷他定针对多种耐药的鲍曼不动杆菌可以起到明显的抑制效果,最低抑制浓度为25μg/mL。基于该研究结果,地氯雷他定作为抗鲍曼不动杆菌制剂的活性成分应用于相关医药产品的开发,有望实现对多重耐药菌引发疾病的治疗效果。
本发明第二方面,提供一种抗菌制剂,所述抗菌制剂中,地氯雷他定作为活性物质。
优选的,所述抗菌制剂由地氯雷他定及药学上所必须的辅料组成。
优选的,所述抗菌制剂包括地氯雷他定、其他具有抗菌活性的成分和/或辅助抗菌活性成分及药学上所必须的辅料。
进一步优选的,所述抗菌活性成分包括但不限于青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类及喹诺酮类、硝咪唑类、林克胺类、碳霉素类及酰胺醇类。
在上述优选技术方案的一些实施方式中,所述抗菌活性成分为β-内酰胺类及氟喹诺酮类,或β-内酰胺类及氨基糖苷类。
由于鲍曼不动杆菌容易产生耐药性,因此在临床治疗当中多采用多种抗菌药物联合使用的方式,上述β-内酰胺类及氟喹诺酮类,或β-内酰胺类及氨基糖苷类为临床常用联合用药方式。依据本领域常规研究思路,采用地氯雷他定与上述成分联合有望得到全面抑制效果,同时降低菌株耐药情况发生的概率。
进一步优选的,所述辅助抗菌活性成分包括但不限于抗炎成分、抗氧化成分、消水肿成分等。
优选的,所述抗菌制剂为口服制剂、透皮制剂、注射剂或喷剂。
本发明第三方面,提供一种鲍曼不动杆菌感染的治疗方法,所述治疗方法包括采用地氯雷他定进行治疗。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案,以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1地氯雷他定抗多重耐药鲍曼不动杆菌的静态作用测定
1.材料
1.1实验菌株
山东大学齐鲁儿童医院微生物实验室分离的鲍曼不动杆菌3株(AB1、AB2、AB3)及山东省千佛山医院分离的鲍曼不动杆菌3株(AB11、AB12、AB13),上述菌株均对氨基糖苷类(庆大霉素),碳青霉烯类(美罗培南)和喹诺酮类(左氧氟沙星)等抗生素耐药,均为多重耐药鲍曼不动杆菌。
1.2药物与主要试剂
地氯雷他定(desloratadine),上海阿拉丁生化科技股份有限公司(上海);
钙调MH肉汤培养基(CAMHB),青岛高科技工业园海博生物技术有限公司(山东青岛);
MHA琼脂培养基,青岛高科技工业园海博生物技术有限公司(山东青岛);
生理盐水,上海阿拉丁生化科技股份有限公司(上海);
1.3仪器
电子天平(AUY120),SHIMADZU CORPORATION(日本);
取菌环,环耀制药设备销售有限公司(中国北京);
麦氏比浊管,康泰生物科技公司(中国浙江);
涡旋混合器(G-560E),Si公司(美国);
热空气消毒箱(GRX-9123A),MMM公司(德国);
生物安全柜,Thermo Scientific(美国);
恒温培养箱(VENTICELL 110),MMM(德国);
高压灭菌(LMQC-80E),新华医疗器械股份有限公司(山东淄博);
-20℃-4℃冰箱,海尔集团(山东青岛);
超低温冰箱,海尔集团(山东青岛);
96孔无菌微孔板,Corning(美国);
可调式移液器,Eppendorf(德国)。
2.方法
2.1菌液制备
-20℃下保存的鲍曼不动杆菌室温下解冻,接种到MHA琼脂培养基上,35℃培养18-20h,取发育良好的单一菌落再次接种,35℃培养18-20h,以保证菌株处于对数生长期。选取若干菌落,生理盐水配制成菌悬液,调整样品管与0.5麦士比浊管浊度一致,此时菌液浓度约为1.5×108CFU/mL,再用CAMHB肉汤进行稀释,使得菌液最后的工作浓度为5×105CFU/mL,最终以活菌计数进行浓度验证。
2.2地氯雷他定抗鲍曼不动杆菌的作用测定
根据CLSIM100-S30方案的微量肉汤稀释法,以CAMHB肉汤稀释药液使其成为2倍工作浓度,筛选地氯雷他定应用的浓度范围为256~0μg/mL。按浓度从低到高的顺序吸取头地氯雷他定100μL,加入96孔平板的,每孔再加入100μL的菌液(5×105CFU/mL),其中阳性生长对照孔只含菌液不含药物,空白对照孔只含CAMHB肉汤。根据CLSIM100-S30方案的要求,将加药的96孔平板置35℃恒温培养箱中培养18-20h,观察结果并记录最低抑菌浓度(MIC,minimal inhibitory concentration),即完全抑制微量稀释孔中细菌生长的最低药物浓度。
3.结果
由表1可以看出,地氯雷他定在浓度为64-128μg/mL时,可完全抑制实验菌株的生长。
表1地氯雷他定抗多重耐药鲍曼不动杆菌的作用
菌株 | MIC(μg/mL) |
AB1 | 128 |
AB2 | 128 |
AB3 | 128 |
AB11 | 64 |
AB12 | 128 |
AB13 | 128 |
实施例2地氯雷他定抗多重耐药鲍曼不动杆菌的动态作用测定
1.材料
1.1药物与主要试剂
地氯雷他定(desloratadine),上海阿拉丁生化科技股份有限公司(上海);
钙调MH肉汤培养基(CAMHB),青岛高科技工业园海博生物技术有限公司(山东青岛);
MHA琼脂培养基,青岛高科技工业园海博生物技术有限公司(山东青岛);
生理盐水,上海阿拉丁生化科技股份有限公司(上海);
1.2实验菌株
山东省千佛山医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌株AB11。
1.3仪器
电子天平(AUY120),SHIMADZU CORPORATION(日本);
取菌环,环耀制药设备销售有限公司(中国北京);
麦氏比浊管,康泰生物科技公司(中国浙江);
涡旋混合器(G-560E),Si公司(美国);
热空气消毒箱(GRX-9123A),MMM公司(德国);
生物安全柜,Thermo Scientific(美国);
恒温培养箱(VENTICELL 110),MMM(德国);
高压灭菌(LMQC-80E),新华医疗器械股份有限公司(山东淄博);
-20℃-4℃冰箱,海尔集团(山东青岛);
超低温冰箱,海尔集团(山东青岛);
96孔无菌微孔板,Corning(美国);
可调式移液器,Eppendorf(德国)。
2.方法
2.1菌液制备
从MHA培养平板上用取菌环分别挑取数个单克隆菌落,接种于无菌CAMHB肉汤中,35℃,200rpm培养16-18h进行活化后离心收集洗涤。用无菌PBS配成菌悬液并与0.5标准麦氏比浊管进行比较,将菌悬液系列稀释后制约为1×107CFU/mL备用。
2.2时间-杀菌曲线测定
时间-杀菌曲线的测定共分为4组,分别是生长对照组(不加地氯雷他定)、25μg/mL地氯雷他定组、50μg/mL地氯雷他定组及75μg/mL地氯雷他定组。取高温高压灭菌后的10mLEP管,依次加入500μL CAMHB肉汤配制好的菌悬液(1×107CFU/mL)和不同体积的药物母液,最终用CAMHB肉汤将各体系补足至5mL,使菌液最终浓度为1×106CFU/mL,地氯雷他定的工作终浓度分别为25μg/mL、50μg/mL和75μg/mL,只含菌悬液不含药液的组为生长对照组。随后将各EP管口塞好无菌脱脂棉球以保证细菌正常呼吸作用,并置于震荡培养箱,35℃、200rpm条件下震荡培养。分别于培养0,2,4,8,12,24h取出各体系,涡旋振荡混合均匀后,各吸取10μL液体进行倍数稀释后,通过菌落计数法确定各组在各时间点对应的菌浓度。采取以下标准判断药物的抗菌结果:与对照组(无药物干预)相比,若用药组菌落数降低>2lg10,则药物有抗菌作用。各实验重复三次。
2.3时间-杀菌曲线法结果
通过统计不同时间点的菌落数,取三次重复实验的平均值,绘制不同药物处理组对AB11的时间-杀菌曲线,如图1所示。
由图1可知,和生长对照组相比,当地氯雷他定浓度为25μg/mL,培养12h以后(12h和24h)AB11的生长速度明显被抑制。和生长对照组相比,25μg/mL地氯雷他定可使12h和24h的菌液浓度分别减少2.53g10和2.17lg10CFU/mL,菌落浓度降低均>2lg10。当地氯雷他定的浓度增高时(50μg/mL和75μg/mL),不同时间点的菌落浓度降低程度基本与25μg/mL的地氯雷他定组相似,均可明显抑制培养12h以后(12h和24h)AB11的生长速度。动态时间-杀菌曲线测定结果与静态抗菌作用测定结果一致,证实了地氯雷他定抗多重耐药鲍曼不动杆菌的作用。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用;
所述抗菌制剂为用于治疗鲍曼不动杆菌引发疾病的药物制剂。
2.如权利要求1所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述鲍曼不动杆菌包括敏感型鲍曼不动杆菌及耐药型鲍曼不动杆菌。
3.如权利要求2所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述耐药型鲍曼不动杆菌为多重耐药鲍曼不动杆菌。
4.如权利要求3所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述地氯雷他定体外完全抑制多重耐药鲍曼不动杆菌的最低浓度为64-128μg/mL;
或,所述地氯雷他定体外明显抑制耐药型鲍曼不动杆菌的最低浓度为25μg/mL。
5.如权利要求1所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述抗菌制剂中,地氯雷他定作为活性物质。
6.如权利要求5所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述抗菌制剂由地氯雷他定及药学上所必须的辅料组成;
或,所述抗菌制剂包括地氯雷他定、其他具有抗菌活性的成分和/或辅助抗菌活性成分及药学上所必须的辅料。
7.如权利要求6所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述抗菌活性成分包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、糖肽类、磺胺类及喹诺酮类、硝咪唑类、林克胺类、碳霉素类及酰胺醇类。
8.如权利要求6所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述抗菌活性成分为β-内酰胺类及氟喹诺酮类,或β-内酰胺类及氨基糖苷类。
9.如权利要求6所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述辅助抗菌活性成分包括抗炎成分、抗氧化成分、消水肿成分。
10.如权利要求1所述地氯雷他定在制备抗菌制剂中的应用,其特征在于,所述抗菌制剂为口服制剂、透皮制剂、注射剂或喷剂。
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Effective date of registration: 20210126 Address after: No.238, Jingshi East Road, Lixia District, Jinan City, Shandong Province, 250102 Applicant after: SHANDONG MATERNAL AND CHILD HEALTH Hospital Address before: 250022 No. 23976, No. ten road, Huaiyin District, Ji'nan, Shandong Applicant before: Jinan Children's Hospital |
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