CN111527823A - 促进桑寄生种子萌发的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理5‑50min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为20‑32℃、湿度为75‑85％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有5‑30mg/L的复硝酚钠、5‑50mg/L的胺鲜酯和2‑20mg/L的激动素。本发明的方法通过浸种剂浸泡处理，显著促进了桑寄生种子在恒温培养箱中的萌发，解决了自然状态下桑寄生种子萌发缓慢、萌发率低的问题。
Description
技术领域
本发明涉及植物种子萌发技术领域。更具体地说，本发明涉及一种促进桑寄生种子萌发的方法。
背景技术
桑寄生Taxillus chinensis(DC.)Danser，传统的常用大宗中药材，具有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎元的功效，是广西乃至我国极具特色、用量极大的道地寄生类药材。目前桑寄生药材主要以野生资源为主，一方面，由于其寄生于林木、果树等经济林上而影响寄主的生长，人们不得不将其除掉，导致其数量减少，另一方面，桑寄生果实为浆果，在野生状态下其传播与繁殖主要通过一些食果肉鸟吞食果实消化果肉排出种子粘连到寄主上成活来实现，然而该方法对外部环境条件要求高，且萌发率较低，萌发缓慢，导致成苗率低，致使野生资源大幅减少，因此，为满足市场需求，保证药材质量，规范化栽培将是必然选择。
但是由于桑寄生种子不耐脱水且对低温敏感，在实验室的自然状态下萌发缓慢、萌发不整齐、萌发率低，并且现有技术没有对于促进桑寄生种子萌发的报道。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种通过人工手段促进桑寄生种子萌发的方法，显著提高桑寄生种子的萌发率和萌发整齐度，极大地缩短了萌发时间。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理5-50min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为20-32℃、湿度为75-85％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有5-30mg/L的复硝酚钠、5-50mg/L的胺鲜酯和2-20mg/L的激动素。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述浸种剂中含有15mg/L的复硝酚钠、10mg/L的胺鲜酯和12mg/L的激动素，浸种剂浸泡处理30min。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理之前，先对桑寄生种子进行消毒处理，具体步骤如下：将挑选后的桑寄生种子置于质量分数为0.1％的洗洁精水溶液中浸泡5-10min，再放入质量分数为75％的无水乙醇水溶液中浸泡5-10min，无菌水清洗3-4次。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述挑选具体是指采收成熟阶段桑寄生种子，除去果皮和果胶后用无菌水洗净，再从中挑出无损伤、籽粒饱满、质地均匀、不携带病虫卵的种子备用。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，在桑寄生种子消毒之后、浸种剂浸泡处理之前，将桑寄生种子置于恒温容器中进行预处理，恒温容器中温度恒定设为20-25℃，具体步骤包括：
1)将桑寄生种子置于恒温容器中第一次浸泡10min，恒温容器中装有质量分数为8％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
2)将第一次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第二次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为5％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
3)将第二次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第三次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为2％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
4)将第三次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第四次浸泡10min，恒温容器中装有磁化水，结束后，备用。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述浸种剂中还含有10mg/L的锁阳水提物和1mg/L的果糖，所述锁阳水提物为锁阳粉碎后与水按照质量比为1:5混合后，胶体磨研磨25-30min，过滤100目纱布得到。
优选的是，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，萌发培养期间，恒温培养箱内每天光照12h黑暗12h，交替进行，光照强度为2000lx。
本发明至少包括以下有益效果：
(1)本发明提供的促进桑寄生种子萌发的方法，通过浸种剂浸泡处理，显著促进了桑寄生种子在恒温培养箱中的萌发，解决了自然状态下桑寄生种子萌发缓慢、萌发率低的问题；
(2)本发明在浸种剂浸泡前，通过对桑寄生种子进行预处理，以自高至低的果糖水溶液在恒温下浸泡处理，使桑寄生种子以较快的吸水速度完成吸胀，促使种子快速萌发，提高其萌发整齐度；
(3)本发明通过在浸种剂中加入适量的锁阳水提取与果糖，进一步刺激并诱导桑寄生种子在离开寄主的条件下快速萌发，提高萌发率并缩短萌发时间。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1：
一种促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理5min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为20℃、湿度为75％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有5mg/L的复硝酚钠、5mg/L的胺鲜酯和2mg/L的激动素。
所述的促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理之前，先对桑寄生种子进行消毒处理，具体步骤如下：将挑选后的桑寄生种子置于质量分数为0.1％的洗洁精水溶液中浸泡5min，再放入质量分数为75％的无水乙醇水溶液中浸泡5min，无菌水清洗3次。
所述挑选具体是指采收成熟阶段桑寄生种子，除去果皮和果胶后用无菌水洗净，再从中挑出无损伤、籽粒饱满、质地均匀、不携带病虫卵的种子备用。
萌发培养期间，恒温培养箱内每天光照12h黑暗12h，交替进行，光照强度为2000lx。
实施例2：
一种促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理50min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为32℃、湿度为85％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有30mg/L的复硝酚钠、50mg/L的胺鲜酯和20mg/L的激动素。
所述的促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理之前，先对桑寄生种子进行消毒处理，具体步骤如下：将挑选后的桑寄生种子置于质量分数为0.1％的洗洁精水溶液中浸泡10min，再放入质量分数为75％的无水乙醇水溶液中浸泡10min，无菌水清洗4次。
所述挑选具体是指采收成熟阶段桑寄生种子，除去果皮和果胶后用无菌水洗净，再从中挑出无损伤、籽粒饱满、质地均匀、不携带病虫卵的种子备用。
萌发培养期间，恒温培养箱内每天光照12h黑暗12h，交替进行，光照强度为2000lx。
实施例3：
一种促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理30min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为25℃、湿度为80％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有15mg/L的复硝酚钠、10mg/L的胺鲜酯和12mg/L的激动素。
所述的促进桑寄生种子萌发的方法，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理之前，先对桑寄生种子进行消毒处理，具体步骤如下：将挑选后的桑寄生种子置于质量分数为0.1％的洗洁精水溶液中浸泡7min，再放入质量分数为75％的无水乙醇水溶液中浸泡7min，无菌水清洗3次。
所述挑选具体是指采收成熟阶段桑寄生种子，除去果皮和果胶后用无菌水洗净，再从中挑出无损伤、籽粒饱满、质地均匀、不携带病虫卵的种子备用。
萌发培养期间，恒温培养箱内每天光照12h黑暗12h，交替进行，光照强度为2000lx。
实施例4：
在实施例3的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，在桑寄生种子消毒之后、浸种剂浸泡处理之前，将桑寄生种子置于恒温容器中进行预处理，恒温容器中温度恒定设为20-25℃，具体步骤包括：
1)将桑寄生种子置于恒温容器中第一次浸泡10min，恒温容器中装有质量分数为8％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
2)将第一次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第二次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为5％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
3)将第二次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第三次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为2％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
4)将第三次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第四次浸泡10min，恒温容器中装有磁化水，结束后，备用。
实施例5：
在实施例4的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述浸种剂中还含有10mg/L的锁阳水提物和1mg/L的果糖，所述锁阳水提物为锁阳粉碎后与水按照质量比为1:5混合后，胶体磨研磨25-30min，过滤100目纱布得到。
对比例1：
在实施例3的基础上，将浸种剂用无菌水替代，其余与实施例3的方法相同。
对比例2：
在实施例3的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，在桑寄生种子消毒之后、浸种剂浸泡处理之前，将桑寄生种子置于恒温容器中进行预处理，恒温容器中温度恒定设为20-25℃，具体步骤包括：
1)将桑寄生种子置于恒温容器中第一次浸泡10min，恒温容器中装有质量分数为3％的氯化钠水溶液，溶剂为磁化水；
2)将第一次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第二次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为1％的氯化钠水溶液，溶剂为磁化水；
3)将第二次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第三次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为0.5％的氯化钠水溶液，溶剂为磁化水；
4)将第三次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第四次浸泡10min，恒温容器中装有磁化水，结束后，备用。
对比例3：
在实施例4的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述浸种剂中还含有10mg/L的锁阳水提物，所述锁阳水提物为锁阳粉碎后与水按照质量比为1:5混合后，胶体磨研磨25-30min，过滤100目纱布得到。
对比例4：
在实施例4的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，所述浸种剂中还含有1mg/L的果糖。
对比例5：野外接种萌发实验
3月中旬，采收新鲜、饱满、无病虫害的桑寄生果实，将果皮去掉，将种子与鸟粪按照5:1的比例混合后，粘于2年生桑树上部健壮枝条上(从顶部往下约植株高度的四分之一处)，当空气比较干燥时，用喷雾器喷水，早晚各喷一次，使空气湿度达80％以上，直至桑寄生种子萌发。
对比例6：
在实施例3的基础上，所述的促进桑寄生种子萌发的方法，在桑寄生种子消毒之后、浸种剂浸泡处理之前，将桑寄生种子置于恒温容器中进行预处理，恒温容器中温度恒定设为20-25℃，预处理过程包括：将桑寄生种子置于恒温容器中浸泡40min，恒温容器中装有质量分数为5％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；果糖水溶液浸泡结束后的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中浸泡10min，恒温容器中装有磁化水，结束后，备用。
为了说明本发明的效果，本发明的发明人针对实施例3-5、对比例1-6的技术方案，对同一来源的桑寄生种子(采集于桑树的桑寄生种子)进行萌发培养处理，以长出1～2片叶子并形成吸器为达到萌芽状态标准，按照农作物种子检验国家标准，测定了桑寄生种子发萌发的初次和末次发芽时间(当种子发芽率达到50％时的天数为初次发芽时间，发芽率达到最高时的天数为末次发芽时间)、发芽势(种子从发芽开始到发芽高峰时段内发芽种子数占试验种子总数的百分比)以及发芽率(种子发芽数占试验种子总数的百分比)，所有试验每组处理重复3次，每次重复50粒种子，具体结果见下表1所示。
表1不同方案的桑寄生种子萌发结果对比
从表1中可以看出，对比例5的野外接种萌发实验，发芽势极低，种子萌发整齐度也差，发芽率也较低；从对比例1与实施例3的结果可以看出，浸种剂(15mg/L的复硝酚钠、10mg/L的胺鲜酯和12mg/L的激动素)确实提高了桑寄生种子的萌发率，且大幅度提高了发芽势和种子萌发整齐度；从实施例4与实施例3的结果可以看出，在浸种剂浸泡前，通过对桑寄生种子进行预处理，以自高至低的果糖水溶液在恒温下浸泡处理，显著提高了种子萌发发芽势和整齐度；从实施例5与实施例4的结果可以看出，在浸种剂中加入适量的锁阳水提取与果糖，显著提高萌发率并缩短萌发时间至3-9天；从对比例2与实施例3的结果可以看出，采用浓度递减的氯化钠水溶液对桑寄生种子进行预处理，效果并不显著；从对比例6与实施例3、实施例4的结果可以看出，采用单一浓度的果糖水溶液对桑寄生种子进行预处理，其效果远没有实施例4中采用浓度递减的果糖水溶液预处理的效果好，可能是由于在浓度递减的果糖水溶液浸泡下，桑寄生种子的吸胀能力增强，加快了萌发速度；从对比例3、对比例4与实施例4、实施例5的结果可以看出，仅在浸种剂中额外加入锁阳提取物，略提升了萌发率与萌发势，仅在浸种剂中额外加入果糖，桑寄生种子的萌发势显著提高，发芽率略增，萌发时间也缩短，而在浸种剂中同时加入锁阳提取物与果糖时，萌发率达到桑寄生种子萌发势与萌发率显著提高，萌发时间也大大缩短至3-7天。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (7)
1.促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理5-50min，之后将桑寄生种子放入带有滤纸的培养皿中，置于温度为20-32℃、湿度为75-85％的恒温培养箱中萌发培养至种子萌发，所述浸种剂中含有5-30mg/L的复硝酚钠、5-50mg/L的胺鲜酯和2-20mg/L的激动素。
2.如权利要求1所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，所述浸种剂中含有15mg/L的复硝酚钠、10mg/L的胺鲜酯和12mg/L的激动素，浸种剂浸泡处理30min。
3.如权利要求1所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，将桑寄生种子用浸种剂浸泡处理之前，先对桑寄生种子进行消毒处理，具体步骤如下：将挑选后的桑寄生种子置于质量分数为0.1％的洗洁精水溶液中浸泡5-10min，再放入质量分数为75％的无水乙醇水溶液中浸泡5-10min，无菌水清洗3-4次。
4.如权利要求3所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，所述挑选具体是指采收成熟阶段桑寄生种子，除去果皮和果胶后用无菌水洗净，再从中挑出无损伤、籽粒饱满、质地均匀、不携带病虫卵的种子备用。
5.如权利要求4所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，在桑寄生种子消毒之后、浸种剂浸泡处理之前，将桑寄生种子置于恒温容器中进行预处理，恒温容器中温度恒定设为20-25℃，具体步骤包括：
1)将桑寄生种子置于恒温容器中第一次浸泡10min，恒温容器中装有质量分数为8％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
2)将第一次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第二次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为5％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
3)将第二次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第三次浸泡15min，恒温容器中装有质量分数为2％的果糖水溶液，溶剂为磁化水；
4)将第三次浸泡结束的桑寄生种子用无菌水清洗2次，再置于恒温容器中第四次浸泡10min，恒温容器中装有磁化水，结束后，备用。
6.如权利要求5所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，所述浸种剂中还含有10mg/L的锁阳水提物和1mg/L的果糖，所述锁阳水提物为锁阳粉碎后与水按照质量比为1:5混合后，胶体磨研磨25-30min，过滤100目纱布得到。
7.如权利要求1所述的促进桑寄生种子萌发的方法，其特征在于，萌发培养期间，恒温培养箱内每天光照12h黑暗12h，交替进行，光照强度为2000lx。
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