CN111201224A - 作为前列腺癌检测生物标志物的尿多胺 - Google Patents
作为前列腺癌检测生物标志物的尿多胺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111201224A CN111201224A CN201880065553.1A CN201880065553A CN111201224A CN 111201224 A CN111201224 A CN 111201224A CN 201880065553 A CN201880065553 A CN 201880065553A CN 111201224 A CN111201224 A CN 111201224A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydrogen
- alkyl
- compound
- prostate cancer
- individual
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 110
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 108
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title abstract description 13
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 73
- 229910052747 lanthanoid Inorganic materials 0.000 claims abstract description 28
- 150000002602 lanthanoids Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 claims description 102
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 76
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 76
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 75
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 72
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 70
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N spermine Chemical compound NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 62
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 59
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 55
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 53
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 42
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 41
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims description 41
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 39
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 34
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 claims description 31
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 29
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 29
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 29
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 29
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 29
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 claims description 29
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 28
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 22
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 claims description 17
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 17
- -1 nitro, hydroxyl Chemical group 0.000 claims description 16
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 claims description 15
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 15
- IBAHLNWTOIHLKE-UHFFFAOYSA-N cyano cyanate Chemical compound N#COC#N IBAHLNWTOIHLKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 12
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 12
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 208000035392 hereditary 6 prostate cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000032154 hereditary 8 prostate cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 5
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims description 5
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 claims description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 4
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical group [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000011734 sodium Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052708 sodium Chemical group 0.000 claims description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 41
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 29
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 29
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 29
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 17
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XNBNXFVMQIZMBM-UHFFFAOYSA-N nitroperoxy nitrate Chemical compound [O-][N+](=O)OOO[N+]([O-])=O XNBNXFVMQIZMBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 11
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 10
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 7
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 7
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010811 Ultra-Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Methods 0.000 description 6
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 6
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 5
- UFFSXJKVKBQEHC-UHFFFAOYSA-N heptafluorobutyric anhydride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F UFFSXJKVKBQEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 230000003544 deproteinization Effects 0.000 description 4
- 150000002178 europium compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100034274 Diamine acetyltransferase 1 Human genes 0.000 description 3
- 101710086762 Diamine acetyltransferase 1 Proteins 0.000 description 3
- 229910052693 Europium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 101710181456 Spermidine N(1)-acetyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 3
- 238000004008 high resolution magic-angle spinning Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- NQNXERHVLXYXRO-UHFFFAOYSA-N Diacetylspermine Chemical compound Cl.Cl.CC(=O)NCCCNCCCCNCCCNC(C)=O NQNXERHVLXYXRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 2
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000000104 diagnostic biomarker Substances 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N europium atom Chemical compound [Eu] OGPBJKLSAFTDLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 150000002601 lanthanoid compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000006862 quantum yield reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- KIDHWZJUCRJVML-WFVSFCRTSA-N 1-deuteriobutane-1,4-diamine Chemical compound [2H]C(N)CCCN KIDHWZJUCRJVML-WFVSFCRTSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 229910052684 Cerium Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 238000005698 Diels-Alder reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052692 Dysprosium Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 229910052691 Erbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000000918 Europium Chemical class 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052689 Holmium Inorganic materials 0.000 description 1
- 101600120596 Homo sapiens Spermine oxidase (isoform 1) Proteins 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 238000007375 Jaffe assay Methods 0.000 description 1
- 229910052765 Lutetium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- NPDTUDWGJMBVEP-UHFFFAOYSA-N N(1),N(12)-diacetylspermine Chemical compound CC(=O)NCCCNCCCCNCCCNC(C)=O NPDTUDWGJMBVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BKCVMAZDKFQPHB-UHFFFAOYSA-N N-{3-[(4-acetamidobutyl)amino]propyl}acetamide Chemical compound CC(=O)NCCCCNCCCNC(C)=O BKCVMAZDKFQPHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052779 Neodymium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 108091033411 PCA3 Proteins 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052777 Praseodymium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 102100032800 Spermine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 102300037958 Spermine oxidase isoform 1 Human genes 0.000 description 1
- 229910052771 Terbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052775 Thulium Inorganic materials 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229910052769 Ytterbium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000005421 acetyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000003570 air Substances 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013103 analytical ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 238000002725 brachytherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000002681 cryosurgery Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000002893 dermoid cyst of ovary Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000005002 female reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000005669 field effect Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000002390 hyperplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000001967 indiganyl group Chemical group [H][In]([H])[*] 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000111 isothermal titration calorimetry Methods 0.000 description 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- IBGCXOFOCKCBNQ-UHFFFAOYSA-N nitro cyanate Chemical compound [O-][N+](=O)OC#N IBGCXOFOCKCBNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000101 novel biomarker Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000004971 ovarian teratoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004223 overdiagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- YPJUNDFVDDCYIH-UHFFFAOYSA-N perfluorobutyric acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F YPJUNDFVDDCYIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089000 polyamine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- YLMGFJXSLBMXHK-UHFFFAOYSA-M potassium perchlorate Chemical compound [K+].[O-]Cl(=O)(=O)=O YLMGFJXSLBMXHK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000064 prostate epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037209 prostate health Effects 0.000 description 1
- 210000004908 prostatic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011472 radical prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020615 rectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000027756 respiratory electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 238000002553 single reaction monitoring Methods 0.000 description 1
- 238000013426 sirius red morphometry Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004306 triazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000002371 ultraviolet--visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000012762 unpaired Student’s t-test Methods 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000000733 zeta-potential measurement Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5308—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for analytes not provided for elsewhere, e.g. nucleic acids, uric acid, worms, mites
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
- C07F5/003—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table without C-Metal linkages
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57434—Specifically defined cancers of prostate
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本公开涉及可用作前列腺癌生物标志物的尿多胺以及使用镧系配合物来检测和定量尿多胺的灵敏性、特异性方法。
Description
对相关申请的交叉引用
本申请要求2017年10月16日提交的美国非临时专利申请序列号15/784,269的优先权，该非临时专利申请要求2016年10月17日提交的美国临时专利申请序列号62/409,361和2017年3月16日提交的美国临时专利申请序列号62/471,989的优先权。本申请还要求2018年2月4日提交的美国临时专利申请序列号62/626,149的优先权。所有上面引用的专利申请的公开内容均通过引用以其整体并入本文。
技术领域
本公开涉及用于检测和量化尿多胺的方法和用于其中的组合物。本文所述的方法和组合物可用于诊断患者的前列腺癌。
背景技术
前列腺癌(PCa)是男性中第二大常见癌症，并且是死亡的主要原因之一，其在包括许多西欧国家和美国在内的许多发达国家中造成了重大的公共卫生影响。
PCa是一种在全世界范围内越来越具有重要意义的疾病。香港在这个公共卫生问题上也不例外。根据香港特别行政区(HKSAR)医院管理局的香港癌症资料统计中心的统计数据，PCa在男性最常见的癌症中排名第3，在致命最严重的癌症中排名第5。鉴于早期可治疗PCa的潜伏期及其晚期可辨别阶段的致死性，迫切需要更加灵敏、精确的诊断方法来检测早期PCa，从而可以显著改善治疗效果，同时挽救更多生命。
目前对PCa的诊断依赖于直肠指检(DRE)和血清前列腺特异性抗原(PSA)测试，随后进行经直肠超声前列腺活检(TRUSPB)确认。虽然DRE是一个简单的程序，但它会给患者带来不适。DRE也是一项对研究者依赖性强的技术，导致PCa诊断的精确性较差。特别是，DRE不是用于PCa早期检测的好工具，因为大多数DRE阳性PCa结果都是晚分期的。虽然PSA测试在检测早期PCa方面表现出良好的灵敏性，但在患有良性前列腺增生(BPH)和前列腺炎等患者中也观察到PSA水平升高，这降低了PSA对PCa的特异性。
在PSA测试的灰色区域内，阳性预测值的平均值较小，为21％。已经开发了多种PSA方法，例如移行区的PSA密度、游离/总PSA比、p2PSA和前列腺健康指数，以提高PSA测量的性能。
经直肠超声引导的前列腺活检(TRUSPB)是目前最常见的用于组织学确认PCa诊断的诊断方法。然而，该手术非常耗费人力并且导致患者的明显不适和并发症。
由于血清PSA测试的特异性较差，许多未患有PCa的患者会进行TRUSPB，从而遭受其潜在的并发症。因此，必须开发一种更有效的检测试剂盒，用于对PCa进行精确早期筛查。
本公开的目的是提供用于诊断患者的PCa的方法，包括检测一种或多种尿多胺(例如，腐胺(Put)、亚精胺(Spd)和/或精胺(Spm))。尿多胺可用作PCa检测的生物标志物。通过比较诊断为PCa的患者、诊断为良性前列腺增生(BPH)的患者和健康对照(HC)的尿多胺浓度来确定尿多胺的诊断能力。本文还提供了用于检测和量化患者中尿多胺的量的组合物和方法。
发明概述
因此，本公开的目的是通过使用镧系配合物开发新的高灵敏性和特异性的变色多胺示踪剂，并检查来自不同年龄组和前列腺癌阶段的患者的平均尿多胺浓度，以验证多胺为早期前列腺癌筛查的值得信赖的生物标志物。
在本公开的第一方面，提供了式1的化合物：
其中m是1、2或3；
n在每次出现时独立地是1或2；
p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-或不存在；
对于每个实例，R1独立地是氢、烷基或环烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢、烷基、环烷基和芳基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃或炔烃；或R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；条件是式1的化合物不包括式2的化合物：
其中Ln是镧系元素；每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca。
在第一方面的第一实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基。
在第一方面的第二实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中R11和R12的每个实例独立地是氢、卤化物、硝基、氰基、醚或烷基。
在第一方面的第三实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、硝基、氰基、醚和烷基；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
其中R11和R12的每个实例独立地是氢、卤化物、硝基、氰基、醚或烷基。
在第一方面的第四实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中R10是氢、卤化物、硝基、氰基、醚、二烷基氨基或烷基；或R10是具有以下结构的部分：
在第一方面的第五实施方案中，提供了第一方面的第一实施方案的化合物，其中R1、R3和R6的每个实例是氢。
在第一方面的第五实施方案中，提供了第一方面的第二实施方案的化合物，其中R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、硝基、氰基、醚和烷基；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
在第一方面的第六实施方案中，提供了第一方面的第二实施方案的化合物，其中R10是氢、卤化物、硝基、氰基、醚、二烷基氨基或烷基；或R10是具有以下结构的部分：
在第一方面的第七实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中m是1、2或3；n在每次出现时独立地是1或2；p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-；
对于每个实例，R1独立地是氢或烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢和烷基；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
R10是氢、烷基和胺；或R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立选自氢和烷基。
在第一方面的第七实施方案中，提供了第一方面的化合物，其中该化合物选自由以下各项组成的组：
其中M是锂或钠。
在本公开的第二方面，提供了检测一种或多种尿多胺的方法，该方法包括以下步骤：
a.提供尿样；
b.使尿样与式1的化合物接触，从而形成测试样品；以及
c.检测测试样品中一种或多种尿多胺的存在。
在第二方面的第一实施方案中，本文提供了第二方面的方法，其中从个体获得尿样。
在第二方面的第二实施方案中，本文提供了第二方面的第一实施方案的方法，其中所述一种或多种尿多胺是精胺。
在第二方面的第三实施方案中，本文提供了第二方面的第一实施方案的方法，其中检测一种或多种尿多胺的存在的步骤包括测定一种或多种尿多胺的浓度。
在第二方面的第四实施方案中，本文提供了第二方面的第三实施方案的方法，其中所述一种或多种尿多胺是精胺。
在第二方面的第五实施方案中，本文提供了第二方面的第四实施方案的方法，该方法进一步包括以下步骤：将测试样品中精胺的浓度与参考浓度进行比较并确定个体是否对前列腺癌具有增加的易感性，其中测试样品中精胺的浓度相对于参考样品的降低指示个体对前列腺癌的易感性增加。
在第二方面的第六实施方案中，本文提供了第二方面的第五实施方案的方法，该方法进一步包括以下步骤：对个体进行前列腺检查以确定个体是否患有前列腺癌并且在个体患有前列腺癌的情况下用放射疗法或化学疗法治疗个体。
在本公开的第三方面，提供了用于治疗个体中的前列腺癌的方法，该方法包括以下步骤：
d.提供来自个体的尿样；
e.使尿样与式1的化合物接触，从而形成测试样品；
f.测定测试样品中精胺的浓度；
g.将测试样品中精胺的浓度与参考浓度进行比较并确定个体是否对前列腺癌具有增加的易感性，其中测试样品中精胺的浓度相对于参考样品的降低指示个体对前列腺癌的易感性增加；
h.对个体进行前列腺检查以确定个体是否患有前列腺癌；以及
i.如果个体患有前列腺癌，则用放射疗法或化学疗法治疗所述个体。
在第三方面的第一实施方案中，本文提供了第三方面的方法，其中测定精胺浓度的步骤包括将测试样品的颜色与校准的参考比色图表进行比较。
在第三方面的第二实施方案中，本文提供了第三方面的方法，其中所述个体是人。
本领域技术人员应当理解，除了具体描述的那些之外，本文描述的发明可进行变化和修改。
本发明包括所有这样的变化和修改。本发明还包括本说明书单独或共同提及或指出的所有步骤和特征，以及所述步骤或特征的任何和所有组合或任何两个或更多个所述步骤或特征。
通过审阅随后的描述，本发明的其它方面和优点对于本领域技术人员而言将是显而易见的。
附图简要说明
通过以下对本文描述的各种实施方案的描述，结合附图，本公开的上述目的和特征以及其它目的和特征将变得显而易见，在所述附图中：
图1显示了1000ppb混合多胺标准品的重叠UPLC-MS/MS SRM的色谱图(显示了0-10min(分钟))。Put(大峰，tR＝4.3min)、Put-d8(小峰，tR＝4.3min)、Spd(大峰，tR＝6.6min)、Spd-d8(小峰，tR＝6.6min)、Spm(大峰，tR＝7.8min)和Spm-d8(小峰，tR＝7.8min)。
图2A显示了PCa、BPH以及HC中归一化Put值的分布。
图2B显示了PCa、BPH以及HC中归一化Spd值的分布。
图2C显示了PCa、BPH以及HC中归一化Spm值的分布。
图3显示了归一化Put、Spd以及Spm值的接受者操作特征分析。
图4显示了多胺代谢途径(只侧重于Put、Spd以及Spm)。
图5A显示了put的校准图(r2＝0.9996)。
图5B显示了Spd的校准图(r2＝0.9993)。
图5C显示了Spm的校准图(r2＝0.9995)。
图6显示了血清PSA测试的接受者操作特征曲线。
图7A显示了示例性镧系配合物1的化学结构。
图7B显示了基于变色的镧系元素的多胺化学传感器的示意图，其中设计是基于多胺激活的f-f发射。
图8A显示了化合物2(1μM)与Spm(1μM)结合后Eu发射增强。
图8B显示了化合物2(1μM)与Spd(50μM)结合后Eu发射增强。
图8C显示了化合物2相对于水性DMSO(3％-DMSO)中各种生物胺和阳离子对Spm和Spd的选择性。
图9A显示了对10份前列腺癌患者尿样中的Spm水平的校准。
图9B显示了用于UV测试的10份选择的前列腺癌患者尿样中的Spm水平的浓度。
图10所示的铕化合物2(10μM，在水溶液中)的照片显示了在UV激发下、在存在10份前列腺癌患者尿样的情况下的颜色变化。检查了一份来自研究生的尿样作为对照实验。
图11显示了定义尿样中多胺浓度的加标方法。
图12A显示了脱蛋白前四份尿样的基质效应。
图12B显示了脱蛋白后四份尿样的基质效应。
图12C显示了脱蛋白并将DNA浓度增加至100nM后四份尿样的基质效应。
图13显示了尿、空白(H2O)和人工尿的基质效应的比较。
图14显示了包含本文所述的化合物的、示例性PCa-生物标志物检测条的示意图。
图15A的图阐释了指示癌症的示例性PCa诊断条。
图15B的图阐释了不指示癌症的示例性PCa诊断条。
图15C的图阐释了具有无效结果的示例性PCa诊断条。
图15D的图阐释了具有无效结果的示例性PCa诊断条。
图15E的图阐释了具有无效结果的示例性PCa诊断条。
具体实施方式
本公开的范围并不限于本文描述的任何具体实施方案。提供以下实施方案仅用于举例说明。
通过比较诊断为PCa的患者、BPH患者和健康患者的每一患者中的浓度，评估作为用于PCa检测的生物标志物的三种尿多胺(Put、Spd和Spm)。通过经过充分验证的色谱方法，已证明尿Spm可用于区分PCa与包括BPH在内的非癌症疾病状态，并当使用4.0ng/mL作为截止点时，其可有助于作为血清PSA测试的二级筛查工具，以解决血清PSA测试高假阳性率的问题。针对该新型生物标志物开发了包含镧系配合物的试剂盒，并在本文中进行了描述。
第一部分：评估多胺作为PCa生物标志物的作用
临床样品
用于临床样品采集的三个患者子集如下指定：诊断为PCa的患者、诊断为BPH的患者和HC。从所有受试者获得了书面同意。香港中文大学临床研究伦理委员会审查并批准将患者纳入临床研究中，并且该研究严格按照该委员会制定的指南进行。在2014年10月至2016年3月间，在前列腺活检前的午餐后中午时间，从165名血清PSA水平大于4.0ng/mL的男性患者(年龄>50)获得尿样。只有在这些患者未患有可能会产生偏倚效应的临床活性尿路感染时，才接受他们的尿样。当患者不同意该研究，或他们在临床上显示其它类型癌症的证据时，则将他们排除在抽样方案之外。
在这165例患者中，使用TRUSPB作为参考标准，66例被诊断为患有PCa，其余99例没有恶性肿瘤的证据(NEM)。为了进一步对这99例NEM患者进行分类，使用前列腺体积>30mL的标准作为标准，发现88例患有BPH，而其它患者被认为是HC。所有病理学检查均在经验丰富的泌尿病理学家的监督下，在香港的香港中文大学威尔斯亲王医院进行。
表1显示了样品的所有临床病理学特征。所有样品均储存在-20℃直至测量。所有测量均在采集后三个月内进行。
表1.患者的临床病理学特征
材料和化学品
从TEDIA获得甲醇(HPLC/光谱级，≥99.9％)。从ACS获得乙腈(HPLC级，≥99.9％)。在MilliQ Direct Water Purification System(Millipore,USA)中纯化水。所有的标准化合物，包括1,4-丁二胺(Put，99％)、亚精胺(Spd，≥99.0％)、精胺(Spm，≥99.0％)、1,4-二氨基(丁烷-d8)二盐酸盐(98原子％D)、亚精胺-(丁烷-d8)三盐酸盐(98原子％D，95％CP)、精胺-(丁烷-d8)四盐酸盐(97原子％D，95％CP)以及七氟丁酸(HFBA，≥99.0％)，均购自Sigma-Aldrich(中国香港)，并在未进一步纯化的情况下使用。强阴离子交换固相萃取(SPE)柱获得自Phenomenex(Strata，100mg/3mL，USA)。使用从Eppendorf(5417R，中国香港)获得的冷冻离心机进行离心。
肌酐的测定
利用LabAssayTM肌酐测定(Wako，日本)，测定尿样中的肌酐浓度。简而言之，使尿样和标准品解冻、脱蛋白并离心。分离上清液，并使之在碱性溶液中与苦味酸反应，以通过Jaffe反应产生橘色冷凝物，所述Jaffe反应如在Bonsnes RW,Taussky HH.On thecolorimetric determination of creatinine by the Jafféreaction.J BiolChem.1945；158(3):581-9中所报道的。通过利用Clariostar Monochromator酶标仪(Clariostar Monochromator Microplate Reader，BMG Labtech，香港)测量吸光度来量化样品中的总肌酐。在样品制备之前，以适当的稀释因子用水稀释超过校准点的浓缩尿样。每个样品至少测定两次，其相对标准偏差(RSD)小于15％。
用于测定多胺的示例性样品制备
在水中单独制备每一种多胺(Put、Spm、Spd)的储备液(5,000μg/ml)。将三种储备液混合并稀释，得到中间标准品(50μg/mL)，然后将中间标准品用于制备一系列工作标准品，其中多胺在水中的浓度为10、25、50、100、250、500、1,000ng/mL。对于内标，在水中单独制备每种多胺(Put-d8、Spm-d8、Spd-d8)的储备液(5,000μg/mL)。将三种储备液混合并稀释，得到在水中的内标(IS)工作溶液(1μg/mL)。
用于测定多胺的示例性样品预处理
样品制备程序遵循
等(
等.Analysis of free,mono-anddiacetylated polyamines from human urine by LC-MS/MS.J Chromatogr B AnalytTechnol Biomed Life Sci.2013；941:81-9)开发的方法，其中进行了稍许改良。首先，将尿样/标准品自然解冻并在13,000rpm和室温离心5分钟。将120μL尿样/标准品上清液和60μL的IS工作溶液与420μL水混合。使550μL该充分混合的溶液通过已经分别用1mL甲醇和水调节并平衡的SPE柱(SPE cartridge)。然后使450μL水通过所述柱以洗脱出所有多胺。然后将400μL的这些SPE处理的样品与100μL的10％HFBA混合，并且最终的混合物准备用于仪器分析。在制备样品之前，以适当的稀释因子用水稀释超过校准点的浓缩尿样。
用于测定多胺的质量控制样品
对于每批样品分析，分析了三种质量控制(QC)工作溶液，以验证校准曲线的准确性并确保批次之间的可比性。使用来自我们研究组的经分析的对照尿样制备溶液。测定对照尿样的多胺浓度，然后平均混合，得到合并的尿样。然后，通过将该合并的尿样与标准溶液混合，制备具有不同多胺浓度范围(低、中和高)的三种QC工作溶液。对于多胺浓度低的QC工作溶液，将SPE处理的合并尿样与SPE处理的10ng/mL标准品以1:7的比例混合。对于多胺浓度中等的QC工作溶液，将SPE处理的合并尿样与SPE处理的100ng/mL标准品以1:1的比例混合。对于多胺浓度高的QC工作溶液，将SPE处理的合并尿样与SPE处理的1,000ng/mL标准品以1:1的比例混合。
稳定性研究
对于稳定性研究，
等之前已经证明，标准混合物和QC样品在以下情况中均是稳定的：在室温储存6小时后(短期稳定性)、分别在-20℃和-80℃储存两个月后(长期稳定性)、以及在制备样品前进行三轮冷冻和解冻循环后(冻融稳定性)。为了进一步验证，分析了标准品和选定尿样中多胺和肌酐的含量。发现在5轮冷冻和解冻循环后，当在-20℃储存时，所有内容物在6个月的时间内仍然稳定。对于SPE处理的样品，当在4℃储存时，其稳定至少两天，并且，当在-20℃储存时，其稳定高达一年。
仪器和统计分析
通过超高效液相色谱法联合三重四极杆质谱仪(UPLC-MS/MS)进行多胺的量化。利用Agilent 1290Infinity Quaternary LC System进行LC分离，而质量分析则由配备有Agilent射流技术电喷雾电离源(Agilent Jet Stream technology electrosprayionization source)的Agilent 6460三重四极杆质谱仪进行。使用的柱是通过AgilentSB-C18保护柱(2.1x5mm，1.8μm)保护的Agilent EclipsePlus C18 RRHD(2.1x50mm，1.8μm)。
如下优化LC洗脱曲线：洗脱液A是具有0.1％HFBA的水，而洗脱液B是具有0.1％HFBA的乙腈。在10分钟内使洗脱液A从95％降至60％。然后在1分钟内使洗脱液A的梯度从60％降低至10％。然后使梯度保持恒定5分钟。然后在1分钟内使梯度从10％增加至95％，然后保持恒定8分钟。(总运行时间＝25分钟)。
将自动进样器和柱温度分别设定为4℃和35℃。通过用洗脱液B以Flush Port模式进行5秒针洗(5-second needle wash)3次来完成注射。每次注射10μL。
对于源参数(source parameter)，干燥气体(氮气)温度设定为300℃，流速为5l/min。雾化器压力为45psi。将保护气体(sheath gas)温度设定为250℃，流速为11l/min。将毛细管电压设定为3,500V。对于质量检测，进行了预定的多反应监测(MRM)。MRM转换的信息见表2。
表2.Put、Spm、Spd的MRM转换、驻留时间、裂解电压、碰撞能量和细胞加速器电压及其相应的内标(*表示计量转换(quantifier transition))
使用Agilent MassHunter Workstation软件计算结果。线性拟合校准曲线，而没有任何加权。相关系数不应小于0.995。为了确保准确性，每个校准点和质量控制工作溶液的允收值为±30％。对于精度验证，在每次每一个10-样品注射后，注射250ng/mL标准品并检查其是否可以复制(±15％)。
对于统计分析，通过使用GraphPad Prism 6(GraphPad Software，美国加利福尼亚洲圣地亚哥)，获得接收者操作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)。在基于学生t检验的比较期间，p值小于0.05(双尾)被认为是统计学上显著的。
结果
尿多胺含量
通过UPLC-MS/MS从所有样品中成功分离和量化Put、Spd、Spm及其相应的氘代内标(图1)。校准曲线均令人满意，其中r2不小于0.995(图5A-图5C)，并且所有QC测量均通过，这保证了不同日期分析的样品之间的可比性。然后将每位患者的平均尿多胺浓度归一化至其尿肌酐水平，并表示为μmol/g肌酐。(对于肌酐结果，参见表3)这是为了补偿阻碍实际量测量的任何利尿过程，参考Jung K.Enzyme activities in urine:how should we expresstheir excretion？A critical literature review.Eur J Clin Chem ClinBiochem.1991；29:725-9。
表3.所有患者的肌酐结果汇总
表4和图2A至图2C显示了不同子集的归一化多胺水平的数据和图形比较：
表4.不同子集中归一化的多胺含量的列统计信息。SEM表示平均值的标准误差。
图2A至图2C中的黑条表示每个子集的平均值，而误差条表示相应的SEM。
在所监测的三种多胺中，与包括BPH患者和HC的非癌症病例相比，在PCa患者中归一化的Spm在统计学方面(未配对学生t检验)表现出显著降低。详细地，PCa的平均值为1.47，相比而言，BPH的为5.87、HC的为5.43。t检验中p值<0.0001，这意味着在p<0.05的预设标准下的显著差异。对于归一化的Put和Spd，通过观察它们的分布或通过t检验比较它们的平均值，没有观察到明显的增强或抑制。(Put：在PCa中为1.63，在BPH中为1.21，在HC中为0.65；Spd：在PCa中为0.52，在BPH中为0.94，在HC中为2.71)。
接收者操作特征分析
图3显示了三种归一化的多胺的ROC曲线，用于评估入选的多胺对PCa诊断的诊断能力。归一化的Put、Spd和Spm的AUC分别为0.63±0.05、0.65±0.05和0.83±0.03。Spm的阈值和相应灵敏度以及特异性列于表5中。
表5.不同阈值下归一化的Spm的灵敏度和特异性
科学家已经对多胺与癌症之间的关系进行了长期研究。一般认为，血液或尿中多胺水平的增加反映了快速生长的癌组织/细胞中多胺合成水平的提高，因为它们与细胞增殖增加、凋亡减少以及影响肿瘤浸润和转移的基因表达增加有关。
Russell DH.Increased polyamine concentrations in the urine of humancancer patients.Nat New Biol.1971；233(39):144-5首先报道了各种实体瘤中尿多胺水平的增加，所述实体瘤包括卵巢畸胎瘤、直肠癌、淋巴肉瘤、骨原性肉瘤和急性髓细胞白血病。Kyoko Hiramatsu等,N1,N12-Diacetylspermine as a Sensitive and Specific NovelMarker for Early-and Late-Stage Colorectal and Breast Cancers.Clin CancerRes.2005；11(8):2986-90报道了患有早期和晚期结肠直肠癌和乳腺癌的患者的N1,N12–二乙酰精胺的增加，并确认了其作为这些癌症的新标志物的作用。在宫颈癌的情况下，Lee等,Altered urinary profiles of polyamines and endogenous steroids in patientswith benign cervical disease and cervical cancer.Cancer Lett.2003；201(2):121-31已证明Put、Spd和Spm中多胺水平的显着升高。对于肝癌，Liu等,Determination ofpolyamine metabolome in plasma and urine by ultrahigh performance liquidchromatography-tandem mass spectrometry method:Application to identifypotential markers for human hepatic cancer.Anal Chim Acta.2013；791:36-45监测了患者血浆和尿中多胺、多胺前体和分解代谢物之间的水平差异。通过仔细分析这些结果，确实可观察到不同种类的多胺基于癌症的类型显示出不同的变化。在癌症病例中尿多胺水平升高的主张不够具体。
然而，很少有报道侧重于检测PCa对尿多胺水平的影响，这反过来可为这种日益增加的常见癌症提供潜在的诊断工具。在1975年，Fair等,Urinary polyamine levels inthe diagnosis of carcinoma of the prostate.J Urol.1975；114(1):88-92报道了通过电泳PCa患者尿Spd含量显著升高，但Put和Spm则没有。Horn等,Relationship of urinarypolyamines to tumor activity and tumor volume in patients.Cancer Res.1984；44(10):4675-8在1984年通过LC和荧光检测器分析了患有乳腺肿瘤、胃肿瘤、前列腺肿瘤、女性生殖道肿瘤或未知来源的转移性癌症患者的尿Spd和Put含量，得出了不确定的结论。随着分析领域的进步，在本公开中，通过UPLC-MS/MS评估了三种天然多胺(Put、Spd和Spm)作为用于筛查PCa的尿生物标志物的潜在能力。通过经过充分验证的方法(其使用单独的氘代内标来校正每种多胺的基质效应)，认为分析性能更可靠。
根据以前关于PCa研究的文献的结果，观察到尿Spm水平下降实际上是合理的。虽然只检查了有限数量的组织样本，但是van der Graaf等,Proton MR spectroscopy ofprostatic tissue focused on the detection of spermine,a possible biomarker ofmalignant behavior in prostate cancer.MAGMA 2000；10(3):153-9报道了，与正常和良性增生前列腺组织相比，通过高效液相色谱和荧光检测器，肿瘤前列腺组织中的Spm含量降低。Swanson等,Proton HR-MAS spectroscopy and quantitative pathologic analysisof MRI/3D-MRSI-targeted postsurgical prostate tissues.Magn Reson Med.2003；50(5):944-54还报道了，通过质子高分辨率魔角旋转核磁共振光谱和定量组织病理学，前列腺组织样品中Spm水平降低。如GF 
等,Spermine and citrate asmetabolic biomarkers for assessing prostate cancer aggressiveness.PLoS One2013；8(4):e62375所报道，通过Spm和柠檬酸盐的浓度降低，可以将高级别癌症前列腺组织与低级别癌症组织区分开来。除直接监测前列腺组织外，Serkova等,The metabolitescitrate,myo-inositol,and spermine are potential age-independent markers ofprostate cancer in human expressed prostatic secretions.Prostate.2008；68(6),620-8报道了，在人类表达的前列腺分泌物中，柠檬酸盐、肌醇和Spm是PCa的潜在重要标志物，并且与对照样品相比，它们在PCa患者中都表现出水平降低。关于这些先前的研究项目，可以预见尿Spm含量降低，因为尿代表了与来自前列腺的脱落的癌细胞和分泌的前列腺产物密切相关的流体。实质上，尿具有易于获得的优点，并且其采集是非侵入性的。因此，有用的尿PCa生物标志物的发现对于当前的医疗状况是令人鼓舞的，从而可以减少不必要的活检并安排患者进行适当治疗。
要解释PCa患者Spm水平的下降，确切的机制缺乏明确的证据，因此仍在研究中。Schipper等,Polyamines and prostatic cancer.Biochem Soc Trans.2003；31(2):375-80提出了可能的解释，即由癌细胞增殖引起的细胞组织变化最终导致腔体积减小，其进而减少前列腺组织、前列腺液或甚至尿中分泌的化合物的量。但这很难解释为什么只有尿Spm水平下降。Leo等,Non-destructive quantitation of spermine in human prostatetissue samples using HRMAS 1H NMR spectroscopy at 9.4T.FEBS Letters.2001；494(1-2):112-6报道了Spm是提议的前列腺癌生长的内源性抑制剂，并且发现Spm含量与正常前列腺上皮细胞的体积百分比之间存在组织病理学量化的线性相关性。而且，最近的研究提出，多胺代谢失调，或更具体地说多胺分解代谢失调，可能与癌变有关。在前体前列腺炎性萎缩病变和早期前列腺上皮内肿瘤性病变中观察到精胺氧化酶(SMO)和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶(SSAT)表达增加，这导致Spm含量的消耗(图4)。
这一假设也得到了SSAT酶促作用导致患有泌尿生殖系统恶性肿瘤患者的尿二乙酰精胺含量显著增加这一观察结果的支持，如Hiramatsu,等,Diagnostic and prognosticusefulness of N1,N8-diacetylspermidine and N1,N12-diacetylspermine in urine asnovel markers of malignancy.J Cancer Res Clin Oncol.1997；123(10):539-45所报道。因此，如本文所述，尿Spm降低的观察结果与先前的发现和建议的机制一致。在不受理论束缚的情况下，假设SMO和SSAT的作用相互抵消，因此没有发现Spd的重大变化。
GF
等,Spermine and citrate as metabolic biomarkers forassessing prostate cancer aggressiveness.PLoS One 2013；8(4):e62375报道了前列腺Spm含量可以作为评估PCa侵袭性的生物标志物，然而，与此不同，有关尿Spm是否显示相似的癌症分级能力的决定性确定结论可根据本文公开的数据确立。根据结果，与低级别癌症(GS≤6)相比，观察到高级别癌症(GS＝8-10)中的下降，尽管不是那么显著。(高级别中1.23，而低级别中1.47；p＝0.611)。相反，它的作用类似于根据用于PCa诊断的TRUSPB发挥作用的诊断生物标志物。
PSA检测作为初步筛查检测还有很多不足之处。它已被证明会引起过度诊断，特别是在灰色区域显示值的患者中。例如，单独的血清PSA分别表现出65％和47％的适当的灵敏度和特异性。Li等,Macrophage inhibitory cytokine 1biomarker serum immunoassayin combination with PSA is a more specific diagnostic tool for detection ofprostate cancer.PLoS One.2015；10(4):e0122249在他们的研究中报道它的灵敏度和特异性甚至更差(灵敏度＝54.8％，特异性＝57.1％，AUC＝0.684)。Ferro等,ProstateHealth Index(Phi)and Prostate Cancer Antigen 3(PCA3)significantly improveprostate cancer detection at initial biopsy in a total PSA range of 2-10ng/mL.PLoS One 2013；8(7):e67687进行的另一项大规模研究表明，总PSA仅给出0.52±0.07的AUC值。当侧重于PSA>4.0ng/mL的患者时，PSA检测表现出最佳的筛查性能(AUC＝0.73±0.04；参见图6)，但它仍然比本文所述的尿Spm测试方法差。灵敏度和特异性分别为67.05％和68.75％。因此，尿Spm能够作为血清PSA>4.0ng/mL的男性的二级筛查检测来区分PCa和非癌症病例(包括BPH)，用于补充PSA检测。
为了基于本公开的第一部分得出结论，评价了三种主要的尿多胺作为PCa生物标志物的潜在作用。在Put、Spd和Spm中，在比较了它们在PCa和BPH患者中的水平之后，Spm表现出突出的PCa诊断性能，特别是对于血清PSA水平升高的患者而言。其AUC值为0.83±0.03。这可有助于应对目前由血清PSA检测的特异性差而带来的医学挑战。通过我们开发的基于镧系元素的生物探针，我们可以实现PCa筛查的简单快速定量。
本文提供了检测一种或多种尿多胺的方法，该方法包括以下步骤：
a.提供尿样；以及
b.检测测试样品中一种或多种尿多胺的存在。
在某些实施方案中，尿多胺是Put、Spm和Spd中的至少一种。
尿样可以从个体获得。所述个体可以是任何动物，诸如哺乳动物、啮齿动物、犬、猫科动物、马、牛科动物、猪、灵长类动物(例如，非人类灵长类动物)人。
在某些实施方案中，样品获自人类男性。在某些实施方案中，人类男性的PSA大于约2.0ng/mL、3.0ng/mL、4.0ng/mL、5.0ng/mL、6.0ng/mL、7.0ng/mL、8.0ng/mL、9.0ng/mL或10.0ng/mL。
在某些实施方案中，人类男性的PSA的范围为约2.0ng/mL至约10.0ng/mL、约3.0ng/mL至约10.0ng/mL或约4.0ng/mL至约10.0ng/mL。
尿样可任选地被预处理，例如，以如本文所述地除去潜在干扰性的分析物和/或蛋白质，进而改善例如精确度、处理容易程度等。
任何可用于测定样品中多胺的量的方法均可以用于测定一种或多种尿多胺水平。对适当方法进行选择完全是在普通技术人员的能力之内。用于检测和/或测定一种或多种多胺(例如，精胺)的水平的方法包括但不限于：核磁共振(NMR)、质谱法(MS)、高效液相色谱法(HPLC)、超高效液相色谱法(UPLC)、等强度HPLC、梯度HPLC、正相色谱法、反相HPLC、尺寸排阻色谱法、离子交换色谱法、毛细管电泳法、微流体法、色谱法、气相色谱法(GC)、薄层色谱法(TLC)、固定化金属离子亲和色谱法(IMAC)、亲和色谱法、免疫测定、酶法，比色测定、使用延伸栅极有机场效应晶体管(OFET)传感器的化学传感、使用半导体传感器的化学传感以及重量分析法。
在某些实施方案中，本文所述的式1的化合物和方法用于检测和/或测定一种或多种尿多胺(例如，精胺)的水平。
在某些实施方案中，用于检测一种或多种尿多胺(例如，精胺)的方法涉及美国非临时申请序列号15/784,269中描述的组合物和方法，该非临时申请公开了使用镧系配合物和DNA封端的金纳米颗粒来检测精胺的比色测定方法。
本文提供的方法和组合物还可以用于检测从怀疑患有乳腺癌的个体获得的样品中的精胺。在这些实施方案中，样品可以是包含怀疑为癌性的乳腺组织的活组织切片。因此，本文所述的方法和组合物可用于检测乳腺组织中的精胺以及确定个体对乳腺癌的易感性。
本文提供的方法和组合物还可用于检测从任何可能来源获得的样品中所存在的任何类型的多胺，因此并不局限于尿样。样品可以从任何来源获得，所述来源例如植物、土壤、废物流、水、土壤、空气、药物、化妆品、生物制品、化学制品、肉类、食品、饮料等。
检测一种或多种尿多胺的方法可进一步包括以下步骤：将测试样品中精胺的浓度与参考浓度进行比较并确定个体是否对前列腺癌具有增加的易感性，其中测试样品中精胺的浓度相对于参考样品的降低指示个体对前列腺癌的易感性增加。
在某些实施方案中，测试样品中指示个体对前列腺癌的易感性增加的精胺的浓度低于约1.8ng/mL、约1.7ng/mL、约1.6ng/mL、约1.5ng/mL、约1.4ng/mL、约1.3ng/mL、约1.2ng/mL、约1.1ng/mL或约1.0ng/mL。
在某些实施方案中，测试样品中指示个体对前列腺癌的易感性增加的精胺的浓度为约1.1ng/mL至约1.5ng/mL或约1.2ng/mL至约1.5ng/mL。
在本文提供的方法的某些实施方案中，至少约60％或更高的AUC概率值指示前列腺癌。本公开考虑其中AUC值是可计算的方法，由此以以下概率预测前列腺癌：大于约61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、73％、74％、74％、75％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％或更大。
在某些实施方案中，AUC值为约60％至约86％；约65％至约86％；约70％至约86％；约75％至约86％；约80％至约86％；约82％至约86％；约84％至约86％；或约84％至约85％。
在某些实施方案中，AUC值高达约61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、73％、74％、74％、75％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％或85％。
在本文提供的方法的某些实施方案中，该方法的灵敏度为约70％至约80％；约70％至约75％；或约75％至约80％。
在本文提供的方法的某些实施方案中，该方法的特异性为约70％至约81％；约73％至约81％；或约70％至约73％。
在本文提供的方法的某些实施方案中，该方法的灵敏度为约70％至约80％，并且相应特异性为约81％至约70％；该方法的灵敏度为约70％至约75％，并且相应的特异性为约81％至约73％；或者该方法的灵敏度为约75％至约80％，并且相应的特异性为73％至约70％。
在样品中的一种或多种尿多胺的浓度指示个体对前列腺癌易感的情况下，可以使用一种或多种确认性的前列腺癌测试来确认个体是否患有前列腺癌。因此，所描述的方法可以进一步包括对个体进行一种或多种前列腺癌检查以确定(例如，确认)所述个体是否患有前列腺癌的步骤。
前列腺癌检查可以是用于诊断前列腺癌的任何前列腺癌测试，例如直肠指检、前列腺特异性抗原测试、前列腺活组织检查、TRUSPB、前列腺的磁共振成像(MRI)扫描及其组合。
如果一种或多种确认性的前列腺癌测试确认了个体患有前列腺癌，则个体可以接受前列腺癌的治疗。因此，本文提供的方法可以进一步包括治疗个体的前列腺癌的步骤。
存在多种针对前列腺癌的治疗选择，并且正在研发新的治疗选择。在目前的实践中，对于具有筛查出的局部前列腺癌的男性而言，三种最常见的治疗选择是手术去除前列腺(根治性前列腺切除术)、放射疗法(外放射疗法、质子束疗法或近距离放射治疗)等。
因此，治疗前列腺癌的方法可以包括手术、放射、冷冻手术、热疗、激素治疗、化学疗法、疫苗、光动力疗法和其它免疫疗法或其组合。
治疗前列腺癌的方法还可以包括预防法，以防止前列腺癌或延迟前列腺癌的发展或进展。
前列腺癌治疗还包括对个体中前列腺癌的严重程度和/或进展进行监测。如果严重程度恶化和/或周围情况有所要求，则个体可以接受前列腺癌的治疗。
第二部分：用于Spm感测的镧系配合物的合成
开发了一系列可用于尿多胺的比色定量分析和定性分析的镧系化合物(1)。
其中m为1、2或3；
n在每次出现时独立地是1或2；
p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-或不存在；
对于每个实例，R1独立地是氢、烷基或环烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢、烷基、环烷基和芳基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃或炔烃；或R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃。在某些实施方案中，本文所述的式1的化合物不包括式2的化合物：
其中Ln是镧系元素；且
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca。
在某些实施方案中，Ln是选自由以下各项组成的组的镧系元素：La、Ce、Pr、Nd、Pr、Nd、Pm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb和Lu。该镧系元素可处于任何氧化态。示例性的氧化态包括但不限于+2、+3和+4。在某些实施方案中，镧系元素处于+3氧化态。在某些实施方案中，镧系元素是Eu3+。
在某些实施方案中，R2、R3、R4、R5、R6和R7独立地选自氢和烷基。在某些实施方案中，R2、R4、R5和R7独立地是烷基；并且R3和R6是氢。
在某些实施方案中，R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
其中R12独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基。
在某些实施方案中，R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；或者R8和R9一起形成选自以下的部分：
其中R12独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；并且R10是胺或者由以下部分表示：
在某些实施方案中，本文提供了由式3表示的化合物：
其中m是1、2或3；
n在每次出现时独立地是1或2；
p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-或不存在；
对于每个实例，R1独立地是氢、烷基或环烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢、烷基、环烷基和芳基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；
R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃或炔烃；并且
R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃。
在某些实施方案中，本文所述的式3的化合物不包括式2的化合物：
其中，Ln是镧系元素；且
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca。
在式3的化合物的某些实施方案中，Y为-C≡C-；R1的每个实例独立地是氢或烷基；R2、R4、R5和R7独立地是烷基；R3和R6是氢；R8和R9独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；并且R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基。
在式3的化合物的某些实施方案中，R1是氢；R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基；R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；并且R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基。
在式3的化合物的某些实施方案中，R1是氢；R2、R4、R5和R7中的每一个独立地选自氢和烷基；R3和R6是氢；R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基；R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；并且R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基。
在某些实施方案中，式3的化合物是以下化合物：
其中M是锂或钠。
在某些实施方案中，本文提供了由式4表示的化合物：
其中m是1、2或3；
n在每次出现时独立地是1或2；
p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-或不存在；
对于每个实例，R1独立地是氢、烷基或环烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢、烷基、环烷基和芳基；
R8和R9一起形成选自以下的部分：
R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃或炔烃；或R10是具有以下结构的部分：
R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃，并且R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃。
在式4的化合物的某些实施方案中，R1是氢；R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基；并且R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基和烯烃。
在某些实施方案中，式4的化合物选自由以下各项组成的组：
其中M是锂或钠。
式1的化合物可以使用任何数目的常规方法来合成。在下面的方案中描述了采用[4+2]狄尔斯-阿德尔反应的示例性合成序列。
通过任选地与进一步的合成转化相结合地对起始材料进行适当改性，可以制备出式1的其它化合物。对于制备式1的其它化合物所需的合适起始材料和必要的进一步合成转化的选择完全在本领域普通技术人员的能力之内。
不希望受理论的束缚，据信在结合多个聚(对-亚苯基亚乙炔基)(PPE)链(即，式1化合物的上部)而形成紧密结合的链内激子迁移增强的聚集体方面，Put和正丁胺明显不如Spm和Spd有效。因此，基于非特异性静电相互作用的化学传感器仍然可以在相似分析物之间表现出一定的选择性，以较高的平均值，它与Spm(带4个正电荷)和Spd(带个3正电荷)结合得更好，但与腐胺(带2个正电荷)和正丁胺(带1个正电荷)结合得较差(图7A至图7B)。
还提供了一种测试装置，其包括可用于测定样品中一种或多种尿多胺的水平的式1的化合物。测试装置可以是测试条或试纸条(dipstick)。图14至图15E描述了用于测定样品中一种或多种尿多胺的水平的测试条。该测试条包含式1的化合物。
图14至图15E中的测试条还可以与用于检测尿多胺的酶方法相结合地使用。
在某些实施方案中，本文提供了可用于测定样品中的一种或多种尿多胺的水平的试剂盒，该试剂盒包括式1的化合物和用于执行本文所述的方法的说明书。
在某些实施方案中，可用于测定样品中的一种或多种尿多胺的水平的试剂盒包括测试装置(例如，包含式1的化合物的试纸条或测试条)和用于使用测试条执行本文所述的方法的说明书。
在某些实施方案中，该试剂盒进一步包括校准的参考比色图表，其提供测试样品的颜色与测试样品中的一种或多种尿多胺的浓度之间的相关性。
在某些实施方案中，试剂盒进一步包括针对精胺的ROC图表和/或表和AUC图表/表中的至少一种，其将测试样品中精胺的浓度与个体患有前列腺癌的可能性相关联。
新开发的发色团与镧系配合物的连接通过线性/双光子激发揭示了对多胺的强结
合和特异性选择性
合成具有多胺特异性结合位点的化合物1。共轭系控制三嗪基配体的三重态并产生配体的绿色发射。化合物1的两个阴离子基团(图7B)用作与带正电荷的多胺的结合，这在热力学上是有利的。多阳离子分析物可以干扰配合物中的共轭系。在390nm激发时，可以从化合物1获得四个结构性红色f-f(5D0→7FJ，J＝1-6)发射带(图8A-8C)。在DMSO:H2O溶液中，化合物2的量子产率(Φ)和寿命分别为0.05和0.83ms。在配合物与Spm和Spd(50M)结合后，发射强度和量子产率增加超过30％(肿瘤血液样品中Spm和Spd的浓度分别为约10M和46M)。
用Spm和Spd滴定铕化合物(2)
在化合物1与多胺结合后，可以在UV激发下显示显著的f-f发射增强(图8A和8B)。已用对照铕化合物进行了对照实验(图7A)；加入多胺后，没有观察到明显的发射变化。(图8C的插图-对照化合物的基序(motif)结构，没有针对多胺的阴离子结合位点)化合物1和多胺之间的结合比(1:1)和常数(3x 10-5M)已经通过各种浓度的Spm的5D0→7F2发射强度测定。已经监测了多胺结合的寿命变化而不是发射。(在时间门控系统的帮助下，响应性毫秒寿命变化对新一代原位多胺传感器具有巨大潜力；它可以消除流体/血液样品中的纳秒/微秒干扰)。
镧系配合物对Spm和Spd的选择性
图8B显示了化合物2相对于其它生物活性阳离子例如K+、Na+、Ca2+和其它生物胺对Spm和Spd的选择性。这是特别重要的，因为这些生物胺能够干扰多胺对所提议的配合物的原位响应。未观察到其它生物胺和阳离子的明显干扰。化合物2对Spm和Spd的选择性明显高于对其它常见生物活性阳离子和生物胺的选择性(图8B)。还使用对照铕配合物进行了对照实验，所述对照铕配合物在所有测试的生物胺和阳离子存在的情况下未显示出任何显著的5D0→7F2发射增强。
用10份前列腺癌患者尿样进行的初步临床试验
从前列腺癌患者采集了150多份尿样，并通过标准方案分析其Spm水平。(通过Jaffe的方法分析肌酐水平，用LC-MS/MS检查多胺水平)。已经制定出许多多胺(图9A)，例如Spm(图9B)和Spd，的校准曲线，并且已经分选出这些多胺水平的浓度。测定的水平与
博士2014年的发现相似。
选择一系列前列腺癌患者的尿样进行临床前试验。通过LC预先测定它们的多胺含量并显示在图9A-9B中。在图10中，在UV光下，仅在10份前列腺癌患者的尿样存在的情况下，化合物1(在水溶液中10mM)的照片才显示颜色变化。通过LCMS和内标评估尿样的多胺浓度。
在实验方面(Experiment-wise)，将2mL患者尿样加入1mL铕传感器溶液中(Eu传感器的最终浓度为50μM)。将样品置于分光荧光计中，并监测响应性发射和发射寿命信号变化。本发明人还监测所提议的配合物的发射光谱，以来自健康志愿者的尿作为对照。
如图11所示，标准添加方法用于通过我们开发的生物探针进行量化，这是解决基质效应问题的常用方法。简而言之，测量尿样中多胺的信号，并以浓度＝x将结果作图。测量2个加标水平(spiked level)的读数，其通常是原始浓度的1倍和2倍。分别以x+A和x+B记录加标水平的浓度。在x轴上外推至零信号后，可以在x轴上测定尿样中多胺的浓度。
利用学生t检验比较通过两种方法获得的平均值，其中P<0.05被认为是统计学上显著的。从发光配合物和HPLC-MS/MS获得的读数之间没有太大差异(P<0.05)，并且这些读数在小范围内变化(％RSD<10)。本发明人可以推断，本发明人的发光配合物对于检测尿样中的多胺是敏感且可靠的。使用在Origin中运行的标准统计软件包分析样品频率随Spm/Spd浓度的变化。用方程式模拟高斯分布。
材料和仪器
所有化学品均来自Aldrich(中国香港)和Meryer(中国上海)。通过混合等摩尔比的磷酸、硼酸和乙酸制备Britton-Robinson(BR)缓冲液，然后使用氢氧化钠溶液调节pH。根据其它配方制备人工尿。所有标准溶液均在Milli-Q水中制备。对于尿样，其是从香港中文大学威尔斯亲王医院采集的。
通过Zetasizer Nano-ZS90系统(Malvern Instruments，中国上海)实现动态光散射(DLS)和ζ电势测量。使用Cary 8453UV-Vis光谱仪(Agilent，中国香港)记录UV-Vis吸收光谱。使用MicroCal PEAQ-ITC自动化系统(Malvern Instruments，中国上海)实现等温滴定量热研究。
对于尿样分析，利用Agilent 1290Infinity Quaternary LC System进行液相色谱分离，而质量分析则由配备了Agilent射流技术电喷雾电离源的Agilent 6460三重四极杆质谱仪(Agilent，中国香港)进行。所有孵育均在KS 260Basic Orbital Shaker(IKA，中国香港)上进行。
样品预处理程序
简而言之，将尿样自然解冻并以13,000rpm和25℃离心5分钟。然后使其通过强阴离子交换固相萃取柱(Phenomenex,Strata,100mg/3mL,USA)以保留不需要的有机酸、酚类化合物和碳水化合物。然后用浓缩的高氯酸处理该溶液，用于进一步脱蛋白，然后通过使用氢氧化钾溶液中和将其除去，以形成不溶性高氯酸钾盐。最后将其再次离心以获得上清液，用0.22uM PES过滤器过滤并进一步在水中稀释。
利用UPLC-MS/MS定量检测Spm
通过超高效液相色谱联合三重四极杆质谱仪(UPLC-MS/MS)进行Spm的量化。利用Agilent 1290Infinity Quaternary LC System进行LC分离，而质量分析则由配备了Agilent射流技术电喷雾电离源的Agilent 6460三重四极杆质谱仪进行。使用的柱是利用Agilent SB-C18保护柱(2.1x5mm,1.8μm)保护的Agilent EclipsePlus C18 RRHD(2.1x50mm,1.8μm)。
LC洗脱曲线如下优化：洗脱液A是具有0.1％HFBA的水，而洗脱液B是具有0.1％HFBA的乙腈。使洗脱液A在10分钟内从95％降至60％。然后在1分钟内使洗脱液A的梯度从60％降低至10％。然后使梯度保持恒定5分钟。然后在1分钟内使梯度从10％增加至95％，然后保持恒定8分钟。(总运行时间＝25分钟)。
自动进样器和柱温度分别设定为4℃和35℃。通过用洗脱液B以Flush Port模式进行5秒针洗3次来完成注射。每次注射10μL。
对于源参数，将干燥气体(氮气)温度设定为300℃，流速为5L/min。雾化器压力为45psi。将保护气体温度设定为250℃，流速为11L/min。将毛细管电压设定为3,500V。对于质量检测，进行了预定的多反应监测(MRM)。
式1的化合物与Spm/Spd在水溶液中的结合亲和力和选择性的测定
在靶Spm/Spd在溶液和生物介质中的不同浓度(尿/血液中的Spm-1.2μM/Spd-11.9μM的模拟水平)下，通过荧光和荧光寿命滴定检验开发的式1的化合物。还确定了这些用于Spm/Spd的传感器的生理特性和检测限度。在达到平衡后进行测量，并监测铕的发射。以I0/(I–I0)(其中I和I0分别是测量的发光强度和空白发光强度)表示的发光响应作为分析物浓度的函数被绘制。为了测定各种分析物加合物的结合强度，将一系列已知浓度的分析物溶液与各种浓度的Spm/Spd溶液混合。根据y轴截距与使用Benesi-Hildebrand方程式从最佳拟合线获得的斜率之间的比率估算结合常数KB。可以通过各种机制，例如电子转移过程(Rehm-Weller方程式)和氧化还原电势，诱导与Spm/Spd结合后的镧系配合物的信号变化，并且应用闪光光解瞬态吸收(transient absorption with flash photolysis)来理解造成发明人的镧系体系标记Spm/Spd之后的信号改变的机制。
测试化合物：
在下表中给出结合和选择性实验的结果。在含有500ppb的、最后一列中列出的胺的样品中进行选择性测定。
工业应用
本公开涉及用于前列腺癌生物标志物的尿多胺的检测。特别是，本公开提供了新的高灵敏度和特异性的变色多胺示踪剂，以及将镧系配合物作为前列腺癌诊断生物标志物用于早期前列腺癌筛查的用途，其在临床诊断应用中具有巨大的潜力。
Claims (20)
1.一种式1的化合物：
其中，
m是1、2或3；
n在每次出现时独立地是1或2；
p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-或不存在；
对于每个实例，R1独立地是氢、烷基或环烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢、烷基、环烷基和芳基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；或者R8和R9共同形成选自由以下各项组成的组的部分：
R10是氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃或炔烃；或R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立地选自氢、卤化物、氰基、硝基、羟基、醚、硫醚、胺、酰胺、酰氨基、酯、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、烯烃和炔烃；条件是式1的化合物不包括式2的化合物：
其中，
Ln是镧系元素；并且
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R11和R12的每个实例独立地是氢、卤化物、硝基、氰基、醚或烷基。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、硝基、氰基、醚和烷基；或者R8和R9一起形成选自由以下各项组成的组的部分：
其中R11和R12的每个实例独立地是氢、卤化物、硝基、氰基、醚或烷基。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中R10是氢、卤化物、硝基、氰基、醚、二烷基氨基或烷基；或R10是具有以下结构的部分：
6.根据权利要求2所述的化合物，其中R1、R3和R6的每个实例是氢。
7.根据权利要求3所述的化合物，其中R8和R9中的每一个独立地选自氢、卤化物、硝基、氰基、醚和烷基；或者R8和R9一起形成选自由以下各项组成的组的部分：
8.根据权利要求3所述的化合物，其中R10是氢、卤化物、硝基、氰基、醚、二烷基氨基或烷基；或R10是具有以下结构的部分：
9.根据权利要求1所述的化合物，其中m是1、2或3；n在每次出现时独立地是1或2；p在每次出现时独立地是1、2、3或4；
Ln是镧系元素；
每个M都独立地选自由以下各项组成的组：Na、Li和K；或两个M一起表示Mg或Ca；
Y为-C≡C-；
对于每个实例，R1独立地是氢或烷基；
R2、R3、R4、R5、R6和R7中的每一个独立地选自氢和烷基；
R8和R9中的每一个独立地选自氢和烷基；或者R8和R9一起形成选自由以下各项组成的组的部分：
R10是氢、烷基和胺；或R10是具有以下结构的部分：
R11和R12的每个实例独立地选自氢和烷基。
10.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自由以下各项组成的组：
其中M是锂或钠。
11.一种检测一种或多种尿多胺的方法，所述方法包括以下步骤：
c.提供尿样；
d.使所述尿样与根据权利要求1所述的化合物接触，从而形成测试样品；以及
e.检测所述测试样品中所述一种或多种尿多胺的存在。
12.根据权利要求11所述的方法，其中从个体获得所述尿样。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述一种或多种尿多胺是精胺。
14.根据权利要求12所述的方法，其中检测所述一种或多种尿多胺的存在的步骤包括测定所述一种或多种尿多胺的浓度。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述一种或多种尿多胺是精胺。
16.根据权利要求15所述的方法，进一步包括以下步骤：将所述测试样品中精胺的浓度与参考浓度进行比较并确定所述个体是否对前列腺癌具有增加的易感性，其中所述测试样品中精胺的浓度相对于参考样品的降低指示所述个体对前列腺癌的易感性增加。
17.根据权利要求16所述的方法，进一步包括以下步骤：对所述个体进行前列腺检查以确定所述个体是否患有前列腺癌并且在所述个体患有前列腺癌的情况下用放射疗法或化学疗法治疗所述个体。
18.一种用于治疗个体中的前列腺癌的方法，所述方法包括以下步骤：
f.提供来自所述个体的尿样；
g.使所述尿样与根据权利要求1所述的化合物接触，从而形成测试样品；
h.测定所述测试样品中精胺的浓度；
i.将所述测试样品中精胺的浓度与参考浓度进行比较并确定所述个体是否对前列腺癌具有增加的易感性，其中所述测试样品中精胺的浓度相对于参考样品的降低指示所述个体对前列腺癌的易感性增加；
j.对所述个体进行前列腺检查以确定所述个体是否患有前列腺癌；以及
k.如果所述个体患有前列腺癌，则用放射疗法或化学疗法治疗所述个体。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述测定精胺的浓度的步骤包括将所述测试样品的颜色与校准的参考比色图表进行比较。
20.根据权利要求18所述的方法，其中所述个体是人。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US15/784,269 | 2017-10-16 | ||
| US15/784,269 US10527627B2 (en) | 2016-10-17 | 2017-10-16 | Urinary polyamines as prostate cancer detection biomarkers |
| US201862626149P | 2018-02-04 | 2018-02-04 | |
| US62/626,149 | 2018-02-04 | ||
| PCT/CN2018/083241 WO2019076013A1 (en) | 2017-10-16 | 2018-04-16 | URINARY POLYAMINES AS BIOMARKERS FOR DETECTING PROSTATE CANCER |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111201224A true CN111201224A (zh) | 2020-05-26 |
| CN111201224B CN111201224B (zh) | 2023-04-25 |
Family
ID=66173529
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201880065553.1A Active CN111201224B (zh) | 2017-10-16 | 2018-04-16 | 作为前列腺癌检测生物标志物的尿多胺 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111201224B (zh) |
| TW (1) | TWI686395B (zh) |
| WO (1) | WO2019076013A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2021213494A1 (en) * | 2020-04-23 | 2021-10-28 | YatHing Biotechnology Company Limited | Methods related to the diagnosis of prostate cancer |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101782572A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-07-21 | 孙晓平 | 一种尿多胺检测试剂盒 |
| US20130116131A1 (en) * | 2011-11-08 | 2013-05-09 | Caldera Health Limited | Methods and materials for the diagnosis of prostate cancers |
| CN105158248A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-12-16 | 苏州锐霖生物科技有限公司 | 一种尿液单羟酚类代谢物检测试剂的制备方法 |
| WO2016187183A1 (en) * | 2015-05-18 | 2016-11-24 | Health Research, Inc. | Compositions and methods for therapy of prostate cancer using drug combinations to target polyamine biosynthesis and related pathways |
-
2018
- 2018-04-16 TW TW107112944A patent/TWI686395B/zh active
- 2018-04-16 CN CN201880065553.1A patent/CN111201224B/zh active Active
- 2018-04-16 WO PCT/CN2018/083241 patent/WO2019076013A1/en active Application Filing
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101782572A (zh) * | 2010-02-10 | 2010-07-21 | 孙晓平 | 一种尿多胺检测试剂盒 |
| US20130116131A1 (en) * | 2011-11-08 | 2013-05-09 | Caldera Health Limited | Methods and materials for the diagnosis of prostate cancers |
| WO2016187183A1 (en) * | 2015-05-18 | 2016-11-24 | Health Research, Inc. | Compositions and methods for therapy of prostate cancer using drug combinations to target polyamine biosynthesis and related pathways |
| CN105158248A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-12-16 | 苏州锐霖生物科技有限公司 | 一种尿液单羟酚类代谢物检测试剂的制备方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| CHOW C.F.ET AL.: ""Design and Synthesis of Heterobimetallic Ru(Ⅱ)-Ln(Ⅲ)Complexes as Chemodosimetric Ensembles for the Detection of Biogenic Amine Odorants"", 《ANALYTICAL CHEMISTRY》 * |
| FLETCHER,J.T.ET AL.: ""Spermine detection via metal-mediated ethynylarene "turn-on"fluorescence signaling"", 《SENSOR AND ACTUATORS》 * |
| KADJANE P.ET AL.: ""Improving Visible Light Sensitization of Luminescent Europium Complexes"", 《JOURNAL OF FLUORESCENCE》 * |
| LIU,Z.D.ET AL.: ""Highly selective colorimetric detection of spermine in biosamples on basis of the non-crosslinking aggregation of ssDNA-capped gold nanoparticles"", 《TALANTA》 * |
| MARTINES,N.J. ET AL.: ""Sensitive and Selective Plasmonic Assay for Spermine as Biomarker in Human Urine"", 《ANALYTICAL CHEMISTRY》 * |
| TSOI，TIK-HUNG ET AL.: ""Urinary Polyamines:A Pilot Study on Their Roles as Prostate Cancer Detection Biomarkers"", 《PLOS ONE》 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2019076013A1 (en) | 2019-04-25 |
| CN111201224B (zh) | 2023-04-25 |
| TWI686395B (zh) | 2020-03-01 |
| TW201917130A (zh) | 2019-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Selevsek et al. | Systematic quantification of peptides/proteins in urine using selected reaction monitoring | |
| Hu et al. | Advantages of time-resolved fluorescent nanobeads compared with fluorescent submicrospheres, quantum dots, and colloidal gold as label in lateral flow assays for detection of ractopamine | |
| EP3526213B1 (en) | Urinary polyamines as prostate cancer detection biomarkers | |
| Song et al. | A reversible fluorescent probe based on C [double bond, length as m-dash] N isomerization for the selective detection of formaldehyde in living cells and in vivo | |
| Guo et al. | Turn-on fluorescence detection of β-glucuronidase using RhB@ MOF-5 as an ultrasensitive nanoprobe | |
| EP1931996B1 (en) | Free ngal as a biomarker for cancer | |
| Tian et al. | A copper based enzyme-free fluorescence ELISA for HER2 detection | |
| US20070292900A1 (en) | Zinc-based screening test and kit for early diagnosis of prostate cancer | |
| Zhao et al. | Rapid quantitation of human epididymis protein 4 in human serum by amplified luminescent proximity homogeneous immunoassay (AlphaLISA) | |
| Ko et al. | Metal-doped inorganic nanoparticles for multiplex detection of biomarkers by a sandwich-type ICP-MS immunoassay | |
| Attia et al. | A new method for early diagnosis of liver cancer using a biosensor embedded in an alginate polymer thin film | |
| US10816478B2 (en) | Urinary polyamines as prostate cancer detection biomarkers | |
| Cao et al. | Dual-color quantum dot-loaded nanoparticles based lateral flow biosensor for the simultaneous detection of gastric cancer markers in a single test line | |
| Chen et al. | A highly sensitive label-free resonance light scattering assay of carcinoembryonic antigen based on immune complexes | |
| CN111201224B (zh) | 作为前列腺癌检测生物标志物的尿多胺 | |
| Xu et al. | Exploration of aminopeptidase N as new biomarker for early diagnosis of thyroid cancer | |
| Garcia-Fernandez et al. | Time-gated luminescence acquisition for biochemical sensing: miRNA detection | |
| US20070207509A1 (en) | Zinc-based screening test and kit for early diagnosis of prostate cancer | |
| Li et al. | Serum metabolomic analysis of human upper urinary tract urothelial carcinoma | |
| Hou et al. | Quantitative detection of urinary bladder cancer antigen via peptide-immobilized magnetic bead-based SERS probe | |
| US20070148712A1 (en) | Breast cancer and prostate cancer assessment | |
| Muhammad et al. | Monitoring of circulating exosomal immuno checkpoint in tumor microenvironment through ultrasensitive aptamer-functionalized SERS probes | |
| Sanjeevan Lekshmi et al. | Europium (III) Incorporated Bovine Serum Albumin Stabilized Gold Nanoclusters as Fluorescent Probes for the Detection of Sarcosine, a Prostate Cancer Biomarker | |
| Attia et al. | Terbium bipyridyl complex as a photo probe for the determination of carbohydrate antigen CA15. 3 in different breast cancer patient samples | |
| US20050019844A1 (en) | Method of detecting malignant tumor and detection kit |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |