CN111388462B - 一种具有降血糖作用的组合物及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有降血糖作用的组合物及应用，属于医药技术领域。本发明具有降血糖作用的组合物，是由橙皮素和香叶木素按照2∶10～8∶10的质量浓度比组成，优选的，所述橙皮素和香叶木素的质量浓度比为3∶10～8∶10。本发明的橙皮素和香叶木素组合物具有明显的抑制α‑葡萄糖苷酶协同增效作用，其效果优于单独使用所述黄酮化合物，且可以减少药物使用的剂量，降低耐药的发生；在制备治疗糖尿病的药物、保健品或食品中具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种具有降血糖作用的组合物及应用。
背景技术
随着工业化、城镇化、人口老龄化发展及生态环境、生活行为方式和膳食结构变化，糖尿病已成为是危害全球人类健康的主要慢性疾病之一。其显著特征是较高的血糖水平以及脂质、蛋白和碳水化合物的代谢异常，临床上表现为多食、多饮、多尿及消瘦等“三多一少”症状。研究表明，α-葡萄糖苷酶抑制剂能抑制小肠绒毛黏膜细胞刷状缘上α-葡萄糖苷酶的活性，通过阻断碳水化合物的消化吸收来达到控制餐后血糖过高的目的。此外，已经用于临床实践降血糖的药物如阿卡波糖、伏格列波糖和米格列波糖，持续使用会造成一些副作用。黄酮类化合物广泛存在于水果、蔬菜、茶叶和药材等植物中，是日常饮食中主要存在的酚类物质之一。研究表明，黄酮类化合物具有多种生物活性如抗氧化、降血糖、抗炎、抗菌、抗癌、预防心血管、保护肝脏等方面。
近年来，以黄酮类化合物为先导化合物，作用于α-葡萄糖苷酶靶点，通过活性筛选可以得到一些具有降血糖功能的黄酮类化合物。Zhang等通过体外酶反应系统研究发现，黄烷类化合物儿茶素和表儿茶素对α-葡萄糖苷酶均表现出良好的抑制活性，其IC50值分别为1.12±0.03μM和0.95±0.02μM，进一步通过酶反应动力学研究发现两者为竞争性抑制剂，Ki分别为1.47±0.02×10-5M和2.04±0.03×10-5M(Zhang L L,Han L,Yang S Y,etal.The mechanism of interactions between flavan-3-ols againstα-glucosidaseand their in vivo antihyperglycemic effects.Bioorganic Chemistry,2019,85:364-372)。Peng等发现山柰酚对α-葡萄糖苷酶表现出显著的抑制活性，其IC50值为1.16μmol/L，通过荧光光谱、圆二色谱和傅里叶变换红外光谱分析发现山奈酚主要通过氢键和范德华力作用与α-葡萄糖苷酶形成紧密结合，从而改变α-葡萄糖苷酶的三维构象(Peng X,Zhang G,Liao Y,Gong D.Inhibitory kinetics and mechanism of kaempferol onα-glucosidase.Food Chemistry,2016,190:207-215)。
目前，针对α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究大多集中在单一化合物，持续使用会产生一定副作用和耐受性，而活性分子间的协同增效作用报道尚少。Chou和Talalay于80年代初对药物协同作用(drug synergism)进行了详细的定义，并推荐使用联合用药指数(Combination Index,CI)来描述药物协同作用的强弱：CI<1代表药物之间具有协同作用，联合用药能够增强各单体药物的疗效，CI值越小协同作用越强；CI＝1代表药物之间具有加合作用，联合用药结果只是各单体药物疗效的线性叠加；CI>1代表药物之间具有拮抗作用，联合用药反而会降低各自的疗效。因此，研究黄酮类化合物联合用药抑制α-葡萄糖苷酶，提高降血糖活性对于提高人类健康具有重要意义。
发明内容
针对现有技术中存在的单一天然活性成分降血糖效果有限、用量高的问题，本发明的目的在于提供一种具有降血糖活性的组合物，所述组合物的有效成分为橙皮素和香叶木素；该组合物具有协同增效抑制α-葡萄糖苷酶活性，在制备治疗糖尿病的药物中具有广泛的应用前景。
为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种具有降血糖作用的组合物，是由橙皮素和香叶木素按照2∶10～8∶10的质量浓度比组成。
在上述方案的基础上，所述橙皮素和香叶木素的质量浓度比为3∶10～8∶10，进一步优选的为3∶10或6∶10。
上述组合物在制备具有降血糖作用的药物中的应用。
在上述方案的基础上，所述的降血糖作用为通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性，阻断碳水化合物的消化吸收来达到控制餐后血糖过高的目的。
一种具有降血糖作用的药物，其有效成分包含橙皮素和香叶木素；所述橙皮素和香叶木素的质量浓度比为3∶10～8∶10。
在上述所限定的质量浓度比的范围内，橙皮素和香叶木素组合物取得协同增效的技术效果。
本发明中的药物中可包含与药学中可接受的载体、溶剂、稀释剂、赋形剂和其他介质混合，可以按需求不同制备成粉剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂、口服液或片剂。
本发明技术方案的优点
本发明的橙皮素和香叶木素组合物具有明显的抑制α-葡萄糖苷酶协同增效作用，其效果优于单独使用所述黄酮化合物，且可以减少药物使用的剂量，降低耐药的发生。通过体外α-葡萄糖苷酶的抑制试验，运用Chou-Talalay法，证明了本发明的橙皮素和香叶木素组合物对α-葡萄糖苷酶具有明显的协同效应，在50％(GI50)、75％(GI75)和90％(GI90)抑制率时的CI值均小于0.8，并且，在高抑制率时药物之间的协同作用强度要普遍高于低抑制率时的强度。
附图说明
图1为橙皮素+香叶木素(3∶10)组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线图；
图2为橙皮素+香叶木素(6∶10)组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线图；
图3为橙皮素+香叶木素(8∶10)组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线图；
图4为橙皮素+香叶木素(2∶10)组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线图；
图5为橙皮素+香叶木素(3∶10)组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势图；
图6为橙皮素+香叶木素(6∶10)组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势图；
图7为橙皮素+香叶木素(8∶10)组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势图。
具体实施方式
在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
下面结合具体实施例，并参照数据进一步详细的描述本发明。以下实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
橙皮素(Hesperetin)，分子式为C16H14O6；分子量：302.29；CAS登录号：520-33-2，结构式为：
香叶木素(Diosmetin)，分子式C16H12O6；分子量：300.26；CAS登录号：520-34-3，结构式为：
实施例1
一种具有降血糖作用的组合物，其有效成分为橙皮素和香叶木素；所述组合物中橙皮素和香叶木素的质量浓度比为3∶10。
橙皮素和香叶木素质量浓度比为3∶10时体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验
1.1试剂：α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,Sigma,750U)，4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG,TOKYO Chemica Industry Co.,LTD)，阿卡波糖(Acarbose，TOKYO ChemicaIndustry Co.,LTD)，科罗索酸，Na2HPO4，NaH2PO4。
实验仪器：酶标仪TECAN infinite M200 PRO(Teacan Group Ltd.,Swizerland)。
1.2实验步骤：
1.2.1配置药物溶液：先将橙皮素、香叶木素、阿卡波糖和科罗索酸用二甲基亚砜(DMSO)配置成为10mg/mL的母液，用超纯水、Na2HPO4和NaH2PO4配制67mmol/mL的磷酸缓冲液(PBS，pH＝6.8)，用PBS配制5mmol/mL的pNPG溶液，用PBS配制0.25U/mLα-葡萄糖苷酶。
1.2.2操作方法：
不同浓度梯度的样品溶液的制备：将橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为3∶10的组合物、科罗索酸和阿卡波糖分别用PBS进行梯度稀释，其中：
橙皮素的稀释浓度梯度为30μg/mL、15μg/mL、7.5μg/mL、3.75μg/mL、1.875μg/mL；
香叶木素的稀释浓度梯度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL；
组合物的稀释浓度梯度为130μg/mL、65μg/mL、32.5μg/mL、16.25μg/mL、8.125μg/mL；
阿卡波糖的稀释浓度梯度为1000μg/mL、500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL；
科罗索酸的稀释浓度梯度为50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL、3.125μg/mL。
将上述橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为3∶10的组合物的梯度浓度溶液作为样品溶液，进行检测。科罗索酸和阿卡波糖的梯度浓度溶液作为阳性对照组进行检测。加入40μL的α-葡萄糖苷酶(0.25U/mL)，在37℃下反应15min，然后加入60μL 5mmol/mL底物对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)；放置37℃下反应15min后，酶标仪在405nm波长处测定。
各组操作如下：
样品组：100μL样品溶液+40μL酶+60μLpNPG；
样品空白组：100μL样品溶液+40μLPBS+60μLpNPG；
阳性对照组：100μL科罗索酸或阿卡波糖+40μL酶+60μLpNPG；
阴性对照组：2μLDMSO+98μL PBS+40μL酶+60μLpNPG；
空白组：2μL DMSO+98μLPBS+40μLPBS+60μLpNPG。
1.3计算公式：抑制率＝[1-(OD样品–OD样品空白)/(OD阴性对照-OD空白)]×100％
其中测试的化合物的半抑制浓度IC50采用SPSS 20.0统计，根据软件CompuSyn计算出CI和DRI值对药物间的协同作用做出评价。
1.4实验结果
橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为3∶10的组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线如图1所示，橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为3∶10的组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势如图5所示。
表1橙皮素、香叶木素及其组合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表1结果可知，橙皮素单独使用时对α-葡萄糖苷酶的IC50为31.03±0.51μg/mL，香叶木素的IC50为93.4±2.01μg/mL，对照阿卡波糖和科罗索酸对α-葡萄糖苷酶的IC50分别为324.85±8.56和12.6±0.12μg/mL，橙皮素和香叶木素联合使用组合物的IC50为52.51±3.15μg/mL；上述测定结果表明联合用药时组合物大大降低了单独用药时的剂量，且提高了抑制活性。
表2橙皮素和香叶木素联用时的联合用药系数(CI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表2结果可知，橙皮素和香叶木素(质量浓度比为3∶10)联用时的联合用药系数CI均小于1，表现出了协同作用，其中在GI75和GI90均小于0.35，表现出强协同作用，联合用药指数均值(CIavg)为0.34。
表3橙皮素和香叶木素联用时的剂量降低系数(DRI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表3结果可知，橙皮素和香叶木素组合在GI90时，橙皮素和香叶木素的DRI值分别为5.62±0.05和49.61±0.03，这意味着：对α-葡萄糖苷酶的抑制率为90％时，橙皮素和香叶木素联合用药组中橙皮素和香叶木素的剂量分别是单独用药组中橙皮素和香叶木素剂量的约1/5和约1/49，联合用药组大大降低了用药剂量，而且还表现了协同增效作用。
实施例2
一种具有降血糖作用的组合物，其有效成分为橙皮素和香叶木素；所述组合物中橙皮素和香叶木素的质量浓度比为6∶10。
橙皮素和香叶木素质量浓度比为6∶10时体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验
2.1试剂：α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,Sigma,750U)，4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG,TOKYO Chemica Industry Co.,LTD)，阿卡波糖(Acarbose，TOKYO ChemicaIndustry Co.,LTD)，科罗索酸，Na2HPO4，NaH2PO4。
实验仪器：酶标仪TECAN infinite M200 PRO(Teacan Group Ltd.,Swizerland)。
2.2实验步骤：
2.2.1配置药物溶液：先将橙皮素、香叶木素、阿卡波糖和科罗索酸用二甲基亚砜(DMSO)配置成为10mg/mL的母液，用超纯水、Na2HPO4和NaH2PO4配制67mmol/mL的磷酸缓冲液(PBS，pH＝6.8)，用PBS配制5mmol/mL的pNPG溶液，用PBS配制0.25U/mLα-葡萄糖苷酶。
2.2.2操作方法：
不同浓度梯度的样品溶液的制备：将橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为6∶10的组合物、科罗索酸和阿卡波糖分别用PBS进行梯度稀释，其中：
橙皮素的稀释浓度梯度为60μg/mL、30μg/mL、15μg/mL、7.5μg/mL、3.75μg/mL；
香叶木素的稀释浓度梯度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL；
组合物的稀释浓度梯度为160μg/mL、80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL；
阿卡波糖的稀释浓度梯度为1000μg/mL、500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL；
科罗索酸的稀释浓度梯度为50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL、3.125μg/mL。将上述橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为6∶10的组合物的梯度浓度溶液作为样品溶液，进行检测。科罗索酸和阿卡波糖的梯度浓度溶液作为阳性对照组进行检测。加入40μL的α-葡萄糖苷酶(0.25U/mL)，在37℃下反应15min，然后加入60μL 5mmol/mL底物对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)；放置37℃下反应15min后，酶标仪在405nm波长处测定。
各组操作如下：
样品组：100μL样品溶液+40μL酶+60μLpNPG；
样品空白组：100μL样品溶液+40μLPBS+60μLpNPG；
阳性对照组：100μL科罗索酸或阿卡波糖+40μL酶+60μLpNPG；
阴性对照组：2μLDMSO+98μL PBS+40μL酶+60μLpNPG；
空白组：2μL DMSO+98μLPBS+40μLPBS+60μLpNPG。
2.3计算公式：抑制率＝[1-(OD样品–OD样品空白)/(OD阴性对照-OD空白)]×100％
其中测试的化合物的半抑制浓度IC50采用SPSS 20.0统计，根据软件CompuSyn计算出CI和DRI值对药物间的协同作用做出评价。
2.4实验结果
橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为6∶10的组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线如图2所示，橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为6∶10的组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势如图6所示。
表4橙皮素、香叶木素及其组合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表4结果可知，橙皮素单独使用时对α-葡萄糖苷酶的IC50为31.03±0.51μg/mL，香叶木素的IC50为93.4±2.01μg/mL，对照阿卡波糖和科罗索酸对α-葡萄糖苷酶的IC50分别为324.85±8.56和12.6±0.12μg/mL，橙皮素和香叶木素联合使用组合物的IC50为50.65±3.15μg/mL；结果表明联合用药时组合物大大降低了单独用药时的剂量，且提高了抑制活性。
表5橙皮素和香叶木素联用时的联合用药系数(CI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表5结果可知，橙皮素和香叶木素(6∶10)联用时的联合用药系数CI均小于1，表现出了协同作用，联合用药指数均值(CIavg)为0.60。
表6橙皮素和香叶木素联用时的剂量降低系数(DRI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表6结果可知，橙皮素和香叶木素组合(6∶10)在GI90时，橙皮素的DRI值为1.94±0.02，而香叶木素的DRI值为34.75±0.12，这意味着：对α-葡萄糖苷酶的抑制率为90％时，橙皮素和香叶木素联合用药组中的剂量分别是单独用药组中剂量的约1/2和1/34，联合用药组降低了用药剂量，而且还表现了协同增效作用。
实施例3
一种具有降血糖作用的组合物，其有效成分为橙皮素和香叶木素；所述组合物中橙皮素和香叶木素的质量浓度比为8∶10。
橙皮素和香叶木素质量浓度比为8∶10时体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验
3.1试剂：α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,Sigma,750U)，4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG,TOKYO Chemica Industry Co.,LTD)，阿卡波糖(Acarbose，TOKYO ChemicaIndustry Co.,LTD)，科罗索酸，Na2HPO4，NaH2PO4。
实验仪器：酶标仪TECAN infinite M200 PRO(Teacan Group Ltd.,Swizerland)。
3.2实验步骤：
3.2.1配置药物溶液：先将橙皮素、香叶木素、阿卡波糖和科罗索酸用二甲基亚砜(DMSO)配置成为10mg/mL的母液，用超纯水、Na2HPO4和NaH2PO4配制67mmol/mL的磷酸缓冲液(PBS，pH＝6.8)，用PBS配制5mmol/mL的pNPG溶液，用PBS配制0.25U/mLα-葡萄糖苷酶。
3.2.2操作方法：
不同浓度梯度的样品溶液的制备：将橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为8∶10的组合物、科罗索酸和阿卡波糖用PBS进行梯度稀释，其中：
橙皮素的稀释浓度梯度为80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL；
香叶木素的稀释浓度梯度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL；
组合物的稀释浓度梯度为180μg/mL、90μg/mL、45μg/mL、22.5μg/mL、11.25μg/mL；
阿卡波糖的稀释浓度梯度为1000μg/mL、500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL；
科罗索酸的稀释浓度梯度为50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL、3.125μg/mL。
将上述橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为8∶10的组合物的梯度浓度溶液作为样品溶液，进行检测。科罗索酸和阿卡波糖的梯度浓度溶液作为阳性对照组进行检测。加入40μL的α-葡萄糖苷酶(0.25U/mL)，在37℃下反应15min，然后加入60μL 5mmol/mL底物对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)；放置37℃下反应15min后，酶标仪在405nm波长处测定。
各组操作如下：
样品组：100μL样品溶液+40μL酶+60μLpNPG；
样品空白组：100μL样品溶液+40μLPBS+60μLpNPG；
阳性对照组：100μL科罗索酸或阿卡波糖+40μL酶+60μLpNPG；
阴性对照组：2μLDMSO+98μL PBS+40μL酶+60μLpNPG；
空白组：2μL DMSO+98μLPBS+40μLPBS+60μLpNPG。
3.3计算公式：抑制率＝[1-(OD样品–OD样品空白)/(OD阴性对照-OD空白)]×100％
其中测试的化合物的半抑制浓度IC50采用SPSS 20.0统计，根据软件CompuSyn计算出CI和DRI值对药物间的协同作用做出评价。
3.4实验结果
橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为8∶10的组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线如图3所示，橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为8∶10的组合物抑制α-葡萄糖苷酶的Fa-CI趋势如图7所示。
表7橙皮素、香叶木素及其组合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表7结果可知，橙皮素单独使用时对α-葡萄糖苷酶的IC50为31.03±0.51μg/mL，香叶木素的IC50为93.4±2.01μg/mL，对照阿卡波糖和科罗索酸对α-葡萄糖苷酶的IC50分别为324.85±8.56和12.6±0.12μg/mL，橙皮素和香叶木素联合使用组合物(质量浓度比为8∶10)的IC50为65.65±3.15μg/mL；结果表明质量浓度比为8∶10橙皮素和香叶木素联合用药时降低了香叶木素单独用药时的剂量，且提高了抑制活性。
表8橙皮素和香叶木素联用时的联合用药系数(CI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表8结果可知，橙皮素和香叶木素(8∶10)联用时的联合用药指数均值(CIavg)为0.99，表现出了弱协同作用。
表9橙皮素和香叶木素联用时的剂量降低系数(DRI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表9结果可知，橙皮素和香叶木素组合(8∶10)在GI90时，橙皮素的DRI值无明显变化，而香叶木素的DRI值为26.51±0.12，这意味着：对α-葡萄糖苷酶的抑制率为90％时，橙皮素和香叶木素联合用药组中香叶木素的剂量是单独用药组中香叶木素剂量的约1/26，联合用药组降低了用药剂量，而且还表现了协同增效作用。
实施例4
一种具有降血糖作用的组合物，其有效成分为橙皮素和香叶木素；所述组合物中橙皮素和香叶木素的质量浓度比为2∶10。
橙皮素和香叶木素质量浓度比为2∶10时体外抑制α-葡萄糖苷酶活性试验
4.1试剂：α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,Sigma,750U)，4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG,TOKYO Chemica Industry Co.,LTD)，阿卡波糖(Acarbose，TOKYO ChemicaIndustry Co.,LTD)，科罗索酸，Na2HPO4，NaH2PO4。
实验仪器：酶标仪TECAN infinite M200 PRO(Teacan Group Ltd.,Swizerland)。
4.2实验步骤：
4.2.1配置药物溶液：先将橙皮素、香叶木素、阿卡波糖和科罗索酸用二甲基亚砜(DMSO)配置成为10mg/mL的母液，用超纯水、Na2HPO4和NaH2PO4配制67mmol/mL的磷酸缓冲液(PBS，pH＝6.8)，用PBS配制5mmol/mL的pNPG溶液，用PBS配制0.25U/mLα-葡萄糖苷酶。
4.2.2操作方法：
不同浓度梯度的样品溶液的制备：将橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为2∶10的组合物、科罗索酸和阿卡波糖用PBS进行梯度稀释，其中：
橙皮素的稀释浓度梯度为20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL；
香叶木素的稀释浓度梯度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL；
组合物的稀释浓度梯度为120μg/mL、60μg/mL、30μg/mL、15μg/mL、7.5μg/mL；
阿卡波糖的稀释浓度梯度为1000μg/mL、500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL；
科罗索酸的稀释浓度梯度为50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.25μg/mL、3.125μg/mL。
将上述橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为2∶10的组合物的梯度浓度溶液作为样品溶液，进行检测。科罗索酸和阿卡波糖的梯度浓度溶液作为阳性对照组进行检测。加入40μL的α-葡萄糖苷酶(0.25U/mL)，在37℃下反应15min，然后加入60μL 5mmol/mL底物对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)；放置37℃下反应15min后，酶标仪在405nm波长处测定。
各组操作如下：
样品组：100μL样品溶液+40μL酶+60μLpNPG；
样品空白组：100μL样品溶液+40μLPBS+60μLpNPG；
阳性对照组：2μL科罗索酸或阿卡波糖+98μLPBS+40μL酶+60μLpNPG；
阴性对照组：2μLDMSO+98μL PBS+40μL酶+60μLpNPG；
空白组：2μL DMSO+98μLPBS+40μLPBS+60μLpNPG。
4.3计算公式：抑制率＝[1-(OD样品–OD样品空白)/(OD阴性对照-OD空白)]×100％
其中测试的化合物的半抑制浓度IC50采用SPSS 20.0统计，根据软件CompuSyn计算出CI和DRI值对药物间的协同作用做出评价。
4.4实验结果
橙皮素、香叶木素及两者质量浓度比为2∶10的组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制曲线如图4所示。
表10橙皮素、香叶木素及其组合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表10结果可知，橙皮素单独使用时对α-葡萄糖苷酶的IC50为31.03±0.51μg/mL，香叶木素的IC50为93.4±2.01μg/mL，对照阿卡波糖和科罗索酸对α-葡萄糖苷酶的IC50分别为324.85±8.56和12.6±0.12μg/mL，橙皮素和香叶木素联合使用组合物的IC50为130.21±4.68μg/mL；结果表明联合用药时组合物没有降低α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值，反而增加了，没有表现出协同作用。
表11橙皮素和香叶木素联用时的联合用药系数(CI)
注：数据源自三次独立实验的结果，表示为平均值±标准差
从表11结果可知，橙皮素和香叶木素(2∶10)联用时的联合用药系数CI均大于1，表现出了拮抗作用。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (4)
1.一种具有降血糖作用的组合物，其特征在于，是由橙皮素和香叶木素按照3∶10～8∶10的质量浓度比组成。
2.权利要求1所述组合物在制备具有降血糖作用的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，所述的降血糖作用为通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性，阻断碳水化合物的消化吸收来达到控制餐后血糖过高的目的。
4.一种具有降血糖作用的药物，其特征在于，其有效成分包含橙皮素和香叶木素；所述橙皮素和香叶木素的质量浓度比为3∶10～8∶10。
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Citations (3)
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| CN106822087A (zh) * | 2017-01-12 | 2017-06-13 | 西南大学 | 香叶木素在制备治疗ⅱ型糖尿病的药物中的应用 |
| CN106924239A (zh) * | 2017-03-06 | 2017-07-07 | 龚* | 橙皮素用于制备防治糖尿病的药物的用途 |
Non-Patent Citations (2)
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| Inhibition of α-amylase by flavonoids: Structure activity relationship (SAR);Martinez-Gonzalez A.I.等;《Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy》;20180828;第206卷;第437-447页 * |
| Synthesis and a-glucosidase inhibitory activity of chrysin, diosmetin,apigenin, and luteolin derivatives;Ning Cheng等;《Chinese Chemical Letters》;20140522;第25卷;第1094-1098页 * |
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