CN111870610B - 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用 - Google Patents

木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111870610B
CN111870610B CN202010795036.9A CN202010795036A CN111870610B CN 111870610 B CN111870610 B CN 111870610B CN 202010795036 A CN202010795036 A CN 202010795036A CN 111870610 B CN111870610 B CN 111870610B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
portions
luteolin
glucoside
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010795036.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111870610A (zh
Inventor
程雪翔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hubei Mingmu Health Technology Co ltd
Original Assignee
Hubei Mingmu Health Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hubei Mingmu Health Technology Co ltd filed Critical Hubei Mingmu Health Technology Co ltd
Priority to CN202010795036.9A priority Critical patent/CN111870610B/zh
Publication of CN111870610A publication Critical patent/CN111870610A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111870610B publication Critical patent/CN111870610B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
    • A61K9/2059—Starch, including chemically or physically modified derivatives; Amylose; Amylopectin; Dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明提供了木犀草素‑7‑O‑葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用，属于眼科疾病治疗技术领域。本发明的结果显示：木犀草素‑7‑O‑葡萄糖苷能够治疗视网膜变性引发的视网膜病变。

Description

木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病 的药物中的应用
技术领域
本发明属于眼科疾病治疗技术领域，尤其涉及木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用。
背景技术
视网膜为一层柔软而透明的膜，紧贴在脉络膜内面，有感受光刺激的作用。当视网膜发生病变时，可直接导致视力受损，严重的可引起失明。
视网膜变性是导致视网膜病变的主要原因之一，临床中由视网膜变性引发的疾病主要有与年龄相关的黄斑变性、视网膜色素变性、糖尿病眼底病变、高度近视黄斑病变等。
治疗视网膜变性引发的眼病的治疗方法常采用扩张视网膜血管、营养视网膜等方法。
近年来，随着对视网膜变性引发的疾病的认识的不断深入，不同类型的治疗方式在积极研究中，包括神经保护、基因治疗、干细胞治疗以及人工视网膜等。临床上已开展多种视网膜变性相关的临床治疗研究，但依旧没有有效的治疗药物上市。视网膜变性引发的各种疾病依据在严重影响人类的身心健康。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用。
优选的，所述疾病包括：与年龄有关的黄斑变性、视网膜色素变性、高度近视黄斑变性和糖尿病视网膜变性。
优选的，所述药物包括口服制剂、外用制剂或无菌制剂。
优选的，所述口服制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
优选的，当所述口服制剂为片剂时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～20份、淀粉5～10份、糊精5～10份、羧甲基纤维素钠5～10、滑石粉5～10份和硬脂酸镁0.5～2份。
优选的，当所述口服制剂为口服液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、质量浓度为65％的单糖浆10～500 份、柠檬酸0.1～1份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-801～10份和水10～500份。
优选的，所述外用制剂包括滴眼液、眼用凝胶剂或眼用膏剂。
优选的，当所述外用制剂为滴眼液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份、羧甲基纤维素钠 1～10份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-801～10份和水10～900份。
优选的，所述无菌制剂包括注射液或无菌粉末。
优选的，当所述无菌制剂为注射液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份吐温-801～10份和水 10～900份。
本发明提供了木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用。
附图说明
图1为小鼠眼球状态变化；
图2为小鼠视网膜组织眼底成像，(注：retinal vessels：视网膜血管； retinalmacula：视网膜色斑；white sheath ofblood vessels：血管白鞘)；
图3为小鼠视网膜组织HE染色；
图4为小鼠视网膜组织免疫组化；
图5为小鼠视网膜层细胞形态；
图6为视网膜组织活性和氧化应激检测，(a)组织内LDH活性(b) 组织内ROS水平(c)细胞内MDA水平(d)细胞内SOD活性(注：实验组与对照组比较，***p<0.001；实验组与模型组比较，##p<0.01， ###p<0.001)。
具体实施方式
本发明提供了木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗视网膜色素变性引发的疾病的药物中的应用。在本发明中，所述木犀草素-7-O-葡萄糖苷的结构式如式I所示：
Figure RE-GDA0002694733420000031
本发明对所述木犀草素-7-O-葡萄糖苷的来源没有特殊限定，采用常规市售即可。
在本发明中，所述疾病优选包括：与年龄有关的黄斑变性、视网膜色素变性、高度近视黄斑变性和糖尿病视网膜变性。
在本发明中，所述药物优选包括口服制剂、外用制剂或无菌制剂。
在本发明中，所述口服制剂优选包括片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。在本发明中，当所述口服制剂优选为片剂时，包括以下重量份数的组分：木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～20份、淀粉5～10份、糊精5～10份、羧甲基纤维素钠5～10、滑石粉5～10份和硬脂酸镁0.5～2份。本发明对所述片剂的制备方法没有特殊限定，采用常规片剂的制备方法即可。
在本发明中，当所述口服制剂优选为口服液时，包括以下重量份数的组分：木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、质量浓度为65％的单糖浆 10～500份、柠檬酸0.1～1份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-801～10份和水 10～500份。在本发明中，所述水优选为注射用水。
在本发明中，当所述口服制剂优选为胶囊剂或颗粒剂时，木犀草素-7- O-葡萄糖苷的质量百分含量优选为0.1～50％。本发明对所述胶囊剂、颗粒剂的制备方法没有特殊限定，采用常规制备方法即可。
在本发明中，所述外用制剂优选包括滴眼液、眼用凝胶剂或眼用膏剂。
在本发明中，当所述外用制剂优选为滴眼液时，包括以下重量份数的组分：木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份、羧甲基纤维素钠1～10份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-80 1～10份和水100～900份。在本发明中，所述水优选为注射用水。本发明对所述滴眼液的制备方法没有特殊限定，采用常规滴眼液的制备方法制备即可。
在本发明中，当所述外用制剂优选为眼用凝胶剂或眼用膏剂时，木犀草素-7-O-葡萄糖苷的质量百分含量优选为0.1～20％，本发明对所述眼用凝胶剂和眼用膏剂的制备方法没有特殊限定，采用常规制备方法即可。
在本发明中，所述无菌制剂优选包括注射液或无菌粉末。在本发明中，当所述无菌制剂为注射液时，优选包括以下重量份数的组分：木犀草素-7- O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份吐温-80 1～10份和水100～900份。在本发明中，所述水优选为注射用水。本发明对所述注射液的制备方法没有特殊限定，采用常规制备方法制备即可。
在本发明中，所述无菌制剂优选为无菌粉末，木犀草素-7-O-葡萄糖苷的质量百分含量优选为0.01～20％，本发明对所述无菌粉末的制备方法没有特殊限定，采用常规无菌粉末的制备方法制备即可。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1.实验动物及分组
实验小鼠品种为SPF级ICR雄性小鼠，体重在18～22g之间，购于南京市江宁区青龙山动物繁殖场。实验一共设置3组小鼠：对照组、NaIO3诱导组和给药组。其中每组小鼠共10只，5只用于动物组织切片实验，5只用于动物眼底成像和组织检测。对照组实验期间只给小鼠喂饲料和水，不进行实验操作；NaIO3诱导组给小鼠尾静脉注射浓度为45mg/kg的NaIO3溶液；给药组既给小鼠尾静脉注射浓度为45mg/kg的NaIO3溶液，同时给小鼠左眼玻璃体腔注射木犀草素-7-O-葡萄糖苷(简称FBJ-2)溶液。
2.实验材料及仪器
2.1.实验试剂及材料：
0.9％氯化钠注射液(双鹤药业)；氧氟沙星滴眼液(民生药业)；红霉素眼膏(北京双吉制药有限公司)；FAS眼球固定液和组织包埋材料( 武汉谷歌生物科技有限公司)；免疫组化试剂盒及相关抗体(武汉谷歌生物科技有限公司)；复方托吡卡胺滴眼液(沈阳兴齐眼药股份有限公司)；碘酸钠和水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司)。H2DCFDA(上海源叶生物科技有限公司)；MDA、SOD活性测定试剂盒(南京生物技术公司) ；LDH检测试剂盒(南京建成生物)；生物实验所用耗材(江苏凯基生物) ；动物实验所需器械(上海医疗器械有限公司)。
实验中部分仪器及设备如下表1所示。
表1实验设备和仪器
Figure RE-GDA0002694733420000051
2.2.小鼠模型的构建
(1)小鼠尾静脉注射NaIO3溶液：
NaIO3溶液用生理盐水配制浓度为5.625mg/mL，每只小鼠按8mL/kg 的剂量尾静脉注射。
(2)小鼠玻璃体腔注射FBJ-2溶液：
用生理盐水配制木犀草素-7-O-葡萄糖苷(FBJ-2)溶液浓度为2.2mg/ml，每只小鼠注射2μL FBJ-2溶液。小鼠玻璃体腔注射前先用乙醚将小鼠麻醉，在小鼠眼球表面滴加抗生素滴眼液，用10μL注射器配33G平头动物针头吸取相应体积的FBJ-2溶液进行小鼠玻璃体腔注射。
(3)小鼠模型实验的构建：
实验开始前的3天给药组小鼠左眼滴加氧氟沙星滴眼液。实验开始当天称取小鼠体重，进行小鼠尾静脉注射NaIO3溶液以及小鼠玻璃体腔注射 FBJ-2溶液。实验完成后对小鼠进行标记，继续饲养小鼠一周，观察小鼠眼部是否有有炎症出现。一周后对小鼠进行称重，并进行小鼠视网膜组织检测。
2.3.小鼠视网膜结构眼底成像
小鼠眼底照相前进行水合氯醛麻醉，麻醉后将小鼠水平俯卧于实验台上，通过小鼠角膜反射判断小鼠完全麻醉。照相前10min小鼠眼部用复方托吡卡胺滴眼液进行散瞳。使用眼底照相仪进行拍照，以视网膜血管为标志，分析小鼠眼底视网膜组织的形态。
2.4.小鼠视网膜结构HE染色
小鼠通过脱颈椎法处死后将眼球放入1mL FAS眼球固定液、石蜡包埋。然后沿小鼠眼球失状面进行组织切片，切片厚度为5μm，并用载玻片固定。取小鼠视网膜中央区域的切片进行HE染色。然后在光学显微镜下观察视网膜组织结构。
2.5.小鼠视网膜结构免疫组化
将小鼠组织石蜡切片脱蜡复水、PBS冲洗，用3％的过氧化氢溶液室温孵育切片组织15min。用正常山羊血清室温封闭，再次清洗玻片。用细胞角蛋白CK-8的鼠源抗体作为一抗，按1:800比例稀释后滴加到切片组织上 4℃孵育过夜。一抗孵育完，将玻片恢复至室温，滴加聚合物辅助剂室温孵育20min。然后用二抗室温孵育，滴加BAD显色液显色，用自来水冲洗终止染色。加苏木素试剂复染细胞核，用自来水冲洗。重新进行脱水、透明操作，用中性树胶封存。切片可在光学显微镜下观察视网膜组织结构。
2.6.小鼠视网膜层结构显微镜观察
小鼠通过脱颈椎法处死后将眼球放入1mL生理盐水中，将小鼠眼球取出，用角膜剪沿角膜与巩膜的连线将眼球沿冠状面剪开，去除小鼠角膜和晶状体。在显微镜下区分小鼠视网膜层和视神经层，用镊子夹取视网膜层轻轻剥下放在载玻片上，滴加一滴生理盐水，盖上盖玻片，在光学显微镜下观察视网膜组织结构。
2.7.小鼠视网膜组织活性及氧化应激检测
用上述方法将小鼠视网膜组织取下，放入500μL生理盐水中，按20:1 的比例加入相应的PMSF，防止蛋白降解。用超声粉碎机进行组织匀浆。细胞破碎后迅速冰浴至低温，用离心机4℃12000rpm离心10min。离心后取上清，利用BCA检测法检测组织的蛋白含量。用H2DCFDA法检测组织内总ROS，并分别用LDH、MDA和SOD试剂盒检测小鼠视网膜组织的活性和其他氧化应激指标。
3结果与分析
3.1小鼠行为及体重分析
通过观察小鼠给药一周后的行为，发现3组小鼠的行为没有太大差异，没有小鼠出现惊恐、焦躁、攻击性强等症状；通过不同组小鼠实验前后体重测量发现三组小鼠实验前后的体重变化没有显著性差异(表2)，说明模型组中NaIO3的含量并未影响到小鼠其他组织正常的生理功能。此外，通过观察小鼠眼部发现实验组小鼠眼部均表现正常，没有肿胀及白色浑浊出现；小鼠玻璃体没有出血等症状，证明实验操作正确(图1)。
3.2小鼠视网膜组织眼底成像
通过眼底照相以视网膜血管为视网膜标志物，观察小鼠的视网膜组织是否有明显病变(图2)。对照组小鼠视网膜组织呈粉红色，可以清晰的看到丰富的小鼠视网膜血管(图2中的a)。经NaIO3诱导的小鼠视网膜组织难以看到正常的视网膜血管，代替出现的是血管白鞘和视网膜色斑(图2 中b)。视网膜血管白鞘是由血管闭塞、纤维化引起的血管病变，产生的原因主要为视网膜炎症。由于白鞘化的血管正常功能受到抑制，视网膜组织无法获得充足的氧气和养料，进而引起视网膜细胞死亡，导致组织病变；其症状之一即是视网膜色素含量降低，出现视网膜色斑。NaIO3组中的视网膜血管白鞘化严重，且出现明显的视网膜色斑，说明小鼠的视网膜组织已经受到了严重的损伤。图2中的c表示的是经玻璃体腔注射FBJ-2后的小鼠视网膜组织。虽然视网膜组织仍呈淡粉色，但是已经没有明显的血管白鞘和视网膜色斑等症状，也可以看到正常的小鼠视网膜血管，证明小鼠的视网膜组织得到了有效的保护。
3.3小鼠视网膜组织HE染色
小鼠视网膜组织HE染色结果如图3所示。小鼠视网膜组织由多层细胞构成，其中与外界血眼屏障相连的细胞即为RPE细胞。RPE细胞作为光感受器细胞(IS/OS)生长依赖的内皮层细胞，并为IS/OS细胞提供养料。在IS/OS细胞内侧为外核层细胞(ONL)，再内侧为内核层细胞(INL)和其他细胞。
对照组的染色结果中，可以看到视网膜各细胞结构完整，且各层细胞排列紧密，细胞层边界平滑整齐(图3中的a)。经NaIO3诱导的小鼠视网膜染色可以明显看出视网膜组织与眼球边界脱离(图3中的b)。进一步放大观察，IS/OS细胞层结构出现变化，细胞层变薄，大量IS/OS细胞游离在组织中。并且IS/OS细胞层与ONL细胞层的边界凹凸不平，细胞排列也不再整齐。玻璃体腔注射FBJ-2后的实验组小鼠的视网膜组织可以看到IS/OS 细胞层与ONL层重新恢复平整，IS/OS细胞层厚度也有明显改善。证明 FBJ-2成功缓解了NaIO3对小鼠视网膜组织造成的损伤(图3中的c)。
3.4小鼠视网膜组织免疫组化
RPE细胞在动物体内仅为单层模型结构，利用光学显微镜和HE染色很难完全观察到其状态变化。为此，选择了一种上皮细胞中的特异性蛋白细胞角蛋白，利用免疫组化实验观察其在组织中的显色情况，从而间接判断RPE细胞的变化。如图4所示，对照组中在IS/OS细胞层上方可以看到一条棕黄色线条，代表视网膜中的RPE细胞层。而经NaIO3诱导的小鼠视网膜组织中已经看不到这一条棕黄色线条，说明RPE细胞层已经消失，这也是视网膜脱离最主要的原因。FBJ-2处理后的小鼠视网膜组织不再与眼球边界脱离，并可以看到薄薄的一层RPE细胞层，证明FBJ-2确实通过保护 RPE细胞受到的损伤从而缓解了NaIO3对小鼠视网膜组织造成的损伤。
3.5小鼠视网膜组织显微镜成像及组织检测
通过手术取下的小鼠视网膜层细胞在光学显微镜下进行形态观察。如图5所示，在光学显微镜下可以清晰的看到视网膜的细胞形态。对照组中可以清晰看到细胞的颗粒状形态和细胞边界，说明细胞状态正常(图5中a) 。NaIO3诱导组中的视网膜细胞只能勉强看出的细胞形态，细胞的边界已经不可见，说明细胞状态出现变化(图5中b)。经50μM浓度FBJ-2玻璃体腔注射后的小鼠的视网膜结构重新恢复，可以看到正常的细胞形态和边界，说明FBJ-2在动物体内仍然可以有效保护视网膜细胞受到的损伤(图5中c) 。
进一步，将取下的视网膜组织制备成匀浆，用于检测小鼠视网膜组织的活性和氧化应激水平。乳酸脱氢酶(LDH)是一种非特异性酶，存在于所有组织细胞中。当组织处于正常状态时，组织细胞未受损，LDH在细胞中不会泄露；而当组织中的细胞受到损伤后，细胞膜结构被破坏，LDH便会从组织中泄露，进入到组织液或者血液中，表现为血液LDH活性升高，组织LDH活性降低。因此，利用LDH的检测我们可以观察小鼠视网膜组织的活性，判断其损伤情况。如图6中的a所示，NaIO3诱导组中的LDH 活性与对照组相比显著降低(59.55±1.29％)，而注射FBJ-2后的实验组小鼠的LDH活性有所恢复(75.69±3.73％)。LDH的检测证明了尾静脉注射 NaIO3可以对小鼠的视网膜组织产生损伤，而FBJ-2可以有效抵御这种损伤。
通过检测视网膜组织中的ROS和MDA水平来评价小鼠视网膜组织的氧化应激情况(图6中b、6中c)。如图所示，NaIO3诱导组中的ROS和 MDA水平与对照比都有明显的升高(285.9±4.16％，240.2±11.96％)，注射FBJ-2后的实验组小鼠的ROS水平发生显著性降低(166.8±4.45％)， MDA水平也明显下降(182.3±9.33％)。
同时检测了视网膜组织中的SOD活性(图6中d)。如图所示，NaIO3诱导组中的SOD与对照比发生显著性提高(167.7±10.89％)，而药物组中的SOD与NaIO3诱导组相比进一步升高(229±14.12％)。NaIO3诱导组中的SOD活性之所以会升高是因为小鼠体内的防御机制检测到视网膜组织发生大量的氧化应激，从而提高了自身的抗氧化能力；而FBJ-2自身的抗氧化能力在药物组中同样表现出来。
实施例1的研究结果表明，NaIO3诱导小鼠视网膜组织损伤的机制主要是由于RPE细胞氧化应激导致的，而FBJ-2可以保护小鼠视网膜组织中 RPE细胞的损伤，从而缓解小鼠视网膜组织病变；这种保护机制与FBJ-2 自身的抗氧化能力有很大的关系。并且FBJ-2这一作用机制一定程度上同样适用于视网膜色素变性的治疗。
表2不同组小鼠实验前后体重变化(单位：g)
Figure RE-GDA0002694733420000101
实施例2
片剂：以重量计：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷10份，淀粉5份，糊精5份，羧甲基纤维素钠 5，滑石粉5份，硬脂酸镁0.5份，压成片剂。
实施例3
口服液：以重量计：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷10g，质量浓度为65％的单糖浆500g，柠檬酸 0.5g，苯扎溴铵0.3g，吐温-805g，加水制成1000ml。
实施例4
滴眼液，以重量计：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷1g，氯化钠9g，羧甲基纤维素钠2g，苯扎溴铵0.2g，吐温-802g，加注射用水制成1000ml，过滤除菌。
实施例5
注射液，以重量计：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷1g，氯化钠9g，吐温-802g，加注射用水制成 1000ml，热压灭菌。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.木犀草素-7-O-葡萄糖苷在制备治疗NaIO3诱导的视网膜变性引发的疾病的药物中的应用；
所述视网膜变性包括视网膜血管白鞘化导致的视网膜色斑和/或IS/OS细胞层与ONL层边界凹凸不平细胞排列不整齐；
所述疾病包括：视网膜色素变性、高度近视黄斑变性和糖尿病视网膜变性。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括口服制剂、外用制剂或无菌制剂。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述口服制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，当所述口服制剂为片剂时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～20份、淀粉5～10份、糊精5～10份、羧甲基纤维素钠5～10、滑石粉5～10份和硬脂酸镁0.5～2份。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，当所述口服制剂为口服液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、质量浓度为65％的单糖浆10～500份、柠檬酸0.1～1份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-801～10份和水10～500份。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述外用制剂包括滴眼液、眼用凝胶剂或眼用膏剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，当所述外用制剂为滴眼液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份、羧甲基纤维素钠1～10份、苯扎溴铵0.1～0.5份、吐温-801～10份和水100～900份。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述无菌制剂包括注射液或无菌粉末。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，当所述无菌制剂为注射液时，包括以下重量份数的组分：
木犀草素-7-O-葡萄糖苷0.1～100份、氯化钠1～9份吐温-801～10份和水100～900份。
CN202010795036.9A 2020-08-10 2020-08-10 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用 Active CN111870610B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010795036.9A CN111870610B (zh) 2020-08-10 2020-08-10 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010795036.9A CN111870610B (zh) 2020-08-10 2020-08-10 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111870610A CN111870610A (zh) 2020-11-03
CN111870610B true CN111870610B (zh) 2023-01-13

Family

ID=73212007

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010795036.9A Active CN111870610B (zh) 2020-08-10 2020-08-10 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111870610B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113599495B (zh) * 2021-06-04 2024-04-05 爱尔眼科医院集团股份有限公司 组合物及其在制备治疗视网膜色素变性的药物中的应用
CN117838628B (zh) * 2024-03-01 2024-05-28 广州市桐晖药业有限公司 一种地夸磷索钠滴眼液及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109876003B (zh) * 2019-04-04 2022-02-08 湖北明钼健康科技有限公司 木犀草素-7-o-葡萄糖苷、木犀草素-7-o-葡萄糖醛酸苷的制药新应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN111870610A (zh) 2020-11-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Phelps et al. Open-angle glaucoma following surgery for congenital cataracts
CN111870610B (zh) 木犀草素-7-o-葡萄糖苷在制备治疗视网膜变性引发的疾病的药物中的应用
CN113599495B (zh) 组合物及其在制备治疗视网膜色素变性的药物中的应用
Jackson et al. An experimental model of rhegmatogenous retinal detachment: surgical results and glial cell response
CN108030783A (zh) 乐伐替尼在制备防治黄斑变性的药物中的用途
Gionfriddo Ophthalmology of south American camelids
Willi et al. Pupillary-block glaucoma in the Marchesani syndrome
Steward et al. Spontaneous regression of retinoblastoma
JP3603129B2 (ja) 糖尿病性角膜症の治療剤
McDonnell et al. Ocular histopathology of systemic mucopolysaccharidosis, type II-A (Hunter syndrome, severe)
Li et al. Effects of modified trabeculectomy combined with phacoemulsification and intraocular lens implantation on intraocular pressure and complications in patients with primary open angle glaucoma
Townsend Cataracts: Clinical presentations, diagnosis and management
KR102228401B1 (ko) 유리체 절제술 및 안구 내 mnu 주입과 제거를 이용한 망막 변성 동물 모델의 제조방법 및 이를 이용한 망막 변성 동물 모델
KRAUSE et al. Treatment of metastatic meningococcic endophthalmitis: Report of a case
Cerreta et al. Bilateral phacoemulsification in an African elephant (Loxodonta africana)
Lin Observation on the clinical effect of cataract phacoemulsification combined with intraocular lens implantation
Iqbal et al. Advancing Glaucoma Care in Bangladesh With Minimally Invasive Glaucoma Surgery
Gupta et al. Management of Diabetic Macular Edema Through Ayurveda: A Single Case Study
Bhandari et al. Parasitic Cyst in Anterior Chamber. Is Viscoexpression Safe? A Case Report
KR20230034156A (ko) Sglt-2 억제제를 포함하는 당뇨병성 안질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물
Bonea et al. Efficiency and therapeutic conduct of surgical procedures for mature cataracts in a dog, case report.
L-LYSOZYM not only the non-pathogenic bacteria, but also many of the bacteria pathogenic for man in such concentration as exists in hu-man tears.
Cerreta et al. Case Report Bilateral Phacoemulsification in an African Elephant (Loxodonta africana)
Jackson et al. The ophthalmic year book
RU2521832C2 (ru) Способ хирургического лечения гемофтальма

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant