CN111704993A - 一种一体化核酸poct检测装置及方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种一体化分子核酸POCT装置及方法，由试剂卡盒和卡盒支架组成。试剂卡盒内部设有不同互相连接的腔体，且每个腔体对应有控制液体通断的阀门开关。卡盒支架为试剂卡盒提供开关通断、活塞运动、加热测温、判断卡盒有无等功能，并起到支撑定位作用。该一体化装置允许鼻咽拭子、生殖道拭子、痰液、血液等样本的直接加入，无需其他处理，从而实现“样本进，结果出”的一体化检测。本发明主要特点具有：（1）结构简易且成本低，操作简便；整个过程封闭完成，有效防止病原菌和气溶胶污染。（2）为现场即时检测提供一体化分子核酸POCT检测装置。（3）性价比高，制备简易，便于基层化，大众化消费。

Description

一种一体化核酸POCT检测装置及方法

技术领域

本发明涉及生物器械技术领域，尤其涉及一种一体化核酸POCT检测装置及方法。

背景技术

传统的核酸检测，样本前处理、核酸提取、核酸检测需要分步独立完成，且每个环节都需要结合特定的设备或者仪器进行操作，步骤复杂，需要在特定的专业检测实验室进行操作。分子诊断领域的核酸POCT,大多采用微流控、电泳等原理进行设计，导致其装置的制备工艺复杂、成本昂贵。在类似新冠疫情的特殊时期，无法实现即时现场检测，造成医疗资源挤兑。因此，迫切需要研发出一种分子核酸POCT装置，实现“样品进，结果出”的一体化检测，进而通过浊度、扩增液颜色等指标对扩增结果做定性判断。既可满足疫情特殊时期的检测需求，亦可普及基层使用，如：呼吸道传染、生殖道分泌物、细菌检测、食品安全检测、宠物病毒检测、人畜共患等多领域应用，为现场即时检测提供了一种便捷方式。

发明内容

本发明提供一种一体化核酸POCT检测装置及方法。

通过针对设计的装置结构，结合相关仪器，可实现低成本且自动化的一体化分子核酸poct检测。

第一方面，本发明提供了一种一体化核酸POCT检测装置及方法，包括：试剂卡盒和卡盒支架，所述试剂卡盒包括操作池和多个储液池；

所述试剂卡盒用于，利用各所述储液池分别储存核酸样品，以及核酸检测相关的检测试剂；并使所述核酸样本和所述检测试剂在所述操作池中进行特定的化学反应，以获得检测结果；

所述卡盒支架用于，固定所述试剂卡盒，并控制所述储液池中的核酸样品和检测试剂按照特定顺序进入所述操作池。

优选地，所述多个储液池包括：

样品池，用于预装保存液，以释放拭子上的样品或加入待测样品；

裂解液池，用于存储裂解液；

洗涤液池，用于存储洗涤液；

洗脱液池，用于存储洗脱液；

反应液池，用于存储第一核酸扩增成分；

扩增池，用于存储第二核酸扩增成分。

第一核酸扩增成分为扩增缓冲液；第二核酸扩增成分为冻干的引物、DNA聚合酶和dNTPs混合物。

优选地：

所述操作池连接各所述储液池；所述操作池中包括吸附物；且操作池顶部平面保持水平，底部平面左高右低，存在10-20°的倾斜。倾斜的结构设计具有如下功能优势：(1) 有利于操作池中的废液排出；(2) 有利于吸附物的重力沉降、进而充分混匀。

所述操作池包括活塞和活塞轨道，且活塞和活塞轨道通过第一推拉杆与操作池实现微导通；当所述核酸样本和所述检测试剂在操作池内进行特定的化学反应时，通过活塞在活塞轨道中做往复运动、混匀所述操作池中的所述核酸样本和所述检测试剂，使操作池内特定的化学反应充分进行。

优选地，所述吸附物包括：

磁珠，或者滤膜。

优选地，所述试剂卡盒还包括：废液池；

所述废液池连接所述操作池，用于接收操作池中在所述特定的化学反应之后排除的废液。

优选地，所述卡盒支架包括：

定位架，用于固定所述试剂卡盒；

加热模块，用于在进行所述特定的化学反应时，对所述试剂卡盒进行加热；

第一推拉杆模块，用于在进行所述特定的化学反应时，推动所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动；

第二推拉杆模块，用于按照特定顺序控制各所述储液池的阀门开关，以使所述储液池中的核酸样品和检测试剂进入所述操作池，以发生所述特定的化学反应。

优选地，所述卡盒支架还包括：

红外对射开关，用于检测所述定位架上是否固定有试剂卡盒。

优选地，所述卡盒支架还包括：

温度传感模块，用于在进行所述特定的化学反应时，探测所述试剂卡盒的温度。

优选地，当所述吸附物为磁珠，则所述卡盒支架还包括：

电磁铁模块，用于吸附或释放所述磁珠。

第二方面，本发明提供了一种一体化核酸POCT检测装置及方法，所述方法利用如第一方面所述装置进行核酸检测，所述方法包括：

当所述被检测样品进入所述样品池，与所述保存液接触，使所述检测样品进入操作池；

当所述裂解液池中的裂解液进入所述操作池，对所述操作池加热，为充分裂解提供所述温度条件，检测样品和裂解液反应以释放所述目标核酸。之后所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动，以使所述吸附物吸附所述核酸样品；

当所述洗涤液池中的洗涤液进入所述操作池，控制所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动，以洗涤所述吸附物；对磁珠吸附的核酸成分做充分清洗。

当所述洗脱液池中的洗脱液进入所述操作池，所述目标核酸从所述吸附物上洗脱分离到所述洗脱液中，含有所述目标核酸的洗脱液进入所述扩增池内；

所述反应液池中的第一核酸扩增成分进入所述扩增池，加热所述扩增池；以使所述第一核酸扩增成分、第二核酸扩增成分和所述含有所述目标核酸的洗脱液进行扩增反应，并得到核酸检测结果。

本发明提供了一种核酸检测装置及方法，该装置具有小型化高集成度的特点，能够在检测过程中做到“样本进，结果出”；并且整个检测过程在密封状态下进行，杜绝了扩增环节的气溶胶污染；装置采用微型机械装置，取代微流控芯片设计的泵、阀等，相较于微流控芯片技术和其他装置，工艺简易，成本低廉。现场操作感强，人性化程度高。

本发明具有下述有益技术效果：

1、电磁推拉杆模块首次应用于核酸提取、纯化、扩增、检测的集成一体化装置中，通过定制小型化的电磁推拉杆装置，使核酸提取、纯化、扩增、检测的集成一体化装置更适合于POCT场景。利用电磁推拉杆模块的单相保持特性，作为装置中的核心动力模块，具有两大关键功能：

（1）按照特定顺序控制各所述储液池的开关：受电磁推拉杆模块控制的开关具有时序可调特性。与微流控芯片时序不可调的开关相比，受电磁推拉杆模块控制的开关能够根据样品体积、样品粘稠度等特性，灵活调整各个贮存液释放到操作池的时长；同时，能够根据核酸样品特点，灵活调整各个贮存液池释放不同贮存液的顺序与次数，从而使该一体化装置适用于鼻咽拭子、生殖道拭子、痰液、血液、相关组织液等更多类型的核酸样品。

（2）推动活塞在操作池中沿活塞轨道进行活塞运动：一般的磁珠法提取核酸相比，磁珠在重力作用下边沉降、边吸附待测靶标；而电磁推拉杆模块通过推动活塞在操作池中沿活塞轨道进行往复运动，使操作池中的液体混匀流动，实现核酸样品的裂解充分，吸附物（磁珠或滤膜）吸附的核酸完全，洗涤、洗脱效果提高，使核酸提取纯化更为充分，从而提取的核酸纯度更高。

2. 集成度高：该专利的一体化装置，集成了样品前处理（样品池中完成），样品裂解、核酸洗涤与核酸洗脱在内的全部环节，以及核酸恒温扩增环节。

（1）一般的微流控装置，不包含样品的核酸提取环节，局限于核酸扩增环节使用。且受制于试剂体系总量使用。

（2）与离心式的圆盘状微流控芯片相比，其常采用凝胶法免洗涤提取样品中的核酸，不包含洗涤环节，具有废液分离不彻底、核酸杂质多、提取的核酸纯度低、核酸扩增假阳性增多的弊病。因此，其检测的样品类型和种类范围狭小。

3. 贮存液充分，各个贮存池的模块可更换

（1）该装置的各个贮存液池，最大贮存液预装量可达到4mL，而微流控芯片则不含有贮存液或小于1mL的贮存液。充足的贮存液会使核酸提取充分、核酸纯度高、扩增效果好。

（2）出厂前，各个贮存液池能够根据不同类型的核酸样品更换模块。如痰液样品粘度大，需要裂解液体积增加，高达3-5mL，可在出厂前单独更换大体积的裂解液池。以及根据试剂体系产生的废液体积相对较大时候，可更换体积大一些的废液池。因此，对比微流控装置需要针对不同样品制备不同芯片设计的策略相比，该装置能够针对不同样品，通过更换模块、显著降低制造成本。可灵活拓展试剂体系，包容多样化的样本需求。

综上，本发明公开了一种一体化分子核酸POCT装置及方法，由试剂卡盒和卡盒支架组成。试剂卡盒内部设有样品池、裂解液池、洗涤液池、洗脱液池、操作池、废液池、扩增池、活塞轨道等腔体，且上述每个池子对应有控制液体通断的阀门开关。检测样品时，通过通断每个池子对应的控制开关、控制磁珠或者滤膜，利用活塞在活塞轨道做往复运动对操作池中的液体体系做混匀处理，进行核酸样本的前处理、裂解、清洗、洗脱、废液排出和扩增反应。通过内部的颜色、浊度，或扩增池外部的光学部件检测核酸扩增反应的定性判别。卡盒支架为试剂卡盒提供开关通断、活塞运动、加热、温度检测、磁珠吸附和释放、判断卡盒有无等功能，并给予卡盒支撑定位作用。该一体化装置允许鼻咽拭子、生殖道拭子、痰液、血液等样本的直接加入，无需其他处理，从而实现“样本进，结果出”的一体化检测。

本发明主要特点具有：（1）应用场景：结构简易且成本低，操作简便，有利于满足大规模的检测需求；整个过程封闭完成，有效防治病原菌污染，与扩增带来的气溶胶污染。（2）功能原理：实现了核酸提取、纯化、扩增一体化，且检测过程能够拓展实现自动化控制，无需专业化的检测人员和专业的实验室操作；既可满足疫情特殊时期的检测需求，亦可普及基层使用，如：呼吸道传染、生殖道分泌物、细菌检测、食品安全检测、宠物病毒检测、人畜共患等多领域应用，为现场即时检测提供了一种便捷方式，也为一体化分子核酸POCT检测领域提供一个创新和普及使用增长点。（3）性价比和工艺：与微流控芯片技术以及其他方式实现的装置相比较，性价比高，制备简易，便于基层化，大众化消费。

上述的非惯用的优选方式所具有的进一步效果将在下文中结合具体实施方式加以说明。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一实施例提供的一种核酸检测装置中试剂卡盒01的逻辑结构示意图；

图2为本发明一实施例提供的一种核酸检测装置中卡盒支架02的逻辑结构示意图；

图3为本发明一实施例提供的一种核酸检测装置中试剂卡盒01 的硬件结构示意图；

图4为本发明一实施例提供的一种核酸检测方法的流程示意图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例及相应的附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

现有的核酸检测装置，大多采用微流控、电泳等原理进行设计。因此装置的制备工艺复杂、成本昂贵。在类似新冠疫情的特殊时期，无法满足大规模的检测需求。因此，本发明提供一种集成核酸提取、纯化、扩增、检测为一体化的装置及方法，可实现一体化分子核酸POCT检测。。

参见图1-图2所示，为本发明提供的核酸检测装置的具体实施例。本实施例中，所述装置包括：试剂卡盒01和卡盒支架02，所述试剂卡盒01包括操作池11和多个储液池10。利用各所述储液池10分别储存核酸样品，以及核酸检测相关的检测试剂；并使所述核酸样本和所述检测试剂在所述操作池11中进行特定的化学反应，以获得检测结果。所述卡盒支架02用于固定所述试剂卡盒01，并控制所述储液池10中的核酸样品和检测试剂按照特定顺序进入所述操作池11。

所述试剂卡盒01的逻辑结构如图1所示，其硬件结构示意图如图3所示。所述多个储液池包括：样品池12、裂解液池13、洗涤液池14、洗脱液池15、反应液池16和扩增池17。其中，样品池12用于预装保存液和裂解液，以释放并存储核酸拭子上的核酸样品；裂解液池13用于存储裂解液；洗涤液池14用于存储洗涤液；洗脱液池15用于存储洗脱液；反应液池16用于存储第一核酸扩增成分；扩增池17用于存储第二核酸扩增成分。所述操作池11连接各所述储液池10。所述操作池11中包括吸附物111，所述吸附物111具体可以是磁珠或者滤膜。所述磁珠可以散装，所述滤膜可以固定在操作池内部；进一步滤膜可以相对于液体流动方向或操作池垂直或水平固定放置。当所述核酸样本和所述检测试剂在进行特定的化学反应时，所述活塞112在所述操作池11中沿所述活塞轨道113进行活塞运动。另外，所述试剂卡盒01还包括废液池18，所述废液池18连接所述操作池11，用于接收操作池11中在所述特定的化学反应之后排除的废液。

所述卡盒支架02的逻辑结构如图2所示。所述卡盒支架02包括：定位架21、加热模块22、第一推拉杆模块23、第二推拉杆模块24。另外卡壳支架02还可以包括红外对射开关25、温度传感模块26、电磁铁模块27。具体的，定位架21用于固定所述试剂卡盒01。加热模块22用于在进行所述特定的化学反应时，对所述试剂卡盒01进行加热。第一推拉杆模块23用于在进行所述特定的化学反应时，推动所述活塞112在所述操作池11中沿所述活塞轨道113进行活塞运动。第二推拉杆模块24用于按照特定顺序控制各所述储液池10的开关，以使所述储液池10中的核酸样品和检测试剂进入所述操作池11，以发生所述特定的化学反应。

需要说明的是，本实施例中的第一推拉杆模块23和第二推拉杆模块24，本质上均属于“电磁推拉杆”。这是本领域中首次将“电磁推拉杆”这一机构应用于核酸检测装置当中。本实施例中通过定制小型化的电磁推拉杆，所述装置更适合于即时检验场景。

其中，第一推拉杆模块23能够推动活塞112在操作池11中沿活塞轨道113进行活塞运动，使操作池11中的液体试剂混匀流动，实现核酸样品更充分的裂解，以及吸附物111更充分的吸附。相比于现有的核酸提取方法（例如磁珠在重力作用下边沉降、边吸附待测靶标）提取的核酸纯度更高。

第二推拉杆模块24能够按照特定顺序控制各所述储液池10的开关。第二推拉杆模块24具有时序可调特性。其时序可调特性的原理是：利用电磁推拉杆单相保持特性，利用CPU时序可调程序指令控制电子开关。从而达到控制电磁推拉杆的伸缩运动，触发各所述储液池10的开关，使卡盒开关保持通断状态。当液体按照既定要求流出后，关闭电子开关，电磁推拉杆断电后做反向收缩运动，卡盒开关复位。与现有的检测装置中采用的时序不可调的微流控芯片开关相比，第二推拉杆模块24能够根据样品体积、样品粘稠度等特性，灵活调整各个储液池10释放试剂到操作池的时长；同时，能够根据核酸样品特点，灵活调整各个储液池10释放的顺序与次数，从而该装置能够广泛的适用于鼻咽拭子、生殖道拭子、痰液、血液、相关组织液等更多类型的核酸样品检测。

本实施例中的第二推拉杆模块24，具体可以由7个独立的电磁行程推拉杆组成，每个都处于无伸缩状态。每个推拉杆对应卡盒上的一个储液池10的控制开关；控制开关通过控制推拉杆的状态，实现控制储液池10释放的时序和保持导通时间。而每个推拉杆是通过控制板发出指令来操作。而当推拉杆断电后，将做出收缩运动，从而对卡盒上的开关失去按触作用，此时卡盒开关失去外力作用后，回复初始状态，即复位。

另外优选地，所述卡盒支架02还可以包括：红外对射开关25，用于检测所述定位架上是否固定有试剂卡盒。温度传感模块26，用于在进行所述特定的化学反应时，探测所述试剂卡盒的温度。当所述吸附物为磁珠，则所述卡盒支架02还可以包括：电磁铁模块27，用于吸附或释放所述磁珠。

另外如图4所示，本实施例中还提供一种核酸检测方法。本实施例中所述方法即利用上述装置实现核酸检测的过程。需要说明的是，本实施例中有关核酸检测的基础原理与现有技术相同，在此不赘述。但通过该装置和方法能够对各步骤进行操作与控制。所述方法包括以下步骤：

步骤401、当所述样品进入所述样品池12，与所述保存液和裂解液反应以释放所述核酸样品之后，使所述核酸样品进入所述操作池11。操作池具有如下结构特征：顶部平面保持水平，底部平面左高右低，存在10-20°的倾斜。倾斜的底部设计具有如下功能优势：(1) 有利于操作池中的废液排出；(2) 有利于吸附物的重力沉降、进而充分混匀。

在试剂卡盒01未固定到卡盒支架02的定位架21时，红外对射开关25处于闭合状态。即卡盒支架02整体处于“待机”状态。当试剂卡盒01固定到卡盒支架02的定位架21上之后，红外对射开关25打开，同时使得其他相关部分进入待命状态。

在样品采集过程中，样品池12中已经放入至少一个核酸拭子。且核酸拭子将于样品池12中预装有的保存液接触。其中，保存液的成分可以是0.15 M NaCl, 10 mM K₂HPO₄, 1mM NaH₂PO₄, pH 7.4。裂解液的成分可以是0.2 M NaCl，3 M CH₆ClN₃，2% CTAB，0.1 MTris，0.02 M EDTA，0.4 mg Protein K。

第二推拉杆模块24由多个独立的电磁行程推拉杆组成，每个电磁行程推拉杆可以控制一个储液池10。则第二推拉杆模块24首先控制样品池12打开，使得样品池12中的核酸样品进入操作池11。

步骤402、当所述裂解液池13中的裂解液进入所述操作池11，对所述操作池11加热，控制所述活塞112在所述操作池11中沿所述活塞轨道113进行活塞运动。

核酸样品进入操作池11之后，第二推拉杆模块24继续控制裂解液池13打开，使裂解液进入操作池11。

操作池11中的吸附物111可以是磁珠或者滤膜。当吸附物111为磁珠，则此时可利用电磁铁模块27释放磁珠到操作池11中。加热模块22可加热裂解液至65℃，并持续20分钟。温度传感模块26可在此期间进行温度监控。活塞112将在第一推拉杆模块23的作用下，沿所述活塞轨道113进行活塞运动，以使所述吸附物111吸附所述核酸样品。

吸附过程完毕后，电磁铁模块27将磁珠吸附在操作池11的内壁。然后第二推拉杆模块24打开废液池18的开关，使操作池11中的反应后产生的废液进入废液池18。

步骤403、当所述洗涤液池14中的洗涤液进入所述操作池11，控制所述活塞112在所述操作池11中沿所述活塞轨道113进行活塞运动，以洗涤所述吸附物111。

第二推拉杆模块24继续控制洗涤液池14打开，使洗涤液进入操作池11。洗涤液的成分可以是70%的乙醇。电磁铁模块27释放磁珠到操作池11中。活塞112将在第一推拉杆模块23的作用下，沿所述活塞轨道113进行活塞运动，以使所述吸附物111被充分的洗涤。洗涤时间可以是2分钟。

洗涤完成后，电磁铁模块27将磁珠吸附在操作池11的内壁。然后第二推拉杆模块24打开废液池18的开关，使操作池11中的洗涤后产生的废液进入废液池18。

步骤404、当所述洗脱液池15中的洗脱液进入所述操作池，所述核酸样品从所述吸附物上洗脱分离到所述洗脱液中，含有所述核酸样品的洗脱液进入所述扩增池17。

第二推拉杆模块24继续控制洗脱液池15打开，使洗脱液进入操作池11。洗脱液的成分可以是0.02 M Tris-HCl，5 M CH₆ClN₃。电磁铁模块27释放磁珠到操作池11中。活塞112将在第一推拉杆模块23的作用下，沿所述活塞轨道113进行活塞运动，以使吸附物111表面的核酸样品通过洗脱分离。

然后第二推拉杆模块24打开扩增池17的开关，是操作池11中的含有所述核酸样品的洗脱液进入所述扩增池17。

步骤405、所述反应液池16中的第一核酸扩增成分进入所述扩增池17，加热所述扩增池17；以使所述第一核酸扩增成分、第二核酸扩增成分和所述含有所述核酸样品的洗脱液进行扩增反应，并得到核酸检测结果。

然后通过第二推拉杆模块24打开反应液池16的开关，使反应液池16中的第一核酸扩增成分进入所述扩增池17，与扩增池17中的第二核酸扩增成分混合。其中，第一核酸扩增成分可以是扩增引物、反应缓冲液。第二核酸扩增成分可以是冻干酶粉、dNTPs等。

加热模块22可对扩增池17中试剂加热，具体加热策略如下：98℃加热2 min，98℃加热10s，30℃加热6s，重复热循环40次，30℃加热1min后结束。由此为核酸扩增提供适宜的温度环境。温度传感模块26可在此期间进行温度监控。扩增后的核酸，可以比浊法、荧光颜色法、PCR荧光读数仪器对结果做判断，从而得到核酸检测结果。

通过以上技术方案可知，本发明中提供的装置及方法存在的有益效果是：使用结构简单且低成本的装置集成实现了核酸提取、纯化、扩增等，无需复杂的样本前处理和其他设备使用，降低环节耗材，以及避免人员过多参与，降低检测人员的感染风险，实现一体化分子核酸POCT检测。无需专业化的检测人员即可完成检测操作；即可满足了疫情时期的现场检测需求，也可满足发热门诊 、传染疾病、细菌检测等需要即时检测的需求。 丰富了一体化分子核酸POCT检测领域市场需求，弥补该领域的空白。

本发明中的各个实施例均采用递进的方式描述，各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其，对于装置实施例而言，由于其基本相似于方法实施例，所以描述的比较简单，相关之处参见方法实施例的部分说明即可。

还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、商品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、商品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、商品或者设备中还存在另外的相同要素。

以上所述仅为本发明的实施例而已，并不用于限制本发明。对于本领域技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的权利要求范围之内。

Claims (8)

1.一种一体化分子核酸POCT装置，其特征在于，包括试剂卡盒和卡盒支架；

所述试剂卡盒包括各自分离的多个储液池和阀门开关，利用各所述储液池分别预装检测核酸样本所需不同试剂成分，以及核酸检测相关的检测试剂；并使所述核酸样本和所述检测试剂在所述试剂卡盒内完成核酸提取、纯化、扩增，以获得检测结果；

所述卡盒支架用于固定所述试剂卡盒，并控制所述储液池中的核酸样本和检测试剂按照特定顺序进入操作池，实现废液排出和核酸扩增;同时提供阀门开关和活塞运动的动力；

所述多个储液池包括：

样品池，用于存储保存液；

裂解液池，用于存储裂解液；

洗涤液池，用于存储洗涤液；

洗脱液池，用于存储洗脱液；

反应液池，用于存储第一核酸扩增成分；

扩增池，用于存储第二核酸扩增成分；

所述操作池连接各所述储液池；所述操液池中包括吸附物；

所述操作池还包括活塞和活塞轨道，且活塞和活塞轨道通过第一推拉杆与操作池实现微导通；当所述核酸样本和所述检测试剂在操作池内进行反应时，通过活塞在活塞轨道中做往复运动、混匀所述操作池中的所述核酸样本和所述检测试剂，使操作池内反应充分进行。

2.根据权利要求1所述装置，其特征在于，所述吸附物为磁珠，或者滤膜。

3.根据权利要求2所述装置，其特征在于，所述试剂卡盒还包括废液池；

所述废液池连接所述操作池，用于接收操作池中排除的废液。

4.根据权利要求1-3任意一项所述装置，其特征在于，所述卡盒支架包括：

定位架，用于固定所述试剂卡盒；

加热模块，用于在进行反应时，对所述试剂卡盒进行加热；

第一推拉杆模块，用于在进行反应时，推动所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动；

第二推拉杆模块，用于控制各所述储液池的阀门开关，以使所述储液池中的核酸样本和检测试剂进入所述操作池，以进行反应。

5.根据权利要求4所述装置，其特征在于，所述卡盒支架还包括：

红外对射开关，用于检测所述定位架上是否固定有试剂卡盒。

6.根据权利要求4所述装置，其特征在于，所述卡盒支架还包括：

温度传感模块，用于在进行反应时，探测所述试剂卡盒的温度。

7.根据权利要求4所述装置，其特征在于，当所述吸附物为磁珠，卡盒支架还包括电磁铁模块，用于吸附或释放所述磁珠。

8.一种一体化分子核酸POCT方法，其特征在于，所述方法利用如权利要求1-7任意一项中所述装置进行核酸检测，所述方法包括：

当检测样品进入样品池，与保存液接触，使检测样品进入所述操作池；

当所述裂解液池中的裂解液进入所述操作池，对所述操作池加热，所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动；以使所述吸附物吸附所述核酸样品；

当所述洗涤液池中的洗涤液进入所述操作池，控制所述活塞在所述操作池中沿所述活塞轨道进行活塞运动，以洗涤所述吸附物；

当所述洗脱液池中的洗脱液进入所述操作池，使核酸从所述吸附物上洗脱分离到所述洗脱液中，含有核酸的洗脱液进入所述扩增池；

所述反应液池中的第一核酸扩增成分进入所述扩增池，加热所述扩增池；以使所述第一核酸扩增成分、第二核酸扩增成分和所述含有核酸的洗脱液进行扩增反应，并得到目标核酸，采用比浊法、荧光颜色法或PCR荧光读数仪器检测得到核酸检测结果。

Images