CN111557686B - 一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及牙科技术领域，具体地说，涉及一种用于体外隐裂牙在真空辅助下使造影剂渗入裂纹，从而在CBCT上显影更佳的方法。其方法包括如下步骤：隐裂牙真空加造影剂实验；拍摄增强小视野CBCT；影像资料收集。该用于体外隐裂牙造影剂渗透裂纹的方法中，利用碘佛醇的流动性和X线阻射性，在牙齿裂纹的冠部放置碘佛醇液体，在密闭环境下抽真空条件下，碘佛醇造影剂渗入牙齿的结构性裂纹，通过拍摄CBCT作为增强CBCT，与裂纹渗入实验前常规的CBCT相比，增加了CBCT对牙齿纤细裂纹的检出率，并可以通过测量高密度线状裂纹影来确定其侵袭的深度，提高了CBCT对牙隐裂的诊断能力。
Description
技术领域
本发明涉及牙科技术领域，具体地说，涉及一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法。
背景技术
牙隐裂，是一种常见的非龋性牙体硬组织疾病，是与龋病和牙周病并称导致成年人牙齿缺失的三大因素。牙隐裂，是指发生在牙冠表面的细小的、不易发现的、非生理性的细小裂纹，一般延伸入牙本质,深度不一,可延伸越过边缘嵴，浅者可无症状,深者可接近牙髓甚至达髓腔。临床上有牙髓炎症状的患者，若找不到如深龋、楔状缺损或深牙周袋的病因，应高度怀疑牙隐裂的存在。由于牙隐裂在临床上因早期症状不明显，诊断困难，易发生误诊、漏诊或误治等问题，最终导致牙髓炎发作或患牙折裂拔除。而隐裂来源的牙髓炎、根尖周炎进行根管治疗预后欠佳，不仅与其裂纹的深度和方向息息相关、隐裂所致的深牙周袋也是影响预后的一大因素。
所以隐裂牙齿的早期发现、早期诊断尤为重要，而牙隐裂具有隐匿性。在临床中根据患者主诉症状，配合使用一些辅助检查方法均能使裂纹的检出率增高。然而,目前关键的临床诊断难点是无法明确冠部裂纹向下延伸到髓腔或者根部牙体组织的确切深度，也就是牙隐裂裂纹的延伸深度无法判断。裂纹的深度直接影响到患牙预后的评估，深度未知，患牙治疗的远期疗效无法明确，只能等待时间的检验治疗效果，是否能保留或拔除该患牙。
目前研究显示，关于牙隐裂诊断，国内外尚没有一种明确的方法，以预测牙隐裂治疗的远期预后。目前研究裂纹侵入深度的检测方法，有扫频光学相干断层成像SS-OCT，定量激光引发荧光技术QLF-D，振动红外线热像法，这些方法均是首次应用于牙齿裂纹的检测，取得了一定的效果，仍存在应用局限性，且目前仅用于体外研究，对于体内隐裂牙的适用性如何尚无明确的报道。
现阶段对于隐裂探测研究较多的是在影像学方面，常规的X线牙片、CBCT、MRI、MicroCT。但由于辐射剂量、分辨率、投照角度等问题，临床上使用对于隐裂的检出率不高，尚没有一种合适的方法既能清晰显示裂纹，又不至于让患者暴露在高辐射剂量下。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其方法包括如下步骤：
S1、隐裂牙建模，选用最近1个月内拔除的前磨牙或磨牙，根据纳入标准和排除标准筛选离体牙，去除表面软组织和牙石，并对离体牙制造人工隐裂纹；
S2、制作蜡块底托，将蜡片烫软做成块状，将隐裂牙的牙根部分插入蜡块，制作底托，模拟牙周组织，将配有蜡块底托的隐裂牙随机放置在下颌塑料托盘内，每个托盘放置8颗隐裂牙，模拟下颌牙弓拍摄CBCT，将隐裂牙进行编号，并记录裂纹走行；
S3、拍摄X线牙片和常规小视野CBCT，隐裂牙分别拍摄X线牙片和小视野，X线牙片拍摄颊舌以及近远两个方向，扫描参数分别为70kV，7mA，0.12s，螺距管与牙齿长轴和胶片垂直，胶片与牙齿长轴平行；
S4、MicroCT分析，使用Micro-CT系统对牙齿分别进行了MicroCT扫描，利用可视化软件InveonResearchWorkplace对二维图像进行三维重建，记录每颗隐裂牙裂纹存在情况，以及隐裂牙冠根向裂纹侵袭深度；
S5、真空加造影剂实验，将碘佛醇与生理盐水3：1配比制作稀释的碘佛醇溶液，充分混合后，注射器抽取5ml碘佛醇稀释液备用；
单颗隐裂牙放置在纸杯底部，使用橡皮障分离牙冠部和牙根部，使冠部暴露出来，橡皮障外部用皮筋固定在纸杯；
注射器注射溶液于牙冠部，使液体充满冠部，将整个装置放置于真空装置中，装置与真空抽气口的垂直距离保持在10cm；
真空装置连接抽真空水泵，抽负压至-0.08Mpa，关闭负压，使真空内保持-0.08Mpa的状态1min，回复大气压后再次抽负压至-0.08Mpa，重复1次，再次回复大气压后，取出隐裂牙，棉球吸干多余液体，酒精棉球擦净牙冠周围液体，取下橡皮障；
S6、拍摄增强小视野CBCT，实验后将隐裂牙仍然放置到下颌托盘里，每个下颌托盘放置8颗隐裂牙，再次拍摄小视野CBCT，观察裂纹显影情况；
S7、影像资料收集：分别收集了实验牙颊舌以及近远两个方向的影像资料，评判时根据1颗牙两张片子综合评估得出结果，能在一个或两个方向上观察到裂纹即记为“有裂纹”，否则，则记为“无裂纹”；
观察常规小视野CBCT时，在冠状面、矢状面、水平面观察是否有裂纹，综合评估后，采用五分值法记录裂纹存在的情况；
观察增强小视野CBCT时，在隐裂牙的CBCT上观察到高密度线状裂纹影记为“有裂纹”，若无，则记为“无裂纹”；
S8、统计方法，分别计算两位医师在X线牙片、常规CBCT、增强CBCT诊断牙隐裂的灵敏度，其中CBCT的灵敏度计算为：灵敏度＝(病损可能存在例数+病损明显存在例数)/病损实际存在例数。
作为优选，所述纳入标准包括有：牙体形态正常，未经物理或化学处理，没有可见的外部裂纹。
作为优选，所述排除标准包括有：内源性或外源性着色；牙体发育畸形；中龋到深龋；楔状缺损；牙根纵折；根管治疗或有修复体的牙齿。
作为优选，制造人工隐裂纹的方法包括如下步骤：
S1.1、采用骤冷骤热直接接触牙齿的方法，制造人工隐裂纹，先将离体牙放置于-196℃的液氮中1min，然后取出牙齿，立即放置于90℃的热水中保持5min，取出备用；
S1.2、冷热交替处理后，除去过程中劈裂的牙齿，在17X放大的显微镜下观察实验牙是否存在裂纹。
作为优选，所述S3中，CBCT扫描参数为120kV，8mA，基体尺寸为640×640，视野为8×8cm，像素尺寸为0.125mm×0.125mm。
作为优选，所述S4中，MicroCT扫描的图像分辨率为9.08μm，管电压为80KV，管电流为500μA，曝光时间为1000ms。
作为优选，所述S6中，裂纹的测量方法包括MicroCT测量裂纹和增强CBCT测量裂纹。
作为优选，所述MicroCT测量裂纹的方法为：从矢状向和冠状向调整牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现裂纹的位置，记录对应的层数，继续往根部移动，直到裂纹消失的位置，记录对应的层数；在冠状面水平，用测量工具测量从裂纹开始出现的层数到裂纹消失的层数之间的距离，记为MicroCT测量的裂纹深度，将其记为裂纹实际深度。
作为优选，所述增强CBCT测量裂纹的方法：在增强CBCT观察上都记为“有裂纹”的牙齿，从矢状向和冠状向调整单颗牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现高密度线状裂纹的位置，用距离工具在相应的层数做一横线标记，继续往根部移动，直到高密度线状裂纹消失的位置，仍用距离工具在相应的层数做一横线标记，在两个横线标记之间用距离工具测量长度，记为增强CBCT测量的裂纹深度。
作为优选，所述S7中，五分值法的评分标准为：1分：病损明显不存在；2分：病损可能不存在；3分：无法判断；4分：病损可能存在；5分：病损明显存在。
与现有技术相比，本发明的有益效果：该用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法中，利用碘佛醇的流动性和X线阻射性，在真空条件下渗入牙齿的结构性裂纹中，增加CBCT对牙齿纤细裂纹的检出率，并确定其侵袭的深度，以提高CBCT对牙隐裂的诊断能力，并且探索如何将其应用于临床中，为牙隐裂裂纹诊断提供更为有效的放射学诊断方法，为临床医师制定合理的治疗方案提供有价值的指导。
附图说明
图1为本发明的每个下颌托盘上整齐排列8颗带有蜡块底托的隐裂牙图；
图2为本发明的mciro CT扫描仪器图；
图3为本发明的用橡皮障分离牙冠部和牙根部图；
图4为本发明的水泵和真空装置图；
图5为本发明的整体流程框图。
图6为本发明的增强CBCT测量的裂纹深度与Micro CT测量的裂纹深度之间存在线性相关关系图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-5所示，本发明提供一种技术方案：
本发明提供一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，包括：
1、实验对象：
本发明经天津医科大学口腔医院伦理委员会的审批(TMUhMEC2019014)，共搜集从2018年1月至2018年12月于天津医科大学口腔医院口腔颌面外科拔除的离体牙共200颗，患者被告知并签署了临床研究的知情同意书。
2、实验对象：纳入标准与排除标准：
纳入标准：牙体形态正常，未经物理或化学处理，没有可见的外部裂纹；排除标准：内源性或外源性着色；牙体发育畸形；中龋到深龋；楔状缺损；牙根纵折；根管治疗或有修复体的牙齿。
3、隐裂牙建模：
选用最近1个月内拔除的前磨牙或磨牙，根据纳入标准和排除标准筛选离体牙，共计纳入40颗离体牙，20颗前磨牙，20颗磨牙，去除表面软组织和牙石，置于含0.1％麝香草酚的溶液中浸泡24h，然后放置于生理盐水中，除了实验操作时取出，其他时间均放置于生理盐水中，防止其干燥脱水。
根据牙釉质和牙本质的热膨胀系数不同，采用骤冷骤热直接接触牙齿的方法，制造人工隐裂纹。先将离体牙放置于-196℃的液氮中1min，然后取出牙齿，立即放置于90℃的热水中保持5min，取出备用。
冷热交替处理后，除去过程中劈裂的牙齿，在1 7X放大的显微镜(S 7/OPMIPROergo；CarlZeiss,Oberkochen,Germany)下观察实验牙是否存在裂纹，一共得到隐裂牙19颗前磨牙，13颗磨牙，其中一颗磨牙在后续实验期间劈裂，排除，共计19颗前磨牙，12颗磨牙。
4、制作蜡块底托：
将蜡片烫软做成块状，将隐裂牙的牙根部分插入蜡块，制作底托，模拟牙周组织。将配有蜡块底托的隐裂牙随机放置在下颌塑料托盘内，每个托盘放置8颗隐裂牙，模拟下颌牙弓拍摄CBCT，具体如图1所示，将隐裂牙进行编号，并记录裂纹走行。
5拍摄X线牙片和常规小视野CBCT：
31颗隐裂牙分别拍摄X线牙片(Sirona,Germany)和小视野CBCT(Kavo3Dexam,Germany)，X线牙片拍摄颊舌以及近远两个方向，扫描参数分别为70kV，7mA，0.12s，螺距管与牙齿长轴和胶片垂直，胶片与牙齿长轴平行。CBCT扫描参数为120kV，8mA，基体尺寸为640×640，视野为8×8cm，像素尺寸为0.125mm×0.125mm。
为了保证X线平片和小视野CBCT的质量，所有的过程都是由一个操作员完成的。图像数据采集完成，结果存入数据库。CBCT图像在VisionQ(KaVoTestVision)软件包中进行分析。
6、MicroCT分析：
为了精确评估31颗牙齿是否存在裂纹以及裂纹侵袭的深度，使用Micro-CT系统(SIEMENS,Munich,Germany)对31颗牙齿分别进行了MicroCT扫描，如图2所示，图像的分辨率为9.08μm，管电压为80KV，管电流为500μA，曝光时间为1000ms。图像由1536个切片组成。利用可视化软件InveonResearchWorkplace(SIEMENS,Munich,Germany)对二维图像进行三维重建。由一名经验丰富的影像医师进行MicroCT的结果分析，记录每颗隐裂牙裂纹存在情况，以及隐裂牙冠根向裂纹侵袭深度。
7、真空加造影剂实验：
将碘佛醇与生理盐水3：1配比制作稀释的碘佛醇溶液，增强其流动性，充分混合后，注射器抽取5ml碘佛醇稀释液备用。
单颗隐裂牙放置在纸杯底部，使用橡皮障分离牙冠部和牙根部，保证良好的封闭性，使冠部暴露出来，橡皮障外部用皮筋固定在纸杯。注射器注射少量溶液于牙冠部，使液体充满冠部，将整个装置放置于真空装置中，如图3所示，装置与真空抽气口的垂直距离保持在10cm。
真空装置连接抽真空水泵，如图4所示，抽负压至-0.08Mpa，关闭负压，使真空内保持-0.08Mpa的状态1min，回复大气压后再次抽负压至-0.08Mpa，重复1次，再次回复大气压后，取出隐裂牙，棉球吸干多余液体，酒精棉球擦净牙冠周围液体，取下橡皮障。
8、拍摄增强小视野CBCT：
实验后将隐裂牙仍然放置到下颌托盘里，每个下颌托盘放置8颗隐裂牙，再次拍摄小视野CBCT，观察裂纹显影情况。
9、拍摄增强小视野CBCT：
X线牙片、常规小视野CBCT、增强CBCT的结果分别由一名牙体牙髓研究生和一名影像科医师观察并记录，两位医师经过相关培训，事先不知道实验目的，并互不知道记录结果。
拍摄X线牙片时，分别收集了实验牙颊舌以及近远两个方向的影像资料，评判时根据1颗牙两张片子综合评估得出结果，能在一个或两个方向上观察到裂纹即记为“有裂纹”，否则，则记为“无裂纹”。
观察常规小视野CBCT时，在冠状面、矢状面、水平面观察是否有裂纹，综合评估后，采用国际通用的五分值法[24]记录裂纹存在的情况，评分标准为：1分：病损明显不存在；2分：病损可能不存在；3分：无法判断；4分：病损可能存在；5分：病损明显存在。
观察增强小视野CBCT时，在隐裂牙的CBCT上观察到高密度线状裂纹影记为“有裂纹”，若无，则记为“无裂纹”。
Micro CT测量裂纹的方法：从矢状向和冠状向调整牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现裂纹的位置，记录对应的层数，继续往根部移动，直到裂纹消失的位置，记录对应的层数。在冠状面水平，用测量工具测量从裂纹开始出现的层数到裂纹消失的层数之间的距离，记为Micro CT测量的裂纹深度，将其记为裂纹实际深度。
增强CBCT测量裂纹的方法：筛选牙体牙髓研究生与影像医师在增强CBCT观察上都记为“有裂纹”的牙齿，从矢状向和冠状向调整单颗牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现高密度线状裂纹的位置，用工具“距离”在相应的层数做一横线标记，继续往根部移动，直到高密度线状裂纹消失的位置，仍用距离工具在相应的层数做一横线标记。在两个横线标记之间用距离工具测量长度，记为增强CBCT测量的裂纹深度。
10、统计方法：
探讨两位医师对X线牙片、增强CBCT检测结果的一致性，采用Cohen's kappa系数分析；而探讨两位医师对常规CBCT检测结果的一致性，由于其结果为等级资料，采用weighted kappa分析。分别计算两位医师在X线牙片、常规CBCT、增强CBCT诊断牙隐裂的灵敏度，其中常规CBCT的灵敏度计算为：灵敏度＝(病损可能存在例数+病损明显存在例数)/病损实际存在例数。
选取两位医师在增强CBCT上均评定为“有裂纹”的实验牙，测量其冠根向裂纹侵袭深度，并与Micro CT测量深度做线性相关分析，观察其是否具有统计学意义，并得出线性回归方程。
结果：
观察记录每颗隐裂牙在X线牙片、常规小视野CBCT、增强CBCT、Micro CT上裂纹的检出情况。关于X线牙片，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的Cohen's kappa系数为0.741(95％CI为0.506-0.976)，P＜0.001，具有较强一致性(表1)。关于常规小视野CBCT，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的weighted kappa系数为0.673(95％CI为0.502-0.844)，P＜0.001，具有较强一致性(表2)。关于增强CBCT，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的Cohen's kappa系数为0.733(95％CI为0.498-0.968，P＜0.001，具有较强一致性(表3)。
X线牙片综合颊舌与近远中两个方向观察检测牙隐裂，牙体牙髓研究生和影像医师的灵敏度分别为58.1％和51.6％；使用常规小视野CBCT检测牙隐裂，牙体牙髓研究生和影像医师的灵敏度分别为45.2％和48.4％；使用增强小视野CBCT检测牙隐裂，牙体牙髓研究生和影像医师的灵敏度分别为54.8％和67.7％。
如图6为增强CBCT测量的裂纹深度与Micro CT测量的裂纹深度之间存在线性相关关系图。线性回归公式为显微CT测量的裂纹深度＝2.071+0.921*增强CBCT测量的裂纹深度(表5)。
表1
对称测量
a.未假定原假设。
b.在假定原假设的情况下使用渐近标准误差。
表1，X线牙片，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的Cohen's kappa系数为0.741(95％CI为0.506-0.976)，P＜0.001，具有较强一致性。
表2
Weighted Kappa
牙体牙髓研究生vs.影像医师
表2，常规小视野CBCT，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的weighted kappa系数为0.673(95％CI为0.502-0.844)，P＜0.001，具有较强一致性。
表3
对称测量
a.未假定原假设。
b.在假定原假设的情况下使用渐近标准误差。
表3，增强CBCT，牙体牙髓研究生与影像医师一致性检验的Cohen's kappa系数为0.733(95％CI为0.498-0.968，P＜0.001，具有较强一致性。
如图6，为散点图结果提示，增强CBCT测量的裂纹深度与Micro CT测量的裂纹深度之间存在线性相关关系。
表5
系数a
a.因变量：显微CT
表5，斜率的P值为0.000(记为P＜0.001)，斜率值与0的差异有统计学意义，说明显微CT与增强CBCT存在线性关系，线性回归公式为显微CT测量的裂纹深度＝2.071+0.921*增强CBCT测量的裂纹深度。
本发明以临床应用诊断牙隐裂为目的，使用碘佛醇作为高密度裂纹指示剂，在真空辅助下渗入隐裂牙的裂纹，拍摄CBCT以期望提高CBCT对于牙隐裂诊断的成功率。碘佛醇为一种新型的含三碘低渗非离子型造影剂，临床常用于血管造影，由于含碘量高，使X线衰减，从而在影像上呈现高密度影。本实验应用碘佛醇，旨在对人体无害的前提下使用高密度造影剂使裂纹在CBCT上显影，提高CBCT对于裂纹的诊断率。有学者研究应用负压技术增加粘接剂渗入深度，从而提高粘接强度，本实验应用负压技术，辅助碘佛醇渗入裂纹深度，从而正确评估裂纹最终延伸深度。
两位医师对X线牙片、常规CBCT、增强CBCT的一致性检验显示均具有较强的一致性。对于X线牙片，由于人工产生隐裂的裂纹方向随机，本实验根据综合颊舌向与近远中向的X线片结果分析隐裂患牙，得出牙体牙髓研究生的灵敏度为58.1％，影像医师的灵敏度为51.6％，明显高于之前研究，可能是由于影响X线牙片诊断能力的是其投照角度，而非其分辨率。临床上常见的是近远中向裂纹，而X线牙片投照角度刚好与其垂直，导致其不能显示裂纹。常规的小视野CBCT分辨率高，能精确到0.125mm，但是对于较细的隐裂纹仍然不能很好地显示，只有在临床上显示较宽的裂纹才有可能在CBCT上显示出来，且只有有经验的影像医师才可以判断，临床诊断率低。
采用增强CBCT能增加牙隐裂诊断的灵敏度，且在CBCT上显示裂纹较为清晰，根据碘佛醇渗入范围可以测量裂纹冠根向侵袭深度。诊断牙隐裂的金标准是组织病理切片，但由于其对样本造成损坏，且难以保证在切片过程中不会造成新的裂纹，现在研究中很少采用切片方法。多数研究采用MicroCT作为诊断牙隐裂的金标准，由于其较高的分辨率使得裂纹显示清晰，且容易测量其侵袭深度，准确性较高。本研究将MicroCT作为诊断金标准，并测量31颗隐裂牙裂纹的冠根向深度作为其实际侵袭深度。根据牙体牙髓研究生和影像医师对增强CBCT结果的判断，选择两位医师在增强CBCT上均“有裂纹”的隐裂牙，共17颗，用CBCT软件测量其冠根向裂纹侵袭深度。结果显示，增强CBCT测量的裂纹深度与MicroCT测量的实际裂纹深度具有线性相关性，可以在未来将增强CBCT的技术应用于临床中，通过得出这一关系式，预测牙隐裂裂纹的实际侵袭深度，从而正确评估患牙情况，告知患者治疗方案和预后，对疗效有一个更好的把握。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的仅为本发明的优选例，并不用来限制本发明，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (10)
1.一种用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其方法包括如下步骤：
S1、隐裂牙建模，选用最近1个月内拔除的前磨牙或磨牙，根据纳入标准和排除标准筛选离体牙，去除表面软组织和牙石，并对离体牙制造人工隐裂纹；
S2、制作蜡块底托，将蜡片烫软做成块状，将隐裂牙的牙根部分插入蜡块，制作底托，模拟牙周组织，将配有蜡块底托的隐裂牙随机放置在下颌塑料托盘内，每个托盘放置8颗隐裂牙，模拟下颌牙弓拍摄CBCT，将隐裂牙进行编号，并记录裂纹走行；
S3、拍摄X线牙片和常规小视野CBCT，隐裂牙分别拍摄X线牙片和小视野，X线牙片拍摄颊舌以及近远两个方向，扫描参数分别为70kV，7mA，0.12s，螺距管与牙齿长轴和胶片垂直，胶片与牙齿长轴平行；
S4、MicroCT分析，使用Micro-CT系统对牙齿分别进行了MicroCT扫描，利用可视化软件InveonResearchWorkplace对二维图像进行三维重建，记录每颗隐裂牙裂纹存在情况，以及隐裂牙冠根向裂纹侵袭深度；
S5、真空加造影剂实验，将碘佛醇与生理盐水3：1配比制作稀释的碘佛醇溶液，充分混合后，注射器抽取5ml碘佛醇稀释液备用；
单颗隐裂牙放置在纸杯底部，使用橡皮障分离牙冠部和牙根部，使冠部暴露出来，橡皮障外部用皮筋固定在纸杯；
注射器注射溶液于牙冠部，使液体充满冠部，将整个装置放置于真空装置中，装置与真空抽气口的垂直距离保持在10cm；
真空装置连接抽真空水泵，抽负压至-0.08Mpa，关闭负压，使真空内保持-0.08Mpa的状态1min，回复大气压后再次抽负压至-0.08Mpa，重复1次，再次回复大气压后，取出隐裂牙，棉球吸干多余液体，酒精棉球擦净牙冠周围液体，取下橡皮障；
S6、拍摄增强小视野CBCT，实验后将隐裂牙仍然放置到下颌托盘里，每个下颌托盘放置8颗隐裂牙，再次拍摄小视野CBCT，观察裂纹显影情况；
S7、影像资料收集：分别收集了实验牙颊舌以及近远两个方向的影像资料，评判时根据1颗牙两张片子综合评估得出结果，能在一个或两个方向上观察到裂纹即记为“有裂纹”，否则，则记为“无裂纹”；
观察常规小视野CBCT时，在冠状面、矢状面、水平面观察是否有裂纹，综合评估后，采用五分值法记录裂纹存在的情况；
观察增强小视野CBCT时，在隐裂牙的CBCT上观察到高密度线状裂纹影记为“有裂纹”，若无，则记为“无裂纹”；
S8、统计方法，分别计算两位医师在X线牙片、常规CBCT、增强CBCT诊断牙隐裂的灵敏度，其中CBCT的灵敏度计算为：灵敏度＝(病损可能存在例数+病损明显存在例数)/病损实际存在例数。
2.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述纳入标准包括有：牙体形态正常，未经物理或化学处理，没有可见的外部裂纹。
3.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述排除标准包括有：内源性或外源性着色；牙体发育畸形；中龋到深龋；楔状缺损；牙根纵折；根管治疗或有修复体的牙齿。
4.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：制造人工隐裂纹的方法包括如下步骤：
S1.1、采用骤冷骤热直接接触牙齿的方法，制造人工隐裂纹，先将离体牙放置于-196℃的液氮中1min，然后取出牙齿，立即放置于90℃的热水中保持5min，取出备用；
S1.2、冷热交替处理后，除去过程中劈裂的牙齿，在17X放大的显微镜下观察实验牙是否存在裂纹。
5.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述S3中，CBCT扫描参数为120kV，8mA，基体尺寸为640×640，视野为8×8cm，像素尺寸为0.125mm×0.125mm。
6.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述S4中，MicroCT扫描的图像分辨率为9.08μm，管电压为80KV，管电流为500μA，曝光时间为1000ms。
7.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述S6中，裂纹的测量方法包括MicroCT测量裂纹和增强CBCT测量裂纹。
8.根据权利要求7所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述MicroCT测量裂纹的方法为：从矢状向和冠状向调整牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现裂纹的位置，记录对应的层数，继续往根部移动，直到裂纹消失的位置，记录对应的层数；在冠状面水平，用测量工具测量从裂纹开始出现的层数到裂纹消失的层数之间的距离，记为MicroCT测量的裂纹深度，将其记为裂纹实际深度。
9.根据权利要求7所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述增强CBCT测量裂纹的方法：在增强CBCT观察上都记为“有裂纹”的牙齿，从矢状向和冠状向调整单颗牙齿，保持其直立状态，然后从水平面观察，从冠部最高点开始往根部观察，记录第一次出现高密度线状裂纹的位置，用距离工具在相应的层数做一横线标记，继续往根部移动，直到高密度线状裂纹消失的位置，仍用距离工具在相应的层数做一横线标记，在两个横线标记之间用距离工具测量长度，记为增强CBCT测量的裂纹深度。
10.根据权利要求1所述的用于隐裂牙真空加造影剂渗透裂纹的方法，其特征在于：所述S7中，五分值法的评分标准为：1分：病损明显不存在；2分：病损可能不存在；3分：无法判断；4分：病损可能存在；5分：病损明显存在。
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