CN111778164A - 一种Actinomucorelegasn的用途及其制备方法 - Google Patents

一种Actinomucorelegasn的用途及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于农业技术领域,具体涉及一种含Actinomucorelegasn的用途及其制备方法。所述的Actinomucorelegasn用于防治茴香薄翅野螟的用途。所述的组合物中含有1~10%wt的Actinomucorelegasn原菌液。本发明的优点在于:(1)提功了Actinomucorelegasn防治茴香薄翅野螟的新用途。(2)含真菌Actinomucorelegasn的组合物的制备方法简单、成本低。(3)对人畜及环境无毒无害,不会造成农药污染和富集积累。(4)无污染、无农残,绿色健康。

Description

一种Actinomucorelegasn的用途及其制备方法
技术领域
本发明属于农业技术领域,具体涉及一种含Actinomucorelegasn的用途其制备方法。
背景技术
茴香薄翅野螟(EvergestisextimalisScopli),属鳞翅目螟蛾科(Lepidoptera,Pyralidida),又名油菜角野螟,茴香螟、油菜螟,其国内主要分布于青海、甘肃、宁夏、内蒙和黑龙江等北方地区,国外分布于朝鲜、日本、美国及西北利亚等地。主要危害茴香、甜菜、白菜、油菜、荠菜、萝卜、甘蓝、芥菜等植物。在春油菜上主要以幼虫钻蛀角果、食籽粒的方式危害,是青海省春油菜田上一种重要的毁灭性害虫,常导致春油菜绝收。
目前,生产上主要用化学农药防治该虫。由于长期、高剂量的使用相对单一的化学农药,该虫已对高效氯氰菊酯、毒死蜱等常规农药产生抗药性。另外,由于大量施用化学农药,空气、水源、土壤和食物受到了污染,毒物积累在家畜和人体当中引起中毒等。化学农药的大量投入和长期使用带来了许多问题,如害虫、病原菌产生抗药性;农产品中产生残毒,由于生物富集作用而使以这些农作物为食的动物体内残毒加大,影响作物的无公害绿色化生产;容易造成农田生态环境破坏和人畜中毒等次生毒害。
目前我国正在实施农药减量增效,提高农产品质量安全。研发害虫生物防治技术,有助于农药减量增效,也是农药减量增效的重要技术。
发明内容
基于上述问题,本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种环保、高效、安全、无污染、无残留的,制备和使用方法简便的生物防治茴香薄翅野螟的方法。
一种Actinomucorelegasn用于防治茴香薄翅野螟的用途。
本发明还提供一种含有Actinomucorelegasn的组合物。
一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,所述的组合物中含有1~10%wt的Actinomucorelegasn原菌液。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn原菌液为真菌Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn经液体发酵制备所得。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中还含有0.05~2%wt的表面活性剂。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中还含有0.1~1%wt的渗透剂T。
本发明还提供一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法。
一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法,所述的方法包含以下步骤:
S1,真菌Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn备用;
S2,从虫体分离出来的Actinomucorelegasn接种至液体培养基中培养;
S3,相对湿度60~80%、30±2℃,培养8~12天,至OD600处发酵液吸光值最大时停止发酵,所得Actinomucorelegasn原菌液备用;
S4,所得Actinomucorelegasn原菌液加水稀释至Actinomucorelegasn原菌液的含量为1~10%wt,即得用于防治茴香薄翅野螟的组合物。
进一步的,所述的液体培养基为马铃薯180~220g,葡萄糖30~40g,蒸馏水1000ml,121℃,灭菌30min后制备的培养液。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中加入0.05~2%wt的阴离子表面活性剂。
本发明还提供一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的使用方法。
一种生物防治茴香薄翅野螟的方法,所述的方法是将含有Actinomucorelegasn的菌液喷洒在茴香薄翅野冥为害的植物上。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液在油菜角果期喷施。
本发明提供的Actinomucorelegasn防治茴香薄翅野螟的用途,利用Actinomucorelegasn这种原本用于传统发酵豆制品中常用的生产菌株,开发了其新用途。
本发明提供的Actinomucorelegasn防治茴香薄翅野螟的用途,真菌Actinomucorelegasn通过感染茴香薄翅野螟幼虫而杀死其幼虫,阻断幼虫化蛹实现防治茴香薄翅野螟的目的。Actinomucorelegasn本身对人畜及环境无毒无害,不会造成农药污染和富集积累,也不会感染其他以茴香薄翅野螟为食的其他动物。
本发明提供的含Actinomucorelegasn的组合物,先用Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn在经液体发酵后,菌液再经配置制得含Actinomucorelegasn的组合物。因此,组合物感染茴香薄翅野螟幼虫的感染率高,组合物有效。
另外,本发明提供的含Actinomucorelegasn的组合物中,还添加了表面活性剂,表面活性剂增加含Actinomucorelegasn的组合物的渗透性,进一步提高感染率。
本发明提供的含Actinomucorelegasn的组合物,根据茴香薄翅野螟危害程度,可选择多次喷施,能有效防治茴香薄翅野螟。
本发明提供的用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法简单、高效,工艺条件和工艺控制点简单,便于推广。且用于培养Actinomucorelegasn的培养基以马铃薯为主,添加少量的葡萄糖,培养基组成简单,成本低廉。
本发明的优点在于:
(1)提功了Actinomucorelegasn防治茴香薄翅野螟的新用途。
(2)含真菌Actinomucorelegasn的组合物的制备方法简单、成本低。
(3)对人畜及环境无毒无害,不会造成农药污染和富集积累。
(4)无污染、无农残,绿色健康。
具体实施方式
为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案,以下实施例对本发明的作进一步详细描述,以下实施例仅用于说明发明,但不用来限制本发明的范围。
本说明书中公开的所有特征、方法或步骤,除了互相排斥的特征和/或步骤以外,均可以以任何方式组合。
一种Actinomucorelegasn用于防治茴香薄翅野螟的用途。
本发明还提供一种含有Actinomucorelegasn的组合物。
一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,所述的组合物中含有1~10%wt的Actinomucorelegasn原菌液。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn原菌液为Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn经液体发酵制备所得。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中还含有0.05~2%wt的表面活性剂。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中还含有0.1~1%wt的渗透剂T。
本发明还提供一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法。
一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法,所述的方法包含以下步骤:
S1,Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn备用;
S2,从虫体分离出来的Actinomucorelegasn接种至液体培养基中培养;
S3,相对湿度60~80%、30±2℃,培养8~12天,至OD600处发酵液吸光值最大时停止发酵,所得Actinomucorelegasn原菌液备用;
S4,所得Actinomucorelegasn原菌液加水稀释至Actinomucorelegasn原菌液的含量为1~10%wt,即得用于防治茴香薄翅野螟的组合物。
进一步的,所述的液体培养基为马铃薯180~220g,葡萄糖30~40g,蒸馏水1000ml,121℃,灭菌30min后制备的培养液。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液中加入0.05~2%wt的阴离子表面活性剂。
本发明还提供一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的使用方法。
一种生物防治茴香薄翅野螟的方法,所述的方法是将含有Actinomucorelegasn(Actinomucorelegasn)的菌液喷洒在茴香薄翅野冥为害的植物上。
进一步的,所述的Actinomucorelegasn菌液在油菜角果期喷施。
实施例1
Actinomucorelegasn菌液的制备
真菌Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn接种至液体发酵制备所得。
其中,液体培养基为马铃薯220g,葡萄糖35g,蒸馏水1000ml,121℃,灭菌30min后制备的培养液。
培养条件:相对湿度60%、28℃,培养至OD600处发酵液吸光值最大时停止发酵。
实施例2
Actinomucorelegasn菌液的制备
Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的Actinomucorelegasn接种至液体发酵制备所得。
其中,液体培养基为马铃薯180g,葡萄糖40g,蒸馏水1000ml,121℃,灭菌30min后制备的培养液。
培养条件:相对湿度80%、32℃,培养至OD600处发酵液吸光值最大时停止发酵。
实施例3
用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法
取实施例1制备的Actinomucorelegasn菌液,加入0.05%wt的十二烷基苯磺酸纳盐。
实施例4
用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法
取实施例2制备的Actinomucorelegasn菌液,加入2%wt的十二烷基苯磺酸纳盐。
实施例5
用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法
取实施例1制备的Actinomucorelegasn菌液,加入0.1%wt的渗透剂T。
实施例6
用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法
取实施例2制备的Actinomucorelegasn菌液,加入1%wt的渗透剂T。
实施例7
实施例1制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为Y1;实施例2制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为Y2;实施例3制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为S1;实施例4制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为S2;实施例5制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为T1;实施例6制备的Actinomucorelegasn菌液,标记为T2。
取实施例1制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为Y101,按1/100稀释,并标记为Y102;取实施例2制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为Y201,按1/100稀释,并标记为Y202。
取实施例3制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为S101,按1/100稀释,并标记为S102;取实施例4制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为S201,按1/100稀释,并标记为S202。
取实施例5制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为T101,按1/100稀释,并标记为T102;取实施例6制备的Actinomucorelegasn菌液,按1/10稀释,并标记为T201,按1/100稀释,并标记为T202。
以上稀释菌液均用蒸馏水稀释。
分别取上述菌液10mL,每个菌液分别均匀喷于50个油菜角果上,晾干。每种角果分别置于培养皿中,并做好标记。每个培养皿接茴香薄翅野螟幼虫10头,重复5次。将试验幼虫饲养到蛹。另做空白对照。
以出现白色菌丝且不正常化蛹的为被正菌寄生的标准。统计发病率(死亡率)。
统计结果并列入表1。
表1茴香薄翅野螟被Actinomucorelegasn组合物寄生死亡的结果
Figure BDA0002574205160000081
Figure BDA0002574205160000091
茴香薄翅野螟幼虫感染实验结果显示,本发明提供的Actinomucorelegasn用于防治茴香薄翅野螟是有效的、可行的。
本发明将用于传统发酵豆制品中常用的生产菌株Actinomucorelegasn(雅致放射毛霉)用于茴香薄翅野螟的生物防治,开发了传统真菌的新用途。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种变换,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征和步骤,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种Actinomucorelegasn用于防治茴香薄翅野螟的用途。
2.一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,其特征在于:所述的组合物中含有1~10%wt的Actinomucorelegasn原菌液。
3.根据权利要求2所述的一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,其特征在于:所述的Actinomucorelegasn原菌液为真菌Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的雅致放射毛霉经液体发酵制备所得。
4.根据权利要求2所述的一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,其特征在于,所述的雅致放射毛霉菌液中还含有0.05~2%wt的表面活性剂。
5.根据权利要求2~4任意一项所述的一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物,其特征在于:所述的雅致放射毛霉菌液中还含有0.1~1%wt的渗透剂T。
6.一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法,其特征在于,所述的方法包含以下步骤:
S1,真菌Actinomucorelegasn感染茴香薄翅野螟幼虫,虫体表面出现白色菌丝后,采集菌丝,分离、纯化、鉴定后的雅致放射毛霉备用;
S2,从虫体分离出来的雅致放射毛霉接种至液体培养基中培养;
S3,相对湿度60~80%、30±2℃,培养8~12天,至OD600处发酵液吸光值最大时停止发酵,所得Actinomucorelegasn原菌液备用;
S4,所得Actinomucorelegasn原菌液加水稀释至Actinomucorelegasn原菌液的含量为1~10%wt,即得用于防治茴香薄翅野螟的组合物。
7.根据权利要求6所述的一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法,其特征在于:所述的液体培养基为马铃薯180~220g,葡萄糖30~40g,蒸馏水1000ml,121℃,灭菌30min后制备的培养液。
8.根据权利要求7所述的一种用于防治茴香薄翅野螟的组合物的制备方法,其特征在于:所述的Actinomucorelegasn菌液中加入0.05~2%wt的表面活性剂。
9.一种生物防治茴香薄翅野螟的方法,其特征在于:所述的方法是将含有真菌Actinomucorelegasn的菌液喷洒在茴香薄翅野冥为害的植物上。
10.根据权利要求9所述的一种生物防治茴香薄翅野螟的方法,其特征在于,所述的Actinomucorelegasn菌液在油菜角果期喷施。
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