CN111494410B - 一种抗真菌组合物、其外用制剂及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗真菌组合物、其外用制剂及用途,涉及医药技术领域。所述组合物包括聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯。其药物制剂为外用制剂,该组合物和药物制剂制剂可用在在制备治疗真菌感染性疾病的药物中。本发明组合物中的聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯,能对多种病原真菌产生优异的协同抑菌作用;本发明组合物制备的外用制剂能有效治疗真菌性阴道炎等真菌感染性疾病。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种抗真菌组合物、其外用制剂及用途。
背景技术
聚维酮碘(Polyvinyl pyrrolidone-Iodine,PVP-I),又称碘伏,是唯一被中国药典收载的含碘消毒制剂,已成为国际上公认的高效、广谱、无毒的杀菌剂,它具有极强的杀菌力和广泛的杀菌谱,对革兰阳性菌、革兰阴性菌、病毒、芽孢、真菌、原虫等都有强而迅速的杀灭作用,常用于生命体、动植物及其环境的消毒,在医药、日化方面有着重要的应用价值。
聚维酮碘是以高分子聚合物—聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)为载体与碘络合而成的,聚乙烯吡咯烷酮是一种非离子型表面活性剂,本身没有抗菌作用,与碘形成络合后,增加了碘的溶解度,同时提高了碘溶液的润湿和穿透能力,通过释放游离碘起到杀菌消毒的作用。聚乙烯吡咯烷酮根据不同的聚合条件而产生多种分子量,Al-Adham和Ibrahim S.I.等人在“Effect of polyvinylpyrrolidone molecular weight upon theantimicrobial activity of povidone-iodine antiseptics”中的研究表明,作为一种抗菌剂,聚维酮碘的抗菌活性也与其分子量成正比;HARALD等人在“Antiproliferative/cytotoxic effects of molecular iodine,povidone-iodine andLugol's solution in different human carcinoma cell lines”中的研究表明,聚维酮碘对人肿瘤细胞具有抑制作用。
聚乙烯醇(PVAA)是一种亲水性优良、生物相容性好并可降解的水溶性高分子,可用于药物缓释制剂、渗透泵控释制剂、溶胀控释系统等医药领域。杨惠芳等人(涂料工业,2008(09):40-43.)在研究聚乙烯醇与纳米羟基磷灰石(HAP)的复合水凝胶时发现,当聚乙烯醇含量较小时,其不能与HAP产生协同效应,而它们各自的抗菌能力又相对较弱,因而复合水凝胶不能有效地杀灭细菌。当聚乙烯醇含量较多时,它与HAP间形成了良好的空间力学结构,两者间的结合已不是单纯的物理交联,而是产生了牢固的键和作用,复合水凝胶具备了所需的抗菌协同能力,能够很好地抵抗金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和白色念珠菌。当聚乙烯醇含量继续增加时,形成了聚乙烯醇对羟基磷灰石机体的包裹作用,聚乙烯醇的这种包裹结构使得复合水凝胶丧失了协同抗菌的效应,因而当聚乙烯醇含量过高时复合水凝胶再次丧失了抗菌能力。
中国专利申请200710055154.0公开了一种聚维酮碘水凝胶创伤敷料及其辐射制备方法。它由下述重量比组分组成:1-10%聚维酮碘、10-30%交联的亲水性聚合物、1-5%辐照敏化剂、1-5%增塑剂、余量水,所述亲水性聚合物为聚乙烯醇、聚氧化乙烯、聚乙烯皮咯烷酮等一种或多种成分。溶液的pH值维持在6-8。先将水凝胶所用的材料与水混合均匀,抽真空脱泡,冷冻固化成型,再选择辐射剂量为10-100kGy,经60Coγ-射线或电子束辐射交联。该创伤敷料不仅具有常规水凝胶创伤敷料的高吸水性和生物相容性,而且含有具有有效广谱抗菌作用的聚维酮碘,对革兰氏阴、阳性菌、结核杆菌、真菌和病毒具有广谱抗菌作用。本发明人在前期研究中使用不同分子量的聚乙烯吡咯烷酮制成的聚维酮碘与不同分子量的聚乙烯醇,在聚乙烯醇不包裹聚维酮碘的质量比下进行实验,发现对多种病原菌均未产生协同抗菌作用。
由于聚乙烯醇的单体结构相对较为简单,因此对其中的游离羟基进行改造(如酰化等)则有可能改变其空间结构,从而影响其与聚维酮碘空间结构的相互作用而产生协同抗菌作用,现有技术中暂无何种结构改造能产生上述效果的技术启示。本申请人在实验过程中出乎意料的发现,使用聚乙烯醇醋酸酯与聚维酮碘组合,并合理调控比例,可以对多种真菌产生优异的协同抗真菌作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗真菌组合物、其外用制剂及用途,所述组合物包括不同分子量的聚乙烯吡咯烷酮的聚维酮碘与不同分子量的聚乙烯醇醋酸酯,能对多种真菌产生优异的协同抗真菌作用。
为了实现上述发明目的,本发明一方面提供了一种抗真菌组合物,包括聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯。
其中,所述聚维酮碘为本领域公知的聚乙烯吡咯烷酮与碘的络合物。
优选地,所述聚维酮碘的有效碘含量为9.0-11.9%。
优选地,所述聚维酮碘中聚乙烯吡咯烷酮的分子量为5-1130kDa,所述聚乙烯醇醋酸酯的分子量为13-186kDa。
优选地,本发明组合物中聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯的质量比为2-10:1。
优选地,所述聚维酮碘采用吕鉴泉,等,"微波法合成聚维酮碘的研究."湖北师范大学学报(自然科学版)1(2013):86-89一文中所披露的液相合成方法制备,具体如下:分别称取一定配比的聚乙烯吡咯烷酮和碘溶于加有适量的无水乙醇的三颈烧瓶中,加入一定量的碘化钾溶液和磷酸缓冲溶液,搅拌下溶解后放入微波辅助合成萃取仪中进行反应,反应停止后回收乙醇,室温下放置1-2h后减压干燥,得到产品,反应条件为:微波功率600W,PVP与I2的投料比(质量比)为4:1,反应时间50min,pH值为6。
另一方面,本发明提供上述组合物的药物制剂。
优选地,所述的药物制剂为外用制剂。
优选地,所述的外用制剂包括皮肤给药外用制剂、直肠给药外用制剂和阴道给药外用制剂;更优选为阴道给药外用制剂。
优选地,所述的药物制剂的剂型选自栓剂、凝胶剂、乳膏剂、软膏剂、膜剂中的任一种。
再一方面,本发提供上述组合物在制备治疗真菌感染性疾病的药物中的用途。
优选地,所述的真菌感染性疾病中的真菌为念珠菌属或曲霉菌属;进一步优选为近平滑念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、烟曲霉菌、黑曲霉菌、黄曲霉菌中的一种或多种。
优选地,所述的真菌感染性疾病为真菌性阴道炎。
本发明与现有技术相比,具有以下优点:
(1)本发明所述的组合物含有聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯,能对多种病原真菌产生优异的协同抑菌作用,为协同增效抑菌的配方提供了新思路;
(2)本发明组合物制备的外用制剂能有效治疗真菌性阴道炎等真菌感染性疾病。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施例,进一步阐明本发明,但下述实施例仅为本发明的优选实施例,并非全部。基于实施方式中的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例,都属于本发明的保护范围。
下述实施例中,若无特殊说明,所用的操作方法均为常规操作方法,所用设备均为常规设备。
若无特殊说明,本发明所有与浓度相关的参数的单位均为μg/L。
下述实施例中,聚维酮碘和聚乙烯醇醋酸酯的质量比以单个数字表示,省略“:1”,例如,聚维酮碘和聚乙烯醇醋酸酯的质量比为10,则代表聚维酮碘和聚乙烯醇醋酸酯的质量比为10:1。
下述实施例中,聚乙烯吡咯烷酮购自上海润捷化学试剂有限公司,批号为20190602、20190618、20190711、20190819、20190823;聚乙烯醇醋酸酯为实验室自制,且根据GPC测定其重均分子量。
1受试物准备
1.1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的聚维酮碘PVPI1-5
采用吕鉴泉,et al."微波法合成聚维酮碘的研究."湖北师范大学学报(自然科学版)1(2013):86-89一文中所披露的液相合成方法制备得到本发明所述的含有不同分子量的聚乙烯吡咯烷酮的聚维酮碘:分别称取一定配比的聚乙烯吡咯烷酮和碘溶于加有适量的无水乙醇的三颈烧瓶中,加入一定量的碘化钾溶液和磷酸缓冲溶液,搅拌下溶解后放入微波辅助合成萃取仪中进行反应,反应停止后回收乙醇,室温下放置1.5h后减压干燥,得到聚维酮碘,PVPI1-5,反应条件与产物特征如表1所示。
表1.
1.2不同分子量的聚乙烯醇醋酸酯PVAA1-5
准备不同分子量的聚乙烯醇醋酸酯PVAA1-5,其分子量如表2所示。
表2.
聚乙烯醇醋酸酯编号 | 聚乙烯醇醋酸酯分子量 |
PVAA1 | 14 |
PVAA2 | 67 |
PVAA3 | 81 |
PVAA4 | 112 |
PVAA5 | 161 |
2试验例抗真菌试验
按照以下步骤计算产生fa时的联合用药指数CI:
(1)采用张志娇等人(广州化工,2019,47(10):75-79+113.)所披露的方法测定聚维酮碘、聚乙烯醇醋酸酯以及聚维酮碘组合物在不同梯度浓度下对各种受试菌的抑菌率(IR)。
(2)对于聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯而言,把IR对PVPI1-5或PVAA1-5的受试浓度的对数log(c)的关系用EXCEL进行线性回归,计算产生抑菌效果fa时的PVPI1-5或PVAA1-5的浓度,分别记为ICfa(A)或ICfa(B);对于聚维酮碘组合物而言,则采用IR对其中PVPI1-5的浓度的log(c)进行线性回归,并计算产生相同fa时的PVPI1-5浓度,记为ICfa(MixA)。
(3)根据下式计算产生fa时的联合用药指数CI。
CI=ICfa(MixA)/ICfa(A)+ICfa(MixA)/(R×ICfa(B))
式中,R为聚维酮碘和聚乙烯醇醋酸酯的质量比。
当CI<1时即表示两者联合用药产生协同作用,CI值越小,表示协同作用越强,最终结果如表3-8所示。
其中,在表3-8中:a代表相应浓度,单位μg/L,对于聚维酮碘组合物而言依其中的聚维酮碘计;b代表IR对相应log(c)线性回归方程(r2≥0.97)的斜率与截距。
MIX代表组合物,例如MIX(PVPI1-PVAA2)代表PVPI1与PVAA2混合制备的组合物,并采用机械搅拌充分混合。
表3.受试物对平滑念珠菌的抑菌作用
受试物 | R | IR<sub>max</sub> | 斜率<sup>b</sup> | 截距<sup>b</sup> | fa | IC<sub>fa</sub><sup>a</sup> | CI |
MIX(PVPI1-PVAA2) | 4 | 99.94% | 0.730 | -0.860 | 8.23% | 19.537 | 0.287 |
MIX(PVPI1-PVAA2) | 9 | 99.78% | 0.785 | -1.387 | 8.23% | 74.425 | 0.440 |
MIX(PVPI2-PVAA4) | 3 | 99.87% | 0.550 | -0.441 | 8.23% | 8.952 | 0.687 |
MIX(PVPI2-PVAA4) | 7 | 99.64% | 0.595 | -0.487 | 8.23% | 9.035 | 0.294 |
MIX(PVPI3-PVAA2) | 4 | 99.63% | 0.553 | -0.822 | 8.23% | 42.990 | 0.299 |
MIX(PVPI3-PVAA2) | 6 | 99.97% | 0.785 | -1.211 | 8.23% | 44.425 | 0.196 |
MIX(PVPI4-PVAA5) | 5 | 99.90% | 0.879 | -0.974 | 8.23% | 15.930 | 0.591 |
MIX(PVPI4-PVAA5) | 7 | 99.96% | 0.810 | -0.894 | 8.23% | 16.013 | 0.438 |
MIX(PVPI5-PVAA4) | 4 | 99.64% | 0.587 | -0.514 | 8.23% | 10.358 | 0.540 |
MIX(PVPI5-PVAA4) | 10 | 99.82% | 0.686 | -0.617 | 8.23% | 10.446 | 0.160 |
PVPI1 | - | 99.67% | 0.768 | -1.381 | 8.23% | 80.425 | - |
PVPI2 | - | 99.77% | 0.303 | -0.208 | 8.23% | 9.099 | - |
PVPI3 | - | 99.03% | 0.771 | -1.210 | 8.23% | 47.605 | - |
PVPI4 | - | 99.37% | 0.897 | -1.003 | 8.23% | 16.223 | - |
PVPI5 | - | 99.80% | 0.960 | -0.898 | 8.23% | 10.506 | - |
PVAA1 | - | 9.82% | 0.585 | -1.111 | 8.23% | 109.317 | - |
PVAA2 | - | 9.32% | 0.576 | -1.095 | 8.23% | 110.853 | - |
PVAA3 | - | 8.23% | 0.412 | -0.845 | 8.23% | 179.592 | - |
PVAA4 | - | 8.39% | 0.902 | -1.961 | 8.23% | 184.592 | - |
PVAA5 | - | 8.86% | 1.001 | -2.167 | 8.23% | 176.735 | - |
表4.受试物对白色念珠菌的抑菌作用
表5.受试物对热带念珠菌的抑菌作用
表6.受试物对烟曲霉菌的抑菌作用
表7.受试物对黑曲霉菌的抑菌作用
表8.受试物对黄曲霉菌的抑菌作用
从表3-8可以看出,聚维酮碘PVPI1-5与聚乙烯醇醋酸酯PVAA1-5组合后,CI均<1,证明均取得协同增效效果。
且对近平滑念珠菌来说,CI均不超过0.6,最小为0.160,此时为PVPI5与PVAA4组合,比例为10:1;;对白色念珠菌来说,CI均不超过0.67,最小为0.222,此时为PVPI2与PVAA4组合,比例为10:1;对热带念珠菌来说,CI均不超过0.63,最小为0.217,此时为PVPI4与PVAA4组合,比例为7:1;对烟曲霉菌来说,CI均不超过0.68,最小为0.183,此时为PVPI5与PVAA1组合,比例为5:1;对黑曲霉菌来说,CI均不超过0.69,最小为0.130,此时为PVPI5与PVAA5组合,比例为8:1;对黄曲霉菌来说,CI均不超过0.7,最小为0.149,此时为PVPI2与PVAA4组合,比例为7:1。
作为对照,本发明采用本发明中聚维酮碘与不同分子量的聚乙烯醇(购自湖北华丹医药科技股份有限公司)组合重复了上述试验,每一组合均试验了多种质量比(1-10取整),选出最低CI值,如表9所示。其中所述聚乙烯醇均符合《中国药典》(2015版)的相关标准。
表9.聚维酮碘与聚乙烯醇的抗菌作用
从表9可以看出,聚维酮碘与聚乙烯醇组合,并不能起到或者起到微弱的协同增效作用,证实本发明通过选择聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯组合取得了意料不到的协同增效作用。
3制剂制备例
3.1含有组合物的栓剂的制备
处方:PVPI2 10g、PVAA3 2.5g、混合脂肪酸酯450g,共制成500枚。
制法:取处方用量的混合脂肪酸酯,置夹层锅中,加热熔化后加入处方用量的PVPI2与PVAA3细粉,在接近凝固时倾入涂有润滑剂的栓模中,迅速冷却,冷却后削平,取出即得栓剂。
3.2含有组合物的凝胶剂的制备
处方:PVPI3 6g、PVAA2 1g、卡波普940 8g、三乙醇胺10g、甘油80g、丙二醇50g、三氯叔丁醇1g,用蒸馏水补至1000g。
制法:将处方用量的PVPI3、PVAA2及三氯叔丁醇加入处方量蒸馏水中溶解,混匀,加入处方用量的卡波普940,充分溶胀,备用。另取处方用量的三乙醇胺、甘油和丙二醇,混匀,缓缓加入上述备用液中,搅匀,即得凝胶剂。
3.3含有组合物的膜剂的制备
处方:PVPI4 10g、PVAA4 5g、羧甲基纤维素钠0.5g、纯化水40mL、甘油0.80g。
制法:将处方用量的PVAA4及羧甲基纤维素钠加水过夜溶胀后,于水浴上加热至95℃使溶解,加入处方用量的甘油和PVPI4,搅拌至溶解,脱气(超声或滴加正丁醇脱气),将膜料倾倒入同温度的玻璃板,颠板使膜料均匀铺平,移至70-80℃的干燥箱中干燥1h,冷却后脱膜切割,在紫外灯下照射15min,灭菌、密封包装,即得膜剂。
3.4含有组合物的软膏剂的制备
处方:PVPI1 10g、PVAA5 2g、硬脂酸120g、单硬脂酸甘油酯35g、凡士林10g、羊毛脂50g、液状石蜡60g、羟苯乙酯1.5g、三乙醇胺4g、甘油50g、加蒸馏水至1000g。
制法:取处方用量的硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、凡士林、液状石蜡、羊毛脂,在水浴上加热至70~80℃使熔化(油相);另取处方用量的PVPI1、PVAA5、羟苯乙酯、三乙醇胺、甘油加入蒸馏水中溶解,加热至相同温度(水相),搅拌下将水相缓缓加入油相中,直到乳化完全,放冷即得软膏剂。
4膜剂治疗兔白色念珠菌性阴道炎的疗效研究
采用阮琪琪等人(中国超声医学杂志,2018,34(11):1042-1044.)所披露的方法考察了制剂制备实施例3.3制备得到的膜剂对兔白色念珠菌阴道炎的治疗效果,结果如表10所示。
表10.各组药物处理7小时后的真菌存活率
组别 | 真菌存活率 |
阳性对照组 | 122.36% |
膜剂(25mg)处理组 | 25.45% |
表10表示,本发明的具有协同抗真菌作用的组合物制备的膜剂,对阴道炎起到良好的治疗效果。
上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种抗真菌组合物,其特征在于,所述组合物包括聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯,所述聚维酮碘中聚乙烯吡咯烷酮的分子量为5-1130kDa,所述聚乙烯醇醋酸酯的分子量为13-186kDa;
所述聚维酮碘中的有效碘含量为9.0-11.9%;
所述组合物中聚维酮碘与聚乙烯醇醋酸酯的质量比为2-10:1;
所述的真菌为近平滑念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、烟曲霉菌、黑曲霉菌和黄曲霉菌中的一种或多种。
2.一种权利要求1所述的组合物的药物制剂,其特征在于,所述的药物制剂为外用制剂。
3.根据权利要求2所述的药物制剂,其特征在于,所述药物制剂的剂型选自栓剂、凝胶剂、乳膏剂、膜剂中的任一种。
4.根据权利要求2所述的药物制剂,其特征在于,所述的外用制剂选自皮肤给药外用制剂、直肠给药外用制剂或阴道给药外用制剂。
5.权利要求1所述的组合物或权利要求2-4任一项所述的药物制剂在制备治疗由近平滑念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、烟曲霉菌、黑曲霉菌、黄曲霉菌中的一种或多种导致的真菌感染性疾病的药物中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述的真菌感染性疾病为由近平滑念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、烟曲霉菌、黑曲霉菌、黄曲霉菌中的一种或多种感染导致的真菌性阴道炎。
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