CN111213658A - 申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物，申嗪霉素和联苯三唑醇复配后作为杀菌剂应用于防治花生叶斑病，属于杀菌剂的复配组合物技术领域。复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇的质量比为1:10～1:20。本发明将申嗪霉素与联苯三唑醇进行复配，经室内外试验，筛选出了复配杀菌剂的最佳配比，增效显著，有利于实现，减少环境污染、有效控制致病菌抗性发生发展。

Description

申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物及其应用
技术领域
本发明涉及一种含有申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物，申嗪霉素和联苯三唑醇复配后作为杀菌剂应用于防治花生叶斑病，属于杀菌剂的复配组合物技术领域。
背景技术
花生是世界上经济作物和油料作物重要品种之一，同时也是重要出口农产品之一。我国花生产业的健康发展在农民增收、保障食用油安全、提高国民身体健康素质等方面具有举足轻重的地位。花生叶斑病是叶部褐斑病、黑斑病和网斑病的总称，病害能混合发生于同一植株甚至同一叶片上，在花生产地普遍发生，且有逐年加重趋势。该病侵染叶片后，形成自下部老叶至上部新叶的病斑，严重发生时导致叶片提前掉落，降低光合作用和果实产量，受害花生可减产20％以上。当前，防控花生叶斑病仍以化学防控为重要措施，随着化学农药使用量的加大和施用次数的增加，不仅导致防治成本的提高，还造成抗药性发生发展、花生农药残留高和环境污染，间接地影响人类的身体健康。选用植物源杀菌剂以及合理田间桶混化学农药是解决当前农药不科学合理使用的重要途径。
申嗪霉素(phenazino-1-carboxylic acid)是上海交通大学生命科学技术学院与上海农乐生物制品股份有限公司自主研发创制的一种新型微生物源农药，具有高效、安全、广谱等特点，其主要成分是甜瓜根际促生菌M18产生的次级代谢产物吩嗪-1-羧酸，属于芳香杂环族吩嗪类化合物，能有效控制多种稻麦果蔬等作物真菌性、细菌性和线虫病害，并同时具有促进植物的生长作用。但申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物在防治花生叶斑病方面还未见报道。
联苯三唑醇(bitertanol)属于三唑类杀菌剂，是甾醇脱甲基化抑制剂。化学名为(1RS,2RS)-1-(双苯-4-氧基)-3,3-二甲基-1-1(1,2,4-三唑-1-基)酮-2-醇；分子式C20H23N3O2，分子量337.4；原药为白色结晶体，熔点118℃，蒸汽压小于 1mPa(20℃)，溶解度(20℃)：水5mg/L，二氯甲烷为100～200g/L，甲苯为 10～30g/L。联苯三唑醇是广谱内吸杀菌剂，主要用来防治由黑星菌属和核盘菌属菌引起的果树病害，以及球腔菌属菌引起的香蕉病害和花生叶斑病。联苯三唑醇被广泛应用于粮食作物以及果蔬等种植过程，而且它的使用量会逐步增加，由其残留引发的食品安全问题受到人们的广泛关注。在粮食及果蔬加工产品中这种杀菌剂的超标残留会给人体内分泌系统带来极大的伤害。
发明内容
本发明是在已有技术的基础上，通过深入研究申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物在农业领域中的应用，尤其是针对花生叶斑病防治研究而完成的。目的在于提供防治花生叶斑病的申嗪霉素、联苯三唑醇单剂及其复配组合物。
本发明提供了防治花生叶斑病的申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物，复配组合物中申嗪霉素：联苯三唑醇1:10有相加作用，尤其1:20具有增效作用，对花生褐斑、黑斑、网斑病菌的增效系数分别为1.80、1.78、1.88，为最佳复配比例。
本发明的申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物，其特殊之处在于复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇的质量比为1:10～1:20；
进一步地，所述复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇的质量比为1:20；
进一步地，所述申嗪霉素和联苯三唑醇在复配组合物中的总质量占复配组合物的21％；
本发明还提供申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物的应用，其特殊之处在于，采用上述的复配组合物，在防治花生叶斑病中的应用。
本发明的申嗪霉素和联苯三唑醇的复配组合物，申嗪霉素、联苯三唑醇两种杀菌剂对花生叶斑病菌表现出良好的抑制作用，申嗪霉素和联苯三唑醇复配应用防治花生叶斑病表现出明显的增效作用。具有以下几个优势：
1、具有增效作用。室内毒力测定结果表明，申嗪霉素、联苯三唑醇对花生叶斑病菌两者在1:10至1:20范围内呈现增效作用，其中以1:20的增效作用最为显著，对花生褐斑、黑斑、网斑病菌的增效系数分别达1.80、1.78、1.88。
2、最佳配比田间桶混防效突出，且减少了制剂用量。我院制成21％申嗪霉素·联苯三唑醇复配组合物60、80、100mL/667m2在田间防治花生叶斑病的药效试验中表现突出，优于单剂、对照药剂的防治效果。同时，大幅减少药剂有效成分用量。
3、高安全性。申嗪霉素、联苯三唑醇对人畜毒性低，我院制得的复配组合物低于市场单剂有效成分的含量，对作物、环境和食用者更为安全。
4、降低了致病菌抗药性产生的风险。如优势2、3所述，复配组合物申嗪霉素和联苯三唑醇的用量明显低于市销单剂产品，且田间使用量明显减少，这可大幅降低花生叶斑病致病菌对这两种杀菌剂的选择压力。此外，申嗪霉素、联苯三唑醇作用机理不同，桶混使用更不易使致病菌产生抗药性。
具体实施方式
本发明用以下具体实例进行详细说明，但绝非对本发明的限制。以下所述仅为本发明较好的实施例，仅仅用于解释本发明，并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。在本发明的基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的，凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替代和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。下述实施例所有配比中百分比均为质量百分比。
实施例1
室内毒力测定与复配比例筛选
1.1供试药剂
95％申嗪霉素原药，上海农乐生物制品股份有限公司产品。
97％联苯三唑醇原药，江苏剑牌农化股份有限公司产品。
1.2供试菌株
试验靶标为花生褐斑病菌(Cercospora arachidicola)、黑斑病菌(Cercosporapersonata)、网斑病菌(Phoma arachidicola)。
病菌菌株样本自田间病叶片上分离获得，培养纯化得到的第一代菌株，4℃冰箱内保存备用。
1.3仪器设备
主要有电子天平、超净工作台、生物培养箱、培养皿、微量移液器等。
1.4实验方法
采用FAO推荐的菌体生长速率法(Mycelium growth rate test)。
1.4.1药剂复配
表1申嗪霉素和联苯三唑醇复配比例
Figure DEST_PATH_IMAGE001
表2复配药剂稀释浓度梯度
Figure DEST_PATH_IMAGE002
1.4.2含药平板的制备
按照1.4.1设定的药剂浓度梯度，将药剂加入定量溶化的PDA培养基中，制成含药平板，以不含药平板为空白对照，每浓度重复3次。
1.4.3接菌培养
用直径0.6cm打孔器沿培养好的菌落边缘打取菌盘，用消毒接种针将菌盘反转移植到平板上，置于25℃条件下恒温培养5天。
1.4.4结果调查
以直尺交叉测量法测量菌落扩展直径，与不施药对照菌盘扩展直径相比，计算出药剂对菌丝生长的抑制率。
Figure BDA0002398938060000041
1.5统计分析
根据各药剂浓度对数值及对应的菌丝生长抑制率几率值作回归分析，计算各药剂毒力回归方程、相关系数(r)和EC50。
进行药剂联合毒力测定时，根据Wadley法计算复配组合物的增效系数(SR)，评价复配组合物的联合作用类型。根据增效系数(SR)来评价药剂复配的增效作用，即SR<0.5为拮抗作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用，SR>1.5为增效作用。增效系数(SR)按式(1)、(2)计算：
Figure BDA0002398938060000042
式中：
X1----复配组合物EC50理论值，单位为mg/L；
PA----复配组合物中A的百分含量，单位为百分率(％)；
PB----复配组合物中B的百分含量，单位为百分率(％)；
A----A的EC50值，单位为mg/L；
B----B的EC50值，单位为mg/L。
Figure BDA0002398938060000043
式中：
SR----复配组合物的增效系数；
X1----复配组合物EC50理论值，单位为mg/L；
X2----复配组合物EC50实测值，单位为mg/L。
1.6结果分析
室内最佳复配比例实验结果表明，申嗪霉素、联苯三唑醇两者1:10、1:20 对花生褐斑、黑斑、网斑病菌具有增效作用，其中1:20的增效作用最为显著，增效系数分别为1.80、1.80、1.88，为最佳复配比例。
表3申嗪霉素和联苯三唑醇抑制花生褐斑病菌最佳复配比例筛选
Figure DEST_PATH_IMAGE003
表4申嗪霉素和联苯三唑醇抑制花生黑斑病菌最佳复配比例筛选
Figure DEST_PATH_IMAGE004
表5申嗪霉素和联苯三唑醇抑制花生网斑病菌最佳复配比例筛选
Figure DEST_PATH_IMAGE005
实施例2
田间小区试验
根据室内复配比例筛选实验筛选出申嗪霉素:联苯三唑醇＝1:20为最佳配比，我们配制了21％申嗪霉素·联苯三唑醇复配组合物。按照农业部农药检定所主编的《农药田间药效试验准则(二)》第85部分设计21％申嗪霉素·联苯三唑醇复配组合物对花生叶斑病的田间药效试验。
2.1供试药剂
1％申嗪霉素悬浮剂100mL/667m2，上海农乐生物制品股份有限公司。
25％联苯三唑醇可湿性粉剂66g/667m2，江苏剑牌农化股份有限公司；
21％申嗪霉素·联苯三唑醇60、80、100mL/667m2，烟台农科院配制。
2.2对照药剂
500g/L多菌灵悬浮剂100m/667m2，江苏龙灯化学有限公司产品。
2.3小区设计
试验共设7个处理，每处理4个重复，共设28个小区，每小区50m2。各小区随机排列。施药器械采用MATABI SuperGreen 16型背负式喷雾器，喷孔直径0.8mm，工作压力2.0巴。喷雾时使叶片正反面均匀着药，滴水为止。
2.4调查方法
0级：无病；
1级：病斑面积占整片叶面积的5％以下；
3级：病斑面积占整片叶面积的6％-25％；
5级：病斑面积占整片叶面积的26％-50％；
7级：病斑面积占整片叶面积的51％-75％；
9级：病斑面积占整片叶面积的76％以上。
2.5药效计算方法
Figure BDA0002398938060000061
Figure BDA0002398938060000062
Figure BDA0002398938060000063
2.6试验结果
21％申嗪霉素·联苯三唑醇复配组合物60、80、100mg/667m2防效分别为90.80％、92.40％、94.41％，显著高于1％申嗪霉素悬浮剂100mL/667m2和25％联苯三唑醇可湿性粉剂66mL/667m2的防效；单剂和复配剂的防效显著优于对照药剂500g/L多菌灵悬浮剂100mL/667m2的防效。
表6 21％申嗪霉素·联苯三唑醇复配组合物防治花生叶斑病田间药效
Figure DEST_PATH_IMAGE006
实施例3
安全性试验
复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇含量小于市售产品的含量，因此其对人畜的毒性与作物的安全性是符合要求的。复配杀菌剂经认定机构毒性试验结果表明属于微毒类农药：
大鼠急性经口毒性LD50♂>5000mg/kg，♀>5000mg/kg；
大鼠急性经皮毒性LD50♂>20000mg/kg，♀>20000mg/kg。

Claims (4)

1.申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物，其特征在于复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇的质量比为1:10～1:20。
2.按照权利要求1所述的申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物，其特征在于所述复配组合物中申嗪霉素和联苯三唑醇的质量比为1:20。
3.按照权利要求1所述的申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物，其特征在于所述申嗪霉素和联苯三唑醇在复配组合物中的总质量占复配组合物的21％。
4.按照权利要求1-3所述的申嗪霉素和联苯三唑醇复配组合物应用于防治花生叶斑病。
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