CN111053737A - 一种提高难溶性药物口服吸收的靶向小肠转运体的聚合物胶束组合物 - Google Patents

一种提高难溶性药物口服吸收的靶向小肠转运体的聚合物胶束组合物 Download PDF

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Abstract

本发明属于药物制剂领域，涉及一种提高难溶性药物口服吸收的聚合物胶束组合物。该组合物由难溶性药物、两亲性聚合物和连接小肠上皮细胞表达的转运体的底物的两亲性聚合物构成的胶束以及任选的可药用辅料组成。经实验证明，本发明组合物可明显提高难溶性药物的口服吸收，为难溶性药物的口服提供了一种新型的制剂策略。

Description

一种提高难溶性药物口服吸收的靶向小肠转运体的聚合物胶 束组合物
技术领域
本发明属于药物制剂领域，涉及一种提高难溶性药物口服吸收的靶向小肠转运体的聚合物胶束组合物，该组合物也可用于注射给药。
背景技术
口服具有简单、方便、经济、患者顺应性好等优点，是最为广泛的给药方式，尤其对于慢性病的治疗。而对于BCS II、IV类药物，由于其水溶性差和/或渗透性差，难以透过胃肠道上皮细胞，口服生物利用度较低，只能以增大剂量提高疗效为代价，这会引起毒副作用的增加和用药成本的上升。因此，提高难溶性药物的口服吸收是药剂学领域的研究热点和难点。
近年来，随着纳米技术的发展，纳米载体(聚合物胶束、纳米粒、微乳等)广泛应用于难溶性药物的口服递送。聚合物胶束是由两亲性分子在水溶液中自组装形成的具有核-壳结构的纳米载体，其作为口服药物递送系统，有如下优势：(1)疏水链段构成的疏水内核可以包载难溶性药物，提高其溶解度和渗透性；亲水链段构成的亲水外壳可以保护药物免受降解，提高其胃肠道稳定性。(2)粒径约为几十纳米，胶束在吸收入血之后，因其柔韧性的亲水性外壳，大大降低被网状内皮系统识别和摄取的机会，从而延长体内作用时间，并通过高渗透性和滞留性效应在炎症或肿瘤组织脉管部位蓄积实现被动靶向。(3)高度的热力学稳定性和动力学稳定性使聚合物胶束的结构在临界胶束浓度(CMC)以下时不易被破坏，即具有很高的抗稀释能力。(4)载体材料来源丰富，制备工艺简单。(5)胶束表面易于进行化学修饰(如连接抗体、配体、转运体底物等)，通过与特定组织和细胞表面特异性表达的抗原、受体、转运体等相互作用，实现聚合物胶束的靶向给药，进一步提高药物的递送效率和治疗指数。因此，聚合物胶束由于其优良的性质和作为口服给药载体的潜力而备受关注。
对于口服递送的药物，必须经过胃肠道上皮进入体循环，故而胃肠道是难溶性药物口服吸收的主要屏障。虽然聚合物胶束可通过改善药物的溶解度和增强药物的膜渗透性或通过抑制肠粘膜中的药物外排转运蛋白来提高药物的吸收，但其效果仍不尽如人意。究其可能的原因是：虽然聚合物胶束成千上万倍提高了难溶性药物的溶解度，但药物的跨膜转运效能却只提高了几倍至十几倍。因此，如何针对小肠上皮的特点，进一步有效提高聚合物胶束的跨膜转运效能，进而大幅提高难溶性药物的口服吸收是当前亟待解决的重大难题，值得深入探索和探究。
近年来,随着分子生物学技术的发展,肠道药物转运体的研究取得了飞速进步,人们认识到了药物在肠道的吸收不只是经过简单的被动扩散,有些药物还通过肠道上皮细胞黏膜上的药物转运体来实现。肠道药物转运体按其功能分为两大类。第一类是具有外排作用而降低药物生物利用度的外排转运体，包括多药耐药蛋白(MDR)、多药耐药相关蛋白(MRPs)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)等，其中MDR1称为P-糖蛋白(P-gp)；第二类是具有摄取作用而促进药物吸收的摄取转运体，如寡肽转运体(PEPT1)、葡萄糖转运体(GLUT)、有机阳离子转运体(OCT)、新型有机阳离子转运体(OCTN)、有机阴离子转运体(OATP)、单羧酸转运体(MCT)、胆酸转运体(ASBT)和氨基酸转运体(LAT)等。在药物研究和新药研发过程中，肠道转运体已成为改善药物口服吸收和提高生物利用度的靶点。尽管基于转运体底物对药物进行修饰的前药策略展现出良好的前景，但对于大多数药物来说，由于其本身结构的限制，结构修饰还是具有较大的局限性。现有技术中未见有关转运体底物修饰的纳米载体用于口服的研究报道。
因此，研制一种提高难溶药物的溶解度、增强小肠上皮细胞的摄取和跨膜转运，以促进难溶药物的口服吸收的新型聚合物胶束纳米载体，有着广阔的应用前景。
发明内容
本发明的目的在于克服常规纳米载体透膜性的不足以及难溶性药物吸收不高的问题。
一方面，本发明提供一种用于提高难溶性药物口服吸收的聚合物胶束组合物。
另一方面，本发明提供难溶性药物的聚合物胶束组合物用于口服给药的用途。也可用于注射给药。
根据本发明的一个方面，其提供一种用于口服的难溶性药物的聚合物胶束组合物，其包含难溶性药物、两亲性聚合物和连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的两亲性聚合物构成的胶束以及任选的可药用辅料。
本发明还涉及制备聚合物胶束组合物的方法，该方法选自透析法、薄膜分散法、乳化法、溶剂挥发法、冻干法、共溶剂挥发法、注入法等。胶束的平均粒径在100nm以下。
本发明组合物可根据任何常规方法配制成各种口服制剂，例如片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂等，以及注射剂等。
本发明组合物可用于制备治疗各种疾病的难溶性药物。
本发明组合物用于提高难溶性药物的溶解度和口服生物利用度。
本发明组合物包括作为活性成分的难溶性药物，还包括两亲性聚合物和连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的两亲性聚合物构成的胶束。本发明的组合物使难溶性药物的溶解性和口服吸收大大提高。所述的难溶性药物选自但不限于紫杉醇、多西紫杉醇、9-硝基喜树碱、10-羟基喜树碱、伊曲康唑、替尼泊苷、依托泊苷、阿霉素、姜黄素、他莫西芬、和厚朴酚、环孢素A、他克莫司、布洛芬、布地奈德、氟米龙、酚丁胺、地塞米松、醋酸可的松、丙酸氟卡替松、水飞蓟宾、水飞蓟素、黄体酮、前列地尔、氯霉素、甲糖宁、表柔比星、普鲁泊福、卤泛曲林、阿瑞匹坦和非诺贝特，优选选自紫杉醇、多西紫杉醇、和厚朴酚、环孢素A和他克莫司。
本发明组合物中难溶性药物与聚合物的质量比为1∶50-1∶5，优选1:30-1∶10。
两亲性聚合物是构成本发明组合物中胶束的主要成分。可在本发明中使用的两亲性聚合物包含选自下述的亲水链段：聚乙二醇(PEG)、聚氧乙烯(PEO)、聚(2-乙基-2-噁唑啉)(PEOz)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、聚醚(如Pluronic,Poloxamer)等。优选PEG、PEOz，更优选PEG。聚乙二醇为聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚。亲水链段具有600Da-20000Da的分子量，优选1000Da-10000Da，更优选2000Da-6000Da。在本发明中使用的两亲性聚合物包含选自下述的疏水链段：聚氧丙烯、磷脂、磷脂衍生物、聚酯、维生素E琥珀酸酯(VES)、聚氨基酸等，如聚赖氨酸、聚门冬氨酸、聚(N-麦芽糖酰-L-赖氨酸)、聚精氨酸、聚乳酸(PLA)、聚(N-硬脂酸苄酯-L-赖氨酸)、聚油酸乙烯酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乙交酯丙交酯(PLGA)等。优选聚酯。优选PLA和PLGA，更优选PLA。两亲性聚合物是二嵌段共聚物和三嵌段共聚物和/或它们的混合物。疏水链段具有700Da-20000Da的分子量，优选1000Da-6000Da，更优选2000Da-5000Da。
所述的小肠上皮细胞表达的转运体的底物选自但不限于寡肽转运体PepT1的底物，例如二肽和三肽、有机阳离子转运体OCT的底物，例如胆碱、新型有机阳离子转运体OCTN1和OCTN2的底物，例如维拉帕米和肉毒碱、有机阴离子转运体OATP的底物，例如普伐他汀、单羧酸转运体MCT的底物，例如水杨酸、胆酸转运体ASBT的底物，例如去氧胆酸、葡萄糖转运体GLUT的底物，例如果糖、氨基酸转运体LAT的底物，例如左旋多巴、OSTα-OSTβ和MRP3的底物。优选寡肽转运体PepT1的底物、新型有机阳离子转运体2(OCTN2)的底物、胆酸转运体ASBT的底物。
所述的胶束组合物，其中连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的聚合物的含量为组合物质量的至少5％，优选至少20％，更优选至少50％。
另外，本发明还包括任选的药学上可接受的辅料。
另一方面，本发明还涉及难溶性药物的聚合物胶束组合物用于治疗相关疾病的用途。
再一方面，本发明涉及以下方案：
方案1.一种提高难溶性药物口服吸收的聚合物胶束组合物，其包含难溶性药物、两亲性聚合物和连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的两亲性聚合物构成的胶束及任选的其他可药用辅料。
方案2.如方案1所述的聚合物胶束组合物，其中的难溶性药物选自但不限于紫杉醇、多西紫杉醇、9-硝基喜树碱、10-羟基喜树碱类、氟尿嘧啶、氨甲喋呤、伊曲康唑、替尼泊苷、依托泊苷、阿霉素、姜黄素、和厚朴酚、环孢素A、他克莫司、布洛芬、布地奈德、氟米龙、酚丁胺、地塞米松、醋酸可的松、丙酸氟卡替松、水飞蓟宾、水飞蓟素、黄体酮、前列地尔、氯霉素、甲糖宁、表柔比星、普鲁泊福、卤泛曲林、阿瑞匹坦和非诺贝特，优选选自紫杉醇、多西紫杉醇、和厚朴酚、环孢素A和他克莫司。
方案3.如方案1-2任一项所述的聚合物胶束组合物，其中的两亲性聚合物包含选自下述的亲水链段：聚乙二醇(PEG)、聚氧乙烯(PEO)、聚(2-乙基-2-噁唑啉)(PEOz)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、聚醚(如Pluronic,Poloxamer)等。优选PEG、PEOz，更优选PEG。聚乙二醇为聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚。亲水链段具有600Da-20000Da的分子量，优选1000Da-10000Da，更优选2000Da-6000Da。
方案4.如方案1-2任一项所述的聚合物胶束组合物，其中的两亲性聚合物包含选自下述的疏水链段：聚氧丙烯、磷脂、磷脂衍生物、聚酯、维生素E琥珀酸酯(VES)、聚氨基酸等，如聚赖氨酸、聚门冬氨酸、聚(N-麦芽糖酰-L-赖氨酸)、聚精氨酸、聚乳酸(PLA)、聚(N-硬脂酸苄酯-L-赖氨酸)、聚油酸乙烯酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乙交酯丙交酯(PLGA)等。优选聚酯。优选PLA和PLGA，更优选PLA。两亲性聚合物是二嵌段共聚物和三嵌段共聚物和/或它们的混合物。疏水链段具有700Da-20000Da的分子量，优选1000Da-6000Da，更优选2000Da-5000Da。
方案5.如方案1-4所述的聚合物胶束组合物，所述的小肠上皮细胞表达的转运体的底物选自但不限于寡肽转运体PepT1的底物，例如二肽和三肽、有机阳离子转运体OCT的底物，例如胆碱、新型有机阳离子转运体OCTN1和OCTN2的底物，例如维拉帕米和肉毒碱、有机阴离子转运体OATP的底物，例如普伐他汀、单羧酸转运体MCT的底物，例如水杨酸、胆酸转运体ASBT的底物，例如去氧胆酸、葡萄糖转运体GLUT的底物，例如果糖、氨基酸转运体LAT的底物，例如左旋多巴、OSTα-OSTβ和MRP3的底物。优选寡肽转运体PepT1的底物、新型有机阳离子转运体2(OCTN2)的底物、胆酸转运体ASBT的底物。
方案6.如方案1-5所述的聚合物胶束组合物，其中连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的聚合物的含量为组合物质量的至少5％，优选至少20％，更优选至少50％。
方案7.如方案1-6所述的聚合物胶束组合物，其中的难溶性药物与聚合物的质量比为1∶50-1∶5，优选1∶30-1∶10。
方案8.如方案1-7任一项所述的聚合物胶束组合物用于制备治疗相关疾病的药物的用途。
方案9.如方案8所述的用途，其特征在于通过口服或注射给药。
方案10.如方案9所述的用途，其特征在于通过口服给药。
为了达到本发明的目的，本发明进行了本发明组合物的体外释放实验、Caco-2细胞摄取实验、体外跨Caco-2细胞单层转运实验和在体小肠吸收实验。
附图说明 参考附图1-3，通过本发明的以下描述，本发明的上述及其它目的和特征将是显而易见的。
附图1显示了本发明实施例3的粒径分布(A)和透射电镜图(B)。
附图2显示了本发明实施例3在模拟胃液和模拟肠液中的体外释放行为。
附图3显示本发明实施例3的小肠吸收情况。
如上所述，本发明的聚合物胶束组合物使难溶性药物的口服吸收显著提高。
以下实施例用于进一步详细说明本发明，但绝对不是对本发明范围的限制。
具体实施方式
实施例1片剂的制备
将90mg的PEG5000-PLA5000、10mg的连接肉毒碱的PEG5000-PLA5000与20mg的环孢素A充分溶解于适量的DMSO中，然后转移至截留分子量为3500的透析袋中，在1L蒸馏水中透析24h，每隔4h更换一次新鲜蒸馏水。透析完成后将透析袋中的溶液取出，在3000rpm下离心30min，取上清液，经0.22μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
在所得的胶束组合物中加入适量的PEG2000，混合均匀，冻干。然后将冻干粉过80目筛，与微晶纤维素混匀，加入淀粉浆制成软材，用14目筛制粒后，置于40℃干燥后过12目筛整粒，加入干淀粉以及硬脂酸镁混匀后压片，即得本发明组合物的片剂。
实施例2片剂的制备
将90mg的PEG5000-PLA5000、20mg连接肉毒碱的PEOz6000-PLA5000与10mg的紫杉醇充分溶解于适量的DMSO中，然后转移至截留分子量为3500的透析袋中，在1L蒸馏水中透析24h，每隔4h更换一次新鲜蒸馏水。透析完成后将透析袋中的溶液取出，在3000rpm下离心30min，取上清液，经0.22μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
在所得的胶束组合物中加入适量的PEG4000，混合均匀，冻干。然后将冻干粉过80目筛，与微晶纤维素混匀，加入淀粉浆制成软材，用14目筛制粒后，置于40℃干燥后过12目筛整粒，加入干淀粉以及硬脂酸镁混匀后压片，即得本发明组合物的片剂。
实施例3硬胶囊的制备
将90mg的PEG5000-PLA3000、15mg连接肉毒碱的PEOz5000-PLA2000与10mg的环孢素A充分溶解于适量的甲醇中，旋转蒸干甲醇后，加入去离子水进行水化，经0.22μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
在所得的胶束组合物中加入适量的PEG4000，混合均匀，冻干。然后将冻干粉填充在胶囊中，得到本发明组合物的胶囊剂。
实施例4口服液的制备
将50mg的PEG5000-PLA2500、50mg连接去氧胆酸的PEG5000-PLA2500与5mg的水飞蓟宾充分溶解于适量的甲醇中，旋转蒸干甲醇后，加水进行水化，经0.45μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
然后将其灌装在西林瓶中，加盖，密封，辐射灭菌即得。
实施例5口服液的制备
将50mg的PEG2000-PLA1500、50mg连接甘氨酰肌氨酸的PEG2000-PLA1500与20mg的依托泊苷充分溶解于适量的甲醇中，旋转蒸干甲醇后，加水进行水化，经0.45μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
然后将其灌装在西林瓶中，加盖，密封，辐射灭菌即得。
实施例6冻干粉针的制备
将60mg的PEG5000-PLA10000、40mg连接肉毒碱的PEG5000-PLA10000与10mg的多西他赛充分溶解于适量的DMSO中，然后转移至截留分子量为3500的透析袋中，在1L蒸馏水中透析24h，每隔4h更换一次新鲜蒸馏水。透析完成后将透析袋中的溶液取出，在3000rpm下离心30min，取上清液，经0.45μm的微孔滤膜过滤得胶束组合物。
在所得的胶束组合物中加入适量的PEG4000，混合均匀，冻干，密封，辐射灭菌即得。
试验例1体外释放试验
为了考察包含在本发明聚合物胶束中包载药物的释放行为，如下对实施例3中的胶束进行体外释放的考察。用HPLC法测定释放介质中环孢素A的含量。
表1环孢素A在SIF和SGF中的累积释放百分率(n＝3)
Figure BDA0001828939460000061
将实施例3的胶束冻干粉末用适量去离子水溶解，使环孢素A的含量为200μg/mL，取2mL胶束溶液置于预先活化的透析袋(MWCO 3500)中，用细线将透析袋两端扎紧密封，然后置于30mL含有0.2％吐温80(w/v)的模拟肠液(SIF,pH＝6.8)和模拟胃液(SGF,pH＝1.2)的释放介质中，每个样品均平行操作三份，在37℃、100rpm的水浴摇床中振荡。分别在预定时间点取出1mL释放介质，同时补充1mL新鲜释放介质。取出的释放样品经0.22μm微孔滤膜过滤后，用HPLC法测定环孢素A的含量，并计算药物的累积释放百分率。
释放结果如表1和图2。
由表1和图2的结果可见，本发明实施例3的聚合物胶束组合物在模拟肠液和模拟胃液中的释放行为较为接近，且释放缓慢，说明本发明聚合物胶束组合物在胃、肠中具有较好的稳定性。
试验例2细胞摄取试验
为了考察本发明聚合物胶束组合物的细胞摄取，如下采用Caco-2细胞对实施例3中的本发明制剂进行细胞摄取研究，为便于分析，以荧光探针香豆素6(简写为C6)作为模拟药物，并以未经肉毒碱修饰的聚合物胶束作为对照。用流式细胞仪测定细胞内C6的荧光强度。
将Caco-2细胞培养于含10％胎牛血清、100IU/mL青霉素-G和0.1mg/mL链霉素、1％非必须氨基酸的DMEM完全培养液中，培养瓶置于37℃、5％CO2和相对湿度90％的恒温培养箱中。待细胞达到80％-90％汇合时，进行消化并计数。用DMEM完全培养液将细胞稀释成1×105个/mL的细胞悬液，接种于6孔细胞培养板中，每孔3mL。将6孔细胞培养板置于5％CO2、相对湿度为90％的37℃恒温培养箱中进行培养。36h后，进行细胞摄取实验。实验前所有溶液均置于37℃水浴锅中预热，轻轻吸去6孔细胞培养板中的培养液，加入适量HBSS漂洗三次。加入2mL载C6的胶束溶液，置于37℃培养箱中培养1h。1h后，吸弃胶束溶液，用4℃PBS漂洗3次。随后每孔加入0.4mL 0.25％胰蛋白酶消化液，置于37℃培养箱中孵育5min，待细胞消化成圆球状后加入0.6mL含血清培养液终止消化，转移至1.5mL离心管中。将细胞悬液于1500rpm离心5min，弃去上清液，加入1mL预冷PBS，吹打成细胞悬液后离心，上述漂洗过程重复三次。将最终得到的细胞团用0.5mL预冷PBS重悬，转移至流式管中，用流式细胞仪测定细胞内C6的荧光强度(激发波长462nm/发射波长509nm)，比较细胞对各载药胶束的摄取情况，每次分析所用数不少于1×105个，收集的细胞数为1×104个。数据使用FCS Express V3软件进行分析。结果如表2所示，实施例3的荧光强度是未经肉毒碱修饰的聚合物胶束的2.21倍，说明本发明组合物能够明显提高C6的细胞摄取，显示了本发明组合物的优越性。
表2聚合物胶束的细胞摄取(n＝3)
Figure BDA0001828939460000081
试验例3体外跨膜转运试验
为了考察本发明聚合物胶束组合物的跨膜转运效能，如下采用Caco-2细胞单层模型对实施例3中的本发明制剂进行跨膜转运研究，并以未经肉毒碱修饰的聚合物胶束作为对照。用HPLC法测定基底侧溶液中环孢素A的含量。
Caco-2细胞培养同上。待细胞达到80％-90％汇合时，进行消化并计数。用DMEM完全培养液将细胞稀释成2×105个/mL的细胞悬液。在Transwell板的顶侧(AP侧)加入0.5mL的细胞悬液，基底侧(BL侧)加入1.5mL DMEM完全培养液。将Transwell板置于5％CO2、相对湿度为90％的37℃恒温培养箱中进行培养。每隔一天换一次培养液。培养至21天后，跨膜电阻(TEER)值大于250Ω/cm2的细胞单层可用于进行转运实验。实验前所有溶液均置于37℃水浴中预热。轻轻吸去Transwell板两侧的培养液，在AP和BL侧分别加入0.5mL和1.5mL的HBSS，轻轻摇动后吸弃HBSS以清洗残留的培养液，同法操作3次，再在AP和BL侧分别加入0.5mL和1.5mL的新鲜HBSS，在37℃培养箱中平衡30min。吸弃两侧的HBSS，在AP侧加入0.5mL实施例3的HBSS溶液或对照组(未经肉毒碱修饰的聚合物胶束)的HBSS溶液，在BL侧加入1.5mL 37℃新鲜HBSS，将Transwell板置于37℃空气浴摇床中进行振摇。分别于30、60、90、120、150min从BL侧取出全部溶液，同时补加等量新鲜的HBSS溶液。使用HPLC法测定环孢素A的含量。计算表观渗透系数Papp。结果如表3所示。实施例3的Papp是对照组的2.14倍，说明本发明聚合物胶束的跨膜转运优于未经肉毒碱修饰的聚合物胶束。
表3聚合物胶束跨Caco-2细胞单层的表观渗透系数(n＝3)
Figure BDA0001828939460000082
试验例4在体小肠吸收试验
为了考察本发明聚合物胶束组合物的在体小肠吸收情况，如下对实施例3中的本发明制剂进行小鼠灌胃研究，以荧光探针DiI作为模型药物，用激光共聚焦显微镜观察药物在体小肠吸收情况，并以未经肉毒碱修饰的聚合物胶束作为对照。
将BALB/C裸鼠随机分成两组，每组3只。分别用0.1mL载DiI的实施例3和对照胶束(未经肉毒碱修饰的聚合物胶束)溶液灌胃给药。90min后，处死小鼠。剖腹，小心分离取出小肠段，注意不要伤及肠系膜和血管。取出5cm长度小肠段，用生理盐水漂洗，用组织包埋剂Tissue-Tek OCT将小肠段包埋在锡箔纸立方小盒中，-20℃冷冻过夜，随后可在-80℃条件下长期保存。-20℃冷冻过夜后，可对小肠段进行组织切片，利用切片机将其切为20μm厚度的切片，并粘附于多聚赖氨酸载玻片上。然后用4％多聚甲醛室温固定15min，吸弃多聚甲醛试液，用PBS漂洗3次。随后，用0.5μg/mL Hoechst试液室温下染色15min，吸弃染色液，用PBS漂洗3次。滴加抗荧光衰减封片剂，并盖上盖玻片。将以上制备好的样品用激光扫描共聚焦显微镜观察，先利用共焦显微镜内置相差观测系统调节样品焦距至视野清晰，然后利用不同荧光探针激发光波长差异进行荧光分析。Hoechst和DiI分别采用365nm和549nm激发光通道检测。结果如图3所示。Hoechst染料为DNA特异性荧光探针，使细胞核呈亮蓝色荧光，DiI呈现红色荧光，代表胶束的分布情况。结果表明，不仅在上皮细胞上实施例3的红色荧光信号明显强于对照组，而且在绒毛内的上皮基底侧也观察到实施例3的更强的红色荧光，说明实施例3的小肠吸收明显高于对照组，即本发明肉毒碱修饰的聚合物胶束的小肠吸收明显优于未经肉毒碱修饰的聚合物胶束。
虽然已利用上述具体的实施方案对本发明进行了描述，但应认识到，本领域的技术人员还可进行各种的改进和改变，而且它们也应如权利要求书限定的本发明的范围之内。

Claims (10)

1.一种提高难溶性药物口服吸收的聚合物胶束组合物，其包含难溶性药物、两亲性聚合物和连接小肠上皮细胞表达的转运体的底物的两亲性聚合物构成的胶束及任选的其他可药用辅料。
2.如权利要求1所述的聚合物胶束组合物，其中的难溶性药物选自但不限于紫杉醇、多西紫杉醇、9-硝基喜树碱、10-羟基喜树碱、氟尿嘧啶、氨甲喋呤、伊曲康唑、替尼泊苷、依托泊苷、阿霉素、姜黄素、他莫西芬、和厚朴酚、环孢素A、他克莫司、布洛芬、布地奈德、氟米龙、酚丁胺、地塞米松、醋酸可的松、丙酸氟卡替松、水飞蓟宾、水飞蓟素、黄体酮、前列地尔、氯霉素、甲糖宁、表柔比星、普鲁泊福、卤泛曲林、阿瑞匹坦和非诺贝特，优选选自紫杉醇、多西紫杉醇、和厚朴酚、环孢素A和他克莫司。
3.如权利要求1-2任一项所述的聚合物胶束组合物，其中的两亲性聚合物包含选自下述的亲水链段：聚乙二醇(PEG)、聚氧乙烯(PEO)、聚(2-乙基-2-噁唑啉)(PEOz)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、聚醚(如Pluronic,Poloxamer)等。优选PEG、PEOz，更优选PEG。聚乙二醇为聚乙二醇或聚乙二醇单甲醚。亲水链段具有600Da-20000Da的分子量，优选1000Da-10000Da，更优选2000Da-6000Da。
4.如权利要求1-2任一项所述的聚合物胶束组合物，其中的两亲性聚合物包含选自下述的疏水链段：聚氧丙烯、磷脂、磷脂衍生物、聚酯、维生素E琥珀酸酯(VES)、聚氨基酸等，如聚赖氨酸、聚门冬氨酸、聚(N-麦芽糖酰-L-赖氨酸)、聚精氨酸、聚乳酸(PLA)、聚(N-硬脂酸苄酯-L-赖氨酸)、聚油酸乙烯酯、聚乙交酯、聚己内酯、聚乙交酯丙交酯(PLGA)等。优选聚酯。优选PLA和PLGA，更优选PLA。两亲性聚合物是二嵌段共聚物和三嵌段共聚物和/或它们的混合物。疏水链段具有700Da-20000Da的分子量，优选1000Da-6000Da，更优选2000Da-5000Da。
5.如权利要求1-4所述的聚合物胶束组合物，所述的小肠上皮细胞表达的转运体的底物选自但不限于寡肽转运体PepT1的底物，例如二肽和三肽、有机阳离子转运体OCT的底物，例如胆碱、新型有机阳离子转运体OCTN1和OCTN2的底物，例如维拉帕米和肉毒碱、有机阴离子转运体OATP的底物，例如普伐他汀、单羧酸转运体MCT的底物，例如水杨酸、胆酸转运体ASBT的底物，例如去氧胆酸、葡萄糖转运体GLUT的底物，例如果糖、氨基酸转运体LAT的底物，例如左旋多巴、OSTα-OSTβ和MRP3的底物。优选寡肽转运体PepT1的底物、新型有机阳离子转运体2(OCTN2)的底物、胆酸转运体ASBT的底物。
6.如权利要求1-5所述的聚合物胶束组合物，其中连接小肠上皮细胞表达的转运体底物的聚合物的含量为组合物质量的至少5％，优选至少20％，更优选至少50％。
7.如权利要求1-6所述的聚合物胶束组合物，其中的难溶性药物与聚合物的质量比为1∶50-1∶5，优选1∶30-1∶10。
8.如权利要求1-7任一项所述的聚合物胶束组合物用于制备治疗相关疾病的药物的用途。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于通过口服或注射给药。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于通过口服给药。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101804021A (zh) * 2010-04-21 2010-08-18 山东大学 载多烯紫杉醇纳米粒混合胶束制剂及冻干剂的制备方法
CN101810560A (zh) * 2009-02-20 2010-08-25 北京大学 环孢a聚合物胶束组合物
CN104116709A (zh) * 2013-04-23 2014-10-29 北京大学 靶向肿瘤的抗肿瘤耐药的pH敏感聚合物胶束组合物
CN104116711A (zh) * 2013-04-23 2014-10-29 北京大学 抗肿瘤耐药的pH敏感聚合物胶束组合物
CN107303272A (zh) * 2016-04-18 2017-10-31 北京大学 一种提高难溶性药物口服吸收的纳晶组合物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101810560A (zh) * 2009-02-20 2010-08-25 北京大学 环孢a聚合物胶束组合物
CN101804021A (zh) * 2010-04-21 2010-08-18 山东大学 载多烯紫杉醇纳米粒混合胶束制剂及冻干剂的制备方法
CN104116709A (zh) * 2013-04-23 2014-10-29 北京大学 靶向肿瘤的抗肿瘤耐药的pH敏感聚合物胶束组合物
CN104116711A (zh) * 2013-04-23 2014-10-29 北京大学 抗肿瘤耐药的pH敏感聚合物胶束组合物
CN107303272A (zh) * 2016-04-18 2017-10-31 北京大学 一种提高难溶性药物口服吸收的纳晶组合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHUYU HE ET AL.: ""Preparation and characterization of intestinal transporter-targeted polymeric micelles"", 《JOURNAL OF CHINESE PHARMACEUTICAL SCIENCES》 *

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