CN111212838A

CN111212838A - 氘代非唑奈坦

Info

Publication number: CN111212838A
Application number: CN201880046709.1A
Authority: CN
Inventors: 哈米德·霍维达
Original assignee: Euroscreen SA
Current assignee: Ogeda SA
Priority date: 2017-07-12
Filing date: 2018-07-12
Publication date: 2020-05-29
Anticipated expiration: 2038-07-12
Also published as: US20200270254A1; WO2019012033A1; US11078203B2; CN111212838B; EP3428168A1

Abstract

本发明涉及作为NK‑3拮抗剂的氘代非唑奈坦(R)‑(4‑氟苯基)‑(8‑甲基‑3‑(3甲基‑d3)‑1,2,4‑噻二唑‑5‑基)‑5,6‑二氢‑[1,2,4]三唑并[4,3‑a]吡嗪‑7(8H)‑基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

Description

氘代非唑奈坦

发明领域

本发明涉及氘代非唑奈坦(Fezolinetant)，包括其药学上可接受的盐和溶剂化物，作为神经激肽-3(NK-3)受体的选择性拮抗剂，并可用作治疗化合物，特别是在治疗和/或预防性激素依赖性疾病方面的治疗化合物。

发明背景

非唑奈坦已开发作为NK-3受体的选择性拮抗剂，并可用作治疗化合物，特别是在治疗和/或预防性激素依赖性疾病方面的治疗化合物。非唑奈坦对应于(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-甲基-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮，在WO2014/154895中进行了描述。

药物-药物相互作用是最常见的药物相互作用类型。它们会降低药物的疗效，可能导致严重的意外副作用，甚至增加某种药物的血药浓度和可能的毒性。

药物相互作用可能是通过药代动力学相互作用发生的，在此过程中，一种药物会影响另一种药物的吸收、分布、代谢或排泄。关于代谢，应注意的是，药物通常以未改变的药物或代谢产物的形式从体内清除。肝脏中的酶通常是细胞色素P450(CYP)酶，通常负责代谢药物。因此，确定药物的CYP谱与确定其是否会影响CYP的活性以及是否可能导致药物-药物相互作用具有高度相关性。

与药物-药物相互作用最相关的五个CYP是CYP3A4、2C9、2C19、1A2和2D6，其中主要为亚型3A4、2C9和2C19。药物对这些CYP的抑制作用越小，预期的药物相互作用就越小。

因此，重要的是要提供具有最安全CYP谱的药物，以最大程度地减少药物-药物相互作用的潜在风险。

即使非唑奈坦具有良好的CYP谱，提供进一步改善的CYP谱的非唑奈坦类似物对患者而言也很有价值。

申请人以完全出乎意料的方式证明，非唑奈坦的氘化提供了进一步改善的CYP谱，特别是对于亚型CYP 2C9和2C19。这通过氘代形式的(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮得到了证明，以下简称“氘代非唑奈坦”。

重要的是，氘代非唑奈坦保留了非唑奈坦的生物活性及其亲脂性。

氘代非唑奈坦还具有能够改善药物体内半衰期的优点。例如，与非唑奈坦相比，在去势猴子中的半衰期增加了2倍。

因此，本发明包括(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮及其可药用盐和溶剂化物，以及使用该化合物作为NK-3受体拮抗剂的方法。

发明概要

因此，本发明涉及(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

还提供了一种药物组合物，其包含(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。

本发明还涉及一种药物，其包含(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

本发明还涉及(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗和/或预防抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病(包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病)、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽)、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症。

本发明的另一个目的是(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗和/或预防潮热。

本发明的再一个目的是(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用作循环LH水平降低剂。

本发明还提供了如下所述的制备(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物的方法。

本发明还涉及下述式(ii)的中间体化合物。

详细说明

如上所述，本发明涉及(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮(以下简称“氘代非唑奈坦”)：

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

氘代非唑奈坦可以通过本领域技术人员已知的反应以不同方式制备。

本发明还涉及氘代非唑奈坦的制备方法，包括以下步骤：

因此，本发明方法的特征在于，其包括以下步骤：

a)使式(i)的化合物与式(ii)的化合物反应以获得式(iii)的化合物，

其中：

PG表示合适的保护基，例如2,4-二甲氧基苄基(DMB)、4-甲氧基苄基(PMB)、叔丁氧羰基(Boc)、烯丙基、二苯基磷酰胺(DPP)、2-三甲基甲硅烷基乙磺酰基(SES)，优选PG为DMB；

其中PG如上定义；

b)用合适的脱保护剂使式(iii)的化合物脱保护，得到式(iv)的化合物，

c)用式(v)的化合物对式(iv)的化合物进行N-酰化，

从而得到氘代非唑奈坦。

在优选的实施方案中，在本发明的方法中使用的保护基PG是DMB。在这种情况下，优选的合适的脱保护剂是三氟乙酸(TFA)。

根据一个实施方案，可以根据以下合成途径制备式(ii)的中间体：

因此，本发明还涉及制备式(II)的中间体的方法，该方法包括：

1)用N,N'-羰基二咪唑(CDI)活化式(a)的d₃-乙酸，

从而形成活化的酯，然后通过用氨处理形成相应的式(b)的d₃-乙酰胺：

2)在氯羰基磺酰氯存在下，在式(b)的d₃-乙酰胺上闭环，得到式(c)的化合物

3)使式(c)的化合物在氰基甲酸甲酯存在下反应，得到式(d)的化合物

4)使式(d)的化合物在水合肼存在下反应以形成式(ii)的中间体。

如实施例部分中所述的反应方案仅是说明性的，不应解释为氘代非唑奈坦只能使用以下实施例中详述的本发明的合成方法制备。

本发明还涉及氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物作为NK-3受体拮抗剂的用途。

因此，在另一方面，本发明涉及氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物在合成药物活性成分如选择性NK-3受体拮抗剂中的用途。

因此，氘代非唑奈坦可用作药物，特别是用于预防和/或治疗抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病(包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病)、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽)、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症。

本发明还提供一种用于延迟患者的抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病(包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病)、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽)、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症发病的方法，所述方法包括将治疗有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物施用至有需要的患者。

氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防性激素依赖性疾病，包括良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症。

在一个具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防良性前列腺增生(BPH)、子宫内膜异位症、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防子宫内膜异位、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、多囊卵巢综合征(PCOS)和良性前列腺增生(BPH)。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防子宫内膜异位。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防子宫纤维化。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防子宫肌瘤。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防子宫平滑肌瘤。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防多囊卵巢综合征(PCOS)。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防良性前列腺增生(BPH)。

在一个具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防潮热(也称为热潮红)。

本发明还提供了一种用于延迟患者潮热发作的方法，该方法包括向有需要的患者施用药学有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防围绝经期疾病(即“潮热”)、体外受精(IVF)、男性避孕、女性避孕、性犯罪者去势。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防与围绝经期病症、绝经病症和/或绝经后病症有关的潮热。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦特别适用于治疗和/或预防潮热，该潮热是有意降低性激素水平的激素治疗的结果，例如在乳腺癌、子宫癌或前列腺癌中由治疗引起的潮热。

氘代非唑奈坦还可用于治疗妇科疾病和不育症。特别地，本发明提供了降低和/或抑制辅助受孕中的LH波动的方法。

氘代非唑奈坦还可用于引起男性去势并抑制男性的性欲。这在处理男性性犯罪者方面特别有意义。

本发明还提供了氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗和/或预防患者的抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病(包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病)、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽)、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症的药物中的用途。

本发明特别提供了氘代非唑奈坦、其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗和/或预防性激素依赖性疾病，包括良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症的药物中的用途。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防子宫内膜异位、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、多囊卵巢综合征(PCOS)和良性前列腺增生(BPH)的药物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防子宫内膜异位的药物。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防子宫纤维化的药物。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防子宫肌瘤的药物。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防子宫平滑肌瘤的药物。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防多囊卵巢综合征(PCOS)的药物。在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防良性前列腺增生(BPH)的药物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防潮热的药物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防围绝经期疾病(即“潮热”)、体外受精(IVF)、男性避孕、女性避孕、性犯罪者去势的药物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防与围绝经期病症、绝经病症和/或绝经后病症有关的潮热的药物。

在具体的实施方案中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于制备治疗和/或预防潮热的药物，潮热是有意降低性激素水平的激素治疗的结果，例如在乳腺癌、子宫癌或前列腺癌中由治疗引起的潮热。

本发明还提供了氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备药物中的用途，所述药物降低和/或抑制了患者辅助受孕中的LH浪潮(LH-surge)。优选地，患者是温血动物，更优选地是女性。

本发明还提供了氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备药物中的用途，该药物引起男性去势并抑制男性的性欲。这在治疗男性性罪犯方面特别有意义。

本发明还提供了用于治疗和/或预防抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病(包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病)、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病(包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽)、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症的方法，所述方法包括将有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物施用至有需要的患者。

本发明特别提供治疗和/或预防性激素依赖性疾病的方法，性激素依赖性疾病包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症，所述方法包括将有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物施用至有需要的患者。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防子宫内膜异位、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、多囊卵巢综合征(PCOS)和良性前列腺增生(BPH)。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防子宫内膜异位。在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防子宫纤维化。在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防子宫肌瘤。在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防子宫平滑肌瘤。在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防多囊卵巢综合征(PCOS)。在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防良性前列腺增生(BPH)。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防潮热。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防围绝经期病症(即“潮热”)、体外受精(IVF)、男性避孕、女性避孕、性犯罪者去势。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防与围绝经期病症、绝经期病症和/或绝经期后病症有关的潮热。

在具体的实施方案中，本发明的方法用于治疗和/或预防潮热，潮热是有意降低性激素水平的激素治疗的结果，例如在乳腺癌、子宫癌或前列腺癌中由治疗引起的潮热。

本发明还提供了一种用于降低和/或抑制患者辅助受孕中的LH-浪潮的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物。优选地，患者是温血动物，更优选地是女性。

本发明还提供了一种导致男性去势并抑制男性的性欲的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物。这在治疗男性性罪犯方面特别有意义。

根据本发明的另一个特征，提供了一种在需要这种治疗的患者，优选温血动物，甚至更优选人类中调节NK-3受体活性的方法，其包括对所述患者施用有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

根据一个实施方案，氘代非唑奈坦或药学上可接受的盐或溶剂化物可以作为联合疗法的一部分进行施用。因此，包括在本发明的实施方案的范围内的实施方案包括共同施用作为活性成分的氘代非唑奈坦、其药学上可接受的盐或溶剂化物以及其他治疗剂和/或活性成分，并且所述组合物和药物除作为活性成分的氘代非唑奈坦、其药学上可接受的盐或溶剂化物外，还包含其他治疗剂和/或活性成分。这样的多种药物方案，通常称为“联合治疗”，可以用于治疗和/或预防由NK-3受体调节介导或与之相关的任何疾病或病症。对于需要治疗的患者或处于成为这种患者的危险中的患者的上述疾病的治疗，此类治疗剂组合的使用特别适合。

除了对治疗功效的要求外，除了可能需要使用NK-3受体调节剂的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物外，还需要使用活性剂，可能有其他理由迫使或强烈建议使用涉及代表辅助疗法的活性成分的药物组合，即补充和增补本发明的NK-3受体调节剂化合物的功能。用于辅助治疗的合适的辅助治疗剂包括以下药物，它们不直接治疗或预防由NK-3受体调节介导的或与之相关的疾病或病症，而是治疗直接由基本或潜在的NK-3受体调节的疾病或病症导致的疾病或病症或间接伴随于基本或潜在的NK-3受体调节的疾病或病症的疾病或病症。

根据本发明的另一个特征，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可与抗精神病药物(APD)联合使用，以提高疗效并最大程度降低与APD相关的继发作用，APD包括但不限于多巴胺2/3和5-HT2受体拮抗剂。更特别地，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用作辅助疗法与非典型抗精神病药(包括但不限于利培酮、氯氮平、奥氮平)联合使用，其中NK-3受体调节剂可起到限制非典型抗精神病药剂量的作用，从而使患者免于那些非典型抗精神病药的某些副作用。

因此，本发明的治疗方法和药物组合物可以采用单一治疗形式的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物，但是所述方法和组合物也可以以多种疗法的形式使用，其中氘代非唑奈坦或药学上可接受的盐或溶剂化物与一种或多于一种其他治疗剂联合施用。

在本发明的上述实施方案的组合中，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及其他治疗活性剂可以以单独的或彼此结合的剂型形式施用，并且可以按其施用时间连续或同时施用。因此，一种组分剂的施用可以在其他组分剂的施用之前、同时或之后。

本发明还提供了药物组合物，其包含氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。如上所述，本发明还涵盖药物组合物，其除了含有作为活性成分的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物外，还包含其他治疗剂和/或活性成分。

本发明的另一个目的是提供一种药物，其至少包含作为活性成分的氘代非唑奈坦、其药学上可接受的盐或溶剂化物。

根据本发明的另一个特征，提供了氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于调节需要这种治疗的患者中的NK-3受体活性的药物中的用途，其包括对所述患者施用有效量的氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

如上所述，氘代非唑奈坦或其药学上可接受的盐或溶剂化物可用于单一疗法或组合疗法中。因此，根据一个实施方案，本发明提供了氘代非唑奈坦在制备用于上述至少一个目的的药物中的用途，其中将所述药物与至少一种其他治疗剂和/或活性成分组合施用至有需要的患者，优选温血动物，甚至更优选人。这样的多种药物方案、可能的施用方案以及合适的另外的治疗剂和/或活性成分的益处和优点如上所述。

通常，为了药学用途，可以将氘代非唑奈坦配制成包含氘代非唑奈坦和至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂以及任选地一种或多于一种其他药物活性化合物的药物制剂。

借助于非限制性实例，这样的制剂可以是适合于口服施用、肠胃外施用(例如通过静脉内注射、肌肉内注射或皮下注射或静脉内输注)、局部施用(包括眼)、通过吸入施用、通过皮肤贴剂施用、通过植入物施用、通过栓剂施用等的形式。取决于施用方式，此类合适的给药形式(可以是固体、半固体或液体)以及用于制备它们的方法和载体、稀释剂和赋形剂对于本领域技术人员将是清楚的；请参考最新版的Remington’s PharmaceuticalSciences。

这样的制剂的一些优选但非限制性实例包括片剂、丸剂、散剂、锭剂、小袋(sachet)、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂、软膏、乳脂、乳液、洗剂、软硬明胶胶囊、栓剂、滴剂、用于大剂量给药和/或连续给药的无菌注射溶液和无菌包装粉末(通常在使用前重新配制)，可以与本身适合这样的制剂的载体、赋形剂和稀释剂一起配制，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、纤维素、(无菌)水、甲基纤维素、甲基羟基苯甲酸酯和丙基羟基苯甲酸酯、滑石粉、硬脂酸镁、食用油、植物油和矿物油或它们的合适混合物。所述制剂可以任选地包含药物制剂中常用的其他物质，例如润滑剂、湿润剂、乳化和悬浮剂、分散剂、崩解剂、膨胀剂、填充剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、流动调节剂、脱模剂等。还可以配制组合物以提供其中所含的活性化合物的快速、持续或延迟释放。

本发明的药物制剂优选为单位剂型，并且可以适当地包装，例如在盒、泡罩、小瓶、瓶、小袋、安瓿中或在任何其他合适的单剂量或多剂量容纳物或容器中(可适当标示)；任选地附一张或多张包含产品信息和/或使用说明的说明书。通常，这样的单位剂量将包含0.05mg至1000mg，通常1mg至500mg的氘代非唑奈坦。

通常，根据要预防或治疗的病状和施用途径，氘代非唑奈坦的施用剂量通常为每千克体重0.001mg至10mg，更常见的是，每天每公斤患者体重0.01mg至4mg，该剂量可以是单日剂量，一剂或多剂每日剂量，也可以基本上连续(例如使用滴注)施用。

根据一个实施方案，氘代非唑奈坦将以单日剂量，一次、两次或多于两次日剂量或基本上连续的方式(例如使用滴注)施用。

定义

以下定义和解释是针对整个申请(包括说明书和权利要求书)中使用的术语。

当描述本发明的化合物时，除非另有说明，所用术语应根据以下定义解释。

通常使用实线(-)、楔形实线

或楔形虚线

描绘化合物中不对称碳的键。使用楔形实线或楔形虚线描绘来自不对称碳原子的键意在表示仅包括所示的立体异构体。

氘代非唑奈坦在位置8处包含立体碳原子中心，因此可能以(R)-和(S)-对映体形式存在。氘代非唑奈坦是(R)-对映体。

在氘代非唑奈坦中，在C8位置带有甲基的楔形虚线

用于描述(R)-对映体，因此不包括其外消旋混合物。

术语“溶剂化物”在本文中用于描述氘代非唑奈坦，其含有化学计量量或亚化学计量量的一种或多于一种药学上可接受的溶剂分子，例如乙醇。术语“水合物”是指所述溶剂为水时。

所有提及的氘代非唑奈坦都包括其盐、溶剂化物、多组分复合物和液晶。

所有提及的氘代非唑奈坦都包括其所有多晶型物和晶体惯态、和前药。

本发明通常还涵盖氘代非唑奈坦的所有药学上可接受的前体药物和前药。

本发明通常还涵盖氘代非唑奈坦的所有药学上可接受的盐。药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑酸盐、柠檬酸盐、环已基氨基磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸一氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、蔗糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和木叶酸盐。合适的碱盐是由形成无毒盐的碱形成的。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、醇胺盐、钾盐、钠盐、氨基丁三醇盐、2-(二乙氨基)乙醇盐、乙醇胺盐、吗啉盐、4-(2-羟乙基)吗啉盐和锌盐。还可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。优选的药学上可接受的盐包括盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硝酸盐、柠檬酸盐和乙酸盐。

术语“患者”是指温血的动物，更优选地是人类，其正在等待或正在接受医疗护理，或者是/将成为医疗程序的对象。

术语“人”是指性别和处于任何发育阶段的对象(即新生儿、婴儿、少年、青少年、成人)。

如本文所用，术语“治疗”旨在包括减轻、减弱或消除病症或疾病和/或其伴随症状。

如本文所用，术语“预防”是指用于延迟或排除疾病或病症和/或其伴随症状的发作、阻止患者患疾病或病症或降低患者患疾病或病症的风险的方法。

如本文所用，术语“治疗有效量”(或简称为“有效量”)是指足以在被施用/施用其的患者中实现期望的治疗或预防作用的活性剂或活性成分(例如NK-3拮抗剂)的量。

术语“施用”或其变体(例如“给药”)是指向待治疗或预防或治疗病症、症状或疾病的患者单独或作为药学上可接受的组合物的一部分提供活性剂或活性成分(例如NK-3拮抗剂)。

“药学上可接受的”是指药物组合物的成分彼此相容且对其患者无害。

如本文所用，术语“拮抗剂”是指与激动剂(例如，内源性配体)在相同位点竞争性或非竞争性地结合受体的化合物，并且该化合物对受体具有可逆和竞争性结合亲和力而不直接调节受体信号传导，但是仍然占据了激动剂(例如内源性配体)的结合位点从而阻断了激动剂介导的受体信号传导。

如本文所用，术语“性激素依赖性疾病”是指过度、不适当或不受调节的性激素产生和/或对性激素的异常生理反应而加剧或引起的疾病。男性中此类疾病的实例包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、雄激素依赖性痤疮、男性型秃发和男孩的性早熟。妇女中此类疾病的例子包括但不限于子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症(卵巢癌、乳腺癌)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、月经过多和子宫腺肌症(子宫肌肉内内膜异常生长)。

如本文所用，术语“精神病性疾病”是指影响心智的一组疾病。这些疾病改变了患者清晰思考、做出良好判断、情感回应、有效沟通、理解现实以及适当行为的能力。当症状严重时，精神病患者难以与现实保持联系，并且通常无法满足日常生活的普通需求。精神病包括但不限于精神分裂症、精神分裂性障碍、分裂情感性障碍、妄想性障碍、短期精神障碍、共有型精神病，由于一般医学状况引起的精神病症、物质诱发的精神病症或其他未指明的精神病症(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,第4版,AmericanPsychiatric Association,Washington,D.C.1994)。

如本文所用，术语“药物载剂”是指用作溶剂或稀释剂的载体或惰性介质，药物活性剂在其中配制和/或施用。药物载剂的非限制性实例包括乳膏、凝胶、洗剂、溶液和脂质体。

参考以下实施例将更好地理解本发明。这些实施例意在代表本发明的具体实施方案，而不意在限制本发明的范围。

附图的简要说明

图1是氘代非唑奈坦的X射线晶体结构，以50％的概率水平绘制了热位移椭圆体。

实施例

化学实施例

所有报告的温度均以摄氏度(℃)表示；除非另有说明，所有反应均在室温(rt)下进行。

所有反应之后进行薄层色谱法(TLC)分析(TLC板，硅胶60F₂₅₄，Merck)用于监测反应，建立硅胶快速色谱条件。本发明中使用的所有其他TLC显影剂/可视化技术、实验装置或纯化程序，当未在具体细节中描述时，被认为是本领域技术人员已知的，并在如下标准参考手册中进行了描述：i)Gordon,A.J.；Ford,R.A.“The Chemist’s Companion–A Handbookof Practical Data,Techniques,and References”,Wiley:New York,1972；ii)Vogel’sTextbook of Practical Organic Chemistry,Pearson Prentice Hall:London,1989。

使用以下缩写：

CCSC：氯羰基亚磺酰氯

Cpd：化合物，

DCM：二氯甲烷，

equiv.：当量，

EtOH：乙醇，

g：克，

h：小时，

mg：毫克，

mL：毫升，

mmol：毫摩尔，

min：分钟，

RT：室温，

R_t：保留时间

TFA：三氟乙酸，

TLC：薄层色谱。

以下描述的中间体和化合物使用

Ultra版本12.0(PerkinElmer)命名。

合成路线

氘代非唑奈坦可以使用以下方案(A部分和B部分)中所述的方法合成：

A部分：氘代关键中间体(ii)的制备

B部分：使用中间体(ii)合成氘代非唑奈坦

通过关键中间体(ii)合成氘代非唑奈坦。A部分对应于中间体(ii)的合成。B部分使用中间体(ii)，采用改编自WO2014/154895的方法制得非唑奈坦(d3-非唑奈坦)。

实验详述

A部分-步骤1)：形成d₃-乙酰胺(b)

向DCM(100mL)中的d₃-乙酸(a)(10g，1当量)中加入CDI(25.3g，1当量)，并将所得混合物在室温搅拌30min，随后将氨气在0℃至5℃下鼓泡通过反应混合物40min。之后停止鼓泡，将混合物过滤并将滤液减压蒸发，得到30.95g粗产物，将其使用硅胶快速色谱纯化，得到6.65g(收率：73％)氘代乙酰胺(b)(GC(RTX-1301柱30m×0.32mm×0.5μm)R_t 7.4min，98％)。

A部分-步骤2)：闭环得到化合物(c)

将d₃-乙酰胺(b)(3.3g，1当量)和氯羰基亚磺酰氯(CCSC)(8.4g，1.2当量)在1,2-二氯乙烷(63mL)中合并，并回流4.5小时。CCSC可以按照Adeppa等人(Synth.Commun.,2012,Vol.42,pp.714-721)中描述的方法进行制备。然后除去挥发物，得到6.60g(102％收率)为黄色油状物的

噻唑酮(c)产物。用GC分析产物(R_t＝7.8min，97％)。¹³C NMR(CDCl₃):16.0,158.7,174.4ppm。

A部分-步骤3)：形成化合物(d)

向

噻唑酮(c)(6.6g，1当量)的间二甲苯(231mL)溶液中加入氰基甲酸甲酯(14.70g，3.2当量)。将混合物在130℃搅拌19h，然后在50℃减压除去挥发物，得到4.53g棕色油状物(收率：51％)。通过GC(R_t＝11.8min，81％)和质谱(M+H＝162)分析产物(d)。

A部分-步骤4)：形成中间体(ii)

将以上获得的酯(d)(3.65g，1当量)溶解在乙醇(45mL)中。滤出未溶解的物质，然后将水合肼(2.3mL，1.15当量，H₂O中的55重量/重量％)加入搅拌的溶液中。在几分钟内形成浓稠的悬浮液，将悬浮液搅拌45分钟，过滤并用EtOH(3mL)洗涤以提供中间体(ii)，浅黄色固体(2.43g，55％收率)。质谱分析(M+H＝162,M+Na＝184)；¹H NMR(d6-DMSO):4.79ppm(br s,2H),10.55ppm(br s,1H)；¹³C NMR(d₆-DMSO):17.4ppm,155.6ppm,173.4ppm,183.0ppm。

B部分-步骤a)：形成化合物(iii)

如WO2014/154895中所述制备中间体(i)。

取中间体(ii)(490mg,3.04mmol)和化合物(i)(1.0g(87mol％1.3含量),2.97mmol)置于MeOH中，将反应混合物在55℃至70℃的温度下搅拌6小时至8小时。TLC确认反应完成。蒸发反应混合物，并将粗产物通过硅胶快速色谱在DCM:MeOH洗脱液中纯化，得到1.13g(97％收率)黄色油状化合物(iii)。¹H NMR(CDCl3):δ(ppm)7.26(d,1H),6.48-6.49(2H),4.50(m,1H),4.30(m,1H),4.09(m,1H),3.94(d,1H),3.80(s,6H),3.61(d,1H),3.22(m,1H),2.75(m,1H),1.72(d,3H)；质谱分析(M+H＝390,2M+Na＝801)。手性LC(色谱柱：Chiralpak IC，250×4.6mm-洗脱液：MTBE/MeOH/DEA 98/2/0.1)99.84％。

B部分-步骤b)：脱保护得到化合物(iv)

将以上制备的中间体(iii)(1.05g，2.7mmol)溶解在DCM中，并用NaOH水溶液洗涤。干燥有机相，然后在室温下添加TFA(1.56mL，2.3g，7.5当量)。将得到的溶液在室温搅拌2小时。通过TLC监测反应。反应完成后，将水加入到反应混合物中，将沉淀物过滤并用水洗涤。分离各相，通过添加20％的NaOH水溶液将水相的pH调节至pH13。然后将NaCl添加到水溶液中，然后用DCM萃取。减压蒸发有机相，得到504mg化合物(iv)(78％收率)。¹H NMR(d₆-DMSO):δ(ppm)4.42(m,1H),4.10(m,2H),3.0(m,1H),2.82(m,1H),1.46(d,3H)。¹³C NMR(d₆-DMSO):δ(ppm)174.8,173.4,156.2,145.0,48.1,45.7,40.7,19.1。质谱分析(M+H＝240,2M+Na＝501)。

B部分-步骤c)：酰化和重结晶以形成氘代非唑奈坦

将中间体(iv)(450mg，1.88mmol)溶解在DCM中，然后添加饱和NaHCO₃水溶液，将混合物搅拌30分钟。在室温下向该混合物中逐滴加入4-氟苯甲酰氯(v)(220μL，1当量)。将反应在室温下搅拌约20分钟至过夜的时间，并通过TLC监测反应进程。反应完成后，分离各相，将有机相用水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并在减压下蒸发，以得到745mg的粗d₃-非唑奈坦(110％收率)。粗产物和第二批产物通过快速色谱法使用MeOH:DCM纯化，然后结晶(EtOH/H₂O)，然后进行最终分析。¹H NMR(d₆-DMSO):δ(ppm)7.60(m,2H),7.33(m,2H),5.73(m,1H),4.68(dd,1H),4.31(m,1H),4.06(m,1H),3.65(m,1H),1.61(d,3H)。¹³C NMR(d₆-DMSO):δ(ppm)174.4,173.5,168.7,163.7,161.8,154.1,144.9,131.6,129.5,115.5,44.7,18.7。基于在m/z＝362.2Da处观察到的强分子离子的同位素纯度估计约为100％同位素纯度。手性纯度(LC)(色谱柱：Chiralpak IC，250×4.6mm-洗脱液：正己烷/EtOH/DEA 80/20/0.1)>99.9％。获得了氘代非唑奈坦最终产物的单晶X射线结构(图1)，证实了该化合物的结构以及立体化学。

生物实施例

功能测定

用人NK-3受体进行水母发光蛋白测定。细胞内钙水平的变化是公认的G蛋白偶联受体活性的指标。通过体外水母发光蛋白功能测定评估了本发明化合物抑制NKA介导的NK-3受体活化的功效。表达人NK-3受体的中国仓鼠卵巢重组细胞和编码光蛋白载水母发光蛋白的构建体用于该测定。在辅因子腔肠素存在的情况下，水母发光蛋白发出的可测量发光与细胞内(胞质)游离钙的含量成比例。

拮抗测试。在将(不同浓度)化合物与细胞预孵育(3分钟)后，接着以相当于EC₈₀(3nM)的最终浓度添加参考激动剂(NKA)并记录随后90秒钟的发射光(FDSS6000Hamamatsu)，测量本发明化合物的拮抗活性。使用阅读器软件对发出的光的强度进行积分。基于添加神经激肽A的发光响应的浓度依赖性抑制作用来测量化合物的拮抗活性。

得到本发明化合物的抑制曲线，并确定抑制50％参考激动剂应答(IC₅₀)的化合物的浓度(参见下表1中的结果)。表1所示的IC₅₀值表明，氘代非唑奈坦是有效的NK-3拮抗化合物。

竞争性结合测定

本发明化合物对人NK-3受体的亲和力是通过测量本发明化合物以浓度依赖性方式竞争性和可逆地置换充分表征的NK-3放射性配体的能力来确定的。

³H-SB222200与人NK-3受体竞争性结合测定。通过体外放射性配体结合测定来评估本发明化合物抑制NK-3受体选择性拮抗剂³H-SB222200结合的能力。由稳定表达人NK-3受体的中国仓鼠卵巢重组细胞制备膜。将膜与pH 7.4的HEPES 25mM/NaCl 0.1M/CaCl₂1mM/MgCl₂ 5mM/BSA 0.5％/皂苷10μg/ml缓冲液中的5nM ³H-SB222200(ARC)和具有各种浓度的本发明化合物一起孵育。过滤后，通过使用TopCount-NXT阅读器(Packard)定量膜相关放射性来确定结合至受体的³H-SB222200的量。得到本发明化合物的竞争曲线，并通过线性回归分析确定了取代50％的结合放射性配体(IC₅₀)的浓度，然后通过以下方程式计算了表观抑制常数(K_i)值：K_i＝IC₅₀/(1+[L]/K_d)，其中[L]是游离放射性配体的浓度，K_d是其在受体上的解离常数，来自饱和结合实验(Cheng和Prusoff，1973)(见下表1中的结果)。

表1显示了使用³H-SB222200与本发明化合物结合竞争测定获得的生物学结果。这些结果表明氘代非唑奈坦对人NK-3受体显示出强亲和力，并且氘代非唑奈坦保留了非唑奈坦的生物活性。

表1

CYP450谱测定

P450-GloTM筛选测定法(Promega)用于评估本发明化合物抑制细胞色素P450亚型的潜力(CYP 1A2#V9770、2C9#V9790、2C19#V9880、2D6#V9890、3A4#V9910)。这些测定采用发光的CYP450探针底物，该底物是甲虫萤光素的衍生物，萤光素酶的底物。衍生物通过P450的细胞色素转化为萤光素，萤光素又与萤光素酶反应以产生与P450活性成正比的光量。

P450-GloTM分析分两个步骤进行，首先将P450-GloTM底物通过细胞色素P450酶转换为荧光素产物，然后将其检测为荧光素酶反应的发光信号。为了进行该测定，在PO4缓冲液中以每种细胞色素P450亚型的最佳浓度，在pH7.4下制备具有细胞色素P450酶和P450-GloTM底物的细胞色素P450混合物。将本发明的化合物(剂量响应曲线从100μM到30nM)一式两份添加到混合物中。不含萤光素的水+0.1％DMSO用作阴性对照，已知的抑制剂用作阳性对照。通过添加NADPH再生系统来引发反应，并在37℃下进行。加入萤光素检测试剂可终止细胞色素P450活性并启动D-萤光素检测反应。然后确定本发明化合物的IC 50值(抑制细胞色素活性50％所需的化合物浓度)。

表2显示了用本发明化合物获得的CYP P450抑制曲线。当在上述测定法中进行测试时，氘代非唑奈坦与非唑奈坦相比出人意料地在CYP2C9和2C19上显示出更好的CYP谱，表明对所有五个细胞色素P450亚型没有或具有非常低的CYP P450抑制作用。

表2

在去势猴子中口服氘代非唑奈坦和非唑奈坦后对促性腺激素的评估

对调节下丘脑-垂体-性腺(‘HPG’)轴的药物的疗效评估可以通过评估去势猴子的黄体生成素(LH)来进行，如文献所既定的那样(例如，Fraser等人,Endocrinol.,2015,Vol.156,pp.4214-4225；Struthers等人,Endocrinol.,207,Vol.148,pp.857-867)。

性成熟的雄性食蟹猴(猕猴(Macaca fascicularis)；N＝4，年龄：4-5岁，体重：4.41至5.69kg)被去势，并在此实验前恢复>6个月。将猴子分组饲养，并以补充水果的标准实验室食物和明暗交替的12小时周期进行饲养。随意提供水。进行了一项初步研究，其中用载剂(0.5％甲基纤维素/水)处理猴子，并在以下指定的时间间隔收集血液样本。这是对载剂的反应。在所有情况下，对动物进行重新测试前给予一周恢复期。将氘代非唑奈坦和非唑奈坦的测试物品类似地配制在0.5％甲基纤维素/水中，并通过口服管饲以1mg/kg、3mg/kg和10mg/kg的剂量施用(所有情况下剂量均为5mL/kg)。在0h至8h给药。通过静脉穿刺在给药后0(给药前)小时、0.5小时、1小时、1.5小时、2.5小时、5小时、8小时、12小时、24小时、32小时和48小时采集血样。将样品收集到含有K₂EDTA的离心管中，并以2500g离心15分钟。将血浆从样品中倾析到指定用于药代动力学分析的小瓶中，而收集血清分别用于LH药代动力学分析。立即将所有样品瓶冷冻并保存在-20℃直至测定。

血清LH的测定采用Leydig细胞法(Wickings等人,J.Reprod.Fert.,1979,Vol.57,pp.497-504)，该方法先前已符合建立LH和睾丸激素的公认验收标准。简言之，对于每次试验，处死2只至3只雄性小鼠，收集睾丸，并根据公开的方法制备Leydig细胞悬液。用LH处理Leydig细胞会引起睾丸激素的分泌，后者通过ELISA测定。对于每次试验，通过将log(LH浓度)相对于产生的睾丸激素的平方根作图，构建LH的标准曲线(猴子LH标准品，Scripps)，从而在剂量范围内绘制线性图。然后将该标准曲线的公式用于通过内插法定量未知样品(例如，从体内测试中收集)中的LH浓度。

对于LH分析，对以相同时间间隔收集的血浆样品进行了药代动力学(PK)分析。建立了液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)，以定量测定食蟹猴血浆样品中的非唑奈坦和氘代非唑奈坦浓度(通过与内标比较得到验证的测定结果)。使用非区室分析(PhoenixTMWinNonlin，版本6.1)计算PK参数。线性对数梯形算法，权重1/Y^*Y用于参数计算。从每个治疗组中的单个动物计算平均PK参数。计算PK参数时，排除低于定量下限(LLOQ)的浓度。

Claims

1.(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

2.一种药物组合物，其包含(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂和/或佐剂。

3.一种药物，其包含(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

4.(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗和/或预防抑郁症、焦虑症、精神病、精神分裂症、精神失常、躁郁症、认知障碍、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、注意缺陷多动障碍(ADHD)、疼痛、惊厥、肥胖、炎症性疾病，包括肠易激综合症(IBS)和炎症性肠病、呕吐、先兆子痫、气道相关疾病，包括慢性阻塞性肺疾病、哮喘、气道高反应性、支气管狭窄和咳嗽、尿失禁、生殖障碍、避孕和性激素依赖性疾病，包括但不限于良性前列腺增生(BPH)、前列腺增生、转移性前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、卵巢癌、雄激素依赖性痤疮、男性型脱发、子宫内膜异位症、青春期异常、子宫纤维化、子宫肌瘤、子宫平滑肌瘤、激素依赖性癌症、雄激素过多症、多毛症、男性化、多囊卵巢综合征(PCOS)、经前烦躁不安症(PMDD)、HAIR-AN综合征(高雄激素血症、胰岛素抵抗和黑棘皮病)、卵巢卵泡膜细胞增生症(HAIR-AN伴有卵巢基质中黄体化的膜细胞增生)、卵巢内雄激素浓度高的其他临床表现(例如滤泡成熟停止、不通、无排卵、痛经、功能失调性子宫出血、不育)、雄性激素产生性肿瘤(男性化卵巢肿瘤或男性化肾上腺肿瘤)、月经过多和子宫腺肌症。

5.(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗和/或预防潮热。

6.(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用作循环LH水平降低剂。

7.一种(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮或其药学上可接受的盐或溶剂化物的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

其中：

其中PG如上定义；

b)用合适的脱保护剂使式(iii)的化合物脱保护，得到式(iv)的化合物

c)用式(v)的化合物N-酰化式(iv)的化合物，

从而得到(R)-(4-氟苯基)-(8-甲基-3-(3-(甲基-d3)-1,2,4-噻二唑-5-基)-5,6-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-7(8H)-基)甲酮。

8.一种式(ii)的化合物