CN111904648A - 一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法 - Google Patents

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闫奎坡
朱翠玲
孙彦琴
朱明军
徐亚洲
刘刚
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Abstract

本发明公开了一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，包括下列步骤：S1、准备实验所需手术器材:10％水和1ml注射器，碘伏，棉棒，电推子，手术板，4根皮筋，剪刀，大眼科弯镊2把，持针器1把，止血钳1把，6‑0带针缝合线，3‑0缝合线，缝合针，电子秤，呼吸机；S2、选择状态较好的大鼠，雄性，220‑250g，称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上，胸骨左侧剃毛，剃毛处擦碘伏消毒，胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜。该大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，相对于现有的小鼠心肌缺血再灌注模型，本制备方法操控简单，且大鼠的存活时间长，灌注效果准备。

Description

一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法
技术领域
本发明涉及大鼠心肌灌注模型技术领域，具体为一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法。
背景技术
现有的小鼠心肌缺血/再灌注(MIR)模型目前﹐制备小鼠心肌缺血模型多采用药物诱导方法﹐如血管升压素(垂体后叶素)异丙肾上腺素等，这些药物诱发的作用复杂，且无法准确实现再灌注。
Guo等于1998年通过手术制备小鼠心肌缺血/再灌注模型他们报道的再灌注时间可达到12h。但该方法对实验设备要求较高，对长时间再灌注的维护条件要求苛刻﹐且这种方法效率较低﹐一个实验员1d最多做两只。鉴于以上方法的弊端.研究者们又发展了一种新的制备方法﹐具体做法是:给小鼠吸入麻醉，在其左侧胸部预做—个荷包，在荷包内用蚊氏钳迅速撑开胸壁﹐挤出心脏结扎前降支:收荷包闭胸﹐留置活结线头于胸外。再灌注时牵拉线头解开活结。这种做法操作简单﹐不使用呼吸机小鼠可长期存活﹐但缺点是成功率低.再灌注不够确切﹐对于价格昂贵的动物(如转基因动物或老年动物〉，可能造成巨大的浪费。
因此亟需提供一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，解决了现有技术中的灌注效果差，制备成本高的问题。
(二)技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，包括下列步骤：
S1、准备实验所需手术器材:10％水和1ml注射器，碘伏，棉棒，电推子，手术板，4根皮筋，剪刀，大眼科弯镊2把，持针器1把，止血钳1把，6-0带针缝合线，3-0缝合线，缝合针，电子秤，呼吸机；
S2、选择状态较好的大鼠，雄性，220-250g，称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上，胸骨左侧剃毛，剃毛处擦碘伏消毒。胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜；
S3、胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜，用镊子撕开胸膜进入胸腔，用止血钳撑开肋骨，暴露出心脏
S4、用镊子轻轻撕破心膜，用止血钳轻轻把心脏夹出，用6-0缝合线结扎，将心脏放回胸腔；
S5、观察心脏里面有无出血，无出血后用3-0缝合线逐层缝合，缝合结束后擦拭碘伏消毒，然后拔出呼吸机，将大鼠放回笼内；
S6、如果需要做缺血再灌注模型时，再S4结扎时加入特制线栓，缺血相应时间后拔去线栓，制成心肌缺血再灌注模型
优选的，所述S4中结扎位置与左心耳尖平行处，且结扎过程中不可触碰到肺部。
优选的，所述S6结束后，进行观察验证包括心电图验证和TTC染色观察验证。
优选的，所述实验组大鼠数量为四到六组，且初始体重性别相同。
(三)有益效果
本发明提供了一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，具备以下有益效果：
(1)该大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，相对于现有的小鼠心肌缺血/再灌注模型，本制备方法操控简单，且大鼠的存活时间长，灌注效果准备。
(2)该大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，通过心电图和TTC染色观察，便于实验组的观察效果，即实验数据既可以通过活体心脏跳动观察，又可以通过心脏梗死面积进行观察。
具体实施方式
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明提供一种技术方案：一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，包括下列步骤：
S1、准备实验所需手术器材:10％水和1ml注射器，碘伏，棉棒，电推子，手术板，4根皮筋，剪刀，大眼科弯镊2把，持针器1把，止血钳1把，6-0带针缝合线，3-0缝合线，缝合针，电子秤，呼吸机；
S2、选择状态较好的大鼠，雄性，220-250g，称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上，胸骨左侧剃毛，剃毛处擦碘伏消毒。胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜；
S3、胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜，用镊子撕开胸膜进入胸腔，用止血钳撑开肋骨，暴露出心脏；
S4、用镊子轻轻撕破心膜，用止血钳轻轻把心脏夹出，用6-0缝合线结扎，将心脏放回胸腔；
S5、观察心脏里面有无出血，无出血后用3-0缝合线逐层缝合，缝合结束后擦拭碘伏消毒，然后拔出呼吸机，将大鼠放回笼内；
S6、如果需要做缺血再灌注模型时，再S4结扎时加入特制线栓，缺血相应时间后拔去线栓，制成心肌缺血再灌注模型
所述S4中结扎位置与左心耳尖平行处，且结扎过程中不可触碰到肺部。
所述S6结束后，进行观察验证通过测试实验组的心电图与正常大鼠的心电图进行对比。
实施例2
一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，包括下列步骤：
S1、准备实验所需手术器材:10％水和1ml注射器，碘伏，棉棒，电推子，手术板，4根皮筋，剪刀，大眼科弯镊2把，持针器1把，止血钳1把，6-0带针缝合线，3-0缝合线，缝合针，电子秤，呼吸机；
S2、选择状态较好的大鼠，雄性，220-250g，称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上，胸骨左侧剃毛，剃毛处擦碘伏消毒。胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜；
S3、胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜，用镊子撕开胸膜进入胸腔，用止血钳撑开肋骨，暴露出心脏
S4、用镊子轻轻撕破心膜，用止血钳轻轻把心脏夹出，用6-0缝合线结扎，将心脏放回胸腔；
S5、观察心脏里面有无出血，无出血后用3-0缝合线逐层缝合，缝合结束后擦拭碘伏消毒，然后拔出呼吸机，将大鼠放回笼内；
S6、如果需要做缺血再灌注模型时，再S4结扎时加入特制线栓，缺血相应时间后拔去线栓，制成心肌缺血再灌注模型
所述S4中结扎位置与左心耳尖平行处，且结扎过程中不可触碰到肺部。
所述S6结束后，进行观察验证通过切割实验组中已经死亡的大鼠心脏，观测心脏梗死面积。
实验例：
取四组大鼠，且每组大鼠数量为5只，其中一组正常饲养，其余四组按照上述实施例进行操作，最终制备对比的心电图模型和大鼠心脏的梗死面积，其中实验组的心跳频率低，梗死面积大。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (4)

1.一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，其特征在于：包括下列步骤：
S1、准备实验所需手术器材:10％水和1ml注射器，碘伏，棉棒，电推子，手术板，4根皮筋，剪刀，大眼科弯镊2把，持针器1把，止血钳1把，6-0带针缝合线，3-0缝合线，缝合针，电子秤，呼吸机；
S2、选择状态较好的大鼠，雄性，220-250g，称重醉后仰卧用皮筋固定手术板上，胸骨左侧剃毛，剃毛处擦碘伏消毒，胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜；
S3、胸骨左侧纵向剪开皮肤4厘米，钝性分离皮下肌肉，在分离三和四肋间暴露出胸膜，用镊子撕开胸膜进入胸腔，用止血钳撑开肋骨，暴露出心脏；
S4、用镊子轻轻撕破心膜，用止血钳轻轻把心脏夹出，用6-0缝合线结扎，将心脏放回胸腔；
S5、观察心脏里面有无出血，无出血后用3-0缝合线逐层缝合，缝合结束后擦拭碘伏消毒，然后拔出呼吸机，将大鼠放回笼内；
S6、如果需要做缺血再灌注模型时，再S4结扎时加入特制线栓，缺血相应时间后拔去线栓，制成心肌缺血再灌注模型。
2.根据权利要求1所述的一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，其特征在于：所述S4中结扎位置与左心耳尖平行处，且结扎过程中不可触碰到肺部。
3.根据权利要求1所述的一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，其特征在于：所述S6结束后，进行观察验证包括心电图验证和TTC染色观察验证。
4.根据权利要求1所述的一种大鼠心肌缺血再灌注模型的制备方法，其特征在于：所述实验组大鼠数量为四到六组，且初始体重性别相同。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113425443A (zh) * 2021-06-17 2021-09-24 湖南丰晖生物科技有限公司 一种sd大鼠心肌缺血模型的构建方法
CN113520363A (zh) * 2021-06-25 2021-10-22 安影科技（北京）有限公司 一种下丘脑及垂体的血流灌注获取方法及系统

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